CN106047970B - 狭鳕鱼骨中胶原多肽与活性钙的提取方法 - Google Patents

狭鳕鱼骨中胶原多肽与活性钙的提取方法 Download PDF

Info

Publication number
CN106047970B
CN106047970B CN201610457531.2A CN201610457531A CN106047970B CN 106047970 B CN106047970 B CN 106047970B CN 201610457531 A CN201610457531 A CN 201610457531A CN 106047970 B CN106047970 B CN 106047970B
Authority
CN
China
Prior art keywords
bone
acid
fish
solution
calcium
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201610457531.2A
Other languages
English (en)
Other versions
CN106047970A (zh
Inventor
毛毛
衣美艳
郭红
焉丽波
郝家喜
陈甜甜
柳耀建
包焕玲
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
SHANDONG ORIENTAL OCEAN SCI-TECH Co Ltd
Original Assignee
SHANDONG ORIENTAL OCEAN SCI-TECH Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by SHANDONG ORIENTAL OCEAN SCI-TECH Co Ltd filed Critical SHANDONG ORIENTAL OCEAN SCI-TECH Co Ltd
Priority to CN201610457531.2A priority Critical patent/CN106047970B/zh
Publication of CN106047970A publication Critical patent/CN106047970A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN106047970B publication Critical patent/CN106047970B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P21/00—Preparation of peptides or proteins
    • C12P21/06—Preparation of peptides or proteins produced by the hydrolysis of a peptide bond, e.g. hydrolysate products
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C51/00—Preparation of carboxylic acids or their salts, halides or anhydrides
    • C07C51/41—Preparation of salts of carboxylic acids
    • C07C51/418—Preparation of metal complexes containing carboxylic acid moieties
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/78—Connective tissue peptides, e.g. collagen, elastin, laminin, fibronectin, vitronectin or cold insoluble globulin [CIG]

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Seasonings (AREA)

Abstract

本发明公开了狭鳕鱼骨中胶原多肽与活性钙的提取方法，包括以下步骤：(一)原料的预处理；(二)骨胶原多肽的制备：(1)鱼骨用NaOH溶液浸泡；再进行高温高压处理；(2)骨胶原的浸提；(3)高压脉冲电场处理；(4)酶解：先加入复合胶原蛋白酶酶解，再加入风味蛋白酶酶解；脱色脱腥，喷雾干燥，即得胶原多肽；(三)鱼骨活性钙的制备：(1)果酸提取；(2)二次果酸提取；(3)合并即得。本发明的提取方法，克服了海洋源胶原多肽腥味重、有苦味和不良异味的缺点，得到了无刺激性气味、口味鲜美柔和的狭鳕鱼骨胶原多肽，同时，本发明经济、高效地利用骨渣制备了活性果酸螯合钙，提高了狭鳕鱼骨的利用率，实现了高值化利用。

