CN105876405A - 一种发酵冬虫夏草胞外多糖口服液及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种发酵冬虫夏草胞外多糖口服液及其制备方法。其目的是为解决生产冬虫夏草菌丝体后的发酵液丢弃处理，浪费资源、能源、人力、物力和财力，且存在对周围水体及土壤污染的问题，满足市场对富含冬虫夏草胞外多糖成分产品的需求。其技术方案：菌种采集、菌种培养、无菌分离、低温培养、纯化、菌种鉴定、原始菌种保藏、发酵性能测定、液体发酵、菌液分离、发酵液浓缩、提取精制冬虫夏草胞外粗多糖；取发酵冬虫夏草胞外多糖相关辅料，纯化水溶解；定容、均质、脱气、灌装、灭菌后，即得发酵冬虫夏草胞外多糖口服液。本发明产品具有抗肿瘤、抗氧化、增强单核巨噬细胞的吞噬能力、提高血清IgG的含量、促进体外淋巴细胞转化和抗辐射等作用。

Description

一种发酵冬虫夏草胞外多糖口服液及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种发酵冬虫夏草胞外多糖口服液及其制备方法，具体来说，是指对发酵冬虫夏草胞外多糖进行分离纯化添加辅料制得的口服液及制备方法。

背景技术

发酵冬虫夏草菌粉足经菌种采集、菌种培养、无菌分离、低温培养、纯化、菌种鉴定、原始菌种保藏、发酵性能测定、液体发酵、菌液分离、菌丝体干燥等工艺制得。而发酵液常被作为废液进行处理，由于发酵液中含有大量微生物和其他功效成分，直接排放会对周围水体及土壤发生污染，需要经过高温高压灭菌处理才可以排放，不仅浪费了大量资源、能源、人力、物力和财力，而且对周围环境存在安全隐患。

试验表明，发酵冬虫夏草胞外多糖具有抗肿瘤、增强单核巨噬细胞的吞噬能力、抗氧化、提高血清中IgG的含量、促进体外淋巴细胞转化和抗辐射等作用。而冬虫夏草发酵液也含有多种功能性有效成分，如对病菌有抑制作用的多糖、虫草菌素、多肽类、甘露醇、单糖、有机酸、多胺、磷脂酰胆碱、微量元素及VB12等成分。它们的生理活性极其丰富多彩，可抗菌、抗癌、抗血小板凝结、抗辐射、改善和提高记忆力、调节机体免疫能力、钙离子拮抗、对脑和心脏在常压缺氧下有保护作用、镇静和镇痛等。

目前，对于发酵冬虫夏草胞外多糖的研究和生产属于空白。

在此基础上，本发明的实施，不仅提供了具有抗肿瘤、增强单核巨噬细胞的吞噬能力、提高小鼠血清中IgG的含量、对体外淋巴细胞转化有促进作用和抗辐射等作用的胞外多糖颗粒剂产品，最大限度的利用了冬虫夏草发酵液，变废为宝，还达到了节约资源、能源、人力、物力和财力，降低环境污染的目的。

发明内容

鉴于人工发酵冬虫夏草方式生产冬虫夏草菌丝体后的发酵液丢弃处理，浪费资源、能源、人力、物力和财力，且存在对周围水体及土壤污染的问题，并为满足市场的需求，本发明的目的在于提供一种利用人工发酵冬虫夏草方式生产冬虫夏草菌丝体后的发酵液生产冬虫夏草胞外多糖口服液及其制备方法。

为达到上述目的，本发明提供一种利用人工发酵冬虫夏草方式生产冬虫夏草菌丝体后的发酵液生产冬虫夏草胞外多糖口服液，包括有：含量介于7.5％至15％重量百分比的发酵冬虫夏草胞外多糖、含量介于79％至91.2％重量百分比的纯化水、含量介于0.1％至5.0％重量百分比的甜味剂、含量介于0.1％至0.5％重量百分比的矫味剂以及含量介于0.1％至0.5％重量百分比的稳定剂。

