CN106404966A - 一种再造烟叶致香成分分析的前处理方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种再造烟叶致香成分分析的前处理方法,包括以下步骤:(1)、对再造烟叶进行水提;(2)、对再造烟叶进行醇提;(3)、量取10mL水提再造烟叶样品于50mL尖底具塞离心管中,使用注射器快速注入二氯甲烷/乙腈混合液,轻微振荡超声1min,然后以4000r/min离心5min,最后用微量进样器吸取沉积相过0.22μm滤膜进行GC‑MS分析;(4)、醇提再造烟叶样品也按步骤(3)处理。本发明方法易于操作,时间短,有机溶剂用量少,可分离更多不同极性组分,而且可明显提高试验效率,且重复性好。
Description
技术领域
本发明涉及再造烟叶技术领域,具体是一种再造烟叶致香成分分析的前处理方法。
背景技术
再造烟叶,又称烟草薄片或重组烟草,属烟草废弃资源再生利用的一种产品,它主要利用烟梗、烟末、碎片、碎丝等烟草副产品和烟草废弃物,按一定配方要求,经过特定工艺加工而成的类似牛皮纸状的重组烟草制品。
以往的分析研究表明,再造烟叶中致香成分采用直接萃取的前处理方法无法分析,需采用同时蒸馏萃取法。同时蒸馏萃取法是提取烟叶中挥发性、半挥发性组分一种十分有效的手段,对烟草中主要香味组分的提取具有较好的回收率和重现性。但此法需消耗较大量的溶剂(一般为40mL二氯甲烷)和较长时间(一般为2h)。
发明内容
本发明的目的是克服现有技术的不足,提供一种操作简单、萃取时间短、有机溶剂用量少的再造烟叶致香成分分析的前处理方法,能够有效富集再造烟叶中某些含量少、检测灵敏度低的致香成分,处理后用于GC/MS可检测出更多组分,且重复性好。
本发明采用的技术方案为:
一种再造烟叶致香成分分析的前处理方法,包括以下步骤:
(1)、称取5g剪碎的再造烟叶样品于锥形瓶中,加入60mL~80mL超纯水,浸没样品,超声10min后,静置12h,振荡摇匀后,取过滤液,得水提再造烟叶样品;
(2)、称取5g剪碎的再造烟叶样品于锥形瓶中,加入60mL~80mL无水乙醇,浸没样品,超声10min后,静置12h,振荡摇匀后,取过滤液,得醇提再造烟叶样品;
(3)、量取10mL水提再造烟叶样品于50mL尖底具塞离心管中,使用注射器快速注入二氯甲烷/乙腈混合液,轻微振荡超声1min,然后以4000r/min离心5min,最后用微量进样器吸取沉积相过0.22μm滤膜进行GC-MS分析。
(4)、醇提再造烟叶样品也按步骤(3)处理,即量取10mL醇提再造烟叶样品于50mL尖底具塞离心管中,使用注射器快速注入二氯甲烷/乙腈混合液,轻微振荡超声1min,然后以4000r/min离心5min,最后用微量进样器吸取沉积相过0.22μm滤膜进行GC-MS分析。
作为优选,步骤(3)中二氯甲烷/乙腈混合液为:1.0mL二氯甲烷和1.5mL乙腈的混合液。
作为优选,步骤(2)和步骤(3)中GC-MS分析条件为:DB-5MS弹性石英毛细管柱(30m×0.25mm i.d.×0.25μm d.f.);载气氦气,流速1mL/min;进样口温度280℃,进样量1μL,分流比50:1;初始柱温50℃,保持2min,以4℃/min的速率升至240℃,保持2min,再以15℃/min升到300℃,保持20min;溶剂延迟5min,电离方式EI,电离能量70eV;离子源温度250℃,传输线温度250℃;扫描范围50-450amu。
本发明所具有的有益效果:
本发明方法易于操作,时间短,通过分别对再造烟叶进行水提和醇提处理,经过如此处理用于GC/MS可检测出更多组分,可分离更多不同极性组分,而且可明显提高试验效率,且重复性好。
附图说明
图1为采用本发明实施例1前处理方法的水提再造烟叶样品GC-MS成分分析色谱图;
图2为采用本发明实施例1前处理方法的醇提再造烟叶样品GC-MS成分分析色谱图;
图3为现有技术采用二氯甲烷直接萃取前处理方法的GC-MS成分分析色谱图;
图4为采用本发明实施例2前处理方法的水提再造烟叶样品GC-MS成分分析色谱图;
图5为采用本发明实施例2前处理方法的醇提再造烟叶样品GC-MS成分分析色谱图;
图6为现有技术采用同时蒸馏萃取前处理方法的GC-MS成分分析色谱图。
具体实施方式
下面将结合具体实施例和附图,对本发明中的技术方案进行清楚、完整地描述。
实施例1:
1、称取5g剪碎的再造烟叶样品于锥形瓶中,加入80mL超纯水,浸没样品,超声10min后,静置12h,振荡摇匀后,取过滤液,得水提再造烟叶样品;
2、称取5g剪碎的再造烟叶样品于锥形瓶中,加入80mL无水乙醇,浸没样品,超声10min后,静置12h,振荡摇匀后,取过滤液,得醇提再造烟叶样品;
3、量取10mL水提再造烟叶样品于50mL尖底具塞离心管中,使用注射器快速注入二氯甲烷/乙腈混合液(1.0mL二氯甲烷和1.5mL乙腈混合液),轻微振荡超声1min,然后以4000r/min离心5min,最后用微量进样器吸取沉积相过0.22μm滤膜进行GC-MS分析。
4、醇提再造烟叶样品同样按步骤3处理。
GC-MS分析条件为:DB-5MS弹性石英毛细管柱(30m×0.25mmi.d.×0.25μm d.f.);载气氦气,流速1mL/min;进样口温度280℃,进样量1μL,分流比50:1;初始柱温50℃,保持2min,以4℃/min的速率升至240℃,保持2min,再以15℃/min升到300℃,保持20min;溶剂延迟5min,电离方式EI,电离能量70eV;离子源温度250℃,传输线温度250℃;扫描范围50-450amu。
将本发明实施例1与现有技术采用二氯甲烷直接萃取前处理方法进行样品GC-MS成分分析比对,其色谱图为图1-3,其中图1为采用本发明实施例1前处理方法的水提再造烟叶样品GC-MS成分分析色谱图;图2为采用本发明实施例1前处理方法的醇提再造烟叶样品GC-MS成分分析色谱图;图3为现有技术采用二氯甲烷直接萃取前处理方法的GC-MS成分分析色谱图。
其中二氯甲烷直接萃取前处理方法为:称取5g剪碎的再造烟叶样品于锥形瓶中,加40mL二氯甲烷,浸没样品,振荡萃取15min,静置5min,取萃取层过0.22μm滤膜后,进行GC-MS分析。
本发明实施例1与现有技术二氯甲烷直接萃取前处理方法鉴定出的致香成分如表1和表2所示。由表1和表2可知,采用本发明前处理再造烟叶共鉴定出32种致香成分,如呋喃酮、苯甲醛、茄酮、香叶基丙酮、β-大马酮、巨豆三烯酮、新植二烯、合金欢醇酮和一些脂肪酸酯以及高链烷烃等烟草主要致香组分均能够分离,而二氯甲烷直接萃取法仅能鉴定出2种成分,无法满足再造烟叶致香成分的分析。
表1采用实施例1前处理方法的再造烟叶致香成分分析结果
表1中“+”表示鉴定出
表2二氯甲烷直接萃取再造烟叶致香成分分析结果
序号 | 保留时间 | 化学名称 |
1 | 21.51 | 2,6-二叔丁基对甲酚 |
2 | 22.43 | 烟碱 |
实施例2:
1、称取5g剪碎的再造烟叶样品于锥形瓶中,加入60mL超纯水,浸没样品,超声10min后,静置12h,振荡摇匀后,取过滤液,得水提再造烟叶样品;
2、称取5g剪碎的再造烟叶样品于锥形瓶中,加入60mL无水乙醇,浸没样品,超声10min后,静置12h,振荡摇匀后,取过滤液,得醇提再造烟叶样品;
3、量取10mL水提再造烟叶样品于50mL尖底具塞离心管中,使用注射器快速注入二氯甲烷/乙腈混合液(1.0mL二氯甲烷和1.5mL乙腈混合液),轻微振荡超声1min,然后以4000r/min离心5min,最后用微量进样器吸取沉积相过0.22μm滤膜进行GC-MS分析。
4、醇提再造烟叶样品同样按步骤3处理。
GC-MS分析条件为:DB-5MS弹性石英毛细管柱(30m×0.25mm i.d.×0.25μmd.f.);载气氦气,流速1mL/min;进样口温度280℃,进样量1μL,分流比50:1;初始柱温50℃,保持2min,以4℃/min的速率升至240℃,保持2min,再以15℃/min升到300℃,保持20min;溶剂延迟5min,电离方式EI,电离能量70eV;离子源温度250℃,传输线温度250℃;扫描范围50-450amu。
将本发明实施例2与现有技术采用同时蒸馏萃取前处理方法进行样品GC-MS成分分析比对,其色谱图为图4-6,其中图4为采用本发明实施例2前处理方法的水提再造烟叶样品GC-MS成分分析色谱图;图5为采用本发明实施例2前处理方法的醇提再造烟叶样品GC-MS成分分析色谱图;图6为现有技术采用同时蒸馏萃取前处理方法的GC-MS成分分析色谱图。
其中同时蒸馏萃取前处理方法为:在同时蒸馏萃取装置一端接盛有25.00g剪碎再造烟叶和350mL水的1000mL平底烧瓶,用电热套加热。另一端接盛有40mL二氯甲烷的100mL烧瓶,用水浴锅加热,水浴温度60℃。同时蒸馏萃取2h后,将二氯甲烷萃取液浓缩至1mL,进行GC/MS定性分析。
本发明实施例2与现有技术同时蒸馏萃取前处理方法鉴定出的致香成分如表3和表4所示。由表3和表4可知,采用本发明前处理再造烟叶共鉴定出32种致香成分,基本涵盖同时蒸馏萃取法鉴定出的26种致香成分,如呋喃酮、苯甲醛、茄酮、香叶基丙酮、β-大马酮、巨豆三烯酮、新植二烯、合金欢醇酮和一些脂肪酸酯以及高链烷烃等烟草主要致香组分均能够分离。
本发明前处理方法,溶剂用量仅需2.5mL,相较于同时蒸馏萃取法的40mL,大大降低了溶剂使用量,降低分析成本;萃取时间仅需1min,相较于同时蒸馏萃取法的2h,大大缩短了萃取时间,提高分析效率。
表3采用实施例2前处理方法的再造烟叶致香成分分析结果
表1中“+”表示鉴定出
表4同时蒸馏萃取再造烟叶致香成分分析结果
试验证明,本发明采用的前处理方法易于操作,时间短,可明显提高试验效率,且重复性好。
以上所述,仅为本发明的具体实施方式,但本发明的保护范围并不局限于此,任何属于本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内,可轻易想到的变化或替换,都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此,本发明的保护范围应该以权利要求的保护范围为准。
Claims (3)
1.一种再造烟叶致香成分分析的前处理方法,其特征在于:包括以下步骤:
(1)、称取5g剪碎的再造烟叶样品于锥形瓶中,加入60mL~80mL超纯水,浸没样品,超声10min后,静置12h,振荡摇匀后,取过滤液,得水提再造烟叶样品;
(2)、称取5g剪碎的再造烟叶样品于锥形瓶中,加入60mL~80mL无水乙醇,浸没样品,超声10min后,静置12h,振荡摇匀后,取过滤液,得醇提再造烟叶样品;
(3)、量取10mL水提再造烟叶样品于50mL尖底具塞离心管中,使用注射器快速注入二氯甲烷/乙腈混合液,轻微振荡超声1min,然后以4000r/min离心5min,最后用微量进样器吸取沉积相过0.22μm滤膜进行GC-MS分析;
(4)、醇提再造烟叶样品也按步骤(3)处理,即量取10mL醇提再造烟叶样品于50mL尖底具塞离心管中,使用注射器快速注入二氯甲烷/乙腈混合液,轻微振荡超声1min,然后以4000r/min离心5min,最后用微量进样器吸取沉积相过0.22μm滤膜进行GC-MS分析。
2.如权利要求1所述的再造烟叶致香成分分析的前处理方法,其特征在于:步骤(3)中二氯甲烷/乙腈混合液为:1.0mL二氯甲烷和1.5mL乙腈的混合液。
3.如权利要求1所述的再造烟叶致香成分分析的前处理方法,其特征在于:步骤(2)和步骤(3)中GC-MS分析条件为:DB-5MS弹性石英毛细管柱(30m×0.25mm i.d.×0.25μmd.f.);载气氦气,流速1mL/min;进样口温度280℃,进样量1μL,分流比50:1;初始柱温50℃,保持2min,以4℃/min的速率升至240℃,保持2min,再以15℃/min升到300℃,保持20min;溶剂延迟5min,电离方式EI,电离能量70eV;离子源温度250℃,传输线温度250℃;扫描范围50-450amu。
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