CN106109498A - 提取物和含有该提取物的制剂 - Google Patents

Abstract

本发明的目的在于提供品质更稳定的痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物和含有该提取物的制剂等。通过将痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物和含有该提取物的制剂所含有的N‑乙酰基神经氨酸的量作为指标，能够确保该提取物和制剂的每个制造批次的品质更加稳定。以这样的方法而品质更稳定的痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物和含有该提取物的制剂，其有效性和安全性也有更严格的保证，是有用性非常高的提取物和制剂。

Description

提取物和含有该提取物的制剂

本案是申请日为2013年10月9日、申请号为201380052290.8(PCT/JP2013/ 077534)、发明名称为提取物和含有该提取物的制剂的分案申请。

技术领域

本发明涉及通过试验或检查而确认含有规定量的N-乙酰基神经氨酸、品质更稳定的痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物和以该提取物为有效成分的制剂等。

背景技术

医药品是只有确保其品质才能受到制造销售的许可的商品。在日本，在药事法第14条中对此进行了规定。在其他各国，在医药品的性质上，这样的处理基本上也是同样的。这样在医药品中品质的确保被认为很重要是因为品质会保证医药品的有效性和安全性。反过来说，品质没有得到确保的医药品，不能保证有效性和安全性，就缺少作为医药品的资格。

在日本，作为在医药品的生产中所使用的原料物质且为医药品的有效成分的物质被称为“原药”。另外，原药也与医药品同样必须确保其品质。原因是医药品的品质依赖于原药的品质。另外，在日本的药事相关法令中，原药被规定为专门用于制造其它医药品的医药品，定义上，原药被包含在医药品中。但是，在本申请中，为了方便，有时分别称医药品和原药，此时的医药品是指除去原药以外的医药品。

一般而言，医药品和原药通过由规定的制造方法制造而制造成为规定品质的产品。因此，为了保证医药品和原药的品质，制造管理也重要。因此，在日本制定了“关于医药品和医药部外品的制造管理和品质管理基准的省令”。该省令在日本也称为GMP(GoodManufacturing Practice的简称)。在GMP中对于医药品等的“制造管理”和“品质管理”进行了规定。在“制造管理”中，采取了通过管理原料的采购、制造工序的最开始到最后从而来保障品质的思路。“品质管理”以如下为中心进行：通过在制造后进行的试验或检查来确认实际所制造的医药品和原药是否具有规定的品质。在那样的试验和检查的结果不符合预先确定的基准时，该医药品和原药不被许可出厂、销售、使用等。这样医药品和原药通过制造管理和品质管理来管理其品质。

痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物(以下有时称为“本提取物”)是含有从接种痘苗病毒而发痘的兔的炎症皮肤组织中提取分离的非蛋白性的活性物质的提取物。本提取物在被提取后的状态下为液体，但通过干燥也能够制成固体。

含有本提取物为有效成分的制剂(以下有时称为“本制剂”)，如后所述，作为医药品非常有用。此时，因为本提取物是本制剂的有效成分，所以本提取物就成为本制剂的原药。作为本制剂，申请人在日本制造销售的具体商品中有“含有痘苗病毒接种家兔炎症皮肤提取液的制剂”(商品名：NEUROTROPIN[注册商标]，以下称为“NTP制剂”)。在NTP制剂中，有注射剂(以下称为“NTP注射剂”)和片剂(以下称为“NTP片剂”)，均为医疗用医药品(ethicaldrug)。作为NTP制剂有效成分的痘苗病毒接种家兔炎症皮肤提取液(以下称为“NTP提取液”)是NTP制剂的原药。NTP提取液包含在本提取物中，NTP制剂(NTP注射剂和NTP片剂)包含在本制剂中。

NTP注射剂的适应症为“腰痛症、颈肩腕综合征、症状性神经痛、伴随皮肤病(湿疹、皮肤炎、荨麻疹)的搔痒、过敏性鼻炎、亚急性视神经脊髓病(SMON)后遗症的冷感-知觉异常-疼痛”。NTP片剂的适应症为“带状疱疹后神经痛、腰痛症、颈肩腕综合征、肩周炎、变形性关节炎”。NTP制剂是申请人创制并作为医药品开发得到的制剂。就NTP制剂而言，其有效性和安全性中的优异特点受到较高评价，长年被销售，在日本的医药品市场中确立了稳固地位。另外，现在NTP制剂被出口到中国，以“神经妥乐平/NEUROTROPIN”的商品名销售。在中国的NTP制剂的适应症与日本相同。

这样，本制剂作为医药品十分有用，本提取物作为本制剂的原药也十分有用。但是，如上所述，本提取物是从接种痘苗病毒而发痘的兔的炎症皮肤组织中提取分离的提取物。因此，本提取物含有极多的物质(成分)，使用本提取物制造的本制剂也仍然含有极多的物质(成分)。因此，怎样管理本提取物和本制剂的品质使其稳定是非常重要的事项。

许多医药品是以1种或最多2～3种物质(成分)作为有效成分的制剂，通常，这些物质是被化学合成的化合物。因此，测定该制剂中的该化合物的含量，如果含有规定的量，则从该制剂的有效成分含量的方面出发的品质就得到保证。但是，本提取物是来自接种痘苗病毒而发痘的兔的炎症皮肤组织的提取物，含有极多种类的物质。以本提取物为有效成分的本制剂，当然也同样含有极多种类的物质。这样，本提取物和本制剂不是以特定的1种或数种物质作为有效成分，所以不能进行将有效成分作为物质进行特别规定的通常的医药品中那样的品质管理。因此，申请人制造的本提取物和本制剂、即NTP提取液和NTP制剂的有效成分的定量(quantitative determination)，通过测定其生物活性(效价、titer)的方法进行。

上述方法是使用作为疼痛阈值比正常动物低的慢性应激动物的SART应激(反复寒冷负荷)动物求出镇痛系数的生物学试验方法(“日药理志”、第72卷、第5号、573-584页、1976年)。通过该文献所记载的方法，使用作为疼痛阈值比正常动物低的慢性应激动物的SART应激(反复寒冷负荷)动物，由炎症足加压(Randall-Selitto)法进行镇痛试验求出镇痛系数。该方法是在小鼠的尾部施加压力刺激，以直到小鼠显示逃避反应的加压重量为指标，测定镇痛效果的方法。所谓镇痛系数是将在投与药物后测定的加压重量除以药物投与前测定的加压重量得到的值。关于NTP提取液和NTP制剂，以显示申请人规定的一定值以上的镇痛系数的情况作为镇痛效果阳性，求出被判断为阳性的动物只数的比例，作为镇痛有效率(％)。从该值，根据对于稀释为各种浓度的标准品测定的结果求出ED₅₀值。作为申请人关于NTP制剂使用的生物活性(效价)的单位的“Neurotropin单位(NU)”，通过将ED₅₀值为给药量100mg/kg(小鼠体重)的本提取物1mg显示的活性设为1Neurotropin单位来定义。然后，关于各NTP制剂测定ED₅₀值，与标准品进行比较来定量镇痛活性(有效成分量)。以下，在本申请中，作为本提取物和本制剂的有效成分量(效价)的尺度，使用“单位”这样的表示，但实质上与NTP提取液和NTP制剂中使用的“Neurotropin单位”意义相同。

但是，在申请人制造的本提取物和本制剂，即NTP提取液和NTP制剂中，在上述镇痛活性的定量以外，还进行如下的多个确认试验，规定必须符合这些试验。即，关于申请人制造的本提取物和本制剂，不是只在上述生物活性(效价)中确保其制造批次适合，而且还进行如下的多个确认试验，将符合这些试验作为本提取物和本制剂的使用、出厂的必要条件。

