CN106498086A - 紫扇贝与海湾扇贝及其回交后代母本来源的鉴定方法 - Google Patents

紫扇贝与海湾扇贝及其回交后代母本来源的鉴定方法 Download PDF

Info

Publication number
CN106498086A
CN106498086A CN201611254985.6A CN201611254985A CN106498086A CN 106498086 A CN106498086 A CN 106498086A CN 201611254985 A CN201611254985 A CN 201611254985A CN 106498086 A CN106498086 A CN 106498086A
Authority
CN
China
Prior art keywords
scallop
purple
bay
mtdna
backcross progeny
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201611254985.6A
Other languages
English (en)
Other versions
CN106498086B (zh
Inventor
王春德
刘桂龙
刘凤巧
刘博�
赵玉明
马斌
陈银
徐冬雪
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Qingdao Agricultural University
Original Assignee
Qingdao Agricultural University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Qingdao Agricultural University filed Critical Qingdao Agricultural University
Priority to CN201611254985.6A priority Critical patent/CN106498086B/zh
Publication of CN106498086A publication Critical patent/CN106498086A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN106498086B publication Critical patent/CN106498086B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6876—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes
    • C12Q1/6888—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for detection or identification of organisms

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明涉及一种紫扇贝与海湾扇贝及其回交后代母本来源的鉴定方法，是基于线粒体DNA序列的差异性而设计的标记引物mtDNA‑Z，分别由左端引物序列mtDNA‑Z‑F：5’‑TATGAGGTGTCCCCCAAGTC‑3’和右端引物序列mtDNA‑Z‑R:5’‑ACTGGCAGACAAACAAATCGT‑3’组成，以提取的紫扇贝、海湾扇贝与回交扇贝的DNA为模板，并利用该引物对其进行PCR扩增，若在近460bp处有PCR特异性条带出现，则确定母本线粒体基因来源为紫扇贝，若在近460bp处无PCR特异性条带出现，则确定其母本线粒体基因来源为海湾扇贝，本发明排除了核基因组DNA的影响，无需单独提取线粒体DNA来进行鉴定，因此可以快速高效的鉴定出紫扇贝与海湾扇贝及其回交后代的亲本来源，方法简便，周期短，可大批量进行，为确保育种进程的顺利进行和确证回交后代的谱系提供技术支持和保障。

