CN105974046A - 银花泌炎灵片的检测方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种银花泌炎灵片的检测方法,属于中药现代化领域。包括半枝莲、川木通的鉴别方法,金银花和石苇的含量测定,半枝莲、金银花的含量测定。本发明能更全面的检测药物的成分,了解其含量和稳定性,也有助于说明药物的药用物质基础。
Description
技术领域
本发明属于中药现代化领域,具体涉及一种银花泌炎灵片的检测方法。
背景技术
中药成分复杂,特别是中药复方往往含多类、多种成分,构成了一个非常复杂的系统。目前,新的有效部位中药制剂和现代复方中药制剂的研发不断增多,新的工艺及多种不同提取方式并用于药品的研究及生产。
随着现代分析测试技术、设备仪器的迅猛发展,中药的含量测定、色谱鉴别成为检测的重要手段。 但目前一般只建立某一指标化学成分的含量测定或鉴别,针对上述多种新工艺同时应用的情况,仅建立某单一成分的含量测定或鉴别在很大程度上带有较大的片面性。
银花泌炎灵片具有清热解毒,利湿通淋功能,用于急性肾盂肾炎,急性膀胱炎,下焦湿热证,症见:发热恶寒、尿频急、尿道刺痛或尿血、腰痛等。
银花泌炎灵片为薄膜衣片,除去薄膜衣后显深褐色;味微苦、涩。
其处方是:金银花500g,半枝莲250g,萹蓄150g,瞿麦150g,石韦150g, 川木通75g,车前子150g,淡竹叶150g,桑寄生250g,灯心草50g;
制法:以上十味,取金银花半量,粉碎成细粉;其余量加 80%乙醇回流提取 2 次,每次2 小时,合并提取液,滤过,回收乙醇,浓缩至相对密度为 1.30~1.35(50℃)的稠膏,备用。其余半枝莲等九味加水煎煮三次,第一次 1.5 小时、第二次 1.5 小时、第三次 1 小时,合并煎液,滤过,滤液浓缩至相对密度为 1.30~1.35(50℃)的稠膏。取金银花细粉,同以上两种备用稠膏合并,干燥,粉碎成细粉,过筛,加入糊精、淀粉和糖浆(1:1:0.5)混合物适量,制粒,干燥,压制成 1000 片,包薄膜衣,即得,每片重0.5g。
银花泌炎灵片原来的检测方法仅有对半枝莲的鉴别,对金银花的含量测定,缺乏对其它药物如川木通的鉴别、以及对石苇、半枝莲的含量测定,不能全面的反映银花泌炎灵片重要成份的含量。
发明内容
本发明提供一种银花泌炎灵片的检测方法,以解决目前检测方法存在的检测方法不全面的问题。
本发明采取的技术方案是,包括如下鉴别方法和含量测定方法:
(一)鉴别方法:
(1)取本品,置显微镜下观察:花粉粒黄色,类圆形或圆三角形,直径60~92μm,外壁表面有细密短刺及圆形细颗粒状雕纹,具3孔沟,金银花;
(2) 取本品 8 片,除去包衣,研细,加丙酮 30ml,回流提取 1 小时,滤过,滤液回收溶剂至干,残渣加无水乙醇 2ml 使溶解,作为供试品溶液,另取半枝莲对照药材2g,同法制成对照药材溶液,照薄层色谱法试验,《中国药典》2015年版,通则0502,吸取上述两种溶液各4µl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以环已烷:二氯甲烷:乙酸乙酯=7:2.5:4为展开剂,展开,取出,晾干,喷以5%磷钼酸乙醇溶液,在105℃加热至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;
(3)取本品8片,除去包衣,研细,加水30ml,超声处理20分钟,离心,上清液用乙酸乙酯振摇提取2次,每次15ml,合并乙酸乙酯液,回收溶剂至干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取川木通对照药材2g,加甲醇20ml,超声处理20分钟,滤过,滤液回收溶剂至干,残渣加甲醇 1ml 使溶解,作为对照药材溶液,照薄层色谱法试验,《中国药典》2015年版,通则0502,吸取上述两种溶液各4µl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以环已烷:丙酮=4:1,为展开剂,展开,取出,晾干,喷以 10%硫酸乙醇溶液,在 105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
(二)、含量测定
(1)金银花、石苇:照高效液相色谱法测定,《中国药典》2015年版,通则 0512,色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈:水:冰醋酸=10:100:2为流动相;检测波长为 323nm,理论板数按绿原酸峰计算应不低于 1500,对照品溶液的制备 取绿原酸对照品适量,精密称定,置棕色瓶中,加水制成每 1ml 含80µg 的溶液,摇匀,即得,10℃以下避光保存;
供试品溶液的制备 取重量差异项下的本品,研细,取0.5g,精密称定,置具塞锥形瓶中,加三氯甲烷 50ml,超声处理30 分钟,功率250 W,频率5 kHz,避光,放冷,滤过,将药渣连同滤纸一并放回锥形瓶中,精密加乙醇 50ml,称定重量,加热回流 2 小时,避强光,放冷,再称定重量,用乙醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得;
