CN110075274B - 一种用于治疗或预防神经损伤的药物组合物 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种用于治疗或预防神经损伤的药物组合物,该药物组合物包括以下组分:积雪草甙、库拉索芦荟提取物、番荔枝籽提取物、高山火绒草提取物、VEGF血管内皮生长因子。本发明的药物组合物可用于诱导神经突生长,用于促进干细胞功能,和/或用于促进在急性和慢性损伤中受损的和/或受伤的神经元的功能恢复并增强突触形成和突触可塑性,能明显改善受损的坐骨神经功能、提高神经传导速度、增加神经轴突计数,修复神经轴突。临床研究显示,本发明药物组合物治疗周围神经损伤患者能够改善其肌力,加速修复损伤的神经组织,改善神经组织传递及代谢障碍。
Description
技术领域
本发明涉及医药技术领域,特别涉及一种用于治疗或预防神经损伤的药物组合物。
背景技术
神经损伤是常见的神经外科疾病,临床表现为不同程度的运动、感觉障碍,同时也可有自主神经系统功能紊乱和肢体营养障碍的表现。运动功能障碍表现为受损神经所支配的肌群肌力减弱或丧失;感觉功能障碍表现为受损神经所支配的区域知觉减退或消失。然而神经修复是一个极其复杂的过程,神经损伤修复术后形成瘢痕,神经与周围组织粘连等问题依然严重影响患者患肢感觉运动功能的恢复。
目前临床使用的神经损伤药物有外源性神经营养因子、腺苷酸环氧化酶激活剂和环磷酸腺苷、蛋白激酶C、炎性因子、维生素B族等。其中外源性神经营养因子中的神经生长因子(nerve growth factor,NGF)疗效最为可靠,但是应用NGF也存在副作用:未受损的正常神经轴突的出芽,可导致慢性疼痛和异常神经反射等不良反应出现。
发明内容
有鉴于此,本发明提供了一种用于治疗或预防神经损伤的药物组合物。
为了实现上述发明目的,本发明采取以下技术方案:
一种用于治疗或预防神经损伤的药物组合物,该药物组合物包括以下组分:积雪草甙、库拉索芦荟提取物、番荔枝籽提取物、高山火绒草提取物、VEGF血管内皮生长因子。
优选地,所述药物组合物由以下重量份组成:积雪草甙3-30份、库拉索芦荟提取物5-26份、番荔枝籽提取物1-10份、高山火绒草提取物1-10份、VEGF血管内皮生长因子1-8份。
优选地,所述药物组合物由以下重量份组成:积雪草甙6-25份、库拉索芦荟提取物10-20份、番荔枝籽提取物2-8份、高山火绒草提取物2-8份、VEGF血管内皮生长因子2-6份。
优选地,所述药物组合物由以下重量份组成:积雪草甙18份、库拉索芦荟提取物16份、番荔枝籽提取物5份、高山火绒草提取物5份、VEGF血管内皮生长因子3份。
积雪草甙是从积雪草提取到的一类化学物,是积雪草的主要活性成分,一般,常用于传统中医学。这种化合物具有明显的抗菌活性、创伤修复的活性和抗氧化活性。易溶于沸水,可溶于甲醇、乙醇、DMSO等有机溶剂。通过与环糊精的络合可进一步提高其在水中的溶解度和稳定性。
库拉索芦荟提取物来源于百合科植物库拉索芦荟,是一种无色透明至褐色的略带黏性的液体,干燥后为黄色精细粉末。库拉索芦荟提取物主要含有叶含芦蔡甙、异芦荟甙、β-芦荟甙、芦荟大黄素及蒽酮类等化合物。芦荟中的蒽酮类化合物大多具有杀菌、抑菌、消炎、解毒、促进伤口愈合等作用;芦荟中含有的芦荟大黄素苷、芦荟宁、芦荟咪酊等有效成分,具有健胃和缓泻功能,起着增进食欲和大肠缓泻作用;芦荟咪嗪能治疗恶性肿瘤,有效率可达76%,能明显提高机体免疫功能。芦荟多糖对癌症的良好治疗作用,主要是通过提高人体免疫系统的功能而发挥其作用;芦荟中的芦荟素、多糖能强化心脏功能,促进血液循环,软化硬化的动脉,降低胆固醇值,扩张毛细血管,使血压正常化,对动脉硬化和高血压有一定的预防和治疗作用。