·由液相色谱法进行的氨基酸的确认试验

·由紫外可见吸光度测定法进行的紫外部吸收物质的确认试验

·由显色反应法进行的磷的确认试验

·由液相色谱法进行的核酸碱基的确认试验

·由in vitro试验法进行的血管舒缓素样物质产生抑制作用的确认试验

虽然进行这样的试验，但是并不是说作为试验对象的氨基酸、紫外部吸收物质、磷和核酸碱基等是本提取物和本制剂的核心的有效成分。另外，这些试验中，氨基酸、紫外部吸收物质、磷和核酸碱基的各确认试验为定性试验，作为试验对象的氨基酸等存在即可，不管含有的量多少。尽管如此，这些试验在有效成分未知的本提取物和本制剂两者中，作为用于减少每制造批次的品质偏差、保证均质性的措施，是申请人从当局得到医药品制造许可中所规定的。

一般而言，对于制造来自动物或植物这样的生物的提取物和含有该提取物作为有效成分的制剂的制造者来说，该制剂必须符合的基准少，由于不需要用于试验和检查的时间、劳动、费用，另外制造品变得不合格的可能性也降低，所以是有利的。但是，从保证上述那样的提取物和制剂品质的观点出发，希望应该符合的基准被更严格地规定。本发明是从这样的观点出发，关于申请人制造的本提取物和本制剂，作为应该符合的新基准而深入研究适合的基准，结果完成的发明。即，测定本发明涉及的本提取物和本制剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，该含量在一定范围内时，将该本提取物和本制剂作为被适当制造的物质处理，即，许可使用、出厂。由此，本提取物和本制剂的每制造批次的偏差进一步降低，品质变得更加稳定。另外，由此，本提取物和本制剂的有效性和安全性受到更加严格地保证。只要是N-乙酰基神经氨酸的含量脱离所规定的一定范围的本提取物和本制剂，就将其作为不良品(不合格品)处理，由此能够将本提取物和本制剂的品质管理得更稳定。即，对于本提取物和本制剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，能够设置自主的或公共的基准。另外，申请人关于至今制造的NTP提取物和NTP制剂，对于它们中所含有的N-乙酰基神经氨酸的量没有设定基准，没有进行在测定该含量、确认该含量在一定范围内的基础上将NTP提取物和NTP制剂投入使用、出厂等。

作为公开本提取物或本制剂的文献，存在专利文献1至3。在这些文献中有关于在本提取物或本制剂中的氨基酸和核酸碱基的含量的记载。另外，同样关于本提取物或本制剂，在专利文献4中有关于硅类含量的记载。但是，在这些专利文献1至4中，关于本提取物或本制剂含有多少N-乙酰基神经氨酸这样的特定物质却没有任何记载。而且，在这些文献中，关于将本提取物或本制剂中的N-乙酰基神经氨酸的含量作为用于将本提取物或本制剂品质管理得更加稳定的指标既没有记载也没有启示。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：中国专利公开CN1205233A公报

专利文献2：国际公开WO2004/060381号公报

专利文献3：中国专利公开CN1613305A公报

专利文献4：日本特开平7－97336号公报

发明内容

发明所要解决的课题

如上所述，在本提取物和本制剂中，没有鉴定单一物质作为有效成分。因此，本提取物和本制剂的品质，通过使用SART应激小鼠求出镇痛系数的生物学试验进行的效价检测和多个确认试验等来确保。另外，尽管如此，在本提取物和本制剂中包含的各种成分在每个制造批次中不可避免地有相当程度的偏差。但是，既然本制剂作为治疗疾病的医药品而使用，就希望其品质尽可能保持一定。更稳定地确保本提取物和本制剂的品质，关系到将本提取物和本制剂的有效性和安全性制造得更恒定，是非常有意义的。

用于解决课题的方法

本发明是以在本提取物和本制剂中含有的N-乙酰基神经氨酸的量作为指标来确保本提取物和本制剂的品质的发明。即，本发明提供：通过确认含有规定量的N-乙酰基神经氨酸而被评价为是适当制造得到的本提取物和本制剂等。

发明的效果

本发明涉及的本提取物和本制剂是含有规定量的N-乙酰基神经氨酸的提取物和制剂。由此，本发明涉及的本提取物和本制剂能够作为适当制造得到的提取物和制剂处理。本发明是在更稳定地确保本提取物和本制剂的品质、本提取物和本制剂的有效性和安全性变得更恒定的方面有利的发明。

具体实施方式

N-乙酰基神经氨酸是涎酸的一种。涎酸是神经氨酸的酰基衍生物的总称，在自然界中存在多种涎酸，其中，N-乙酰基神经氨酸最多，N-羟乙酰神经氨酸第二位多。涎酸作为糖蛋白、糖脂质、糖肽等的构成成分在生物体内广泛分布，特别存在于动物或细菌的细胞膜表面，承担着参与细胞的特异性识别机理等重要的生物学功能。另外，涎酸作为与癌、炎症、免疫、病毒感染、细胞分化、激素受体等相关的物质，在医学和药学中受到重视，关于含有涎酸的生物体成分、涎酸及其衍生物进行着各种研究。

关于该涎酸、特别关于N-乙酰基神经氨酸，申请人意外地发现该物质具有镇痛作用，特别具有对神经性疼痛(neuropathic pain disease)等非炎症性疼痛疾病(non-inflammatory pain disease)的效果，基于这样的发现而取得了专利(日本特许第4005115号、中国授权公告号CN101600438B)。因为申请人制造销售的NTP制剂的特征也是对神经性疼痛等的治疗效果，所以作为用于将本提取物和本制剂的品质管理为更加稳定的品质的指标，N-乙酰基神经氨酸是合理的物质(成分)。

接着，说明制造本提取物和本制剂的方法。

本提取物能够通过采集在兔的皮肤中接种痘苗病毒而发痘的炎症皮肤，进行破碎，加入提取溶剂处理后，除去组织片，进行除蛋白处理，在酸性条件下使其吸附于吸附剂，接着在碱性条件下将有效成分洗脱而得到。

其中，痘苗病毒(vaccinia virus)可以是任意株的痘苗病毒。作为例子，可以列举利斯特(Lister)株、大连(Dairen)株、池田(Ikeda)株、EM-63株、纽约市公众卫生局(NewYork City Board of Health)株等。

另外，兔只要属于兔形目就可以为任意的兔。作为例子，有穴兔、家兔(将穴兔驯化的兔)、野兔(日本野兔)、鼠兔、雪兔等。其中，适合使用家兔。在日本，有从过去被饲养的作为家畜或实验用动物而频繁使用的称为家养兔(イエウサギ)的兔，但这也是家兔的别称。在家兔中存在多个品种(breed)，但能够优选使用称为日本白色种和新西兰白色种(新西兰白)的品种。

作为本提取物的基本的提取工序，例如，使用以下那样的工序。

(A)采集皮内接种痘苗病毒而使其发痘的兔的皮肤组织，将发痘组织破碎，加入水、苯酚水、生理盐水或加有苯酚的甘油水等提取溶剂进行数日的提取处理后，由过滤或离心分离，得到组织片被除去的粗提取液(滤液或上清液)。

(B)将在(A)中得到的粗提取液调整为酸性的pH进行加热，过滤或离心分离进行除蛋白处理。接着，将除蛋白后的溶液调整为碱性的pH进行加热，再过滤或离心分离，得到除蛋白处理后的滤液或上清液。

(C)将在(B)中得到的滤液或上清液调整为酸性的pH，使其吸附于活性炭、高岭土等吸附剂。

(D)在(C)中得到的吸附剂中加入水等提取溶剂，调整为碱性的pH，通过将吸附成分洗脱，得到痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物(本提取物)。

以上是基本的工序，如下将更详细地叙述这些工序。

关于(A)

采集在兔的皮肤中将痘苗病毒进行皮内接种使其发痘的炎症皮肤组织。采集的皮肤组织以苯酚溶液等进行清洗、消毒。破碎该炎症皮肤组织，加入其1至5倍量的提取溶剂。其中，所谓破碎是指使用绞肉机等细细地破碎为肉末状。另外，作为提取溶剂，能够使用蒸馏水、生理盐水、弱酸性至弱碱性的缓冲液等，也可以适当添加苯酚等杀菌-防腐剂、甘油等稳定剂、氯化钠、氯化钾、氯化镁等盐类等。此时，也能够通过冷冻融化、超声波、细胞膜溶解酶或表面活性剂等的处理来破坏细胞组织使提取变得容易。将得到的悬浊液放置5日至12日。此期间，可以边适当搅拌或不搅拌边加温到30至45℃。通过将得到的液体进行固液分离(过滤或离心分离等)除去组织片，得到粗提取液(滤液或上清液)。