所述的甜味剂选自甜菊苷或阿斯巴甜或木糖醇中的一种或多种混合物；所述的矫味剂选自柠檬酸或乳酸或苹果酸中的一种或多种混合物；所述的稳定剂选自羧甲基纤维素钠或黄原胶或瓜尔胶或刺槐豆胶或魔芋精粉或环状糊精或六偏磷酸钠或三聚磷酸钠中的一种或多种混合物。

优选的，用于发酵冬虫夏草胞外多糖口服液包括有：

含量为10％重量百分比的发酵冬虫夏草胞外多糖；

含量为84.4％重量百分比的纯化水；

含量为5％重量百分比的甜味剂，所述甜味剂是白砂糖；

含量为0.1％重量百分比的矫味剂，所述粘合剂是柠檬酸；以及

含量为0.3％重量百分比的稳定剂，所述稳定剂是将0.1％重量百分比的羧甲基纤维素钠和0.2％重量百分比的黄原胶的混合物。

本发明亦有关于发酵冬虫夏草胞外多糖的提取方法。

本发明的发酵冬虫夏草胞外多糖的提取方法，包括有：利用冬虫夏草菌株，液体发酵生产冬虫夏草菌丝体；发酵结束后，提取菌丝体并收集发酵液；发酵液用外加热式三效浓缩器浓缩，各效真空度和蒸发温度：一效-0.02～-0.04MPa，70～90℃；二效-0.04～-0.06MPa，60～80℃；三效-0.06～-0.08MPa，50～70℃，发酵液浓缩至相对密度1.20～1.35；将浓缩后的发酵液的pH调至6.5～8.5，常温静置1～4h，3000r/min～10000r/min离心5～20min去除沉淀；将75％～95％的食用乙醇以1L/min～10L/min的流速贴容器壁加入40r/min～500r/min的浓缩发酵液中，发酵液中乙醇浓度达到60％～75％时停止加入，停止搅拌，0～20℃静置8～12h后回收上清液并收集沉淀，沉淀即为冬虫夏草胞外粗多糖；对所得的粗多糖进行提纯，干燥，粉碎过筛，即得发酵冬虫夏草胞外多糖。

优选的，用于制备发酵冬虫夏草胞外多糖的方法包括有：

利用冬虫夏草菌株，液体发酵生产冬虫夏草菌丝体；

发酵结束后，提取菌丝体并收集发酵液；发酵液用外加热式三效浓缩器浓缩，各效真空度和蒸发温度：一效-0.025MPa，80℃；二效-0.05MPa，70℃；三效-0.07MPa，60℃，发酵液浓缩至相对密度1.28；

将浓缩后的发酵液的pH调至7.0，常温静置1.5h，5000r/min离心10min去除沉淀；

将95％的食用乙醇以6L/min的流速贴容器壁加入100r/min的去除沉淀后的浓缩发酵液中，发酵液中乙醇浓度达到60％时停止加入，停止搅拌，4℃静置8h后回收上清液并收集沉淀，沉淀即为冬虫夏草胞外粗多糖；

对所得的粗多糖进行常规提纯，干燥，粉碎过筛，即得发酵冬虫夏草胞外多糖。

本发明还有关于发酵冬虫夏草胞外多糖口服液的制备方法。

本发明的发酵冬虫夏草胞外多糖口服液的制备方法，包括有：将重量百分比7.5％～15.0％发酵冬虫夏草胞外多糖用纯化水完全溶解，依次加入重量百分比0.1％～5.0％甜味剂，重量百分比0.1％～0.5％矫味剂，重量百分比0.1％～0.5％稳定剂，溶解后的混合溶液定容后，经均质、脱气、灌装、灭菌后，即得发酵冬虫夏草胞外多糖口服液。