Description

狭鳕鱼骨中胶原多肽与活性钙的提取方法
技术领域
本发明涉及狭鳕鱼骨中胶原多肽与活性钙的提取方法，属于鱼骨高值开发技术领域。
背景技术
鳕鱼是我国远洋渔业重要捕捞对象之一，每年捕捞数10万吨。然而海洋鱼类在加工生产过程中会产生大量的废弃物，其中鱼骨占鱼整体重量的15％左右，在生产中通常直接丢弃，或仅作为饲料、肥料应用，造成资源的巨大浪费。鱼骨主要成分是灰分、蛋白质、水分及脂肪，并且钙含量丰富，其中胶原成分含量高，是开发鱼骨胶原肽及其相关产品的良好资源，对水产品综合利用和环境保护有着重要意义。
骨胶原是典型的Ⅰ型胶原蛋白，胶原纤维相互交联形成骨网，使骨骼具有弹性和韧性。Ⅰ型胶原蛋白在食品营养、美容保健、生物医学材料及临床应用等方面有着广泛应用。鱼骨中的有机组成部分，30％都是由胶原蛋白组成，并且来源于水产动物的胶原蛋白在许多方面明显优于牛、猪皮胶原蛋白,如低过敏性、低热变性、低抗原性、分子结构较脆弱导致酶解较容易等。因此，鱼骨被认为是除鱼皮外制备胶原蛋白和明胶的最佳选择。
鱼骨中含有大量钙质,但鱼骨中的钙以羟基磷灰石和磷酸钙的形式存在，补钙效果不佳。需要对其进行特殊处理才可以添加到钙营养强化型的食品中，以提高人体对钙的吸收效果。
高压脉冲技术(PEF)是以高电压(0～50kV)、短脉冲及温和的温度等条件处理液态或半固态食品。国外在高压脉冲电场方面做了比较多的研究，但大多数研究都是针对高压脉冲电场对食品微生物和酶的影响方面。
发明内容
针对上述现有技术，为实现鳕鱼骨的高效率、高值化综合利用，本发明提供了一种狭鳕鱼骨中胶原蛋白与活性钙的提取方法，不仅丰富了胶原蛋白与活性钙的来源，而且提高了海洋水产品在加工生产过程中的利用率，提高了其附加值。本发明采用高压脉冲技术，有效地改善了胶原蛋白风味，降低了其在生产加工中腥味的限制，从而提高了其在食品、医药及工业生产中的适用性。同时，本发明对活性钙的提取采用二次酸提法，既保证了活性钙的提取率，又节约了酸用量，具有一定的社会经济效益，对活性钙提取技术具有一定的指导意义。
本发明是通过以下技术方案实现的：
狭鳕鱼骨中胶原多肽与活性钙的提取方法，包括以下步骤：
(一)原料的预处理：采肉后的狭鳕鱼排，进行酸处理；酸处理后，再利用动物蛋白酶酶解的方法酶解掉鱼骨上残留的碎肉；酶解结束后，过滤，取鱼骨，清洗备用；
进一步地，所述酸处理的具体方式为：将狭鳕鱼排浸入0.3％HCl溶液(质量百分数)中，浸泡60min，然后用水清洗至pH 6～7；
所述动物蛋白酶可常规市场购买得到，本发明所用动物蛋白酶购自南宁庞博生物工程有限公司。
(二)骨胶原多肽的制备：
(1)上述预处理所得的鱼骨，用NaOH溶液浸泡(优选浓度0.5mol/L，浸泡时间优选2小时)；浸泡后取出，进行高温高压处理(高压水蒸125℃作用下处理40min)，然后粉碎至40目以下，得鱼骨粉；
(2)骨胶原的浸提：将上述鱼骨粉利用85～90℃热水浸提(料液比优选1:8，质量比；浸提时间优选4小时)，抽滤，得骨胶原溶液和骨渣；
(3)高压脉冲电场处理：对上述得到的骨胶原溶液进行高压脉冲电场处理，高压脉冲电场处理的参数为：电场强度30～50KV/cm，脉冲频率200～400Hz，脉冲时间150～250μs；