关于(B)

对在(A)中得到的粗提取液进行除蛋白处理。除蛋白能够由通常进行的公知方法实施，能够应用加热处理、由蛋白质变性剂(例如酸、碱、脲、胍、丙酮等有机溶剂等)的处理、等电点沉淀、盐析等的方法。接着，通过除去不溶物的通常方法，例如使用滤纸(纤维素、硝酸纤维素等)、玻璃过滤器、硅藻土制品、塞茨过滤板等的过滤、超滤、离心分离等，得到除去了析出的不溶蛋白质的滤液或上清液。

关于(C)

将在(B)中得到的滤液或上清液调整为酸性、优选调整为pH3.5至5.5，进行向吸附剂的吸附操作。作为能够使用的吸附剂，能够列举活性炭、高岭土等，在提取液中添加吸附剂进行搅拌或使提取液通过吸附剂填充柱，能够使有效成分吸附于该吸附剂。在提取液中添加吸附剂时，通过过滤或离心分离等除去溶液，能够得到吸附有活性成分的吸附剂。

关于(D)

为了使活性成分从(C)中得到的吸附剂中洗脱(脱离)，在该吸附剂中加入洗脱溶剂，调整为碱性、优选调整为pH9至12，在室温或适当加热、或者搅拌进行洗脱，以过滤或离心分离等通常的方法除去吸附剂。作为所使用的洗脱溶剂，能够使用碱性溶剂，例如，能够使用调整为碱性pH的水、甲醇、乙醇、异丙醇等或它们的适当的混合溶液，能够优选使用调整为pH9至12的水。洗脱溶剂的量能够适当设定。为了将这样操作得到的洗脱液作为原药使用，能够将pH适当地调整到中性附近等，最终得到痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物(本提取物)。

本提取物在制成时为液体，因此也能够通过适当浓缩、稀释制成所希望浓度的提取物。从本提取物制造制剂时，优选实施加热灭菌处理。为了制成注射剂，例如，能够加入氯化钠等配制与生理盐水等渗的溶液。另外，也能够通过对液体状态的本提取物进行适当的浓缩干燥固化等的操作，制造片剂等口服用固体制剂。从本提取物制造这样的口服用固体制剂的具体方法，在日本专利第3818657号和日本专利第4883798号的说明书中有记载。本制剂是这样操作得到的注射剂或口服用固体制剂等。

本提取物和本制剂中的N-乙酰基神经氨酸的含量，能够由通常所使用的定量法测定。具体而言，例如，能够使用利用液相色谱质谱分析仪(LC-MS)或毛细管电泳质谱仪(CE-MS)的测定法、由DMB(1,2-二氨基-4,5-亚甲基二氧苯)的荧光标识法、酶法等。在任意1种方法中，都能够使用以校正用的N-乙酰基神经氨酸试样制作的校正曲线，将本提取物和本制剂中的N-乙酰基神经氨酸进行定量。

以上述那样的方法测定申请人制造的本提取物和本制剂中所含有的N-乙酰基神经氨酸的含量。其结果，在本提取物和本制剂中，虽然有偏差，但每1单位含有4000ng以上的N-乙酰基神经氨酸。进一步而言，在本提取物和本制剂中，每1单位含有4000～18000ng的N-乙酰基神经氨酸。因此，在以本提取物和本制剂中的N-乙酰基神经氨酸的含量作为指标管理本提取物和本制剂的品质时，判断能够将这样的含量设定为基准。另外，对申请人而言，确认了在本提取物和本制剂的制造方法上有变动时，N-乙酰基神经氨酸的含量有时会低于每1单位4000ng以下。

其中，从上述说明可知，所谓“每1单位”是指在本提取物和本制剂中的每有效成分含量的意思。在申请人制造的本提取物(NTP提取液)中，含有1.2单位/mL的有效成分。在使用其制造的注射用的本制剂(NTP注射剂)也同样含有1.2单位/mL的有效成分。在NTP注射剂中，存在容量3mL的注射剂和1mL的注射剂。因此，在3mL的制剂中含有3.6单位的有效成分，在1mL的制剂中含有1.2单位的有效成分。另一方面，在申请人制造的口服用的本制剂(NTP片剂)中，每1片含有4单位的有效成分。

然而，本提取物能够浓缩或稀释。另外，本制剂也能够制造含有各种单位的制剂。此时，在本提取物和本制剂的每份分量(每1mL、每1mg、每1管、每1片等)中所含有的有效成分的量也会变化。因此，基本上意味着以与本提取物和本制剂的有效成分的量的关系规定N-乙酰基神经氨酸的含量。原因是这涉及与本提取物和本制剂的有效性和安全性的关系的缘故。因此，申请人以每有效成分的含量(“每1单位”)规定本提取物和本制剂中的N-乙酰基神经氨酸的含量。另一方面，申请人从现在制造销售NTP制剂考虑，以具体的注射剂的每1mL和每1管或以片剂每1片进行规定，还由于在与给药量的关系上具有一定的意义，所以也进行那样的规定。

但是，在NTP注射剂中，在日本和中国存在申请人以外的公司(以下称为“其它公司”)制造的非专利药(generic drug)或类似制剂(similar drug)(以下将这些称为“其它公司注射剂”)。这些其它公司注射剂也与NTP制剂同样地使用SART应激小鼠，以镇痛效果为指标，进行作为有效成分的痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物(本提取物)的定量。在表示上，这些其它公司注射剂的有效成分的含量，如作为在日本的多个其它公司注射剂的“ROSEMORGEN Inj.”(注册商标)、“NABUTOPIN Inj.”(注册商标)和“NOLPORT Inj.”(注册商标)那样，既有简单表示为“单位”的注射剂，也有作为在中国的其它公司注射剂的“恩再适/ANALGECINE”(注册商标)那样地表示为“Analgecine单位”或“AGC单位”的注射剂。但是，即使是在这些任意制剂中，有效成分的含量也与NTP注射剂同样地为每1mL为1.2单位或1.2Analgecine(1.2AGC)单位，在3mL装的制品1管中含有3.6单位或3.6Analgecine(3.6AGC)单位。结果，在NTP制剂中使用的“Neurotropin单位”和其它公司使用的“单位”或“Analgecine单位”只是表示方法不同，作为规定有效成分含量的单位是相同的尺度。因此，在本申请中，不仅NTP制剂，而且还包含所有的其它公司的注射剂，作为表示有效成分即本提取物的含量的表示都使用“单位”。这样，多个以痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物作为有效成分的制剂，以“单位”表示有效成分，就该制剂而言，“单位”表示对于本领域技术人员是明确的。

从以上可知，在本申请中，“本制剂”是包含NTP制剂(NTP注射剂和NTP片剂)和其它公司注射剂的概念。另外，其它公司作为NTP制剂的非专利品或类似品要制造、销售片剂(以下称为“其它公司片剂”)的情况下，“本制剂”是还包含其它公司片剂的概念。

以下，作为实施例表示本提取物和本制剂制造的具体例、以及在本提取物和本制剂中的N-乙酰基神经氨酸含量的测定结果，但本发明不受这些实施例的记载任何限制。

实施例

实施例1(本提取物的制造)

在健康成熟家兔的皮肤中皮内接种痘苗病毒，切下并采集发痘的皮肤。采集的皮肤以苯酚溶液进行清洗、消毒后，除去多余的苯酚溶液，进行破碎，加入苯酚溶液混合，放置3～7日后，进而边搅拌3～4日边在35～40℃加热。然后，以盐酸将固液分离得到的提取液调整到pH4.5～5.2，以90～100℃加热处理30分钟后，过滤进行除蛋白。再以氢氧化钠将滤液调整到pH9.0～9.5，以90～100℃加热处理15分钟后，进行固液分离。