Description

紫扇贝与海湾扇贝及其回交后代母本来源的鉴定方法
技术领域
本发明属于扇贝杂交育种的后裔鉴定技术，尤其是涉及一种紫扇贝与海湾扇贝及其回交后代母本来源的鉴定方法。
背景技术
海湾扇贝(Argopectenirradians)自1982年从美国引进以来,产量逐年增加，已成为中国最重要的养殖贝类之一，但是近年来出现的种质退化问题成为制约中国扇贝养殖业发展的严重障碍。
紫扇贝(Argopectenpurpuratus)是南美洲太平洋海岸的优良经济贝类，大小中等，广泛养殖于智利和秘鲁，并使智利成为仅次于中国的扇贝养殖大国。为了改善海湾扇贝的种质，提高扇贝养殖业的经济产量，王春德等于2008年从秘鲁引进紫扇贝并与海湾扇贝成功杂交，培育出生长优势极其显著的两种杂交子一代，即紫海杂交扇贝(紫扇贝卵子×海湾扇贝精子)和海紫杂交扇贝(海湾扇贝卵子×紫扇贝精子)(王春德等，2009；Wang et al,2011)。而杂交子一代中存在着少量雄性可育个体，可通过回交的方法培育出生长优势极其显著的回交扇贝后代，即海紫紫回交扇贝(海紫杂交扇贝卵子×紫扇贝精子)、紫海海回交扇贝(紫海扇贝卵子×海湾扇贝精子)、紫海紫回交扇贝(紫海杂交扇贝卵子×紫扇贝精子)、海紫海回交扇贝(海紫杂交扇贝卵子×海湾扇贝精子)，因而具有巨大的育种潜力。但紫扇贝和海湾扇贝均为雌雄同体的动物，在繁育时两种扇贝均同时排放精子和卵子，在育种实践中存在着精子或卵子污染的问题，为确保育种进程的顺利进行并确证后代的谱系，经常需要确定某一后代是否为真正的回交后代及其母本来源，因此需要建立一种方法来快速鉴定其亲本来源尤其是母本来源。
利用来自核基因组的分子标记(如微卫星标记)鉴定方法虽然可以用来鉴定回交后代是否为真正的杂交种，但无法辨别其父母本来源，导致回交后代谱系混乱、难以对优良的品系进行筛选等问题，而且在回交试验中发现，用作回交的母体不同，其回交一代性状的表现也不同，有的甚至完全表现为母体的性状，因此快速鉴定回交扇贝的母本来源是非常必要的。
发明内容
本发明的目的在于提供一种鉴定紫扇贝与海湾扇贝及其回交后代的母本来源的方法，基于线粒体DNA序列差异而设计的标记引物，并利用该标记引物序列鉴定紫扇贝与海湾扇贝及其回交后代母本来源。
研究已发现，线粒体基因组严格遵循母系遗传规律，且缺少基因重组，回交后代的线粒体必定来自其母本，因此通过鉴定其线粒体DNA的来源就可以确定回交种的母本来源。本发明根据海湾扇贝和紫扇贝线粒体基因组差异性特点，设计了一对特异性引物，能够通过PCR方法鉴定杂交后代线粒体基因的类型，从而快速鉴定回交扇贝的母本来源。
本发明基于以下构思：研究发现，扇贝的线粒体基因组遵循严格的母系遗传，即后代的线粒体基因与其母本线粒体基因型完全相同，而与父本的线粒体基因型无关；具体到海湾扇贝和紫扇贝均为Argopecten属的近缘种，虽然其线粒体基因组序列相似性高达82.34％，但仍可以根据两者线粒体基因序列的少许差异设计出特异的引物，从而区分回交后代线粒体基因的来源，为育种工作的顺利进行提供保障。
本发明是通过如下技术方案来实现的：一种鉴定紫扇贝与海湾扇贝杂交后代母本来源的方法，所用标记引物为mtDNA-Z，分别由左端引物序列mtDNA-Z-F：5’-TATGAGGTGTCCCCCAAGTC-3’和右端引物序列mtDNA-Z-R：5’-ACTGGCAGACAAACAAATCGT-3’组成。
本发明利用上述标记引物对紫扇贝、海湾扇贝及其回交后代母本来源进行鉴定的方法如下：
(1)分别取待鉴定的紫扇贝、海湾扇贝与海紫紫回交扇贝、紫海海回交扇贝、紫海紫回交扇贝、海紫海回交扇贝的闭壳肌，直接用常规的方法提取上述扇贝全基因组DNA，用TE缓冲液稀释至终浓度100ng/μL保存在-20℃备用；
(2)以提取的上述紫扇贝、海湾扇贝与各回交扇贝的DNA为模板，用上述引物mtDNA-Z对其进行PCR扩增，反应体系为10μL，包括0.25U Taq DNA酶，含1.5mM MgCl2的1×PCRbuffer,0.2mM dNTP mix,左右端引物各1μM,50ngDNA模板；反应程序为：94℃预变性3min,94℃1min,56℃1min,72℃1min,30个循环，72℃延伸10min；PCR产物经1％琼脂糖凝胶电泳，EB染色，凝胶成像系统照相观察；如果在近460bp处有PCR特异性条带出现，则确定其母本线粒体基因来源为紫扇贝，如果在近460bp处没有PCR特异性条带出现，则确定其母本线粒体基因来源为海湾扇贝。
本发明具有如下优点：
(1)本发明基于线粒体DNA序列的引物设计排除了核基因组DNA的影响，因此不需要单独提取线粒体DNA来进行鉴定，利用常规提取的全基因组中的少量线粒体DNA，即可用标记引物mtDNA-Z进行PCR扩增，经琼脂糖电泳检测后就能够得到鉴定结果，周期时间短，方法简便，可大批量进行，快速高效。
(2)本发明基于线粒体DNA序列设计的特异性引物能够快速简便地鉴别出四个回交后代及其两个亲本。
附图说明
图1是本发明实施例1中所用标记引物mtDNA-Z PCR扩增紫扇贝、海湾扇贝及其回交后代海紫紫扇贝、紫海海扇贝产物的电泳图；其中1:Marker，2-3：海湾扇贝，4-5：紫扇贝,6-9：海紫紫回交扇贝，10-13：紫海海回交扇贝；
