CN106383200A

CN106383200A - 一种测定玉米中脂肪酸值的方法

Info

Publication number: CN106383200A
Application number: CN201610768424.1A
Authority: CN
Inventors: 罗满珍; 张书金; 肖丽萍; 汤建平; 李兵; 温庆琪; 周盛昌; 吴有林; 艾春香
Original assignee: Hui Nong Bio Tech Ltd Beijing
Current assignee: Hui Nong Bio Tech Ltd Beijing
Priority date: 2016-08-30
Filing date: 2016-08-30
Publication date: 2017-02-08

Abstract

本发明的一种测定玉米中脂肪酸值的方法，主要包括如下步骤：(A)将玉米样品与无水乙醇混合，振荡9‑20min，过滤收集滤液；(B)在滤液中滴加酚酞指示剂，分别采用含有基准物的氢氧化钾标准溶液以及不含有基准物的氢氧化钾标准溶液滴定滤液至微红色，用橙色滤色镜消除黄色干扰，分别记录耗用氢氧化钾标准溶液的体积，计算即得玉米中的脂肪酸数值。本发明实施例的测定玉米脂肪酸值的方法，解决了检测周期冗长，终点难判断的问题，可以实现在较短时间内对玉米中脂肪酸值的精确检测，并且该测定方法大大简化了操作，操作条件也比较温和，值得大力推广进行应用，为后续应用提供了可参考的技术路线。

Description

一种测定玉米中脂肪酸值的方法

技术领域

本发明涉及玉米中脂肪酸值的检测方法领域，具体而言，涉及一种测定玉米中脂肪酸值的方法。

背景技术

近年来，随着农业科技的不断进步和发展，玉米产品逐年增加，玉米成为畜禽饲料的主要原料也成不变的事实，因此可见玉米的品质从根本上决定了饲料的品质，通过快速准确测定脂肪酸值以监控玉米品质对玉米原料的采购和验收提供参考数据，同时对饲料品质安全均是具有重要的意义的。所谓脂肪酸值是指测定方法中提取液提取的所有脂肪酸的量，尤其指被提取的各种非酯化脂肪酸的量，是判断玉米品质的重要指标之一。

现有技术中，测定玉米脂肪酸值的方法，采用的是标准GB/T20570-2015《玉米储存品质判定规则》附录A第一法的方法滴定，该方法中在处理样品时需要振荡30min，还有在后续测定样品时需要加入无二氧化碳水与滤液混合，然后按照标准进行测定，但是这样操作的缺陷在于振荡30min不仅延长了操作周期，而且反复振荡会使得提取液的颜色比较深，影响了终点的判断，另外在测定样品时加入无二氧化碳水后测试溶液会变的很浑浊，终点不易判断，影响判断的准确性，也影响测定脂肪酸值的重复稳定性。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供一种用于测定玉米中脂肪酸值的方法，该方法是在原有的标准GB/T20570-2015《玉米储存品质判定规则》附录A第一法的测定方法上进行了进一步的改进，解决了检测周期冗长，终点难判断的问题，可以实现在较短时间内对玉米中脂肪酸值的精确检测，并且该测定方法大大简化了操作，操作条件也比较温和，值得大力推广进行应用，为后续应用提供了可参考的技术路线。

为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：

本发明实施例提供了一种测定玉米中脂肪酸值的方法，主要包括如下步骤：

(A)将玉米样品与无水乙醇混合，振荡9-20min，过滤收集滤液；

(B)在滤液中滴加酚酞指示剂，分别采用含有基准物的氢氧化钾标准溶液以及不含有基准物的氢氧化钾标准溶液滴定滤液至微红色，用橙色滤色镜消除黄色干扰，分别记录耗用氢氧化钾标准溶液的体积，计算即得玉米中的脂肪酸数值。

