CN111019984A - 一种提取燕窝中唾液酸的高效方法 - Google Patents
一种提取燕窝中唾液酸的高效方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN111019984A CN111019984A CN201911195541.3A CN201911195541A CN111019984A CN 111019984 A CN111019984 A CN 111019984A CN 201911195541 A CN201911195541 A CN 201911195541A CN 111019984 A CN111019984 A CN 111019984A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- cubilose
- nest
- sialic acid
- drying
- filtering
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Withdrawn
Links
- SQVRNKJHWKZAKO-UHFFFAOYSA-N beta-N-Acetyl-D-neuraminic acid Natural products CC(=O)NC1C(O)CC(O)(C(O)=O)OC1C(O)C(O)CO SQVRNKJHWKZAKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 50
- SQVRNKJHWKZAKO-OQPLDHBCSA-N sialic acid Chemical compound CC(=O)N[C@@H]1[C@@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)OC1[C@H](O)[C@H](O)CO SQVRNKJHWKZAKO-OQPLDHBCSA-N 0.000 title claims abstract description 48
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 30
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims abstract description 36
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims abstract description 28
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims abstract description 15
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 57
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 56
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 56
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 claims description 56
- 239000002994 raw material Substances 0.000 claims description 36
- 244000000626 Daucus carota Species 0.000 claims description 32
- 235000005770 birds nest Nutrition 0.000 claims description 32
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 claims description 32
- 235000005765 wild carrot Nutrition 0.000 claims description 32
- 241000411851 herbal medicine Species 0.000 claims description 29
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 27
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 27
- 229940109850 royal jelly Drugs 0.000 claims description 24
- 108091005658 Basic proteases Proteins 0.000 claims description 23
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 claims description 23
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 claims description 23
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 claims description 23
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 claims description 23
- 108010007119 flavourzyme Proteins 0.000 claims description 23
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 claims description 23
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 23
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 claims description 23
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 22
- 238000001816 cooling Methods 0.000 claims description 21
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 20
- 239000002002 slurry Substances 0.000 claims description 19
- RQFQJYYMBWVMQG-IXDPLRRUSA-N chitotriose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](N)[C@H](O)O[C@H](CO)[C@H]1O[C@H]1[C@H](N)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)N)[C@@H](CO)O1 RQFQJYYMBWVMQG-IXDPLRRUSA-N 0.000 claims description 16
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims description 16
- 238000009210 therapy by ultrasound Methods 0.000 claims description 16
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 13
- 230000000415 inactivating effect Effects 0.000 claims description 13
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 13
- 239000000047 product Substances 0.000 claims description 13
- 238000002791 soaking Methods 0.000 claims description 11
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 10
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 claims description 10
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 10
