CN106333956A - 一种药物组合物及其在治疗急性脊髓炎的应用 - Google Patents

一种药物组合物及其在治疗急性脊髓炎的应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种药物组合物及其在治疗急性脊髓炎的应用，所述的药物组合物包括三七皂苷R1、柚皮苷、水杨苷和α‑蒎烯，特别是按照重量计算，14‑16份三七皂苷R1、5‑6份柚皮苷、9‑11份水杨苷和1‑2份α‑蒎烯在一起配比时，比于治疗急性脊髓炎有着非常好的效果。

Description

一种药物组合物及其在治疗急性脊髓炎的应用
技术领域
本发明涉及一种药物组合物及其在治疗急性脊髓炎的应用，属于医药技术领域。
背景技术
急性脊髓炎是一种非特异性感染后所诱发的自身免疫性疾病, 是一种发病率比较低但比较严重的脊髓疾病。其可以累及整个脊髓, 但以胸段脊髓最常见。肉眼见受累脊髓质地变软,软脊膜充血, 切面见脊髓灰质与白质分界不清, 脊髓软化、点状出血等。其发病率大约是0. 1 ～ 0. 4 /10万,各年龄段均可发病。无性别和家族性差异。本病多急性起病,首发症状多为双下肢麻木、无力、颈背部疼痛以及相应部位的束带感等。于数小时至数天内达到高峰。出现病变水平以下肢体瘫痪、感觉缺失和膀胱、直肠功能障碍为特点的脊髓完全性横贯性损伤。实验室检查脑脊液细胞数正常或轻度升高, 蛋白含量正常或增高, 糖与氯化物正常。脊髓MRI 检查可见髓内片状或较弥散的T 2 加权像异常信号,可有脊髓肿胀。根据免疫发病机制, 目前多采用类固醇激素治疗。但是过去采用常规剂量皮质类固醇治疗效果多不令人满意, 其用药时间长, 见效慢, 效果不佳,副作用较大。近年来有报道大剂量甲基强的松龙冲击疗法治疗多发性硬化、吉兰-巴雷综合征、重症肌无力等神经系统免疫性疾病取得良好的效果，但是目前对于大剂量甲强龙冲击治疗急性、脊髓炎在国内外仍存在争议, 相关的研究也不是十分详尽。
发明内容
针对上述现有技术存在的问题，本发明提供一种药物组合物及其在治疗急性脊髓炎的应用， 对于治疗急性脊髓炎具有很好的效果。
为了实现上述目的，本发明采用的技术方案是：一种药物组合物，包括三七皂苷R1、柚皮苷、水杨苷和α-蒎烯。
按照重量计算，包括如下10-20份三七皂苷R1、4-8份柚皮苷、8-15份水杨苷和1-6份α-蒎烯。
按照重量计算，包括14-16份三七皂苷R1、5-6份柚皮苷、9-11份水杨苷和1-2份α-蒎烯。
本发明还提供一种药物组合物在治疗急性脊髓炎的应用，所述的药物组合物包括三七皂苷R1、柚皮苷、水杨苷和α-蒎烯。
按照重量计算，所述的药物组合物包括如下10-20份三七皂苷R1、4-8份柚皮苷、8-15份水杨苷和1-6份α-蒎烯。
按照重量计算，所述的药物组合物包括14-16份三七皂苷R1、5-6份柚皮苷、9-11份水杨苷和1-2份α-蒎烯。
本发明药物组合物以三七皂苷R1、柚皮苷、水杨苷和α-蒎烯为原料，既能为患者提供营养支持，增强机体免疫力，又能营养神经，促进酶代谢，促进神经递质生成，细胞功能恢复。其定量14-16份三七皂苷R1、5-6份柚皮苷、9-11份水杨苷和1-2份α-蒎烯的配比组合治疗急性脊髓炎效果好。
具体实施方式
实施例1
按照重量计算，药物组合物包括如下15份三七皂苷R1、5份柚皮苷、9份水杨苷和1份α-蒎烯。
实施例2
按照重量计算，药物组合物包16份三七皂苷R1、6份柚皮苷、11份水杨苷和2份α-蒎烯。
实施例3
按照重量计算，药物组合物包括如下10份三七皂苷R1、4份柚皮苷、8份水杨苷和6份α-蒎烯。
实施例4
按照重量计算，药物组合物包括如下20份三七皂苷R1、4份柚皮苷、15份水杨苷和5份α-蒎烯。
实施例5
按照重量计算，药物组合物包括如下17份三七皂苷R1、7份柚皮苷、13份水杨苷和3份α-蒎烯。
对比例1
