CN106176698A - 水翁花提取物及其制备方法、应用 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及中药技术领域，特别涉及水翁花提取物及其制备方法、应用。本发明采用乙醇提取，乙酸乙酯萃取，大孔树脂纯化，得到水翁花提取物。该提取物主要含有2'，4'‑二羟基‑6'‑甲氧基‑3',5'‑二甲基查耳酮(DMC)的含量为40‑90％之间。所得到的水翁花提取物可作为解热抗炎药应用，可制成口服剂，注射剂，外用制剂等等。本发明所提供的水翁花提取物，其制备工艺简单，易于操作，成本低廉。

Description

水翁花提取物及其制备方法、应用
技术领域
本发明涉及中药技术领域，特别涉及水翁花提取物及其制备方法、应用。
背景技术
目前，临床上的解热药物主要包括非留体类抗炎药和类固醇解热药。前者包括如水杨酸类、苯胺类、P比哩酮类以及其他抗炎有机酸类，这些药物共同的作用机制是通过抑制环氧化酶，减少前列腺素(prostaglandin,PG)合成，使体温调节中枢的SP恢复正常而产生解热作用，但是这些药物同时抑制了胃粘膜PG的合成，增加了胃酸分泌，削弱了屏障作用，导致胃肠道的不良反应，甚至引起胃粘膜损伤严重出现胃、十二指肠出血和馈病。传统中药由于其成分多，可能涉及多作用靶点发挥解热作用，且研究表明其降温作用稳定而持久。临床上，中药的解热抗炎药物大多为复方，由于其成分复杂，很难阐明其物质基础及作用机制，所以，从具有解热药效的单一药材入手，阐明其发挥作用的部位，进而寻找有效的成分，为开发成分明确、质量可控、安全有效的解热抗炎药物具有重要的意义，为临床用药提供更广泛的选择。
水翁花始载于《岭南采药录》，为桃金娘科水翁属植物水翁Cleistocalyxrculatus(Roxb.)Merr.et Perry的干燥幼嫩花蕾，又名水雍花、大蛇药、水翁仔、水榕花、水翁、酒翁、水榕树、水香；性寒，味苦，归脾、胃经；能清热解毒，去湿消滞；主用于夏天暑湿食滞所致的发热，咽干，口渴腹胀或呕吐泄泻。水翁花在民间应用广泛，属于广东地产药材，夏季常作凉茶以解暑，是“清热凉茶”等中药的主要原料之一。目前上尚未有相关的药物制剂上市。
水翁花醇提取物的药效活性研究未有文献报道。
发明内容
有鉴于此，本发明提供水翁花提取物及其制备方法、应用。该提取物对小鼠巨噬细胞的抑制率较好，且呈现剂量依赖关系，水翁花提取物组在剂量为25μg/ml时，对小鼠巨噬细胞的抑制率为99.3％，水翁花提取物组显著抑制前列腺素E2的活性，显示出较强的抗炎作用。且该水翁花提取物组解热效果更好，水翁花提取物组在剂量为80mg/kg时，300min和360min后解热效果更加明显。
为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：
本发明提供了2',4'-二羟基-6'-甲氧基-3',5'-二甲基査耳酮(DMC)在制备前列腺素E2的抑制剂中的应用。
本发明提供了2',4'-二羟基-6'-甲氧基-3',5'-二甲基査耳酮(DMC)在制备预防和/或治疗抗炎的药物中的应用。
本发明提供了2',4'-二羟基-6'-甲氧基-3',5'-二甲基査耳酮(DMC)在制备预防和/或治疗解热的药物中的应用。
在本发明的一些具体实施方案中，所述2',4'-二羟基-6'-甲氧基-3',5'-二甲基査耳酮(DMC)的有效剂量为3.094～12.375μg/(0.4×105个cell/mL)。
