CN106728447A - 赪桐根乙酸乙酯提取物的制备方法及应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了赪桐根乙酸乙酯提取物的制备方法及应用，属于医药技术领域。本发明具体制备方法如下：将赪桐根粉碎，经过回流提取，用乙酸乙酯萃取，合并萃取液，浓缩，干燥等步骤得赪桐根提取物。本发明还公开了赪桐根乙酸乙酯提取物在制备抗炎症药物中的应用。将赪桐根乙酸乙酯提取物用于制备抗炎症药物，可以为炎症病人提供了新的治疗药物，能降低目前使用抗炎药物出现的各种副作用。

Description

赪桐根乙酸乙酯提取物的制备方法及应用
技术领域
本发明涉及医药技术领域，具体的涉及赪桐根乙酸乙酯提取物的制备方法及应用。
背景技术
炎症是机体最基本的抗损伤反应，任何能够引起组织损伤的因素都可成为炎症的原因。其临床特征为红、肿、热、痛，是致炎因子刺激具有血管系统的活体组织对局部损伤的反应。炎症有三个不同时相：第一时相为急性或炎症早期，该时期血管受到刺激，血管内皮间隙扩大，血管壁通透性增强，白细胞和蛋白质等渗出到组织间隙，造成组织肿胀，因此，肿胀是炎症早期的重要指标；第二时相为炎症中期，以血小板黏附及白细胞游走为特点，与免疫反应紧密相关；第三时相为慢性炎症或炎症的后期，该时期内皮细胞、纤维母细胞和实质细胞等增生，形成肉芽组织增生，以纤维组织增生、肉芽肿形成为特点。目前普遍使用的抗炎药大多为西药，而西药使用后有一定的副作用，对身体造成慢性伤害。
赪桐为马鞭草科大青属植物赪桐 Clerodendrum japonicum（Thunb.）Sweet.，又名红龙船、荷苞花、抽须红、木通莲、珍珠梧桐、“个朋被”（广西壮族语），为广西常用壮药，药用部位为根，《中华本草》、《民间常用草药汇编》记载其味甘，性凉，全株均可入药，其花可安神、止血，主治心悸失眠、痔疮出血；叶具有祛风散瘀、解毒消肿等功效，主治偏头痛、跌打瘀肿、痈肿疮毒；根、茎可清肺热、利小便、凉血止血，临床用于肺热咳嗽、热淋、小便不利、咳血、尿血、痔疮出血、风湿骨痛的治疗，具有良好的临床应用价值。
赪桐根作为广西的民间壮药材，虽然在壮族民间有一定的应用，但至今仍没有进行很好地开发利用，目前对赪桐研究的公开报道较少。
发明内容
本发明的目的是为了解决现有技术存在的上述问题，提供赪桐根乙酸乙酯提取物的制备方法及应用。
为达到上述目的，本发明采用的技术方案如下：
赪桐根乙酸乙酯提取物的制备方法，包括如下步骤：
（1）将赪桐根粉碎，8倍量的80%乙醇溶液回流提取3次，每次2h，温度70℃，过滤，合并滤液，滤液置旋转蒸发仪减压回收乙醇，浓缩液置水浴上挥尽乙醇溶液，干燥得赪桐根乙醇总提取物；
（2）将赪桐根乙醇总提取物浸膏，加水溶解后，用等体积的乙酸乙酯萃取5次，合并各次萃取液，回收溶剂后，得到赪桐根乙酸乙酯提取物。
上述赪桐根乙酸乙酯提取物在制备抗炎症药物中的应用。
上述赪桐根乙酸乙酯提取物在制备抗急性炎症药物的应用。
上述赪桐根乙酸乙酯提取物在制备抗慢性炎症药物中的应用
有益效果：本发明提取的赪桐根乙酸乙酯提取物均能对急性炎症和慢性炎症的组织肿胀有显著的抑制作用。本发明的实施能为深入抗炎药物的开发提供原材料。将赪桐根乙酸乙酯提取物用于制备抗炎症药物，可以为炎症病人提供了新的治疗药物，能降低目前使用抗炎药物出现的各种副作用。
具体实施方式
在本发明的实施过程中，使用到而未提及的技术均为现有技术。
实施例
（1）受试药物的制备
赪桐根乙酸乙酯提取物的制备，步骤如下：
赪桐根乙醇总提取物的制备：赪桐根5880g，粉碎，8倍量的80%乙醇溶液回流提取3次，每次2h，温度70℃，过滤，合并滤液，滤液置旋转蒸发仪减压回收乙醇，浓缩液置水浴上挥尽乙醇溶液，干燥得赪桐根乙醇总提取物838.7g。
赪桐根乙酸乙酯提取物的制备：将上述赪桐根乙醇总提取物浸膏，加水溶解后，用等体积的乙酸乙酯萃取5次，分别合并各次萃取液，回收溶剂后，得赪桐根乙酸乙酯提取物31.7g。
分别称取注射用青霉素钠0.48g和注射用硫酸链霉素0.8g混匀用蒸馏水溶解至80ml即得双抗供试液，摇匀，-20℃保存。
（2）小鼠棉球肉芽肿
取健康昆明种小鼠96只，雄性，称重，随机分为8组，每组12只，分别为空白对照组，阳性对照组（地塞米松，0.006g/ kg），赪桐根乙酸乙酯提取物高、中、低剂量组（80、40、20g/kg）。动物麻醉后，将2个已高压灭菌且滴加0.1ml双抗供试液的10mg棉球分别植入小鼠两侧腋下，缝合切口后外涂碘酒抗感染。次日各组小鼠分别灌胃给予相应的药物，空白组给相应体积的蒸馏水。1次/d，连续7d，末次给药12h后处死小鼠，剥离肉芽组织的棉球，精密称取棉球湿重，60℃烘烤至恒重，精密称重，计算肉芽质量。
肉芽重量=带肉芽组织的棉球重量-棉球原始重量
（3）角叉菜胶致小鼠足肿胀
昆明小鼠96只，称重，分组及给药剂量同(2)，每组按给药体积20ml/kg灌胃给药，1次/d，连续7d。末次给药后，在每只小鼠后足同高处用标记笔标标记后，用足趾肿胀容积测量仪测量足趾正常容积，并记录。在小鼠足趾皮下注射1%角叉菜胶0.02ml，于致炎后0.5、1.5、3.5、4.5、5.5h测量足趾肿胀容积，计算肿胀率。
