CN105949275A - 一种简便提取动物蹄甲多肽的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种简便提取动物蹄甲多肽的方法，试管中称取氨基甲酸铵，加入动物蹄甲粉末，动物蹄甲和氨基甲酸铵的重量比为5‑18：1，用橡皮塞密封试管，在140‑190℃下加热10‑15分钟，动物蹄甲全部溶解后得到动物蹄甲溶液，降温，动物蹄甲溶液凝固，粉碎，再加入95%乙醇让蹄甲多肽析出，氨基甲酸铵重量：乙醇体积=1：5，过滤，用乙醇或蒸馏水清洗沉淀，加热干燥，得到粉末状的蹄甲多肽，滤液旋转蒸发，回收乙醇。本发明操作步骤简单，成本低，耗时短。

Description

一种简便提取动物蹄甲多肽的方法
技术领域
本发明属于动物蹄甲深加工的技术领域，具体涉及一种简便提取动物蹄甲多肽的方法。
背景技术
检索到如下4篇专利文献，专利文献1（申请号为201110315457.8）记载了一种蹄甲肽的提取方法，该方法采用健康猪蹄甲为原料，经过升温蒸煮、烘干、粉碎机粉碎、蹄甲粉配水、升温蒸煮、酶解、灭酶、活性炭脱色、膜分离，将得到的滤液经干燥后即获蹄甲肽的技术；专利文献2（申请号201110084644.X）记载了一种蹄甲多肽的复合水解制备方法，是将经过干燥和粉碎后的蹄甲原料，在碱溶液中进行温和的部分水解；然后使用蛋白水解酶进一步水解；制得蹄甲多肽产品。其技术特点在于采用碱液和蛋白水解酶双重复合水解方法制备蹄甲多肽；专利文献3（申请号200910192431.1）记载了一种动物蹄甲提取物的制备方法，具体的说是一种采用酶解方法制备蹄甲提取物的生产工艺，酶解所得酶解液，结合喷雾干燥的方法制备蹄甲多肽提取物，其特征在于将猪、羊或牛的蹄甲洗净、除杂、酶解后，精制加工制成多肽提取液，加入生物活性保护剂后喷雾干燥制成蹄甲提取物干粉的技术；专利文献4（申请号200910230964.4）记载了一种蹄甲多肽的制备方法，该方法属于一种药物的制备方法，所述的方法是原料处理、提取、浓缩、烘干、粉碎、制得蹄甲多肽的技术。
以上方法从蹄甲中分离（提取）蹄甲肽时，使用酸化剂、还原剂等药品以及蛋白酶等生物活性试剂。缺点主要有：所需耗材多，成本高；操作时间长，除去试剂残留需要较长时间，并且有些成分长时间也很难去除；操作过程复杂，以上蹄甲多肽的分离（提取）需要复杂的操作步骤，需要具有较强专业知识的专业技术人员才可完成。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的不足，并提供一种使用热的氨基甲酸铵溶液来处理动物蹄甲简便提取动物蹄甲多肽的方法，它不使用酸化剂、还原剂、表面活性剂和酶等试剂，操作步骤简单，成本低，耗时短。
本发明的技术方案如下：
一种简便提取动物蹄甲多肽的方法，试管中称取氨基甲酸铵，加入动物蹄甲粉末，动物蹄甲粉末和氨基甲酸铵的重量比为5-18：1，用橡皮塞密封试管，在140-190℃下加热10-15分钟，动物蹄甲全部溶解后得到动物蹄甲溶液，降温，动物蹄甲溶液凝固，粉碎，然后按氨基甲酸铵重量：乙醇体积=1：5，加入95%乙醇让蹄甲多肽析出，过滤，用乙醇或蒸馏水清洗沉淀，加热干燥，得到粉末状的蹄甲多肽，滤液旋转蒸发，回收乙醇。