番荔枝籽提取物来源于番荔枝科植物的果实,主要活性成分包括黄酮类、生物碱类、二砧类、苯乙烯内醋类、多氧环己烯类、番荔枝内酯类化合物等物质。具有抗癌活性作用的化学物质极为丰富,该类物质对肿瘤细胞有强烈杀伤作用,同时番荔枝籽提取物对受损的正常细胞和神经细胞具有一定的修复作用,具有补充体力、清洁血液、健强骨骼、预防坏血病、增强免疫力的功效。
高山火绒草提取物来源于火绒草属系菊科火绒草属植物,其提取物中含有多种化学成分,迄今从中分离并获得的化合物有挥发油类、倍半萜类、苯丙素类、黄酮类和甾体类等化合物。火绒草提取物对白细胞移行有显著的抑制作用,具有治疗免疫复合型疾病的功效;火绒草对四氧嘧啶引起的糖尿病有明显的防治作用,能减弱四氧嘧啶对胰岛β细胞的损伤或改善受损的β细胞的功能,具备具备降低血糖的作用;此外高山火绒草提取物还能增强机体免疫力。
血管内皮生长因子VEGF(Vascular endothelial growth factor)是血管内皮细胞特异性的肝素结合生长因子(heparin-binding growth factor),可在体内诱导血管新生(induce angiogenesis in vivo)。该因子能有效的促进血管再生,可以与神经纤毛蛋白-1(neuropilin-1,NP-1)和VEGF受体-1(VEGFR-1)结合,后者主要在血管内皮细胞表达。VEGF是各种神经元强有力的保护/存活因子,它促进神经/血管存活的作用是通过NP-1和VEGFR-1调节许多血管促存活基因的表达。本发明中使用的血管内皮生长因子VEGF是由北京健平金星生物科技有限公司合成的蛋白。
本发明的另一目的在于提供了上述药物组合物的用途。
一种用于治疗或预防神经损伤的药物组合物在周围神经系统和/或中枢神经系统中的损伤中的应用。
优选地,所述神经损伤包括对脑、脊髓、感觉神经元和/或运动神经元的损伤。
优选地,所述神经损伤是急性损伤。
优选地,所述神经损伤是慢性损伤。
优选地,所述神经损伤由退行性疾病造成。
优选地,所述药物组合物被配制成用于通过手术中施用、注射、静脉内注射或输注进患病组织中而施用给周围神经系统或中枢神经系统。
本发明还提供了上述药物组合物的制备方法,具体包括以下步骤:
(1)分别将库拉索芦荟、番荔枝籽、高山火绒草洗净,烘干磨粉过80-100目筛,加入乙醇使含醇量达70%~90%,搅匀,静置,过滤,滤液回收乙醇后浓缩,最终分别得到库拉索芦荟提取物、番荔枝籽提取物、高山火绒草提取物;
(2)将血管内皮生长因子VEGF、积雪草甙、库拉索芦荟提取物、番荔枝籽提取物、高山火绒草提取物混合均匀,过滤灭菌即可;
(3)任选地,加入医学上可用的辅料进一步制成成品制剂。
与现有技术相比较,本发明具有以下特点:
本发明的药物组合物可用于诱导神经突生长,用于促进干细胞功能,和/或用于促进在急性和慢性损伤(包括神经退行性损伤)中受损的和/或受伤的神经元的功能恢复并增强突触形成和突触可塑性,能明显改善受损的坐骨神经功能、提高神经传导速度、增加神经轴突计数,修复神经轴突。临床研究显示,本发明药物组合物治疗周围神经损伤患者能够改善其肌力,加速修复损伤的神经组织,改善神经组织传递及代谢障碍。
具体实施方式
下面结合实施例和实验例详细说明本发明的技术方案。
实施例1~4本发明药物组合物成分及制备方法,如表1所示。
表1:实施例1~4本发明药物组合物成分及制备方法
对比例
