CN105891519B - 一种用于测定糖化血红蛋白比例的试剂盒及测定方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种用于测定糖化血红蛋白比例的试剂盒，本发明试剂盒中，通过将抗体和二抗包被于试纸上，并通过使用荧光颗粒或者彩色颗粒等信号颗粒为标记检测物，从而可以通过将待测样本与信号颗粒一次混合后，直接采用层析的方法将糖化血红蛋白在试纸上分离得到，并进一步通过荧光层析读数仪或者肉眼直接对照检测得到样本中糖化血红蛋白比例。本发明试剂盒具有成分结构稳定，检测便捷，操作方便，结果准确等优点。同时，本发明还提供了一种测定糖化血红蛋白比例的方法，本发明方法中，通过使用本发明试剂盒进行检测，因而具有操作便捷，检测方法简单，检测结果准确等优点。
Description
技术领域
本发明涉及糖化血红蛋白测定领域，具体的，本发明涉及一种用于测定糖化血红蛋白比例的试剂盒及测定方法
背景技术
糖化血红蛋白(即HbA1c)，是人体血液中红细胞内的血红蛋白与血糖结合的产物。一般临床上使用糖化血红蛋白占总血红蛋白的百分比作为衡量糖化血红蛋白含量是否正常的指标。糖化血红蛋白占总血红蛋白的百分比可以稳定可靠的反应出检测前4个月的平均血糖水平，且这种检测不会受到抽血时间，是否空腹，是否使用胰岛素等因素干扰，是国际上糖尿病监控的“金标准”。
现有技术中，为了得到糖化血红蛋白的比例，往往需要分别检测总血红蛋白和糖化血红蛋白的含量，再进行计算得出糖化血红蛋白的比例。而目前主要的血红蛋白检测方法有：高效液相色谱法、硼酸亲和层析法、离子交换层析法、免疫比浊法、酶法。然而，高效液相色谱法、硼酸亲和层析法以及离子交换层析需要使用专业的大型仪器，且仪器价格昂贵，其实际应用并不便捷；同时，免疫比浊法需要使用大量抗体，且需要使用大型生化分析仪器才能进行检测，也无法实现小型化，便捷化的检测；同样的，酶法也需要使用多种酶配合进行反应，并经过大型生化分析仪仪器进行检测，才能得到最终结果。
为了解决无法实现小型化、便捷化测定糖化血红蛋白比例的问题，现有技术中也进行了一定的尝试与实验。例如现有技术(CN101915849A，公开日：2010年12月25日)就公开了一种便捷化测定糖化血红蛋白的方法，其包括如下步骤：a.将全血样本与溶血液混合均匀；b.取适量溶血后的样本加入悬浮在甘氨酸缓冲液中的乳胶；c.经预定时间后再分别加入抗体B试剂及抗体A试剂；d.混合均匀后在单波长光照射条件下,通过特定蛋白分析仪读取散射值；e.最后根据散射值从标准曲线图中读取糖化血红蛋白的百分比。
然而，这种方法仍然存在不便之处，例如其检测过程中，需要额外加入较大量的抗体A和抗体B试剂，这不仅提高了检测成本，同时由于需要额外加入抗体试剂，所以也进一步带来了抗体试剂运输和储存的问题；进一步的，单波长光照检测和蛋白分析仪读取都需要价格较为昂贵的设备，其操作也较为繁琐，需要进行大量的培训以保证检测结果准确，而这也进一步提高了检测的成本和不便捷性。
有鉴于此，特提出本发明。
发明内容
本发明的第一个目的在于，提供一种用于测定糖化血红蛋白比例的试剂盒，本发明试剂盒中，本发明提供了一种用于测定糖化血红蛋白比例的试剂盒，本发明试剂盒中，通过将抗体和二抗包被于试纸上，并通过使用荧光颗粒为标记检测物，从而可以通过将待测样本与荧光颗粒一次混合后，直接采用层析的方法将糖化血红蛋白在试纸上分离得到，并进一步通过荧光层析读数仪直接对照检测得到样本中糖化血红蛋白比例。而这也同时解决了现有技术中需要多仪器配合使用所带来的操作不便捷的技术问题。本发明试剂盒具有成分结构稳定，检测便捷，操作方便，结果准确等优点。
本发明的第二个目的在于，提供一种测定糖化血红蛋白比例的方法。本发明方法中，通过使用本发明试剂盒进行检测，因而可以解决现有技术中方法由于特异性抗体储存运输以及大量使用所带来的操作不便捷等技术问题，也可以解决现有技术中检测需要多仪器配合使用所带来的操作不方便的技术问题。本发明方法具有操作便捷，检测方法简单，检测结果准确等优点。