- 229920001661 Chitosan Polymers 0.000 claims description 7
- 108090000526 Papain Proteins 0.000 claims description 7
- 239000004365 Protease Substances 0.000 claims description 7
- 229940055729 papain Drugs 0.000 claims description 7
- 235000019834 papain Nutrition 0.000 claims description 7
- 239000007974 sodium acetate buffer Substances 0.000 claims description 7
- BHZOKUMUHVTPBX-UHFFFAOYSA-M sodium acetic acid acetate Chemical compound [Na+].CC(O)=O.CC([O-])=O BHZOKUMUHVTPBX-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 7
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 claims description 5
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 claims description 4
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 4
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 claims description 3
- 239000009636 Huang Qi Substances 0.000 claims description 2
- 244000269722 Thea sinensis Species 0.000 claims description 2
- 238000010298 pulverizing process Methods 0.000 claims description 2
- 239000006049 herbal material Substances 0.000 claims 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 8
- 230000036039 immunity Effects 0.000 abstract description 4
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 abstract description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 abstract description 3
- 230000032683 aging Effects 0.000 abstract description 2
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 abstract description 2
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 abstract description 2
- 230000006386 memory function Effects 0.000 abstract description 2
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 abstract description 2
- 238000009777 vacuum freeze-drying Methods 0.000 description 17
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 15
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 15
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 15
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 13
- 239000004744 fabric Substances 0.000 description 12
- 239000000463 material Substances 0.000 description 9
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 7
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 7
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 7
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 7
- 241001061264 Astragalus Species 0.000 description 6
- IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-M Nitrite anion Chemical compound [O-]N=O IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 6
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 6
- 235000017784 Mespilus germanica Nutrition 0.000 description 5
- 244000182216 Mimusops elengi Species 0.000 description 5
- 235000000560 Mimusops elengi Nutrition 0.000 description 5
- 235000007837 Vangueria infausta Nutrition 0.000 description 5
- 235000006533 astragalus Nutrition 0.000 description 5
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 5
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 5
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 5
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 5
- 239000004627 regenerated cellulose Substances 0.000 description 5
- 238000000859 sublimation Methods 0.000 description 5
- 230000008022 sublimation Effects 0.000 description 5
- 210000004233 talus Anatomy 0.000 description 5
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 4
- 230000009849 deactivation Effects 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 3
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 235000013402 health food Nutrition 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- 210000003296 saliva Anatomy 0.000 description 3
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 3
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241001254604 Angelica pubescens Species 0.000 description 2