在本发明的一些具体实施方案中，所述2',4'-二羟基-6'-甲氧基-3',5'-二甲基査耳酮(DMC)的有效剂量为20～80mg/kg。
本发明还提供了一种水翁花提取物，其中2',4'-二羟基-6'-甲氧基-3',5'-二甲基査耳酮(DMC)在所述水翁花提取物中含量为40％～90％。
本发明还提供了所述的水翁花提取物的制备方法，包括如下步骤：
步骤1：取水翁花经乙醇提取获得稀浸膏；
步骤2：将步骤1制得的所述稀浸膏经有机溶剂萃取，收集萃取液，减压回收有机溶剂、干燥，得到浸膏；
步骤3：将步骤2制得的所述浸膏用乙醇溶解，经树脂吸附并用乙醇淋洗除去杂质，用乙醇梯度洗脱吸附于树脂上的水翁花提取物；收集洗脱液减压浓缩，得到浸膏；
步骤4：将步骤3制得的浸膏，干燥粉碎后得到水翁花提取物。
在本发明的一些具体实施方案中，步骤1中乙醇的体积浓度为60％～90％；
步骤2中所述有机溶剂为乙酸乙酯；
步骤3中所述树脂为苯乙烯、二乙烯苯、丙烯酸酯或甲基丙烯酸酯中任意一种或几种为骨架材料的极性或非极性树脂；
步骤3中所述淋洗除去杂质的所述乙醇的体积浓度为30％～65％。
在本发明的一些具体实施方案中，步骤3中所述梯度洗脱的乙醇的体积浓度为50％～90％。
本发明还提供了一种中药制剂，由所述的水翁花提取物或如所述的制备方法制得的水翁花提取物与药学上可接受的载体制成。
本发明提供了2',4'-二羟基-6'-甲氧基-3',5'-二甲基査耳酮(DMC)在制备前列腺素E2的抑制剂中的应用。还提供了2',4'-二羟基-6'-甲氧基-3',5'-二甲基査耳酮(DMC)在制备预防和/或治疗抗炎的药物中的应用。除此之外，本发明还提供了2',4'-二羟基-6'-甲氧基-3',5'-二甲基査耳酮(DMC)在制备预防和/或治疗解热的药物中的应用。
水翁花提取物组与水翁花水层部位组相比，水翁花提取物组对小鼠巨噬细胞的抑制率较好，且呈现剂量依赖关系，水翁花提取物组在剂量为25ug/ml时，对小鼠巨噬细胞的抑制率为99.3％，水翁花提取物组显著抑制前列腺素E2的活性，显示出较强的抗炎作用。
水翁花提取物组与水翁花水层部位组相比，水翁花提取物组解热效果更好，水翁花提取物组在剂量为80mg/kg时，300min和360min后解热效果更加明显。
本发明的优点在于：本发明所提供的水翁花提取物，其制备工艺简单，采用乙酸乙酯充分萃取，使水翁花提取物中DMC的含量在40-90％之间，用药更安全，易于操作，成本低廉。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍。
图1示本发明实施例1中2',4'-二羟基-6'-甲氧基-3',5'-二甲基査耳酮标准品的HPLC检测图谱；
图2示本发明实施例1中水翁花提取物含量测定的HPLC检测图谱；
图3示本发明实施例2中水翁花提取物含量测定的HPLC检测图谱；
图4示本发明实施例3中水翁花提取物含量测定的HPLC检测图谱；
图5示本发明实施例4中水翁花提取物含量测定的HPLC检测图谱；
图6示本发明实施例5中水翁花提取物含量测定的HPLC检测图谱；
图7示本发明实施例6中水翁花提取物含量测定的HPLC检测图谱。
具体实施方式
本发明公开了水翁花提取物及其制备方法、应用，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。