为了实现本发明上述目的，本申请特采用如下技术方案：
一种用于测定糖化血红蛋白比例的试剂盒，所述试剂盒包括试剂瓶和试纸。其中，所述试剂瓶中装有可与血红蛋白反应或可吸附血红蛋白的荧光颗粒或彩色颗粒；其中，所述试纸由一端起，依次为冲洗区、样品区、糖化血红蛋白抗体结合区、检测区、对照区以及吸水区。进一步的，所述糖化血红蛋白抗体结合区包被有鼠抗人糖化血红蛋白抗体，所述检测区包被有可与鼠抗人糖化血红蛋白抗体结合的二抗，所述对照区包被有抗血红蛋白抗体。
本发明中，通过使用荧光颗粒为标记检测物，并通过将荧光颗粒与样本一次混合后，并通过在试纸上将糖化血红蛋白固定分离，并通过检测荧光度数即能够实现糖化血红蛋白比例的测定，具有检测方法便捷准确的优点。
可选的，本发明中，所述二抗为羊抗鼠抗体。
可选的，本发明中，所述荧光颗粒或彩色颗粒为具有疏水性表面的聚合物荧光颗粒/彩色微球；或荧光无机颗粒/彩色微球，也可以是表面具有环氧基，氯甲基，甲苯磺酰基，醛基等高活性基团可以和蛋白进行反应的荧光/彩色微球。
可选的，本发明中，所述试纸包括底板以及与其粘合的硝基纤维素膜，所述硝基纤维素膜的宽度与底板宽度相同；其中，所述冲洗区、样品区、糖化血红蛋白抗体结合区以及吸水区分别设置有冲洗液加样垫、防水垫、样品抗体结合垫和吸水垫；其中，所述样品抗体结合垫包括样品区以及糖化血红蛋白抗体结合区，并与所述硝基纤维素膜紧贴，所述样品抗体结合垫的宽度分别与冲洗区、样品区以及糖化血红蛋白抗体结合区三个区域的宽度相同，并覆盖所述三个区域；所述吸水垫的宽度与吸水区宽度相同；其中，所述冲洗液加样垫和防水垫分别与所述样本抗体结合垫紧贴，所述冲洗液加样垫和防水垫的宽度与冲洗区相同，且冲洗液加样垫和防水垫覆盖冲洗区；其中，所述鼠抗人糖化血红蛋白抗体包被于所述样品抗体结合垫上。
本发明中，通过对所述试纸结构和材料的进一步选择、调整以及优化，从而可以进一步提高检测的效率。可选的，本发明中，所述底板为硬质聚氯乙烯板。
可选的，本发明中，所述冲洗液加样垫和样品抗体结合垫为一体式结构。
可选的，本发明中，所述样本抗体结合垫为玻璃纤维垫。
本发明中，通过对样本抗体结合垫材料的选择和优化，选择具有高比表面积能吸附大量抗体的样本的和玻璃纤维为结合垫材料，从而可以在实现抗体有效吸附的同时，还不会由于吸附性过好所导致的检测结果不准确。
可选的，本发明中，所述荧光颗粒/彩色颗粒的粒径为50-500nm；优选的，本发明中，所述荧光颗粒/彩色颗粒的直径为80-100nm。
本发明中，通过对荧光颗粒粒径的调整和优化，从而使得荧光颗粒在与抗体接触后，能够进一步通过纤维素膜并进行固定和检测。
可选的，本发明中，所述试剂盒还进一步包括用于糖化血红蛋白检测的微量红细胞采集装置。
本发明中，通过进一步在试剂盒中添加微量红细胞采集装置，从而可以实现由压积红细胞采集到糖化血红蛋白检测的一体化操作流程，进一步便捷了糖化血红蛋白检测的整体流程步骤。
可选的，本发明中，所述用于糖化血红蛋白检测的微量红细胞采集装置包括：固件，血液去除装置、多孔粘合层，吸血垫；其中，所述吸血垫设置在所述固件的一端；所述多孔粘合层通过包裹所述吸血垫以及设置有吸血垫的端部将所述吸血垫固定于所述固件上；所述血液去除装置设置在所述固件上，并与所述固件滑动连接。
本发明中，通过设置吸血垫以及覆盖其的多孔粘合层，从而可以对吸血垫进行位置固定，并直接进行血样的吸取和进一步压积红细胞的固定，通过进一步设置血液去除装置，从而可以在同一装置上进一步实现未固定的多余血液的去除，进而实现了压积红细胞提取的一体化装置操作步骤，使得检测更加方便快捷。
同时，本发明还提供了一种测定糖化血红蛋白比例的方法，所述方法中使用本发明所述的试剂盒进行检测。具体的，所述方法包括如下步骤：将压积红细胞置于含溶血剂和荧光颗粒/彩色颗粒的试剂瓶中，并与所述荧光颗粒/彩色颗粒反应，然后将反应后荧光颗粒/彩色颗粒取出，并置于所述样品区，并在所述冲洗区加入适量冲洗液，使得所述反应后荧光颗粒/彩色颗粒能够随冲洗液流动并经过糖化血红蛋白抗体结合区以及检测区或对照区，然后，对检测区进行荧光强度或色带强度检测，并将检测结果与标准曲线或标准色卡对照，即可计算出糖化血红蛋白比例。