优选，动物蹄甲和氨基甲酸铵的重量比为8-13：1。
优选，在150-170℃下加热得到动物蹄甲溶液。
本发明的优点在于：1、据实验结果，热的氨基甲酸铵溶液溶解动物蹄甲的能力很强，不使用酸化剂、还原剂、表面活性剂等试剂，也可以在短时间内充分溶解蹄甲，可以节省提取蹄甲多肽的试剂费用和不需要复杂的试剂除去过程；2、只使用热的氨基甲酸铵溶液就可以溶解动物蹄甲并可以提取蹄甲多肽，溶解过程很简单；3、本发明加热氨基甲酸铵的方法没有特别的要求，油浴加热，微波炉加热都可以；4、本发明从动物蹄甲中分离蹄甲多肽时，不使用酸化剂、还原剂、表面活性剂和酶等试剂，操作步骤简单，成本低，耗时短。
附图说明 图1是本发明工艺流程图。
具体实施方式 下面结合附图对本发明作进一步说明。
实施例1，由图1可知，一种简便提取动物蹄甲多肽的方法，试管中称取氨基甲酸铵，加入驴蹄甲粉末，驴蹄甲粉末和氨基甲酸铵的重量比为5：1，用橡皮塞密封试管，在140℃下加热15分钟，驴蹄甲全部溶解后得到驴蹄甲溶液，降温，驴蹄甲溶液凝固，粉碎，然后按氨基甲酸铵重量：乙醇体积=1：5，加入95%乙醇让蹄甲多肽析出，过滤，用乙醇或蒸馏水清洗沉淀，加热干燥，得到粉末状的蹄甲多肽，滤液旋转蒸发，回收乙醇，蹄甲多肽提取率为91.21%。
实施例2，由图1可知，一种简便提取动物蹄甲多肽的方法，试管中称取氨基甲酸铵，加入驴蹄甲粉末，驴蹄甲粉末和氨基甲酸铵的重量比为7：1，用橡皮塞密封试管，在150℃下加热11分钟，驴蹄甲全部溶解后得到驴蹄甲溶液，降温，驴蹄甲溶液凝固，粉碎，然后按氨基甲酸铵重量：乙醇体积=1：5，加入95%乙醇让蹄甲多肽析出，过滤，用乙醇或蒸馏水清洗沉淀，加热干燥，得到粉末状的蹄甲多肽，滤液旋转蒸发，回收乙醇，蹄甲多肽提取率为91.51%。
实施例3，由图1可知，一种简便提取动物蹄甲多肽的方法，试管中称取氨基甲酸铵，加入猪蹄甲粉末，猪蹄甲粉末和氨基甲酸铵的重量比为18：1，用橡皮塞密封试管，在190℃下加热10分钟，猪蹄甲全部溶解后得到猪蹄甲溶液，降温，猪蹄甲溶液凝固，粉碎，然后按氨基甲酸铵重量：乙醇体积=1：5，加入95%乙醇让蹄甲多肽析出，过滤，用乙醇或蒸馏水清洗沉淀，加热干燥，得到粉末状的蹄甲多肽，滤液旋转蒸发，回收乙醇，蹄甲多肽提取率为91.17%。
实施例4，由图1可知，一种简便提取动物蹄甲多肽的方法，试管中称取氨基甲酸铵，加入猪蹄甲粉末，猪蹄甲粉末和氨基甲酸铵的重量比为16：1，用橡皮塞密封试管，在180℃下加热10分钟，猪蹄甲全部溶解后得到猪蹄甲溶液，降温，猪蹄甲溶液凝固，粉碎，然后按氨基甲酸铵重量：乙醇体积=1：5，加入95%乙醇让蹄甲多肽析出，过滤，用乙醇或蒸馏水清洗沉淀，加热干燥，得到粉末状的蹄甲多肽，滤液旋转蒸发，回收乙醇，蹄甲多肽提取率为91.33%。
