CN106749613A - 一种索玛鲁肽的合成方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种索玛鲁肽的合成方法，该方法采用固液相相结合的方法合成索玛鲁肽产品，采用16+6+9片段的合成方式，同时开展3个片段的合成，大大缩短了产品的合成时间，同时通过对His‑Ala‑Glu‑Gly‑Thr‑Phe‑Thr‑Ser‑Asp‑Val‑Ser‑Ser‑Tyr‑Leu‑Glu‑Gly、Gln‑Ala‑Ala‑N6‑[N‑(17‑carboxy‑1‑oxoheptadecyl‑L‑γ‑glutamyl[2‑(2‑aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2‑(2‑aminoethoxy) ethoxy]acetyl]‑Lys‑Glu‑Phe、Ile‑Ala‑Trp‑Leu‑Val‑Arg‑Gly‑Arg‑Gly‑OH等合成因子的分步解析，降低了固相合成中困难肽序的合成、解决了固相合成中批量放大的困难、提高了合成效率、由于采用液相片段合成使的纯化难度有效的降低、同时大大降低了生产成本。本发明方法可以实现缩短40%的合成时间、降低物料成本、减少缺失肽、杂肽的产生数量，适合工业化大生产。

Description

一种索玛鲁肽的合成方法
技术领域
本发明为多肽合成制备领域，特别涉及索玛鲁肽的合成制备方法。
技术背景
索玛鲁肽是诺和诺德公司正在开展III期临床试验的新型治疗糖尿病药物，每周注射一次剂量为1.0 mg，疗效极其优秀，同时也在开展口服索玛鲁肽制剂（40mg规格）的临床试验，并取得了一定成效，如果索玛鲁肽的口服制剂开发成功，必将大大改善糖尿病患者的生活质量。
目前仅有一篇文献报道了该产品的合成方法，PCT Int. Appl., 2015055801, 23Apr 2015 （US20150111826）。该专利报道了直接固相合成索玛鲁肽的方法，然而，由于肽链上Lys[[N6-[N-(17-carboxy(R3)-1-oxoheptadecyl-L-γ-glutamyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy]acetyl] ]基团的存在，使得后续的氨基酸在偶联的时候十分困难，往往导致偶联不完全，缺失肽、杂肽大量产生，这样的工艺产生的杂质是很难除去的。索玛鲁肽的现有合成方法存在操作繁琐，需多步纯化，合成周期长，废液多，不利于环保，需花费大量乙腈，成本高昂以及不利于大规模生产的缺点。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是针对现有技术的不足，提供了一种新的索玛鲁肽的合成方法，该方法采用固液相相结合的方式进行该产品的合成，16肽片段、6肽片段、9肽片段同时进行合成，利用固相法常规中长肽链合成的优势、结合液相片段法合成的优势、利用液相最终缩合片段获得产品。
本发明索玛鲁肽的结构式如下：
本发明所要解决的技术问题是通过以下的技术方案来实现的。本发明是一种索玛鲁肽的合成方法，其特点是：包括如下步骤：
A、片段缩合成各类索玛鲁肽中间体，氨基酸保护基在下面赋予种类：
（1）R-His(R1)-Ala-Glu(R2)-Gly-Thr(R4)-Phe-Thr(R4)-Ser(R4)-Asp(R5)- Val-Ser(R4)-Ser(R4)-Tyr(R4)-Leu-Glu(R2)-Gly-R3的合成；
（2）Fmoc-Lys[[N6-[N-(17-carboxy(R3)-1-oxoheptadecyl-L-γ-glutamyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy]acetyl] ]-OH的合成；
（3）R-Gln-Ala-Ala-N6-[N-(17-carboxy(R3)-1-oxoheptadecyl-L-γ-glutamyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy]acetyl]-Lys-Glu(R2)-Phe-R3的合成；
（4）R-Ile-Ala-Trp(R6)-Leu-Val-Arg(R7)-Gly-Arg(R7)-Gly-R3的合成；
（5）R-Gln-Ala-Ala- N6-[N-(17-carboxy(R3)-1-oxoheptadecyl-L-γ-glutamyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy]acetyl]-Lys-Glu(R2)-Phe-Ile-Ala-Trp(R6)-Leu-Val-Arg(R7)-Gly-Arg(R7)-Gly-R3的合成；
（6）R-His(R1)-Ala-Glu(R2)-Gly-Thr(R4)-Phe-Thr(R4)-Ser(R4)-Asp(R5)-Val-Ser(R4)-Ser(R4)-
Tyr(R4)-Leu-Glu(R2)-Gly-Gln-Ala-Ala-N6-[N-(17-carboxy(R3)-1-oxoheptadecyl-L-γ-glutamyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy]acetyl]-Lys-Glu(R2)-Phe-Ile-Ala-Trp(R6)-Leu-Val-Arg(R7)-Gly-Arg(R7)-Gly-R3的合成；
以上所述的各种保护氨基酸片段缩合后，形成的索玛鲁肽各种中间体片段，并将各片段按肽序缩合后，形成索玛鲁肽的全保护肽；
R为Z、Boc、Cl-Z、Fmoc、oNBS、dNBS、Troc、Dts、pNZ、oNZ、NVOC、NPPOC、HFA、 Ddz、Bpoc、Nps、Nsc、Bsmoc、α-Nsmoc、ivDde、Fmoc* 、MTT、Alloc 其中任意一个
R1为TOS、TRT、Mtt、Mmt、Boc、Bom、Bum、Fmoc、Dmbz、Dnp其中任意一个
R2为H、Otbu、Bn、cHX、Mpe、2-ph1pr、TEGbn、Damb、Al、pNB、pTMSE、Dmnb其中任意一个
R3为H、Otbu、Bn、cHX、Mpe、2-ph1pr、TEGbn、Damb、Al、pNB、pTMSE、Dmnb其中任意一个
R4为Bn、cHx、tBu、Trt、TBDMS、Dmnb、Poc、其中任意一个
R5为H、Otbu、Bn、cHX、Mpe、2-ph1pr、TEGbn、Damb、Al、pNB、pTMSE、Dmnb其中任意一个
R6为Z、Boc、Cl-Z、Fmoc、For、Hoc、Mts、Alloc其中任意一个
R7为TOS、Pbf、Pmc、Mts、Mtr、Mis其中任意一个
B、全保护索玛鲁肽的去保护，即裂解：
His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-N6-[N-(17-carboxy-1-oxoheptadecyl-L-γ-glutamyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy]acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy]acetyl]-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Arg-Gly-Arg-Gly-OH。
本发明所述的索玛鲁肽的合成方法，其进一步优选的技术方案是：步骤A中6个多肽片段的合成过程中用到的偶联体系选自：
单一缩合剂：DIC、DCC、EDC、氯乙酰氯、叠氮化物、TBTU、PyBOP、HBTU、HATU；
二体系缩合剂：DIC/HOBT、DCC/HOBT、EDC/HOBT。
本发明所述的索玛鲁肽的合成方法，其进一步优选的技术方案是：采用纯化和冻干方法对索玛鲁肽粗品进行处理，得到索玛鲁肽产品。
本发明所述的索玛鲁肽的合成方法，其进一步优选的技术方案是：
步骤A中R-Gln-Ala-Ala-N6-[N-(17-carboxy(R3)-1-oxoheptadecyl-L-γ-glutamyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy]acetyl]-Lys-Glu(R2)-Phe-R3的合成方法如下：
采用固液相相结合的方式合成，包含多种片段合成方法，具体片段如下：
采用纯液相法合成Fmoc-Lys[[N6-[N-(17-carboxy(R3)-1-oxoheptadecyl-L-γ-glutamyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy]acetyl] ]-OH；
采用固相法R-Gln-Ala-Ala-N6-[N-(17-carboxy(R3)-1-oxoheptadecyl-L-γ-glutamyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy]acetyl]-Lys-Glu(R2)-Phe-R3。
本发明所述的索玛鲁肽的合成方法，其进一步优选的技术方案是：Fmoc-Lys[[N6-[N-(17-carboxy(R3)-1-oxoheptadecyl-L-γ-glutamyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy]acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy]acetyl] ]-OH的合成方法如下：
17-carboxy(R3) -1-oxoheptadecyl-L-α（R3）-glu-OH
采用NH2-Glu-R3与γ羧基R3保护的1,18-十八烷二羧酸的活泼酯进行反应得到目的产品；活泼酯法合成中用到的单一缩合剂或缩合剂复方：DIC、DCC、EDC、TBTU、PyBOP、HBTU、DIC/HOBT、DCC/HOBT、EDC/HOBT、HOSu；或者采用NH2-Glu-R3与γ羧基R3保护的1,18-十八烷二羧酸的酸酐进行反应得到产品；酸酐法采用氯乙酰氯、氯甲酸乙酯、氯甲酸叔丁酯、氯甲酸异丁酯；或者采用硫苄酯先与γ羧基R3保护的1,18-十八烷二羧酸成硫酯，之后与NH2-Glu-R3进行酯交换反应，得到产品；或者采用γ羧基R3保护的1,18-十八烷二羧酸形成叠氮化物，之后与NH2-Glu-R3形成产品；
、[2-[2-(Fmoc-amino)ethoxy]ethoxy]acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy]acetic acid的合成
采用[2-[2-(Fmoc-amino)ethoxy]ethoxy] acetic acid的活泼酯与羧基R3保护的[2-(2-aminoethoxy) ethoxy] acetic acid进行缩合并酸解后得到目的产品；活泼酯法合成中用到的单一缩合剂或者缩合剂复方：DIC、DCC、EDC、TBTU、PyBOP、HBTU、DIC/HOBT、DCC/HOBT、EDC/HOBT、HOSu；或者采用羧基R3保护的[2-(2-aminoethoxy) ethoxy] acetic acid与[2-[2-(Fmoc-amino)ethoxy]ethoxy] acetic acid的酸酐进行反应并酸解后得到产品；酸酐法采用氯乙酰氯、氯甲酸乙酯、氯甲酸叔丁酯、氯甲酸异丁酯；或者采用硫苄酯先与[2-[2-(Fmoc-amino)ethoxy]ethoxy] acetic acid成硫酯，之后与羧基R3保护的[2-(2-aminoethoxy) ethoxy] acetic acid进行酯交换反应，酸解后得到产品；或者采用[2-[2-(Fmoc-amino)ethoxy]ethoxy] acetic acid形成叠氮化物，之后与羧基R3保护的[2-(2-aminoethoxy) ethoxy] acetic acid形成产品再酸解后得到产品；
N-(17-carboxy(R3)-1-oxoheptadecyl-L-γ-Glu (R3)-[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy] acetic acid的合成
采用17-carboxy(R3) -1-oxoheptadecyl-L-α（R3）-glu-OH的活泼酯与羧基R3保护的2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy] acetic acid进行缩合并酸解后得到目的产品；活泼酯法合成中用到的单一缩合剂或者缩合剂复方：DIC、DCC、EDC、TBTU、PyBOP、HBTU、DIC/HOBT、DCC/HOBT、EDC/HOBT、HOSu；或者采用羧基R3保护的2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy] acetic acid与17-carboxy(R3) -1-oxoheptadecyl-L-α（R3）-glu-OH的酸酐进行反应并酸解后得到产品；酸酐法采用氯乙酰氯、氯甲酸乙酯、氯甲酸叔丁酯、氯甲酸异丁酯；或者采用硫苄酯先与17-carboxy(R3) -1-oxoheptadecyl-L-α（R3）-glu-OH成硫酯，之后与羧基R3保护的2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy] acetic acid进行酯交换反应，酸解后得到产品；或者采用17-carboxy(R3) -1-oxoheptadecyl-L-α（R3）-glu-OH形成叠氮化物，之后与羧基R3保护的2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetic acid形成产品再酸解后得到产品；
Fmoc-Lys[[N6-[N-(17-carboxy(R3)-1-oxoheptadecyl-L-γ-glutamyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy]acetyl] ]-OH的合成
采用N-(17-carboxy(R3)-1-oxoheptadecyl-L-γ-Glu (R3)-[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy] acetic acid的活泼酯与羧基R3保护的Fmoc-Lys-OH进行缩合并酸解后得到目的产品；活泼酯法合成中用到的单一缩合剂或者缩合剂复方：DIC、DCC、EDC、TBTU、PyBOP、HBTU、DIC/HOBT、DCC/HOBT、EDC/HOBT、HOSu；或者采用羧基R3保护的Fmoc-Lys-OH与N-(17-carboxy(R3)-1-oxoheptadecyl-L-γ-Glu (R3)-[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy] acetic acid的酸酐进行反应并酸解后得到产品；酸酐法采用氯乙酰氯、氯甲酸乙酯、氯甲酸叔丁酯、氯甲酸异丁酯等等。或者采用硫苄酯先与N-(17-carboxy(R3)-1-oxoheptadecyl-L-γ-Glu (R3)-[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy] acetic acid成硫酯，之后与羧基R3保护的Fmoc-Lys-OH进行酯交换反应，酸解后得到产品；或者采用N-(17-carboxy(R3)-1-oxoheptadecyl-L-γ-Glu (R3)-[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy] acetic acid形成叠氮化物，之后与羧基R3保护的Fmoc-Lys-OH形成产品再酸解后得到产品；
