CN102367466A - 一种蹄甲肽的提取方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种蹄甲肽的提取方法，该方法采用健康猪蹄甲为原料，经过升温蒸煮、烘干、粉碎机粉碎、蹄甲粉配水、升温蒸煮、酶解、灭酶、活性炭脱色、膜分离，将得到的滤液经干燥后即获蹄甲肽。本发明方法生产成本低、收率高、不产生任何有毒有害物质，而且所得产品安全性高，可广泛用于药品、保健品等领域。
Description
技术领域
本发明方法涉及猪蹄甲深加工技术领域，具体涉及一种蹄甲肽的提取方法，是一种以猪蹄甲为原料，通过生物工程技术提取蹄甲肽的方法。
背景技术
猪蹄甲味咸、平，可以治疗咳嗽喘息、痔疮、白秃、冻疮。猪蹄甲主要含角蛋白、肽类、氨基酸类、酯类、糖类、甾体化合物及无机盐等化学成分，一些成分具有明显的药理活性。对猪蹄甲的止血成分分析表明，其无机成分所含9种元素—钙、镁、磷、硼、铁、铜、锰和硅，均无止血作用；非蛋白质有机成分中的甾体类、酚类、糖类和氨基酸类物质亦无止血作用；蛋白质成分含胶原蛋白、弹性蛋白和角蛋白，除胶原蛋白外，均与止血作用有关。对猪蹄甲粉酸水解后进行氨基酸及酸性多糖分析证实，猪蹄甲含17种氨基酸，总量为93.9%；其中必需氨基酸7种，占总量27.9%；非必需氨基酸10种，占总量的66%；酸性多糖含量以氨基己糖计为0.85% 。
而蹄甲肽是猪蹄甲提取物，是角蛋白部分水解生成的多肽。猪蹄甲肽有直接兴奋心肌的作用，使血压先略升而后明显下降。以蹄甲肽为原料的产品妇血宁具有促凝血和抗纤溶双重作用，并且可能对凝血和纤溶系统的平衡有调节作用。通过猪蹄甲对溴醋酸抑制巯基酶的影响，以及对巯基封闭剂溶血作用和对冷藏血液中红细胞的影响实验证明，猪蹄甲对红细胞巯基酶、膜巯基蛋白和红细胞本身都有保护作用。研究比较猪蹄甲和穿山甲消痈作用，证明猪蹄甲和穿山甲消痈作用机制与增强白细胞吞噬功能,提高血清SOD（超氧化物岐化酶）活性、消除自由基、降低MDA（丙二醛）含量有关，在消痈作用方面猪蹄甲对穿山甲似有可替代性。且蹄甲肽具有双向调节细胞免疫的作用，其作用显著而持久。蹄甲肽可兴奋子宫，增加子宫收缩的频率和幅度，节律性地兴奋子宫肌影响内膜的血管，使血管呈扩张和收缩的双相变化，从而改善“功血”的子宫内膜血管血流障碍；本品还可调节内分泌，通过促进肾上腺束状带分泌糖皮质激素，抑制纤维蛋白溶解，减少血管通透性，稳定溶酶体膜等作用，从而改善或制止“功血”时出血。同蹄甲多肽相比，蹄甲肽具有更好的疗效，具有更加广阔的市场前景。
传统蹄甲多肽的生产方法主要是：猪蹄甲清洗、烘干、粉碎、配水、碱提取（两次）、浓缩、烘干、粉碎。此工艺生产时间长，碱溶液使用量过大，容易破坏药效成分，环境污染严重，所生产的产品分子量大，人体吸收利用率低。
总之，目前提取蹄甲多肽的传统工艺存在的问题有：碱用量大、环境污染严重、和收率偏低，属于初加工，不能直接利用。
发明内容
本发明要解决的技术问题是针对现有技术中存在的不足，提供一种产品收率高、便于于工业化生产的蹄甲肽的提取方法。
为了为解决上述技术问题，本发明采取如下技术方案：
1）取健康猪蹄甲用40-45℃水清洗洗净，加蹄甲重量5-8倍水升温至90-95℃蒸煮1.5-2h，烘干；
2）将烘干的猪蹄甲用粉碎机粉碎，过80目筛得蹄甲粉；
3）按蹄甲粉重量的12-16倍配水，升温至90-95℃，蒸煮1.5-2h,再降温至50-55℃，调节pH值至7.5-8，按蹄甲粉重量的1-2%加入复合蛋白酶，恒温搅拌酶解4-5h，酶解过程中保持体系pH值稳定；
4）将得到的酶解液升温至90-95℃，恒温灭酶10-15min；
5）将酶解液趁热过滤，得上清液；
6）将上清液冷却至50-55℃，按蹄甲粉重量的3-5%加入活性炭脱色、除腥，搅拌1-1.5h，过滤除去活性炭，得滤液；
7）将滤液用膜分离装置进行分离，脱盐并浓缩；
8）浓缩液经干燥后，得到产品蹄甲肽。
所述的粉碎先用粗碎机粉碎，筛孔径为5mm，再用超微粉碎机粉碎，粉碎后过80目筛。
所述的蹄甲肽分子量小于2000道尔顿。
所述的干燥为喷雾干燥。
与现有技术相比，本发明方法的优点和有益效果如下：
1、采用本发明工艺生产出来的蹄甲肽的分子量1000道尔顿以下肽的含量可达到90%以上，人体吸收率达99%以上，改善了人体吸收难的问题；