本申请提供了一种水翁花的提取物，其特征在于，含有药物有效成分2'，4'-二羟基-6'-甲氧基-3',5'-二甲基査耳酮(DMC)的含量为40-90％。
本申请还提供了所述的水翁花提取物的制备方法，包括以下步骤：
步骤1：取水翁花经乙醇提取获得稀浸膏；
步骤2：将步骤1制得的所述稀浸膏经有机溶剂萃取，收集萃取液，减压回收有机溶剂、干燥，得到浸膏；
步骤3：将步骤2制得的所述浸膏用乙醇溶解，经树脂吸附并用乙醇淋洗除去杂质，用乙醇梯度洗脱吸附于树脂上的水翁花提取物；收集洗脱液减压浓缩，得到浸膏；
步骤4：将步骤3制得的浸膏，干燥粉碎后得水翁花提取物。
本发明以水翁花药材为原料，所述水翁花药材可以为本领域技术人员公知的水翁花药材，本发明对其来源并无特殊限制。
本发明首先用乙醇对水翁花药材进行加热回流提取，过滤后滤液浓缩回收乙醇得稀浸膏。本发明中，所述乙醇优选为60％-90％乙醇(体积分数)，更优选为70％-85％乙醇；所述水翁花药材重量与乙醇体积的比例，以g/mL计，优选为1:(2-10)，更优选为1:(3-7)，所述回流提取优选进行2-3次。
本发明对上述浓缩的方法并无特殊限定，可以为本领域公知的浓缩方法，本发明优选采用减压的方法进行浓缩，除去溶剂得到稀浸膏。
得到稀浸膏后，然后用第一有机溶剂萃取，所述第一有机溶剂优选为乙酸乙酯，回收乙酸乙酯得水翁花提取物粗提物；本发明中，所述稀浸膏与乙酸乙酯的体积比，优选为1：(1-3)，在本发明的某些具体实施例中，所述比例为1:1，1:1.5，1:3；所述萃取的次数优选为3～4次。
然后，将得到的水翁花提取物粗提物进行大孔树脂吸附，本发明优选采用以苯乙烯、二乙烯苯、丙烯酸酯或甲基丙烯酸酯中任意一种或几种为骨架材料的极性或非极性树脂，例如D101、D201、AB-8、HP-20、XAD-4、XAD-16、HPD100、HPD200、HPD400等,优选为苯乙烯型大孔树脂。
然后，以乙醇淋洗除去杂质，所述的乙醇为浓度为30％～65％乙醇，更优选为35％-55％，实验表明，在该洗脱浓度下，杂质能够得到去除而使水翁花提取物得到富集。
然后，用乙醇进行梯度洗脱，收集洗脱液，所述梯度洗脱用乙醇浓度为50％-90％。更优选为60％-80％，实验表明，在该洗脱浓度下，得到的水翁花提取物含量较高，总DMC的含量大于40％。
上述所用的干燥方法为真空干燥、冷冻干燥、喷雾干燥、常压干燥等，最好为真空干燥、冷冻干燥。
本发明的水翁花提取物是采用上述1-4描述的方法制备得到的。本发明除了运用一些常规方法外，还采用一些重要的步骤来提高水翁花提取物的含量，如用乙醇回流提取，好处在于充分溶解黄酮类成分；然后采用乙酸乙酯充分萃取，则可有效的除去水溶性较大的化合物；采用树脂吸附有利于除去大极性的多糖、氨基酸等，提高黄酮的含量。
申请还提供了水翁花提取物的应用，主要是将上述的水翁花提取物作为制备治抗炎解热药物来使用。
本申请还提供了一种中药制剂，由上述方案所述的或上述方案所述的制备方法所制备的水翁花提取物与药学上可接受的载体制成。在本发明中，所述药学上可接受的载体可根据药剂学领域的常用辅料，根据剂型和实际情况进行恰当选择，例如常用的辅料有淀粉、低取代羟丙基纤维素、微粉硅胶、硬脂酸镁、淀粉浆、蔗糖、糊精、羧甲基淀粉钠、滑石粉、聚山梨酯、聚乙二醇、注射用大豆磷脂和注射用甘油等；利用本发明得到的水翁花提取物制备所需药物的各种剂型时，可以按照药剂学领域的常规生产方法制备。如将该提取物与一种或多种载体混合，然后制成相应的剂型。作为优选，所述中药制剂的剂型包括注射剂、片剂、栓剂、软膏剂、凝胶剂、丸剂、片剂、颗粒剂、胶囊剂和合剂。