按照重量计算，药物组合物包括如下15份三七皂苷R1、5份柚皮苷、9份水杨苷。
对比例2
按照重量计算，药物组合物包括如下15份三七皂苷R1、9份水杨苷和1份α-蒎烯。
对比例3
按照重量计算，药物组合物包括如下15份三七皂苷R1、15份柚皮苷、9份水杨苷和10份α-蒎烯。
对比例4
按照重量计算，药物组合物包括如下5份柚皮苷、9份水杨苷和1份α-蒎烯。
对比例5
按照重量计算，药物组合物包括如下16份三七皂苷R1、16份柚皮苷、11份水杨苷和12份α-蒎烯。
对比例6
按照重量计算，药物组合物包括如下10份三七皂苷R1、27份柚皮苷、3份水杨苷和13份α-蒎烯
本发明组合物的药理学实验及临床观察情况：
实验一：药物组合物对大鼠脊髓损伤后神经修复和运动功能的影响
1.实验材料及方法
1）造模及给药方法：选用160只清洁级标准成年健康Wistar大鼠，雌雄不限，体重250~300g，1%戊巴比妥钠（50mg/kg）腹腔注射麻醉，俯卧位固定，无菌条件下显露T9~T10椎板棘突，切除椎板，暴露硬脊膜，重物坠落法（10g×4cm）制作脊髓损伤模型。脊髓损伤模型制作成功的标准为打击后脊髓组织水肿，硬膜下充血，出血，且术后24h行为学检查BBB（Basso-Beattie-Bresnahan）评分≤1分。术后及时止血、缝合，加强保暖和防感染等护理，每天按摩膀胱两次，并且碘伏消毒会阴部，直至膀胱功能恢复。取造模成功大鼠160只随机分为8组，每组20只：实施例1-2组，以及对比例1-6组，每组术后于腹腔给予对应的药物组合物注射液2mL/kg，每日1次，连续4周。
2）斜板试验：将大鼠头朝左横放在改良Rivlin斜板上，从水平位置起逐渐增大角度，以动物能够在板上停留5s而不跌落的最大角度作为评分标准，重复3次取其平均值作为最终结果。2组分别在术后1天、一周、四周进行。
3）BBB运动评分：采用双盲法对8组大鼠进行运动功能评分，将动物置于平坦不滑，光线充足的桌面上观察后肢各关节活动状况，并对其运动功能评分，大鼠在损伤前评分一次，然后在造模后的2天、一周、四周分别评分，共检测3次，取均值，评分主要体现运动功能的恢复，正常大鼠可评最高分（21分），损伤最严重的大鼠为0分。
4）组织取材及切片制备：八组大鼠分别于术后3个时间点(1，48，72h)，麻醉动物，经左心室灌注肝素生理盐水约200mL直至流出澄清液，再使用4%多聚甲醛约200mL灌洗固定，取损伤为中心的长约8mm脊髓组织，用4%多聚甲醛固定24h，常规石蜡包埋，连续切片，每个样本切片25张，片厚5μm，常规苏木精-伊红染色。
5）免疫组织化学染色：采用Super Picture免疫组织化学染色检测NF表达。NF-抗的工作浓度为1:400，即用型第2代免疫组化广谱试剂盒Super PicTure(Mouse/RabbitKIT)，Zymed分装。DAB显色试剂盒(DAB-0031)。光学显微镜下观察染色结果，免疫阳性细胞呈棕黄色或棕褐色着色。每张切片在400倍光学显微镜下选10个不同视野，采用病理图像分析仪，Leica QWin图像分析软件，对同一批染色的切片，先根据染色的灰度定下同一标准，根据染色的底色计算出神经丝蛋白（NF）的平均灰度值。灰度值可间接反映细胞蛋白的表达活性，灰度值越大，表达活性越低，灰度值越小，表达活性越高。
2.主要观察指标：大鼠运动功能、脊髓病理组织学观察、NF染色阳性细胞灰度测定。
3.实验结果
1）各组大鼠脊髓组织学观察
造模72h后，病理检查结果表明，对比例组大鼠脊髓组织结构紊乱，有较多片状出血及出血坏死后形成的囊腔，神经细胞肿胀较明显，并有大量炎细胞聚集，有的神经细胞无法辨认，灰白质界限不清，中央管部分消失或偏位，脊髓边缘粘连。实施例组大鼠脊髓组织结构一般清晰，出血、坏死程度较轻，形成囊腔少，神经细胞肿胀不明显，炎细胞浸润数量较少，神经细胞丰富，白质区水肿，脊髓皮质区边缘不清。
2）NF的表达