以盐酸将得到的除蛋白液调整到pH4.0～4.3，加入除蛋白液质量的2％量的活性炭，搅拌2小时后，进行固液分离。在采集的活性炭中加水，以氢氧化钠调整到pH9.5～10，以60℃搅拌90～100分钟后，进行离心分离得到上清液。在以离心分离沉淀的活性炭中再加入水后，以氢氧化钠调整到pH10.5～11，以60℃搅拌90～100分钟后，进行离心分离得到上清液。合并两上清液，以盐酸中和，得到本提取物。

实施例2(N-乙酰基神经氨酸含量的测定方法)

如下以高效液相色谱质谱分析仪(LC-MS)测定本提取物和本制剂的N-乙酰基神经氨酸含量。

以水10倍稀释按照实施例1制造的本提取物(1.2单位/mL)，注入LC-MS。

使用按照实施例1所制造的本提取物来制造的本制剂(NTP注射剂)也同样以水10倍稀释，注入LC-MS。

使用按照实施例1所制造的本提取物来制造的本制剂(NTP片剂)，将3片以甲醇/氯仿(1∶1)3mL清洗3次，除去膜包衣层，干燥后，加入12mL水进行悬浮(1单位/mL)，离心后将上清液以水10倍稀释，注入LC-MS。

就N-乙酰基神经氨酸而言，配制水溶液的标准溶液制成校正曲线。

LC-MS在HPLC部中使用Agilent生产的1100系列，在质谱分析装置中使用API3000(Applied Biosystems/MDS Sciex生产)。分析条件如下。

柱：Inertsil ODS-3(Φ2.1×150mm)

柱温：25℃，流速：200μL/分钟

流动相：甲醇/0.05％甲酸

甲醇％/分钟：0/0-0/1-44/8-100/8.1-100/11

进样量：5μL，样品室设定温度：4℃

检测：正离子检测MRM

在表1中表示LC-MS的测定条件。表1中的各参数的意义如下。

·DP：施加于孔板的电压

·FP：施加于聚焦环的电压

·CE：碰撞能量

·CXP：施加于Q2出口的电压

·NEB：雾化器气体的压力

·CUR：气帘气体的压力

·IS：离子喷雾器的电压

·CAD：碰撞气体的压力

·TEM：叶轮气体温度(turbo gas temperature)

[表1]

检测离子(Q1/Q3)	DP	FP	CE	CXP	NEB	CUR	IS	CAD	TEM
										310/274	20	100	20	20	12	10	5000	8	450

实施例3(本提取物的N-乙酰基神经氨酸含量的测定结果)

在表2中表示将本提取物中的N-乙酰基神经氨酸含量以上述实施例2中记载的方法测定得到的结果。本提取物中的有效成分含量为1.2单位/mL。以本提取物的每1单位(“/单位”)和本提取物的每1mL(“/mL”)两者表示本提取物中的N-乙酰基神经氨酸的含量。另外，批次序号中的A～C记号表示申请人的制造场所(设施)的不同。另外，测定值统一到有效数字3位(以下，在全部测定值中相同)。

[表2]

实施例4(本制剂的N-乙酰基神经氨酸含量的测定结果1)

本制剂中，在表3中表示将NTP注射剂(每1mL含有1.2单位)中的N-乙酰基神经氨酸含量以在上述实施例2中记载的方法测定得到的结果。结果以本制剂有效成分的每1单位(“/单位”)、本制剂的每1mL(“/mL”)和3mL装的安瓿管每1管(“/管”)的各含量表示。

[表3]

实施例5(本制剂的N-乙酰基神经氨酸含量的测定结果2)

本制剂中，在表4中表示将NTP片剂(每1片含有4单位)中的N-乙酰基神经氨酸含量以上述实施例2中记载的方法测定得到的结果。结果以有效成分的每1单位(“/单位”)和每1片(“/片”)的各含量表示。

[表4]

比较例1(其它公司注射剂的N-乙酰基神经氨酸含量的测定结果)

接着，在表5中表示与NTP注射剂同样地测定其它公司注射剂中的N-乙酰基神经氨酸含量的结果。另外，“ROSEMORGEN Inj.”是本申请在提出申请时销售已结束、在市场上不存在的批次，下述测定结果是申请人过去在市场上购入进行测定的结果。

[表5]

从以上的结果可知，即使是相同的痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取液制剂，根据制造公司，N-乙酰基神经氨酸的含量也有很大不同(表3～5)。另外，还可知也包含申请人在内，即使是相同公司的制剂，也有N-乙酰基神经氨酸含量显著不同的情况(表3～5)。关于作为痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取液制剂的原药的痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取液，因为不能获得其它公司的产品，所以只能测定申请人制造的痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取液(NTP提取液)。而且，对于此可知，N-乙酰基神经氨酸的含量中有一定程度的偏差(表2)。

但是，在申请人制造的本提取物和本制剂中，含有4000ng/单位以上的N-乙酰基神经氨酸(表2～表4)。另外，在申请人制造的本提取物和本制剂中，以4000～22500ng/单位的范围含有N-乙酰基神经氨酸。另一方面，在其它公司制造的本制剂中，不存在具有这样高的N-乙酰基神经氨酸含量的制剂(表5)。虽然不清楚各公司制造的本制剂中的N-乙酰基神经氨酸含量之差起因于何种原因，但极力推测是起因于各公司的本制剂的制造方法的不同。总之，由于如上所述，N-乙酰基神经氨酸具有镇痛作用，特别具有对于神经性疼痛等非炎症性疼痛疾病的效果，所以作为申请人理解为该物质(成分)在申请人制造的本制剂(NTP注射剂)中相比于其它公司含量多，其本身就是特征且为优选的特征。

如上所述，在本提取物和本制剂中含有4000ng/单位以上的N-乙酰基神经氨酸为本提取物和本制剂的特征。同样地，在本提取物和本制剂中，以实施例2中记载的本提取物和本制剂(注射剂、片剂)中的N-乙酰基神经氨酸含量的测定方法(以下称为“10倍稀释法”)测定时，以4000～15000ng/单位的范围含有N-乙酰基神经氨酸为本提取物和本制剂的特征。利用将在10倍稀释法中由水得到的稀释倍率设为10倍的操作，设定为例如以水的50倍稀释或250倍稀释等其他的稀释倍率的测定方法(以下称为“其他稀释法”)来测定本提取物和本制剂中的N-乙酰基神经氨酸含量时，以4000～22500ng/单位的范围含有N-乙酰基神经氨酸为本提取物和本制剂的特征。其中，相比于10倍稀释法时，上限为1.5倍的理由在后面叙述。

另外，本制剂中，关于每1mL含有1.2单位的注射剂(以下称为“本注射剂”)，以4800ng/mL以上含有N-乙酰基神经氨酸为本注射剂的特征。同样地，以10倍稀释法测定时，以4800～18000ng/单位的范围含有N-乙酰基神经氨酸为本注射剂的特征。以其他稀释法测定本注射剂中的N-乙酰基神经氨酸的含量时，以4800～27000ng/mL的范围含有N-乙酰基神经氨酸为本注射剂的特征。另外，在本注射剂为3mL容量的安瓿管装的注射剂时(以下将这样的注射剂称为“本3mL装注射剂”)，每1管含有14400ng/管以上的N-乙酰基神经氨酸为本3mL装注射剂的特征。同样地，以10倍稀释法测定时，以14400～54000ng/管的范围含有N-乙酰基神经氨酸为本3mL装注射剂的特征。以其他稀释法测定本3mL装注射剂中的N-乙酰基神经氨酸的含量时，以14400～81000ng/管的范围含有N-乙酰基神经氨酸为本3mL装注射剂的特征。其中，相比于10倍稀释法时，上限为1.5倍的理由也在后面叙述。