本发明所述的索玛鲁肽的合成方法，其进一步优选的技术方案是：步骤A中各片段缩合法采用活化酯法、混合酸酐法、叠氮化合物法或者硫苄酯交换法。
本发明所述的索玛鲁肽的合成方法，其进一步优选的技术方案是：步骤A中R-His(R1)-Ala-Glu(R2)-Gly-Thr(R4)-Phe-Thr(R4)-Ser(R4)-Asp(R5)- Val-Ser(R4)-Ser(R4)-Tyr(R4)-Leu-Glu(R2)-Gly-R3的合成方法如下：
采用固相合成法或者液相合成法或者固液结合法合成；
所述的固相合成法采用CTC树脂为起始载体，通过前述记载的各类缩合体系，逐一偶联合成，具体偶联顺序为R-Gly-OH，R- Glu(R2)-OH，R-Leu-OH，R-Tyr(R4)-OH，R- Ser(R4)-OH，R- Ser(R4)-OH，R-Val-OH，R- Asp(R5)-OH，R-Ser(R4)-OH，R-Thr(R4)-OH，R-Phe-OH，R-Thr(R4)-OH，R-Gly-OH，R-Glu(R2)-OH，R-Ala-OH，R-His(R1)-OH；偶联完毕后，采用裂解液裂解CTC树脂，裂解液为TFE或者TFA为主体的含有捕获剂的混合物；最终得到R-His(R1)-Ala-Glu(R2)-Gly-Thr(R4)-Phe-Thr(R4)-Ser(R4)-Asp(R5)- Val-Ser(R4)-Ser(R4)-Tyr(R4)-Leu-Glu(R2)-Gly-OH
所述的液相合成法以NH2-Gly-R3为起始物料，通过前述记载的各类缩合体系，或者酸酐法采用氯乙酰氯、氯甲酸乙酯、氯甲酸叔丁酯、氯甲酸异丁酯，或者叠氮化作为偶联试剂，逐一偶联合成或者片段法偶联合成，逐一法偶联顺序为R-Gly-OH，R- Glu(R2)-OH，R-Leu-OH，R-Tyr(R4)-OH，R- Ser(R4)-OH，R- Ser(R4)-OH，R-Val-OH，R- Asp(R5)-OH，R-Ser(R4)-OH，R-Thr(R4)-OH，R-Phe-OH，R-Thr(R4)-OH，R-Gly-OH，R-Glu(R2)-OH，R-Ala-OH，R-His(R1)-OH；片段法采用各类片段法，选自1+15、2+14、3+13、4+12、5+11、6+10、7+9、8+8、9+7、10+6、11+5、12+4、13+3、14+2、15+1。
本发明所述的索玛鲁肽的合成方法，其进一步优选的技术方案是：步骤A中R-Ile-Ala-Trp(R6)-Leu-Val-Arg(R7)-Gly-Arg(R7)-Gly-R3的合成方法如下：
采用固相合成法、液相合成法或者固液结合法合成；
其中固相合成法采用CTC树脂为起始载体，通过前述记载的各类缩合体系，逐一偶联合成，具体偶联顺序为R-Gly-OH，R-Arg(R7)-OH，R-Gly-OH，R-Arg(R7)-OH，R-Val-OH，R-Leu-OH，R-Trp(R6)-OH， R-Ala-OH，R-Ile-OH；偶联完毕后，采用裂解液裂解CTC树脂，裂解液为TFE或者TFA为主体的含有捕获剂的混合物；或者偶联完毕后，不进行处理，直接得到需要的肽树脂，以备后用；最终得到R-Ile-Ala-Trp(R6)-Leu-Val-Arg(R7)-Gly-Arg(R7)-Gly-OH或者R-Ile-Ala-Trp(R6)-Leu-Val-Arg(R7)-Gly-Arg(R7)-Gly-CTC树脂；
所述的采用液相合成法以NH2-Gly-R3为起始物料，通过前述记载的各类缩合体系，或者酸酐法采用氯乙酰氯、氯甲酸乙酯、氯甲酸叔丁酯、氯甲酸异丁酯，或者叠氮化作为偶联试剂，逐一偶联合成或者片段法偶联合成，逐一法偶联顺序为R-Gly-OH，R-Arg(R7)-OH，R-Gly-OH，R-Arg(R7)-OH，R-Val-OH，R-Leu-OH，R-Trp(R6)-OH， R-Ala-OH，R-Ile-OH；片段法选自1+8、2+7、3+6、4+5、5+4、6+3、7+2或者8+1。
本发明所述的索玛鲁肽的合成方法，其进一步优选的技术方案是：步骤A中R-Gln-Ala-Ala- N6-[N-(17-carboxy(R3)-1-oxoheptadecyl-L-γ-glutamyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy]acetyl]-Lys-Glu(R2)-Phe-Ile-Ala-Trp(R6)-Leu-Val-Arg(R7)-Gly-Arg(R7)-Gly-R3的合成方法如下；
采用固相合成法以R-Gln-Ala-Ala- N6-[N-(17-carboxy(R3)-1-oxoheptadecyl-L-γ-glutamyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy]acetyl]-Lys-Glu(R2)-Phe-OH为起始物料，通过权利要求2中的各类缩合体系，与NH2-Ile-Ala-Trp(R6)-Leu-Val-Arg(R7)-Gly-Arg(R7)-Gly-CTC树脂缩合反应；反应完毕后，得到目标化合物；
或者采用液相合成法，以R-Gln-Ala-Ala- N6-[N-(17-carboxy(R3)-1-oxoheptadecyl-L-γ-glutamyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy]acetyl]-Lys-Glu(R2)-Phe-OH为起始物料，通过前述记载的各类缩合体系，或者酸酐法采用氯乙酰氯、氯甲酸乙酯、氯甲酸叔丁酯、氯甲酸异丁酯，或者叠氮化作为偶联试剂，与NH2-Ile-Ala-Trp(R6)-Leu-Val-Arg(R7)-Gly-Arg(R7)-Gly-R3偶联合成，得到目标化合物。
本发明所述的索玛鲁肽的合成方法，其进一步优选的技术方案是：步骤A中R-His(R1)-Ala-Glu(R2)-Gly-Thr(R4)-Phe-Thr(R4)-Ser(R4)-Asp(R5)-Val-Ser(R4)-Ser(R4)-
Tyr(R4)-Leu-Glu(R2)-Gly-Gln-Ala-Ala-N6-[N-(17-carboxy(R3)-1-oxoheptadecyl-L-γ-glutamyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy]acetyl]-Lys-Glu(R2)-Phe-Ile-Ala-Trp(R6)-Leu-Val-Arg(R7)-Gly-Arg(R7)-Gly-R3
的合成方法如下：
采用固相合成法，以R-His(R1)-Ala-Glu(R2)-Gly-Thr(R4)-Phe-Thr(R4)-Ser(R4)-Asp(R5)-Val-Ser(R4)-Ser(R4)-
Tyr(R4)-Leu-Glu(R2)-Gly-OH为起始物料，通过前述记载的各类缩合体系，与NH2-Gln-Ala-Ala- N6-[N-(17-carboxy(R3)-1-oxoheptadecyl-L-γ-glutamyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy]acetyl]-Lys-Glu(R2)-Phe-Ile-Ala-Trp(R6)-Leu-Val-Arg(R7)-Gly-Arg(R7)-Gly-CTC树脂缩合反应；反应完毕后，得到目标化合物。
或者采用液相合成法，以R-His(R1)-Ala-Glu(R2)-Gly-Thr(R4)-Phe-Thr(R4)-Ser(R4)-Asp(R5)-Val-Ser(R4)-Ser(R4)-
Tyr(R4)-Leu-Glu(R2)-Gly-OH为起始物料，通过前述记载的各类缩合体系，或者酸酐法采用氯乙酰氯、氯甲酸乙酯、氯甲酸叔丁酯、氯甲酸异丁酯，或者叠氮化作为偶联试剂，与NH2-Gln-Ala-Ala- N6-[N-(17-carboxy(R3)-1-oxoheptadecyl-L-γ-glutamyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy]acetyl]-Lys-Glu(R2)-Phe-Ile-Ala-Trp(R6)-Leu-Val-Arg(R7)-Gly-Arg(R7)-Gly-R3偶联合成，得到目标化合物。
本发明中，相关的名词解释参见下表：
Fmoc 9-芴甲氧羰基
HBTU O-苯并三唑-N-四甲基脲鎓六氟磷酸盐
HATU O-(7-偶氮苯并三氮唑-1-氧)-N-四甲基脲鎓六氟磷酸盐
PyBOP (苯并三唑-1-氧)三吡咯烷子基磷鎓六氟磷酸盐
DIC 二异丙基碳二亚胺
HOBt 1-羟基苯并三唑
HOAt 1-羟基-7-偶氮苯并三唑
DCC 二环己基碳二亚胺
TMP 2.4.6-三甲基吡啶
Pbf 2,2,4,6,7-五甲基二氢苯并呋喃-5-磺酰基
Trt 三苯甲基
tBu 叔丁基
OtBu 叔丁基氧
DMF N,N-二甲基甲酰胺
DCM 二氯甲烷
Z-Cl 氯苄氧羰基
TFA 三氟乙酸
Alloc 烯丙氧羰基
Z 苄氧羰基
Boc 叔丁氧羰基
[2-[2-(Fmoc-amino)ethoxy]ethoxy]acetyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetic acid [2-[2-(Fmoc-氨基)乙氧基]乙氧基]乙酰(2-(2-氨基乙氧基)乙氧基)乙酸
AM 氨甲基
EDT 乙二硫醇
HOSU 琥珀酰亚胺氧基
Ac 醋酸根
如无特殊说明，本发明中涉及的相关的名词解释均采用现有技术中常规的解释。
本发明方法采用固液相相结合的方法合成索玛鲁肽产品。采用16+6+9片段的合成方式，同时开展3个片段的合成，大大缩短了产品的合成时间，同时通过对His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly、Gln-Ala-Ala-N6-[N-(17-carboxy-1-oxoheptadecyl-L-γ-glutamyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy]acetyl]-Lys-Glu-Phe、Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Arg-Gly-Arg-Gly-OH等合成因子的分步解析，降低了固相合成中困难肽序的合成、解决了固相合成中批量放大的困难、提高了合成效率、由于采用液相片段合成使的纯化难度有效的降低、同时大大降低了生产成本。
与现有技术相比，本发明合成方法具有以下优点：本发明方法可以实现缩短40%的合成时间、降低物料成本、减少缺失肽、杂肽的产生数量，适合工业化大生产。
附图说明
图1为本发明方法合成的索玛鲁肽粗肽的HPLC谱图；
图2为本发明方法合成的索玛鲁肽精肽的HPLC谱图；
图3为本发明方法合成的索玛鲁肽精肽的质谱图。
具体实施方式
以下参照附图，进一步描述本发明的具体技术方案，以便于本领域的技术人员进一步地理解本发明，而不构成对其权利的限制。
实施例1，一种索玛鲁肽的合成方法，包括如下步骤：
A、片段缩合成各类索玛鲁肽中间体，氨基酸保护基在下面赋予种类：
（1）R-His(R1)-Ala-Glu(R2)-Gly-Thr(R4)-Phe-Thr(R4)-Ser(R4)-Asp(R5)- Val-Ser(R4)-Ser(R4)-Tyr(R4)-Leu-Glu(R2)-Gly-R3的合成；
（2）Fmoc-Lys[[N6-[N-(17-carboxy(R3)-1-oxoheptadecyl-L-γ-glutamyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy]acetyl] ]-OH的合成；
（3）R-Gln-Ala-Ala-N6-[N-(17-carboxy(R3)-1-oxoheptadecyl-L-γ-glutamyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy]acetyl]-Lys-Glu(R2)-Phe-R3的合成；
（4）R-Ile-Ala-Trp(R6)-Leu-Val-Arg(R7)-Gly-Arg(R7)-Gly-R3的合成；
（5）R-Gln-Ala-Ala- N6-[N-(17-carboxy(R3)-1-oxoheptadecyl-L-γ-glutamyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy]acetyl]-Lys-Glu(R2)-Phe-Ile-Ala-Trp(R6)-Leu-Val-Arg(R7)-Gly-Arg(R7)-Gly-R3的合成；
（6）R-His(R1)-Ala-Glu(R2)-Gly-Thr(R4)-Phe-Thr(R4)-Ser(R4)-Asp(R5)-Val-Ser(R4)-Ser(R4)-
Tyr(R4)-Leu-Glu(R2)-Gly-Gln-Ala-Ala-N6-[N-(17-carboxy(R3)-1-oxoheptadecyl-L-γ-glutamyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy]acetyl]-Lys-Glu(R2)-Phe-Ile-Ala-Trp(R6)-Leu-Val-Arg(R7)-Gly-Arg(R7)-Gly-R3的合成；
以上所述的各种保护氨基酸片段缩合后，形成的索玛鲁肽各种中间体片段，并将各片段按肽序缩合后，形成索玛鲁肽的全保护肽；
R为Z、Boc、Cl-Z、Fmoc、oNBS、dNBS、Troc、Dts、pNZ、oNZ、NVOC、NPPOC、HFA、 Ddz、Bpoc、Nps、Nsc、Bsmoc、α-Nsmoc、ivDde、Fmoc* 、MTT、Alloc 其中任意一个
R1为TOS、TRT、Mtt、Mmt、Boc、Bom、Bum、Fmoc、Dmbz、Dnp其中任意一个
R2为H、Otbu、Bn、cHX、Mpe、2-ph1pr、TEGbn、Damb、Al、pNB、pTMSE、Dmnb其中任意一个
R3为H、Otbu、Bn、cHX、Mpe、2-ph1pr、TEGbn、Damb、Al、pNB、pTMSE、Dmnb其中任意一个
R4为Bn、cHx、tBu、Trt、TBDMS、Dmnb、Poc其中任意一个
R5为H、Otbu、Bn、cHX、Mpe、2-ph1pr、TEGbn、Damb、Al、pNB、pTMSE、Dmnb其中任意一个
R6为Z、Boc、Cl-Z、Fmoc、For、Hoc、Mts、Alloc其中任意一个
R7为TOS、Pbf、Pmc、Mts、Mtr、Mis其中任意一个
B、全保护索玛鲁肽的去保护，即裂解制得索玛鲁肽粗品：
His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-N6-[N-(17-carboxy-1-oxoheptadecyl-L-γ-glutamyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy]acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy]acetyl]-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Arg-Gly-Arg-Gly-OH。
实施例2，实施例1所述的索玛鲁肽的合成方法中：步骤A中6个多肽片段的合成过程中用到的偶联体系选自：
单一缩合剂：DIC、DCC、EDC、氯乙酰氯、叠氮化物、TBTU、PyBOP、HBTU、HATU；
二体系缩合剂：DIC/HOBT、DCC/HOBT、EDC/HOBT。
实施例3，实施例1或2所述的索玛鲁肽的合成方法中：采用纯化和冻干方法对索玛鲁肽粗品进行处理，得到索玛鲁肽产品。
实施例4，实施例1－3中任何一项所述的索玛鲁肽的合成方法中：