本发明中，通过将血红蛋白与荧光颗粒/彩色颗粒反应固定，并通过加入冲洗液而带动反应后荧光颗粒/彩色颗粒经过糖化血红蛋白抗体以及二抗或抗血红蛋白抗体，从而可以通过检测包被有二抗的检测区的荧光强度/色带强度，即可通过对比标准曲线/标准色卡计算得出糖化血红蛋白含量，从而可以避免现有技术中的复杂操作。同时，本发明中，通过进一步设置对照检测区域，还可以进一步通过荧光检测结果测试包被于试纸上的抗体是否失活，从而进一步保证了检测结果的准确定。本发明方法具有操作简便，检测效率高等优点。
进一步的，本发明糖化血红蛋白比例测定的原理如下：糖化血红蛋白与非糖化血红蛋白在荧光颗粒上有相同的吸附能力，当具有不同糖化血红蛋白比例的样本与信号颗粒混合后，能够形成不同糖化血红蛋白包被密度的荧光颗粒。当加入冲洗液冲洗后，所述荧光颗粒/彩色颗粒会先通过糖化血红蛋白抗体结合区，并与糖化血红蛋白抗体发生反应，然后荧光颗粒/彩色颗粒继续随冲洗液经过包埋有二抗的检测区时，吸附有糖化血红蛋白的荧光颗粒会固定于检测区，而未与糖化血红蛋白结合的荧光颗粒/彩色颗粒会进一步随冲洗液达到对照区并被固定。进一步的，检测区的荧光强度会与糖化血红蛋白的包被密度成正相关性，通过测定检测区的荧光强度数值，并进一步与标准曲线数值对照，即可得出糖化血红蛋白比例；或者检测区域的色带强度会与糖化血红蛋白的包被密度成正相关性，随着将色带与标准色带对照，即可得出糖化血红蛋白比例。可选的，本发明中，所述试剂瓶中还进一步含有甘氨酸缓冲液和溶血剂，同时，所述荧光颗粒/彩色颗粒悬浮于所述甘氨酸缓冲溶液和溶血剂中。
可选的，本发明中，所述荧光强度检测是以激发波长为300～700nm的发射波长，在350～1000波长范围内进行的荧光信号强度检测。
可选的，本发明方法中，溶血后样本与所述荧光颗粒/彩色颗粒反应的时间为0.5-2min。
本发明中，通过对反应时间的调整和优化，从而可以在实现样本中血红蛋白与荧光颗粒/彩色颗粒的充分接触反应，同时还不会由于反应时间过长而影响整体的测定效率。
可选的，本发明方法中，所述冲洗液是含有能够提供抗原抗体反应环境的保护性蛋白以及表面活性剂的缓冲溶液。优选的，本发明中，所述缓冲溶液为含有0.5％BSA和0.1％吐温20的pH＝7.4的磷酸缓冲液。
本发明中，通过使用能为抗体抗原反应提供良好环境的缓冲溶液作为冲洗液，从而可以进一步提高检测的准确性。
可选的，本发明方法中，所述方法还进一步包括使用糖化血红蛋白检测的微量红细胞采集装置采集积压红细胞的步骤。
本发明中，通过进一步增加压积红细胞采集步骤，从而可以在一次检测中实现由压积红细胞提取到糖化血红蛋白检测的整体步骤，从而进一步简化了检测方法，实现了便捷检测。
进一步的，本发明中，所述积压红细胞的步骤具体如下：将本发明中用于糖化血红蛋白检测的微量红细胞采集装置带有吸血垫的结构部分浸入血样中进行血液吸取；然后，将装置取出，然后将血液去除装置通过夹持装置移动至吸血垫处，并对对吸血垫进行挤压，将多余血样去除，即得到所采集微量红细胞，也就是压积红细胞。然后，将装置带有吸血垫的结构部分浸泡于含溶血剂和荧光颗粒的试剂液中，从而将压积红细胞中的血红蛋白释放，并进行进一步的糖化血红蛋白检测。
与现有技术相比，本发明的有益效果为：
(1)本发明中，使用荧光颗粒/彩色颗粒为标记检测物，并能够通过简单的荧光数值读取以及标准对照即实现糖化血红蛋白比例的检测，或者通过简单的色带颜色检测并于标准色卡对照实现糖化血红蛋白比例的检测，因此具有成分结构稳定，检测便捷，操作方便，结果准确等优点。
(2)本发明中，通过对试纸结构以及材料的进一步选择、调整与优化，从而进一步提高了检测的准确性。
(3)本发明中，通过对混合时间以及冲洗液等测定条件的选择和优化，从而可以在提高检测效率的同时，进一步提高检测的准确性。
附图说明