另外，在本制剂中，关于每1片含有4单位的片剂(以下称为“本片剂”)，以16000ng/片以上含有N-乙酰基神经氨酸为本片剂的特征。同样地，以10倍稀释法测定时，以16000～60000ng/片的范围含有N-乙酰基神经氨酸为本片剂的特征。以其他稀释法测定本片剂中的N-乙酰基神经氨酸含量时，以16000～90000ng/片的范围含有N-乙酰基神经氨酸为本片剂的特征。其中，相比于10倍稀释法时，上限为1.5倍的理由也在后面叙述。

从这样的情况出发，能够测定在本提取物和本制剂中含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认本提取物和本制剂是否被适当地制造，管理它们的品质。即，测定在本提取物和本制剂中含有的N-乙酰基神经氨酸的量，如果其为4000ng/单位以上，就能够评价为适当制造得到的提取物和制剂。另外，将在本提取物和本制剂中含有的N-乙酰基神经氨酸的量以10倍稀释法测定时确认是否为4000～15000ng/单位，以其他稀释法测定时确认是否为4000～22500ng/单位的范围，也能够将该本提取物和本制剂评价为适当制造得到的提取物和制剂。

本注射剂的情况下，测定在本注射剂中含有的N-乙酰基神经氨酸的量，如果其为4800ng/mL以上，就能够将该本注射剂评价为适当制造得到的注射剂。另外，测定在本注射剂中含有的N-乙酰基神经氨酸的量，在其以10倍稀释法测定时确认为4800～18000ng/mL，在以其他稀释法测定时确认为4800～27000ng/mL的范围，就能够将该本注射剂评价为适当制造得到的注射剂。另外，同样地在本3mL装注射剂的情况下，测定所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，如果其为14400ng/mL以上或在以10倍稀释法测定时确认为14400～54000ng/mL、在以其他稀释法测定时确认为14400～81000ng/mL的范围，就能够将3mL装该本注射剂评价为适当制造得到的注射剂。

本片剂时，测定在本片剂中含有的N-乙酰基神经氨酸的量，如果其为16000ng/片以上时，就能够将该本片剂评价为适当制造得到的片剂。另外，在以10倍稀释法测定本片剂中含有的N-乙酰基神经氨酸的量时确认为16000～60000ng/片，在以其他稀释法测定时确认为16000～90000ng/片的范围，也能够将该本片剂评价为适当制造得到的片剂。

另外，以下限～上限的范围表示上述N-乙酰基神经氨酸的含量时的相当于上限的数值，由其它稀释方法测定时，变得比实施例3～5中得到的测定结果(表2～4)大得多(约1.5倍左右)，是由于下述理由造成的。

即，在上述实施例中，N-乙酰基神经氨酸的含量由LC-MS测定，但N-乙酰基神经氨酸容易受到夹杂离子的影响(离子抑制)。本发明的发明者们基本上将本提取物等的试样稀释10倍进行测定，但稀释为50倍或250倍时，测定出比稀释10倍时的测定值高的值。该现象可以认为是因为在稀释度高时夹杂离子浓度的影响下降。本发明的发明者们比较在多个试样中以各稀释倍率的定量值进行验证的结果，确认了稀释为50倍或250倍时，测定出10倍稀释时的最大1.5倍左右的值(表6)。基于该事实，在本申请中，如上所述设定相当于N-乙酰基神经氨酸含量上限的数值。

[表6]

从以上内容，作为本发明能够导出如下内容。但是，这些为例示，本发明不受这些限定。另外，在以下表示的各发明中，记载为“测定N-乙酰基神经氨酸的量”，通常以在本提取物和本制剂的每制造批次中测定N-乙酰基神经氨酸的量的意义使用。

(1)一种痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物，其是通过测定该提取物所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该提取物每1单位为4000ng以上，而被评价为是适当制造得到的痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物。

(2)一种痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物，其是通过测定该提取物所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该提取物每1单位为4000～22500ng，而被评价为是适当制造得到的痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物。

(3)一种液体的痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物，其是通过测定该提取物所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该提取物每1mL为4800ng以上，而被评价为是适当制造得到的液体的痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物。

(4)一种液体的痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物，其是通过测定该提取物所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该提取物每1mL为4800～27000ng，而被评价为是适当制造得到的液体的痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物。

(5)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的制剂，其是通过测定该制剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该制剂中的痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物每1单位为4000ng以上，而被评价为是适当制造得到的含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的制剂。

(6)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的制剂，其是通过测定该制剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该制剂中的痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物每1单位为4000～22500ng，而被评价为是适当制造得到的痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的制剂。

(7)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的制剂，其是通过测定该制剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该制剂中的痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物每1单位为4000ng以上，而被作为适当制造得到的产品出厂的含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的制剂。

(8)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的制剂，其是通过测定该制剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该制剂中的痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物每1单位为4000～22500ng，而被作为适当制造得到的产品出厂的含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的制剂。

(9)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的制剂，其是测定该制剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，其含量满足该制剂中的痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物每1单位为4000ng以上的基准而出厂的含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的制剂。

(10)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的制剂，其是测定该制剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，其含量满足该制剂中的痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物每1单位为4000～22500ng的基准而出厂的含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的制剂。

(11)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的注射剂，其是通过测定该注射剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该注射剂每1mL为4800ng以上，而被评价为是适当制造得到的含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的注射剂。

(12)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的注射剂，其是通过测定该注射剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该注射剂每1mL为4800～27000ng，而被评价为是适当制造得到的含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的注射剂。

(13)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的注射剂，其是通过测定该注射剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该注射剂每1mL为4800ng以上，而作为适当制造得到的产品出厂的含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的注射剂。

(14)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的注射剂，其是测定该注射剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该注射剂每1mL为4800～27000ng，而作为适当制造得到的产品出厂的含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的注射剂。

(15)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的注射剂，其是测定该注射剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，其含量满足该注射剂每1mL为4800ng以上的基准而出厂的含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的注射剂。

(16)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的注射剂，其是测定该注射剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，其含量满足该注射剂每1mL为4800～27000ng的基准而出厂的含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的注射剂。

(17)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的3mL装的注射剂，其是通过测定该注射剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该注射剂每1管为14400ng以上，而被评价为是适当制造得到的含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的3mL装的注射剂。

(18)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的3mL装的注射剂，其是通过测定该注射剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该注射剂每1管为14400～81000ng，而被评价为是适当制造得到的含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的3mL装的注射剂。

(19)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的3mL装的注射剂，其是通过测定该注射剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该注射剂每1管为14400ng以上，而作为适当制造得到的产品出厂的含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的3mL装的注射剂。

(20)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的3mL装的注射剂，其是通过测定该注射剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该注射剂每1管为14400～81000ng，而作为适当制造得到的产品出厂的含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的3mL装的注射剂。

(21)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的3mL装的注射剂，其是测定该注射剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，其含量满足该注射剂每1管为14400ng以上的基准而出厂的含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的3mL装的注射剂。

(22)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的3mL装的注射剂，其是测定该注射剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，其含量满足该注射剂每1管为14400～81000ng的基准而出厂的含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的3mL装的注射剂。

(23)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的片剂，其是通过测定该片剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该片剂每1片为16000ng以上，而被评价为是适当制造得到的含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的片剂。

(24)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的片剂，其是通过测定该片剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该片剂每1片为16000～90000ng，而被评价为是适当制造得到的含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的片剂。

(25)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的片剂，其是通过测定该片剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该片剂每1片为16000ng以上，而作为适当制造得到的产品出厂的含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的片剂。

(26)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的片剂，其是通过测定该片剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该片剂每1片为16000～90000ng，而作为适当制造得到的产品出厂的含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的片剂。

(27)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的片剂，其是测定该片剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，其含量满足该片剂每1片为16000ng以上的基准而出厂的含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的片剂。

(28)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的片剂，其是测定该片剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，其含量满足该片剂每1片为16000～90000ng的基准而出厂的含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的片剂。

(29)在(5)～(10)的任一项中记载的制剂，其为镇痛剂。

(30)在(11)～(22)的任一项中记载的注射剂，其为镇痛剂。

(31)在(23)～(28)的任一项中记载的片剂，其为镇痛剂。

(32)一种痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物，其特征在于，其是测定该提取物所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该提取物每1单位为4000ng以上的痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物。