2、采用本发明的两次蒸煮工艺，第一次蒸煮即去掉了产品中的异味，又软化了产品中的角质层；第二次蒸煮提高了液体物料的乳化型，有利于与酶的反应，可以缩短酶解时间、提高产品收率，收率达45%以上；
3、本发明方法不产生任何有毒有害物质，安全，无毒副作用，可广泛用于食品、药品、保健品和生物合成等领域；
4、本发明采用先粗碎后超微粉碎的方法，即改善了猪蹄甲粉碎难的问题，又可以为酶解提供了条件。
具体实施方式
下面通过具体的实施例对本发明方法做进一步的详细说明。
实施例1：
称取健康猪蹄甲1kg,用41℃水清洗两次、洗净,加5kg水升温至90℃蒸煮2h, 用电热烘箱烘干； 烘干的猪蹄甲先用粗碎机粉碎，筛孔径为5mm，再用超微粉碎机粉碎，粉碎后过80目筛得蹄甲粉；向蹄甲粉中加入12kg水，升温至90℃，蒸煮2h，再降温至55℃，用食品级氢氧化钠调节pH值至8，加入10g复合蛋白酶，恒温搅拌酶解5h，酶解过程中用氢氧化钠保持体系pH值稳定；将得到的酶解液升温至90℃，恒温灭酶15min；将酶解液趁热过滤，得上清液；上清液冷却至55℃，加入30g活性炭脱色、除腥，搅拌1h，过滤除去活性炭，得滤液；将滤液用膜分离装置进行分离，脱盐并浓缩；浓缩液经喷雾干燥后，得到产品蹄甲肽，蹄甲肽分子量小于2000道尔顿。
表1 实施例1所得产品的检测报告
| 检测项目 | 标准规定 | 检测结果 |
| 性状 | 淡黄色粉末 | 淡黄色粉末 |
| 干燥失重 | ≤10% | 3.8% |
| 灰分 | ≤10% | 7.1% |
| 蛋白质含量 | ≥80% | 89% |
| 铅（以pb元素计） | ＜1.0ppm | 0.2ppm |
| PH值（10%水溶液） | 7.0-8.0 | 7.5 |
| 砷（以As元素计） | ＜0.5ppm | 0.2ppm |
| 菌落总数 | ＜1000cfu/g | ＜500cfu/g |
| 大肠菌群 | ＜40MPN/100g | ＜25MPN/100g |
| 霉菌 | ＜25cfu/g | ＜10cfu/g |
| 酵母菌 | ＜25cfu/g | ＜5cfu/g |
自以上检测报告表可以看到：本工艺该批次产品全部指标，皆高于国家标准。
实施例2：
称取健康猪蹄甲2kg,用41℃水清洗两次、洗净,加12kg水升温至92℃蒸煮1.5h, 用电热烘箱烘干； 烘干的猪蹄甲先用粗碎机粉碎，筛孔径为5mm，再用超微粉碎机粉碎，粉碎后过80目筛得蹄甲粉；向蹄甲粉中加入24kg水，升温至91℃，蒸煮1.5h,再降温至54℃，用食品级氢氧化钠调节pH值至7.8，加入20g复合蛋白酶，恒温搅拌酶解4.5h，酶解过程中用氢氧化钠保持体系pH值稳定；将得到的酶解液升温至92℃，恒温灭酶14min；将酶解液趁热过滤，得上清液；上清液冷却至53℃，加入60g活性炭脱色、除腥，搅拌1.2h，过滤除去活性炭，得滤液；将滤液用膜分离装置进行分离，脱盐并浓缩；浓缩液经喷雾干燥后，得到产品蹄甲肽，蹄甲肽分子量小于2000道尔顿。
表2 实施例2所得产品的检测报告
| 检测项目 | 标准规定 | 检测结果 |
| 性状 | 淡黄色粉末 | 淡黄色粉末 |
| 干燥失重 | ≤10% | 5.8% |
| 灰分 | ≤10% | 6.2% |
| 蛋白质含量 | ≥80% | 88% |
| 铅（以pb元素计） | ＜1.0ppm | 0.24ppm |
| PH值（10%水溶液） | 7.0-8.0 | 7.2 |
| 砷（以As元素计） | ＜0.5ppm | 0.15ppm |
| 菌落总数 | ＜1000cfu/g | ＜500cfu/g |
| 大肠菌群 | ＜40MPN/100g | ＜20MPN/100g |
| 霉菌 | ＜25cfu/g | ＜10cfu/g |
| 酵母菌 | ＜25cfu/g | ＜10cfu/g |
自以上检测报告表可以看到：本工艺该批次产品全部指标，皆高于国家标准。
实施例3：