图2是本发明实施例2中所用标记引物mtDNA-Z PCR扩增紫扇贝、海湾扇贝及其回交后代紫海紫扇贝、海紫海扇贝产物的电泳图；其中注：1-2：海湾扇贝，3-4：紫扇贝,5-8：紫海紫扇贝，9-12：海紫海扇贝.M:DL2000。
具体实施方式
实施例1以紫扇贝、海湾扇贝及回交后代海紫紫回交扇贝、紫海海回交扇贝为例，进行鉴定的结果。
(1)分别取紫扇贝、海湾扇贝各2个，海紫紫回交扇贝、紫海海回交扇贝各4个的闭壳肌，用天根DNA提取试剂盒(天根生化科技有限公司，北京)分别提取全基因组DNA，用TE缓冲液稀释至终浓度100ng/μL保存在-20℃备用，提取的全基因组DNA经1％琼脂糖凝胶电泳，EB染色，凝胶成像系统照相观察，以确保提取的全基因组DNA的纯度和质量符合要求。
(2)以提取的上述扇贝DNA为模板，用上述引物mtDNA-Z对其进行PCR扩增，反应体系为10μL，包括0.25U Taq DNA酶(Takara Inc.,Shiga,Japan)，1×PCR buffer(含1.5mMMgCl2),0.2mM dNTP mix，上下游引物各1μM，50ngDNA模板。反应程序为：94℃预变性3min,94℃1min,56℃1min,72℃1min,30个循环；72℃延伸10min。PCR产物经1％琼脂糖凝胶电泳，EB染色，凝胶成像系统照相观察电泳结果。
(3)电泳结果表明，在海湾扇贝和海紫紫回交扇贝中未扩增出条带，在紫扇贝、紫海海回交扇贝在约460bp附近扩增出明显的条带(见图1)，大小与预期的463bp相符；将上述紫扇贝中的扩增产物纯化后测序结果大小为460bp，与紫扇贝的线粒体DNA序列进行DNAMAN比对，测得序列与紫扇贝线粒体DNA的片段相似度为97.81％(见表1),从而排除了mtDNA-Z引物受核基因组的影响，确定为以紫扇贝线粒体DNA作为模板进行的PCR扩增反应。显然本发明设计的引物能够鉴定出紫扇贝与海湾扇贝及其回交后代的母本来源。
表1测序结果比对表
实施例2以紫扇贝、海湾扇贝及回交后代紫海紫扇贝、海紫海扇贝为例，进行鉴定的结果。
(1)分别取紫扇贝、海湾扇贝各2个，海紫紫回交扇贝和紫海海回交扇贝各4个的闭壳肌，用天根DNA提取试剂盒(天根生化科技有限公司，北京)分别提取上述扇贝的全基因组DNA，用TE缓冲液稀释至终浓度100ng/μL保存在-20℃备用，提取的全基因组DNA经1％琼脂糖凝胶电泳，EB染色，凝胶成像系统照相观察，以保证提取的全基因组DNA的纯度和质量是否符合要求。
(2)以提取的上述扇贝的DNA为模板，用引物mtDNA-Z对其进行PCR扩增，反应体系为10μL，包括0.25U Taq DNA酶(Takara Inc.,Shiga,Japan)，1×PCR buffer(含1.5mM MgCl2),0.2mM dNTP mix，左右端引物各1μM，50ngDNA模板。反应程序为：94℃预变性3min,94℃1min,56℃1min,72℃1min,30个循环；72℃延伸10min。PCR产物经1％琼脂糖凝胶电泳，EB染色，凝胶成像系统照相观察电泳结果。
(3)电泳结果表明，紫扇贝、紫海紫回交扇贝在近460bp处扩增出明显的条带，而在海湾扇贝和海紫海回交扇贝中均未扩增出条带(见图2)，说明本发明设计的引物对鉴定紫扇贝与海湾扇贝及其回交后代的母本来源是无误的。
SQUENCE LISTING
<110> 青岛农业大学
<120> 紫扇贝与海湾扇贝及其回交后代母本来源的鉴定方法
<160> 1
<210> 1
<211> 463
<212> DNA
<213> 紫扇贝（Argopecten purpuratus）
<220>
<221> misc_feature
<400> 1
tatgaggtgt cccccaagtc ttgggttttt gggggaggtt ataataggga tagggatttg 60
tagaattttt ccacaaggct atattttttg ttttattcta ctattctttt tcggtggtgc 120
aagaataatg gtgctttaca ccagggtaat acacggaagg ttttcgactg ccctggttcc 180
tggggggtct ggaattacga agtgtagtta tcttggtctt ttccatgggg tgccgttaat 240
tattttgttt tttttacctg cgttcttgtc tttgcgggct cttcggagcg gtctttaaga 300
agtagggcta aagcccacgc actgttgaca gagtaggaga ggaggaagta gaaaaccaga 360
ttaaatgggt ggcgagagcg atgagattgt acaagacccg ggataaaggc taagagaagg 420
ggtctcccga tcgaattagg gtacgatttg tttgtctgcc agt 463