实施例5，由图1可知，一种简便提取动物蹄甲多肽的方法，试管中称取氨基甲酸铵，加入羊蹄甲粉末，羊蹄甲粉末和氨基甲酸铵的重量比为8：1，用橡皮塞密封试管，在150℃下加热12分钟，羊蹄甲全部溶解后得到羊蹄甲溶液，降温，羊蹄甲溶液凝固，粉碎，然后按氨基甲酸铵重量：乙醇体积=1：5，加入95%乙醇让蹄甲多肽析出，过滤，用乙醇或蒸馏水清洗沉淀，加热干燥，得到粉末状的蹄甲多肽，滤液旋转蒸发，回收乙醇，蹄甲多肽提取率为93.25%。
实施例6，由图1可知，一种简便提取动物蹄甲多肽的方法，试管中称取氨基甲酸铵，加入羊蹄甲粉末，羊蹄甲粉末和氨基甲酸铵的重量比为10：1，用橡皮塞密封试管，在160℃下加热13分钟，羊蹄甲全部溶解后得到羊蹄甲溶液，降温，羊蹄甲溶液凝固，粉碎，然后按氨基甲酸铵重量：乙醇体积=1：5，加入95%乙醇让蹄甲多肽析出，过滤，用乙醇或蒸馏水清洗沉淀，加热干燥，得到粉末状的蹄甲多肽，滤液旋转蒸发，回收乙醇，蹄甲多肽提取率为93.68%。
实施例7，由图1可知，一种简便提取动物蹄甲多肽的方法，试管中称取氨基甲酸铵，加入马蹄甲粉末，马蹄甲粉末和氨基甲酸铵的重量比为13：1，用橡皮塞密封试管，在170℃下加热13分钟，马蹄甲全部溶解后得到马蹄甲溶液，降温，马蹄甲溶液凝固，粉碎，然后按氨基甲酸铵重量：乙醇体积=1：5，加入95%乙醇让蹄甲多肽析出，过滤，用乙醇或蒸馏水清洗沉淀，加热干燥，得到粉末状的蹄甲多肽，滤液旋转蒸发，回收乙醇，蹄甲多肽提取率为93.58%。
实施例8，由图1可知，一种简便提取动物蹄甲多肽的方法，试管中称取氨基甲酸铵，加入马蹄甲粉末，马蹄甲粉末和氨基甲酸铵的重量比为11：1，用橡皮塞密封试管，在165℃下加热15分钟，马蹄甲全部溶解后得到马蹄甲溶液，降温，马蹄甲溶液凝固，粉碎，然后按氨基甲酸铵重量：乙醇体积=1：5，加入95%乙醇让蹄甲多肽析出，过滤，用乙醇或蒸馏水清洗沉淀，加热干燥，得到粉末状的蹄甲多肽，滤液旋转蒸发，回收乙醇，蹄甲多肽提取率为93.79%。
本发明氨基甲酸铵溶液当中溶解蹄甲的机理如下：以驴蹄甲为例，这些多肽分子主要是以二硫键和氢键结合的，氨基甲酸铵切断多肽的氢键让多肽变性，即氨基甲酸铵作为溶媒切断多肽氢键的同时，结合多肽中自由的氨基和羧基，提高了氨基甲酸铵当中的溶解度。另外，氨基甲酸铵分解产生的氨侵入多肽的结晶领域，扩大了多肽分子间距离，氨基甲酸铵分子更容易侵入多肽分子当中，促进多肽的溶解。

Claims (3)

1.一种简便提取动物蹄甲多肽的方法，其特征在于采用如下步骤，试管中称取氨基甲酸铵，加入动物蹄甲粉末，动物蹄甲和氨基甲酸铵的重量比为5-18：1，用橡皮塞密封试管，在140-190℃下加热10-15分钟，动物蹄甲全部溶解后得到动物蹄甲溶液，降温，动物蹄甲溶液凝固，粉碎，再加入95%乙醇让蹄甲多肽析出，氨基甲酸铵重量：乙醇体积=1：5，过滤，用乙醇或蒸馏水清洗沉淀，加热干燥，得到粉末状的蹄甲多肽，滤液旋转蒸发，回收乙醇。
2.如权利要求1所述的一种简便提取动物蹄甲多肽的方法，其特征在于：动物蹄甲和氨基甲酸铵的重量比为8-13：1。
3.如权利要求1所述的一种简便提取动物蹄甲多肽的方法，其特征在于：在150-170℃下加热得到动物蹄甲溶液。
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