对比例采用的神经损伤药物为一种神经损伤康复散,其由以下原料组成:三七15克、生地12克、柴胡10克、全蝎2克、桂枝10克、穿山甲20克、血竭6克、当归15克、黄芪30克、川芎10克、丹参10克、红花10克、桃仁10克、鸡血藤10克、络石藤10克、海风藤15克、白芍10克、西洋参20克、肉苁蓉10克、巴戟天12克、锁阳10克,甘草10克。
试验例1:药理学实验
1.材料与方法
1.1实验动物
普通级SD大鼠240只,雄性,体重210±26g,雌雄各半。
1.2药物
(1)将实施例1~4药物内容物4g溶于200ml蒸馏水,pH值7.8,200ml/瓶,制得药液;实验时大鼠用药量按人与大鼠体表面积比值换算法求得(1.0/kg.日),将药液配制成浓度为0.1g/ml,每只大鼠200g体重每次给药2ml,1次/日。
(2)对比例的动物实验药液采用上述方法制备。
1.3动物模型的建立
SD大鼠采用3%水合氯醛腹腔注射麻醉成功后,固定在手术台上,随机选取大鼠一侧下肢,用备皮刀将大鼠股部后肢毛剃除干净,应用碘伏对术区进行充分消毒,戴无菌手套,取无菌洞巾铺单,于股骨后侧正中纵切口,分离皮下组织,由股后外侧肌间隙分离显露大鼠坐骨神经,距离坐骨神经出口2cm处,显微器械切断坐骨神经,造成神经损伤模型。在手术显微镜下将坐骨神经断端用9-0无创显微缝合线作端端吻合,共缝合外膜6针,所有大鼠坐骨神经显微缝尽可能保证对合、打结松紧度一致并由同一人操作完成,后采用4-0丝线缝合皮肤,碘伏涂擦缝合口。从神经电生理,组织病理学上验证成功造模,坐骨神经已被切断,放回饲养笼中。
1.4分组与给药
在造模成功后随机分为对照组、对比例、实验组,每组40只,雌雄各半。
(1)对照组给予生理盐水按每200g体重2ml灌胃,每日1次。
(2)对比例给予对比例的药液按每200g体重2ml灌胃,每日1次。
(2)实验组给予实施例的药液按每200g体重2ml灌胃,每日1次。
以上每组经上述处理后分别在第4、6、8、12周后观察坐骨神经功能指数(SFI)、神经传导速度(NCV)、神经轴突计数(NAC)的恢复率,以及根据神经与周围组织形态学观察整体粘连程度。
2.结果
2.1坐骨神经功能指数(SFI)测定结果
坐骨神经功能指数(SFI)的恢复率采用沈宁江等(中华显微外科杂志,1993,16(4):284)的改良方法计算。
经过测定如表2所示,在SIF检测结果方面,实验组恢复好于对照组(P<0.05),且实施例的恢复率远高于对照组(P<0.01),实施例1~4的效果优于对比例,证明本发明的药物组合物能修复受损的坐骨神经功能,且效果要好于比对比例的中药组合物。
表2:各组不同时段SFI恢复率(x±s,%)
注:*与同时段对照组比较P<0.05,**与同时段对照组比较P<0.01。
2.2神经传导速度(NCV)测定结果
检测方法:暴露双侧坐骨神经,范围从梨状肌下缘起至远端约4cm左右,不切断神经。刺激电极和引导电极用铂金丝自制,两电极之间距离固定为2.4cm。测量损伤侧坐骨神纤NCV时刺激电极置于造模吻合口远0.5cm处,引导电极置于神经远端;测量正常侧坐骨神经NCV时刺激电极置于梨状肌下缘处1cm处,引导电极在神经远端。测量结果记录双侧NCV绝对值,并以同大鼠的受伤侧NCV值除以正常侧NCV值作为神经传异速度恢复率(%)。
经过测定如表3所示,在NCV检测结果方面,实验组恢复效果好于对照组(P<0.05),实施例组的恢复率远高于对照组(P<0.01),实施例1~4的效果优于对比例,证明本发明的药物组合物能提高神经传导速度,且效果要好于比对比例的中药组合物。
表3:各组大鼠损伤侧NCV恢复率(x±s,%)
注:*与同时段对照组比较P<0.05,**与同时段对照组比较P<0.01。