Claims (4)

1.一种紫扇贝与海湾扇贝及其回交后代母本来源的鉴定方法，其特征是所用标记引物为mtDNA-Z，分别由左端引物序列mtDNA-Z-F和右端引物序列mtDNA-Z-R组成。
2.如权利要求1所述的紫扇贝与海湾扇贝及其回交后代母本来源的鉴定方法，其特征是上述左端引物序列mtDNA-Z-F为：5’-TATGAGGTGTCCCCCAAGTC-3’。
3.如权利要求1所述的紫扇贝与海湾扇贝及其回交后代母本来源的鉴定方法，其特征是上述右端引物序列mtDNA-Z-R为：5’-ACTGGCAGACAAACAAATCGT-3’。
4.如权利要求1所述的紫扇贝与海湾扇贝及其回交后代母本来源的鉴定方法，其特征是具体步骤如下：
(1)分别取待鉴定的紫扇贝、海湾扇贝与海紫紫回交扇贝、紫海海回交扇贝、紫海紫回交扇贝、海紫海回交扇贝的闭壳肌，并用常规的方法提取全基因组DNA，用TE缓冲液稀释至终浓度100ng/μL保存在-20℃备用；
(2)以提取的紫扇贝、海湾扇贝与上述各回交扇贝的DNA为模板，用上述引物对其进行PCR扩增，反应体系为10μL，包括0.25U Taq DNA酶,含1.5mM MgCl2的1×PCR buffer,0.2mMdNTP mix,左右端引物各1μM,50ngDNA模板；反应程序为：94℃预变性3min,94℃1min,56℃1min,72℃1min,30个循环，72℃延伸10min；PCR产物经1％琼脂糖凝胶电泳，EB染色，凝胶成像系统照相观察电泳结果；如果在近460bp处有PCR特异性条带出现，则确定母本线粒体基因来源为紫扇贝，如果在近460bp处没有PCR特异性条带出现，则确定其母本线粒体基因来源为海湾扇贝。
CN201611254985.6A 2016-12-30 2016-12-30 紫扇贝与海湾扇贝及其回交后代母本来源的鉴定方法 Active CN106498086B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201611254985.6A CN106498086B (zh) 2016-12-30 2016-12-30 紫扇贝与海湾扇贝及其回交后代母本来源的鉴定方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201611254985.6A CN106498086B (zh) 2016-12-30 2016-12-30 紫扇贝与海湾扇贝及其回交后代母本来源的鉴定方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN106498086A true CN106498086A (zh) 2017-03-15
CN106498086B CN106498086B (zh) 2019-10-29