(4)酶解：上述处理后，进行酶解，先加入复合胶原蛋白酶酶解，再加入风味蛋白酶酶解；其中，复合胶原蛋白酶用量为0.1％～0.2％(20万u/ml)(以反应体系质量计)，反应温度为55℃，pH为6～7，反应时间为3.5～4.5h；风味蛋白酶用量为0.1％～0.2％(10万u/g)(以反应体系质量计)，反应温度为53℃，pH为6～7，反应时间为30～50min；两次酶解后，将酶解液升温到90℃，保持10min进行灭酶；然后，使用硅藻土和活性炭脱色脱腥(优选的，硅藻土和活性炭的加入量均为骨胶原质量的0.5％)，喷雾干燥，即得胶原多肽，无异味，无苦味，风味优良；
所述复合胶原蛋白酶和风味蛋白酶均可常规市场购买得到，本发明所用复合胶原蛋白酶购自诺维信生物技术有限公司(中国)，风味蛋白酶购自南宁庞博生物工程有限公司；
(三)鱼骨活性钙的制备：
(1)果酸提取：上述得到的骨渣，加入酸液，骨渣与酸液(酸液是由柠檬酸、苹果酸和水混合而成)的用量比为1:6(单位g：ml)，酸液中总酸(柠檬酸+苹果酸)的质量分数为5～8％，柠檬酸与苹果酸质量比为1:1，反应温度95～100℃，反应时间60～100min；反应后，离心，得果酸钙螯合溶液，以及提取过一次钙的骨渣；
(2)二次果酸提取：以上述提取过一次钙的骨渣为原料进行第二次提取，加入酸液，骨渣与酸液的用量比为1:6，酸液中总酸的质量分数为2～3.5％，柠檬酸与苹果酸质量比为1:1，反应温度95～100℃，反应时间60～100min；反应后，离心，得果酸钙螯合溶液；
(3)合并两次的果酸钙螯合溶液，即为活性钙。
本发明的狭鳕鱼骨中胶原多肽与活性钙的提取方法，利用高压脉冲电场技术与复合酶解技术，克服了海洋源胶原多肽腥味重、有苦味和不良异味的缺点，得到了无刺激性气味、口味鲜美柔和的狭鳕鱼骨胶原多肽，该骨胶原多肽产品可作为一种优秀的功能性食品基料，提升了以鱼骨胶原多肽为原料食品的风味，降低了该类食品的调配难度。同时，本发明经济、高效地利用提取骨胶原剩余的骨渣制备了活性果酸螯合钙，提高了狭鳕鱼骨的利用率，实现了高值化利用。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步的说明。
下述实施例中所涉及的仪器、试剂、材料等，若无特别说明，均为现有技术中已有的常规仪器、试剂、材料等，可通过正规商业途径获得。下述实施例中所涉及的实验方法，检测方法等，若无特别说明，均为现有技术中已有的常规实验方法，检测方法等。
为得到最佳工艺参数，本发明设计了鱼骨胶原多肽风味改善实验与活性果酸螯合钙提取试验。
实验一鱼骨胶原多肽风味改善实验
步骤如下：
(一)原料的预处理：
采肉后的狭鳕鱼排，先进行酸处理(将狭鳕鱼排浸入0.3％HCl溶液中，浸泡60min，然后用水清洗至pH 7)；酸处理后，再利用动物蛋白酶酶解的方法酶解掉鱼骨上残留的碎肉；酶解结束后，过滤，取鱼骨，清洗备用。
(二)骨胶原多肽的制备：
(1)将上述预处理所得的鱼骨用NaOH溶液浸泡(浓度0.5mol/L，浸泡时间2小时)后，高温高压处理(高压水蒸125℃作用下处理40min)，粉碎至40目以下，得鱼骨粉。