本发明的各种制剂中含有水翁花提取物的剂量范围是相当宽的，如可以是2-500mg，在使用时可根据病人的病情确定用法用量。例如每天服用的剂量可在每公斤体重大约0.5mg-1200mg的范围内。在成人的治疗中，剂量范围最好是在20mg/kg-80mg/kg，一次或几次服用。实际服用的剂量应该由医生根据有关的情况来决定，这些情况包括被治疗者的身体状态，选者的给药途径、年龄、体重、患者对药物的个体反应，患者症状的严重程度等等，因此上述剂量范围并不是以任何方式限制本发明的范围。
本发明的优点在于：本发明所提供的水翁花提取物，其制备工艺简单，采用低极性溶剂充分萃取，使水翁花提取物中DMC的含量在40-90％之间，用药更安全，易于操作，成本低廉。
本发明提供的水翁花提取物及其制备方法、应用中所用原料及试剂均可由市场购得。
下面结合实施例，进一步阐述本发明：
实施例1水翁花提取物的制备
取水翁花药材5kg，加85％乙醇30L回流提取二次，每次2小时，滤过，提取液浓缩至5L，加乙酸乙酯5L进行萃取，萃取4次，合并萃取液，减压回收溶剂，干燥即得水翁花粗提物124.5克；粗提物用25％乙醇溶解，吸附于AB-8树脂，以50％乙醇洗去杂质，再以50％-70％乙醇梯度洗脱，浓缩洗脱液，减压干燥，得水翁花提取物10.1g，经HPLC法测得DMC的含量78.23％(图1-2)。
实施例2水翁花提取物的制备
取水翁花药材5kg，加60％乙醇25L回流提取二次，每次2小时，滤过，提取液浓缩至5L，加乙酸乙酯7.5L进行萃取，萃取3次，合并萃取液，减压回收溶剂，干燥即得水翁花提取物130.5克；粗提物用25％乙醇水溶解，吸附于HP-20树脂，以35％乙醇洗去杂质，再以50％-80％乙醇梯度洗脱，浓缩洗脱液，减压干燥，得水翁花提取物9.8g，经HPLC法测得DMC的含量52.47％(图3，标准品谱图见图1)。
实施例3水翁花提取物的制备
取水翁花药材5kg，加90％乙醇15L回流提取三次，每次2小时，滤过，提取液浓缩至5L，加乙酸乙酯15L进行萃取，萃取3次，合并萃取液，减压回收溶剂，干燥即得浸膏144.5克；上述浸膏用25％乙醇水溶解，吸附于D101树脂，以55％乙醇洗去杂质，再以60％-80％乙醇梯度洗脱，浓缩洗脱液，减压干燥，得水翁花提取物15.5g，经HPLC法测得DMC的含量90.54％(图4，标准品谱图见图1)。
实施例4水翁花提取物的制备
取水翁花药材5kg，加80％乙醇10L回流提取三次，每次2小时，滤过，提取液浓缩至5L，加乙酸乙酯5L进行萃取，萃取4次，合并萃取液，减压回收溶剂，干燥即得浸膏112.3克；上述浸膏用40％乙醇水溶解，吸附于HPD-100树脂，以65％乙醇洗去杂质，再以60％-90％乙醇梯度洗脱，浓缩洗脱液，减压干燥，得水翁花提取物12.9g，经HPLC法测得DMC的含量81.27％(图5，标准品谱图见图1)。
实施例5水翁花提取物的制备
取水翁花药材5kg，加75％乙醇50L回流提取二次，每次2小时，滤过，提取液浓缩至5L，加乙酸乙酯7.5L进行萃取，萃取3次，合并萃取液，减压回收溶剂，干燥即得浸膏130.5克；上述浸膏用25％乙醇水溶解，吸附于HPD-200树脂，以30％乙醇洗去杂质，再以60％-85％乙醇梯度洗脱，浓缩洗脱液，减压干燥，得水翁花提取物10.5g，经HPLC法测得DMC的含量40.35％(图6，标准品谱图见图1)。