玉米是畜禽饲料中常用的原料，因此其品质的优劣直接关乎着饲料的品质好坏，需要严格控制其品质才能保证后续饲料的品质，那么针对玉米中的脂肪酸值进行测定是现有技术中监控玉米品质的常用方法，一般测定玉米中的脂肪酸值的常用方法为是按照标准GB/T20570-2015《玉米储存品质判定规则》附录A第一法的方法滴定，但是该方法中存在诸多问题，比如在处理样品时需要振荡30min，还有在后续测定样品时需要加入无二氧化碳水与滤液混合，这样操作提取30min的时间太长，使得测试周期延长，而且反复振荡会使得提取液的颜色比较深，影响终点的判断，另外在测定样品时加入无二氧化碳水后测试溶液会变的很浑浊，终点不易判断，影响判断的准确性，也影响测定脂肪酸值的重复稳定性。

本发明为了解决现有技术中出现的技术问题，在以该标准GB/T20570-2015为基础的条件下进行了进一步的改进，不仅缩短了振动的时间，后续在测定的过程中也不添加任何无二氧化碳水，而且为了避免测试溶液浑浊影响终点判定，本发明特意采用了橙色滤色镜消除黄色干扰，增加了测试的准确性，本发明的这种测定方法在本领域中尚属首创，现有技术中没有任何记载，为后续技术人员实施提供了可参考的方案，值得广泛推广应用。

需要注意的是，国家标准的测定方法里，振荡的时间规定为30min，但是发明人通过大量的实验发现其实在样品处理，反复振荡提取玉米脂肪酸的过程中，当振荡10min左右，其玉米中的脂肪酸值已经趋于一个稳定值，因此其实提取的时间并不需要30min那么长，10min左右基本可以满足提取的要求，发明人因此将该步骤加以改进，将振荡的时间规定在了9-20min之间，这样一来大大缩短了操作周期，简化了操作步骤，而且振荡时间越长，反而样品溶液颜色会比较深，影响后续终点判断，也会影响到准确性，发明人的这一改进措施，无形之中增加了后续滴定时的终点判断的准确性。

优选地，将玉米样品与无水乙醇混合后，振荡的时间控制在10-15min，更优为10min，振荡时间还可以为11min、12min、13min、14min等。10min之所以为最优，因为10min之后正好玉米样品中的脂肪酸值趋于一个稳定值。

还有，一般在振荡后最好静置1-2min，使得玉米中的脂肪酸能够充分溶解于乙醇中，再进行过滤这样效果更佳，过滤过程中最好弃掉初始滤液，收集剩余的滤液，以增加测试的准确性。

本发明的整个方案中另一个保护重点在于用橙色滤色镜消除黄色干扰这个步骤，本发明的整个测定过程中也不需要添加无二氧化碳水，但是在国家标准的方法里，测定时是需要加入50ml的无二氧化碳水与滤液混合的，也没有解决黄色干扰影响终点判断的问题，发明人基于增加终点判断的准确性考虑，对这个步骤加以改进，不添加无二氧化碳水也就不会发生测试溶液浑浊影响终点判断的问题发生，还额外采用了橙色滤色镜来消除黄色干扰，更加增加了整个测定方法的准确性。

优选地，为了使得黄色干扰消除的更为彻底，橙色滤色镜的波长有一定的限制，波长最好控制在400-450nm之间，更优的控制在420-445nm之间，最优为440nm，除此之外还可以为410nm、415nm、425nm等。

其实，在配制含有基准物的氢氧化钾标准溶液以及不含有基准物的氢氧化钾标准溶液时，国家标准的方法是参照GB/T601的氢氧化钾标准储备液的方法配制出浓度为0.5mol/L的溶液的，在每次进行测定时再用乙醇稀释成浓度为0.01mol/L的溶液，这样的问题在于当标准滴定溶液的浓度小于等于0.02mol/L时，每次临用前均需要重新标定(GB/T601的规定)，因此这就增加了每次测定的工作量，当然也不可能直接采用浓度为0.5mol/L的溶液进行滴定，因为这样脂肪酸含量过小，可能滴定的量很小就直接达到终点，不好判断终点。可见现有的测定方法还是存在诸多缺陷的，本发明为了解决这一问题，是直接参照GB/T601的氢氧化钾标准储备液的方法配制出浓度为0.025mol/L左右的溶液，这样在后续测定时可直接使用，不需要采用乙醇稀释，而且脂肪酸的含量也比较合适，不会存在不好判断的问题，并且由于浓度大于0.02mol/L时，每次临用前均不需要重新标定，可以重复使用，经过实验验证本发明的标准液可以存放1个月之久，浓度都比较稳定，不会有任何波动。这样一来既方便了操作，也减少了工作量。