- 102000007644 Colony-Stimulating Factors Human genes 0.000 description 2
- 108010071942 Colony-Stimulating Factors Proteins 0.000 description 2
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 2
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 244000241838 Lycium barbarum Species 0.000 description 2
- 235000015459 Lycium barbarum Nutrition 0.000 description 2
- SQVRNKJHWKZAKO-PFQGKNLYSA-N N-acetyl-beta-neuraminic acid Chemical compound CC(=O)N[C@@H]1[C@@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)O[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)CO SQVRNKJHWKZAKO-PFQGKNLYSA-N 0.000 description 2
- IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-N Nitrous acid Chemical compound ON=O IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 2
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 2
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 2
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 2
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 2
- 230000006870 function Effects 0.000 description 2
- 239000000413 hydrolysate Substances 0.000 description 2
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 2
- BQINXKOTJQCISL-GRCPKETISA-N keto-neuraminic acid Chemical compound OC(=O)C(=O)C[C@H](O)[C@@H](N)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO BQINXKOTJQCISL-GRCPKETISA-N 0.000 description 2
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 2
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 2
- CERZMXAJYMMUDR-UHFFFAOYSA-N neuraminic acid Natural products NC1C(O)CC(O)(C(O)=O)OC1C(O)C(O)CO CERZMXAJYMMUDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 2
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 description 2
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 2
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 2
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 2
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 2
- VBEQCZHXXJYVRD-GACYYNSASA-N uroanthelone Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O)C(C)C)[C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CS)NC(=O)CNC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O)C(C)C)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 VBEQCZHXXJYVRD-GACYYNSASA-N 0.000 description 2
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 2
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 2
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 2
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 2
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 2
- HVCOBJNICQPDBP-UHFFFAOYSA-N 3-[3-[3,5-dihydroxy-6-methyl-4-(3,4,5-trihydroxy-6-methyloxan-2-yl)oxyoxan-2-yl]oxydecanoyloxy]decanoic acid;hydrate Chemical compound O.OC1C(OC(CC(=O)OC(CCCCCCC)CC(O)=O)CCCCCCC)OC(C)C(O)C1OC1C(O)C(O)C(O)C(C)O1 HVCOBJNICQPDBP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 description 1
- 240000001810 Angelica gigas Species 0.000 description 1
- 235000018865 Angelica gigas Nutrition 0.000 description 1
- 241000208173 Apiaceae Species 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010011224 Cough Diseases 0.000 description 1
- 208000019505 Deglutition disease Diseases 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 102000009024 Epidermal Growth Factor Human genes 0.000 description 1
- 101800003838 Epidermal growth factor Proteins 0.000 description 1
- 229930186217 Glycolipid Natural products 0.000 description 1
- 208000034507 Haematemesis Diseases 0.000 description 1
- 208000000616 Hemoptysis Diseases 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 206010062717 Increased upper airway secretion Diseases 0.000 description 1
- 241001106041 Lycium Species 0.000 description 1
- 229910002651 NO3 Inorganic materials 0.000 description 1