实施例6水翁花提取物的制备
取水翁花药材5kg，加70％乙醇35L回流提取三次，每次2小时，滤过，提取液浓缩至5L，加乙酸乙酯15L进行萃取，萃取3次，合并萃取液，减压回收溶剂，干燥即得浸膏164.5克；上述浸膏用25％乙醇水溶解，吸附于XAD-4树脂，以40％乙醇洗去杂质，再以60％-90％乙醇梯度洗脱，浓缩洗脱液，减压干燥，得水翁花提取物15.5g，经HPLC法测得DMC的含量68.45％(图7，标准品谱图见图1)。
实施例7片剂
取实施例1制备的水翁花提取物12.2g，研成细粉，加入10％淀粉糊约8g，药用淀粉7g，微粉硅胶0.8g，混合，14目筛制粒，于80℃干燥，整粒，加入硬脂酸镁0.05g，混匀，压制成100片，即得。每片重0.2g，口服，每次1片，一日三次。
实施例8硬胶囊
取实施例2制备的水翁花提取物16g，研成细粉，药用淀粉3.5g，硬脂酸镁0.01g，混合均匀，过筛，装入胶囊，制成100粒，即得。每粒内容物重0.2g，口服，每次1粒，一日两次。
实施例9软胶囊
取实施例3制备的水翁花提取物12.2g，加入丙二醇0.2g，卵磷脂0.9g，大豆油18g，振动磨超微20分钟，使混匀，制成软胶囊100粒，即得。每粒内容物重0.3g，口服，每次1粒，一日三次。
实施例10颗粒剂
取实施例4制备的翁花提取物13.8g，研成细粉，加入糊精25g，乳糖458g，混合均匀，制粒，于80℃干燥，整粒，分装，制100包，即得。每包重5g，口服，每次1包，一日两次。
实施例11缓释片
取上述实施例5的水翁花提取物24.4g，研成细粉，过100目筛，HPMC10.3g，乳糖16g，十二烷基硫酸钠1g，过100目筛，混合均匀，加入2％聚维酮(95％乙醇)黏合剂制软材，过20目筛制粒，于50℃干燥，过18目筛整粒，干颗粒采用外加法加入2％硬脂酸镁，混匀，压片，制成缓释片100片，即得。每片重0.5g。口服，每次1片，一日一次。
实施例12滴丸
取上述实施例6的水翁花提取物12.2g，研成细粉，另取24.8g聚乙二醇4000加热熔融，加入水翁花提取物，振动磨超微20分钟，使混合均匀，滴制成滴丸，即得。每丸重0.35g，口服，每次1粒，一日三次。
实施例13注射剂
取上述实施例3的水翁花提取物12.2g，研成细粉，加入β环糊精4.5g，蔗糖500g，纯水适量(约390g)搅拌加热溶解，煮沸10分钟，稍冷后加入10％(W/V)尼泊金乙酯乙醇溶液搅匀，用水调整至100ml，过滤，分装，灭菌，即得。每支10ml。口服，每次1支，一日三次。
实施例14药效实验部分
实验一、水翁花提取物体外抗炎活性研究
1、试验材料
实验组1：水翁花提取物组，按照实施例1方法制备，DMC含量为78.23％实验组2：水翁花水层部位组，按照实施例1方法制备(提取溶剂为水)。
细胞株：小鼠巨噬细胞系RAW 264.7，来源于中医科学院，江苏康缘药业股份有限公司培养。
脂多糖(LPS)：南京大治生物科技有限公司
前列腺素E2(PGE2)ELISA试剂盒,恩佐生命科学,批号：06241415D
2、试验方法
用Hank’s液将实验组1和实验组2按1∶2、1∶4、1∶8比例进行稀释，药液浓度分别为25.00ug/ml、12.50ug/ml、6.25ug/ml。将细胞以0.25％胰酶(含
