CN106967170A - 一种从牛皮中提取胶原蛋白的方法 - Google Patents

一种从牛皮中提取胶原蛋白的方法 Download PDF

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韦云伊
刘容
黄广君
黄福标
张艳雯
于冬玲
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    • CCHEMISTRY; METALLURGY
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Abstract

本发明公开了一种从牛皮中提取胶原蛋白的方法,包括以下步骤:(1)提取:原料用有机溶剂脱脂,再用盐酸胍溶液浸泡,用水净后,用有机酸溶液进行溶涨,高速匀浆,保温后,过滤得到沉降物;(2)精制:沉降物用乙酸溶解,冷冻干燥,得到酸溶性胶原蛋白;在剩余的沉降物中添加胃蛋白酶酶解,滴加NaOH调pH值至9‑10,静置,离心,上清液中滴加HCl调pH值至6‑8,离心得到的沉降物用冰水冲洗,离心,再将沉降物用乙酸溶解,冷冻干燥,得到胃蛋白酶可溶性胶原蛋白。本发明通过酸酶复合法制备胶原蛋白,显著提高了制备效率,大大缩短了提取时间,降低了制备成本,胶原蛋白提取率可达到50%。

Description

一种从牛皮中提取胶原蛋白的方法
技术领域
本发明属于牛皮加工领域,具体涉及一种从牛皮中提取胶原蛋白的方法。
背景技术
胶原蛋白一般是白色、透明的粉状物,分子呈细长的棒状,相对分子质量从约2kD至300kD不等。胶原蛋白具有很强的延伸力,不溶于冷水、稀酸、稀碱溶液,具有良好的保水性和乳化性。胶原蛋白不易被一般的蛋白酶水解,但能被动物胶原酶断裂,断裂的碎片自动变性,可被普通蛋白酶水解。胶原蛋白因具有良好的生物相容性、可生物降解性以及生物活性,因此在食品、医药、组织工程、化妆品等领域获得广泛的应用。胶原蛋白一般在猪皮、牛皮等中提取,现有常规方法的制备胶原蛋白受工艺条件等影响,提纯率较低,而且提取出来的胶原蛋白中杂质较多,严重影响了胶原蛋白的质量。
发明内容
本发明针对现有技术存在的问题,提供了一种从牛皮中提取胶原蛋白的方法。
本发明采用的技术方案:从牛皮中提取胶原蛋白的方法:包括以下步骤:
(1)提取:原料用有机溶剂脱脂,再用盐酸胍溶液浸泡12-24h,用水净后,用有机酸溶液进行溶涨,溶涨后的皮液混合物进行高速匀浆,25-35℃保温3-5h后,过滤得到沉降物;
(2)精制:沉降物用乙酸溶解,冷冻干燥,得到酸溶性胶原蛋白;在剩余的沉降物中添加胃蛋白酶酶解,滴加NaOH调pH值至9-10,静置,离心,上清液中滴加HCl调pH值至6-8,室温下静置,离心得到的沉降物用冰水冲洗,离心,再将沉降物用乙酸溶解,冷冻干燥,得到胃蛋白酶可溶性胶原蛋白。
优选,步骤(1)中的有机溶剂为丙酮、乙醚、二氯甲烷、三氯甲烷、甲醇中的一种或多种。
优选,步骤(1)盐酸胍溶液的浓度为1mol/L。
优选,步骤(1)中有机酸溶液为柠檬酸、酒石酸、乙酸或乳酸。
优选,步骤(2)中胃蛋白酶酶解的条件为:料质量比1:50-1:150,20-45℃条件下,酶解3-8h。
优选,步骤(2)中乙酸的浓度为0.05-0.2mol/L。
本发明与现有技术相比达到的有益效果:在对牛皮中胶原蛋白理化性质理解的基础上,通过酸酶复合法制备胶原蛋白,该提取制备方法显著提高了制备效率,大大缩短了提取时间,降低了制备成本,胶原蛋白提取率可达到50%,制备得到的胶原蛋白均具有天然三螺旋结构。
具体实施方式
实施例1
从牛皮中提取胶原蛋白的方法,包括以下步骤:
(1)提取:原料用丙酮脱脂,再用1mol/L的盐酸胍溶液浸泡12-24h,用水净后,用酒石酸溶液进行溶涨,溶涨后的皮液混合物进行高速匀浆,25-35℃保温3-5h后,过滤得到沉降物;
(2)精制:沉降物用0.2mol/L乙酸溶解,冷冻干燥,得到酸溶性胶原蛋白;在剩余的沉降物中添加胃蛋白酶酶解,料质量比1:150,35℃条件下,酶解3h,滴加NaOH调pH值至10,静置,离心,上清液中滴加HCl调pH值至7.2,室温下静置,离心得到的沉降物用冰水冲洗,离心,再将沉降物用0.2mol/L乙酸溶解,冷冻干燥,得到胃蛋白酶可溶性胶原蛋白。其中酸溶性胶原蛋白提取率为8.5%;同时,胃蛋白酶可溶性胶原蛋白的提取率达到了42.5%,即两者总提取达到了51.0%。
实施例2
从牛皮中提取胶原蛋白的方法,包括以下步骤:
(1)提取:原料用乙醚脱脂,再用1mol/L的盐酸胍溶液浸泡12-24h,用水净后,用柠檬酸溶液进行溶涨,溶涨后的皮液混合物进行高速匀浆,25-35℃保温3-5h后,过滤得到沉降物;
(2)精制:沉降物用0.1mol/L乙酸溶解,冷冻干燥,得到酸溶性胶原蛋白;在剩余的沉降物中添加胃蛋白酶酶解,料质量比1:100,30℃条件下,酶解4h,滴加NaOH调pH值至10,静置,离心,上清液中滴加HCl调pH值至7.2,室温下静置,离心得到的沉降物用冰水冲洗,离心,再将沉降物用0.1mol/L乙酸溶解,冷冻干燥,得到胃蛋白酶可溶性胶原蛋白。其中酸溶性胶原蛋白提取率为8.0%;同时,胃蛋白酶可溶性胶原蛋白的提取率达到了43.6%,即两者总提取率达到了51.6%。
实施例3
从牛皮中提取胶原蛋白的方法,包括以下步骤:
(1)提取:原料用二氯甲烷脱脂,再用1mol/L的盐酸胍溶液浸泡12-24h,用水净后,用乳酸溶液进行溶涨,溶涨后的皮液混合物进行高速匀浆,25-35℃保温3-5h后,过滤得到沉降物;
(2)精制:沉降物用0.05mol/L乙酸溶解,冷冻干燥,得到酸溶性胶原蛋白;在剩余的沉降物中添加胃蛋白酶酶解,料质量比1:50,45℃条件下,酶解3h,滴加NaOH调pH值至9,静置,离心,上清液中滴加HCl调pH值至7.2,室温下静置,离心得到的沉降物用冰水冲洗,离心,再将沉降物用0.2mol/L乙酸溶解,冷冻干燥,得到胃蛋白酶可溶性胶原蛋白。其中酸溶性胶原蛋白提取率为8.0%;同时,胃蛋白酶可溶性胶原蛋白的提取率达到了44.2%,即两者总提取率达到了52.2%。