为了更清楚地说明本发明具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本发明的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其它的附图。
图1为本发明所提供用于测定糖化血红蛋白比例的试剂盒中试剂瓶示意图：
1-试剂瓶，101-荧光颗粒或彩色颗粒；
图2为本发明所提供用于测定糖化血红蛋白比例的试剂盒中试纸的俯视图：
2-试纸，201-冲洗区，202-样品区203-糖化血红蛋白抗体结合区，204-检测区，205-对照区，206-吸水区；
图3为本发明所提供用于测定糖化血红蛋白比例的试剂盒中试纸的侧视图：
301-底板，302-硝基纤维素膜，303-冲洗液加样垫，304-防水垫，305-包括样品区和糖化血红蛋白抗体结合区的样本抗体结合垫，306-吸水垫
图4为本发明所提供用于糖化血红蛋白检测的微量红细胞采集装置:
401－固件，402－血液去除装置，403－多孔粘合层，404－吸血垫。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明的技术方案进行清楚、完整的描述，基于本发明中的具体实施方式，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所得到的所有其它实施方式，都属于本发明所保护的范围。
在本发明的描述中，需要说明的是，术语“中心”、“上”、“下”、“左”、“右”、“竖直”、“水平”、“内”、“外”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系，仅是为了便于描述本发明和简化描述，而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本发明的限制。此外，术语“第一”、“第二”、“第三”仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性。
在本发明的描述中，需要说明的是，除非另有明确的规定和限定，术语“安装”、“相连”、“连接”应做广义理解，例如，可以是固定连接，也可以是可拆卸连接，或一体地连接；可以是机械连接，也可以是电连接；可以是直接相连，也可以通过中间媒介间接相连，可以是两个元件内部的连通。对于本领域的普通技术人员而言，可以具体情况理解上述术语在本发明中的具体含义。
实施例1
请参考图1和图2，本发明用于测定糖化血红蛋白比例的试剂盒包括试剂瓶1和试纸2；
其中，所述试剂瓶1中装有溶血剂和可与血红蛋白反应或可吸附血红蛋白的荧光颗粒101；
其中所述试纸2由一端起，依次为冲洗区201、样品区202、糖化血红蛋白抗体结合区203、检测区204、对照区205以及吸水区206；
其中，所述糖化血红蛋白抗体结合区203包被有鼠抗人糖化血红蛋白抗体，所述检测区204包被有可与鼠抗人糖化血红蛋白抗体结合的二抗，所述对照区205包被有抗血红蛋白抗体。
实施例2
请参考图1、图2以及图3，本发明用于测定糖化血红蛋白比例的试剂盒包括试剂瓶1和试纸2；
其中，所述试剂瓶1中装有可与血红蛋白反应或可吸附血红蛋白的彩色颗粒101；
其中所述试纸2由一端起，依次为冲洗区201、样品区202、糖化血红蛋白抗体结合区203、检测区204、对照区205以及吸水区206；
其中，所述糖化血红蛋白抗体结合区203包被有鼠抗人糖化血红蛋白抗体，所述检测区204包被有可与鼠抗人糖化血红蛋白抗体结合的二抗，所述对照区205包被有抗血红蛋白抗体；
进一步的，所述试纸2包括底板301以及与其粘合的硝基纤维素膜302，所述硝基纤维素膜302的宽度与底板301的宽度相同；
同时，所述冲洗区201、样品区202、糖化血红蛋白抗体结合区203以及吸水区206分别设置有的冲洗液加样垫303、防水垫304、包括样品区和糖化血红蛋白抗体结合区的样品抗体结合垫305和吸水垫306；