优选地，氢氧化钾标准溶液的浓度最好控制在0.024-0.026mol/L之间，更优为0.025mol/L。

此外，玉米样品在使用之前最好经过一定的粉碎预处理，这样可以使得玉米中所含的脂肪酸更全面的溶解于乙醇中，更优的为，在粉碎过程中，95wt％以上的颗粒的目粒度控制在40目以上，粉碎成比较细的粒度更有利于溶解。

最后，分别采用含有基准物的氢氧化钾标准溶液以及不含有基准物的氢氧化钾标准溶液滴定的过程中，滴定的时间均控制在1min以内，如果时间过长也会影响到测定的准确度，所以在实际操作时需要熟练的掌握每个操作步骤，以便于准确快速的进行测定工作。

与现有技术相比，本发明的有益效果为：

(1)本发明的用于测定玉米中脂肪酸值的方法，是在原有的标准GB/T20570-2015《玉米储存品质判定规则》附录A第一法的测定方法上进行进一步的改进，解决了检测周期冗长，终点难判断、测试溶液浑浊的问题，可以实现在较短时间内对玉米中脂肪酸值的精确检测，并且该测定方法大大简化了操作，操作条件也比较温和，值得大力推广进行应用，为后续应用提供了可参考的技术路线；

(2)本发明在配制氢氧化钾标准溶液时，直接参照GB/T601的氢氧化钾标准储备液的方法配制出浓度为0.025mol/L左右的溶液，这样在后续测定时直接使用，不需要采用乙醇稀释，而且脂肪酸的含量也比较合适，不会存在不好判断的问题，并且由于浓度大于0.02mol/L时，每次临用前均不需要重新标定，可以重复使用，经过实验验证本发明的标准液可以存放1个月之久，浓度都比较稳定，可恒定在一个水平，不会有任何波动。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，以下将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍。

图1为本发明实验例1的测定玉米的脂肪酸值方法中提取时间与玉米中所含脂肪酸量的关系曲线图。

具体实施方式

下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限制本发明的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。

实施例1

本实施例中，所用仪器、设备和环境要求如下：

1)仪器和设备

粉碎机(莱驰ZM200)、分析天平(精确至0.0001和0.00001g各一台)、往返式振荡器、滴定管(10mL、25mL各一根)、实验室常用玻璃器皿、快速定性滤纸、橙色滤色镜(440nm)、质控样品(英国，FAPAS编号为：T06190QC：含量：30.6mg/100g(以KOH计))。

2)环境要求室温：20℃～25℃；

检测方法如下：

(1)配置酚酞指示剂：称取1g酚酞溶于100mL95％的乙醇中；

(2)不含二氧化碳的蒸馏水：将蒸馏水煮沸10min左右，加盖冷却；

(3)0.025mol/L的氢氧化钾标准滴定液：称取2g氢氧化钾，置于聚乙烯瓶中，加少量水(5mL)溶解，用95％的乙醇稀释至1000mL，精确称取105℃烘2h并冷却后的邻苯二甲酸氢钾0.05g(精确至0.00001g)于150mL三角瓶中，加入50mL无二氧化碳蒸馏水溶解，滴加酚酞指示剂2滴，用上述稀释后的氢氧化钾溶液滴定至微红色，以30s不褪色为终点，记下用去氢氧化钾毫升数，同时作空白试验(不加邻苯二甲酸氢钾，同上操作)，记下用去氢氧化钾毫升数，按式计算：

c (K O H) = \frac{m \times 1000}{(V_{1} - V_{0}) \times M}

式中：

C(KOH)—氢氧化钾标准滴定溶液的浓度，单位为摩尔每升(mol/L)；

V1—氢氧化钾-乙醇溶液的体积数值，单位为毫升(mL)；

V0—空白试验氢氧化钾-乙醇溶液的体积数值，单位为毫升(mL)；

M—邻苯二甲酸氢钾的摩尔质量的数值，单位为克每摩尔(g/moL)[M(KH6Cs H4O4)＝204.22]

(4)试样制备

取100g左右混合均匀的样品，用粉碎机粉碎；

(5)试样处理

称取试样(5)约10g(m)，准确至0.0001g，于250mL具塞磨口三角瓶，加入50mL无水乙醇；

置往返式振荡器上振荡10min，过滤，收集滤液超过25mL，待用；

(6)测定

移取滤液(5)25.0mL于150mL三角瓶中，滴加2滴酚酞指示剂(1)，用0.025mol/L的氢氧化钾标准滴定液(3)滴定至微红色，3s不褪色，滴定在1min之内完成。用橙色滤色镜消除黄色干扰，橙色滤色镜的波长为440nm。

记下用去氢氧化钾标准滴定液毫升数，同时作空白试验(加25.0mL无水乙醇，不加滤液(5)，其他同上操作)，记下用去氢氧化钾标准滴定液毫升数；

另外，用测定脂肪酸值的同一个粉碎样品，按照GB/T5497中105℃恒重法测样品水分含量。

脂肪酸值结果按式计算：

A_{k} = \frac{(V_{1} - V_{0}) \times c (K O H) \times 1122000}{m \times (100 - w)}

式中：

Ak—脂肪酸值的含量，以中和100g干物质中游离脂肪酸所需要的氢氧化钾毫克数表示，单位为毫克每百克(mg/100g)；

V1—滴定试样液所消耗氢氧化钾标准滴定溶液体积，单位为毫升(mL)；

V0—滴定空白液所消耗氢氧化钾标准滴定溶液体积，单位为毫升(mL)；

1122000—换算系数；

m—试样的质量，单位为克(g)；

w—100g试样中水分的质量，单位为克(g)。

实施例2

具体实施步骤基本按照实施例1的检测步骤进行，只是测定方法中：

步骤(3)中，配制的氢氧化钾标准滴定液的浓度为0.024mol/L；

步骤(4)中，用粉碎机粉碎，粉碎后的样品95wt％过40目筛；

步骤(5)中，置往返式振荡器上振荡9min，过滤后去掉初滤液，保留剩余的滤液；

步骤(6)中，所用的橙色滤色镜的波长为445nm。

实施例3

步骤(3)中，配制的氢氧化钾标准滴定液的浓度为0.026mol/L；

步骤(4)中，用粉碎机粉碎，粉碎后的样品96wt％过50目筛；

步骤(5)中，置往返式振荡器上振荡20min，过滤后去掉初滤液，保留剩余的滤液；

步骤(6)中，所用的橙色滤色镜的波长为450nm。

实施例4

步骤(5)中，置往返式振荡器上振荡15min，过滤后去掉初滤液，保留剩余的滤液；

步骤(6)中，所用的橙色滤色镜的波长为420nm。

比较例1

标准GB/T20570-2015《玉米储存品质判定规则》附录A第一法的测定方法，采用的玉米样品与实施例1相同。

实验例1

采用本发明实施例1的测定玉米脂肪酸值的方法，针对步骤(5)中试样处理中置往返式振荡器上振荡10min的振荡时间这个参数进行优化，振荡时间每5min为一个实验点值，针对0-45min的提取时间与脂肪酸值的关系进行实验，具体实验的结果图表如附图1所示，从图中可以看出，刚开始随着振荡提取的时间增加玉米中脂肪酸含量随之增加，但是当提取时间在10min之后，脂肪酸的含量已经趋于稳定，因此在进行具体测定的过程中，并不需要像国标规定的反复振荡30min那么久，10min左右即可达到提取的目的。