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N Nitrate Chemical compound [O-][N+]([O-])=O NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N Nitric acid Chemical compound O[N+]([O-])=O GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010067171 Regurgitation Diseases 0.000 description 1
- 241000219100 Rhamnaceae Species 0.000 description 1
- 241000612118 Samolus valerandi Species 0.000 description 1
- 206010039966 Senile dementia Diseases 0.000 description 1
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000208292 Solanaceae Species 0.000 description 1
- 239000005862 Whey Substances 0.000 description 1
- 102000007544 Whey Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010046377 Whey Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241001247821 Ziziphus Species 0.000 description 1
- 240000000038 Ziziphus mauritiana Species 0.000 description 1
- 235000006545 Ziziphus mauritiana Nutrition 0.000 description 1
- 235000008529 Ziziphus vulgaris Nutrition 0.000 description 1
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 description 1
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N acetonitrile Substances CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 1
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 description 1
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 1
- GNNALEGJVYVIIH-UHFFFAOYSA-N benzene-1,2-diamine;hydrochloride Chemical compound Cl.NC1=CC=CC=C1N GNNALEGJVYVIIH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- HQABUPZFAYXKJW-UHFFFAOYSA-N butan-1-amine Chemical compound CCCCN HQABUPZFAYXKJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000032823 cell division Effects 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 235000009508 confectionery Nutrition 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 238000009795 derivation Methods 0.000 description 1
- 238000001212 derivatisation Methods 0.000 description 1
- 210000002249 digestive system Anatomy 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 208000001848 dysentery Diseases 0.000 description 1
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 description 1
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 1
- 230000000369 enteropathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 229940116977 epidermal growth factor Drugs 0.000 description 1
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 1
- 210000003746 feather Anatomy 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 1
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 210000002216 heart Anatomy 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 210000004251 human milk Anatomy 0.000 description 1
- 235000020256 human milk Nutrition 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000007654 immersion Methods 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000015110 jellies Nutrition 0.000 description 1
- 239000008274 jelly Substances 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 201000004792 malaria Diseases 0.000 description 1
- 239000002398 materia medica Substances 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 229910017604 nitric acid Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 208000026435 phlegm Diseases 0.000 description 1
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 1
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 244000144977 poultry Species 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 1
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 238000005728 strengthening Methods 0.000 description 1
- 208000011117 substance-related disease Diseases 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000001256 tonic effect Effects 0.000 description 1
- 201000008827 tuberculosis Diseases 0.000 description 1
- 238000004506 ultrasonic cleaning Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
- C12P19/26—Preparation of nitrogen-containing carbohydrates