其中，所述样本抗体结合垫305和吸水垫306与所述硝基纤维素膜302紧贴，所述包括样品区和糖化血红蛋白抗体结合区的样本抗体结合垫305的宽度分别与冲洗区201、样品区202以及糖化血红蛋白抗体结合区203等三个区域的宽度相同，并覆盖所述三个区域；所述吸水垫306的宽度与吸水区206宽度相同；
其中，所述冲洗液加样垫303以及防水垫304分别与所述样本抗体结合垫305紧贴，同时冲洗液加样垫303和防水垫304覆盖冲洗区201；所述冲洗液加样垫303和防水垫304的宽度均与冲洗区201相同；
其中，所述鼠抗人糖化血红蛋白抗体包被于所述包括样品区和糖化血红蛋白抗体结合区的样本抗体结合垫305上。
实施例3
请参考图1、图2以及图3，本发明用于测定糖化血红蛋白比例的试剂盒包括试剂瓶1和试纸2；
其中，所述试剂瓶1中装有荧光颗粒101，所述荧光颗粒101的直径为80nm，是具有疏水性表面的可吸附血红蛋白的聚合物荧光颗粒；
其中所述试纸2由一端起，依次为冲洗区201、样品区202、糖化血红蛋白抗体结合区203、检测区204、对照区205以及吸水区206；
其中，所述糖化血红蛋白抗体结合区203包被有鼠抗人糖化血红蛋白抗体，所述检测区204包被有可与鼠抗人糖化血红蛋白抗体结合的二抗，所述对照区205包被有抗血红蛋白抗体；
进一步的，所述试纸2包括底板301以及与其粘合的硝基纤维素膜302，所述硝基纤维素膜302的宽度与底板301的宽度相同；
同时，所述冲洗区201、样品区202、糖化血红蛋白抗体结合区203以及吸水区206分别设置有的冲洗液加样垫303、防水垫304、样本抗体结合垫305和吸水垫306，所述样本抗体结合垫305为玻璃纤维垫；
其中，所述包括样品区和糖化血红蛋白抗体结合区的样本抗体结合垫305和吸水垫306与所述硝基纤维素膜302紧贴，所述包括样品区和糖化血红蛋白抗体结合区的样本抗体结合垫305的宽度分别与冲洗区201、样品区202以及糖化血红蛋白抗体结合区203等三个区域的宽度相同，并覆盖所述三个区域；所述吸水垫306的宽度与吸水区206宽度相同；
其中，所述冲洗液加样垫303以及防水垫304分别与所述样本抗体结合垫305紧贴，同时冲洗液加样垫303和防水垫304覆盖冲洗区201；所述冲洗液加样垫303和防水垫304的宽度分别与冲洗区201相同；
其中，所述鼠抗人糖化血红蛋白抗体包被于所述包括样品区和糖化血红蛋白抗体结合区的样本抗体结合垫305上。
实施例4
请参考图4，本发明用于测定糖化血红蛋白比例的试剂盒还包括用于糖化血红蛋白检测的微量红细胞采集装置，其包括：固件401，血液去除装置402，多孔粘合层403，吸血垫404；
其中，所述吸血垫404设置在所述固件401的一端；所述多孔粘合层403通过包裹所述吸血垫404以及设置有吸血垫404的端部将所述吸血垫404固定于所述固件401上；所述血液去除装置402设置在所述固件401上，并与所述固件401滑动连接。
实验例1
本发明糖化血红蛋白比例检测方法如下：将压积红细胞置于含有溶血剂和荧光颗粒101的试剂瓶1中，使血红蛋白从血细胞中释放并与荧光颗粒101反应，在反应1min后，从试剂瓶1中取出含反应后荧光颗粒101的液体20ul，并将其置于包括样品区和糖化血红蛋白抗体结合区的样本抗体结合垫305的样品区202上，并在所述冲洗区201的冲洗液加样垫303上加入适量含有0.5％BSA和0.1％吐温20的pH＝7.4的磷酸缓冲液的冲洗液，使得所述反应后的荧光颗粒101能够随冲洗液流动，而防水垫304是为了防止冲洗液从垫子上方直接溢到加样区203，从而保证冲洗液的冲洗效果；使荧光颗粒101经过包括样品区和糖化血红蛋白抗体结合区的样本抗体结合垫305的糖化血红蛋白抗体结合区203，以及检测区204或对照区205，多余的冲洗液将被吸水区206的吸水垫306吸附。然后，对检测区204进行荧光强度检测，并将检测结果与标准曲线对照，即可计算出糖化血红蛋白比例。
实验例2
本发明糖化血红蛋白比例检测方法如下：将压积红细胞置于含有溶血剂和荧光颗粒101的试剂瓶1中，使血红蛋白从血细胞中释放并与荧光颗粒101反应，在反应1min后，从试剂瓶1中取出含反应后彩色颗粒101的液体20ul，并将其置于包括样品区和糖化血红蛋白抗体结合区的样本抗体结合垫305的样品区202上，并在所述冲洗区201的冲洗液加样垫303上加入适量含有0.5％BSA和0.1％吐温20的pH＝7.4的磷酸缓冲液的冲洗液，使得所述反应后的彩色颗粒101能够随冲洗液流动，而防水垫304是具有防止冲洗液从垫子上方直接溢到加样区203的功能，从而保证冲洗液的冲洗效果；使彩色颗粒101经过包括样品区和糖化血红蛋白抗体结合区的样本抗体结合垫305的糖化血红蛋白抗体结合区203，以及检测区204或对照区205，多余的冲洗液将被吸水区206的吸水垫306吸附。然后，对检测区204进行色带强度检测，并将检测结果与标准色卡对照，即可计算出糖化血红蛋白比例。
实验例3
本发明方法还进一步包括使用糖化血红蛋白检测的微量红细胞采集装置采集积压红细胞的步骤，所述步骤具体如下：将本发明实施例4中所述的用于糖化血红蛋白检测的微量红细胞采集装置带有吸血垫404的结构部分浸入血样中进行血液吸取；然后，将装置取出，然后将血液去除装置402通过夹持装置移动至吸血垫404处，并对对吸血垫404进行挤压，将多余血样去除，即得到所采集微量红细胞，也就是压积红细胞。然后，将装置带有吸血垫404的结构部分浸泡于含有溶血剂和荧光颗粒/彩色颗粒的试剂瓶中，并释放血红蛋白，然后再按照实验例1或实验例2的步骤进行糖化血红蛋白检测。
本发明试剂盒中，通过使用荧光颗粒为标记检测物，并将抗体直接包被于试纸表面，从而无需外加抗体，并能够通过简单的荧光数值读取以及标准对照即实现检测，并具有成分结构稳定，检测便捷，操作方便，结果准确等优点。
尽管已用具体实施例来说明和描述了本发明，然而应意识到，在不背离本发明的精神和范围的情况下可以作出许多其它的更改和修改。因此，这意味着在所附权利要求中包括属于本发明范围内的所有这些变化和修改。
Claims (7)
1.一种用于测定糖化血红蛋白比例的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括试剂瓶和试纸；
其中，所述试剂瓶中装有可与血红蛋白反应或可吸附血红蛋白的荧光颗粒或彩色颗粒；
其中，所述试纸由一端起，依次为冲洗区、样品区、糖化血红蛋白抗体结合区、检测区、对照区以及吸水区；
其中，所述糖化血红蛋白抗体结合区包被有鼠抗人糖化血红蛋白抗体，所述检测区包被有可与鼠抗人糖化血红蛋白抗体结合的二抗，所述对照区包被有抗血红蛋白抗体；
所述试剂盒还进一步包括用于糖化血红蛋白检测的微量红细胞采集装置；
所述用于糖化血红蛋白检测的微量红细胞采集装置包括：固件，血液去除装置、多孔粘合层，吸血垫；
其中，所述吸血垫设置在所述固件的一端；所述多孔粘合层通过包裹所述吸血垫以及设置有吸血垫的端部将所述吸血垫固定于所述固件上；所述血液去除装置设置在所述固件上，并与所述固件滑动连接；
通过设置所述吸血垫以及所述多孔粘合层，直接进行血样的吸取和压积红细胞的固定；
其中，所述血液去除装置用于通过夹持装置移动至所述吸血垫处，并对所述吸血垫进行挤压，将多余血样去除，得到所采集的压积红细胞。
2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试纸包括底板以及与其粘合的硝基纤维素膜，所述硝基纤维素膜的宽度与底板宽度相同；
其中，所述冲洗区、样品区、糖化血红蛋白抗体结合区以及吸水区分别设置有冲洗液加样垫、防水垫、样品抗体结合垫和吸水垫；
其中，所述样品抗体结合垫包括样品区以及糖化血红蛋白抗体结合区，并与所述硝基纤维素膜紧贴，所述样品抗体结合垫的宽度分别与冲洗区、样品区以及糖化血红蛋白抗体结合区三个区域的宽度相同，并覆盖所述三个区域；所述吸水垫的宽度与吸水区宽度相同；
其中，所述冲洗液加样垫和防水垫分别与所述样本抗体结合垫紧贴，所述冲洗液加样垫和防水垫的宽度与冲洗区相同，且冲洗液加样垫和防水垫覆盖冲洗区；
其中，所述鼠抗人糖化血红蛋白抗体包被于所述样品抗体结合垫上。