实验例2

将本发明实施例1与比较例1的测定玉米脂肪酸值的方法的重复稳定性进行比较，均采用相同的玉米样品反复测定5次后，将测定的玉米中脂肪酸值记录于下表1中：

表1玉米的脂肪酸值测定结果

序号	比较例1(mg/100g)	实施例1(mg/100g)
			1	52.5	53.6
2	50.3	53.1
			3	51.4	53.3
4	50.1	52.5
			5	50.8	52.8
标准偏差％	0.97	0.43

从上表1中可以看出，本发明的测定方法相较于现有技术中常用的方法重复稳定性更高，并且通过实验发现，实施例2-3的测定方法也呈现出同样的结果，一般规定重复性的结果绝对差值不超过2mg/100g即满足规定，该测定结果可以采纳。

实验例3

采用不同脂肪酸值含量的玉米样品1-5号，分别采用本发明实施例2与比较例1的测定方法测定其脂肪酸值含量，具体结果见下表2：

表2玉米的脂肪酸值测定结果

从上表2中可以看出，本发明实施例的测定玉米中脂肪酸值的方法准确度还是很高的，基本测定结果与国标的测定结果基本一致，差异不是很大，说明本发明的方法是具有实际利用价值的，可以进行广泛推广应用，且通过实验发现，其他实施例的测定方法也呈现出同样的结果。

实验例4

采用玉米的质控样品(样品的脂肪酸值恒定为30.6mg/100g)进行测定，采用本发明实施例3的测定方法进行测定，测定具体结果如下表3所示：

表3玉米的脂肪酸值测定结果

序号	实施例3mg/100g	质控样品中脂肪酸值含量mg/100g
			1	32.5	30.6
2	32.2	30.6

从表3中可以看出，本发明的实施例方法对玉米中的脂肪酸提取充分，滴定重复性也比较好，可以准确的测定玉米中脂肪酸值的含量。

尽管已用具体实施例来说明和描述了本发明，然而应意识到，在不背离本发明的精神和范围的情况下可以作出许多其它的更改和修改。因此，这意味着在所附权利要求中包括属于本发明范围内的所有这些变化和修改。

Claims

1.一种测定玉米中脂肪酸值的方法，其特征在于，主要包括如下步骤：

(A)将玉米样品与无水乙醇混合，振荡9-20min，过滤收集滤液；

2.根据权利要求1所述的一种测定玉米中脂肪酸值的方法，其特征在于，所述步骤(A)中，将玉米样品与无水乙醇混合后，振荡的时间控制在10-15min，更优为10min。

3.根据权利要求1所述的一种测定玉米中脂肪酸值的方法，其特征在于，所述步骤(A)中，所述氢氧化钾标准溶液的浓度控制在0.024-0.026mol/L之间，更优为0.025mol/L。

4.根据权利要求2所述的一种测定玉米中脂肪酸值的方法，其特征在于，所述步骤(A)中，振荡后静置1-2min后，再进行过滤。

5.根据权利要求4所述的一种测定玉米中脂肪酸值的方法，其特征在于，所述步骤(A)中，过滤过程中弃掉初始滤液，收集剩余的滤液。

6.根据权利要求1所述的一种测定玉米中脂肪酸值的方法，其特征在于，所述步骤(A)中，玉米样品预先进行粉碎处理，再与无水乙醇混合。

7.根据权利要求6所述的一种测定玉米中脂肪酸值的方法，其特征在于，粉碎过程中，95wt％以上的颗粒的目粒度控制在40目以上。

8.根据权利要求1所述的一种测定玉米中脂肪酸值的方法，其特征在于，所述步骤(B)中，所采用的橙色滤色镜的波长控制在400-450nm之间。

9.根据权利要求8所述的一种测定玉米中脂肪酸值的方法，其特征在于，所采用的橙色滤色镜的波长控制在420-445nm之间，优选为440nm。

10.根据权利要求1所述的一种测定玉米中脂肪酸值的方法，其特征在于，所述步骤(B)中，分别采用含有基准物的氢氧化钾标准溶液以及不含有基准物的氢氧化钾标准溶液滴定的过程中，滴定的时间均控制在1min以内。