2.3神经轴突计数(NAC)测定结果
测定方法:用快刀片切取坐骨神经吻合口近侧5mm及远侧5mm处的神经样本,10%福尔马林溶液内固定24h,30%~100%各级酒精脱水,二甲苯透明,石蜡包埋。做横切片,片厚5μm,改良三色法染色。将染色的神经组织切片在显微镜200倍(目镜10×,物镜20×)放大后输入Meta Morph图像分析系统,进行神经轴突计数,用吻合口远侧的轴突数除以近侧的轴突数,求出轴突再生的恢复率(%),以此来判断神经轴突的再生情况。
经过测定如表4所示,在NAC检测结果方面,实验组恢复效果好于对照组(P<0.05),实施例组的恢复率远高于对照组(P<0.01),实施例1~4的效果优于对比例,证明本发明的药物组合物能增加神经轴突的数量,且效果要好于比对比例的中药组合物。
表4:各组大鼠坐骨神经NAC恢复率(x±s,%)
注:*与同时段对照组比较P<0.05,**与同时段对照组比较P<0.01。
2.4神经与周围组织形态学观察整体粘连程度评级结果
评级分类:1级:无需分离或轻微钝性分离;2级:较多钝性分离;3级:需要锐性分离;其中1级-2级为有效,3级为无效,进行统计评价。
经过测定如表5所示,对照组与周围组织粘连较重,钝性分离时需要锐性分离,神经活动度差。通过统计两组大鼠坐骨神经粘连程度级别数量,应用秩和检验统计分析,实验组与对照组之间差异有统计学意义(P<0.01),与对比例之间差异有统计学意义(P<0.05),证明本发明的药物组合物能改善神经与周围组织整体粘连,有利于预防神经粘连。
表5:神经与周围组织形态学观察整体粘连程度评级结果
注:*与同时段对照组比较P<0.05,**与同时段对照组比较P<0.01。
试验例2:毒理学研究
1.用小鼠进行毒性试验
实施例1的药物的LD50 229±21.25g/kg。该剂量比给人用的剂量大152倍。结果小鼠无1只死亡。
2.用SD大鼠进行长期毒性试验
将实施例1的药物以78.23g/kg一天的口服剂量给药于SD大鼠3个月。该剂量比给人用的剂量大48倍。发现本发明的药物组合物是安全的。在啮齿动物急性和长期毒性实验中,未发现本发明的药物组合物由明显的毒性和副作用。
试验例3:临床试验
1.病例选择和分组
选择确诊的坐骨神经损伤患者140例临床观察,病人随机分成治疗组、对照组,治疗组70例,其中男性45例,女性25例,年龄22-78岁,平均年龄52.6岁,平均病程1年;对照组70例,其中男性38例,女性32例,年龄21~75岁,平均年龄53.4岁,平均病程1年。两组一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。
2.治疗方法
治疗组:以实施例1制备的胶囊剂口服,每日3次,早中晚各1次,每次2粒,温开水送服;7天为1个疗程,4~6个疗程即可痊愈,病情严重者遵医嘱酌增用量。
对照组:服用米格来宁片,口服,常用量,一次1片,必要时不得超过2片,一日根据需要服用1~3次。
3.诊断标准与疗效标准
3.1诊断标准
根据《内科疾病鉴别诊断学》所定标准。
3.2疗效判断标准
(1)服药4个疗程后测定病例患者的肌力,其测定标准如下:治愈:运动功能完全恢复,肌力5级,麻木、疼痛消失;显效:运动功能基本恢复,肌力4级,无明显麻木及痛觉异常;有效:运动功能部分恢复,肌力3级,麻木疼痛减轻;无效:治疗前后无明显改变。
(2)服药4个疗程后分别测定损伤神经支配区域内皮肤的30g压觉、2g触觉、5g痛觉以及两点分辨觉<10mm的患者数及百分数以及两点分辨觉的数值对比做出比较。
4.治疗结果