测定法,分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各 5µl,注入液相色谱仪,测定,即得;
本品每片含金银花、石苇以绿原酸C16H18O9 计,不得少于3.60mg;
(2)半枝莲 照高效液相色谱法测定,《中国药典》2015年版,通则0512,
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇:0.4%磷酸溶液=15:85为流动相;检测波长为335nm,理论板数按野黄芩苷峰计算应不低于5000;
对照品溶液的制备 取野黄芩苷对照品适量,精密称定,加甲醇制成每1ml含12µg的溶液,摇匀,即得;
供试品溶液的制备 取重量差异项下的本品,研细,取0.5g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加甲醇25ml,称定重量,加热回流30分钟,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得;
测定法,分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10µl,注入液相色谱仪,测定,即得;
本品每片含半枝莲以野黄芩苷C21H18O12计,不得少于0.25mg;
(3)金银花 照高效液相色谱法测定,《中国药典》2015 年版,通则0512,色谱条件与系统适用性试验 以苯基硅烷键合硅胶为填充剂Themo Dim(mm),4.6mm*250mm,5µm;以乙腈为流动相A,以 0.5%冰醋酸溶液为流动相B,按规定进行梯度洗脱;检测波长为350nm,理论板数按木犀草苷峰计算应不低于17000,流动相A 10~13%,流动相B87~90%,0~10分钟,流动相A13%,流动相B87%,10~40分钟;
对照品溶液的制备,取木犀草苷对照品适量,精密称定,加70%乙醇制成每1ml含40µg的溶液,即得;
供试品溶液的制备,取重量差异项下的本品,研细,取2g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入70%乙醇 50ml,称定重量,超声处理1小时,功率 250W,频率35kHz,放冷,再称定重量,用 70%乙醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得;
测定法 分别精密吸取对照品溶液 10µ1,与供试品溶液 10~20µ1,注入液相色谱仪,测定,即得;
本品每片含金银花以木犀草苷C21H20O11计,不得少于0.15mg。
本发明还包括:
检查,应符合片剂项下有关的各项规定,《中国药典》2015年版,通则0101,
浸出物,取本品 10 片,除去包衣,研细,取2g,精密称定,精密加入正丁醇50ml,置电热套中加热,依法测定,《中国药典》2015 年版,通则2201 ,醇溶性浸出物测定法:热浸法,不得少于13%。
本发明优点是:规范了银花泌炎灵片的检测方法,通过建立对川木通的鉴别,以及对石苇、半枝莲的含量测定,并配合原有的对半枝莲的鉴别,对金银花的含量测定,能更全面的检测药物的成分,了解其含量和稳定性,也有助于说明药物的药用物质基础。
具体实施方式
包括如下鉴别方法和含量测定方法:
(一)鉴别方法:
(1)取本品,置显微镜下观察:花粉粒黄色,类圆形或圆三角形,直径60~92μm,外壁表面有细密短刺及圆形细颗粒状雕纹,具3孔沟,金银花;
(2) 取本品 8 片,除去包衣,研细,加丙酮 30ml,回流提取 1 小时,滤过,滤液回收溶剂至干,残渣加无水乙醇 2ml 使溶解,作为供试品溶液,另取半枝莲对照药材2g,同法制成对照药材溶液,照薄层色谱法试验,《中国药典》2015年版,通则0502,吸取上述两种溶液各4µl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以环已烷:二氯甲烷:乙酸乙酯=7:2.5:4为展开剂,展开,取出,晾干,喷以5%磷钼酸乙醇溶液,在105℃加热至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;
(3)取本品8片,除去包衣,研细,加水30ml,超声处理20分钟,离心,上清液用乙酸乙酯振摇提取2次,每次15ml,合并乙酸乙酯液,回收溶剂至干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取川木通对照药材2g,加甲醇20ml,超声处理20分钟,滤过,滤液回收溶剂至干,残渣加甲醇 1ml 使溶解,作为对照药材溶液,照薄层色谱法试验,《中国药典》2015年版,通则0502,吸取上述两种溶液各4µl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以环已烷:丙酮=4:1,为展开剂,展开,取出,晾干,喷以 10%硫酸乙醇溶液,在 105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
(二)、含量测定