称取健康猪蹄甲10kg,用45℃水清洗两次、洗净,加60kg水升温至94℃蒸煮2h, 用电热烘箱烘干； 烘干的猪蹄甲用粗碎机粉碎，筛孔径为5mm，再用超微粉碎机粉碎，粉碎后过80目筛得蹄甲粉；向蹄甲粉中加入120kg水，升温至94℃，蒸煮2h,再降温至52℃，用食品级氢氧化钠调pH值至7.6，加入120g复合蛋白酶，恒温搅拌酶解4.5h，酶解过程中用氢氧化钠保持体系pH值稳定；将得到的酶解液升温至94℃，恒温灭酶12min；将酶解液趁热过滤，得上清液；上清液冷却至52℃，加入300g活性炭脱色、除腥，搅拌1.3h，过滤除去活性炭，得滤液；将滤液用膜分离装置进行分离，脱盐并浓缩；浓缩液经喷雾干燥后，得到产品蹄甲肽，蹄甲肽分子量小于2000道尔顿。
表3 实施例3所得产品的检测报告
| 检测项目 | 标准规定 | 检测结果 |
| 性状 | 淡黄色粉末 | 淡黄色粉末 |
| 干燥失重 | ≤10% | 4.5% |
| 灰分 | ≤10% | 6.5% |
| 蛋白质含量 | ≥80% | 89% |
| 铅（以pb元素计） | ＜1.0ppm | 0.17ppm |
| PH值（10%水溶液） | 7.0-8.0 | 7.5 |
| 砷（以As元素计） | ＜0.5ppm | 0.12ppm |
| 菌落总数 | ＜1000cfu/g | ＜500cfu/g |
| 大肠菌群 | ＜40MPN/100g | ＜10MPN/100g |
| 霉菌 | ＜25cfu/g | ＜15cfu/g |
| 酵母菌 | ＜25cfu/g | ＜5cfu/g |
自以上检测报告表可以看到：本工艺该批次产品全部指标，皆高于国家标准。
实施例4：
称取健康猪蹄甲100kg,用40℃水清洗两次、洗净,加700kg水升温至93℃蒸煮2h, 用电热烘箱烘干； 烘干的猪蹄甲用粗碎机粉碎，筛孔径为5mm，再用超微粉碎机粉碎，粉碎后过80目筛得蹄甲粉；向蹄甲粉中加入1400kg水，升温至93℃，蒸煮2h,再降温至50℃，用食品级氢氧化钠调pH值至7.5，加入2kg复合蛋白酶，恒温搅拌酶解4.5h，酶解过程中用氢氧化钠保持体系pH值稳定；将得到的酶解液升温至93℃，恒温灭酶13min；将酶解液趁热过滤，得上清液；上清液冷却至51℃，加入4kg活性炭脱色、除腥，搅拌1.5h，过滤除去活性炭，得滤液；将滤液用膜分离装置进行分离，脱盐并浓缩；浓缩液经喷雾干燥后，得到产品蹄甲肽，蹄甲肽分子量小于2000道尔顿。
表4 实施例4所得产品的检测报告
| 检测项目 | 标准规定 | 检测结果 |
| 性状 | 淡黄色粉末 | 淡黄色粉末 |
| 干燥失重 | ≤10% | 5.0% |
| 灰分 | ≤10% | 8% |
| 蛋白质含量 | ≥80% | 87% |
| 铅（以pb元素计） | ＜1.0ppm | 0.14ppm |
| PH值（10%水溶液） | 7.0-8.0 | 7.9 |
| 砷（以As元素计） | ＜0.5ppm | 0.16ppm |
| 菌落总数 | ＜1000cfu/g | ＜500cfu/g |
| 大肠菌群 | ＜40MPN/100g | ＜25MPN/100g |
| 霉菌 | ＜25cfu/g | ＜10cfu/g |
| 酵母菌 | ＜25cfu/g | ＜10cfu/g |
自以上检测报告表可以看到：本工艺该批次产品全部指标，皆高于国家标准。
上述实施例中使用的复合蛋白酶的酶活力为30U/mg，膜分离装置为通用装置，蹄甲肽产品无腥臭味，可以直接用于医药原料。
Claims (4)
1.一种蹄甲肽的提取方法，其特征是包括以下步骤：
1）取健康猪蹄甲用40-45℃水清洗洗净，加蹄甲重量5-8倍水升温至90-95℃蒸煮1.5-2h，烘干；
2）将烘干的猪蹄甲用粉碎机粉碎，过80目筛得蹄甲粉；
3）按蹄甲粉重量的12-16倍配水，升温至90-95℃，蒸煮1.5-2h,再降温至50-55℃，调节pH值至7.5-8，按蹄甲粉重量的1-2%加入复合蛋白酶，恒温搅拌酶解4-5h，酶解过程中保持体系pH值稳定；
4）将得到的酶解液升温至90-95℃，恒温灭酶10-15min；
5）将酶解液趁热过滤，得上清液；
6）将上清液冷却至50-55℃，按蹄甲粉重量的3-5%加入活性炭脱色、除腥，搅拌1-1.5h，过滤除去活性炭，得滤液；
7）将滤液用膜分离装置进行分离，脱盐并浓缩；
8）浓缩液经干燥后，得到产品蹄甲肽。
2.如权利要求1所述的蹄甲肽的提取方法，其特征是所述的粉碎先用粗碎机粉碎，筛孔径为5mm，再用超微粉碎机粉碎，粉碎后过80目筛。
3.如权利要求1所述的蹄甲肽的提取方法，其特征是所述的蹄甲肽分子量小于2000道尔顿。
