CN106880692A - 一种辣椒叶多酚的提取方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种辣椒叶多酚的提取方法，它是以辣椒叶作为原料，具体操作步骤是：（1）预处理；（2）酶解及超声处理；（3）纯化；（4）干燥，得多酚。本发明的有益效果是，通过复合酶和超声波共同作用于辣椒叶，从辣椒叶中提取多酚，酶作用条件温和，而且还起到破壁的作用，使辣椒叶中的多酚彻底的溶出的作用；超声波提取过程是一个物理过程，提取过程中无化学变化，提取率高且有效保护提取物的功能成分，缩短了破碎时间。该方法可以减少溶剂的用量，提高提取率，提高纯度。

Description

一种辣椒叶多酚的提取方法
技术领域
本发明属植物提取领域，具体涉及的是一种辣椒叶多酚的提取方法。
背景技术
植物多酚是广泛存在于植物体内的重要次生代谢产物，广泛分布于植物体的根、叶、皮、果肉和壳中，具有抗氧化、抗肿瘤、保护肝脏等多种生理功能，是人体每天必须从食物中摄取的抗氧化物质，被称为继膳食纤维之后的第七营养素。按结构将多酚分为以下几类：简单酚类、木脂素类、香豆素类、芪类、黄酮类、酚酸类和鞣质类等化合物。
辣椒（Capsicum annuum L.）是一种药食两用的植物，在我国广泛种植，产量居世界第一位。辣椒叶作为辣椒种植的副产品，不仅具有很高的营养和食用价值，也可作药材用于强健脾胃、活血消肿、杀虫止痒等。辣椒叶中含有丰富的多酚类化合物，具有抗氧化、抗过敏和抗肿瘤等多种活性，广泛应用于食品保鲜，化妆品添加和肿瘤辅助治疗等多方面。目前尚未有高效的方法从辣椒叶中提取多酚类化合物，使得辣椒叶资源长期未得到合理的利用。
现有技术中，植物多酚的提取方法主要有溶液浸提法、超声提取法、微波法等，但是单一的提取方法产率低。
酶是活细胞产生的，并能在细胞内或者细胞外起催化作用的蛋白质。具有高效性、专一性和催化条件温和等特点，可以在常温、常压下分解植物细菌壁，大幅度提高多紛得率，可以最大限度保存多酚的活性，分解或除去杂质，无污染，简化后续的纯化工艺。
而超声波辅助提取法已广泛应用于植物活性成分开发利用中，与传统的回流提取相比，具有提高提取率﹑降低溶剂用量﹑节约能源等优势，更加环保高效。
利用超声波福射可以产生空化效应、机械效应、加热作用、乳化、炉散和搅拌等多种作用，使植物细胞壁发生穿孔，增加分子运动的频率和速度，加强溶剂的穿透力，可快速高效的提取细胞内物质。与传统的水煮、醇沉及回流提取相比，超声可以在较低温度下，避免对多酚的热破坏，预防其水解和氧化，最大限度的保持多盼的生物活性，而且提取工艺简单，缩短提取时间以及有针对性的提高提取量、减少溶刻的用量，节约能源，更加的环保、高效和节能，在多酚提取领域得到了广泛应用。
发明内容
本发明以水取代传统的有机溶剂，同时采用改进的酶解并超声波提取工艺，破坏辣椒叶细胞，促使其中的多酚物质溶出并向外扩散，可以减少溶剂的用量，提高提取率，提高纯度。
本发明的目的是提供一种辣椒叶多酚的提取方法，该方法可以减少溶剂的用量，提高提取率，提高纯度。
为实现以上目的，本发明的一种辣椒叶多酚的提取方法，步骤如下：
（1）预处理：将辣椒叶洗净，沥干水后，在60-80℃温度下烘干，然后切剪成小段，用粉碎机粉碎，过40目筛得到辣椒叶粉末备用；
（2）提取：
酶处理：取步骤（1）中的辣椒叶粉末，按辣椒叶粉末与水(g/ml)1：4-8 的比例加入水，调节其温度至35-55℃，pH 至3.5-4.5，加入纤维素酶、酸性蛋白酶组成的复合酶，酶解2h，得酶解液；所述的纤维素酶、酸性蛋白酶的重量比例为：1-4 ：1；所述的复合酶的总重占辣椒叶粉末的0.8-1.2%；
超声处理：取酶解液用无机酸调PH为0.8-1.2，升温至40-50℃，200W 的功率下超声波处理35-45min；
过滤，收集滤液，减压浓缩除酒精，再真空干燥得辣椒叶多酚粗提物；
(3) 纯化：
a)将所述多酚粗提物加水配成10mg/mL 的溶液，流过HP-20 型大孔树脂进行吸附，流速为4BV/h，吸附时间为3h，然后水浴振荡24h，水浴温度为25℃，振荡频率为120r/min ；
b)将吸附后的树脂过滤，蒸馏水洗两次后滤干，用乙醇进行动态洗脱，洗脱速率为2BV/h，乙醇浓度为70%，减压浓缩，真空干燥，得到辣椒叶总多酚。
优选的，所述无机酸为盐酸。
进一步优选的，所述减压浓缩的温度为70～75℃。
更进一步优选的，所述真空干燥是真空度控制在一0.08Mpa，温度控制在60～70℃。