(2)骨胶原的浸提：将上述鱼骨粉利用85～90℃热水浸提(浸提时间4小时)，抽滤得骨胶原溶液和骨渣。
(3)高压脉冲电场处理：各实验参数(电场强度，脉冲频率，脉冲时间)见表2。
(4)酶解：上述处理后，利用复合胶原蛋白酶酶解后再利用风味蛋白酶酶解进行风味改善。复合胶原蛋白酶用量0.2％(20万u/ml)，反应温度55℃，反应pH值为7，反应时间3.5h；风味蛋白酶用量、反应时间见表2，反应温度53℃，反应pH值为7。反应后将酶解液升温到90℃，保持10min进行灭酶。使用硅藻土和活性炭脱色脱腥后喷雾干燥。
将喷雾干燥所得骨胶原多肽粉末用25℃的水配制成1％的水溶液，进行风味评价，评价依据见表1。
表1风味评定要求表
表2正交因素水平表
试验结果见表3。
表3正交试验分析表
根据表3知，以风味评定总分为指标，影响鱼骨胶原多肽风味因素的主次关系为B(脉冲频率)>D(风味酶用量)>A(电场强度)＝E(酶解时间)>C(脉冲时间)，根据因素均值，胶原蛋白多肽风味提升的最适条件为：A2B2C2D3E2，即电场强度30KV/cm，脉冲频率200Hz，脉冲时间150μs，风味酶用量0.15％，酶解时间40min。
上述正交试验后，又进行了如下试验和风味评价：
对照：鱼骨胶原多肽不经PEF与风味酶处理，仅用复合胶原蛋白酶酶解，获得的胶原多肽，其风味评价得分为4分，其中气味得分为2分，口感得分为2分。得到的产品在气味上微有腥味，基本无鲜味；在口感上微有异味，苦味明显。
最佳条件：将鱼骨胶原用上述得出的最佳工艺参数处理，得到鱼骨胶原多肽，其风味评价得分为8.5分，其中气味得分为4分，口感得分为4.5分。得到的产品在气味上基本无腥味，有淡淡的鲜味；在口感上无异味，基本无苦味，有较柔和的鲜味。
通过以上对比，可得出PEF与风味酶的处理对鱼骨胶原多肽的风味提升有显著作用。
实验二活性果酸螯合钙提取试验
应用国标方法《GB/T 5009.92-2003食品中钙的测定》测得鳕鱼骨渣中的钙含量。
根据预实验结果，综合考虑提取效率与工业生产成本，选取工艺参数为：柠檬酸与苹果酸复合提取，骨渣与酸液(酸液是由柠檬酸、苹果酸和水混合而成)的用量比为1:6(单位g：ml)，酸液中总酸(柠檬酸+苹果酸)的质量分数为8％，柠檬酸与苹果酸质量比为1:1，反应温度95℃，反应时间100min。单次果酸钙提取率为82.3％。为在酸用量不变的前提下提高钙提取率，本发明设计果酸提取试验分两次进行，实验步骤如下：
1.果酸提取：以提取骨胶原多肽剩余的骨渣为原料提取果酸螯合钙，向骨渣中加入酸液，反应料液比为1:6，柠檬酸与苹果酸质量比例1:1，反应温度95℃，反应时间100min，果酸用量见表4。离心得果酸钙螯合溶液。
2.二次果酸提取：以上述提取过一次钙的骨渣为原料进行第二次提取，向骨渣中加入酸液，反应料液比为1:6，柠檬酸与苹果酸质量比例1:1，反应温度95℃，反应时间100min，果酸用量见表4。离心得果酸钙螯合溶液。合并两次的果酸钙螯合溶液，测量钙提取率。实验结果见表4。
表4