抑制率%=（致炎后V2-致炎前V1）/致炎前V1×100%
（4）对二甲苯所致小鼠耳肿胀及肿胀抑制率的影响
选体重18～22g 的健康昆明种小鼠，雄性，随机分组，每组10 只，分为空白对照组、阳性对照组(地塞米松)、赪桐根乙酸乙酯提取物高、中、低剂量组，灌胃给药， 每天1 次，连续6 d。末次给药后，将二甲苯均匀涂于小鼠右耳两面致肿，左耳作对照。脱颈椎处死小鼠，沿耳廓基线剪下两耳，用打孔器分别在两耳同一部位打下圆耳片，称重，以同一小鼠两耳片重量之差表示肿胀度，并计算肿胀抑制率。
抑制率=(模型对照组肿胀度—实验组肿胀度)/模型对照组肿胀度×100%
（5） 醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性实验
小鼠60 只，随机分为模型组、地塞米松组（0.0045 g/kg）、赪桐根乙酸乙酯提取物高、中、低剂量组（40，20，10 g/kg），每组12 只。灌胃给药，给药容积20 ml/kg，模型组灌胃等体积蒸馏水。每日给药1 次，连续7 d。末次给药45 min 后，各鼠尾静脉注射0.25%伊文思蓝溶液0.1 ml/10 g，同时腹腔注射0.6%冰醋酸溶液，每只0.2 ml。15 min 后脱颈椎处死动物，腹腔注射生理盐水6 ml 冲洗腹腔，轻揉腹部1 min，剪开腹腔收集腹腔液，离心（1 000rpm/min）10 min，取上清液于723 分光光度计590 nm 处测定吸光度。
（6）结果
a 对小鼠棉球肉芽肿的影响
赪桐根乙酸乙酯提取物各剂量组小鼠的棉球肉芽肿重量较模型组均明显降低，差异有显著性（P＜0.001、P＜0.01或P＜0.05），其中赪桐根乙酸乙酯提取物高剂量组对小鼠棉球肉芽肿湿重抑制率最显著，达26.67%，表1。
表1 赪桐根乙酸乙酯提取物对小鼠棉球肉芽肿的影响。
注：与模型组比较，***P＜0.001，**P＜0.01。
b对角叉菜胶致小鼠足肿胀的影响
赪桐根乙酸乙酯提取物中、高剂量组（20，40g/kg）小鼠足肿胀的肿胀度较模型组明显降低，差异有显著性（P＜0.05），其中赪桐根乙酸乙酯提取物高剂量组对小鼠足肿胀抑制率最显著，高达26.37%。结果见表2。
表2 赪桐根乙酸乙酯提取物对角叉菜胶致小鼠脚肿胀的影响。
注：与模型组比较，***P＜0.001，*P＜0.05。
c 对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响
赪桐根乙酸乙酯提取物各剂量组与模型组比较，小鼠耳肿胀肿胀度均显著降低，差异有显著性（P＜0.001或P＜0.01）。其中赪桐根乙酸乙酯提取物高剂量组对小鼠耳肿胀抑制率最显著，高达56.03%。结果见表3。
表3 赪桐乙酸乙酯提取物对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响。
注：与模型组比较，***P＜0.001，**P＜0.01。
d对醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性的影响
赪桐根乙酸乙酯提取物各剂量组与模型组比较，均显著降低醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性，差异有显著性（P＜0.01或P＜0.05）。提示赪桐根乙酸乙酯提取物对醋酸所致小鼠腹腔毛细血管透通性增加有显著抑制作用，结果见表4。
表4 赪桐乙酸乙酯提取物对醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性的影响。
注：与模型组比较，***P＜0.001，**P＜0.01，*P＜0.05。
结果表明，实施例中所制备的赪桐根乙酸乙酯提取物均能对炎症早期的组织肿胀有显著的抑制作用，具有抗炎作用，赪桐根乙酸乙酯提取物可用于制备抗炎症药物。

Claims (4)

1.赪桐根乙酸乙酯提取物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
（1）将赪桐根粉碎，8倍量的80%乙醇溶液回流提取3次，每次2h，温度70℃，过滤，合并滤液，滤液置旋转蒸发仪减压回收乙醇，浓缩液置水浴上挥尽乙醇溶液，干燥得赪桐根乙醇总提取物；
（2）将赪桐根乙醇总提取物浸膏，加水溶解后，用等体积的乙酸乙酯萃取5次，合并各次萃取液，回收溶剂后，得到赪桐根乙酸乙酯提取物。
2.权利要求1所述的赪桐根乙酸乙酯提取物的应用，其特征在于：在制备抗炎症药物中的应用。
3.如权利要求2所述的赪桐根乙酸乙酯提取物的应用，其特征在于：在制备抗急性炎症药物的应用。
4.如权利要求2所述的赪桐根乙酸乙酯提取物的应用，其特征在于：在制备抗慢性炎症药物中的应用。
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