本发明的有益效果为：
（1）通过复合酶和超声波共同作用于原料，从原料中提取多酚，酶作用条件温和，而且还起到破壁的作用，使原料中的多酚彻底的溶出的作用；超声波提取过程是一个物理过程，提取过程中无化学变化，被浸提的生物活性物质在短时间内保持不变，缩短了破碎时间；
（2）利用超声波产生的强烈振动、高的加速度、搅拌作用等可加速植物有效成分的溶出，从而提高了提取率，节约了溶剂。
（3）以水取代传统的有机溶剂，同时采用改进的酶解并超声波提取工艺处理提取辣椒叶中多酚，耗时短；超声功率、提取时间、提取剂及其浓度、料液比等提取工艺条件均采取最优，提取率高且有效保护提取物的功能成分；可以减少溶剂的用量，提高提取率，提高纯度。
具体实施方式
下面以实施例作进一步说明，但本发明不局限于这些实施例。
实施例1
（1）预处理：将辣椒叶洗净，沥干水后，在60-80℃温度下烘干，然后切剪成小段，用粉碎机粉碎，过40目筛得到辣椒叶粉末备用。
（2）提取：
酶处理：取步骤（1）中的辣椒叶粉末100g，加入800ml 的纯净水，调节其温度至30℃，pH 至3.5，加入0.8g由纤维素酶、酸性蛋白酶（1:1）组成的复合酶，酶解2h，得酶解液；
超声处理：取酶解液用盐酸调PH为0.8，升温至40℃，200W 的功率下超声波处理35min；
过滤，收集滤液，70～75℃减压浓缩除酒精，再在真空度控制在一0.08Mpa，温度控制在60～70℃真空干燥得辣椒叶多酚粗提物。
(3) 纯化：
a)将所述多酚粗提物加水配成10mg/mL 的溶液，流过HP-20 型大孔树脂进行吸附，流速为4BV/h，吸附时间为3h，然后水浴振荡24h，水浴温度为25℃，振荡频率为120r/min ；
b)将吸附后的树脂过滤，蒸馏水洗两次后滤干，用乙醇进行动态洗脱，洗脱速率为2BV/h，乙醇浓度为70%，收集洗脱液，70～75℃减压浓缩除酒精，再在真空度控制在一0.08Mpa，温度控制在60～70℃，得到辣椒叶总多酚。
经以上步骤得到辣椒叶多酚的纯度为78.4%。
实例2
（1）预处理：将辣椒叶洗净，沥干水后，在60-80℃温度下烘干，然后切剪成小段，用粉碎机粉碎，过40目筛得到辣椒叶粉末备用。
（2）提取：
酶处理：取步骤（1）中的辣椒叶粉末100g，加入800ml 的纯净水，调节其温度至30℃，pH 至4.5，加入1.2g由纤维素酶、酸性蛋白酶（4:1）组成的复合酶，酶解2h，得酶解液；
超声处理：取酶解液用盐酸调PH为1.2，升温至50℃，200W 的功率下超声波处理45min；
过滤，收集滤液，70～75℃减压浓缩除酒精，再在真空度控制在一0.08Mpa，温度控制在60～70℃真空干燥得辣椒叶多酚粗提物。
(3) 纯化：
a)将所述多酚粗提物加水配成10mg/mL 的溶液，流过HP-20 型大孔树脂进行吸附，流速为4BV/h，吸附时间为3h，然后水浴振荡24h，水浴温度为25℃，振荡频率为120r/min ；
b)将吸附后的树脂过滤，蒸馏水洗两次后滤干，用乙醇进行动态洗脱，洗脱速率为2BV/h，乙醇浓度为70%，收集洗脱液，70～75℃减压浓缩除酒精，再在真空度控制在一0.08Mpa，温度控制在60～70℃，得到辣椒叶总多酚。
经以上步骤得到辣椒叶多酚的纯度为77.5%。
实施例3
（1）预处理：将辣椒叶洗净，沥干水后，在60-80℃温度下烘干，然后切剪成小段，用粉碎机粉碎，过40目筛得到辣椒叶粉末备用。
（2）提取：
酶处理：取步骤（1）中的辣椒叶粉末100g，加入600ml 的纯净水，调节其温度至45℃，pH 至4.0，加入1g由纤维素酶、酸性蛋白酶（2.5:1）组成的复合酶，酶解2h，得酶解液；
超声处理：取酶解液用盐酸调PH为1.0，升温至45℃，200W 的功率下超声波处理40min；
过滤，收集滤液，70～75℃减压浓缩除酒精，再在真空度控制在一0.08Mpa，温度控制在60～70℃真空干燥得辣椒叶多酚粗提物。
(3) 纯化：
a)将所述多酚粗提物加水配成10mg/mL 的溶液，流过HP-20 型大孔树脂进行吸附，流速为4BV/h，吸附时间为3h，然后水浴振荡24h，水浴温度为25℃，振荡频率为120r/min ；
b)将吸附后的树脂过滤，蒸馏水洗两次后滤干，用乙醇进行动态洗脱，洗脱速率为2BV/h，乙醇浓度为70%，收集洗脱液，70～75℃减压浓缩除酒精，再在真空度控制在一0.08Mpa，温度控制在60～70℃，得到辣椒叶总多酚。
经以上步骤得到辣椒叶多酚的纯度为79.2%。