两次提取果酸质量比例(总量不变) 3:1 2:1 1:1 1:2 1:3
钙提取率 89.7％ 92.8％ 91.3％ 88.5％ 85.4％
根据上述实验结果，在总酸用量不变(与单次提取相比)的前提下，选取两次提取的酸质量比例为2:1，即第一次提取时总酸质量分数为5.33％，第二次提取时总酸质量分数为2.67％，得到钙提取率为92.8％，提取率明显高于单次果酸提取实验。
本发明根据胶原多肽的风味评定与双次果酸钙提取实验结果，得到了最优工艺参数，下面结合具体实施例对本发明方法做进一步阐述。
实施例1狭鳕鱼骨中胶原多肽与活性钙的提取
步骤如下：
(一)原料的预处理：
(1)酸处理：采肉后的狭鳕鱼排5kg，置于0.3％HCl溶液中浸泡60min，流动水清洗至pH 6～7。
(2)鱼骨上附着鱼肉的脱除：上述酸处理后的狭鳕鱼排，加入水，料液比为1:1，再加入0.1％的动物蛋白酶(20万u/ml)进行酶解，反应温度为50℃，反应pH为6.5，反应时间为3.5h。
(3)过滤：将上述酶解后得到的产物进行过滤，滤液为鱼肉多肽，得到鱼骨815g，清洗备用。
(二)骨胶原多肽的制备：
(1)碱处理：将预处理所得的鱼骨浸没于0.5MNaOH溶液2h，流动水清洗至pH值中性。
(2)高温高压处理：高压水蒸125℃作用下处理40min。
(3)粉碎：将高压处理过的鱼骨粉碎至40目以下。
(4)骨胶原的浸提：将上述鱼骨粉利用85℃热水浸提4h，料液比为1:8。
(5)固液分离：抽滤得骨胶原溶液和骨渣。
(6)高压脉冲电场处理：电场强度30KV/cm，脉冲频率200Hz，脉冲时间150us。
(7)酶解：复合胶原蛋白酶用量0.2％(20万u/ml)，反应温度55℃，反应pH值为7，反应时间3.5h；风味蛋白酶用量0.15％(10万u/g)，反应温度53℃，反应pH值为7，反应时间40min。反应后将酶解液升温到90℃，保持10min进行灭酶。
(8)脱色脱腥：利用0.5％的硅藻土与0.5％的活性炭共同作用，在60℃条件下反应30min，过程中不断搅拌。过滤后得胶原多肽滤液。
(9)喷雾干燥：入风温度180℃，出风温度70℃，得到骨胶原多肽90.6g。
(10)风味评价试验：风味评价得分为8.5分，其中气味得分为4分，口感得分为4.5分。得到的产品在气味上基本无腥味，有淡淡的鲜味；在口感上无异味，基本无苦味，有较柔和的鲜味。
(三)鱼骨活性钙的制备：
(1)果酸提取：以提取骨胶原多肽剩余的骨渣100g为原料提取果酸螯合钙，选用柠檬酸与苹果酸复合提取，骨渣与酸液(酸液是由柠檬酸、苹果酸和水混合而成)的用量比为1:6(单位g：ml)，酸液中总酸(柠檬酸+苹果酸)的质量分数为5.33％，柠檬酸与苹果酸质量比例1:1，反应温度95℃，反应时间100min。离心得果酸钙螯合溶液。
(2)二次果酸提取：以上述提取过一次钙的骨渣为原料进行第二次提取，骨渣与酸液的用量比为1:6(单位g：ml)，酸液中总酸的质量分数为2.67％，柠檬酸与苹果酸质量比例1:1，反应温度95℃，反应时间100min。离心得果酸钙螯合溶液。合并两次的果酸钙螯合溶液，测得钙总提取率为92.8％。