4.1肌力测定结果
两组病例的临床症状疗效比较见表5,治愈率和总有效率治疗组明显优于对照组(P<0.05)。且在康复活动中,治疗组的肌肉适应性优于对照组。
表5:治疗组与对照组肌力测定结果
组别 | 例数 | 治愈 | 显效 | 有效 | 无效 | 治愈率(%) | 总有效率(%) |
治疗组 | 70 | 48 | 18 | 3 | 1 | 68.6 | 98.6 |
对照组 | 70 | 35 | 16 | 10 | 9 | 50.0 | 87.1 |
4.2压觉、触觉、痛觉以及两点分辨觉的测定结果
两组病例的三组压觉、触觉、痛觉及两点分辨觉>10mm改变疗效比较见表6,治愈率率和总有效率治疗组明显优于对照组(P<0.05)。
表6:治疗组与对照组压觉、触觉、痛觉以及两点分辨觉的测定结果
组别 | 例数 | 压觉(%) | 触觉(%) | 痛觉(%) | 两点分辨觉(%) |
治疗组 | 70 | 100% | 100% | 90% | 72% |
对照组 | 70 | 78% | 83% | 82% | 56% |
试验例1-3结果说明,本发明的中药组合物可以明显增强大鼠周围神经损伤后坐骨神经功能、提高神经传导速度以及增加神经轴突计数;通过临床症状证实,本发明的中药组合物对周围神经损伤有明显的治愈效果,有效改善患者松弛肌肉、缓解神经末端不适感,达到促进神经损伤后修复之目的,疗效确切;临床应用安全无毒副作用。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式,其描述较为具体和详细,但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是,对于本领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明构思的前提下,还可以做出若干变形和改进,这些都属于本发明的保护范围。因此,本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。
Claims (7)
1.一种用于治疗或预防神经损伤的药物组合物,其特征在于,该药物组合物包括以下组分:
积雪草甙18份、库拉索芦荟提取物16份、番荔枝籽提取物5份、高山火绒草提取物5份、VEGF血管内皮生长因子3份。
2.一种如权利要求1所述的用于治疗或预防神经损伤的药物组合物在制备治疗或预防周围神经系统和/或中枢神经系统损伤药物中的应用。
3.如权利要求2所述的应用,其特征在于,所述神经损伤包括对脑、脊髓、感觉神经元和/或运动神经元的损伤。
4.如权利要求3所述的应用,其特征在于,所述神经损伤是急性损伤。
5.如权利要求3所述的应用,其特征在于,所述神经损伤是慢性损伤。
6.如权利要求3所述的应用,其特征在于,所述神经损伤由退行性疾病造成。
7.一种如权利要求1任一项所述的药物组合物的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)分别将库拉索芦荟、番荔枝籽、高山火绒草洗净,烘干磨粉过80-100目筛,加入乙醇使含醇量达70%~90%,搅匀,静置,过滤,滤液回收乙醇后浓缩,最终分别得到库拉索芦荟提取物、番荔枝籽提取物、高山火绒草提取物;
(2)将血管内皮生长因子VEGF、积雪草甙、库拉索芦荟提取物、番荔枝籽提取物、高山火绒草提取物混合均匀,过滤灭菌即可;
(3)任选地,加入医学上可用的辅料进一步制成成品制剂。
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