(33)一种痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物，其特征在于，其是测定该提取物所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该提取物每1单位为4000～22500ng的痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物。

(34)一种液体的痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物，其特征在于，其是测定该提取物所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该提取物每1mL为4800ng以上的液体的痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物。

(35)一种液体的痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物，其特征在于，其是测定该提取物所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该提取物每1mL为4800～27000ng的液体的痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物。

(36)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的制剂，其特征在于，其是测定该制剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该制剂中的痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物每1单位为4000ng以上的含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的制剂。

(37)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的制剂，其特征在于，其是测定该制剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该制剂中的痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物每1单位为4000～22500ng的含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的制剂。

(38)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的注射剂，其特征在于，其是测定该注射剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该注射剂每1mL为4800ng以上的含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的制剂。

(39)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的注射剂，其特征在于，其是测定该注射剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该注射剂每1mL为4800～27000ng的含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的制剂。

(40)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的3mL装的注射剂，其特征在于，其是测定该注射剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该注射剂每1管为14400ng以上的含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的3mL装的注射剂。

(41)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的3mL装的注射剂，其特征在于，其是测定该注射剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该注射剂每1管为14400～81000ng的含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的3mL装的注射剂。

(42)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的片剂，其特征在于，其是测定该片剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该片剂每1片为16000ng以上的含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的片剂。

(43)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的片剂，其特征在于，其是测定该片剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该片剂每1片为16000～90000ng的含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的片剂。

(44)在(36)或(37)中记载的制剂，其为镇痛剂。

(45)在(38)～(41)的任一项中记载的注射剂，其为镇痛剂。

(46)在(42)或(43)中记载的片剂，其为镇痛剂。

(47)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的制剂，其特征在于，其是测定在出厂前该制剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该制剂中的痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物每1单位为4000ng的含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的制剂。

(48)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的制剂，其特征在于，其是测定在出厂前该制剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该制剂中的痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物每1单位为4000～22500ng的含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的制剂。

(49)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的注射剂，其特征在于，其是测定在出厂前该注射剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该注射剂每1mL为4800ng以上的含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的注射剂。

(50)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的注射剂，其特征在于，其是测定在出厂前该注射剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该注射剂每1mL为4800～27000ng的含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的注射剂。

(51)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的3mL装的注射剂，其特征在于，其是测定在出厂前该注射剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该注射剂每1管为14400ng以上的含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的3mL装的注射剂。

(52)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的3mL装的注射剂，其特征在于，其是测定在出厂前该注射剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该注射剂每1管为14400～81000ng的含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的3mL装的注射剂。

(53)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的片剂，其特征在于，其是测定在出厂前该片剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该注射剂每1片为16000ng以上的含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的片剂。

(54)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的片剂，其特征在于，其是测定在出厂前该片剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该片剂每1片为16000～90000ng的含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的片剂。

(55)在(47)或(48)中记载的制剂，其为镇痛剂。

(56)在(49)～(52)的任一项中记载的注射剂，其为镇痛剂。

(57)在(53)或(54)中记载的片剂，其为镇痛剂。

(58)一种痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的检查方法，其中，测定该提取物所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，其含量在该提取物每1单位为4000ng以上时，被认为该提取物的制造适当。

(59)一种痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的检查方法，其中，测定该提取物所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，其含量在该提取物每1单位为4000～22500ng时，被认为该提取物的制造适当。

(60)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的制剂的检查方法，其中，测定该制剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，其含量在该制剂中的痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物每1单位为4000ng以上时，被认为该制剂的制造适当。

(61)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的制剂的检查方法，其中，测定该制剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，其含量在该制剂中的痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物每1单位为4000～22500ng时，被认为该制剂的制造适当。

(62)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的注射剂的检查方法，在该注射剂中，测定该注射剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，其含量在该注射剂每1mL为4800ng以上时，被认为该注射剂的制造适当。

(63)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的注射剂的检查方法，在该注射剂中，测定该注射剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，其含量在该注射剂每1mL为4800～27000ng时，被认为该注射剂的制造适当。

(64)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的3mL装的注射剂的检查方法，在该3mL装注射剂中，测定该注射剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，其含量在该注射剂每1管为14400ng以上时，被认为该3mL装注射剂的制造适当。

(65)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的3mL装的注射剂的检查方法，在该3mL装注射剂中，测定该注射剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，其含量在该注射剂每1管为14400～81000ng时，被认为该3mL装注射剂的制造适当。

(66)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的片剂的检查方法，在该片剂中，测定该片剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，其含量在该片剂每1片为16000ng以上时，被认为该片剂的制造适当。

(67)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的片剂的检查方法，在该片剂中，测定该片剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，其含量在该片剂每1片为16000～90000ng时，被认为该片剂的制造适当。

(68)一种管理痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的制造的方法，其是通过该提取物所含有的N-乙酰基神经氨酸的量在该提取物每1单位为4000ng以上时，被认为该提取物的制造适当而进行的。

(69)一种管理痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的制造的方法，其是通过该提取物所含有的N-乙酰基神经氨酸的量在该提取物每1单位为4000～22500ng时，被认为该提取物的制造适当而进行的。

(70)一种管理含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的制剂的制造的方法，其是通过该制剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量在该制剂中的痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物每1单位为4000ng以上时，被认为该制剂的制造适当而进行的。

(71)一种管理含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的制剂的制造的方法，其是通过该制剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量在该制剂中的痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物每1单位为4000～22500ng时，被认为该制剂的制造适当而进行的。

(72)一种管理含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的注射剂的制造的方法，其是通过在该注射剂中，该注射剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量在该注射剂每1mL为4000ng以上时，被认为该注射剂的制造适当而进行的。

(73)一种管理含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的注射剂的制造的方法，其是通过在该注射剂中，该注射剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量在该注射剂每1mL为4800～27000ng时，被认为该注射剂的制造适当而进行的。

(74)一种管理含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的3mL装的注射剂的制造的方法，其是通过在该3mL装注射剂中，该注射剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量在该注射剂每1管为14400ng以上时，被认为该注射剂的制造适当而进行的。

(75)一种管理含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的3mL装的注射剂的制造的方法，其是通过在该3mL装注射剂中，该注射剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量在该注射剂每1管为14400～81000ng时，被认为该注射剂的制造适当而进行的。

(76)一种管理含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的片剂的制造的方法，其是通过在该片剂中，该片剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量在该片剂每1片为16000ng以上时，被认为该片剂的制造适当而进行的。

(77)一种管理含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的片剂的制造的方法，其是通过在该片剂中，该片剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量在该片剂每1片为16000～90000ng时，被认为该片剂的制造适当而进行的。

(78)在含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的制剂制造中，N-乙酰基神经氨酸的含量在该提取物每1单位为4000ng以上的该提取物的使用。

(79)在含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的制剂制造中，N-乙酰基神经氨酸的含量在该提取物每1单位为4000～22500ng的该提取物的使用。

(80)在含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的制剂制造中，N-乙酰基神经氨酸的含量在该提取物每1mL为4800ng以上的该提取物的使用。

(81)在含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的制剂制造中，N-乙酰基神经氨酸的含量在该提取物每1mL为4800～27000ng的该提取物的使用。

(82)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的制剂的出厂方法，其中，对该制剂测定该制剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该制剂中的痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物每1单位为4000ng以上时，判断该制剂能够作为被适当制造的制剂出厂。

(83)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的制剂的出厂方法，其中，对该制剂测定该制剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该制剂中的痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物每1单位为4000～22500ng时，判断该制剂能够作为被适当制造的制剂出厂。

(84)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的注射剂的出厂方法，其中，对该注射剂测定该注射剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该注射剂每1mL为4800ng以上时，判断该注射剂能够作为被适当制造的注射剂出厂。

(85)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的注射剂的出厂方法，其中，对该注射剂测定该注射剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该注射剂每1mL为4800～27000ng时，判断该注射剂能够作为被适当制造的注射剂出厂。

(86)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的3mL装的注射剂的出厂方法，其中，对该3mL装的注射剂测定该注射剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该注射剂每1管为14400ng以上时，判断该3mL装注射剂能够作为被适当制造的3mL装注射剂出厂。

(87)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的3mL装的注射剂的出厂方法，其中，对该3mL装的注射剂测定该注射剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该注射剂每1管为14400～81000ng时，判断该3mL装注射剂能够作为被适当制造的3mL装注射剂出厂。

(88)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的片剂的出厂方法，其中，对该片剂测定该片剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该片剂每1片为16000ng以上时，判断该片剂能够作为被适当制造的片剂出厂。

(89)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的片剂的出厂方法，其中，对该片剂测定该片剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该片剂每1片为16000～90000ng时，判断该片剂能够作为被适当制造的片剂出厂。

(90)根据(82)或(83)中记载的出厂方法所出厂的含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的制剂。

(91)根据(84)～(77)的任一项中记载的出厂方法所出厂的含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的注射剂。

(92)根据(88)或(89)中记载的出厂方法所出厂的含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的片剂。

(93)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的制剂，通过在每制造批次中测定该制剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该制剂中的痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物每1单位为4000ng以上，由此降低了该制剂具有的效果在每制造批次的偏差。

(94)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的制剂，通过在每制造批次中测定该制剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该制剂中的痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物每1单位为4000～22500ng，由此降低了该制剂具有的效果在每制造批次的偏差。

(95)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的注射剂，通过在每制造批次中测定该注射剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该注射剂每1mL为4800ng以上，由此降低了该注射剂具有的效果在每制造批次的偏差。

(96)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的注射剂，通过在每制造批次中测定该注射剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该注射剂每1mL为4800～27000ng，由此降低了该注射剂具有的效果在每制造批次的偏差。

(97)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的3mL装的注射剂，通过在每制造批次中测定该注射剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该注射剂每1管为14400ng以上，由此降低了该注射剂具有的效果在每制造批次的偏差。

(98)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的3mL装的注射剂，通过在每制造批次中测定该注射剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该注射剂每1管为14400～81000ng，由此降低了该注射剂具有的效果在每制造批次的偏差。

(99)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的片剂，通过在每制造批次中测定该片剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该片剂每1片为16000ng以上，由此降低了该片剂具有的效果在每制造批次的偏差。

(100)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的片剂，通过在每制造批次中测定该片剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该片剂每1片为16000～90000ng，由此降低了该片剂具有的效果在每制造批次的偏差。

(101)在(93)或(94)中记载的制剂，其中，效果为镇痛效果。

(102)在(101)中记载的制剂，其中，镇痛效果为对于非炎症性疼痛疾病的镇痛效果。

(103)在(95)～(98)的任一项中记载的注射剂，其中，效果为镇痛效果。

(104)在(103)中记载的注射剂，其中，镇痛效果为对于非炎症性疼痛疾病的镇痛效果。

(105)在(99)或(100)中记载的片剂，其中，效果为镇痛效果。

(106)在(105)中记载的片剂，其中，镇痛效果为对于非炎症性疼痛疾病的镇痛效果。

(107)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的制剂的制造方法，降低了该制剂具有的效果在每制造批次的偏差，在该制剂中，在每制造批次中测定该制剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，其含量在该制剂中的痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物每1单位为4000ng以上时，被认为该制剂的制造适当。

(108)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的制剂的制造方法，降低了该制剂具有的效果在每制造批次的偏差，在该制剂中，在每制造批次中测定该制剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，其含量在该制剂中的痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物每1单位为4000～22500ng时，被认为该制剂的制造适当。

(109)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的注射剂的制造方法，降低了该注射剂具有的效果在每制造批次的偏差，在该注射剂中，在每制造批次中测定该注射剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，其含量在该注射剂每1mL为4800ng以上时，被认为该注射剂的制造适当。

(110)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的注射剂的制造方法，降低了该注射剂具有的效果在每制造批次的偏差，在该注射剂中，在每制造批次中测定该注射剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，其含量在该注射剂每1mL为4800～27000ng时，被认为该注射剂的制造适当。

(111)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的3mL装的注射剂的制造方法，降低了该3mL装的注射剂具有的效果在每制造批次的偏差，在该3mL装的注射剂中，在每制造批次中测定该注射剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，其含量在该注射剂每1管为14400ng以上时，被认为该注射剂的制造适当。

(112)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的3mL装的注射剂的制造方法，降低了该3mL装的注射剂具有的效果在每制造批次的偏差，在该3mL装的注射剂中，在每制造批次中测定该注射剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，其含量在该注射剂每1管为14400～81000ng时，被认为该注射剂的制造适当。

(113)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的片剂的制造方法，降低了该片剂具有的效果在每制造批次的偏差，在该片剂中，在每制造批次中测定该片剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，其含量在该片剂每1片为16000ng以上时，被认为该片剂的制造适当。

(114)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的片剂的制造方法，降低了该片剂具有的效果在每制造批次的偏差，在该片剂中，在每制造批次中测定该片剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，其含量在该片剂每1片为16000～90000ng时，被认为该片剂的制造适当。

(115)在(107)～(114)的任一项中记载的制造方法，其中，效果为镇痛效果。

(116)在(115)中记载的制造方法，其中，镇痛效果为对于非炎症性疼痛疾病的镇痛效果。

(117)通过(107)或(108)中记载的制造方法所制造的含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的制剂。

(118)通过(109)～(112)的任一项中记载的制造方法所制造的含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的注射剂。

(117)通过(113)或(114)中记载的制造方法所制造的含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的片剂。

(120)由(115)中记载的制造方法所制造的制剂、注射剂或片剂。

(121)由(116)中记载的制造方法所制造的制剂、注射剂或片剂。

(122)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的制剂的检查方法，降低了该制剂具有的效果在每制造批次的偏差，在该制剂中，在每制造批次中测定该制剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，其含量在该制剂中的痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物每1单位为4000ng以上时，被认为该制剂的制造适当。

(123)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的制剂的检查方法，降低了该制剂具有的效果在每制造批次的偏差，在该制剂中，在每制造批次中测定该制剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，其含量在该制剂中的痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物每1单位为4000～22500ng时，被认为该制剂的制造适当。

(124)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的注射剂的检查方法，降低了该注射剂具有的效果在每制造批次的偏差，在该注射剂中，在每制造批次中测定该注射剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，其含量在该注射剂每1mL为4800ng以上时，被认为该注射剂的制造适当。

(125)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的注射剂的检查方法，降低了该注射剂具有的效果在每制造批次的偏差，在该注射剂中，在每制造批次中测定该注射剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，其含量在该注射剂每1mL为4800～27000ng时，被认为该注射剂的制造适当。

(126)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的3mL装的注射剂的检查方法，降低了该3mL装的注射剂具有的效果在每制造批次的偏差，在该3mL装的注射剂中，在每制造批次中测定该注射剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，其含量在该注射剂每1管为14400ng以上时，被认为该注射剂的制造适当。

(127)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的3mL装的注射剂的检查方法，降低了该3mL装的注射剂具有的效果在每制造批次的偏差，在该3mL装的注射剂中，在每制造批次中测定该注射剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，其含量在该注射剂每1管为14400～81000ng时，被认为该注射剂的制造适当。

(128)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的片剂的检查方法，降低了该片剂具有的效果在每制造批次的偏差，在该片剂中，在每制造批次中测定该片剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，其含量在该片剂每1片为16000ng以上时，被认为该片剂的制造适当。

(129)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的片剂的检查方法，降低了该片剂具有的效果在每制造批次的偏差，在该片剂中，在每制造批次中测定该片剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，其含量在该片剂每1片为16000～90000ng时，被认为该片剂的制造适当。

(130)在(122)～(129)的任一项中记载的检查方法，其中，效果为镇痛效果。

(131)在(130)中记载的检查方法，其中，镇痛效果为对于非炎症性疼痛疾病的镇痛效果。

(132)通过(122)或(123)中记载的检查方法所检查的含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的制剂。

(133)通过(124)～(127)的任一项中记载的检查方法所检查的含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的注射剂。

(134)通过(128)或(129)中记载的检查方法所检查的含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的片剂。

(135)由(130)中记载的检查方法所检查的制剂、注射剂或片剂。

(136)由(131)中记载的检查方法所检查的制剂、注射剂或片剂。

(137)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的制剂的出厂方法，降低了该制剂具有的效果在每制造批次的偏差，在每制造批次中对该制剂测定该制剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该制剂中的痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物每1单位为4000ng以上时，判断该制剂能够适当地制造。

(138)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的制剂的出厂方法，降低了该制剂具有的效果在每制造批次的偏差，在每制造批次中对该制剂测定该制剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该制剂中的痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物每1单位为4000～22500ng时，判断该制剂能够适当地制造。

(139)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的注射剂的出厂方法，降低了该注射剂具有的效果在每制造批次的偏差，在每制造批次中对该注射剂测定该注射剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该注射剂每1mL为4800ng以上时，判断该注射剂能够适当地制造。

(140)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的注射剂的出厂方法，降低了该注射剂具有的效果在每制造批次的偏差，在每制造批次中对该注射剂测定该注射剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该注射剂每1mL为4800～27000ng时，判断该注射剂能够适当地制造。

(141)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的3mL装的注射剂的出厂方法，降低了该3mL装的注射剂具有的效果在每制造批次的偏差，在每制造批次中对该3mL装的注射剂测定该注射剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该注射剂每1管为14400ng以上时，判断该注射剂能够适当地制造。

(142)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的3mL装的注射剂的出厂方法，降低了该3mL装的注射剂具有的效果在每制造批次的偏差，在每制造批次中对该3mL装的注射剂测定该注射剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该注射剂每1管为14400～81000ng时，判断该注射剂能够适当地制造。

(143)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的片剂的出厂方法，降低了该片剂具有的效果在每制造批次的偏差，在每制造批次中对该片剂测定该片剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该片剂每1片为16000ng以上时，判断该片剂能够适当地制造。

(144)一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的片剂的出厂方法，降低了该片剂具有的效果在每制造批次的偏差，在每制造批次中对该片剂测定该片剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该片剂每1片为16000～90000ng时，判断该片剂能够适当地制造。

(145)在(137)～(144)的任一项中记载的出厂方法，其中，效果为镇痛效果。

(146)在(145)中记载的出厂方法，其中，镇痛效果为对于非炎症性疼痛疾病的镇痛效果。

(147)通过(137)或(138)中记载的出厂方法所出厂的含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的制剂。

(148)通过(139)～(142)的任一项中记载的出厂方法所出厂的含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的注射剂。

(149)通过(143)或(144)中记载的出厂方法所出厂的含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的片剂。

(150)由(145)中记载的出厂方法所出厂的制剂、注射剂或片剂。

(151)由(146)中记载的出厂方法所出厂的制剂、注射剂或片剂。

(152)一种痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的制造方法，其特征在于，在该方法中，在破碎的发痘组织中加入提取溶剂，放置5至12日。

(153)在(152)中记载的痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的制造方法，其特征在于，在破碎的发痘组织中加入提取溶剂放置5至12日的期间，边搅拌或不搅拌边加热到30至45℃。

(154)在(153)中记载的痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的制造方法，其特征在于，在破碎的发痘组织中加入提取溶剂，放置3～7日后，再边搅拌3～4日边加热到35～40℃。

(155)在(152)～(154)的任一项中记载的痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的制造方法，其中，在破碎的发痘组织中加入的提取溶剂为苯酚溶液。

(156)在(155)中记载的痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的制造方法，其中，苯酚溶液的量为破碎的发痘组织的1至5倍量。

(157)通过(152)～(156)的任一项中记载的制造方法所制造的痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物。

(158)在(157)中记载的痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物，其中，该提取物所含有的N-乙酰基神经氨酸的量在该提取物每1单位为4000ng以上。

(159)在(157)中记载的痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物，其中，该提取物所含有的N-乙酰基神经氨酸的量在该提取物每1单位为4000～22500ng。

(160)通过(152)～(156)的任一项中记载的制造方法所制造的含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的制剂。

(161)在(160)中记载的制剂，其中，该制剂为注射剂。

(162)在(160)中记载的制剂，其中，该制剂为3mL装的注射剂。

(163)在(160)中记载的制剂，其中，该制剂为片剂。

(164)在(160)中记载的制剂，其中，该制剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，在该制剂所含有的痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物每1单位为4000ng以上。

(165)在(160)中记载的制剂，其中，该制剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，在该制剂所含有的痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物每1单位为4000～22500ng。

(166)在(161)中记载的制剂，其中，该注射剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量在该注射剂每1mL为4800ng以上。

(167)在(161)中记载的制剂，其中，该注射剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量在该注射剂每1mL为4800～27000ng。

(168)在(162)中记载的制剂，其中，该注射剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量在该注射剂每1管为14400ng以上。

(169)在(162)中记载的制剂，其中，该注射剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量在该注射剂每1管为14400～81000ng。

(170)在(163)中记载的制剂，其中，该片剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量在该片剂每1片为16000ng以上。

(171)在(163)中记载的制剂，其中，该片剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量在该片剂每1片为16000～90000ng。

工业上的可利用性

如上所述，本发明提供通过测定N-乙酰基神经氨酸的含量并确认含有规定量而被评价为是适当制造的痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物或含有该提取物的制剂。另外，本发明提供通过在这样的提取物或制剂的每个制造批次中确认含有规定量的N-乙酰基神经氨酸，而评价该提取物和制剂为适当制造的检查方法。这样的提取物和制剂由于使用生物体组织制造，所以能够更严格地确保其每制造批次的品质的恒定性，非常有用。

Claims (19)

1.一种痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物，其特征在于：

测定该提取物所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该提取物每1单位为4000ng以上。

2.一种液体的痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物，其特征在于：

测定该提取物所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该提取物每1mL为4800ng以上。

3.一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的制剂，其特征在于：

测定该制剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该制剂中的痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物每1单位为4000ng以上。

4.一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的注射剂，其特征在于：

测定该注射剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该注射剂每1mL为4800ng以上。

5.一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的3mL装的注射剂，其特征在于：

测定该注射剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该注射剂每1管为14400ng以上。

6.一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的片剂，其特征在于：

测定该片剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该片剂每1片为16000ng以上。

7.如权利要求3所述的制剂，其特征在于：

其为镇痛剂。

8.如权利要求4或5所述的注射剂，其特征在于：

其为镇痛剂。

9.如权利要求6所述的片剂，其特征在于：

其为镇痛剂。

10.一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的制剂，其特征在于：

通过在每制造批次中测定该制剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该制剂中的痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物每1单位为4000ng以上，由此降低了该制剂具有的效果在每制造批次的偏差。

11.如权利要求10所述的制剂，其特征在于：

效果为镇痛效果。

12.如权利要求11所述的制剂，其特征在于：

镇痛效果为对于非炎症性疼痛疾病的镇痛效果。

13.一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的注射剂，其特征在于：

通过在每制造批次中测定该注射剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该注射剂每1mL为4800ng以上，由此降低了该注射剂具有的效果在每制造批次的偏差。

14.一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的3mL装的注射剂，其特征在于：

通过在每制造批次中测定该注射剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该注射剂每1管为14400ng以上，由此降低了该注射剂具有的效果在每制造批次的偏差。

15.如权利要求13或14所述的注射剂，其特征在于：

效果为镇痛效果。

16.如权利要求15所述的注射剂，其特征在于：

镇痛效果为对于非炎症性疼痛疾病的镇痛效果。

17.一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的片剂，其特征在于：

通过在每制造批次中测定该片剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量，确认其含量在该片剂每1片为16000ng以上，由此降低了该片剂具有的效果在每制造批次的偏差。

18.如权利要求17所述的片剂，其特征在于：

效果为镇痛效果。

19.如权利要求18所述的片剂，其特征在于：

镇痛效果为对于非炎症性疼痛疾病的镇痛效果。