Claims (8)

1.狭鳕鱼骨中胶原多肽与活性钙的提取方法，其特征在于：包括以下步骤：
(一)原料的预处理：采肉后的狭鳕鱼排，进行酸处理；酸处理后，再利用动物蛋白酶酶解的方法酶解掉鱼骨上残留的碎肉；酶解结束后，过滤，取鱼骨，清洗备用；
所述酸处理的具体方式为：将狭鳕鱼排浸入0.3％HCl溶液中，浸泡60min，然后用水清洗至pH6～7；
(二)骨胶原多肽的制备：
(1)上述预处理所得的鱼骨，用NaOH溶液浸泡；浸泡后取出，进行高温高压处理，然后粉碎至40目以下，得鱼骨粉；
(2)骨胶原的浸提：将上述鱼骨粉利用85～90℃热水浸提，抽滤，得骨胶原溶液和骨渣；
鱼骨粉与热水的用量比为1:8，热水浸提的时间为4小时；
(3)高压脉冲电场处理：对上述得到的骨胶原溶液进行高压脉冲电场处理，高压脉冲电场处理的参数为：电场强度30～50KV/cm，脉冲频率200～400Hz，脉冲时间150～250μs；
(4)酶解：上述处理后，进行酶解，先加入复合胶原蛋白酶酶解，再加入风味蛋白酶酶解；其中，复合胶原蛋白酶用量为0.1％～0.2％，20万u /ml，反应温度为55℃，pH为6～7，反应时间为3.5～4.5h；风味蛋白酶用量为0.1％～0.2％，10万u /g，反应温度为53℃，pH为6～7，反应时间为30～50min；两次酶解后，将酶解液升温到90℃，保持10min进行灭酶；然后，使用硅藻土和活性炭脱色脱腥，喷雾干燥，即得胶原多肽；
(三)鱼骨活性钙的制备：
(1)果酸提取：上述得到的骨渣，加入酸液，骨渣与酸液的用量比为1:6，酸液是由柠檬酸、苹果酸和水混合而成的，酸液中总酸的质量分数为5～8％，柠檬酸与苹果酸质量比为1:1，反应温度95～100℃，反应时间60～100min；反应后，离心，得果酸钙螯合溶液，以及提取过一次钙的骨渣；
(2)二次果酸提取：以上述提取过一次钙的骨渣为原料进行第二次提取，加入酸液，骨渣与酸液的用量比为1:6，酸液中总酸的质量分数为2～3.5％，柠檬酸与苹果酸质量比为1:1，反应温度95～100℃，反应时间60～100min；反应后，离心，得果酸钙螯合溶液；
(3)合并两次的果酸钙螯合溶液，即得活性钙。
2.根据权利要求1所述的狭鳕鱼骨中胶原多肽与活性钙的提取方法，其特征在于：所述步骤(二)(1)中，所述NaOH溶液的浓度为0.5mol/L，浸泡时间2小时。
3.根据权利要求1所述的狭鳕鱼骨中胶原多肽与活性钙的提取方法，其特征在于：所述步骤(二)(1)中，所述高温高压处理的具体方式为：高压水蒸125℃作用下处理40min。
4.根据权利要求1所述的狭鳕鱼骨中胶原多肽与活性钙的提取方法，其特征在于：所述步骤(二)(3)中，高压脉冲电场处理的参数为：电场强度30KV/cm，脉冲频率200Hz，脉冲时间150μs。
5.根据权利要求1所述的狭鳕鱼骨中胶原多肽与活性钙的提取方法，其特征在于：所述步骤(二)(4)中，风味蛋白酶用量为0.15％，10万u /g，反应温度为53℃，pH为7，反应时间为40min。
6.根据权利要求1所述的狭鳕鱼骨中胶原多肽与活性钙的提取方法，其特征在于：所述步骤(二)(4)中，硅藻土和活性炭的加入量均为骨胶原质量的0.5％。
7.根据权利要求1所述的狭鳕鱼骨中胶原多肽与活性钙的提取方法，其特征在于：所述步骤(三)(1)中，酸液中总酸的质量分数为5.33％；所述步骤(三)(2)中，酸液中总酸的质量分数为2.67％。
8.根据权利要求1～7中任一项所述的狭鳕鱼骨中胶原多肽与活性钙的提取方法，其特征在于：步骤如下：
(一)原料的预处理：
(1)酸处理：采肉后的狭鳕鱼排5kg，置于0.3％HCl溶液中浸泡60min，水清洗至pH6～7；
(2)鱼骨上附着鱼肉的脱除：上述酸处理后的狭鳕鱼排，加入水，料液比为1:1，再加入0.1％的动物蛋白酶进行酶解，反应温度为50℃，反应pH为6.5，反应时间为3.5h；
(3)过滤：将上述酶解后得到的产物进行过滤，得到鱼骨，清洗备用；
(二)骨胶原多肽的制备：
(1)碱处理：将上述预处理所得的鱼骨浸没于0.5M NaOH溶液2h，水清洗至pH值中性；
(2)高温高压处理：高压水蒸125℃作用下处理40min；
(3)粉碎：将高压处理过的鱼骨粉碎至40目以下；
(4)骨胶原的浸提：将上述鱼骨粉利用85℃热水浸提4h，料液比为1:8；
(5)固液分离：抽滤得骨胶原溶液和骨渣；
(6)高压脉冲电场处理：电场强度30KV/cm，脉冲频率200Hz，脉冲时间150μs；
(7)酶解：复合胶原蛋白酶用量0.2％，20万u /ml，反应温度55℃，反应pH值为7，反应时间3.5h；风味蛋白酶用量0.15％，10万u /g，反应温度53℃，反应pH值为7，反应时间40min；反应后将酶解液升温到90℃，保持10min进行灭酶；
(8)脱色脱腥：利用0.5％的硅藻土与0.5％的活性炭共同作用，在60℃条件下反应30min，过程中不断搅拌；过滤后得胶原多肽滤液；
(9)喷雾干燥：入风温度180℃，出风温度70℃，得到骨胶原多肽；
(三)鱼骨活性钙的制备：
(1)果酸提取：以提取骨胶原多肽剩余的骨渣100g为原料提取果酸螯合钙，选用柠檬酸与苹果酸复合提取，骨渣与酸液的用量比为1:6，酸液中总酸的质量分数为5.33％，柠檬酸与苹果酸质量比例1:1，反应温度95℃，反应时间100min；离心得果酸钙螯合溶液；
(2)二次果酸提取：以上述提取过一次钙的骨渣为原料进行第二次提取，骨渣与酸液的用量比为1:6，酸液中总酸的质量分数为2.67％，柠檬酸与苹果酸质量比例1:1，反应温度95℃，反应时间100min；离心得果酸钙螯合溶液；
(3)合并上述得到的果酸钙螯合溶液。
CN201610457531.2A 2016-06-21 2016-06-21 狭鳕鱼骨中胶原多肽与活性钙的提取方法 Active CN106047970B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610457531.2A CN106047970B (zh) 2016-06-21 2016-06-21 狭鳕鱼骨中胶原多肽与活性钙的提取方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610457531.2A CN106047970B (zh) 2016-06-21 2016-06-21 狭鳕鱼骨中胶原多肽与活性钙的提取方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN106047970A CN106047970A (zh) 2016-10-26
CN106047970B true CN106047970B (zh) 2019-06-04