Claims (4)

1.一种辣椒叶多酚的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）预处理：将辣椒叶洗净，沥干水后，在60-80℃温度下烘干，然后切剪成小段，用粉碎机粉碎，过40目筛得到辣椒叶粉末备用；
（2）提取：
酶处理：取步骤（1）中的辣椒叶粉末，按辣椒叶粉末与水(g/ml)1：4-8 的比例加入水，调节其温度至35-55℃，pH 至3.5-4.5，加入纤维素酶、酸性蛋白酶组成的复合酶，酶解2h，得酶解液；所述的纤维素酶、酸性蛋白酶的重量比例为：1-4 ：1；所述的复合酶的总重占辣椒叶粉末的0.8-1.2%；
超声处理：取酶解液用无机酸调PH为0.8-1.2，升温至40-50℃，200W 的功率下超声波处理35-45min；
过滤，收集滤液，减压浓缩除酒精，再真空干燥得辣椒叶多酚粗提物；
(3) 纯化：
a)将所述多酚粗提物加水配成10mg/mL 的溶液，流过HP-20 型大孔树脂进行吸附，流速为4BV/h，吸附时间为3h，然后水浴振荡24h，水浴温度为25℃，振荡频率为120r/min ；
b)将吸附后的树脂过滤，蒸馏水洗两次后滤干，用乙醇进行动态洗脱，洗脱速率为2BV/h，乙醇浓度为70%，减压浓缩，真空干燥，得到辣椒叶总多酚。
2.根据权利要求1 所述的一种辣椒叶多酚的提取方法，其特征在于：步骤（2）中，所述无机酸为盐酸。
3.根据权利要求1 所述的一种辣椒叶多酚的提取方法，其特征在于：所述减压浓缩的温度为70～75℃。
4.根据权利要求1 所述的一种辣椒叶多酚的提取方法，其特征在于：所述真空干燥是真空度控制在一0.08Mpa，温度控制在60～70℃。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107536870A (zh) * 2017-09-06 2018-01-05 哈尔滨商业大学 一种用生物工程技术获得桑葚次生代谢产物多酚的方法
CN111467450A (zh) * 2020-05-09 2020-07-31 渠志灿 一种基于辣椒叶制备得到的具有抗炎症功能的天然植物制剂及其制备方法
CN111568973A (zh) * 2020-07-03 2020-08-25 长治市全民大健康产业研究院 一种辣椒叶活性成分的提取精制工艺

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