CN104313090A - 一种鹿皮胶原蛋白的提取方法 - Google Patents

一种鹿皮胶原蛋白的提取方法 Download PDF

Info

Publication number
CN104313090A
CN104313090A CN201410465783.0A CN201410465783A CN104313090A CN 104313090 A CN104313090 A CN 104313090A CN 201410465783 A CN201410465783 A CN 201410465783A CN 104313090 A CN104313090 A CN 104313090A
Authority
CN
China
Prior art keywords
deerskin
voltage pulse
precipitation
extracting method
high voltage
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201410465783.0A
Other languages
English (en)
Other versions
CN104313090B (zh
Inventor
王全凯
李庆杰
王莲萍
胡太超
博士儒
陶珊
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Individual
Original Assignee
Individual
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Individual filed Critical Individual
Priority to CN201410465783.0A priority Critical patent/CN104313090B/zh
Publication of CN104313090A publication Critical patent/CN104313090A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN104313090B publication Critical patent/CN104313090B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/54—Improvements relating to the production of bulk chemicals using solvents, e.g. supercritical solvents or ionic liquids

Landscapes

  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

本发明公开了一种提取鹿皮胶原蛋白的方法、将梅花鹿皮或马鹿皮去毛，切成小块，用高速组织捣碎机捣碎，用超临界CO2萃取方法除去脂溶性成分，得到除脂后的鹿皮；向其中加入NaCl溶液，用液体泵将料液连续泵入高电压脉冲提取装置中，以温度20～50℃，场强10～30KV，脉冲数5～10为参数提取，连续收集提取液，离心，弃上清，得到除杂蛋白沉淀，沉淀用蒸馏水冲洗，离心，弃水层，得除盐后的沉淀，沉淀中加入有机酸溶液，加入蛋白酶，用液体泵将料液连续泵入高电压脉冲提取装置中，连续收集提取液，离心，上清液浓缩至一定体积，冷冻干燥，得白色固体的本发明产品。热敏成份不变性，提取连续、快速，技术先进，环保高效。