优选的，用于制备发酵冬虫夏草胞外多糖口服液的方法包括有：

将100g发酵冬虫夏草胞外多糖用纯化水完全溶解；

依次加入：50g白砂糖，10g柠檬酸，10g羧甲基纤维素钠，20g黄原胶；

溶解后的混合溶液加入纯化水至1000g；

经均质、脱气、灌装、灭菌后，即得100瓶10mL/瓶的发酵冬虫夏草胞外多糖口服液。

由本发明可以利用适合商业化生产的发酵冬虫夏草胞外多糖口服液，进而提供发酵冬虫夏草深加工产品满足市场需求，达到本发明的目的。

具体实施方式

以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。

(一)冬虫夏草胞外多糖口服液

实施例1

10.0kg发酵冬虫夏草胞外多糖口服液包括有：

0.75kg发酵冬虫夏草胞外多糖；

9.10kg的纯化水；

0.05kg白砂糖；

0.05kg柠檬酸；以及

含量为0.05kg的稳定剂，所述稳定剂是将0.015kg羧甲基纤维素钠和0.035kg黄原胶的混合物。

所述冬虫夏草产物具有8.26IU/g的超氧化物歧化酶的活性。

实施例2

10.0kg发酵冬虫夏草胞外多糖口服液包括有：

1.5kg发酵冬虫夏草胞外多糖；

8.46kg的纯化水；

0.02kg白砂糖；

0.01kg柠檬酸；以及

含量为0.01kg的稳定剂，所述稳定剂是将0.004kg羧甲基纤维素钠和0.006kg黄原胶的混合物。

所述冬虫夏草产物具有17.11IU/g的超氧化物歧化酶的活性。

(二)用于制备发酵冬虫夏草胞外多糖的方法

实施例3

利用冬虫夏草菌株，液体发酵生产冬虫夏草菌丝体；

发酵结束后，提取菌丝体并收集发酵液；发酵液用外加热式三效浓缩器浓缩，各效真空度和蒸发温度：一效-0.04MPa，70℃；二效-0.06MPa，60℃；三效-0.08MPa，50℃，发酵液浓缩至相对密度1.22；

将50L浓缩后的发酵液的pH调至6.5，常温静置1.5h，3000r/min离心20min去除沉淀；

将75％的食用乙醇以1L/min的流速贴容器壁加入40r/min的去除沉淀后的浓缩发酵液中，发酵液中乙醇浓度达到60％时停止加入，停止搅拌，0℃静置8h后回收上清液并收集沉淀，沉淀即为冬虫夏草胞外粗多糖，得粗多糖3.62kg；

对所得的粗多糖进行提纯，干燥，粉碎过筛，即得发酵冬虫夏草胞外多糖。

实施例4

利用冬虫夏草菌株，液体发酵生产冬虫夏草菌丝体；

发酵结束后，提取菌丝体并收集发酵液；发酵液用外加热式三效浓缩器浓缩，各效真空度和蒸发温度：一效-0.02MPa，90℃；二效-0.04MPa，80℃；三效-0.06MPa，80℃，发酵液浓缩至相对密度1.31；

将50L浓缩后的发酵液的pH调至8.5，常温静置4h，10000r/min离心5min去除沉淀；

将95％的食用乙醇以10L/min的流速贴容器壁加入500 r/min的去除沉淀后的浓缩发酵液中，发酵液中乙醇浓度达到75％时停止加入，停止搅拌，20℃静置12h后回收上清液并收集沉淀，沉淀即为冬虫夏草胞外粗多糖，得粗多糖4.28kg；