4.如权利要求1所述的蹄甲肽的提取方法，其特征是所述的干燥为喷雾干燥。
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|---|---|
| CN (1) | CN102367466A (zh) |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103243127A (zh) * | 2013-04-19 | 2013-08-14 | 中国水稻研究所 | 一种超微粉碎酶解一体化制备复合氨基酸的方法 |
| CN105579588A (zh) * | 2013-07-30 | 2016-05-11 | 泰森德洛化学公司 | 用于制备水解的角蛋白材料的方法 |
| CN105949275A (zh) * | 2016-06-21 | 2016-09-21 | 赤峰学院 | 一种简便提取动物蹄甲多肽的方法 |
| CN108504711A (zh) * | 2018-04-08 | 2018-09-07 | 山东鲁北药业有限公司 | 蹄甲多肽的制备方法 |
| CN114831212A (zh) * | 2022-04-18 | 2022-08-02 | 武汉新华扬生物股份有限公司 | 一种用于酶解蹄角的复合酶制剂及其应用 |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101979656A (zh) * | 2010-11-11 | 2011-02-23 | 武汉远城科技发展有限公司 | 一种蹄甲肽的提取方法 |
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2011
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Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101979656A (zh) * | 2010-11-11 | 2011-02-23 | 武汉远城科技发展有限公司 | 一种蹄甲肽的提取方法 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 唐勇，李洪军，睢道惠: "乳酸菌发酵对超微猪骨粉营养及理化特性的影响", 《农业工程学报》, vol. 18, no. 2, 31 March 2002 (2002-03-31) * |
| 张瑞宇: "超微细粉碎技术及其在食品领域中的重要作用", 《重庆工商大学学报》, vol. 20, no. 2, 30 June 2003 (2003-06-30) * |
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103243127A (zh) * | 2013-04-19 | 2013-08-14 | 中国水稻研究所 | 一种超微粉碎酶解一体化制备复合氨基酸的方法 |
| CN103243127B (zh) * | 2013-04-19 | 2015-02-04 | 中国水稻研究所 | 一种超微粉碎酶解一体化制备复合氨基酸的方法 |
| CN105579588A (zh) * | 2013-07-30 | 2016-05-11 | 泰森德洛化学公司 | 用于制备水解的角蛋白材料的方法 |
| CN105949275A (zh) * | 2016-06-21 | 2016-09-21 | 赤峰学院 | 一种简便提取动物蹄甲多肽的方法 |
| CN108504711A (zh) * | 2018-04-08 | 2018-09-07 | 山东鲁北药业有限公司 | 蹄甲多肽的制备方法 |
| CN108504711B (zh) * | 2018-04-08 | 2021-09-10 | 山东鲁北药业有限公司 | 蹄甲多肽的制备方法 |
| CN114831212A (zh) * | 2022-04-18 | 2022-08-02 | 武汉新华扬生物股份有限公司 | 一种用于酶解蹄角的复合酶制剂及其应用 |
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