Family

ID=58333330

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201611254985.6A Active CN106498086B (zh) 2016-12-30 2016-12-30 紫扇贝与海湾扇贝及其回交后代母本来源的鉴定方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN106498086B (zh)

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113604584A (zh) * 2021-08-12 2021-11-05 中国海洋大学 一种栉孔扇贝遗传性别相关的分子标记及其应用
CN115807109A (zh) * 2022-12-20 2023-03-17 中国海洋大学三亚海洋研究院 一种基于pcr技术的扇贝品种鉴定方法及其特异性引物
CN117121853A (zh) * 2022-09-19 2023-11-28 中国海洋大学 一种扇贝孤雄单倍体胚胎的制备方法

Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101413029A (zh) * 2008-12-09 2009-04-22 王成辉 三种红鲤遗传渐渗的分子鉴别方法
CN101798598A (zh) * 2010-03-29 2010-08-11 云南农业大学 一组鉴别牛属各家牛的母系遗传标记及其鉴别方法与应用
CN103276068A (zh) * 2013-05-20 2013-09-04 中国水产科学研究院珠江水产研究所 一种鉴定乌鳢、斑鳢及其杂交f1代斑乌鳢、乌斑鳢的标记引物及方法
CN104046683A (zh) * 2013-03-13 2014-09-17 中国科学院海洋研究所 一种用于鉴别贝类两种近缘物种或鉴定其杂交后代的方法
CN104561351A (zh) * 2015-01-28 2015-04-29 厦门大学 一种鉴别杂交石斑鱼个体的方法
CN104928367A (zh) * 2015-06-26 2015-09-23 中国海洋大学 一种贝类远缘杂交子代遗传鉴定方法
CN105567789A (zh) * 2014-10-08 2016-05-11 北京市水产科学研究所 鉴定或辅助鉴定鲟鱼种质的pcr引物对组合物及其应用
CN105695590A (zh) * 2016-03-21 2016-06-22 中国水产科学研究院长江水产研究所 用于鉴定黄颡鱼和长吻鮠杂交种的引物组、试剂盒和方法

Patent Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101413029A (zh) * 2008-12-09 2009-04-22 王成辉 三种红鲤遗传渐渗的分子鉴别方法
CN101798598A (zh) * 2010-03-29 2010-08-11 云南农业大学 一组鉴别牛属各家牛的母系遗传标记及其鉴别方法与应用
CN104046683A (zh) * 2013-03-13 2014-09-17 中国科学院海洋研究所 一种用于鉴别贝类两种近缘物种或鉴定其杂交后代的方法
CN103276068A (zh) * 2013-05-20 2013-09-04 中国水产科学研究院珠江水产研究所 一种鉴定乌鳢、斑鳢及其杂交f1代斑乌鳢、乌斑鳢的标记引物及方法
CN105567789A (zh) * 2014-10-08 2016-05-11 北京市水产科学研究所 鉴定或辅助鉴定鲟鱼种质的pcr引物对组合物及其应用
CN104561351A (zh) * 2015-01-28 2015-04-29 厦门大学 一种鉴别杂交石斑鱼个体的方法
CN104928367A (zh) * 2015-06-26 2015-09-23 中国海洋大学 一种贝类远缘杂交子代遗传鉴定方法
CN105695590A (zh) * 2016-03-21 2016-06-22 中国水产科学研究院长江水产研究所 用于鉴定黄颡鱼和长吻鮠杂交种的引物组、试剂盒和方法