Claims (6)

1.一种从牛皮中提取胶原蛋白的方法,其特征在于:包括以下步骤:
(1)提取:原料用有机溶剂脱脂,再用盐酸胍溶液浸泡12-24h,用水净后,用有机酸溶液进行溶涨,溶涨后的皮液混合物进行高速匀浆,25-35℃保温3-5h后,过滤得到沉降物;
(2)精制:沉降物用乙酸溶解,冷冻干燥,得到酸溶性胶原蛋白;在剩余的沉降物中添加胃蛋白酶酶解,滴加NaOH调pH值至9-10,静置,离心,上清液中滴加HCl调pH值至6-8,室温下静置,离心得到的沉降物用冰水冲洗,离心,再将沉降物用乙酸溶解,冷冻干燥,得到胃蛋白酶可溶性胶原蛋白。
2.根据权利要求1所述的一种从牛皮中提取胶原蛋白的方法,其特征在于:步骤(1)中的有机溶剂为丙酮、乙醚、二氯甲烷、三氯甲烷、甲醇中的一种或多种。
3.根据权利要求1所述的一种从牛皮中提取胶原蛋白的方法,其特征在于:步骤(1)盐酸胍溶液的浓度为1mol/L。
4.根据权利要求1所述的一种从牛皮中提取胶原蛋白的方法,其特征在于:步骤(1)中有机酸溶液为柠檬酸、酒石酸、乙酸或乳酸。
5.根据权利要求1所述的一种从牛皮中提取胶原蛋白的方法,其特征在于:步骤(2)中胃蛋白酶酶解的条件为:料质量比1:50-1:150,20-45℃条件下,酶解3-8h。
6.据权利要求1所述的一种从牛皮中提取胶原蛋白的方法,其特征在于:步骤(2)中乙酸的浓度为0.05-0.2mol/L。
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