0.02％EDTA)消化，含10％FBS的DMEM培养基调整细胞密度为1×105个/ml，均匀接种至24孔板，每孔400μl，种板后放入培养箱培养24小时。在96孔细胞培养板的小鼠巨噬细胞系RAW 264.7单层细胞中，分别加入不同质量浓度的水翁花样品液，置37℃、5％CO2培养箱中培养96h，观察细胞病变。培养24小时后，取出24孔板，吸去上清液，加入无血清的DMEM培养基配制的含药培养基，分为以下几组：空白对照组(N组)：每孔加入495μl无血清的DMEM培养基；溶媒组(RM组)：每孔加入495μl含千分之一DMSO的无血清DMEM培养基；模型组(M组)：每孔加入495μl无血清的DMEM培养基；给药样品组：每孔加495μl含不同浓度含药的培养基；同时设6个复孔，加药完毕后将24孔板放入CO2细胞培养箱培养1小时。1小时后，除空白对照和溶剂对照组外，其余每孔加入5μl的100μg/ml的LPS(终浓度为1μg/ml)，溶剂对照组每孔加入5μl的无血清的DMEM培养基，加药完毕后将24孔板放入CO2细胞培养箱继续培养18小时。18小时后收集细胞培养液，按试剂盒说明，用ELISA法检测细胞上清中前列腺素E2的含量。
3、实验结果
所有计量资料采用x±s表示，采用下列公式计算抑制率：
表1水翁花不同部位对小鼠巨噬细胞系RAW 264.7细胞上清PGE2的影响(x±s,n＝6)
各组细胞病变如表1所示，结果表明，水翁花提取物组与水翁花水层部位组相比，水翁花提取物组对小鼠巨噬细胞的抑制率较好，且呈现剂量依赖关系，水翁花提取物组在剂量为25μg/ml时，对小鼠巨噬细胞的抑制率为99.3％，水翁花提取物组显著抑制前列腺素E2的活性，显示出较强的抗炎作用。
取实施例2至实施例6制备的水翁花提取物进行上述实验，实验结果与实施例1制备的水翁花提取物的结果相近，与实施例1制备的水翁花提取物的结果无显著差异(P＞0.05)。
实验二、水翁花提取物体内解热实验研究
1实验材料
实验组1：水翁花提取物组，按照实施例1方法制备，DMC含量为78.23％
实验组2：水翁花水层部位组，按照实施例1方法制备(提取溶剂为水)。
对照药：对乙酰氨基酚片，由昆明振业制药厂有限公司提供，批号：20140901
内毒素：10mg/瓶，由sigma公司提供，批号：044M4004V。
实验动物：健康新西兰白兔，80只，雄性，体重2.0±0.2kg，清洁级，江苏省南京市江宁区青龙山动物繁殖场提供，合格证号：201511853。
2、实验方法
取健康新西兰家兔80只，每日适应性测肛温1次，连续2天，于第3天进行实验，先进行预选兔，持续监测每只家兔体温变化，15min测一次，连续测四次，取平均体温作为基础体温，选取体温在38.0-39.5℃之间的家兔，且体温波动在0.4℃之内的家兔进行正式试验，选取体温合格的家兔，耳缘静脉注射0.25ug/ml的内毒素生理盐水溶液，注射体积1ml/kg；注射后持续监测家兔体温，注射内毒素90min内，体温上升超过基础体温1.0℃的家兔，即为造模成功。
所有家兔均按上述方法造模，将成模家兔按体温变化随机分成8组，即模型组、对乙酰氨基酚组、水翁花提取物低剂量组、水翁花提取物中剂量组、水翁花提取物高剂量组、水翁花水层部位低剂量组、水翁花水层部位中剂量组、水翁花水层部位高剂量组、每组8只。分组后立即灌胃给药，模型组给予等容积的蒸馏水，对乙酰氨基酚组给对乙酰氨基酚混悬液70mg/kg，水翁花提取物、水层部位低剂量组分别给予水翁花提取物、水层部位混悬液20mg/kg，水翁花提取物、水层部位中剂量组分别给予水翁花提取物、水层部位混悬液40mg/kg，水翁花提取物、水层部位高剂量组分别给予水翁花提取物、水层部位混悬液80mg/kg。各组给药容积为10ml/kg。给药后30min、60min、后续每隔1小时测一次体温，测至360min。