(1)金银花、石苇:照高效液相色谱法测定,《中国药典》2015年版,通则 0512,色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈:水:冰醋酸=10:100:2为流动相;检测波长为 323nm,理论板数按绿原酸峰计算应不低于 1500,对照品溶液的制备 取绿原酸对照品适量,精密称定,置棕色瓶中,加水制成每 1ml 含80µg 的溶液,摇匀,即得,10℃以下避光保存;
供试品溶液的制备 取重量差异项下的本品,研细,取0.5g,精密称定,置具塞锥形瓶中,加三氯甲烷 50ml,超声处理30 分钟,功率250 W,频率5 kHz,避光,放冷,滤过,将药渣连同滤纸一并放回锥形瓶中,精密加乙醇 50ml,称定重量,加热回流 2 小时,避强光,放冷,再称定重量,用乙醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得;
测定法,分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各 5µl,注入液相色谱仪,测定,即得;
本品每片含金银花、石苇以绿原酸C16H18O9 计,不得少于3.60mg;
(2)半枝莲 照高效液相色谱法测定,《中国药典》2015年版,通则0512,
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇:0.4%磷酸溶液=15:85为流动相;检测波长为335nm,理论板数按野黄芩苷峰计算应不低于5000;
对照品溶液的制备 取野黄芩苷对照品适量,精密称定,加甲醇制成每1ml含12µg的溶液,摇匀,即得;
供试品溶液的制备 取重量差异项下的本品,研细,取0.5g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加甲醇25ml,称定重量,加热回流30分钟,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得;
测定法,分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10µl,注入液相色谱仪,测定,即得;
本品每片含半枝莲以野黄芩苷C21H18O12计,不得少于0.25mg;
(3)金银花 照高效液相色谱法测定,《中国药典》2015 年版,通则0512,色谱条件与系统适用性试验 以苯基硅烷键合硅胶为填充剂Themo Dim(mm),4.6mm*250mm,5µm;以乙腈为流动相A,以 0.5%冰醋酸溶液为流动相B,按规定进行梯度洗脱;检测波长为350nm,理论板数按木犀草苷峰计算应不低于17000,流动相A 10~13%,流动相B87~90%,0~10分钟,流动相A13%,流动相B87%,10~40分钟;
对照品溶液的制备,取木犀草苷对照品适量,精密称定,加70%乙醇制成每1ml含40µg的溶液,即得;
供试品溶液的制备,取重量差异项下的本品,研细,取2g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入70%乙醇 50ml,称定重量,超声处理1小时,功率 250W,频率35kHz,放冷,再称定重量,用 70%乙醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得;
测定法 分别精密吸取对照品溶液 10µ1,与供试品溶液 10~20µ1,注入液相色谱仪,测定,即得;
本品每片含金银花以木犀草苷C21H20O11计,不得少于0.15mg。
本发明还包括:
检查,应符合片剂项下有关的各项规定,《中国药典》2015年版,通则0101,
浸出物,取本品 10 片,除去包衣,研细,取2g,精密称定,精密加入正丁醇50ml,置电热套中加热,依法测定,《中国药典》2015 年版,通则2201 ,醇溶性浸出物测定法:热浸法,不得少于13%。
Claims (2)
1.一种银花泌炎灵片的检测方法,其特征在于,包括如下鉴别方法和含量测定方法:
(一)鉴别方法:
(1)取本品,置显微镜下观察:花粉粒黄色,类圆形或圆三角形,直径60~92μm,外壁表面有细密短刺及圆形细颗粒状雕纹,具3孔沟,金银花;
(2) 取本品 8 片,除去包衣,研细,加丙酮 30ml,回流提取 1 小时,滤过,滤液回收溶剂至干,残渣加无水乙醇 2ml 使溶解,作为供试品溶液,另取半枝莲对照药材2g,同法制成对照药材溶液,照薄层色谱法试验,《中国药典》2015年版,通则0502,吸取上述两种溶液各4µl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以环已烷:二氯甲烷:乙酸乙酯=7:2.5:4为展开剂,展开,取出,晾干,喷以5%磷钼酸乙醇溶液,在105℃加热至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;
(3)取本品8片,除去包衣,研细,加水30ml,超声处理20分钟,离心,上清液用乙酸乙酯振摇提取2次,每次15ml,合并乙酸乙酯液,回收溶剂至干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取川木通对照药材2g,加甲醇20ml,超声处理20分钟,滤过,滤液回收溶剂至干,残渣加甲醇 1ml 使溶解,作为对照药材溶液,照薄层色谱法试验,《中国药典》2015年版,通则0502,吸取上述两种溶液各4µl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以环已烷:丙酮=4:1,为展开剂,展开,取出,晾干,喷以 10%硫酸乙醇溶液,在 105℃加热至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;