步骤A中R-Gln-Ala-Ala-N6-[N-(17-carboxy(R3)-1-oxoheptadecyl-L-γ-glutamyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy]acetyl]-Lys-Glu(R2)-Phe-R3的合成方法如下：
采用固液相相结合的方式合成，包含多种片段合成方法，具体片段如下：
采用纯液相法合成Fmoc-Lys[[N6-[N-(17-carboxy(R3)-1-oxoheptadecyl-L-γ-glutamyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy]acetyl] ]-OH；
采用固相法R-Gln-Ala-Ala-N6-[N-(17-carboxy(R3)-1-oxoheptadecyl-L-γ-glutamyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy]acetyl]-Lys-Glu(R2)-Phe-R3。
实施例5，实施例4所述的索玛鲁肽的合成方法中：
Fmoc-Lys[[N6-[N-(17-carboxy(R3)-1-oxoheptadecyl-L-γ-glutamyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy]acetyl] ]-OH的合成方法如下：
17-carboxy(R3) -1-oxoheptadecyl-L-α（R3）-glu-OH
采用NH2-Glu-R3与γ羧基R3保护的1,18-十八烷二羧酸的活泼酯进行反应得到目的产品；活泼酯法合成中用到的单一缩合剂或缩合剂复方：DIC、DCC、EDC、TBTU、PyBOP、HBTU、DIC/HOBT、DCC/HOBT、EDC/HOBT、HOSu；或者采用NH2-Glu-R3与γ羧基R3保护的1,18-十八烷二羧酸的酸酐进行反应得到产品；酸酐法采用氯乙酰氯、氯甲酸乙酯、氯甲酸叔丁酯、氯甲酸异丁酯；或者采用硫苄酯先与γ羧基R3保护的1,18-十八烷二羧酸成硫酯，之后与NH2-Glu-R3进行酯交换反应，得到产品；或者采用γ羧基R3保护的1,18-十八烷二羧酸形成叠氮化物，之后与NH2-Glu-R3形成产品；
、[2-[2-(Fmoc-amino)ethoxy]ethoxy]acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy]acetic acid的合成
采用[2-[2-(Fmoc-amino)ethoxy]ethoxy] acetic acid的活泼酯与羧基R3保护的[2-(2-aminoethoxy) ethoxy] acetic acid进行缩合并酸解后得到目的产品；活泼酯法合成中用到的单一缩合剂或者缩合剂复方：DIC、DCC、EDC、TBTU、PyBOP、HBTU、DIC/HOBT、DCC/HOBT、EDC/HOBT、HOSu；或者采用羧基R3保护的[2-(2-aminoethoxy) ethoxy] acetic acid与[2-[2-(Fmoc-amino)ethoxy]ethoxy] acetic acid的酸酐进行反应并酸解后得到产品；酸酐法采用氯乙酰氯、氯甲酸乙酯、氯甲酸叔丁酯、氯甲酸异丁酯；或者采用硫苄酯先与[2-[2-(Fmoc-amino)ethoxy]ethoxy] acetic acid成硫酯，之后与羧基R3保护的[2-(2-aminoethoxy) ethoxy] acetic acid进行酯交换反应，酸解后得到产品；或者采用[2-[2-(Fmoc-amino)ethoxy]ethoxy] acetic acid形成叠氮化物，之后与羧基R3保护的[2-(2-aminoethoxy) ethoxy] acetic acid形成产品再酸解后得到产品；
N-(17-carboxy(R3)-1-oxoheptadecyl-L-γ-Glu (R3)-[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy] acetic acid的合成
采用17-carboxy(R3) -1-oxoheptadecyl-L-α（R3）-glu-OH的活泼酯与羧基R3保护的2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy] acetic acid进行缩合并酸解后得到目的产品；活泼酯法合成中用到的单一缩合剂或者缩合剂复方：DIC、DCC、EDC、TBTU、PyBOP、HBTU、DIC/HOBT、DCC/HOBT、EDC/HOBT、HOSu；或者采用羧基R3保护的2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy] acetic acid与17-carboxy(R3) -1-oxoheptadecyl-L-α（R3）-glu-OH的酸酐进行反应并酸解后得到产品；酸酐法采用氯乙酰氯、氯甲酸乙酯、氯甲酸叔丁酯、氯甲酸异丁酯；或者采用硫苄酯先与17-carboxy(R3) -1-oxoheptadecyl-L-α（R3）-glu-OH成硫酯，之后与羧基R3保护的2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy] acetic acid进行酯交换反应，酸解后得到产品；或者采用17-carboxy(R3) -1-oxoheptadecyl-L-α（R3）-glu-OH形成叠氮化物，之后与羧基R3保护的2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetic acid形成产品再酸解后得到产品；
Fmoc-Lys[[N6-[N-(17-carboxy(R3)-1-oxoheptadecyl-L-γ-glutamyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy]acetyl] ]-OH的合成
采用N-(17-carboxy(R3)-1-oxoheptadecyl-L-γ-Glu (R3)-[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy] acetic acid的活泼酯与羧基R3保护的Fmoc-Lys-OH进行缩合并酸解后得到目的产品；活泼酯法合成中用到的单一缩合剂或者缩合剂复方：DIC、DCC、EDC、TBTU、PyBOP、HBTU、DIC/HOBT、DCC/HOBT、EDC/HOBT、HOSu；或者采用羧基R3保护的Fmoc-Lys-OH与N-(17-carboxy(R3)-1-oxoheptadecyl-L-γ-Glu (R3)-[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy] acetic acid的酸酐进行反应并酸解后得到产品；酸酐法采用氯乙酰氯、氯甲酸乙酯、氯甲酸叔丁酯、氯甲酸异丁酯等等。或者采用硫苄酯先与N-(17-carboxy(R3)-1-oxoheptadecyl-L-γ-Glu (R3)-[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy] acetic acid成硫酯，之后与羧基R3保护的Fmoc-Lys-OH进行酯交换反应，酸解后得到产品；或者采用N-(17-carboxy(R3)-1-oxoheptadecyl-L-γ-Glu (R3)-[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy] acetic acid形成叠氮化物，之后与羧基R3保护的Fmoc-Lys-OH形成产品再酸解后得到产品。
实施例6，实施例1－5中任何一项所述的索玛鲁肽的合成方法中：
步骤A中各片段缩合法采用活化酯法、混合酸酐法、叠氮化合物法或者硫苄酯交换法。
实施例7，实施例1－6中任何一项所述的索玛鲁肽的合成方法中：
步骤A中R-His(R1)-Ala-Glu(R2)-Gly-Thr(R4)-Phe-Thr(R4)-Ser(R4)-Asp(R5)-Val-Ser(R4)-Ser(R4)-Tyr(R4)-Leu-Glu(R2)-Gly-R3的合成方法如下：
采用固相合成法或者液相合成法或者固液结合法合成；
所述的固相合成法采用CTC树脂为起始载体，通过如实施例2中记载的各类缩合体系，逐一偶联合成，具体偶联顺序为R-Gly-OH，R- Glu(R2)-OH，R-Leu-OH，R-Tyr(R4)-OH，R-Ser(R4)-OH，R- Ser(R4)-OH，R-Val-OH，R- Asp(R5)-OH，R-Ser(R4)-OH，R-Thr(R4)-OH，R-Phe-OH，R-Thr(R4)-OH，R-Gly-OH，R-Glu(R2)-OH，R-Ala-OH，R-His(R1)-OH；偶联完毕后，采用裂解液裂解CTC树脂，裂解液为TFE或者TFA为主体的含有捕获剂的混合物；最终得到R-His(R1)-Ala-Glu(R2)-Gly-Thr(R4)-Phe-Thr(R4)-Ser(R4)-Asp(R5)- Val-Ser(R4)-Ser(R4)-Tyr(R4)-Leu-Glu(R2)-Gly-OH
所述的液相合成法以NH2-Gly-R3为起始物料，通过如实施例2中的各类缩合体系，或者酸酐法采用氯乙酰氯、氯甲酸乙酯、氯甲酸叔丁酯、氯甲酸异丁酯，或者叠氮化作为偶联试剂，逐一偶联合成或者片段法偶联合成，逐一法偶联顺序为R-Gly-OH，R- Glu(R2)-OH，R-Leu-OH，R-Tyr(R4)-OH，R- Ser(R4)-OH，R- Ser(R4)-OH，R-Val-OH，R- Asp(R5)-OH，R-Ser(R4)-OH，R-Thr(R4)-OH，R-Phe-OH，R-Thr(R4)-OH，R-Gly-OH，R-Glu(R2)-OH，R-Ala-OH，R-His(R1)-OH；片段法采用各类片段法，选自1+15、2+14、3+13、4+12、5+11、6+10、7+9、8+8、9+7、10+6、11+5、12+4、13+3、14+2、15+1。
实施例8，实施例1－7中任何一项所述的索玛鲁肽的合成方法中：
步骤A中R-Ile-Ala-Trp(R6)-Leu-Val-Arg(R7)-Gly-Arg(R7)-Gly-R3的合成方法如下：
采用固相合成法、液相合成法或者固液结合法合成；
其中固相合成法采用CTC树脂为起始载体，通过如实施例2中的各类缩合体系，逐一偶联合成，具体偶联顺序为R-Gly-OH，R-Arg(R7)-OH，R-Gly-OH，R-Arg(R7)-OH，R-Val-OH，R-Leu-OH，R-Trp(R6)-OH， R-Ala-OH，R-Ile-OH；偶联完毕后，采用裂解液裂解CTC树脂，裂解液为TFE或者TFA为主体的含有捕获剂的混合物；或者偶联完毕后，不进行处理，直接得到需要的肽树脂，以备后用；最终得到R-Ile-Ala-Trp(R6)-Leu-Val-Arg(R7)-Gly-Arg(R7)-Gly-OH或者R-Ile-Ala-Trp(R6)-Leu-Val-Arg(R7)-Gly-Arg(R7)-Gly-CTC树脂；
所述的采用液相合成法以NH2-Gly-R3为起始物料，通过如实施例2中的各类缩合体系，或者酸酐法采用氯乙酰氯、氯甲酸乙酯、氯甲酸叔丁酯、氯甲酸异丁酯，或者叠氮化作为偶联试剂，逐一偶联合成或者片段法偶联合成，逐一法偶联顺序为R-Gly-OH，R-Arg(R7)-OH，R-Gly-OH，R-Arg(R7)-OH，R-Val-OH，R-Leu-OH，R-Trp(R6)-OH， R-Ala-OH，R-Ile-OH；片段法选自1+8、2+7、3+6、4+5、5+4、6+3、7+2或者8+1。
实施例9，实施例1－8中任何一项所述的索玛鲁肽的合成方法中：
步骤A中R-Gln-Ala-Ala- N6-[N-(17-carboxy(R3)-1-oxoheptadecyl-L-γ-glutamyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy]acetyl]-Lys-Glu(R2)-Phe-Ile-Ala-Trp(R6)-Leu-Val-Arg(R7)-Gly-Arg(R7)-Gly-R3的合成方法如下；
采用固相合成法以R-Gln-Ala-Ala- N6-[N-(17-carboxy(R3)-1-oxoheptadecyl-L-γ-glutamyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy]acetyl]-Lys-Glu(R2)-Phe-OH为起始物料，通过实施例2中的各类缩合体系，与NH2-Ile-Ala-Trp(R6)-Leu-Val-Arg(R7)-Gly-Arg(R7)-Gly-CTC树脂缩合反应；反应完毕后，得到目标化合物；
或者采用液相合成法，以R-Gln-Ala-Ala- N6-[N-(17-carboxy(R3)-1-oxoheptadecyl-L-γ-glutamyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy]acetyl]-Lys-Glu(R2)-Phe-OH为起始物料，通过实施例2中的各类缩合体系，或者酸酐法采用氯乙酰氯、氯甲酸乙酯、氯甲酸叔丁酯、氯甲酸异丁酯，或者叠氮化作为偶联试剂，与NH2-Ile-Ala-Trp(R6)-Leu-Val-Arg(R7)-Gly-Arg(R7)-Gly-R3偶联合成，得到目标化合物。
实施例10，实施例1－9中任何一项所述的索玛鲁肽的合成方法中：
步骤A中R-His(R1)-Ala-Glu(R2)-Gly-Thr(R4)-Phe-Thr(R4)-Ser(R4)-Asp(R5)-Val-Ser(R4)-Ser(R4)-
Tyr(R4)-Leu-Glu(R2)-Gly-Gln-Ala-Ala-N6-[N-(17-carboxy(R3)-1-oxoheptadecyl-L-γ-glutamyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy]acetyl]-Lys-Glu(R2)-Phe-Ile-Ala-Trp(R6)-Leu-Val-Arg(R7)-Gly-Arg(R7)-Gly-R3
的合成方法如下：
采用固相合成法，以R-His(R1)-Ala-Glu(R2)-Gly-Thr(R4)-Phe-Thr(R4)-Ser(R4)-Asp(R5)-Val-Ser(R4)-Ser(R4)-
Tyr(R4)-Leu-Glu(R2)-Gly-OH为起始物料，通过实施例2中的各类缩合体系，与NH2-Gln-Ala-Ala- N6-[N-(17-carboxy(R3)-1-oxoheptadecyl-L-γ-glutamyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy]acetyl]-Lys-Glu(R2)-Phe-Ile-Ala-Trp(R6)-Leu-Val-Arg(R7)-Gly-Arg(R7)-Gly-CTC树脂缩合反应；反应完毕后，得到目标化合物。
或者采用液相合成法，以R-His(R1)-Ala-Glu(R2)-Gly-Thr(R4)-Phe-Thr(R4)-Ser(R4)-Asp(R5)-Val-Ser(R4)-Ser(R4)-
Tyr(R4)-Leu-Glu(R2)-Gly-OH为起始物料，通过实施例2中的各类缩合体系，或者酸酐法采用氯乙酰氯、氯甲酸乙酯、氯甲酸叔丁酯、氯甲酸异丁酯，或者叠氮化作为偶联试剂，与NH2-Gln-Ala-Ala- N6-[N-(17-carboxy(R3)-1-oxoheptadecyl-L-γ-glutamyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy]acetyl]-Lys-Glu(R2)-Phe-Ile-Ala-Trp(R6)-Leu-Val-Arg(R7)-Gly-Arg(R7)-Gly-R3偶联合成，得到目标化合物。
实施例11，参照图1－3，索玛鲁肽合成方法实验：
一、Boc-His(trt)-Ala-Glu(otbu)-Gly-Thr(tbu)-Phe-Thr(tbu)-Ser(tbu)-Asp(otbu)- Val-Ser(tbu)-Ser(tbu)-Tyr(tbu)-Leu-Glu(otbu)-Gly-OH的合成
1、第一个氨基酸偶联
1.1.1向反应釜中，加入200mmol的CTC 树脂和6L DMF，搅拌10-15分钟，抽滤除去液体；再加入6L DCM，氮气保护下搅拌溶胀25~35分钟，抽滤除去液体。
1.1.2称取600mmol Fmoc-Gly-OH，用5L的DMF溶解，溶解完全后转移至反应釜中。开启反应釜搅拌和上鼓氮气，加入250mlDIEA，20-35℃偶联反应3h。反应结束后抽滤除去反应液体，加入甲醇进行封端，封端结束后，抽滤出去反应液，洗涤树脂，检测树脂的替代度，按照替代度进行下一步投料。
2、第二个氨基酸偶联
1.2.1去保护
向计量罐中加入20%六氢吡啶/DMF溶液9L作为去保护液，加入主反应釜内通氮气并搅拌控制反应温度在15~30℃，反应5~7 min，抽除反应液，抽干3~5 min。
再次向计量罐中加入20%六氢吡啶/DMF溶液9L作为去保护液，加入主反应釜内通氮气并搅拌控制反应温度在15~30℃，反应8~12 min，抽除反应液，抽干3~5min。
去保护后洗涤6次
每次量取DMF 9L加入主反应釜，通氮气并搅拌洗涤3~5min，抽干3~5min。茚三酮检测阳性结束洗涤。
1.2.2 偶联
称取400mmol Fmoc-Glu(otbu)-OH，400mmol HOBT，用5L的DMF溶解，溶解完全后转移至激活灌中。开启搅拌、冷媒，控制温度在0~10℃，缓慢加入66mL的DIC，控制温度在0~10℃，活化反应10~15分钟。活化反应完成后，将活化液转入反应釜中。开启反应釜搅拌和上鼓氮气，20-35℃偶联反应2h。反应结束后抽滤除去反应液体，洗涤树脂。
3、第三个氨基酸偶联
1.3.1去保护
向计量罐中加入20%六氢吡啶/DMF溶液9L作为去保护液，加入主反应釜内通氮气并搅拌控制反应温度在15~30℃，反应5~7 min，抽除反应液，抽干3~5 min。
再次向计量罐中加入20%六氢吡啶/DMF溶液9L作为去保护液，加入主反应釜内通氮气并搅拌控制反应温度在15~30℃，反应8~12 min，抽除反应液，抽干3~5min。
去保护后洗涤6次
每次量取DMF 9L加入主反应釜，通氮气并搅拌洗涤3~5min，抽干3~5min。茚三酮检测阳性结束洗涤。
1.3.2 偶联
称取400mmol Fmoc-Leu-OH，400mmol HOBT，用5L的DMF溶解，溶解完全后转移至激活灌中。开启搅拌、冷媒，控制温度在0~10℃，缓慢加入66mL的DIC，控制温度在0~10℃，活化反应10~15分钟。活化反应完成后，将活化液转入反应釜中。开启反应釜搅拌和上鼓氮气，20-35℃偶联反应2h。反应结束后抽滤除去反应液体，洗涤树脂。
4、第四个氨基酸偶联
1.4.1去保护
向计量罐中加入20%六氢吡啶/DMF溶液9L作为去保护液，加入主反应釜内通氮气并搅拌控制反应温度在15~30℃，反应5~7 min，抽除反应液，抽干3~5 min。
再次向计量罐中加入20%六氢吡啶/DMF溶液9L作为去保护液，加入主反应釜内通氮气并搅拌控制反应温度在15~30℃，反应8~12 min，抽除反应液，抽干3~5min。
去保护后洗涤6次
每次量取DMF 9L加入主反应釜，通氮气并搅拌洗涤3~5min，抽干3~5min。茚三酮检测阳性结束洗涤。
1.4.2 偶联
称取400mmol Fmoc-Tyr(tbu)-OH，400mmol HOBT，用5L的DMF溶解，溶解完全后转移至激活灌中。开启搅拌、冷媒，控制温度在0~10℃，缓慢加入66mL的DIC，控制温度在0~10℃，活化反应10~15分钟。活化反应完成后，将活化液转入反应釜中。开启反应釜搅拌和上鼓氮气，20-35℃偶联反应2h。反应结束后抽滤除去反应液体，洗涤树脂。
5、第五个氨基酸偶联
1.5.1去保护
向计量罐中加入20%六氢吡啶/DMF溶液9L作为去保护液，加入主反应釜内通氮气并搅拌控制反应温度在15~30℃，反应5~7 min，抽除反应液，抽干3~5 min。
再次向计量罐中加入20%六氢吡啶/DMF溶液9L作为去保护液，加入主反应釜内通氮气并搅拌控制反应温度在15~30℃，反应8~12 min，抽除反应液，抽干3~5min。
去保护后洗涤6次
每次量取DMF 9L加入主反应釜，通氮气并搅拌洗涤3~5min，抽干3~5min。茚三酮检测阳性结束洗涤。
1.5.2 偶联
称取400mmol Fmoc-Ser(tbu)-OH，400mmol HOBT，用5L的DMF溶解，溶解完全后转移至激活灌中。开启搅拌、冷媒，控制温度在0~10℃，缓慢加入66mL的DIC，控制温度在0~10℃，活化反应10~15分钟。活化反应完成后，将活化液转入反应釜中。开启反应釜搅拌和上鼓氮气，20-35℃偶联反应2h。反应结束后抽滤除去反应液体，洗涤树脂。
6、第六个氨基酸偶联
1.6.1去保护
向计量罐中加入20%六氢吡啶/DMF溶液9L作为去保护液，加入主反应釜内通氮气并搅拌控制反应温度在15~30℃，反应5~7 min，抽除反应液，抽干3~5 min。
再次向计量罐中加入20%六氢吡啶/DMF溶液9L作为去保护液，加入主反应釜内通氮气并搅拌控制反应温度在15~30℃，反应8~12 min，抽除反应液，抽干3~5min。
去保护后洗涤6次
每次量取DMF 9L加入主反应釜，通氮气并搅拌洗涤3~5min，抽干3~5min。茚三酮检测阳性结束洗涤。
1.6.2 偶联
称取400mmol Fmoc-Ser(tbu)-OH，400mmol HOBT，用5L的DMF溶解，溶解完全后转移至激活灌中。开启搅拌、冷媒，控制温度在0~10℃，缓慢加入66mL的DIC，控制温度在0~10℃，活化反应10~15分钟。活化反应完成后，将活化液转入反应釜中。开启反应釜搅拌和上鼓氮气，20-35℃偶联反应2h。反应结束后抽滤除去反应液体，洗涤树脂。
7、第七个氨基酸偶联
1.7.1去保护
向计量罐中加入20%六氢吡啶/DMF溶液9L作为去保护液，加入主反应釜内通氮气并搅拌控制反应温度在15~30℃，反应5~7 min，抽除反应液，抽干3~5 min。
再次向计量罐中加入20%六氢吡啶/DMF溶液9L作为去保护液，加入主反应釜内通氮气并搅拌控制反应温度在15~30℃，反应8~12 min，抽除反应液，抽干3~5min。
去保护后洗涤6次
每次量取DMF 9L加入主反应釜，通氮气并搅拌洗涤3~5min，抽干3~5min。茚三酮检测阳性结束洗涤。
1.7.2 偶联
称取400mmol Fmoc-Val-OH，400mmol HOBT，用5L的DMF溶解，溶解完全后转移至激活灌中。开启搅拌、冷媒，控制温度在0~10℃，缓慢加入66mL的DIC，控制温度在0~10℃，活化反应10~15分钟。活化反应完成后，将活化液转入反应釜中。开启反应釜搅拌和上鼓氮气，20-35℃偶联反应2h。反应结束后抽滤除去反应液体，洗涤树脂。
8、第八个氨基酸偶联
1.8.1去保护
向计量罐中加入20%六氢吡啶/DMF溶液9L作为去保护液，加入主反应釜内通氮气并搅拌控制反应温度在15~30℃，反应5~7 min，抽除反应液，抽干3~5 min。
再次向计量罐中加入20%六氢吡啶/DMF溶液9L作为去保护液，加入主反应釜内通氮气并搅拌控制反应温度在15~30℃，反应8~12 min，抽除反应液，抽干3~5min。
去保护后洗涤6次
每次量取DMF 9L加入主反应釜，通氮气并搅拌洗涤3~5min，抽干3~5min。茚三酮检测阳性结束洗涤。
1.8.2 偶联
称取400mmol Fmoc-Asp(otbu)-OH，400mmol HOBT，用5L的DMF溶解，溶解完全后转移至激活灌中。开启搅拌、冷媒，控制温度在0~10℃，缓慢加入66mL的DIC，控制温度在0~10℃，活化反应10~15分钟。活化反应完成后，将活化液转入反应釜中。开启反应釜搅拌和上鼓氮气，20-35℃偶联反应2h。反应结束后抽滤除去反应液体，洗涤树脂。
9、第九个氨基酸偶联
1.9.1去保护
向计量罐中加入20%六氢吡啶/DMF溶液9L作为去保护液，加入主反应釜内通氮气并搅拌控制反应温度在15~30℃，反应5~7 min，抽除反应液，抽干3~5 min。
再次向计量罐中加入20%六氢吡啶/DMF溶液9L作为去保护液，加入主反应釜内通氮气并搅拌控制反应温度在15~30℃，反应8~12 min，抽除反应液，抽干3~5min。
去保护后洗涤6次
每次量取DMF 9L加入主反应釜，通氮气并搅拌洗涤3~5min，抽干3~5min。茚三酮检测阳性结束洗涤。
1.9.2 偶联
称取400mmol Fmoc-Ser(tbu)-OH，400mmol HOBT，用5L的DMF溶解，溶解完全后转移至激活灌中。开启搅拌、冷媒，控制温度在0~10℃，缓慢加入66mL的DIC，控制温度在0~10℃，活化反应10~15分钟。活化反应完成后，将活化液转入反应釜中。开启反应釜搅拌和上鼓氮气，20-35℃偶联反应2h。反应结束后抽滤除去反应液体，洗涤树脂。
10、第十个氨基酸偶联
1.10.1去保护
向计量罐中加入20%六氢吡啶/DMF溶液9L作为去保护液，加入主反应釜内通氮气并搅拌控制反应温度在15~30℃，反应5~7 min，抽除反应液，抽干3~5 min。
再次向计量罐中加入20%六氢吡啶/DMF溶液9L作为去保护液，加入主反应釜内通氮气并搅拌控制反应温度在15~30℃，反应8~12 min，抽除反应液，抽干3~5min。
去保护后洗涤6次
每次量取DMF 9L加入主反应釜，通氮气并搅拌洗涤3~5min，抽干3~5min。茚三酮检测阳性结束洗涤。
1.10.2 偶联
称取400mmol Fmoc-Thr(tbu)-OH，400mmol HOBT，用5L的DMF溶解，溶解完全后转移至激活灌中。开启搅拌、冷媒，控制温度在0~10℃，缓慢加入66mL的DIC，控制温度在0~10℃，活化反应10~15分钟。活化反应完成后，将活化液转入反应釜中。开启反应釜搅拌和上鼓氮气，20-35℃偶联反应2h。反应结束后抽滤除去反应液体，洗涤树脂。
11、第十一个氨基酸偶联
1.11.1去保护
向计量罐中加入20%六氢吡啶/DMF溶液9L作为去保护液，加入主反应釜内通氮气并搅拌控制反应温度在15~30℃，反应5~7 min，抽除反应液，抽干3~5 min。
再次向计量罐中加入20%六氢吡啶/DMF溶液9L作为去保护液，加入主反应釜内通氮气并搅拌控制反应温度在15~30℃，反应8~12 min，抽除反应液，抽干3~5min。
去保护后洗涤6次
每次量取DMF 9L加入主反应釜，通氮气并搅拌洗涤3~5min，抽干3~5min。茚三酮检测阳性结束洗涤。
1.11.2 偶联
称取400mmol Fmoc-Phe-OH，400mmol HOBT，用5L的DMF溶解，溶解完全后转移至激活灌中。开启搅拌、冷媒，控制温度在0~10℃，缓慢加入66mL的DIC，控制温度在0~10℃，活化反应10~15分钟。活化反应完成后，将活化液转入反应釜中。开启反应釜搅拌和上鼓氮气，20-35℃偶联反应2h。反应结束后抽滤除去反应液体，洗涤树脂。
12、第十二个氨基酸偶联
1.12.1去保护
向计量罐中加入20%六氢吡啶/DMF溶液9L作为去保护液，加入主反应釜内通氮气并搅拌控制反应温度在15~30℃，反应5~7 min，抽除反应液，抽干3~5 min。
再次向计量罐中加入20%六氢吡啶/DMF溶液9L作为去保护液，加入主反应釜内通氮气并搅拌控制反应温度在15~30℃，反应8~12 min，抽除反应液，抽干3~5min。
去保护后洗涤6次
每次量取DMF 9L加入主反应釜，通氮气并搅拌洗涤3~5min，抽干3~5min。茚三酮检测阳性结束洗涤。
1.12.2 偶联
称取400mmol Fmoc-Thr(tbu)-OH，400mmol HOBT，用5L的DMF溶解，溶解完全后转移至激活灌中。开启搅拌、冷媒，控制温度在0~10℃，缓慢加入66mL的DIC，控制温度在0~10℃，活化反应10~15分钟。活化反应完成后，将活化液转入反应釜中。开启反应釜搅拌和上鼓氮气，20-35℃偶联反应2h。反应结束后抽滤除去反应液体，洗涤树脂。
13、第十三个氨基酸偶联
1.13.1去保护
向计量罐中加入20%六氢吡啶/DMF溶液9L作为去保护液，加入主反应釜内通氮气并搅拌控制反应温度在15~30℃，反应5~7 min，抽除反应液，抽干3~5 min。
再次向计量罐中加入20%六氢吡啶/DMF溶液9L作为去保护液，加入主反应釜内通氮气并搅拌控制反应温度在15~30℃，反应8~12 min，抽除反应液，抽干3~5min。
去保护后洗涤6次
每次量取DMF 9L加入主反应釜，通氮气并搅拌洗涤3~5min，抽干3~5min。茚三酮检测阳性结束洗涤。
1.13.2 偶联
称取400mmol Fmoc-Gly-OH，400mmol HOBT，用5L的DMF溶解，溶解完全后转移至激活灌中。开启搅拌、冷媒，控制温度在0~10℃，缓慢加入66mL的DIC，控制温度在0~10℃，活化反应10~15分钟。活化反应完成后，将活化液转入反应釜中。开启反应釜搅拌和上鼓氮气，20-35℃偶联反应2h。反应结束后抽滤除去反应液体，洗涤树脂。
14、第十四个氨基酸偶联
1.14.1去保护
向计量罐中加入20%六氢吡啶/DMF溶液9L作为去保护液，加入主反应釜内通氮气并搅拌控制反应温度在15~30℃，反应5~7 min，抽除反应液，抽干3~5 min。
再次向计量罐中加入20%六氢吡啶/DMF溶液9L作为去保护液，加入主反应釜内通氮气并搅拌控制反应温度在15~30℃，反应8~12 min，抽除反应液，抽干3~5min。
去保护后洗涤6次
每次量取DMF 9L加入主反应釜，通氮气并搅拌洗涤3~5min，抽干3~5min。茚三酮检测阳性结束洗涤。
1.14.2 偶联
称取400mmol Fmoc-Glu(otbu)-OH，400mmol HOBT，用5L的DMF溶解，溶解完全后转移至激活灌中。开启搅拌、冷媒，控制温度在0~10℃，缓慢加入66mL的DIC，控制温度在0~10℃，活化反应10~15分钟。活化反应完成后，将活化液转入反应釜中。开启反应釜搅拌和上鼓氮气，20-35℃偶联反应2h。反应结束后抽滤除去反应液体，洗涤树脂。
15、第十五个氨基酸偶联
1.15.1去保护
向计量罐中加入20%六氢吡啶/DMF溶液9L作为去保护液，加入主反应釜内通氮气并搅拌控制反应温度在15~30℃，反应5~7 min，抽除反应液，抽干3~5 min。
再次向计量罐中加入20%六氢吡啶/DMF溶液9L作为去保护液，加入主反应釜内通氮气并搅拌控制反应温度在15~30℃，反应8~12 min，抽除反应液，抽干3~5min。
去保护后洗涤6次
每次量取DMF 9L加入主反应釜，通氮气并搅拌洗涤3~5min，抽干3~5min。茚三酮检测阳性结束洗涤。
1.15.2 偶联
称取400mmol Fmoc-Aib-OH，400mmol HOBT，用5L的DMF溶解，溶解完全后转移至激活灌中。开启搅拌、冷媒，控制温度在0~10℃，缓慢加入66mL的DIC，控制温度在0~10℃，活化反应10~15分钟。活化反应完成后，将活化液转入反应釜中。开启反应釜搅拌和上鼓氮气，20-35℃偶联反应2h。反应结束后抽滤除去反应液体，洗涤树脂。
16、第十六个氨基酸偶联
1.16.1去保护
向计量罐中加入20%六氢吡啶/DMF溶液9L作为去保护液，加入主反应釜内通氮气并搅拌控制反应温度在15~30℃，反应5~7 min，抽除反应液，抽干3~5 min。
再次向计量罐中加入20%六氢吡啶/DMF溶液9L作为去保护液，加入主反应釜内通氮气并搅拌控制反应温度在15~30℃，反应8~12 min，抽除反应液，抽干3~5min。
去保护后洗涤6次
每次量取DMF 9L加入主反应釜，通氮气并搅拌洗涤3~5min，抽干3~5min。茚三酮检测阳性结束洗涤。
1.16.2 偶联