3、实验结果
表2水翁花不同部位对内毒素致家兔发热模型体温的影响(x±s,n＝8)
与模型组比较P*＜0.05，P**＜0.01.
家兔体温变化如表2所示，结果表明，水翁花提取物组与水翁花水层部位组相比，水翁花提取物组解热效果更好，水翁花提取物组在剂量为80mg/kg时，300min和360min后解热效果更加明显。
取实施例2至实施例6制备的水翁花提取物进行上述实验，实验结果与实施例1制备的水翁花提取物的结果相近，与实施例1制备的水翁花提取物的结果无显著差异(P＞0.05)。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (10)

1.2',4'-二羟基-6'-甲氧基-3',5'-二甲基査耳酮在制备前列腺素E2的抑制剂中的应用。
2.2',4'-二羟基-6'-甲氧基-3',5'-二甲基査耳酮在制备预防和/或治疗抗炎的药物中的应用。
3.2',4'-二羟基-6'-甲氧基-3',5'-二甲基査耳酮在制备预防和/或治疗解热的药物中的应用。
4.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述2',4'-二羟基-6'-甲氧基-3',5'-二甲基査耳酮的有效剂量为3.094～12.375μg/(0.4×105个cell/mL)。
5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述2',4'-二羟基-6'-甲氧基-3',5'-二甲基査耳酮的有效剂量为20～80mg/kg。
6.一种水翁花提取物，其特征在于，其中2',4'-二羟基-6'-甲氧基-3',5'-二甲基査耳酮在所述水翁花提取物中含量为40％～90％。
7.根据权利要求6所述的水翁花提取物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
步骤1：取水翁花经乙醇提取获得稀浸膏；
步骤2：将步骤1制得的所述稀浸膏经有机溶剂萃取，收集萃取液，减压回收有机溶剂、干燥，得到浸膏；
步骤3：将步骤2制得的所述浸膏用乙醇溶解，经树脂吸附并用乙醇淋洗除去杂质，用乙醇梯度洗脱吸附于树脂上的水翁花提取物；收集洗脱液减压浓缩，得到浸膏；
步骤4：将步骤3制得的浸膏，干燥粉碎后得到水翁花提取物。
8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，步骤1中乙醇的体积浓度为60％～90％；
步骤2中所述有机溶剂为乙酸乙酯；
步骤3中所述树脂为苯乙烯、二乙烯苯、丙烯酸酯或甲基丙烯酸酯中任意一种或几种为骨架材料的极性或非极性树脂；
步骤3中所述淋洗除去杂质的所述乙醇的体积浓度为30％～65％。
9.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，步骤3中所述梯度洗脱的乙醇的体积浓度为50％～90％。
10.一种中药制剂，由权利要求6所述的水翁花提取物或如权利要求7至9任一项所述的制备方法制得的水翁花提取物与药学上可接受的载体制成。
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