(二)、含量测定
(1)金银花、石苇:照高效液相色谱法测定,《中国药典》2015年版,通则 0512,色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈:水:冰醋酸=10:100:2为流动相;检测波长为 323nm,理论板数按绿原酸峰计算应不低于 1500,对照品溶液的制备 取绿原酸对照品适量,精密称定,置棕色瓶中,加水制成每 1ml 含80µg 的溶液,摇匀,即得,10℃以下避光保存;
供试品溶液的制备 取重量差异项下的本品,研细,取0.5g,精密称定,置具塞锥形瓶中,加三氯甲烷 50ml,超声处理30 分钟,功率250 W,频率5 kHz,避光,放冷,滤过,将药渣连同滤纸一并放回锥形瓶中,精密加乙醇 50ml,称定重量,加热回流 2 小时,避强光,放冷,再称定重量,用乙醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得;
测定法,分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各 5µl,注入液相色谱仪,测定,即得;
本品每片含金银花、石苇以绿原酸C16H18O9 计,不得少于3.60mg;
(2)半枝莲 照高效液相色谱法测定,《中国药典》2015年版,通则0512,
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇:0.4%磷酸溶液=15:85为流动相;检测波长为335nm,理论板数按野黄芩苷峰计算应不低于5000;
对照品溶液的制备 取野黄芩苷对照品适量,精密称定,加甲醇制成每1ml含12µg的溶液,摇匀,即得;
供试品溶液的制备 取重量差异项下的本品,研细,取0.5g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加甲醇25ml,称定重量,加热回流30分钟,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得;
测定法,分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10µl,注入液相色谱仪,测定,即得;
本品每片含半枝莲以野黄芩苷C21H18O12计,不得少于0.25mg;
(3)金银花 照高效液相色谱法测定,《中国药典》2015 年版,通则0512,色谱条件与系统适用性试验 以苯基硅烷键合硅胶为填充剂Themo Dim(mm),4.6mm*250mm,5µm;以乙腈为流动相A,以 0.5%冰醋酸溶液为流动相B,按下表中的规定进行梯度洗脱;检测波长为350nm,理论板数按木犀草苷峰计算应不低于17000,流动相A 10~13%,流动相B87~90%,0~10分钟,流动相A13%,流动相B87%,10~40分钟;
对照品溶液的制备,取木犀草苷对照品适量,精密称定,加70%乙醇制成每1ml含40µg的溶液,即得;
供试品溶液的制备,取重量差异项下的本品,研细,取2g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入70%乙醇 50ml,称定重量,超声处理1小时,功率 250W,频率35kHz,放冷,再称定重量,用 70%乙醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得;
测定法 分别精密吸取对照品溶液 10µ1,与供试品溶液 10~20µ1,注入液相色谱仪,测定,即得;
本品每片含金银花以木犀草苷C21H20O11计,不得少于0.15mg。
2.根据权利要求1所述的一种银花泌炎灵片的检测方法,还包括:
检查,应符合片剂项下有关的各项规定,《中国药典》2015年版,通则0101,
浸出物,取本品 10 片,除去包衣,研细,取2g,精密称定,精密加入正丁醇50ml,置电热套中加热,依法测定,《中国药典》2015 年版,通则2201 ,醇溶性浸出物测定法:热浸法,不得少于13%。
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CN113189248B (zh) * | 2021-05-26 | 2022-09-30 | 吉林华康药业股份有限公司 | 银花泌炎灵片的hplc指纹图谱构建和检测方法 |
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Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication | ||
WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20160928 |