Non-Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
LI,H.等: "Argopecten irradians irradians mitochondrion，complete genome", 《GENBANK DATABASE》 *
LI,H.等: "Argopecten purpuratus mitochondrion，complete genome", 《GENBANK DATABASE》 *
于涛等: "栉孔扇贝、虾夷扇贝及其杂交子代线粒体COI和Cytb基因遗传多样性分析", 《海洋科学》 *
王春德等: "紫扇贝与诲湾扇贝种间杂交的研究", 《海洋科学》 *
胡丽萍 等: "基于16S rDNA基因序列探讨引进物种紫扇贝(Argopecten purpuratus)在海湾扇贝属(Argopecten)中的分类地位", 《海洋与湖沼》 *
胡佳等: "施氏鲟、达氏鳇及其杂交子代的分子鉴定", 《中国水产科学》 *
范晓 等: "紫扇贝与海湾扇贝通用SSR的检测及其在杂交子代鉴定中的应用", 《生命科学研究》 *

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113604584A (zh) * 2021-08-12 2021-11-05 中国海洋大学 一种栉孔扇贝遗传性别相关的分子标记及其应用
CN113604584B (zh) * 2021-08-12 2024-02-13 中国海洋大学 一种栉孔扇贝遗传性别相关的分子标记及其应用
CN117121853A (zh) * 2022-09-19 2023-11-28 中国海洋大学 一种扇贝孤雄单倍体胚胎的制备方法
CN115807109A (zh) * 2022-12-20 2023-03-17 中国海洋大学三亚海洋研究院 一种基于pcr技术的扇贝品种鉴定方法及其特异性引物

Also Published As

Publication number Publication date
CN106498086B (zh) 2019-10-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN107326077B (zh) 一种鉴别黄姑鱼遗传性别的分子标记及其应用
CN106701948B (zh) 紫扇贝、海湾扇贝与杂交后代母本来源的鉴定方法
CN114410818B (zh) 一种与冬瓜果实大小紧密连锁的Indel分子标记引物及其应用
CN106498086B (zh) 紫扇贝与海湾扇贝及其回交后代母本来源的鉴定方法
CN105483217B (zh) 一种鉴定水稻东野型细胞质雄性不育源的分子标记方法
CN106520939B (zh) 一种鲷鱼种质鉴定的方法及其应用
CN104531693B (zh) 水稻不育基因pms3的特异性功能标记及其应用
CN110241251A (zh) 同时鉴定棉花细胞质雄性不育恢复基因Rf1、Rf2的InDel标记
CN112176074A (zh) 一种检测虾夷扇贝的实时荧光pcr引物探针及方法
CN106755438A (zh) 一种用于鉴定鱼类增殖放流个体的引物、试剂盒及鉴别方法
CN109880893B (zh) 用于丝尾鱯性别鉴定的特异性dna片段及应用
Yara Identification of Torymus sinensis and T. beneficus (Hymenoptera: Torymidae), introduced and indigenous parasitoids of the chestnut gall wasp Dryocosmus kuriphilus (Hymenoptera: Cynipidae), using the ribosomal ITS2 region
CN103320425A (zh) 一种用于大规模、高通量基因分型的贝类dna快速提取方法
CN102747070A (zh) 甜瓜抗白粉病基因Pm-AN紧密连锁的两个CAPs标记与使用方法
CN106636319A (zh) 快速鉴别东白眉长臂猿和北白颊长臂猿的分子生物学方法
CN113881786B (zh) 用于乌苏里拟鲿、圆尾拟鲿及二者正反杂交个体鉴定的引物
CN110452992A (zh) 一种凡纳滨对虾est微卫星位点引物的标记方法
CN110184378A (zh) 三裂棉细胞质雄性不育恢复基因的分子鉴定方法
CN115058537A (zh) 一种海带的选育方法
CN111455063B (zh) 一种检测鸭有色羽性状基因型的方法及引物对和试剂盒
CN111118130B (zh) 快速鉴别罗氏沼虾性别的方法
CN111850138A (zh) 一种区分黑龙江三角鲂与团头鲂及其杂交种的分子标记、试剂盒及区分方法
CN106011257A (zh) 一种芜菁与萝卜属间远缘杂交后代的分子鉴定方法
CN109055565B (zh) 一种蒙古裸腹溞的dna条形码及其应用
CN114058710A (zh) 一种鉴别海水鱼类生殖细胞种间移植生殖细胞嵌合体的方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant