CN106397619A - 一种枸杞多糖铁络合物的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种枸杞多糖铁络合物的制备方法，属于络合物领域。本发明先从枸杞干中经过微波浸提、醇沉、脱蛋白、透析等工艺得到枸杞精多糖，以枸杞精多糖铁盐为原料，经过碱化、络合、醇沉、干燥等工艺最终制得枸杞多糖铁络合物，本发明制备得到的枸杞多糖铁络合物不仅可以作为新型补铁剂，稳定性好，对胃肠道无或极少刺激作用，而且结合枸杞多糖自身的生物活性，还具有调节免疫、延缓衰老等作用，在人体释放后可被吸收利用，无毒副作用。

Description

一种枸杞多糖铁络合物的制备方法

技术领域

本发明公开了一种枸杞多糖铁络合物的制备方法，属于络合物领域。

背景技术

枸杞是我国传统名贵中药材，富含植物多糖、蛋白质、维生素等营养成分。枸杞多糖是从枸杞中提取而得的一种水溶性多糖。已明确该多糖系蛋白多糖，由阿拉伯糖、葡萄糖、半乳糖、甘露糖、木糖、鼠李糖6种单糖成分组成.经研究表明，枸杞多糖是枸杞子调节免疫、延缓衰老的主要活性成分，可改善老年人易疲劳、食欲不振和视力模糊等症状，并具有降血脂、抗脂肪肝、抗衰老等作用。

缺铁的治疗对缺铁性贫血的病人是很有必要的，其中静脉注射特别适用于那些不能耐受口服铁剂治疗、不能够完全吸收膳食铁或者有造血障碍的人群，静脉注射铁剂中右旋糖酐铁应用广泛，但其有明显的不良反应，据报道，接受右旋糖酐铁治疗的病人中，接近26％的病人出现了副作用，引起这种严重副反应的根本原因还不明确，但是，已知对右旋糖酐的过敏反应是引起这种严重副作用的原因，因此没有右旋糖酐的静脉注射铁剂可以降低或者避免这些副作用。

多糖铁络合物是新一代补铁剂，不仅有合适的络合稳定性，对胃肠道刺激性小，且当其释放铁之后，多糖本身具有多方面的生物活性，可被吸收利用。多糖铁络合物由糖基和配糖铁两部分组成。

发明内容

本发明主要解决的技术问题：针对传统缺铁性贫血的病人，选用亚铁盐来治疗缺

铁性贫血，但其化学性质不稳定，生物利用度差，消化道刺激作用显著，并且易在体内产生内源性自由基造成细胞膜损伤的缺点，提供了一种枸杞多糖铁络合物的制备方法，本发明先从枸杞干中经过微波浸提、醇沉、脱蛋白、透析等工艺得到枸杞精多糖，以枸杞精多糖铁盐为原料，经过碱化、络合、醇沉、干燥等工艺最终制得枸杞多糖铁络合物，本发明制备得到的枸杞多糖铁络合物不仅可以作为新型补铁剂，稳定性好，对胃肠道无或极少刺激作用，而且结合枸杞多糖自身的生物活性，还具有调节免疫、延缓衰老等作用，在人体释放后可被吸收利用，无毒副作用。

为了解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案是：

（1）称取200～300g枸杞干，将其粉碎、过筛得60～80目枸杞粉末，将枸杞粉末按固液比1:6加入去离子水中，在温度为70～80℃和微波频率为2000～2200MHz下进行微波浸提3～5次，每次浸提5～10min，浸提结后过滤，收集滤液，并将滤液合并，得到枸杞多糖水浸液；

（2）将上述枸杞多糖水浸液按体积比1:2加入质量分数85%乙醇溶液中，搅拌15～20min后在室温下静置10～18h，静置结束后过滤，收集沉淀物，将沉淀物按固液比1：3加入去离子水中混合，得枸杞粗多糖液，再将枸杞多糖液加入总体积3～5%的Sevage试剂进行振荡脱蛋白，振荡10～15min后在4000～6000r/min转速下离心分离得上清液，将上清液装入透析袋中，放入去离子水中透析，每隔3～5h更换一次水，透析20～24h后进行减压蒸馏，将浓缩液喷雾干燥得枸杞精多糖，所述的sevage试剂是氯仿和正丁醇按体积比4:1混合；

（3）取3～5g上述得到的枸杞精多糖溶于30～50mL的蒸馏水中，搅拌溶解后用浓度为3mol/L氢氧化钠溶液调节pH为10～11，调节后向溶液中加入25～30mL质量分数15%碳酸钠溶液，混合后放入水浴中，在80℃水浴下边搅拌边滴加60～100mL浓度为0.5mol/L氯化铁溶液，滴加结束后用浓度为3mol/L氢氧化钠溶液保持pH为10～11，并保持在80℃温度下搅拌回流2～3h，回流结束后过滤，将滤液旋转蒸发浓缩至原体积的20%，得浓缩液；

（4）将上述浓缩液按体积比1:4加入无水乙醇中，搅拌混合后静置3～5h后放入离心分离机中在5000～6000r/min离心分离20～30min，将沉淀物分别用丙酮和无水乙醇洗涤2～3次，将洗涤后的固体真空烘干，烘干后固体再次溶于蒸馏水中，在常温下透析3～5h，透析后旋转蒸发得浓缩液，向浓缩液中加入其体积2～4倍的无水乙醇，分离得沉淀物后分别用丙酮和无水乙醇清洗2～3次，清洗后真空干燥，即可得到枸杞多糖铁络合物。

本发明的应用方法：将本发明制备得到的枸杞多糖铁络合物加入到注射用水中配制成每毫升含铁元素280～320mg的溶液，所述的注射用水为常规无菌去离子注射用水，加入质量分数15％的NaOH溶液调节PH值为9～11，控制温度在55～65℃，然后再加入总质量1～3‰的活性炭，搅拌混合25～35min后用0.20～0.22μm微滤膜过滤，将滤液灭菌，灭菌后的滤液灌装到容器中，用蒸汽加热温度控制在110～130℃，保持15～25min，即得枸杞多糖铁注射液成品。

本发明的有益效果是：

（1）本发明制备得到的枸杞多糖铁络合物可以作为新型补铁剂，稳定性好，对胃肠道无或极少刺激作用；

（2）本发明的枸杞多糖铁络合物结合枸杞多糖自身的生物活性，具有调节免疫、延缓衰老等作用，在人体释放后可被吸收利用，无毒副作用；

（3） 本发明制备工艺简单，稳定可靠，易操作，成本低。

具体实施方式

首先称取200～300g枸杞干，将其粉碎、过筛得60～80目枸杞粉末，将枸杞粉末按固液比1:6加入去离子水中，在温度为70～80℃和微波频率为2000～2200MHz下进行微波浸提3～5次，每次浸提5～10min，浸提结后过滤，收集滤液，并将滤液合并，得到枸杞多糖水浸液；将上述枸杞多糖水浸液按体积比1:2加入质量分数85%乙醇溶液中，搅拌15～20min后在室温下静置10～18h，静置结束后过滤，收集沉淀物，将沉淀物按固液比1：3加入去离子水中混合，得枸杞粗多糖液，再将枸杞多糖液加入总体积3～5%的Sevage试剂进行振荡脱蛋白，振荡10～15min后在4000～6000r/min转速下离心分离得上清液，将上清液装入透析袋中，放入去离子水中透析，每隔3～5h更换一次水，透析20～24h后进行减压蒸馏，将浓缩液喷雾干燥得枸杞精多糖，所述的sevage试剂是氯仿和正丁醇按体积比4:1混合；取3～5g上述得到的枸杞精多糖溶于30～50mL的蒸馏水中，搅拌溶解后用浓度为3mol/L氢氧化钠溶液调节pH为10～11，调节后向溶液中加入25～30mL质量分数15%碳酸钠溶液，混合后放入水浴中，在80℃水浴下边搅拌边滴加60～100mL浓度为0.5mol/L氯化铁溶液，滴加结束后用浓度为3mol/L氢氧化钠溶液保持pH为10～11，并保持在80℃温度下搅拌回流2～3h，回流结束后过滤，将滤液旋转蒸发浓缩至原体积的20%，得浓缩液；将上述浓缩液按体积比1:4加入无水乙醇中，搅拌混合后静置3～5h后放入离心分离机中在5000～6000r/min离心分离20～30min，将沉淀物分别用丙酮和无水乙醇洗涤2～3次，将洗涤后的固体真空烘干，烘干后固体再次溶于蒸馏水中，在常温下透析3～5h，透析后旋转蒸发得浓缩液，向浓缩液中加入其体积2～4倍的无水乙醇，分离得沉淀物后分别用丙酮和无水乙醇清洗2～3次，清洗后真空干燥，即可得到枸杞多糖铁络合物。

实例1

首先称取200g枸杞干，将其粉碎、过筛得60目枸杞粉末，将枸杞粉末按固液比1:6加入去离子水中，在温度为70℃和微波频率为2000MHz下进行微波浸提3次，每次浸提5min，浸提结后过滤，收集滤液，并将滤液合并，得到枸杞多糖水浸液；将上述枸杞多糖水浸液按体积比1:2加入质量分数85%乙醇溶液中，搅拌15min后在室温下静置10h，静置结束后过滤，收集沉淀物，将沉淀物按固液比1：3加入去离子水中混合，得枸杞粗多糖液，再将枸杞多糖液加入总体积3%的Sevage试剂进行振荡脱蛋白，振荡10min后在4000r/min转速下离心分离得上清液，将清液装入透析袋中，放入去离子水中透析，每隔3h更换一次水，透析20h后将溶液减压蒸馏、干燥得枸杞精多糖，所述的sevage试剂是氯仿和正丁醇按体积比4:1混合；取3g上述得到的枸杞多糖溶于30mL的蒸馏水中，搅拌溶解后用浓度为3mol/L氢氧化钠溶液调节pH为10，调节后向溶液中加入25mL质量分数15%碳酸钠溶液，混合后放入水浴中，在80℃水浴下边搅拌边滴加60mL浓度为0.5mol/L氯化铁溶液，滴加结束后用浓度为3mol/L的氢氧化钠溶液保持pH为10，并保持在80℃温度下搅拌回流2h，回流结束后过滤，得滤液旋转蒸发浓缩至原体积的20%，得浓缩液；将上述浓缩液按体积比1:4加入无水乙醇中，搅拌混合后静置3h后放入离心分离机中在5000r/min离心分离20min，将沉淀物分别用丙酮和无水乙醇洗涤2次，将洗涤后的固体真空烘干，烘干后固体再次溶于蒸馏水中，在常温下透析3h，透析后旋转蒸发得浓缩液，向浓缩液中加入其体积2倍的无水乙醇，分离得沉淀物后分别用丙酮和无水乙醇清洗2次，即清洗后真空干燥，即可得到枸杞多糖铁络合物。

将本发明制备得到的枸杞多糖铁络合物加入到注射用水中配制成每毫升含铁元素280mg的溶液，所述的注射用水为常规无菌去离子注射用水，加入质量分数15％的NaOH溶液调节PH值为9，控制温度在55℃，然后再加入总质量1‰的活性炭，搅拌混合25min后用0.20μm微滤膜过滤，将滤液灭菌，灭菌后的滤液灌装到容器中，用蒸汽加热温度控制在110℃，保持15min，即得枸杞多糖铁注射液成品。

实例2

首先称取250g枸杞干，将其粉碎、过筛得70目枸杞粉末，将枸杞粉末按固液比1:6加入去离子水中，在温度为75℃和微波频率为2100MHz下进行微波浸提4次，每次浸提8min，浸提结后过滤，收集滤液，并将滤液合并，得到枸杞多糖水浸液；将上述枸杞多糖水浸液按体积比1:2加入质量分数85%乙醇溶液中，搅拌17min后在室温下静置14h，静置结束后过滤，收集沉淀物，将沉淀物按固液比1：3加入去离子水中混合，得枸杞粗多糖液，再将枸杞多糖液加入总体积4%的Sevage试剂进行振荡脱蛋白，振荡13min后在5000r/min转速下离心分离得上清液，将清液装入透析袋中，放入去离子水中透析，每隔4h更换一次水，透析22h后将溶液减压蒸馏、干燥得枸杞精多糖，所述的sevage试剂是氯仿和正丁醇按体积比4:1混合；取4g上述得到的枸杞多糖溶于40mL的蒸馏水中，搅拌溶解后用浓度为3mol/L氢氧化钠溶液调节pH为10.5，调节后向溶液中加入27mL质量分数15%碳酸钠溶液，混合后放入水浴中，在80℃水浴下边搅拌边滴加80mL浓度为0.5mol/L氯化铁溶液，滴加结束后用浓度为3mol/L的氢氧化钠溶液保持pH为10.5，并保持在80℃温度下搅拌回流2.5h，回流结束后过滤，得滤液旋转蒸发浓缩至原体积的20%，得浓缩液；将上述浓缩液按体积比1:4加入无水乙醇中，搅拌混合后静置4h后放入离心分离机中在5500r/min离心分离25min，将沉淀物分别用丙酮和无水乙醇洗涤2次，将洗涤后的固体真空烘干，烘干后固体再次溶于蒸馏水中，在常温下透析4h，透析后旋转蒸发得浓缩液，向浓缩液中加入其体积3倍的无水乙醇，分离得沉淀物后分别用丙酮和无水乙醇清洗2次，即清洗后真空干燥，即可得到枸杞多糖铁络合物。

将本发明制备得到的枸杞多糖铁络合物加入到注射用水中配制成每毫升含铁元素300mg的溶液，所述的注射用水为常规无菌去离子注射用水，加入质量分数15％的NaOH溶液调节PH值为10，控制温度在60℃，然后再加入总质量2‰的活性炭，搅拌混合30min后用0.21μm微滤膜过滤，将滤液灭菌，灭菌后的滤液灌装到容器中，用蒸汽加热温度控制在120℃，保持20min，即得枸杞多糖铁注射液成品。

实例3

首先称取300g枸杞干，将其粉碎、过筛得80目枸杞粉末，将枸杞粉末按固液比1:6加入去离子水中，在温度为80℃和微波频率为2200MHz下进行微波浸提5次，每次浸提10min，浸提结后过滤，收集滤液，并将滤液合并，得到枸杞多糖水浸液；将上述枸杞多糖水浸液按体积比1:2加入质量分数85%乙醇溶液中，搅拌20min后在室温下静置18h，静置结束后过滤，收集沉淀物，将沉淀物按固液比1：3加入去离子水中混合，得枸杞粗多糖液，再将枸杞多糖液加入总体积5%的Sevage试剂进行振荡脱蛋白，振荡15min后在6000r/min转速下离心分离得上清液，将清液装入透析袋中，放入去离子水中透析，每隔5h更换一次水，透析24h后将溶液减压蒸馏、干燥得枸杞精多糖，所述的sevage试剂是氯仿和正丁醇按体积比4:1混合；取5g上述得到的枸杞多糖溶于50mL的蒸馏水中，搅拌溶解后用浓度为3mol/L氢氧化钠溶液调节pH为11，调节后向溶液中加入30mL质量分数15%碳酸钠溶液，混合后放入水浴中，在80℃水浴下边搅拌边滴加100mL浓度为0.5mol/L氯化铁溶液，滴加结束后用浓度为3mol/L的氢氧化钠溶液保持pH为11，并保持在80℃温度下搅拌回流3h，回流结束后过滤，得滤液旋转蒸发浓缩至原体积的20%，得浓缩液；将上述浓缩液按体积比1:4加入无水乙醇中，搅拌混合后静置5h后放入离心分离机中在6000r/min离心分离30min，将沉淀物分别用丙酮和无水乙醇洗涤3次，将洗涤后的固体真空烘干，烘干后固体再次溶于蒸馏水中，在常温下透析5h，透析后旋转蒸发得浓缩液，向浓缩液中加入其体积4倍的无水乙醇，分离得沉淀物后分别用丙酮和无水乙醇清洗3次，即清洗后真空干燥，即可得到枸杞多糖铁络合物。

将本发明制备得到的枸杞多糖铁络合物加入到注射用水中配制成每毫升含铁元素320mg的溶液，所述的注射用水为常规无菌去离子注射用水，加入质量分数15％的NaOH溶液调节PH值为11，控制温度在65℃，然后再加入总质量3‰的活性炭，搅拌混合35min后用0.22μm微滤膜过滤，将滤液灭菌，灭菌后的滤液灌装到容器中，用蒸汽加热温度控制在130℃，保持25min，即得枸杞多糖铁注射液成品。

Claims (1)

1.一种枸杞多糖铁络合物的制备方法，其特征在于具体制备步骤为：

（1）称取200～300g枸杞干，将其粉碎、过筛得60～80目枸杞粉末，将枸杞粉末按固液比1:6加入去离子水中，在温度为70～80℃和微波频率为2000～2200MHz下进行微波浸提3～5次，每次浸提5～10min，浸提结后过滤，收集滤液，并将滤液合并，得到枸杞多糖水浸液；

（2）将上述枸杞多糖水浸液按体积比1:2加入质量分数85%乙醇溶液中，搅拌15～20min后在室温下静置10～18h，静置结束后过滤，收集沉淀物，将沉淀物按固液比1：3加入去离子水中混合，得枸杞粗多糖液，再将枸杞多糖液加入总体积3～5%的Sevage试剂进行振荡脱蛋白，振荡10～15min后在4000～6000r/min转速下离心分离得上清液，将上清液装入透析袋中，放入去离子水中透析，每隔3～5h更换一次水，透析20～24h后进行减压蒸馏，将浓缩液喷雾干燥得枸杞精多糖，所述的sevage试剂是氯仿和正丁醇按体积比4:1混合；

（3）取3～5g上述得到的枸杞精多糖溶于30～50mL的蒸馏水中，搅拌溶解后用浓度为3mol/L氢氧化钠溶液调节pH为10～11，调节后向溶液中加入25～30mL质量分数15%碳酸钠溶液，混合后放入水浴中，在80℃水浴下边搅拌边滴加60～100mL浓度为0.5mol/L氯化铁溶液，滴加结束后用浓度为3mol/L氢氧化钠溶液保持pH为10～11，并保持在80℃温度下搅拌回流2～3h，回流结束后过滤，将滤液旋转蒸发浓缩至原体积的20%，得浓缩液；

（4）将上述浓缩液按体积比1:4加入无水乙醇中，搅拌混合后静置3～5h后放入离心分离机中在5000～6000r/min离心分离20～30min，将沉淀物分别用丙酮和无水乙醇洗涤2～3次，将洗涤后的固体真空烘干，烘干后固体再次溶于蒸馏水中，在常温下透析3～5h，透析后旋转蒸发得浓缩液，向浓缩液中加入其体积2～4倍的无水乙醇，分离得沉淀物后分别用丙酮和无水乙醇清洗2～3次，清洗后真空干燥，即可得到枸杞多糖铁络合物。