Description

一种鹿皮胶原蛋白的提取方法
技术领域
本发明涉及生物医药领域，尤其涉及一种利用高压脉冲电场技术从鹿皮中提取胶原蛋白的方法。 
背景技术
胶原( collagen) 是一种由动物细胞合成的生物高分子，广泛存在于有机体中的结构蛋白质, 约占哺乳动物总蛋白的1/3, 是皮肤、软骨、动脉血管壁及结缔组织的主要成分, 在动物体内起支持、保护、连接等多种作用。胶原蛋白具有良好的生物相容性和弱抗原性，在保健品、药品辅料以及生物材料等领域应用十分广泛，常规胶原蛋白提取方法包括酸法、碱法、热降解法、酶法以及这些方法结合使用等，在提取过程中存在工艺周期长，工艺步骤复杂，提取率较低等问题， Gomez－Guillen 等研究了高压处理对胶原蛋白提取过程的影响，此外，超声、压力脉冲等预处理方法也被尝试用于胶原蛋白提取。孟黄军等人以胶原蛋白的热稳定性为基础，考察了基于多级逆流固液萃取技术的鱼鳞胶原蛋白提取工艺，探讨了酶促反应和膜分离耦合技术用于制备胶原蛋白多肽的可行性。王建辉等人采用酸法和酶法从东北特产梅花鹿鹿皮中提取胶原蛋白, 对其中的水分、灰分、氮含量、微量元素及羟脯氨酸含量、分子量、氨基酸及饱湿性和吸水性进行测定, 并与牛皮和猪皮的胶原进行比较。 
发明内容
本发明的目的是提供一种从梅花鹿皮或马鹿皮中提取胶原蛋白方法，采用该方法提取梅花鹿皮或马鹿皮中胶原蛋白具有提取周期短、提取率高等优点。 
本发明的技术方案如下： 
鹿皮前处理：取新鲜梅花鹿皮去毛、刮去油脂、洗净，切成1.0cm×1.0cm的小块，用蒸馏水洗至无血色；脱脂：胶体磨或高速组织捣碎机捣碎鹿皮，采用超临界CO2萃取装置萃取1～5小时，萃取后鹿皮即为脱脂鹿皮；去除杂蛋白：脱脂鹿皮中加入5倍～20倍（W/V）的1%～5%NaCl溶液混匀，用液体泵将料液连续泵入高电压脉冲提取装置中，以温度20～50℃，场强10～30KV，脉冲数5～10为参数提取，连续收集提取液，离心，弃上清，得到去除杂蛋白的沉淀；沉淀用10倍～30倍（W/V）的蒸馏水冲洗，离心，弃上清，得除盐后的沉淀；胶原蛋白的提取：取上述步骤获得的沉淀，按10倍～30倍（W/V）量加入pH1～7的有机酸溶液，加入鹿皮重量1.0%～5.0%（W/W）的蛋白酶，用液体泵将料液连续泵入高压电脉冲提取装置中，以温度20～50℃，场强10～30KV，脉冲数5～10为参数提取，连续收集提取液，离心，上清液40℃浓缩至一定体积，冷冻干燥，得白色固体的本发明产品，本发明具有的优点在于鹿皮胶原蛋白的提取方法较已有工艺快速、高效、提取率高，适合工业放大生产等优点。
具体实施例：
实施例1
鹿皮前处理：取新鲜梅花鹿皮去毛、刮去油脂、洗净，切成1.0cm×1.0cm的小块，用4℃蒸馏水洗至无血色，沥干，取1.0kg鹿皮备用；脱脂：取鹿皮，高速组织捣碎机捣碎，置超临界CO2萃取釜中25MPa 40℃萃取1小时，取萃取后鹿茸0.85kg备用；去除杂蛋白：取脱脂鹿皮0.85kg加入4.25L 5%NaCl溶液混匀，用液体泵将料液连续泵入高电压脉冲提取装置中，以温度50℃，场强30KV，脉冲数10，供料速度,5ml/min为参数提取，连续收集提取液，离心，弃上清得到去除杂蛋白的沉淀；沉淀用25.5L蒸馏水冲洗，离心，弃水层，得除盐后的沉淀0.70kg。胶原蛋白的提取：取上述步骤获得的沉淀0.70kg，加入pH2的柠檬酸溶液21L，加入14g胃蛋白酶，用液体泵将料液连续泵入高压电脉冲提取装置中，以温度37℃，场强30KV，脉冲数10，供料速度5ml/min为参数提取，连续收集提取液，离心，上清液用旋转蒸发仪在40℃下浓缩至1.4L，-55℃冷冻干燥，得鹿皮胶原蛋白390g。
实施例2
鹿皮前处理：取新鲜梅花鹿皮去毛、刮去油脂、洗净，切成1.0cm×1.0cm的小块，用4℃蒸馏水洗至无血色，沥干，取3.0kg鹿皮备用；脱脂：取鹿皮，胶体磨磨碎，置超临界CO2萃取釜中30MPa 35℃萃取5小时，取萃取后鹿茸2.5kg备用；去除杂蛋白：取脱脂鹿皮2.5kg加入75L 1%NaCl溶液混匀，用液体泵将料液连续泵入高电压脉冲提取装置中，以温度20℃，场强10KV，脉冲数5，供料速度,10ml/min为参数提取，连续收集提取液，离心，弃上清得到去除杂蛋白的沉淀；沉淀用25L的蒸馏水冲洗，离心，弃水层，得除盐后的沉淀2.2kg；胶原蛋白的提取：取上述步骤获得的沉淀2.2kg，加入pH6的苹果酸溶液66L，加入220g木瓜蛋白酶，用液体泵将料液连续泵入高压电脉冲提取装置中，以温度50℃，场强10KV，脉冲数5，供料速度,10ml/min为参数提取，连续收集提取液，离心，上清液用旋转蒸发仪在40℃下浓缩至5.0L，-55℃冷冻干燥，得鹿皮胶原蛋白1210g。
实施例3
鹿皮前处理：取新鲜梅花鹿皮去毛、刮去油脂、洗净，切成1.0cm×1.0cm的小块，用4℃蒸馏水洗至无血色，沥干，取5.0kg鹿皮备用；脱脂：取鹿皮，高速组织捣碎机捣碎，置超临界CO2萃取釜中35MPa 40℃萃取3小时，取萃取后鹿皮4.2kg备用；去除杂蛋白：取脱脂鹿皮4.2kg加入94L 3.0%NaCl溶液混匀，用液体泵将料液连续泵入高电压脉冲提取装置中，以温度40℃，场强15KV，脉冲数5，供料速度15ml/min为参数提取，连续收集提取液，离心，弃上清得到去除杂蛋白的沉淀；沉淀用100L的蒸馏水冲洗，离心，弃水层，得除盐后的沉淀3.6kg；胶原蛋白的提取：取上述步骤获得的沉淀3.6kg，加入pH5的柠檬酸溶液72L，加入180g胃蛋白酶，用液体泵将料液连续泵入高压电脉冲提取装置中，以温度40℃，场强15KV，脉冲数5，供料速度15ml/min为参数提取，连续收集提取液，离心，上清液用旋转蒸发仪在40℃浓缩至7L，-55℃冷冻干燥，得鹿皮胶原蛋白2006g。
实施例4
鹿皮前处理：取新鲜梅花鹿皮去毛、刮去油脂、洗净，切成1.0cm×1.0cm的小块，用4℃蒸馏水洗至无血色，沥干，取10kg鹿皮备用；脱脂：取鹿皮，高速组织捣碎机捣碎，置超临界CO2萃取釜中30MPa 40℃萃取5小时，取萃取后鹿皮8.5kg备用；去除杂蛋白：取脱脂鹿皮8.5kg加入170L 3.0%NaCl溶液混匀，用液体泵将料液连续泵入高电压脉冲提取装置中，以温度35℃，场强20KV，脉冲数6，供料速度30ml/min为参数提取，连续收集提取液，离心，弃上清得到去除杂蛋白的沉淀；沉淀用200L的蒸馏水冲洗，离心，弃水层，得除盐后的沉淀7.3kg；胶原蛋白的提取：取上述步骤获得的沉淀7.3kg，加入pH4的酒石酸溶液145L，加入365g胃蛋白酶，用液体泵将料液连续泵入高压电脉冲提取装置中，以温度35℃，场强20KV，脉冲数6，供料速度30ml/min为参数提取，连续收集提取液，离心，上清液用旋转蒸发仪在40℃浓缩至15L，-55℃冷冻干燥，得鹿皮胶原蛋白4021g。 

Claims (5)

1.从鹿皮中提取高活性胶原蛋白，其特征在于：采用高电压脉冲提取技术提取胶原蛋白。
2.根据权利要求1所述的一种鹿皮胶原蛋白提取技术，其特征在于通过以下制备方法：包括鹿皮清洗、切块，捣碎，除去脂肪，除去杂蛋白，调节pH值，加入蛋白酶，运用高电压脉冲技术提取，离心，提取液浓缩，冻干等一系列步骤。
3.根据权利要求2所述的制备方法，捣碎过程可以用胶体磨，组织捣碎机；除去脂肪过程是用超临界CO2萃取装置来进行的；杂蛋白的去除是用1%～5%NaCl溶液在高电压脉冲装置中进行的；pH值的调节可以是柠檬酸、酒石酸、苹果酸等有机酸溶液；加入的蛋白酶可以是胃蛋白酶、木瓜蛋白酶等蛋白酶，高电压脉冲装置可以是自制的简易装置，也可以是购买的成套设备。
4.根据权利要求3所述的制备方法， 1%～5%NaCl溶液的用量为5～30倍（W/V）的鹿皮原料； pH的调节范围在2～7之间，有机酸溶液的用量为10～30倍（W/V）的鹿皮原料，蛋白酶的用量为鹿皮原料量的2.0%～10%（W/W）。
5.根据权利要求3所述的制备方法，高电压脉冲技术参数为温度控制在20～50℃，场强控制在10～30KV，脉冲数控制在5～10，供料速度控制在5-30ml/min。
CN201410465783.0A 2014-09-15 2014-09-15 一种鹿皮胶原蛋白的提取方法 Active CN104313090B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201410465783.0A CN104313090B (zh) 2014-09-15 2014-09-15 一种鹿皮胶原蛋白的提取方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201410465783.0A CN104313090B (zh) 2014-09-15 2014-09-15 一种鹿皮胶原蛋白的提取方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN104313090A true CN104313090A (zh) 2015-01-28
CN104313090B CN104313090B (zh) 2018-02-16

Family

ID=52368400

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201410465783.0A Active CN104313090B (zh) 2014-09-15 2014-09-15 一种鹿皮胶原蛋白的提取方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN104313090B (zh)

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107142294A (zh) * 2017-06-16 2017-09-08 吉林省东鳌鹿业集团有限公司 以鹿皮为原料制备胶原蛋白肽制品的方法
CN108272736A (zh) * 2018-04-19 2018-07-13 王风云 一种具有高活性的化妆水及其制备方法
CN108925950A (zh) * 2018-07-19 2018-12-04 荣延洲 一种含有胶原蛋白的黑芝麻球及其制备方法
CN110973343A (zh) * 2019-12-26 2020-04-10 苏州红冠庄国药股份有限公司 一种鹿皮胶粉、制备方法和应用方法
CN111358707A (zh) * 2019-04-18 2020-07-03 吉林省东鳌鹿业科技开发有限公司 一种鹿胶原蛋白肽化妆水及其制备方法

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103627761A (zh) * 2013-10-22 2014-03-12 浙江省海洋开发研究院 一种制备富羟脯氨酸胶原蛋白肽的方法

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103627761A (zh) * 2013-10-22 2014-03-12 浙江省海洋开发研究院 一种制备富羟脯氨酸胶原蛋白肽的方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
王建辉等: "鹿皮胶原的提取与性质", 《吉林大学自然科学学报》 *
胡太超等: "鹿皮胶原蛋白的提取及特性研究", 《吉林农业大学学报》 *

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107142294A (zh) * 2017-06-16 2017-09-08 吉林省东鳌鹿业集团有限公司 以鹿皮为原料制备胶原蛋白肽制品的方法
CN108272736A (zh) * 2018-04-19 2018-07-13 王风云 一种具有高活性的化妆水及其制备方法
CN108925950A (zh) * 2018-07-19 2018-12-04 荣延洲 一种含有胶原蛋白的黑芝麻球及其制备方法
CN111358707A (zh) * 2019-04-18 2020-07-03 吉林省东鳌鹿业科技开发有限公司 一种鹿胶原蛋白肽化妆水及其制备方法
CN110973343A (zh) * 2019-12-26 2020-04-10 苏州红冠庄国药股份有限公司 一种鹿皮胶粉、制备方法和应用方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN104313090B (zh) 2018-02-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN104313090A (zh) 一种鹿皮胶原蛋白的提取方法
CN103992384B (zh) 一种大黄鱼鱼骨胶原肽及其制备方法和用途
CN101307348B (zh) 从淡水鱼鱼鳞中制备未变性胶原蛋白的方法
CN101724677B (zh) 蒸煮热挤压提取鱼鳞胶原蛋白多肽和羟基磷灰石的方法
CN103980347B (zh) 一种大黄鱼鱼鳔降压肽及其制备方法和用途
CN102690370B (zh) 一种海洋鱼类鱼骨的综合利用工艺
CN102488713B (zh) 一种制备羊胎盘素和羊胎盘水解胶原浓缩液的方法
CN101851300B (zh) 硫酸软骨素提取工艺
CN102676619B (zh) 一种海洋鱼类鱼皮的综合利用工艺
CN104152519B (zh) 一种酶溶性高纯超螺旋结构ⅰ型胶原蛋白的制备方法
CN101711591A (zh) 一种鱼软骨提取物的制备方法及所得的产品
CN101792382A (zh) 消毒脱色鱼鳞骨有机酸钙、无变性胶原蛋白的制备方法
CN101664210B (zh) 一种海参卵营养品的加工方法
CN100369929C (zh) 海蜇胶原蛋白及其制备方法
CN101979654A (zh) 一种从鱼皮中提取胶原蛋白的方法
CN101037468A (zh) 一种牡蛎活性肽的制备方法
CN106319014A (zh) 一种小分子深海鱼多肽的提取方法
CN103773828A (zh) 从鱼鳞中提取胶原蛋白的方法
CN103305580A (zh) 一种以哺乳动物皮及骨为原料制备胶原蛋白肽的方法
CN107114793A (zh) 一种综合利用鲟鱼骨制备钙和硫酸软骨素的方法
CN102732592A (zh) 酶法制备淡水鱼骨明胶的方法
CN103421867A (zh) 一种海参胶原蛋白的制备方法
CN103740793B (zh) 一种生产鱼皮胶原蛋白的方法
CN101375863B (zh) 一种提取海参煮汁中多糖等多种活性成分的方法
CN103421868A (zh) 一种金枪鱼皮胶原蛋白小分子肽的制备方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
CB03 Change of inventor or designer information
CB03 Change of inventor or designer information

Inventor after: Wang Quankai

Inventor after: Li Qingjie

Inventor after: Wang Lianping

Inventor after: Wang Qi

Inventor after: Du Shuai

Inventor after: Hu Taichao

Inventor after: Bo Shiru

Inventor after: Tao Shan

Inventor before: Wang Quankai

Inventor before: Li Qingjie

Inventor before: Wang Lianping

Inventor before: Hu Taichao

Inventor before: Bo Shiru

Inventor before: Tao Shan

GR01 Patent grant
GR01 Patent grant