对所得的粗多糖进行提纯，干燥，粉碎过筛，即得发酵冬虫夏草胞外多糖。

(三)用于制备发酵冬虫夏草胞外多糖口服液的方法

实施例5

将75g发酵冬虫夏草胞外多糖用纯化水完全溶解；

依次加入50g白砂糖，50g柠檬酸，10g羧甲基纤维素钠，20g黄原胶；

溶解后的混合溶液加入纯化水至1000g；

经均质、脱气、灌装、灭菌后，即得100瓶10mL/瓶的发酵冬虫夏草胞外多糖口服液。

实施例6

将150g发酵冬虫夏草胞外多糖用纯化水完全溶解；

依次加入20g白砂糖，10g柠檬酸，4g羧甲基纤维素钠，6g黄原胶；

溶解后的混合溶液加入纯化水至1000g；

经均质、脱气、灌装、灭菌后，即得100瓶10mL/瓶的发酵冬虫夏草胞外多糖口服液。

由上述可知本发明的具体制造及实施方法，确实可以解决目前人工发酵冬虫夏草方式生产冬虫夏草菌丝体后的发酵液处理方法的弊端。由于发酵液中含有大量微生物，直接排放会对周围水体及土壤发生污染，需要经过高温高压灭菌处理才可以排放，不仅浪费了大量资源、能源、人力、物力和财力，而且对周围环境存在安全隐患。

Claims (6)

1.一种发酵冬虫夏草胞外多糖口服液，其特征在于其所采用的活性成分为发酵冬虫夏草胞外多糖，辅以其他药用辅料，其原料组分如下，各组重量百分比为：发酵冬虫夏草胞外多糖7.5％～15.0％、纯化水79％～91.2％，甜味剂0.1％～5.0％，矫味剂0.1％～0.5％，稳定剂0.1％～0.5％。

2.根据权利要求1所述的一种发酵冬虫夏草胞外多糖口服液，其特征在于：所述的甜味剂选自甜菊苷或阿斯巴甜或木糖醇中的一种或多种混合物。

3.根据权利要求1所述的一种发酵冬虫夏草胞外多糖口服液，其特征在于：所述的矫味剂选自柠檬酸或乳酸或苹果酸中的一种或多种混合物。

4.根据权利要求1所述的一种发酵冬虫夏草胞外多糖口服液，其特征在于：所述的稳定剂选自羧甲基纤维素钠或黄原胶或瓜尔胶或刺槐豆胶或魔芋精粉或环状糊精或六偏磷酸钠或三聚磷酸钠中的一种或多种混合物。

5.根据权利要求1～4所述的一种发酵冬虫夏草胞外多糖口服液，其特征在于：所述的发酵冬虫夏草胞外多糖通过以下步骤制得：

(1)利用冬虫夏草菌株，液体发酵生产菌丝体；

(2)发酵结束后，提取菌丝体并收集发酵液；

(3)发酵液5000r/min离心10min，收集上清液；

(4)上清液用外加热式三效浓缩罐浓缩，各效真空度和蒸发温度：一效-0.02～-0.04MPa，70～90℃；二效-0.04～-0.06MPa，60～80℃；三效-0.06～-0.08MPa，50～70℃，发酵液浓缩至相对密度1.20～1.35；

(4)将75％～95％的食用乙醇以1L/min～10L/min的流速贴壁加入40r/min～200r/min的浓缩发酵液中，发酵液中乙醇浓度达到60％～75％时停止加入，停止搅拌，0～20℃静置8～12h后收集沉淀得到粗多糖；

(5)对粗多糖进行常规提纯，干燥，粉碎后即得发酵冬虫夏草胞外多糖。

6.根据权利要求1所述的一种发酵冬虫夏草胞外多糖口服液，其特征在于：其制备方法如下：将重量百分比7.5％～15.0％发酵冬虫夏草胞外多糖用纯化水完全溶解，依次加入重量百分比0.1％～5.0％甜味剂，重量百分比0.1％～0.5％矫味剂，重量百分比0.1％～0.5％稳定剂，溶解后的混合溶液定容后，经均质、脱气、灌装、灭菌后，即得发酵冬虫夏草胞外多糖口服液。