称取400mmol Boc-His(trt)-OH，400mmol HOBT，用5L的DMF溶解，溶解完全后转移至激活灌中。开启搅拌、冷媒，控制温度在0~10℃，缓慢加入66mL的DIC，控制温度在0~10℃，活化反应10~15分钟。活化反应完成后，将活化液转入反应釜中。开启反应釜搅拌和上鼓氮气，20-35℃偶联反应2h。反应结束后抽滤除去反应液体，洗涤树脂。
17、裂解
称取全肽树脂1004g，量取DCM体积8.03L，TFEA（三氟乙醇）2.01L混合，加入全肽树脂到混合液中，在室温下反应2h，过滤除去树脂，在滤液中加入等体积的水，上旋蒸除去DCM和TFEA（三氟乙醇），产生大量白色沉淀。用无水乙醚打浆洗涤两次，纯度90%，产品干燥备用。
二、Fmoc-Gln-Ala-Ala-N6-[N-(17-carboxy(otbu)-1-oxoheptadecyl-L-γ-glutamyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy]acetyl]-Lys-Glu(otbu)-Phe-OH的合成
2.1、[2-[2-(Fmoc-amino)ethoxy]ethoxy]acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy]acetic acid的合成
溶液1：称取300mmol的[2-[2-(Fmoc-amino)ethoxy]ethoxy] acetic acid、360mmol的HOSu，置于3000ml的圆底烧瓶中，加入1000mlDMF溶解，磁力搅拌下冷却至0-5℃备用。
溶液2：称取360mmol的DCC，置于小烧杯中，用300ml的DMF溶解，冷却至0-5℃备用
溶液3：称取360mmol的[2-(2-aminoethoxy) ethoxy] acetic acid，溶于300ml的10%的碳酸钠溶液中，室温下备用
在0-5℃下，将DCC溶液（溶液2）慢慢滴加到搅拌的溶液1中，反应15分钟，25℃下反应2小时，点板确定反应结束（具体反应时间以点板时间为准）。过滤除去白色沉淀，用100mlDMF洗涤沉淀并过滤，合并滤液，加入大量纯水，出现大量白色固体，过滤得到白色固体，用饱和碳酸氢钠500ml打浆洗涤，抽滤，重复洗涤3次，获得白色固体。将白色固体溶于1200mlTHF中，25℃下用恒压漏斗慢慢的滴加到溶液3中，滴加完毕后反应继续反应1小时，反应结束（以点板为准）。用稀柠檬酸调pH值到7，旋蒸除去THF，再次用稀柠檬酸调pH值到3-4之间，得到大量白色沉淀，过滤，用稀柠檬酸300ml打浆洗涤，过滤，重复洗涤3遍后获得白色固体。产品为白色固体，纯度：97.5%
2.2、17-carboxy(otbu) -1-oxoheptadecyl-L-Glu-otbu的合成
溶液1：称取300mmol的1,18-十八烷二酸单叔丁酯、360mmol的HOSu，置于3000ml的圆底烧瓶中，加入1000mlDMF溶解，磁力搅拌下冷却至0-5℃备用。
溶液2：称取360mmol的DCC，置于小烧杯中，用300ml的DMF溶解，冷却至0-5℃备用
溶液3：称取360mmol的NH2-Glu-otbu，溶于300ml的10%的碳酸钠溶液中，室温下备用
在0-5℃下，将DCC溶液（溶液2）慢慢滴加到搅拌的溶液1中，反应15分钟，25℃下反应2小时，点板确定反应结束（具体反应时间以点板时间为准）。过滤除去白色沉淀，用100mlDMF洗涤沉淀并过滤，合并滤液，加入大量纯水，出现大量白色固体，过滤得到白色固体，用饱和碳酸氢钠500ml打浆洗涤，抽滤，重复洗涤3次，获得白色固体。将白色固体溶于1200mlTHF中，25℃下用恒压漏斗慢慢的滴加到溶液3中，滴加完毕后反应继续反应1小时，反应结束（以点板为准）。用稀柠檬酸调pH值到7，旋蒸除去THF，再次用稀柠檬酸调pH值到3-4之间，得到大量白色沉淀，过滤，用稀柠檬酸300ml打浆洗涤，过滤，重复洗涤3遍后获得白色固体。产品为白色固体，纯度：98%
2.3、N-(17-carboxy(otbu)-1-oxoheptadecyl-L-γ-Glu (otbu)-[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy] acetic acid的合成
2.3.1脱保护
取300mmol的[2-[2-(Fmoc-amino)ethoxy]ethoxy]acetyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetic acid置于2000ml的圆底烧瓶中，机械搅拌下，加入500ml的20%pip/ DMF溶液（V：V=1:4），室温下搅拌反应30分钟，点板检测反应是否完成，确定反应结束后，将反应液慢慢倒入搅拌的冰乙醚中，出现大量白色沉淀。过滤，用冰乙醚打浆洗涤3次，获得[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy] acetic acid，纯度为97.3%。
2.3.2合成
溶液1：称取300mmol的17-carboxy(otbu) -1-oxoheptadecyl-L-Glu-otbu、360mmol的HOSu，置于3000ml的圆底烧瓶中，加入1000mlDMF溶解，磁力搅拌下冷却至0-5℃备用。
溶液2：称取360mmol的DCC，置于小烧杯中，用300ml的DMF溶解，冷却至0-5℃备用
溶液3：称取400mmol的[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetic acid，溶于400ml的10%的碳酸钠溶液中，室温下备用
在0-5℃下，将DCC溶液（溶液2）慢慢滴加到搅拌的溶液1中，反应15分钟，25℃下反应2小时，点板确定反应结束（具体反应时间以点板时间为准）。过滤除去白色沉淀，用100mlDMF洗涤沉淀并过滤，合并滤液，加入大量纯水，出现大量白色固体，过滤得到白色固体，用饱和碳酸氢钠500ml打浆洗涤，抽滤，重复洗涤3次，获得白色固体。将白色固体溶于1200mlTHF中，25℃下用恒压漏斗慢慢的滴加到溶液3中，滴加完毕后反应继续反应1小时，反应结束（以点板为准）。用稀柠檬酸调pH值到7，旋蒸除去THF，再次用稀柠檬酸调pH值到3-4之间，得到大量白色沉淀，过滤，用稀柠檬酸300ml打浆洗涤，过滤，重复洗涤3遍后获得白色固体。产品为白色固体，纯度：96.6%
2.4、Fmoc-Lys[[N6-[N-(17-carboxy(otbu)-1-oxoheptadecyl-L-γ-glutamyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy]acetyl] ]-OH的合成
溶液1：称取300mmol的N-(17-carboxy(otbu)-1-oxoheptadecyl-L-γ-Glu (otbu)-[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy] acetic acid、400mmol的HOSu，置于3000ml的圆底烧瓶中，加入1000mlDMF溶解，磁力搅拌下冷却至0-5℃备用。
溶液2：称取400mmol的DCC，置于小烧杯中，用400ml的DMF溶解，冷却至0-5℃备用
溶液3：称取400mmol的Fmoc-Lys-OH，溶于500ml的DMF中，室温下备用
在0-5℃下，将DCC溶液（溶液2）慢慢滴加到搅拌的溶液1中，反应15分钟，25℃下反应2小时，点板确定反应结束（具体反应时间以点板时间为准）。过滤除去白色沉淀，用100mlDMF洗涤沉淀并过滤，合并滤液，加入大量纯水，出现大量白色固体，过滤得到白色固体，用饱和碳酸氢钠500ml打浆洗涤，抽滤，重复洗涤3次，获得白色固体。将白色固体溶于1200mlTHF中，25℃下用恒压漏斗慢慢的滴加到溶液3中，滴加完毕后反应继续反应1小时，反应结束（以点板为准）。用稀柠檬酸调pH值到7，旋蒸除去THF，再次用稀柠檬酸调pH值到3-4之间，得到大量白色沉淀，过滤，用稀柠檬酸300ml打浆洗涤，过滤，重复洗涤3遍后获得白色固体。产品为白色固体，纯度：98.1%
2.5、第一个氨基酸偶联
2.5.1向反应釜中，加入200mmol的CTC 树脂和6L DMF，搅拌10-15分钟，抽滤除去液体；再加入6L DCM，氮气保护下搅拌溶胀25~35分钟，抽滤除去液体。
2.5.2称取600mmol Fmoc-Phe-OH，用5L的DMF溶解，溶解完全后转移至反应釜中。开启反应釜搅拌和上鼓氮气，加入250ml的DIEA，20-35℃偶联反应3h。反应结束后抽滤除去反应液体，加入甲醇进行封端，封端结束后，抽滤出去反应液，洗涤树脂，检测树脂的替代度，按照替代度进行下一步投料。
2.6、第二个氨基酸偶联
2.6.1去保护
向计量罐中加入20%六氢吡啶/DMF溶液9L作为去保护液，加入主反应釜内通氮气并搅拌控制反应温度在15~30℃，反应5~7 min，抽除反应液，抽干3~5 min。
再次向计量罐中加入20%六氢吡啶/DMF溶液9L作为去保护液，加入主反应釜内通氮气并搅拌控制反应温度在15~30℃，反应8~12 min，抽除反应液，抽干3~5min。
去保护后洗涤6次
每次量取DMF 9L加入主反应釜，通氮气并搅拌洗涤3~5min，抽干3~5min。茚三酮检测阳性结束洗涤。
2.6.2 偶联
称取400mmol Fmoc-Glu(otbu)-OH，400mmol HOBT，用5L的DMF溶解，溶解完全后转移至激活灌中。开启搅拌、冷媒，控制温度在0~10℃，缓慢加入66mL的DIC，控制温度在0~10℃，活化反应10~15分钟。活化反应完成后，将活化液转入反应釜中。开启反应釜搅拌和上鼓氮气，20-35℃偶联反应2h。反应结束后抽滤除去反应液体，洗涤树脂。
2.7、第三个氨基酸偶联
2.7.1去保护
向计量罐中加入20%六氢吡啶/DMF溶液9L作为去保护液，加入主反应釜内通氮气并搅拌控制反应温度在15~30℃，反应5~7 min，抽除反应液，抽干3~5 min。
再次向计量罐中加入20%六氢吡啶/DMF溶液9L作为去保护液，加入主反应釜内通氮气并搅拌控制反应温度在15~30℃，反应8~12 min，抽除反应液，抽干3~5min。
去保护后洗涤6次
每次量取DMF 9L加入主反应釜，通氮气并搅拌洗涤3~5min，抽干3~5min。茚三酮检测阳性结束洗涤。
2.7.2 偶联
称取500mmol的Fmoc-Lys[[N6-[N-(17-carboxy(otbu)-1-oxoheptadecyl-L-γ-glutamyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy]acetyl] ]-OH，500mmol HOBT，用5L的DMF溶解，溶解完全后转移至激活灌中。开启搅拌、冷媒，控制温度在0~10℃，缓慢加入66mL的DIC，控制温度在0~10℃，活化反应10~15分钟。活化反应完成后，将活化液转入反应釜中。开启反应釜搅拌和上鼓氮气，20-35℃偶联反应4h。反应结束后抽滤除去反应液体，洗涤树脂。
2.8、第四个氨基酸偶联
2.8.1去保护
向计量罐中加入20%六氢吡啶/DMF溶液9L作为去保护液，加入主反应釜内通氮气并搅拌控制反应温度在15~30℃，反应5~7 min，抽除反应液，抽干3~5 min。
再次向计量罐中加入20%六氢吡啶/DMF溶液9L作为去保护液，加入主反应釜内通氮气并搅拌控制反应温度在15~30℃，反应8~12 min，抽除反应液，抽干3~5min。
去保护后洗涤6次
每次量取DMF 9L加入主反应釜，通氮气并搅拌洗涤3~5min，抽干3~5min。茚三酮检测阳性结束洗涤。
2.8.2 偶联
称取400mmol的 Fmoc-Ala-OH，400mmol HOBT，用5L的DMF溶解，溶解完全后转移至激活灌中。开启搅拌、冷媒，控制温度在0~10℃，缓慢加入66mL的DIC，控制温度在0~10℃，活化反应10~15分钟。活化反应完成后，将活化液转入反应釜中。开启反应釜搅拌和上鼓氮气，20-35℃偶联反应2h。反应结束后抽滤除去反应液体，洗涤树脂。
2.9、第五个氨基酸偶联
2.9.1去保护
向计量罐中加入20%六氢吡啶/DMF溶液9L作为去保护液，加入主反应釜内通氮气并搅拌控制反应温度在15~30℃，反应5~7 min，抽除反应液，抽干3~5 min。
再次向计量罐中加入20%六氢吡啶/DMF溶液9L作为去保护液，加入主反应釜内通氮气并搅拌控制反应温度在15~30℃，反应8~12 min，抽除反应液，抽干3~5min。
去保护后洗涤6次
每次量取DMF 9L加入主反应釜，通氮气并搅拌洗涤3~5min，抽干3~5min。茚三酮检测阳性结束洗涤。
2.9.2 偶联
称取400mmol的 Fmoc-Ala-OH，400mmol HOBT，用5L的DMF溶解，溶解完全后转移至激活灌中。开启搅拌、冷媒，控制温度在0~10℃，缓慢加入66mL的DIC，控制温度在0~10℃，活化反应10~15分钟。活化反应完成后，将活化液转入反应釜中。开启反应釜搅拌和上鼓氮气，20-35℃偶联反应2h。反应结束后抽滤除去反应液体，洗涤树脂。
2.10、第六个氨基酸偶联
2.10.1去保护
向计量罐中加入20%六氢吡啶/DMF溶液9L作为去保护液，加入主反应釜内通氮气并搅拌控制反应温度在15~30℃，反应5~7 min，抽除反应液，抽干3~5 min。
再次向计量罐中加入20%六氢吡啶/DMF溶液9L作为去保护液，加入主反应釜内通氮气并搅拌控制反应温度在15~30℃，反应8~12 min，抽除反应液，抽干3~5min。
去保护后洗涤6次
每次量取DMF 9L加入主反应釜，通氮气并搅拌洗涤3~5min，抽干3~5min。茚三酮检测阳性结束洗涤。
2.10.2 偶联
称取400mmol的 Fmoc-Gln-OH，400mmol HOBT，用5L的DMF溶解，溶解完全后转移至激活灌中。开启搅拌、冷媒，控制温度在0~10℃，缓慢加入66mL的DIC，控制温度在0~10℃，活化反应10~15分钟。活化反应完成后，将活化液转入反应釜中。开启反应釜搅拌和上鼓氮气，20-35℃偶联反应2h。反应结束后抽滤除去反应液体，洗涤树脂。
2.11、裂解
称取全肽树脂768g，量取DCM体积6.15L，TFEA（三氟乙醇）1.54L混合，加入全肽树脂到混合液中，在室温下反应2h，过滤除去树脂，在滤液中加入等体积的水，上旋蒸除去DCM和TFEA（三氟乙醇），产生大量白色沉淀。用无水乙醚打浆洗涤两次，纯度96.2%，产品干燥备用。
三、Fmoc-Ile-Ala-Trp(Boc)-Leu-Val-Arg(pbf)-Gly-Arg(pbf)-Gly-otbu的合成
3.1、Fmoc-Arg(pbf)-Gly-otbu
溶液1、称取120mmol的NH2-Gly-otbu、100mmol的Fmoc-Arg(pbf)-OH、120mmol的HOBT，置于500ml的圆底烧瓶中，用200ml的DMF溶解，冷却至0℃备用。
溶液2：称取120mmol的DCC，置于小烧杯中，用100ml的DMF溶解，冷却至0-5℃备用
在0-5℃下，将DCC溶液（溶液2）慢慢滴加到搅拌的溶液1中，反应15分钟，25℃下反应2小时，点板确定反应结束（具体反应时间以点板时间为准）。过滤除去白色沉淀，用30mlDMF洗涤沉淀并过滤，合并滤液，加入大量纯水，出现大量白色固体，过滤得到白色固体。白色固体用1L乙酸乙酯溶解，装入分液漏斗中，分别用稀柠檬酸150ml洗涤3次，用饱和碳酸氢钠150ml洗涤3次，用饱和食盐水200ml洗涤2次，干燥2小时，旋蒸除去溶剂获得产品。纯度为98.4%。
3.2、Fmoc-Gly-Arg(pbf)-Gly-otbu的合成
溶液1：称取100mmol的Fmoc-Arg(pbf)-Gly-otbu置于500ml的圆底烧瓶中，磁力搅拌下加入哌啶：二氯甲烷=1：4的溶液溶解，室温下脱保护30分钟，加入大量石油醚，析出大量沉淀，抽滤，用石油醚洗涤数次，获得白色固体产品（NH2-Arg(pbf)-Gly-otbu），纯度为99.1%。固体用100ml的DMF溶解，冷却至0-5℃备用
溶液2：称取100mmol的Fmoc-Gly-OH、120mmol的HOBT，置于500ml的圆底烧瓶中，用200ml的DMF溶解，冷却至0℃备用。
溶液3：称取120mmol的DCC，置于小烧杯中，用100ml的DMF溶解，冷却至0-5℃备用
在0-5℃下，将DCC溶液（溶液3）慢慢滴加到搅拌的溶液2中，反应15分钟，将溶液1慢慢滴加到反应液中，在0-5℃下反应15分钟，25℃下反应2小时，点板确定反应结束（具体反应时间以点板时间为准）。过滤除去白色沉淀，用30mlDMF洗涤沉淀并过滤，合并滤液，加入大量纯水，出现大量白色固体，过滤得到白色固体。白色固体用1L乙酸乙酯溶解，装入分液漏斗中，分别用稀柠檬酸150ml洗涤3次，用饱和碳酸氢钠150ml洗涤3次，用饱和食盐水200ml洗涤2次，干燥2小时，旋蒸除去溶剂获得产品。纯度为98.6%。
3.3、Fmoc-Arg(pbf)-Gly-Arg(pbf)-Gly-otbu
溶液1：称取100mmol的Fmoc-Gly-Arg(pbf)-Gly-otbu置于500ml的圆底烧瓶中，磁力搅拌下加入哌啶：二氯甲烷=1：4的溶液溶解，室温下脱保护30分钟，加入大量石油醚，析出大量沉淀，抽滤，用石油醚洗涤数次，获得白色固体产品（NH2-Gly-Arg(pbf)-Gly-otbu），纯度为98.3%。固体用100ml的DMF溶解，冷却至0-5℃备用
溶液2：称取100mmol的Fmoc-Arg(pbf)-OH、120mmol的HOBT，置于500ml的圆底烧瓶中，用200ml的DMF溶解，冷却至0℃备用。
溶液3：称取120mmol的DCC，置于小烧杯中，用100ml的DMF溶解，冷却至0-5℃备用
在0-5℃下，将DCC溶液（溶液3）慢慢滴加到搅拌的溶液2中，反应15分钟，将溶液1慢慢滴加到反应液中，在0-5℃下反应15分钟，25℃下反应2小时，点板确定反应结束（具体反应时间以点板时间为准）。过滤除去白色沉淀，用30mlDMF洗涤沉淀并过滤，合并滤液，加入大量纯水，出现大量白色固体，过滤得到白色固体。白色固体用1L乙酸乙酯溶解，装入分液漏斗中，分别用稀柠檬酸150ml洗涤3次，用饱和碳酸氢钠150ml洗涤3次，用饱和食盐水200ml洗涤2次，干燥2小时，旋蒸除去溶剂获得产品。纯度为98.5%。
3.4、Fmoc-Val-Arg(pbf)-Gly-Arg(pbf)-Gly-otbu
溶液1：称取100mmol的Fmoc-Arg(pbf)-Gly-Arg(pbf)-Gly-otbu置于500ml的圆底烧瓶中，磁力搅拌下加入哌啶：二氯甲烷=1：4的溶液溶解，室温下脱保护30分钟，加入大量石油醚，析出大量沉淀，抽滤，用石油醚洗涤数次，获得白色固体产品（NH2- Arg(pbf )-Gly-Arg(pbf)-Gly-otbu），纯度为98.5%。固体用100ml的DMF溶解，冷却至0-5℃备用
溶液2：称取100mmol的Fmoc-Val-OH、120mmol的HOBT，置于500ml的圆底烧瓶中，用200ml的DMF溶解，冷却至0℃备用。
溶液3：称取120mmol的DCC，置于小烧杯中，用100ml的DMF溶解，冷却至0-5℃备用
在0-5℃下，将DCC溶液（溶液3）慢慢滴加到搅拌的溶液2中，反应15分钟，将溶液1慢慢滴加到反应液中，在0-5℃下反应15分钟，25℃下反应2小时，点板确定反应结束（具体反应时间以点板时间为准）。过滤除去白色沉淀，用30mlDMF洗涤沉淀并过滤，合并滤液，加入大量纯水，出现大量白色固体，过滤得到白色固体。白色固体用1L乙酸乙酯溶解，装入分液漏斗中，分别用稀柠檬酸150ml洗涤3次，用饱和碳酸氢钠150ml洗涤3次，用饱和食盐水200ml洗涤2次，干燥2小时，旋蒸除去溶剂获得产品。纯度为98.3%。
3.5、Fmoc-Leu-Val-Arg(pbf)-Gly-Arg(pbf)-Gly-otbu
溶液1：称取100mmol的Fmoc-Val-Arg(pbf)-Gly-Arg(pbf)-Gly-otbu置于500ml的圆底烧瓶中，磁力搅拌下加入哌啶：二氯甲烷=1：4的溶液溶解，室温下脱保护30分钟，加入大量石油醚，析出大量沉淀，抽滤，用石油醚洗涤数次，获得白色固体产品（NH2- Val-Arg(pbf)-Gly-Arg(pbf)-Gly-otbu），纯度为97.9%。固体用100ml的DMF溶解，冷却至0-5℃备用
溶液2：称取100mmol的Fmoc-Leu-OH、120mmol的HOBT，置于500ml的圆底烧瓶中，用200ml的DMF溶解，冷却至0℃备用。
溶液3：称取120mmol的DCC，置于小烧杯中，用100ml的DMF溶解，冷却至0-5℃备用
在0-5℃下，将DCC溶液（溶液3）慢慢滴加到搅拌的溶液2中，反应15分钟，将溶液1慢慢滴加到反应液中，在0-5℃下反应15分钟，25℃下反应2小时，点板确定反应结束（具体反应时间以点板时间为准）。过滤除去白色沉淀，用30mlDMF洗涤沉淀并过滤，合并滤液，加入大量纯水，出现大量白色固体，过滤得到白色固体。白色固体用1L乙酸乙酯溶解，装入分液漏斗中，分别用稀柠檬酸150ml洗涤3次，用饱和碳酸氢钠150ml洗涤3次，用饱和食盐水200ml洗涤2次，干燥2小时，旋蒸除去溶剂获得产品。纯度为98.2%。
3.6、Fmoc-Trp(Boc)-Leu-Val-Arg(pbf)-Gly-Arg(pbf)-Gly-otbu的合成
溶液1：称取100mmol的Fmoc-Leu-Val-Arg(pbf)-Gly-Arg(pbf)-Gly-otbu置于500ml的圆底烧瓶中，磁力搅拌下加入哌啶：二氯甲烷=1：4的溶液溶解，室温下脱保护30分钟，加入大量石油醚，析出大量沉淀，抽滤，用石油醚洗涤数次，获得白色固体产品（NH2-Leu-Val-Arg(pbf)-Gly-Arg(pbf)-Gly-otbu），纯度为98.3%。固体用100ml的DMF溶解，冷却至0-5℃备用
溶液2：称取100mmol的Fmoc-Trp(Boc)-OH、120mmol的HOBT，置于500ml的圆底烧瓶中，用200ml的DMF溶解，冷却至0℃备用。
溶液3：称取120mmol的DCC，置于小烧杯中，用100ml的DMF溶解，冷却至0-5℃备用
在0-5℃下，将DCC溶液（溶液3）慢慢滴加到搅拌的溶液2中，反应15分钟，将溶液1慢慢滴加到反应液中，在0-5℃下反应15分钟，25℃下反应2小时，点板确定反应结束（具体反应时间以点板时间为准）。过滤除去白色沉淀，用30mlDMF洗涤沉淀并过滤，合并滤液，加入大量纯水，出现大量白色固体，过滤得到白色固体。白色固体用1L乙酸乙酯溶解，装入分液漏斗中，分别用稀柠檬酸150ml洗涤3次，用饱和碳酸氢钠150ml洗涤3次，用饱和食盐水200ml洗涤2次，干燥2小时，旋蒸除去溶剂获得产品。纯度为97.4%。
3.7、Fmoc-Ala-Trp(boc)-Leu-Val-Arg(pbf)-Gly-Arg(pbf)-Gly-otbu的合成
溶液1：称取100mmol的Fmoc-Trp(Boc)-Leu-Val-Arg(pbf)-Gly-Arg(pbf)-Gly-otbu置于500ml的圆底烧瓶中，磁力搅拌下加入哌啶：二氯甲烷=1：4的溶液溶解，室温下脱保护30分钟，加入大量石油醚，析出大量沉淀，抽滤，用石油醚洗涤数次，获得白色固体产品（NH2-Trp(Boc)-Leu-Val-Arg(pbf)-Gly-Arg(pbf)-Gly-otbu），纯度为98.7%。固体用100ml的DMF溶解，冷却至0-5℃备用
溶液2：称取100mmol的Fmoc-Val-OH、120mmol的HOBT，置于500ml的圆底烧瓶中，用200ml的DMF溶解，冷却至0℃备用。
溶液3：称取120mmol的DCC，置于小烧杯中，用100ml的DMF溶解，冷却至0-5℃备用
在0-5℃下，将DCC溶液（溶液3）慢慢滴加到搅拌的溶液2中，反应15分钟，将溶液1慢慢滴加到反应液中，在0-5℃下反应15分钟，25℃下反应2小时，点板确定反应结束（具体反应时间以点板时间为准）。过滤除去白色沉淀，用30mlDMF洗涤沉淀并过滤，合并滤液，加入大量纯水，出现大量白色固体，过滤得到白色固体。白色固体用1L乙酸乙酯溶解，装入分液漏斗中，分别用稀柠檬酸150ml洗涤3次，用饱和碳酸氢钠150ml洗涤3次，用饱和食盐水200ml洗涤2次，干燥2小时，旋蒸除去溶剂获得产品。纯度为97.5%。
3.8、Fmoc-Ile-Ala-Trp(boc)-Leu-Val-Arg(pbf)-Gly-Arg(pbf)-Gly-otbu的合成
溶液1：称取100mmol的Fmoc-Ala-Trp(boc)-Leu-Val-Arg(pbf)-Gly-Arg(pbf)-Gly-otbu置于500ml的圆底烧瓶中，磁力搅拌下加入哌啶：二氯甲烷=1：4的溶液溶解，室温下脱保护30分钟，加入大量石油醚，析出大量沉淀，抽滤，用石油醚洗涤数次，获得白色固体产品（NH2-Ala-Trp(boc)-Leu-Val-Arg(pbf)-Gly-Arg(pbf)-Gly-otbu），纯度为99.1%。固体用100ml的DMF溶解，冷却至0-5℃备用
溶液2：称取100mmol的Fmoc-Ile-OH、120mmol的HOBT，置于500ml的圆底烧瓶中，用200ml的DMF溶解，冷却至0℃备用。
溶液3：称取120mmol的DCC，置于小烧杯中，用100ml的DMF溶解，冷却至0-5℃备用
在0-5℃下，将DCC溶液（溶液3）慢慢滴加到搅拌的溶液2中，反应15分钟，将溶液1慢慢滴加到反应液中，在0-5℃下反应15分钟，25℃下反应2小时，点板确定反应结束（具体反应时间以点板时间为准）。过滤除去白色沉淀，用30mlDMF洗涤沉淀并过滤，合并滤液，加入大量纯水，出现大量白色固体，过滤得到白色固体。白色固体用1L乙酸乙酯溶解，装入分液漏斗中，分别用稀柠檬酸150ml洗涤3次，用饱和碳酸氢钠150ml洗涤3次，用饱和食盐水200ml洗涤2次，干燥2小时，旋蒸除去溶剂获得产品。纯度为97%。
四、片段Fmoc-Gln-Ala-Ala-N6-[N-(17-carboxy(otbu)-1-oxoheptadecyl-L-γ-glutamyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy]acetyl]-Lys-Glu(otbu)-Phe-Ile-Ala-Trp(boc)-Leu-Val-Arg(pbf)-Gly-Arg(pbf)-Gly-otbu的合成
称取100mmol的Fmoc-Ile-Ala-Trp(boc)-Leu-Val-Arg(pbf)-Gly-Arg(pbf)-Gly-otbu置于500ml的圆底烧瓶中，磁力搅拌下加入哌啶：DMF=1：4的溶液溶解，室温下脱保护30分钟，加入大量石油醚，析出大量沉淀，抽滤，用石油醚洗涤数次，获得白色固体产品，纯度为94.5%。
称取Fmoc-Gln-Ala-Ala-N6-[N-(17-carboxy(otbu)-1-oxoheptadecyl-L-γ-glutamyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy]acetyl]-Lys-Glu(otbu)-Phe-OH片段120mmol，NH2-Ile-Ala-Trp(boc)-Leu-Val-Arg(pbf)-Gly-Arg(pbf)-Gly-otbu片段100mmol，和130mmol的HOBT溶于2500mlDMF中，0℃下加入130mmol的DCC的DMF溶液。0℃下搅拌10小时，再25℃搅拌6小时。之后在0℃慢慢加入5000ml冰的稀盐酸溶液，搅拌下，出现大量白色沉淀，过滤得到固体。固体用4000ml乙酸乙酯溶解，分液漏斗进行洗涤。分别为稀碳酸氢钠500mlX5，洗涤至微碱性，稀盐酸300mlX4，最后用饱和食盐水洗涤500mlX3，溶液转移至三角瓶，加入无水硫酸钠或者无水硫酸镁进行干燥。干燥约10小时。旋蒸除去溶剂（回收利用），得到白色固体。纯度为94.5%。
五、Boc-His(trt)-Ala-Glu(otbu)-Gly-Thr(tbu)-Phe-Thr(tbu)-Ser(tbu)-Asp(otbu)- Val-Ser(tbu)-Ser(tbu)-Tyr(tbu)-Leu-Glu(otbu)-Gly-Gln-Ala-Ala-N6-[N-(17-carboxy(otbu)-1-oxoheptadecyl-L-γ-glutamyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy]acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy]acetyl]-Lys-Glu(otbu)-Phe-Ile-Ala-Trp(boc)-Leu-Val-Arg(pbf)-Gly-Arg(pbf)-Gly-otbu的合成
称取100mmol的Fmoc-Gln-Ala-Ala-N6-[N-(17-carboxy(otbu)-1-oxoheptadecyl-L-γ-glutamyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy]acetyl]-Lys-Glu(otbu)-Phe-Ile-Ala-Trp(boc)-Leu-Val-Arg(pbf)-Gly-Arg(pbf)-Gly-otbu置于10000ml的圆底烧瓶中，磁力搅拌下加入哌啶：DMF=1：4的溶液溶解，室温下脱保护30分钟，加入大量石油醚，析出大量沉淀，抽滤，用石油醚洗涤数次，获得白色固体产品，纯度为95.5%。
称取Boc-His(trt)-Ala-Glu(otbu)-Gly-Thr(tbu)-Phe-Thr(tbu)-Ser(tbu)-Asp(otbu)- Val-Ser(tbu)-Ser(tbu)-Tyr(tbu)-Leu-Glu(otbu)-Gly-OH片段120mmol，NH2-Gln-Ala-Ala-N6-[N-(1-oxohexadecyl)-Glu(otbu)]-Lys-Glu(Otbu)-Phe-Ile-Ala-Trp(boc)-Leu-Val-Arg(pbf)-Gly-Arg(pbf)-Gly-otbu片段100mmol，和三乙胺130mmol溶于2700mlDMF中，0℃下加入二苯基磷酰叠氮物120mmol。0℃下搅拌6小时，再25℃搅拌20小时。之后在0℃慢慢加入3000ml稀盐酸溶液，搅拌下，出现大量白色沉淀，过滤得到固体。固体用8000ml二氯甲烷溶解，分液漏斗进行洗涤。分别为稀碳酸氢钠800mlX5，稀盐酸800mlX5，最后用饱和食盐水洗涤1000mlX4，溶液转移至三角瓶，加入无水硫酸钠或者无水硫酸镁进行干燥。干燥约10小时。旋蒸除去溶剂（回收利用），得到白色固体。纯度为85%。
六、索玛鲁肽粗肽的合成
称取100mmol的Boc-His(trt)-Ala-Glu(otbu)-Gly-Thr(tbu)-Phe-Thr(tbu)-Ser(tbu)-Asp(otbu)- Val-Ser(tbu)-Ser(tbu)-Tyr(tbu)-Leu-Glu(otbu)-Gly-Gln-Ala-Ala-N6-[N-(17-carboxy(otbu)-1-oxoheptadecyl-L-γ-glutamyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy]acetyl]-Lys-Glu(otbu)-Phe-Ile-Ala-Trp(boc)-Leu-Val-Arg(pbf)-Gly-Arg(pbf)-Gly-otbu置于50L的反应釜中，在室温下加入脱保护试剂（TFA：苯甲硫醚：水：EDT=92:3:3:2）30L，室温下裂解2h，将裂解液倒入预先冷却好的（0℃）无水乙醚中，搅拌沉降3小时，离心，用无水乙醚洗涤5次，真空干燥，得到白色固体。纯度为87.57%，收率为84.2%。
七、索玛鲁肽产品的纯化制备
称取100mmol的索玛鲁肽粗肽用乙腈和水的混合液溶解，采用C8或者C18制备柱进行3次纯化并经过转盐和冷冻干燥获得纯度达到99.40%的产品，分子量检测结果为2056.8146（荷质比为2:1）。
具体流动相、设备、体系如下：
一纯设备：LC6000 3# U3000 2# UV220nm
体系：流动相A为0.1% 醋酸 流动相B为乙腈
流速：70ml/分钟
梯度：B流动相 7%维持5分钟， B流动相7%-40%用时2分钟，B流动相40%-65%用时60分钟
二纯设备：LC6000 3# U3000 2# UV220nm
体系：0.085%（v/v）磷酸 流动相B为乙腈
流速：30ml/分钟
梯度：B流动相 5%维持5分钟， B流动相5%-45%用时1分钟，B流动相45%-55%用时45分钟
三纯设备：LC6000 3# U3000 2# UV220nm
体系：流动相A为0.1% TFA 流动相B为乙腈
流速：40ml/分钟
梯度：B流动相 8%维持7分钟， B流动相8%-45%用时2分钟，B流动相45%-65%用时80分钟
本发明具有总体时间成本、物料成本、设备折旧、工业化生产风险等大大降低的优势，并且索玛鲁肽的总收率为32%摩尔收率，收率高于报道或者当前生产企业水平，适用于工业化生产。

Claims (10)

1.一种索玛鲁肽的合成方法，其特征在于：包括如下步骤：
A、片段缩合成各类索玛鲁肽中间体，氨基酸保护基在下面赋予种类：
（1）R-His(R1)-Ala-Glu(R2)-Gly-Thr(R4)-Phe-Thr(R4)-Ser(R4)-Asp(R5)- Val-Ser(R4)-Ser(R4)-Tyr(R4)-Leu-Glu(R2)-Gly-R3的合成；
（2）Fmoc-Lys[[N6-[N-(17-carboxy(R3)-1-oxoheptadecyl-L-γ-glutamyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy]acetyl] ]-OH的合成；
（3）R-Gln-Ala-Ala-N6-[N-(17-carboxy(R3)-1-oxoheptadecyl-L-γ-glutamyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy]acetyl]-Lys-Glu(R2)-Phe-R3的合成；
（4）R-Ile-Ala-Trp(R6)-Leu-Val-Arg(R7)-Gly-Arg(R7)-Gly-R3的合成；
（5）R-Gln-Ala-Ala- N6-[N-(17-carboxy(R3)-1-oxoheptadecyl-L-γ-glutamyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy]acetyl]-Lys-Glu(R2)-Phe-Ile-Ala-Trp(R6)-Leu-Val-Arg(R7)-Gly-Arg(R7)-Gly-R3的合成；
（6）R-His(R1)-Ala-Glu(R2)-Gly-Thr(R4)-Phe-Thr(R4)-Ser(R4)-Asp(R5)-Val-Ser(R4)-Ser(R4)-
Tyr(R4)-Leu-Glu(R2)-Gly-Gln-Ala-Ala-N6-[N-(17-carboxy(R3)-1-oxoheptadecyl-L-γ-glutamyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy]acetyl]-Lys-Glu(R2)-Phe-Ile-Ala-Trp(R6)-Leu-Val-Arg(R7)-Gly-Arg(R7)-Gly-R3的合成；
以上所述的各种保护氨基酸片段缩合后，形成的索玛鲁肽各种中间体片段，并将各片段按肽序缩合后，形成索玛鲁肽的全保护肽；
R为Z、Boc、Cl-Z、Fmoc、oNBS、dNBS、Troc、Dts、pNZ、oNZ、NVOC、NPPOC、HFA、 Ddz、Bpoc、Nps、Nsc、Bsmoc、α-Nsmoc、ivDde、Fmoc* 、MTT、Alloc 其中任意一个
R1为TOS、TRT、Mtt、Mmt、Boc、Bom、Bum、Fmoc、Dmbz、Dnp其中任意一个
R2为H、Otbu、Bn、cHX、Mpe、2-ph1pr、TEGbn、Damb、Al、pNB、pTMSE、Dmnb其中任意一个
R3为H、Otbu、Bn、cHX、Mpe、2-ph1pr、TEGbn、Damb、Al、pNB、pTMSE、Dmnb其中任意一个
R4为Bn、cHx、tBu、Trt、TBDMS、Dmnb、Poc、其中任意一个
R5为H、Otbu、Bn、cHX、Mpe、2-ph1pr、TEGbn、Damb、Al、pNB、pTMSE、Dmnb其中任意一个
R6为Z、Boc、Cl-Z、Fmoc、For、Hoc、Mts、Alloc其中任意一个
R7为TOS、Pbf、Pmc、Mts、Mtr、Mis其中任意一个
B、全保护索玛鲁肽的去保护，即裂解制得索玛鲁肽粗品：
His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-N6-[N-(17-carboxy-1-oxoheptadecyl-L-γ-glutamyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy]acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy]acetyl]-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Arg-Gly-Arg-Gly-OH。
2.根据权利要求1所述的索玛鲁肽的合成方法，其特征如下：步骤A中6个多肽片段的合成过程中用到的偶联体系选自：
单一缩合剂：DIC、DCC、EDC、氯乙酰氯、叠氮化物、TBTU、PyBOP、HBTU、HATU；
二体系缩合剂：DIC/HOBT、DCC/HOBT、EDC/HOBT。
3.根据权利要求1所述的索玛鲁肽的合成方法，其特征如下：采用纯化和冻干方法对索玛鲁肽粗品进行处理，得到索玛鲁肽产品。
4.根据权利要求1或2或3所述的索玛鲁肽的合成方法，其特征如下：步骤A中R-Gln-Ala-Ala-N6-[N-(17-carboxy(R3)-1-oxoheptadecyl-L-γ-glutamyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy]acetyl]-Lys-Glu(R2)-Phe-R3的合成方法如下：
采用固液相相结合的方式合成，包含多种片段合成方法，具体片段如下：
采用纯液相法合成Fmoc-Lys[[N6-[N-(17-carboxy(R3)-1-oxoheptadecyl-L-γ-glutamyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy]acetyl] ]-OH；
采用固相法R-Gln-Ala-Ala-N6-[N-(17-carboxy(R3)-1-oxoheptadecyl-L-γ-glutamyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy]acetyl]-Lys-Glu(R2)-Phe-R3。
5.根据权利要求4所述的索玛鲁肽的合成方法，其特征如下：Fmoc-Lys[[N6-[N-(17-carboxy(R3)-1-oxoheptadecyl-L-γ-glutamyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy]acetyl] ]-OH的合成方法如下：
17-carboxy(R3) -1-oxoheptadecyl-L-α（R3）-glu-OH
采用NH2-Glu-R3与γ羧基R3保护的1,18-十八烷二羧酸的活泼酯进行反应得到目的产品；活泼酯法合成中用到的单一缩合剂或缩合剂复方：DIC、DCC、EDC、TBTU、PyBOP、HBTU、DIC/HOBT、DCC/HOBT、EDC/HOBT、HOSu；或者采用NH2-Glu-R3与γ羧基R3保护的1,18-十八烷二羧酸的酸酐进行反应得到产品；酸酐法采用氯乙酰氯、氯甲酸乙酯、氯甲酸叔丁酯、氯甲酸异丁酯；或者采用硫苄酯先与γ羧基R3保护的1,18-十八烷二羧酸成硫酯，之后与NH2-Glu-R3进行酯交换反应，得到产品；或者采用γ羧基R3保护的1,18-十八烷二羧酸形成叠氮化物，之后与NH2-Glu-R3形成产品；
、[2-[2-(Fmoc-amino)ethoxy]ethoxy]acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy] aceticacid的合成
采用[2-[2-(Fmoc-amino)ethoxy]ethoxy] acetic acid的活泼酯与羧基R3保护的[2-(2-aminoethoxy) ethoxy] acetic acid进行缩合并酸解后得到目的产品；活泼酯法合成中用到的单一缩合剂或者缩合剂复方：DIC、DCC、EDC、TBTU、PyBOP、HBTU、DIC/HOBT、DCC/HOBT、EDC/HOBT、HOSu；或者采用羧基R3保护的[2-(2-aminoethoxy) ethoxy] acetic acid与[2-[2-(Fmoc-amino)ethoxy]ethoxy] acetic acid的酸酐进行反应并酸解后得到产品；酸酐法采用氯乙酰氯、氯甲酸乙酯、氯甲酸叔丁酯、氯甲酸异丁酯；或者采用硫苄酯先与[2-[2-(Fmoc-amino)ethoxy]ethoxy] acetic acid成硫酯，之后与羧基R3保护的[2-(2-aminoethoxy) ethoxy] acetic acid进行酯交换反应，酸解后得到产品；或者采用[2-[2-(Fmoc-amino)ethoxy]ethoxy] acetic acid形成叠氮化物，之后与羧基R3保护的[2-(2-aminoethoxy) ethoxy] acetic acid形成产品再酸解后得到产品；
N-(17-carboxy(R3)-1-oxoheptadecyl-L-γ-Glu (R3)-[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy] acetic acid的合成
采用17-carboxy(R3) -1-oxoheptadecyl-L-α（R3）-glu-OH的活泼酯与羧基R3保护的2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy] acetic acid进行缩合并酸解后得到目的产品；活泼酯法合成中用到的单一缩合剂或者缩合剂复方：DIC、DCC、EDC、TBTU、PyBOP、HBTU、DIC/HOBT、DCC/HOBT、EDC/HOBT、HOSu；或者采用羧基R3保护的2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy] acetic acid与17-carboxy(R3) -1-oxoheptadecyl-L-α（R3）-glu-OH的酸酐进行反应并酸解后得到产品；酸酐法采用氯乙酰氯、氯甲酸乙酯、氯甲酸叔丁酯、氯甲酸异丁酯；或者采用硫苄酯先与17-carboxy(R3) -1-oxoheptadecyl-L-α（R3）-glu-OH成硫酯，之后与羧基R3保护的2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy] acetic acid进行酯交换反应，酸解后得到产品；或者采用17-carboxy(R3) -1-oxoheptadecyl-L-α（R3）-glu-OH形成叠氮化物，之后与羧基R3保护的2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetic acid形成产品再酸解后得到产品；
Fmoc-Lys[[N6-[N-(17-carboxy(R3)-1-oxoheptadecyl-L-γ-glutamyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy]acetyl] ]-OH的合成
采用N-(17-carboxy(R3)-1-oxoheptadecyl-L-γ-Glu (R3)-[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy] acetic acid的活泼酯与羧基R3保护的Fmoc-Lys-OH进行缩合并酸解后得到目的产品；活泼酯法合成中用到的单一缩合剂或者缩合剂复方：DIC、DCC、EDC、TBTU、PyBOP、HBTU、DIC/HOBT、DCC/HOBT、EDC/HOBT、HOSu；或者采用羧基R3保护的Fmoc-Lys-OH与N-(17-carboxy(R3)-1-oxoheptadecyl-L-γ-Glu (R3)-[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy] acetic acid的酸酐进行反应并酸解后得到产品；酸酐法采用氯乙酰氯、氯甲酸乙酯、氯甲酸叔丁酯、氯甲酸异丁酯等等;
或者采用硫苄酯先与N-(17-carboxy(R3)-1-oxoheptadecyl-L-γ-Glu (R3)-[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy] acetic acid成硫酯，之后与羧基R3保护的Fmoc-Lys-OH进行酯交换反应，酸解后得到产品；或者采用N-(17-carboxy(R3)-1-oxoheptadecyl-L-γ-Glu (R3)-[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy] acetic acid形成叠氮化物，之后与羧基R3保护的Fmoc-Lys-OH形成产品再酸解后得到产品。
6.根据权利要求1所述的根据权利要求1所述的索玛鲁肽的合成方法，其特征如下：步骤A中各片段缩合法采用活化酯法、混合酸酐法、叠氮化合物法或者硫苄酯交换法。
7.根据权利要求1所述的根据权利要求1所述的索玛鲁肽的合成方法，其特征如下：步骤A中R-His(R1)-Ala-Glu(R2)-Gly-Thr(R4)-Phe-Thr(R4)-Ser(R4)-Asp(R5)- Val-Ser(R4)-Ser(R4)-Tyr(R4)-Leu-Glu(R2)-Gly-R3的合成方法如下：
采用固相合成法或者液相合成法或者固液结合法合成；
所述的固相合成法采用CTC树脂为起始载体，通过如权利要求2中记载的各类缩合体系，逐一偶联合成，具体偶联顺序为R-Gly-OH，R- Glu(R2)-OH，R-Leu-OH，R-Tyr(R4)-OH，R-Ser(R4)-OH，R- Ser(R4)-OH，R-Val-OH，R- Asp(R5)-OH，R-Ser(R4)-OH，R-Thr(R4)-OH，R-Phe-OH，R-Thr(R4)-OH，R-Gly-OH，R-Glu(R2)-OH，R-Ala-OH，R-His(R1)-OH；偶联完毕后，采用裂解液裂解CTC树脂，裂解液为TFE或者TFA为主体的含有捕获剂的混合物；最终得到R-His(R1)-Ala-Glu(R2)-Gly-Thr(R4)-Phe-Thr(R4)-Ser(R4)-Asp(R5)- Val-Ser(R4)-Ser(R4)-Tyr(R4)-Leu-Glu(R2)-Gly-OH