Landscapes
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明公开了一种提取燕窝中唾液酸的高效方法。所述从燕窝中提取唾液酸的高效方法包括以下步骤：Ⅰ.预处理；Ⅱ.提取；Ⅲ.过滤、干燥。本发明所述提取燕窝中唾液酸的高效方法，提取效率高，得到的燕窝唾液酸纯度高，对神经细胞具有保护与稳定作用，具有抗衰老、改善记忆功能、增强免疫力等功效，且工艺简单，使用方便，提取成本低，有工业化生产的实用价值。
Description
技术领域
本发明涉及食品加工技术领域，具体涉及一种提取燕窝中唾液酸的高效方法。
背景技术
燕窝始载于《本草逢原》，其性味甘、平，归心、肺、肾经，具有养阴润燥，益气补中的功效，临床可用于治疗虚损，痨瘵，咳嗽痰喘，咯血，吐血，久痢，久疟，噎膈反胃等症，向以贵重药材及美味佳肴而在民间广为流传使用，是宜药宜膳的高级保健品。燕窝是雨燕科金丝燕分泌的唾液或唾液与其绒羽混合粘结所筑成的巢穴，主产于马来西亚、印度尼西亚、泰国、缅甸等东南亚国家及我国的福建、广东沿海地带。燕窝含有大量粘蛋白、糖蛋白、唾液酸、微量元素、表皮生长因子等多种生物活性成分，具有抗病毒、促细胞分裂、提高免疫力作用，一向以贵重药材及美味佳肴而在民间流传，作为药食两用的高档滋补品，深受国内外消费者的喜爱。燕窝主要成分有水溶性蛋白质、碳水化合物、微量元素(钙、磷、铁、钠、钾等)及人体必需的重要成分“神经氨酸”也被称为“燕窝酸”。燕窝酸可促进大脑神经细胞的信息传递速度，母乳中的燕窝酸为婴儿早期生长提供免疫力，提高肠道对于维生素及矿物质的吸收能力。由于燕窝酸在通过消化系统时不会被消化道的酶降解，可通过消化道进入肠道阻止肠道致病菌及病毒与细胞的吸附，对抵抗多种病菌起重要作用。燕窝中含有三种不同的营养物质：唾液酸Sialicacid(N-acetylneuramicacid)，表皮生长因子(EGF)和集落刺激因子(CSF)。
唾液酸又称神经氨酸，广泛存在于动物组织及微生物中，通常位于细胞膜最外层的糖类部分和分泌的糖复合物(糖脂、糖蛋白和脂多糖)的关键位置，是糖复合物结构和功能多样化的重要物质基础，具有提高婴儿智力和记忆力、抗老年痴呆、抗识别、抗病毒和提高肠道对维生素及矿物质的吸收等生理作用。唾液酸在燕窝中含量最高，达100g/kg，其次，唾液酸在禽蛋、乳清等原料中含量相对丰富，分别为0.3g/kg，3g/kg。唾液酸在生物体中主要有3种状态：蛋白质结合状态、低聚糖结合状态和游离状态，其中蛋白质结合和低聚糖结合状态为主要存在状态，其中结合态形式存在的燕窝唾液酸其功效远远不及以游离态形式存在的唾液酸。
所以本发明致力于寻找一种新型的提高燕窝唾液游离酸的方法，尽可能地将燕窝中以结合态形式存在的唾液酸转化为以游离态形式存在的唾液酸。
发明内容
针对上述现有技术中存在的不足，本发明提供了一种提取燕窝中唾液酸的高效方法。
一种提取燕窝中唾液酸的高效方法，包括以下步骤：
Ⅰ.预处理：燕窝原料经干燥、粉碎处理后，得到预处理的燕窝；
Ⅱ.提取：向预处理的燕窝中加入预处理的燕窝体积10-30倍的水，搅拌均匀，接着在30-45℃下超声15-40min，得到燕窝浆液；接着向燕窝浆液中加入胰蛋白酶、碱性蛋白酶、风味蛋白酶、胃蛋白酶、酶稳定剂，所述燕窝浆液、胰蛋白酶、碱性蛋白酶、风味蛋白酶、胃蛋白酶、酶稳定剂的质量比为100：(0.5-1)：(0.5-1)：(0.5-1)：(0.5-1)：(0.01-0.05)，在40-60℃下进行酶解2-7h，置于100-105℃下灭酶活5-10min，冷却，得到酶解液；
Ⅲ.过滤、干燥：离心处理上述酶解液，所得上清液经过滤、真空冷冻干燥处理后，即得产品。
优选地，所述提取燕窝中唾液酸的高效方法，包括以下步骤：
Ⅰ.预处理：先将燕窝原料置于燕窝原料质量20-30倍的复合蜂王浆制剂中，在30-45℃下浸泡1-4h，过滤，用水清洗1-3次，经干燥、粉碎处理后，得到预处理的燕窝；
Ⅱ.提取：向预处理的燕窝中加入预处理的燕窝体积10-30倍的水，搅拌均匀，接着在30-45℃下超声15-40min，得到燕窝浆液；接着向燕窝浆液中加入胰蛋白酶、碱性蛋白酶、风味蛋白酶、胃蛋白酶、酶稳定剂，所述燕窝浆液、胰蛋白酶、碱性蛋白酶、风味蛋白酶、胃蛋白酶、酶稳定剂的质量比为100：(0.5-1)：(0.5-1)：(0.5-1)：(0.5-1)：(0.01-0.05)，在40-60℃下进行酶解2-7h，置于100-105℃下灭酶活5-10min，冷却，得到酶解液；
Ⅲ.过滤、干燥：离心处理上述酶解液，所得上清液经过滤、真空冷冻干燥处理后，即得产品。
优选地，所述步骤Ⅰ预处理为：先将燕窝原料置于燕窝原料质量20-30倍的复合蜂王浆制剂中，在30-45℃下浸泡1-4h，过滤，用水清洗1-3次，经干燥、粉碎处理后，得到燕窝粉末；将燕窝粉末继续置于30-45℃的水中浸泡1-4h，所述燕窝粉末、水的质量体积比为1：(10-20)(g/mL)，过滤，得到预处理的燕窝。
优选地，所述步骤Ⅱ提取为：向预处理的燕窝中加入预处理的燕窝体积10-30倍的水，搅拌均匀，接着在30-45℃下超声15-40min，得到燕窝浆液；调节燕窝浆液的pH至8-9，接着加入胰蛋白酶、碱性蛋白酶、酶稳定剂，所述燕窝浆液、胰蛋白酶、碱性蛋白酶、酶稳定剂的质量比为100：(0.5-1)：(0.5-1)：(0.01-0.05)，在40-60℃下进行酶解2-6h，冷却，得到酶解液A；调节酶解液A的pH为4-5，加入风味蛋白酶、胃蛋白酶，所述酶解液A、风味蛋白酶、胃蛋白酶的质量比为100：(0.5-1)：(0.5-1)，在30-50℃下进行酶解，置于100-105℃下灭酶活5-10min，冷却，得到酶解液。
所述酶稳定剂包括6-葡萄糖-A-葡萄糖苷和/或壳寡糖。
优选地，所述酶稳定剂由6-葡萄糖-A-葡萄糖苷、壳寡糖按(1-3)：(1-3)的质量比混合而成。
所述壳寡糖的制备方法为：按1：(0.04-0.06)：(80-95)的质量比，将壳聚糖、木瓜蛋白酶、醋酸-醋酸钠缓冲溶液混合，混匀，得到混合溶液，置于40-50℃下酶解3-6h，灭酶活，冷却后调节pH为中性，过滤，所得滤液经透析、干燥处理后即得。
所述复合蜂王浆制剂的制备方法为：中草药原料经干燥、粉碎处理后，得到中草药粉末，接着向中草药粉末中加入中草药粉末质量10-20倍的水进行煎煮30-60min，过滤，浓缩至含水量为10-15wt％，得到中草药提取物；按(1-2)：(20-40)：(40-80)的质量比，将中草药提取物、蜂王浆、水混合，搅拌均匀，灭菌，即得。
所述中草药原料包括黄芪、独活、红枣、枸杞中的一种或多种。
优选地，所述中草药原料由黄芪、独活、红枣、枸杞按(1-3)：(1-3)：(1-3)：(1-3)的质量比组成。
由于采用了上述技术方案，本发明与现有技术相比具有如下有益效果：本发明所述提取燕窝中唾液酸的高效方法，提取效率高，得到的燕窝唾液酸纯度高，对神经细胞具有保护与稳定作用，具有抗衰老、改善记忆功能、增强免疫力等功效，且工艺简单，使用方便，提取成本低，有工业化生产的实用价值。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明的上述发明内容作进一步的详细描述，但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于下述实施例。
实施例中各原料及设备介绍：
燕窝原料，品种白燕，购自马来西亚瑞玛燕窝有限公司。
蜂王浆，种类春浆，产地云南，购自云南中蜂源头厂家。
黄芪，拉丁学名：Astragalus membranaceus(Fisch.)Bunge.，蝶形花科黄芪属植物干燥根，产地甘肃，购自陇南市武都区华盛中药材种植农民专业合作社。
独活，拉丁学名：Angelica pubescens Maxim.f.biserrata Shan et Yuan，为伞形科植物重齿毛当归的的干燥根，产地甘肃，购自成都德音电子商务有限公司。
红枣，拉丁学名：Ziziphus jujuba Mill.，为鼠李科枣属植物的果实，产地新疆，去核，购自泊头市均旺保鲜冷库。
枸杞，拉丁学名：Lycium barbarumL.，为茄科枸杞属的果实，品种宁夏枸杞，购自安国市御颜坊中药材有限公司。
胰蛋白酶，酶活力为10万U/g，食品级，购自世纪华星生物工程源头厂家。
碱性蛋白酶，酶活力为20万/g，食品级，购自世纪华星生物工程源头厂家。
风味蛋白酶，酶活力为3万U/g，食品级，购自南宁东恒华道生物科技有限责任公司。
胃蛋白酶，酶活力10万U/g，食品级，购自郑州万瑞达化工产品有限公司。
6-葡萄糖-A-葡萄糖苷，CAS号：499-40-1，分子量为3000，购自汉邦环宇多糖生物科技(河源)有限公司。
壳聚糖，CAS号：9012-76-4，粒度80目，食品级，购自武汉远成共创科技有限公司。
醋酸-醋酸钠缓冲溶液的配制方法为：把3.86g冰醋酸和2.93g醋酸钠加入到1L的蒸馏水中，混匀后即可。
木瓜蛋白酶，酶活力为20万U/g，食品级，购自世纪华星生物工程源头厂家。
再生纤维素透析袋，直径6.4mm，截留分子量为3500Da，购自上海联迈生物工程有限公司。
超声设备为SB25-12 DTD型超声波清洗机，购自宁波新芝生物科技股份有限公司。
离心设备为TDL-5型低速大容量离心机，购自上海安亭科学仪器厂。
700Da超滤膜，材质为GE，型号为DL8040F，购自美国通用电气公司。
真空冷冻干燥设备为FD-100S型真空冷冻干燥机，购自北京惠城佳仪科技有限公司。
实施例1
一种提取燕窝中唾液酸的高效方法，包括以下步骤：
Ⅰ.预处理：先将燕窝原料置于45℃下干燥至含水量为10％，粉碎至40目，得到预处理的燕窝；
Ⅱ.提取：向预处理的燕窝中加入预处理的燕窝质量20倍的去离子水，置于40℃、1800r/min的条件下搅拌30min，接着在35℃下超声30min，所述超声处理的工作频率为40kHz，所述超声功率为500W，得到燕窝浆液；接着向燕窝浆液中加入胰蛋白酶、碱性蛋白酶、风味蛋白酶、胃蛋白酶、酶稳定剂，所述燕窝浆液、胰蛋白酶、碱性蛋白酶、风味蛋白酶、胃蛋白酶、酶稳定剂的质量比为100：0.5：0.5：0.5：0.5：0.02，在50℃下进行酶解4h，接着置于100℃下灭酶活8min，冷却至25℃，得到酶解液；
Ⅲ.过滤、干燥：将酶解液置于25℃、5000r/min的条件下离心10min，所得上清液接着用700Da超滤膜进行超滤处理，其中所述超滤处理的分离温度为45℃，工作压力为0.1MPa，超滤时间60min，得到超滤液；接着对超滤液进行真空冷冻干燥，所述真空冷冻干燥的条件是控制物料厚度10mm，设定预冻温度为-30℃，当样品温度降到设定温度后保持2h，设定升华温度为15℃，解析温度为35℃，真空度30Pa，真空冷冻干燥时间为24h，即得产品。
所述酶稳定剂由6-葡萄糖-A-葡萄糖苷、壳寡糖按1：1的质量比混合而成。
所述壳寡糖的制备方法为：按1：0.05：90的质量比，将壳聚糖、木瓜蛋白酶、醋酸-醋酸钠缓冲溶液混合，在20℃下以600r/min搅拌20min，得到混合溶液，接着将所得混合溶液置于45℃下酶解3h，90℃下保温10min，灭酶活，冷却至25℃，再用0.6mol/L NaOH水溶液调节pH至7，经200目滤布过滤后，得到滤液，接着将所得滤液置于15℃下透析24h，其中所用透析袋为截留分子量为3500Da的再生纤维素透析袋，每8h换一次蒸馏水，得到透析液；将透析液置于50℃、绝对压强为0.02MPa的条件下浓缩至含水量为8wt％，即得。
实施例2
一种提取燕窝中唾液酸的高效方法，包括以下步骤：
Ⅰ预处理：先将燕窝原料置于燕窝原料质量25倍的复合蜂王浆制剂中，在35℃下浸泡1h，经200目滤布过滤，接着用燕窝质量3倍的去离子水清洗1次，置于45℃下干燥至含水量为10％，粉碎至40目，得到预处理的燕窝；
Ⅱ.提取：向预处理的燕窝中加入预处理的燕窝质量20倍的去离子水，置于40℃、1800r/min的条件下搅拌30min，接着在35℃下超声30min，所述超声处理的工作频率为40kHz，所述超声功率为500W，得到燕窝浆液；接着向燕窝浆液中加入胰蛋白酶、碱性蛋白酶、风味蛋白酶、胃蛋白酶、酶稳定剂，所述燕窝浆液、胰蛋白酶、碱性蛋白酶、风味蛋白酶、胃蛋白酶、酶稳定剂的质量比为100：0.5：0.5：0.5：0.5：0.02，在50℃下进行酶解4h，接着置于100℃下灭酶活8min，冷却至25℃，得到酶解液；
Ⅲ.过滤、干燥：将酶解液置于25℃、5000r/min的条件下离心10min，所得上清液接着用700Da超滤膜进行超滤处理，其中所述超滤处理的分离温度为45℃，工作压力为0.1MPa，超滤时间60min，得到超滤液；接着对超滤液进行真空冷冻干燥，所述真空冷冻干燥的条件是控制物料厚度10mm，设定预冻温度为-30℃，当样品温度降到设定温度后保持2h，设定升华温度为15℃，解析温度为35℃，真空度30Pa，真空冷冻干燥时间为24h，即得产品。
所述酶稳定剂由6-葡萄糖-A-葡萄糖苷、壳寡糖按1：1的质量比混合而成。
所述复合蜂王浆制剂的制备方法为：按1：1：1：1的质量比，将黄芪、独活、红枣、枸杞混合，置于55℃下干燥48h，粉碎至40目，得到中草药粉末，接着向中草药粉末中加入中草药粉末质量10倍的去离子水进行煎煮，煎煮的温度为90℃，煎煮时间30min，经100目滤布过滤，得到过滤液，所得过滤液再置于50℃、绝对压强为0.08MPa的条件下浓缩，浓缩至含水量为12wt％，即得中草药提取物；按1：30：60的质量比，将中草药提取物、蜂王浆、水混合，在65℃、800r/min的条件下搅拌30min，再置于105℃下灭菌5min，即得。
所述壳寡糖的制备方法为：按1：0.05：90的质量比，将壳聚糖、木瓜蛋白酶、醋酸-醋酸钠缓冲溶液混合，在20℃下以600r/min搅拌20min，得到混合溶液，接着将所得混合溶液置于45℃下酶解3h，90℃下保温10min，灭酶活，冷却至25℃，再用0.6mol/L NaOH水溶液调节pH至7，经200目滤布过滤后，得到滤液，接着将所得滤液置于15℃下透析24h，其中所用透析袋为截留分子量为3500Da的再生纤维素透析袋，每8h换一次蒸馏水，得到透析液；将透析液置于50℃、绝对压强为0.02MPa的条件下浓缩至含水量为8wt％，即得。
实施例3
一种提取燕窝中唾液酸的高效方法，包括以下步骤：
Ⅰ预处理：先将燕窝原料置于燕窝原料质量25倍的复合蜂王浆制剂中，在35℃下浸泡1h，经200目滤布过滤，接着用燕窝质量3倍的去离子水清洗1次，置于45℃下干燥至含水量为10％，粉碎至40目，得到燕窝粉末；将燕窝粉末继续置于35℃的去离子水中浸泡2h，所述燕窝粉末、去离子水的质量体积比为1：15(g/mL)，经200目滤布过滤，得到预处理的燕窝；
Ⅱ.提取：向预处理的燕窝中加入预处理的燕窝质量20倍的去离子水，置于40℃、1800r/min的条件下搅拌30min，接着在35℃下超声30min，所述超声处理的工作频率为40kHz，所述超声功率为500W，得到燕窝浆液；接着向燕窝浆液中加入胰蛋白酶、碱性蛋白酶、风味蛋白酶、胃蛋白酶、酶稳定剂，所述燕窝浆液、胰蛋白酶、碱性蛋白酶、风味蛋白酶、胃蛋白酶、酶稳定剂的质量比为100：0.5：0.5：0.5：0.5：0.02，在50℃下进行酶解4h，接着置于100℃下灭酶活8min，冷却至25℃，得到酶解液；
Ⅲ.过滤、干燥：将酶解液置于25℃、5000r/min的条件下离心10min，所得上清液接着用700Da超滤膜进行超滤处理，其中所述超滤处理的分离温度为45℃，工作压力为0.1MPa，超滤时间60min，得到超滤液；接着对超滤液进行真空冷冻干燥，所述真空冷冻干燥的条件是控制物料厚度10mm，设定预冻温度为-30℃，当样品温度降到设定温度后保持2h，设定升华温度为15℃，解析温度为35℃，真空度30Pa，真空冷冻干燥时间为24h，即得产品。
所述酶稳定剂由6-葡萄糖-A-葡萄糖苷、壳寡糖按1：1的质量比混合而成。
所述复合蜂王浆制剂的制备方法为：按1：1：1：1的质量比，将黄芪、独活、红枣、枸杞混合，置于55℃下干燥48h，粉碎至40目，得到中草药粉末，接着向中草药粉末中加入中草药粉末质量10倍的去离子水进行煎煮，煎煮的温度为90℃，煎煮时间30min，经100目滤布过滤，得到过滤液，所得过滤液再置于50℃、绝对压强为0.08MPa的条件下浓缩，浓缩至含水量为12wt％，即得中草药提取物；按1：30：60的质量比，将中草药提取物、蜂王浆、水混合，在65℃、800r/min的条件下搅拌30min，再置于105℃下灭菌5min，即得。
所述壳寡糖的制备方法为：按1：0.05：90的质量比，将壳聚糖、木瓜蛋白酶、醋酸-醋酸钠缓冲溶液混合，在20℃下以600r/min搅拌20min，得到混合溶液，接着将所得混合溶液置于45℃下酶解3h，90℃下保温10min，灭酶活，冷却至25℃，再用0.6mol/L NaOH水溶液调节pH至7，经200目滤布过滤后，得到滤液，接着将所得滤液置于15℃下透析24h，其中所用透析袋为截留分子量为3500Da的再生纤维素透析袋，每8h换一次蒸馏水，得到透析液；将透析液置于50℃、绝对压强为0.02MPa的条件下浓缩至含水量为8wt％，即得。
实施例4
与实施例1基本相同，区别仅仅在于：所述酶稳定剂为6-葡萄糖-A-葡萄糖苷。
实施例5
与实施例1基本相同，区别仅仅在于：所述酶稳定剂为壳寡糖。
对比例1
一种提取燕窝中唾液酸的高效方法，包括以下步骤：
Ⅰ预处理：先将燕窝原料置于45℃下干燥至含水量为10％，粉碎至40目，得到预处理的燕窝；
Ⅱ.提取：向预处理的燕窝中加入预处理的燕窝质量20倍的去离子水，置于40℃、1800r/min的条件下搅拌30min，接着在35℃下超声30min，所述超声处理的工作频率为40kHz，所述超声功率为500W，得到燕窝浆液；接着向燕窝浆液中加入胰蛋白酶、碱性蛋白酶、风味蛋白酶、胃蛋白酶，所述燕窝浆液、胰蛋白酶、碱性蛋白酶、风味蛋白酶、胃蛋白酶的质量比为100：0.5：0.5：0.5：0.5，在50℃下进行酶解4h，接着置于100℃下灭酶活8min，冷却至25℃，得到酶解液；
Ⅲ.过滤、干燥：将酶解液置于25℃、5000r/min的条件下离心10min，所得上清液接着用700Da超滤膜进行超滤处理，其中所述超滤处理的分离温度为45℃，工作压力为0.1MPa，超滤时间60min，得到超滤液；接着对超滤液进行真空冷冻干燥，所述真空冷冻干燥的条件是控制物料厚度10mm，设定预冻温度为-30℃，当样品温度降到设定温度后保持2h，设定升华温度为15℃，解析温度为35℃，真空度30Pa，真空冷冻干燥时间为24h，即得产品。
实施例6
一种提取燕窝中唾液酸的高效方法，包括以下步骤：
Ⅰ预处理：先将燕窝原料置于燕窝原料质量25倍的复合蜂王浆制剂中，在35℃下浸泡1h，经200目滤布过滤，接着用燕窝质量3倍的去离子水清洗1次，置于45℃下干燥至含水量为10％，粉碎至40目，得到燕窝粉末；将燕窝粉末继续置于35℃的去离子水中浸泡2h，所述燕窝粉末、去离子水的质量体积比为1：15(g/mL)，经200目滤布过滤，得到预处理的燕窝；
Ⅱ.提取：向预处理的燕窝中加入预处理的燕窝质量20倍的去离子水，置于40℃、1800r/min的条件下搅拌30min，接着在35℃下超声30min，所述超声处理的工作频率为40kHz，所述超声功率为500W，得到燕窝浆液；接着向燕窝浆液中加入0.5mo1/L氢氧化钠溶液，调节pH至8.5，加入胰蛋白酶、碱性蛋白酶、酶稳定剂，所述燕窝浆液、胰蛋白酶、碱性蛋白酶、酶稳定剂的质量比为100：0.5：0.5：0.02，在50℃下进行酶解2h，冷却至25℃，得到酶解液A；向酶解液A中加入柠檬酸，调节pH为5，加入风味蛋白酶、胃蛋白酶，所述酶解液A、风味蛋白酶、胃蛋白酶的质量比为100：0.5：0.5，在50℃下进行酶解，置于100℃下灭酶活8min，冷却至25℃，得到酶解液；
Ⅲ.过滤、干燥：将酶解液置于25℃、5000r/min的条件下离心10min，所得上清液接着用700Da超滤膜进行超滤处理，其中所述超滤处理的分离温度为45℃，工作压力为0.1MPa，超滤时间60min，得到超滤液；接着对超滤液进行真空冷冻干燥，所述真空冷冻干燥的条件是控制物料厚度10mm，设定预冻温度为-30℃，当样品温度降到设定温度后保持2h，设定升华温度为15℃，解析温度为35℃，真空度30Pa，真空冷冻干燥时间为24h，即得产品。
所述酶稳定剂由6-葡萄糖-A-葡萄糖苷、壳寡糖按1：1的质量比混合而成。
所述复合蜂王浆制剂的制备方法为：按1：1：1：1的质量比，将黄芪、独活、红枣、枸杞混合，置于55℃下干燥48h，粉碎至40目，得到中草药粉末，接着向中草药粉末中加入中草药粉末质量10倍的去离子水进行煎煮，煎煮的温度为90℃，煎煮时间30min，经100目滤布过滤，得到过滤液，所得过滤液再置于50℃、绝对压强为0.08MPa的条件下浓缩，浓缩至含水量为12wt％，即得中草药提取物；按1：30：60的质量比，将中草药提取物、蜂王浆、水混合，在65℃、800r/min的条件下搅拌30min，再置于105℃下灭菌5min，即得。
所述壳寡糖的制备方法为：按1：0.05：90的质量比，将壳聚糖、木瓜蛋白酶、醋酸-醋酸钠缓冲溶液混合，在20℃下以600r/min搅拌20min，得到混合溶液，接着将所得混合溶液置于45℃下酶解3h，90℃下保温10min，灭酶活，冷却至25℃，再用0.6mol/L NaOH水溶液调节pH至7，经200目滤布过滤后，得到滤液，接着将所得滤液置于15℃下透析24h，其中所用透析袋为截留分子量为3500Da的再生纤维素透析袋，每8h换一次蒸馏水，得到透析液；将透析液置于50℃、绝对压强为0.02MPa的条件下浓缩至含水量为8wt％，即得。
测试例1
亚硝酸盐含量测定：用《GB/T5009.33-2016食品中亚硝酸盐与硝酸盐的测定》中规定的分光光度法-亚硝酸盐和硝酸盐的测定方法，对本发明实施例1-7酶解液中的亚硝酸含量进行测试，所述亚硝酸含量＝酶解液中的亚硝酸质量÷燕窝原料总质量，具体测试结果见表1。
表1：亚硝酸盐含量测定结果表
| 组别 | 亚硝酸盐含量/(mg·kg<sup>-1</sup>) |
| 实施例1 | 12.5 |
| 实施例2 | 10.9 |
| 实施例3 | 9.4 |
| 实施例4 | 13.3 |
| 实施例5 | 12.9 |
| 实施例6 | 8.82 |
由测试结果可知，实施例2-3采用复合蜂王浆制剂对原料进行预处理，可有效降低原料中亚硝酸含量，其亚硝酸含量低于实施例1；实施例3对破碎后的原料进行再次浸泡处理，相对于实施例1而言，进一步降低了原料中亚硝酸含量。
测试例2
游离态唾液酸的百分含量测试：对本发明实施例1-7产品中游离态唾液酸的百分含量进行测试。测试方法为：首先称取燕窝原料50mg，粉碎至40目，加入50mL的1wt％磷酸溶液，置于95℃下水解1h，冷却至25℃后以5000r/min的转速离心20min，得到上清液，待衍生，称取0.1gN-乙酰神经氨酸标准品(购自北京阿拉丁有限公司)，配制成浓度为2mg/mL的标准品储备液，接着将其稀释成1，20，40，60，80，100μg/mL等浓度的标准品使用液，待衍生；参考冯婷玉的期刊文献《燕窝中唾液酸的DAD/FLD串联HPLC测定方法研究》中所示液相色谱法对燕窝原料中游离态唾液酸总质量进行测定，其中本测试例的衍生条件为：取样品溶液1mL，加入20mg/mL的邻苯二氨盐酸盐溶液1mL，80℃避光水浴40min，取出迅速冷却后，经0.45μm水系微孔滤膜过滤，准备进样；色谱条件：色谱柱：waterssymmetryC18柱(4.6mm×250mm，5μm)；流动相：1.0％四氢呋喃水溶液(含0.5％磷酸、0.15％正丁胺)-乙腈(95：5，v/v)；荧光激发波长230nm，发射波长425nm；柱温：35℃；流速：1.0mL/min；进样体积：20μL。采用同样的测试方法测定产品中唾液酸的质量，所述游离态唾液酸百分含量的计算式为：游离态唾液酸百分含量＝产品中游离态唾液酸质量/燕窝原料中唾液酸总质量×100％，具体测试结果见表2。
表2：游离态唾液酸百分含量测试结果表
从上述数据可知，实施例1、4-5中在对唾液酸进行酶解过程中，加入酶稳定剂，有利于酶的稳定性，其游离态唾液酸百分含量高于对比例1；实施例1中酶稳定剂由6-葡萄糖-A-葡萄糖苷、壳寡糖组成，其游离态唾液酸百分含量高于实施例4-5(酶稳定剂为6-葡萄糖-A-葡萄糖苷、壳寡糖中的一种)；而实施例6采用二次酶解的方法对唾液酸进行提取，进一步提高了游离态唾液酸的百分含量。
以上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非对本发明做任何形式上的限制，故凡依本发明专利构思所述的原理所做的等效或简单变化，均包括于本发明专利的保护范围内；本发明所属技术领域的技术人员可以对所描述的具体实施例做各种各样的修改或补充或采用类似的方式替代，只要不偏离本发明的结构或者超越本权利要求书所定义的范围，均应属于本发明的保护范围。
Claims (8)
1.一种提取燕窝中唾液酸的高效方法，其特征在于，包括以下步骤：
Ⅰ.预处理：燕窝原料经干燥、粉碎处理后，得到预处理的燕窝；
Ⅱ.提取：向预处理的燕窝中加入预处理的燕窝体积10-30倍的水，搅拌均匀，接着在30-45℃下超声15-40min，得到燕窝浆液；接着向燕窝浆液中加入胰蛋白酶、碱性蛋白酶、风味蛋白酶、胃蛋白酶、酶稳定剂，所述燕窝浆液、胰蛋白酶、碱性蛋白酶、风味蛋白酶、胃蛋白酶、酶稳定剂的质量比为100：(0.5-1)：(0.5-1)：(0.5-1)：(0.5-1)：(0.01-0.05)，在40-60℃下进行酶解2-7h，置于100-105℃下灭酶活5-10min，冷却，得到酶解液；
Ⅲ.过滤、干燥：离心处理上述酶解液，所得上清液经过滤、真空冷冻干燥处理后，即得产品。
2.一种提取燕窝中唾液酸的高效方法，其特征在于，包括以下步骤：
Ⅰ.预处理：先将燕窝原料置于燕窝原料质量20-30倍的复合蜂王浆制剂中，在30-45℃下浸泡1-4h，过滤，用水清洗1-3次，经干燥、粉碎处理后，得到预处理的燕窝；
Ⅱ.提取：向预处理的燕窝中加入预处理的燕窝体积10-30倍的水，搅拌均匀，接着在30-45℃下超声15-40min，得到燕窝浆液；接着向燕窝浆液中加入胰蛋白酶、碱性蛋白酶、风味蛋白酶、胃蛋白酶、酶稳定剂，所述燕窝浆液、胰蛋白酶、碱性蛋白酶、风味蛋白酶、胃蛋白酶、酶稳定剂的质量比为100：(0.5-1)：(0.5-1)：(0.5-1)：(0.5-1)：(0.01-0.05)，在40-60℃下进行酶解2-7h，置于100-105℃下灭酶活5-10min，冷却，得到酶解液；
Ⅲ.过滤、干燥：离心处理上述酶解液，所得上清液经过滤、真空冷冻干燥处理后，即得产品。
3.如权利要求2所述所述提取燕窝中唾液酸的高效方法，其特征在于，所述复合蜂王浆制剂的制备方法为：中草药原料经干燥、粉碎处理后，得到中草药粉末，接着向中草药粉末中加入中草药粉末质量10-20倍的水进行煎煮30-60min，过滤，浓缩至含水量为10-15wt％，得到中草药提取物；按(1-2)：(20-40)：(40-80)的质量比，将中草药提取物、蜂王浆、水混合，搅拌均匀，灭菌，即得。
4.如权利要求3所述所述提取燕窝中唾液酸的高效方法，其特征在于，所述中草药原料包括黄芪、独活、红枣、枸杞中的一种或多种。
5.如权利要求1或2所述所述提取燕窝中唾液酸的高效方法，其特征在于，所述酶稳定剂包括6-葡萄糖-A-葡萄糖苷和/或壳寡糖。
6.权利要求5所述所述提取燕窝中唾液酸的高效方法，其特征在于，所述壳寡糖的制备方法为：按1：(0.04-0.06)：(80-95)的质量比，将壳聚糖、木瓜蛋白酶、醋酸-醋酸钠缓冲溶液混合，混匀，得到混合溶液，置于40-50℃下酶解3-6h，灭酶活，冷却后调节pH为中性，过滤，所得滤液经透析、干燥处理后即得。
7.如权利要求1或2所述所述提取燕窝中唾液酸的高效方法，其特征在于，所述步骤Ⅰ预处理为：先将燕窝原料置于燕窝原料质量20-30倍的复合蜂王浆制剂中，在30-45℃下浸泡1-4h，过滤，用水清洗1-3次，经干燥、粉碎处理后，得到燕窝粉末；将燕窝粉末继续置于30-45℃的水中浸泡1-4h，所述燕窝粉末、水的质量体积比为1：(10-20)(g/mL)，过滤，得到预处理的燕窝。
8.如权利要求1或2所述所述提取燕窝中唾液酸的高效方法，其特征在于，所述步骤Ⅱ提取为：向预处理的燕窝中加入预处理的燕窝体积10-30倍的水，搅拌均匀，接着在30-45℃下超声15-40min，得到燕窝浆液；调节燕窝浆液的pH至8-9，接着加入胰蛋白酶、碱性蛋白酶、酶稳定剂，所述燕窝浆液、胰蛋白酶、碱性蛋白酶、酶稳定剂的质量比为100：(0.5-1)：(0.5-1)：(0.01-0.05)，在40-60℃下进行酶解2-6h，冷却，得到酶解液A；调节酶解液A的pH为4-5，加入风味蛋白酶、胃蛋白酶，所述酶解液A、风味蛋白酶、胃蛋白酶的质量比为100：(0.5-1)：(0.5-1)，在30-50℃下进行酶解，置于100-105℃下灭酶活5-10min，冷却，得到酶解液。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201911195541.3A CN111019984A (zh) | 2019-11-28 | 2019-11-28 | 一种提取燕窝中唾液酸的高效方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201911195541.3A CN111019984A (zh) | 2019-11-28 | 2019-11-28 | 一种提取燕窝中唾液酸的高效方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN111019984A true CN111019984A (zh) | 2020-04-17 |
Family
ID=70207126
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201911195541.3A Withdrawn CN111019984A (zh) | 2019-11-28 | 2019-11-28 | 一种提取燕窝中唾液酸的高效方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN111019984A (zh) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN111820412A (zh) * | 2020-08-10 | 2020-10-27 | 广西自贸区燕握生物科技有限公司 | 燕窝提取方法、提取物及其产品 |
| CN114891051A (zh) * | 2022-06-21 | 2022-08-12 | 小仙炖霸州食品有限公司 | 一种超声波联合球磨粉碎法水提燕窝酸的方法 |
| CN115197285A (zh) * | 2022-06-24 | 2022-10-18 | 北京小仙炖生物科技有限公司 | 一种超声波联合酶解提取燕窝酸的方法 |
| CN115308345A (zh) * | 2022-08-26 | 2022-11-08 | 广东泰升药业有限公司 | 一种燕窝超高效液相图谱构建方法及检测方法 |
-
2019
- 2019-11-28 CN CN201911195541.3A patent/CN111019984A/zh not_active Withdrawn
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN111820412A (zh) * | 2020-08-10 | 2020-10-27 | 广西自贸区燕握生物科技有限公司 | 燕窝提取方法、提取物及其产品 |
| CN114891051A (zh) * | 2022-06-21 | 2022-08-12 | 小仙炖霸州食品有限公司 | 一种超声波联合球磨粉碎法水提燕窝酸的方法 |
| CN115197285A (zh) * | 2022-06-24 | 2022-10-18 | 北京小仙炖生物科技有限公司 | 一种超声波联合酶解提取燕窝酸的方法 |
| CN115308345A (zh) * | 2022-08-26 | 2022-11-08 | 广东泰升药业有限公司 | 一种燕窝超高效液相图谱构建方法及检测方法 |
| CN115308345B (zh) * | 2022-08-26 | 2023-12-12 | 广东泰升药业有限公司 | 一种燕窝超高效液相图谱构建方法及检测方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN111019984A (zh) | 一种提取燕窝中唾液酸的高效方法 | |
| CN107412721B (zh) | 一种降血糖苦瓜多肽复方胶囊及其制备方法 | |
| CN106720752A (zh) | 金花茶饮料及其制备方法 | |
| CN108671002B (zh) | 一种含雪莲培养物提取物的组合物及其应用 | |
| CN105754809B (zh) | 一种工业化生产有机富硒藏虫草原浆酒的方法及所得产物 | |
| CN110679819A (zh) | 一种牡丹花蕊固体饮料及其制备方法 | |
| CN105029408A (zh) | 一种铁皮石斛绞股蓝胶囊及其制备方法 | |
| CN102940688A (zh) | 一种无花果叶中多糖与总黄酮的提取方法 | |
| CN114984098B (zh) | 一种山楂鸡内金咀嚼片及其制备方法 | |
| CN110881594A (zh) | 一种火龙果汁的制备方法 | |
| CN111196959A (zh) | 一种保健冰葡萄酒的酿造方法 | |
| CN105661248A (zh) | 一种富含黄酮的固体饮料及其制备方法 | |
| CN105994853A (zh) | 一种枸杞子保健茶及其制备方法 | |
| CN115644331A (zh) | 一种有效提高抗疲劳功能的海参牡蛎复合肽饮品的制备方法 | |
| CN113694152B (zh) | 一种高稳定性酶解法获取薏苡仁提取液的方法 | |
| CN113249359B (zh) | 一种利用酶提取桑叶功能成分的方法 | |
| CN114452357A (zh) | 一种含六堡茶具有降血脂降血糖作用的制剂及其制备方法 | |
| CN106810617A (zh) | 一种黄绿蜜环菌多糖的制备方法 | |
| CN103798520B (zh) | 一种替代抗生素的饲料添加剂及其制备方法 | |
| CN108969580B (zh) | 蓝布正总鞣质的制备方法及应用 | |
| CN110973429A (zh) | 一种竹液的提取方法及其应用 | |
| CN105795049A (zh) | 一种乌药叶四照花茶粉的制作方法 | |
| CN111887367A (zh) | 一种枇杷花饮料及其制备方法 | |
| CN104490992A (zh) | 一种葛根流浸膏的制备方法 | |
| CN111171112A (zh) | 一种苦瓜籽蛋白的酶解提取方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| WW01 | Invention patent application withdrawn after publication |
Application publication date: 20200417 |
|
| WW01 | Invention patent application withdrawn after publication |