3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述样本抗体结合垫为玻璃纤维垫。
4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述荧光颗粒的粒径为50-500nm。
5.一种测定糖化血红蛋白比例的方法，其特征在于，所述方法中使用权利要求1-4中任一项所述的试剂盒进行检测，所述方法具体包括如下步骤：
使用糖化血红蛋白检测的微量红细胞采集装置采集压积红细胞：将用于糖化血红蛋白检测的微量红细胞采集装置带有吸血垫的结构部分浸入血样中进行血液吸取；然后，将微量红细胞采集装置取出，然后将血液去除装置通过夹持装置移动至吸血垫处，并对对吸血垫进行挤压，将多余血样去除，即得到所采集压积红细胞；
将压积红细胞置于所述的含溶血剂和荧光颗粒/彩色颗粒的试剂瓶中，使血红蛋白释放并与所述荧光颗粒/彩色颗粒反应，然后将反应后荧光颗粒/彩色颗粒取出，并置于所述样品区，并在所述冲洗区加入适量冲洗液，使得所述反应后荧光颗粒/彩色颗粒能够随冲洗液流动并经过糖化血红蛋白抗体结合区以及检测区或对照区，然后，对检测区进行荧光强度或色带颜色检测，并将检测结果与标准曲线或标准色卡对照，即可计算出糖化血红蛋白比例。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，溶血后样本与所述荧光颗粒/彩色颗粒反应的时间为0.5-2min。
7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述冲洗液是含有能够提供抗原抗体反应环境的保护性蛋白以及表面活性剂的缓冲溶液。
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| PE01 | Entry into force of the registration of the contract for pledge of patent right | ||
| PE01 | Entry into force of the registration of the contract for pledge of patent right |
Denomination of invention: A kit and method for determining the proportion of glycosylated hemoglobin Effective date of registration: 20210208 Granted publication date: 20180330 Pledgee: Bank of China Limited by Share Ltd. Xiamen branch Pledgor: ANBIO (XIAMEN) PRODUCTS Inc. Registration number: Y2021980001126 |
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| PC01 | Cancellation of the registration of the contract for pledge of patent right | ||
| PC01 | Cancellation of the registration of the contract for pledge of patent right |
Date of cancellation: 20231011 Granted publication date: 20180330 Pledgee: Bank of China Limited by Share Ltd. Xiamen branch Pledgor: ANBIO (XIAMEN) PRODUCTS Inc. Registration number: Y2021980001126 |