所述的液相合成法以NH2-Gly-R3为起始物料，通过如权利要求2中的各类缩合体系，或者酸酐法采用氯乙酰氯、氯甲酸乙酯、氯甲酸叔丁酯、氯甲酸异丁酯，或者叠氮化作为偶联试剂，逐一偶联合成或者片段法偶联合成，逐一法偶联顺序为R-Gly-OH，R- Glu(R2)-OH，R-Leu-OH，R-Tyr(R4)-OH，R- Ser(R4)-OH，R- Ser(R4)-OH，R-Val-OH，R- Asp(R5)-OH，R-Ser(R4)-OH，R-Thr(R4)-OH，R-Phe-OH，R-Thr(R4)-OH，R-Gly-OH，R-Glu(R2)-OH，R-Ala-OH，R-His(R1)-OH；片段法采用各类片段法，选自1+15、2+14、3+13、4+12、5+11、6+10、7+9、8+8、9+7、10+6、11+5、12+4、13+3、14+2、15+1。
8.根据权利要求1所述的根据权利要求1所述的索玛鲁肽的合成方法，其特征如下：步骤A中R-Ile-Ala-Trp(R6)-Leu-Val-Arg(R7)-Gly-Arg(R7)-Gly-R3的合成方法如下：
采用固相合成法、液相合成法或者固液结合法合成；
其中固相合成法采用CTC树脂为起始载体，通过如权利要求2中的各类缩合体系，逐一偶联合成，具体偶联顺序为R-Gly-OH，R-Arg(R7)-OH，R-Gly-OH，R-Arg(R7)-OH，R-Val-OH，R-Leu-OH，R-Trp(R6)-OH， R-Ala-OH，R-Ile-OH；偶联完毕后，采用裂解液裂解CTC树脂，裂解液为TFE或者TFA为主体的含有捕获剂的混合物；或者偶联完毕后，不进行处理，直接得到需要的肽树脂，以备后用；最终得到R-Ile-Ala-Trp(R6)-Leu-Val-Arg(R7)-Gly-Arg(R7)-Gly-OH或者R-Ile-Ala-Trp(R6)-Leu-Val-Arg(R7)-Gly-Arg(R7)-Gly-CTC树脂；
所述的采用液相合成法以NH2-Gly-R3为起始物料，通过如权利要求2中的各类缩合体系，或者酸酐法采用氯乙酰氯、氯甲酸乙酯、氯甲酸叔丁酯、氯甲酸异丁酯，或者叠氮化作为偶联试剂，逐一偶联合成或者片段法偶联合成，逐一法偶联顺序为R-Gly-OH，R-Arg(R7)-OH，R-Gly-OH，R-Arg(R7)-OH，R-Val-OH，R-Leu-OH，R-Trp(R6)-OH， R-Ala-OH，R-Ile-OH；片段法选自1+8、2+7、3+6、4+5、5+4、6+3、7+2或者8+1。
9.根据权利要求1所述的根据权利要求1所述的索玛鲁肽的合成方法，其特征如下：步骤A中R-Gln-Ala-Ala- N6-[N-(17-carboxy(R3)-1-oxoheptadecyl-L-γ-glutamyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy]acetyl]-Lys-Glu(R2)-Phe-Ile-Ala-Trp(R6)-Leu-Val-Arg(R7)-Gly-Arg(R7)-Gly-R3的合成方法如下；
采用固相合成法以R-Gln-Ala-Ala- N6-[N-(17-carboxy(R3)-1-oxoheptadecyl-L-γ-glutamyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy]acetyl]-Lys-Glu(R2)-Phe-OH为起始物料，通过权利要求2中的各类缩合体系，与NH2-Ile-Ala-Trp(R6)-Leu-Val-Arg(R7)-Gly-Arg(R7)-Gly-CTC树脂缩合反应；反应完毕后，得到目标化合物；
或者采用液相合成法，以R-Gln-Ala-Ala- N6-[N-(17-carboxy(R3)-1-oxoheptadecyl-L-γ-glutamyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy]acetyl]-Lys-Glu(R2)-Phe-OH为起始物料，通过权利要求2中的各类缩合体系，或者酸酐法采用氯乙酰氯、氯甲酸乙酯、氯甲酸叔丁酯、氯甲酸异丁酯，或者叠氮化作为偶联试剂，与NH2-Ile-Ala-Trp(R6)-Leu-Val-Arg(R7)-Gly-Arg(R7)-Gly-R3偶联合成，得到目标化合物。
10.根据权利要求1所述的根据权利要求1所述的索玛鲁肽的合成方法，其特征如下：步骤A中R-His(R1)-Ala-Glu(R2)-Gly-Thr(R4)-Phe-Thr(R4)-Ser(R4)-Asp(R5)-Val-Ser(R4)-Ser(R4)-
Tyr(R4)-Leu-Glu(R2)-Gly-Gln-Ala-Ala-N6-[N-(17-carboxy(R3)-1-oxoheptadecyl-L-γ-glutamyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy]acetyl]-Lys-Glu(R2)-Phe-Ile-Ala-Trp(R6)-Leu-Val-Arg(R7)-Gly-Arg(R7)-Gly-R3
的合成方法如下：
采用固相合成法，以R-His(R1)-Ala-Glu(R2)-Gly-Thr(R4)-Phe-Thr(R4)-Ser(R4)-Asp(R5)-Val-Ser(R4)-Ser(R4)-
Tyr(R4)-Leu-Glu(R2)-Gly-OH为起始物料，通过权利要求2中的各类缩合体系，与NH2-Gln-Ala-Ala- N6-[N-(17-carboxy(R3)-1-oxoheptadecyl-L-γ-glutamyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy]acetyl]-Lys-Glu(R2)-Phe-Ile-Ala-Trp(R6)-Leu-Val-Arg(R7)-Gly-Arg(R7)-Gly-CTC树脂缩合反应；反应完毕后，得到目标化合物;
或者采用液相合成法，以R-His(R1)-Ala-Glu(R2)-Gly-Thr(R4)-Phe-Thr(R4)-Ser(R4)-Asp(R5)-Val-Ser(R4)-Ser(R4)-
Tyr(R4)-Leu-Glu(R2)-Gly-OH为起始物料，通过权利要求2中的各类缩合体系，或者酸酐法采用氯乙酰氯、氯甲酸乙酯、氯甲酸叔丁酯、氯甲酸异丁酯，或者叠氮化作为偶联试剂，与NH2-Gln-Ala-Ala- N6-[N-(17-carboxy(R3)-1-oxoheptadecyl-L-γ-glutamyl[2-(2-aminoethoxy)ethoxy] acetyl[2-(2-aminoethoxy) ethoxy]acetyl]-Lys-Glu(R2)-Phe-Ile-Ala-Trp(R6)-Leu-Val-Arg(R7)-Gly-Arg(R7)-Gly-R3偶联合成，得到目标化合物。
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Cited By (18)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107722107A (zh) * 2017-11-28 2018-02-23 陕西慧康生物科技有限责任公司 一种乙酰基四肽‑2的制备方法
CN107892717A (zh) * 2017-12-29 2018-04-10 江苏诺泰澳赛诺生物制药股份有限公司 一种纯化索玛鲁肽的方法
CN108034004A (zh) * 2017-12-29 2018-05-15 江苏诺泰澳赛诺生物制药股份有限公司 一种索玛鲁肽的合成方法
CN108059666A (zh) * 2018-02-10 2018-05-22 润辉生物技术（威海）有限公司 一种固液结合制备索玛鲁肽的方法
CN108359006A (zh) * 2018-05-25 2018-08-03 扬子江药业集团四川海蓉药业有限公司 一种索玛鲁肽的制备方法
CN108640985A (zh) * 2018-06-25 2018-10-12 杭州诺泰澳赛诺医药技术开发有限公司 一种纯化索玛鲁肽的方法
CN109456401A (zh) * 2018-12-03 2019-03-12 成都诺和晟泰生物科技有限公司 一种索马鲁肽的合成方法
CN109627317A (zh) * 2019-02-01 2019-04-16 兰州大学 片段缩合制备索马鲁肽的方法
CN110294800A (zh) * 2018-03-22 2019-10-01 齐鲁制药有限公司 一种索玛鲁肽的制备方法
CN110317258A (zh) * 2018-03-29 2019-10-11 齐鲁制药有限公司 一种索玛鲁肽的新多肽片段及其制备方法
CN111153983A (zh) * 2020-03-11 2020-05-15 江南大学 一种索玛鲁肽的半合成制备法
CN112010961A (zh) * 2019-05-31 2020-12-01 深圳市健元医药科技有限公司 一种索玛鲁肽的固液合成方法
CN112175068A (zh) * 2020-09-28 2021-01-05 深圳深创生物药业有限公司 一种司美格鲁肽的纯化方法
EP3819308A1 (en) 2019-11-07 2021-05-12 Fresenius Kabi iPSUM S.r.l. Process for the manufacture of derivatized amino acids
WO2021143073A1 (zh) * 2020-01-19 2021-07-22 深圳市健元医药科技有限公司 一种索玛鲁肽的制备方法
US11744873B2 (en) 2021-01-20 2023-09-05 Viking Therapeutics, Inc. Compositions and methods for the treatment of metabolic and liver disorders
CN116693653A (zh) * 2023-08-09 2023-09-05 杭州湃肽生化科技有限公司 一种规模化生产索玛鲁肽的制备方法
CN117586375A (zh) * 2024-01-19 2024-02-23 苏州金顶生物有限公司 一种制备司美格鲁肽的方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102875665A (zh) * 2012-09-28 2013-01-16 深圳翰宇药业股份有限公司 一种合成利拉鲁肽的方法
CN103864918A (zh) * 2014-03-31 2014-06-18 哈尔滨吉象隆生物技术有限公司 一种利拉鲁肽的固相合成方法
CN105732798A (zh) * 2015-11-03 2016-07-06 江苏诺泰生物制药股份有限公司 一种利拉鲁肽的合成方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102875665A (zh) * 2012-09-28 2013-01-16 深圳翰宇药业股份有限公司 一种合成利拉鲁肽的方法
CN103864918A (zh) * 2014-03-31 2014-06-18 哈尔滨吉象隆生物技术有限公司 一种利拉鲁肽的固相合成方法
CN105732798A (zh) * 2015-11-03 2016-07-06 江苏诺泰生物制药股份有限公司 一种利拉鲁肽的合成方法

Cited By (27)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107722107A (zh) * 2017-11-28 2018-02-23 陕西慧康生物科技有限责任公司 一种乙酰基四肽‑2的制备方法
CN107892717A (zh) * 2017-12-29 2018-04-10 江苏诺泰澳赛诺生物制药股份有限公司 一种纯化索玛鲁肽的方法
CN108034004A (zh) * 2017-12-29 2018-05-15 江苏诺泰澳赛诺生物制药股份有限公司 一种索玛鲁肽的合成方法
CN108059666A (zh) * 2018-02-10 2018-05-22 润辉生物技术（威海）有限公司 一种固液结合制备索玛鲁肽的方法
CN108059666B (zh) * 2018-02-10 2018-09-25 润辉生物技术（威海）有限公司 一种固液结合制备索玛鲁肽的方法
CN110294800B (zh) * 2018-03-22 2022-03-04 齐鲁制药有限公司 一种索玛鲁肽的制备方法
CN110294800A (zh) * 2018-03-22 2019-10-01 齐鲁制药有限公司 一种索玛鲁肽的制备方法
CN110317258B (zh) * 2018-03-29 2023-03-17 齐鲁制药有限公司 一种索玛鲁肽的新多肽片段及其制备方法
CN110317258A (zh) * 2018-03-29 2019-10-11 齐鲁制药有限公司 一种索玛鲁肽的新多肽片段及其制备方法
CN108359006B (zh) * 2018-05-25 2021-11-26 扬子江药业集团四川海蓉药业有限公司 一种索玛鲁肽的制备方法
CN108359006A (zh) * 2018-05-25 2018-08-03 扬子江药业集团四川海蓉药业有限公司 一种索玛鲁肽的制备方法
CN108640985A (zh) * 2018-06-25 2018-10-12 杭州诺泰澳赛诺医药技术开发有限公司 一种纯化索玛鲁肽的方法
CN109456401A (zh) * 2018-12-03 2019-03-12 成都诺和晟泰生物科技有限公司 一种索马鲁肽的合成方法
CN109627317A (zh) * 2019-02-01 2019-04-16 兰州大学 片段缩合制备索马鲁肽的方法
CN109627317B (zh) * 2019-02-01 2020-11-27 兰州大学 片段缩合制备索马鲁肽的方法
CN112010961A (zh) * 2019-05-31 2020-12-01 深圳市健元医药科技有限公司 一种索玛鲁肽的固液合成方法
CN112010961B (zh) * 2019-05-31 2023-05-16 深圳市健元医药科技有限公司 一种索玛鲁肽的固液合成方法
EP3819308A1 (en) 2019-11-07 2021-05-12 Fresenius Kabi iPSUM S.r.l. Process for the manufacture of derivatized amino acids
WO2021143073A1 (zh) * 2020-01-19 2021-07-22 深圳市健元医药科技有限公司 一种索玛鲁肽的制备方法
CN111153983A (zh) * 2020-03-11 2020-05-15 江南大学 一种索玛鲁肽的半合成制备法
CN111153983B (zh) * 2020-03-11 2022-07-01 江南大学 一种索玛鲁肽的半合成制备法
CN112175068B (zh) * 2020-09-28 2021-06-25 深圳深创生物药业有限公司 一种司美格鲁肽的纯化方法
CN112175068A (zh) * 2020-09-28 2021-01-05 深圳深创生物药业有限公司 一种司美格鲁肽的纯化方法
US11744873B2 (en) 2021-01-20 2023-09-05 Viking Therapeutics, Inc. Compositions and methods for the treatment of metabolic and liver disorders
CN116693653A (zh) * 2023-08-09 2023-09-05 杭州湃肽生化科技有限公司 一种规模化生产索玛鲁肽的制备方法
CN116693653B (zh) * 2023-08-09 2023-10-31 杭州湃肽生化科技有限公司 一种规模化生产索玛鲁肽的制备方法
CN117586375A (zh) * 2024-01-19 2024-02-23 苏州金顶生物有限公司 一种制备司美格鲁肽的方法

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