脊髓损伤后脊髓组织神经细胞的NF表达随时间发展逐渐增强，在脊髓前角运动神经元最早出现，而在脊髓后角神经元出现较晚。在形态学方面，神经元的胞体和胞核均有增大。实施例两个组在各时间的NF表达水平均高于对比例6个组。
8组不同时间（依次是1小时、48小时以及72小时）损伤区周围脊髓NF染色阳性细胞灰度值依次是：
实施例1组： 196.35、 184.26、171.34
实施例2组： 199.25、 186.55、174.26
对比例1组： 232.55、 201.36、196.28
对比例2组： 235.62、 203.58、193.61
对比例3组： 241.82、 199.46、194.26
对比例4组： 271.38、 210.64、199.18
对比例5组： 252.65、 208.35、196.45
对比例6组： 229.54、 198.32、188.26
3）各组大鼠行为学变化
八组大鼠造模前BBB评分均为20分，造模后见双下肢全瘫，全部出现尿潴留，脊髓休克表现，前2天评分较低，但随着时间的延长，大鼠脊髓功能逐渐恢复，其后肢肌力不断增强，伤后四周八组都有所升高，实施例两组与对比例六组相比有显著性差异。
下列数据为各组大鼠受伤后不同时间段（2天、一周、四周）BBB评分结果如下：
实施例1组： 1.38、8.33、20.74
实施例2组： 1.29、8.17、17.96
对比例1组： 1.25、2.36、3.68
对比例2组： 1.21、2.14、3.29
对比例3组： 1.23、2.98、3.35
对比例4组： 1.22、2.31、3.16
对比例5组： 1.23、2.67、3.53
对比例6组： 1.19、2.72、4.06
术后斜板试验结果表明，四周后实施例组和对比例组比较有明显差异性。说明实施例组合物注射液能明显促进受伤后脊髓神经功能的恢复。
下列数据为各组大鼠受伤后不同时间段（1天、一周、四周）斜板试验结果：
实施例1组： 26.38、43.23、58.64
实施例2组： 25.39、41.67、55.36
对比例1组： 21.45、24.26、31.68
对比例2组： 22.35、26.14、29.29
对比例3组： 21.37、25.98、31.35
对比例4组： 23.82、26.31、29.16
对比例5组： 22.56、26.67、30.53
对比例6组： 22.54、26.32、28.26
综合试验可以看出，本发明的药物组合物对于治疗急性脊髓炎有一定的效果，特比是实施例1、2组相对于其他配比有着显著的效果。

Claims (6)

1.一种药物组合物，其特征在于，包括三七皂苷R1、柚皮苷、水杨苷和α-蒎烯。
2.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，按照重量计算，包括如下10-20份三七皂苷R1、4-8份柚皮苷、8-15份水杨苷和1-6份α-蒎烯。
3.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，按照重量计算，包括14-16份三七皂苷R1、5-6份柚皮苷、9-11份水杨苷和1-2份α-蒎烯。
4.一种药物组合物在治疗急性脊髓炎的应用，所述的药物组合物包括三七皂苷R1、柚皮苷、水杨苷和α-蒎烯。
5.根据权利要求5所述的一种药物组合物在治疗急性脊髓炎的应用，其特征在于，按照重量计算，所述的药物组合物包括如下10-20份三七皂苷R1、4-8份柚皮苷、8-15份水杨苷和1-6份α-蒎烯。
6.根据权利要求5所述的一种药物组合物在治疗急性脊髓炎的应用，其特征在于，按照重量计算，所述的药物组合物包括14-16份三七皂苷R1、5-6份柚皮苷、9-11份水杨苷和1-2份α-蒎烯。
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