Family

ID=57167893

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201610457531.2A Active CN106047970B (zh) 2016-06-21 2016-06-21 狭鳕鱼骨中胶原多肽与活性钙的提取方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN106047970B (zh)

Families Citing this family (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106820158B (zh) * 2016-12-30 2020-09-11 江苏天美健大自然生物工程有限公司 能引钙入骨且防止骨钙流失的补钙复剂及其制备方法
CN107307331A (zh) * 2017-06-22 2017-11-03 新昌县瑞天食品科技有限公司 鲅鱼鱼骨的活性提取物
CN107385005A (zh) * 2017-09-12 2017-11-24 海力生集团有限公司 一种鲟鱼骨ii型胶原肽的制备方法
CN108095074B (zh) * 2017-12-12 2021-02-02 浙江海洋大学 一种辅助治疗骨质疏松症的金枪鱼鱼骨保健食品及其制备方法
CN110327245B (zh) * 2019-08-21 2022-02-11 蝶泉(广东)生物科技有限公司 一种多肽冻干粉修复面膜
CN110628837B (zh) * 2019-09-29 2021-12-14 南宁学院 一种牛骨源柠檬酸钙的提取方法
CN112341537B (zh) * 2020-12-09 2021-08-13 茂名希普生物科技有限公司 一种鱼骨胶原蛋白肽的制备方法及应用
CN114794361B (zh) * 2022-05-31 2024-03-19 中国农业科学院农产品加工研究所 骨胶原蛋白肽粉异嗅味物质去除方法

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102851346A (zh) * 2012-09-13 2013-01-02 广东工业大学 一种具抗前列腺癌作用的鱼骨胶原多肽的制备方法
CN103798845A (zh) * 2014-03-05 2014-05-21 青岛金海源食品有限公司 一种利用鳕鱼骨开发纳米胶原蛋白钙的方法
CN104758925A (zh) * 2015-04-15 2015-07-08 浙江海洋学院 带鱼鱼骨铁螯合胶原肽的铁螯合用途
CN105211892A (zh) * 2015-11-14 2016-01-06 中国海洋大学 一种鱼骨钙肽螯合物及其制备方法

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102851346A (zh) * 2012-09-13 2013-01-02 广东工业大学 一种具抗前列腺癌作用的鱼骨胶原多肽的制备方法
CN103798845A (zh) * 2014-03-05 2014-05-21 青岛金海源食品有限公司 一种利用鳕鱼骨开发纳米胶原蛋白钙的方法
CN104758925A (zh) * 2015-04-15 2015-07-08 浙江海洋学院 带鱼鱼骨铁螯合胶原肽的铁螯合用途
CN105211892A (zh) * 2015-11-14 2016-01-06 中国海洋大学 一种鱼骨钙肽螯合物及其制备方法

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
真鳕鱼骨胶原肽及鱼骨钙联产工艺的优化设计;毛毛;《食品科技》;20171020;第42卷(第10期);第138-140页
高压脉冲电场提取猪皮胶原蛋白;韦汉昌;《广西科学》;20110815;第18卷(第3期);第235-237页
高压脉冲电场辅助提取鱼骨钙工艺优化;周亚军;《农业工程学报》;20121231;第28卷(第23期);第265-270页
鳕鱼骨胶原肽与活性钙的制备及其抗骨质疏松活性研究;王珊珊;《中国博士学位论文全文数据库工程科技I辑》;20130115;第63-68页，第96-101页

Also Published As

Publication number Publication date
CN106047970A (zh) 2016-10-26

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN106047970B (zh) 狭鳕鱼骨中胶原多肽与活性钙的提取方法
CN101836687B (zh) 速溶性淡水鱼肽粉的制备方法
CN103843970B (zh) 一种鲜动物骨制得骨胶原低聚肽粉、骨油、骨粉的生产方法
US11129400B2 (en) Method of ecological utilization of silver carp
CN105361153A (zh) 一种海参糖肽螯合钙的加工方法
CN101822308B (zh) 酶解畜骨咸味复合肽及其制备方法
JP2007068454A (ja) 米蛋白質の製造方法、それにより製造される米蛋白質、及び食品。
GB1531293A (en) Process for preparing seasonings of animal origin
CN105349600B (zh) 一种鳕鱼蛋白酶解液的脱腥方法
CN104719993A (zh) 一种鱿鱼须酶法脱皮后水解液的利用方法及以该方法制备的海鲜味调味品
CN108588053B (zh) 动物蛋白水解专用酶及其制备方法
CN105906710A (zh) 一种依次提取和分级盐析纯化鸡爪皮胶原蛋白的方法
JP6213756B1 (ja) プラセンタエキスの製造方法、プラセンタエキス含有粉体の製造方法および加工食品の製造方法
CN109275863A (zh) 一种肉味香精的加工方法
TWI600379B (zh) 結合壓力與酵素萃取動物性成份水解物之方法
CN109554422A (zh) 一种猪皮胶原蛋白提取方法
CN107114713A (zh) 一种红鱼籽的生物脱腥方法
CN106337074A (zh) 一种鲮鱼骨胶原蛋白的提取方法
US4387485A (en) Method of extracting meat of small crustaceans
CN112753998B (zh) 利用鱿鱼下脚料制作海鲜酱汁的方法
JP5505863B2 (ja) 尿素を含有する魚類からアンモニア臭の無い調味食品原材料及び調味食品を製造する方法
CN108396054A (zh) 一种酶解南极冰鱼制备低聚肽的方法
CN108030002A (zh) 一种利用生物酶除腥的即食调味鱼块及其制作方法
CN103947818A (zh) 一种鱿鱼活性肽的制备方法
WO2006121361A1 (en) Process for the preparation of gelatine and gelatine hydrolyzate

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant