CN103083366B - 血芝-香菇柄固态发酵复合物、其制备方法及其用途 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种血芝-香菇柄固态发酵复合物、其制备方法及其用途。血芝-香菇柄固态发酵复合物是以香菇柄为培养基对血芝进行发酵培养，获得培养基与培养物的复合物，其包含经分解的香菇柄及血芝混合物。血芝-香菇柄固态发酵复合物的基本制备方法包括：A-1、菌种的复壮筛选；A-2、扩繁培养；B-1、香菇柄的初选；B-2、香菇柄的清洗；B-3、香菇柄的干燥；B-4、香菇柄的粉碎；B-5、固态发酵培养基的配料；B-6、装料及灭菌；B-7、菌种接种；B-8、发酵培养；C、后处理。本发明所得复合物具有更好的抗衰老、抗氧化功效，是对香菇柄这种废弃物的高效深加工开发技术。

Description

血芝-香菇柄固态发酵复合物、其制备方法及其用途

技术领域

本发明涉及血芝珍稀真菌以及香菇菌柄废弃物资源化开发的综合利用技术领域。

背景技术

血芝(Amauroderma rude(berk))，即皱盖假芝，别名皱盖乌芝，灵芝科假芝属(Amauoderma Murr)真菌。幼嫩子实体白色，被损伤时由伤口处分泌血样液体，故又名血芝，自古以来，就作为玄芝入药，被认为具有延年益寿的功能。在申报人过往研究及专利（血芝的液体发酵方法及获得的产品，ZL200310109602.2）中，血芝已表现出确定的生物活性，血芝在自然界中生长于腐木，其分解固态纤维质的能力较强，在本实验室进行的主要农业废弃物分解对比中，血芝与侧耳类均属于长速最快的大型真菌类群。

香菇是我国栽培面积较大、生产栽培技术成熟、经济效益比较好的一种食用菌，也是我国目前栽培面积最大的四种主要食用菌之一。食用菌在人民日常生活及经济生活中均具有重要地位，香菇产业已成为扶贫开发片区中的主要支柱产业。在其加工商品化过程中，须剪去菇柄（占菇体重量近30%），仅此我国每年就会产生数十万吨的香菇柄，但菇柄纤维化程度高，难以食用，目前基本废弃，这部分资源是巨大。菇柄和子实体同样是由菌丝体分化形成，富含有效的生物活性成分，尤其香菇多糖，有研究发现，香菇多糖有抗氧化及提高免疫力的功效；还可促进胆固醇代谢而降低其在血清中的含量，还具有降血脂、增加冠状动脉血流量的作用，对高血压和心脑血管病具有良好的预防和治疗功能。因此是一种很好的菌类多糖的来源。香菇柄的资源化开发是业内热点问题。

目前，香菇柄的利用报道都集中在粉碎和超声波提取方法方面，没有利用药用真菌通过固态发酵技术生物利用香菇柄开发功能制剂的有关报道。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种血芝-香菇柄固态发酵复合物,具有抗衰老、抗氧化功效，可实现对香菇柄的高效利用；本发明同时提供血芝-香菇柄固态发酵复合物的制备方法及其用途。

为解决上述技术问题，本发明所采取的技术方案如下。

血芝-香菇柄固态发酵复合物，其以香菇柄为培养基对血芝进行发酵培养，获得培养基与培养物的复合物，其包含经分解的香菇柄及血芝混合物。

上述血芝-香菇柄固态发酵复合物的制备方法，其征步骤包括：

A、菌种的复壮筛选与扩繁培养：生产季节前，采用含有香菇柄的筛选培养基获取优良血芝菌种，并大量扩繁试管备用；

B、发酵培养：取无霉变香菇菌柄烘干、粉碎，按重量比取香菇柄83%,无霉变麸皮15%，蔗糖2%，按料水比1:1.2拌匀，2/3量装入玻璃瓶或聚丙烯塑料袋，白市布扎紧，灭菌；无菌条件下接入步骤A所得菌种，固态发酵，静置培养，温度控制在26-30℃，血芝菌丝发满瓶/袋后，变温至25℃散射光条件下培养7天，观察瓶/袋表面出现血样分泌物后，即得血芝-香菇柄固态发酵复合物；

C、后处理：血芝-香菇柄固态发酵复合物经粉碎后，35-40℃烘干3小时，45-50℃烘干3小时，55-60℃烘干1小时，再粉碎并过20-40mm筛，装袋备用，避光保存。

作为上述制备方法的一种优选技术方案，步骤A的的具体操作方法为：

A-1、菌种的复壮筛选：生产季节前，首先进行血芝生产菌株的复壮筛选，筛选培养基配方采用：按重量比计，香菇柄细粉2%、葡萄糖2%、玉米粉1%、豆饼粉1%、KH₂PO₄0.1%、MgSO₄.7H₂O0.1%，水余量，pH自然；筛选培养工艺采用：将菌种标记接种至培养器皿，28℃避光下液体培养5天后，再降温至25℃散射光条件下静置培养3-7天，挑选首先在气生菌丝表面分泌形成血样分泌物的对应菌株，作为出发菌株，大量扩繁试管备用；

A-2、扩繁培养：扩繁用培养基按重量比计组成为：土豆120份，麦麸50份，香菇柄30份，上述三物料经煮沸后过滤，取滤液，加入葡萄糖20份、琼脂20份，最后加蒸馏水定容至1000份，即得。

作为上述制备方法的一种优选技术方案，步骤B的的具体操作方法为：

B-1、香菇柄的初选：挑选无霉变香菇柄，去除香菇柄中的杂物；

B-2、香菇柄的清洗：将香菇柄用流动水清洗干净；

B-3、香菇柄的干燥：60℃干燥5小时；

B-4、香菇柄的粉碎：用粉碎机粉碎并过筛，筛孔尺寸20-40mm；

B-5、固态发酵培养基的配料：按重量比计香菇菌柄83%,无霉变麸皮15%，2%蔗糖，料水比1:1.2，拌匀，批式操作每次拌料200公斤，堆闷30分钟；

B-6、装料及灭菌：2/3量装入玻璃瓶或聚丙烯塑料袋，瓶/袋口用白市布外覆牛皮纸扎紧，0.1MPa灭菌2小时；

B-7、菌种接种：上步所得固态发酵培养基在无菌室中冷却至30℃，无菌操作接种步骤A所得菌种；每支试管接4瓶/袋；

B-8、发酵培养：静置培养，固态发酵温度控制在26-30℃，血芝菌丝发满瓶/袋后，变温至25℃散射光条件下培养7天，观察瓶/袋表面出现血样分泌物后，即得血芝-香菇柄固态发酵复合物。

作为上述制备方法的一种优选技术方案，步骤C的的具体操作方法为：

C-1、血芝-香菇柄固态发酵复合物及时粉碎，装盘后放在烤架上，送入烘干室进行烘烤，摆放8～10层，每层间距15-25cm厘米，烘干室温度升到35-40℃时，入室烘干3小时；烘干时先低温，然后逐渐升高温度；45-50℃烘干3小时，55-60℃烘干1小时；

C-2、烘干后立即粉碎并过20-40mm筛，马上装入不透气的包装袋，以防吸潮引起发霉变质，包装后的产品放在干燥环境中贮存。

上述血芝-香菇柄固态发酵复合物的一种用途：

A、取血芝-香菇柄固态发酵复合物，按重量比配加大枣、茯苓、黄芪、酸枣仁、罗汉果，比例100:1:1:1:0.1:0.1，再按照料液比1:5加入蒸馏水或软化水，得混合液；

B、浸提提取：步骤A所得混合液在45-55℃、0.06兆帕条件下浸提20分钟，过滤得第一次浸提液；滤渣加首次提取水量，同条件下浸提20分钟，过滤得第二次浸提液，滤渣弃去，合并两次浸提液，得终提液；

C、灌装与保存：无菌灌装，低温避光保存。

上述血芝-香菇柄固态发酵复合物的另一种用途：

A、取血芝-香菇柄固态发酵复合物，按重量比配加大枣、茯苓、黄芪、酸枣仁、罗汉果，比例100:1:1:1:0.1:0.1，再按照料液比1:5加入蒸馏水或软化水，得混合液；

B、超声提取：步骤A所得混合液在45-55℃、超声波功率300W条件下，提取8min/批次，共两次，过滤得第一次提取液，滤渣加首次提取水量，同条件下提取，过滤得第二次提取液，滤渣弃去，合并两次提取液，得终提液；

C、灌装与保存：无菌灌装，低温避光保存。

采用上述技术方案所产生的有益效果在于：

本发明采用血芝-香菇柄固态发酵技术，利用药用真菌血芝的纤维素分解能力，不仅有助于香菇柄香菇多糖等功能因子的释放，还配合其自身血芝合成次生代谢产物、包括其多糖的生物合成能力，丰富发酵产物体系的功效物质构成；血芝固态发酵法属于生物技术分解利用，分解与合成相辅，产物比单一香菇柄水提更为丰富，所得复合物具有更好的抗衰老、抗氧化功效，是对香菇柄这种废弃物的生物技术深加工开发。以下试验数据显示了本发明的有益效果。

试验1、本发明对血芝菌种进行了复壮筛选，采用能够形成血样分泌物的对应菌株，在本发明的培养条件下，经复壮筛选出的菌丝的营养生长速度快于不形成血样分泌物之菌株，可缩短其固体发酵培养周期；并且，形成血样分泌物的对应菌株发酵产物比未形成血样分泌物之菌株丰富。

250mL三角瓶、装液量100mL、28℃避光下液体培养5天后，再降温至25℃散射光条件下静置培养，挑选首先在气生菌丝表面分泌形成血样分泌物的对应菌株，作为出发菌株，以未出现血样分泌物的菌株为对照。试验结果见表1、2。

表1不同血芝菌株母种培养阶段生长对比

注：“+”的多少表示生长势强弱、密度大小；表中数据为3次试验之均值。

表2不同血芝菌株固态发酵培养生长情况对比

注：“+”的多少表示血样分泌物大小、多少；培养物多糖为简单水提法；表中数据为3次试验之均值。

对血样分泌物进行成分初查，以定性反应及薄层显色分析等分析方法进行分析。初步测定其中除含有多糖外,还含有生物碱类、甾类化合物、香豆素类、鞣质类及黄酮类物质。因此，血样分泌物的形成与多少，可以作为优良固态发酵菌株筛选的依据，并也可以说明血芝-香菇柄固态发酵物的功能基础。

试验2、本发明制得的血芝-香菇柄固态发酵复合物提取液具有更强的抗衰老作用。

2-1、果蝇寿命试验

为检验不同受试物的抗衰老功能，将本实验分五组进行。对比不同受试物的果蝇培养效果，观察各组果蝇寿命的长短，以找到抗衰老功能最强的受试物，再进行小鼠实验。

表3果蝇寿命实验各受试物浓度及添加量

各受试物中，“血芝普通培养物”是以阔叶树木屑替代香菇柄；“超声波法制备的香菇柄提取液”，参见文献：王谦等，食用菌，2007，29（5），其余各受试物的提取方法均与本发明权利要求6记载的提取方法相同。香菇柄取相同产地加工废弃之香菇柄。采用苯酚-硫酸法测定多糖含量。

以多糖为指标性功效因子，不同受试物在基础培养基中的添加量均为10mL/100g。果蝇基础培养基为：将10g玉米粉倒入烧杯中，加入36mL自来水，加热调成糊状；将1.5g琼脂置于烧杯中，加40mL自来水，煮沸使之充分溶解，再加入白砂糖13.5g、苯甲酸0.15g(用3mL95%酒精溶解)煮沸溶解；将上述两者混合，煮沸，称重，补加沸水使总重量至99g，待降到合适温度时立即加入干酵母粉1g，充分调匀即可。

将雄性果蝇放入含有不同受试物的果蝇培养基中饲养。每种受试物做4组，每组25支，置于温箱培养（25±0.5℃，湿度60-65％）。每天早晚各观察一次，记录死亡的果蝇数，进而计算果蝇的寿命。注意观察培养的形状，培养基及时更换，直至最后一只果蝇死亡为止。

表4不同受试物对果蝇寿命的影响

经过观察可知：五种受试物均可使果蝇的平均寿命延长。其中香菇柄提取液、固态发酵前培养基提取液和血芝普通培养物提取液分别将果蝇的平均寿命延长了4.44％，7.20％和13.13％，延长效果达到了显著水平(P＜0.05)；超声波法制备的香菇柄提取液和本发明发酵法制备的培养物提取液分别延长了25.29％和39.25％，延长效果达到了极显著水平(P＜0.01)。

对比可知，超声波法香菇柄提取液对寿命的延长效果极显著好于普通水提法香菇柄提取液，表现出更好的抗衰老功能，说明超声波法由于其对有效物质的提取效率更高；但超声波法香菇柄提取液与血芝-香菇柄固态发酵法组对比可知，即便是未使用超声波设备，血芝-香菇柄固态发酵法制剂组对平均寿命的延长效果仍显著好于前者，说明血芝在发酵过程中既分解了香菇柄的纤维类等束缚物质，有助于香菇功效物质的释放，又通过自身合成作用形成血芝多糖等次生代谢成分，及目前未知的血芝-香菇新合成产物，从而产生了更好的抗衰老功能效果。

同时表明，如果设备条件、能耗因素等允许的情况下，本发明固态发酵后培养物也可以增加超声波处理工艺制备提取液的工艺。

2-2、小鼠体内抗氧化作用实验

小鼠体内抗氧化作用实验的原理是：小鼠肝中毒是人们研究药物抗氧化作用常用的体内实验方法，以四氯化碳或其他毒物导致小鼠肝中毒，引起肝脂质过氧化可以形成丙二醛、乙烷、共轭二烯、荧光产物及能产生化学发光的物质，通过测定丙二醛(MDA)等脂质过氧化各项指标的变化，评价药物的抗氧化作用。

试验采用清洁级雌性昆明种小鼠，体重18-22g，六周龄，由河北医科大学实验动物部提供。小鼠随机分成5组，每组10只。1个空白对照组，1个模型对照组和3个受试样品剂量组，3个剂量组（2.5、5、10g（多糖制剂）/kg，用蒸馏水按所需剂量用多糖制剂配成混悬液）给予不同浓度受试样品，对照组给予生理盐水，灌胃量按2mL/100g体重计算，每日一次，连续30天。最后一次给药后禁食8h，其中3个受试样品剂量组腹腔注射CCL4与中性茶油混合物60μι/20g(1:1，v:v)。模型对照组腹腔注射CCL4混合物60μι／20g造成染毒模型，空白对照组腹腔注射中性茶油60μι／20g作空白对照。2h后，所有3个受试样品剂量组与2个对照组同时处死，取肝组织测丙二醛的含量。

血芝-香菇柄固态发酵法制剂对小鼠肝MDA影响的数据及多重比较的结果见表5和表6。

表5制剂对小鼠肝MDA的影响

表6制剂对小鼠肝MDA影响的多重比较

注：*P<0.05差异显著；**P<0.01差异极显著。

由表5和表6可见，模型对照组与空白对照组相比，小鼠肝MDA水平明显提高，差异极显著（P＜0.01），说明造模成功。三个剂量组与模型对照组比较，均能使小鼠肝MDA水平降低，但经多重比较，2.5g/kg剂量组与模型对照组比较无显著性差异（P＞0.05），5g/kg剂量组显著低于模型对照组（P＜0.05），10g/kg剂量组与模型对照组比较差异极显著（P＜0.01）。三个剂量组之间比较，10g/kg剂量组MDA水平极显著低于5g/kg剂量组和2.5g/kg剂量组（P＜0.01）。表明，具有抗脂质过氧化的作用，且表现为随剂量的增加而增强。表明血芝-香菇柄固态发酵法制剂具有抗氧化作用，并表现出量效关系。

附图说明

图1显示血芝气生菌丝表面特有的血样分泌物。

具体实施方式

以下实施例详细说明了本发明。本发明所使用的各种原料及各项设备均为常规市售产品，均能够通过市场购买直接获得。本发明所用菌种为：血芝，即皱盖假芝（Amauroderma rude(Berk)Pat），可以从中国科学院微生物研究所菌种保藏中心购买；其保存条件为：4℃冰箱保藏，6个月转管1次，使用前室温下活化过夜。

实施例1

血芝-香菇柄固态发酵法抗衰老制剂，按照如下步骤制备：

A-1、生产季节前，优良固态发酵血芝生产菌株复壮筛选工艺：种库中取保藏菌株10株，以香菇柄细粉2%，葡萄糖2%、玉米粉1%、豆饼粉1%、KH₂PO₄0.1%、MgSO₄.7H₂O0.1%为主要成分的液体发酵培养基，pH自然，常规方法分别标记接种于250mL三角瓶、装液量100mL、28℃避光下液体培养5天后，再降温至25℃散射光条件下静置培养3-7天，挑选首先在气生菌丝表面分泌形成血样分泌物的对应菌株（参看附图1），作为出发菌株，大量扩繁试管备用。另取50支如此制备之试管作为保藏菌株入库保藏。

A-2、菌株扩繁采用血芝-香菇柄固态发酵专用母种综合培养基：按重量计培养基的组成为：葡萄糖20g，琼脂20g，土豆120g，麦麸50g，香菇柄30g(土豆、麦麸、香菇柄经煮沸20min后过滤，取滤液)，加蒸馏水定容至1000mL。分装试管后，常规0.1MPa灭菌30分钟。冷却后接种，28℃培养菌丝满管后，备用。

B-1、香菇柄的初选：挑选无霉变香菇柄，去除香菇柄中的杂物；

B-2、香菇柄的清洗：将香菇柄用流动水清洗干净；

B-3、香菇柄的干燥：60℃干燥5小时；

B-4、香菇柄的粉碎：用粉碎机粉碎并过筛，筛孔尺寸20-40mm；

B-5、固态发酵培养基的配料：香菇菌柄83%,无霉变麸皮15%，2%蔗糖，料水比1:1.2，拌匀，批式操作每次拌料200公斤，堆闷30分钟；

B-6、装料及灭菌：2/3量装入500克或750克容积玻璃瓶（广口细口均可）或普通规格菌类栽培用各型号聚丙烯塑料袋，瓶/袋口白市布外覆牛皮纸扎紧，0.1MPa灭菌2小时；

B-7、菌种接种：上步所得固态发酵培养基在无菌室中冷却至30℃，无菌操作接种步骤A所得菌种；每支试管接4瓶/袋；

B-8、发酵培养：静置培养，固态发酵温度控制在（26-30）℃，血芝菌丝发满瓶/袋后再培养7天，得血芝-香菇柄固态发酵复合物；

C-1、血芝-香菇柄固态发酵复合物及时粉碎，装盘后放在烤架上，送入烘干室进行烘烤。一般摆放8～10层。每层的间距应为20厘米。烘干室温度升到35℃时，入室烘干。烘干时必须先低温，然后逐渐升高温度。1h增温5℃，35℃～40℃下烘烤3小时；

C-2、45-50℃烘干3小时，55-60℃烘干1小时，烘干后，粉碎马上装入塑料袋，以防吸潮引起发霉变质。禁用尼龙丝编织袋或麻袋等易透气的袋子包装。包装后的产品应放在干燥的房间里贮存。

D-1、在血芝-香菇柄固态发酵复合物提取前，按其重量配加大枣、茯苓、黄芪、酸枣仁、罗汉果，比例100:1:1:1:0.1:0.1(w/w)，再按照料液比1:5加入蒸馏水或软化水；

D-2、提取参数：料液比1:5，45-55℃，压力0.06兆帕条件下浸提20分钟，过滤得第一次浸提液；滤渣加首次提取水量，同上条件下浸提20分钟，过滤得第二次浸提液，滤渣弃去；合并：将两次浸提液混合，得提取液；

E、灌装与保存：按照食品或药品口服液无菌灌装工艺要求灌装，易拉罐或棕色口服液瓶，低温避光保存。

F、相关检验：

1、感官指标

暗红色、无杂质，具有香菇、大枣的特殊菌果香味，口味醇正。放置60天不出现分层，允许少量沉淀。

2、理化指标

多糖含量应≥4%，可溶性固形物含量≥5%。

3、微生物指标

细菌总数≤100cfu/mL，大肠菌群≤3cfu/100mL，致病菌不得检出。

实施例2

步骤A、B、C各工艺步骤同实施例1；

D-1、在血芝-香菇柄固态发酵复合物提取前，按其重量配加大枣、茯苓、黄芪、酸枣仁、罗汉果，比例100:1:1:1:0.1:0.1(w/w)，料水比为1：5，加入蒸馏水或软化水；

D-2、提取参数：料液比1:5，45-55℃，超声波功率为300W，提取时间为8min/批次，共两次。过滤得第一次浸提液；滤渣加首次提取水量，同上条件下浸提，过滤得第二次浸提液，滤渣弃去；合并：将两次浸提液混合，得提取液；

E、灌装与保存：按照食品或药品口服液无菌灌装工艺要求灌装，易拉罐或棕色口服液瓶，低温避光保存。

F、相关检验：

1、感官指标

暗红色、无杂质，具有香菇、大枣的特殊菌果香味，口味醇正。放置60天不出现分层，允许少量沉淀。

2、理化指标

多糖含量应≥4%，可溶性固形物含量≥5%。

3、微生物指标

细菌总数≤100cfu/mL，大肠菌群≤3cfu/100mL，致病菌不得检出。

上述描述仅作为本发明可实施的技术方案提出，不作为对其技术方案本身的单一限制条件。另外，采用其他适宜种类的灵芝替代血芝，对于本发明提供的技术方案来讲是同样适用的，因此同样落在本发明的保护范围之内。

Claims (4)

1.血芝-香菇柄固态发酵复合物的制备方法，其特征在于：其步骤包括：

A、菌种的复壮筛选与扩繁培养：生产季节前，采用含有香菇柄的筛选培养基获取优良血芝菌种，并大量扩繁试管备用；

B、发酵培养：取无霉变香菇柄烘干、粉碎，按重量比取香菇柄83%,无霉变麸皮15%，蔗糖2%，按料水比1:1.2拌匀，2/3量装入玻璃瓶或聚丙烯塑料袋，白市布扎紧，灭菌；无菌条件下接入步骤A所得菌种，固态发酵，静置培养，温度控制在26-30℃，血芝菌丝发满瓶/袋后，变温至25℃散射光条件下培养7天，观察瓶/袋表面出现血样分泌物后，即得血芝-香菇柄固态发酵复合物；

C、后处理：血芝-香菇柄固态发酵复合物经粉碎后，35-40℃烘干3小时，45-50℃烘干3小时，55-60℃烘干1小时，再粉碎并过20-40mm筛，装袋备用，避光保存。

2.根据权利要求1所述的血芝-香菇柄固态发酵复合物的制备方法，其特征在于：步骤A的具体操作方法为：

A-1、菌种的复壮筛选：生产季节前，首先进行血芝生产菌株的复壮筛选，筛选培养基配方采用：按重量比计，香菇柄细粉2%、葡萄糖2%、玉米粉1%、豆饼粉1%、KH₂PO₄ 0.1%、MgSO₄·7H₂O 0.1%，水余量，pH自然；筛选培养工艺采用：将菌种标记接种至培养器皿，28℃避光下液体培养5天后，再降温至25℃散射光条件下静置培养3-7天，挑选首先在气生菌丝表面分泌形成血样分泌物的对应菌株，作为出发菌株，大量扩繁试管备用；

A-2、扩繁培养：扩繁用培养基按重量比计组成为：土豆120份，麦麸50份，香菇柄30份，上述三物料经煮沸后过滤，取滤液，加入葡萄糖20份、琼脂20份，最后加蒸馏水定容至1000份，即得。

3.根据权利要求1所述的血芝-香菇柄固态发酵复合物的制备方法，其特征在于：步骤B的具体操作方法为：

B-1、香菇柄的初选：挑选无霉变香菇柄，去除香菇柄中的杂物；

B-2、香菇柄的清洗：将香菇柄用流动水清洗干净；

B-3、香菇柄的干燥：60℃干燥5小时；

B-4、香菇柄的粉碎：用粉碎机粉碎并过筛，筛孔尺寸20-40mm；

B-5、固态发酵培养基的配料：按重量比计香菇柄83%,无霉变麸皮15%，2%蔗糖，料水比1:1.2，拌匀，批式操作每次拌料200公斤，堆闷30分钟；

B-6、装料及灭菌：2/3量装入玻璃瓶或聚丙烯塑料袋，瓶/袋口用白市布外覆牛皮纸扎紧，0.1MPa灭菌2小时；

B-7、菌种接种：上步所得固态发酵培养基在无菌室中冷却至30℃，无菌操作接种步骤A所得菌种；每支试管接4瓶/袋；

B-8、发酵培养：静置培养，固态发酵温度控制在26-30℃，血芝菌丝发满瓶/袋后，变温至25℃散射光条件下培养7天，观察瓶/袋表面出现血样分泌物后，即得血芝-香菇柄固态发酵复合物。

4.根据权利要求1所述的血芝-香菇柄固态发酵复合物的制备方法，其特征在于：步骤C的具体操作方法为：

C-1、血芝-香菇柄固态发酵复合物及时粉碎，装盘后放在烤架上，送入烘干室进行烘烤，摆放8～10层，每层间距15-25cm厘米，烘干室温度升到35-40℃时，入室烘干3小时；烘干时先低温，然后逐渐升高温度；45-50℃烘干3小时，55-60℃烘干1小时；

C-2、烘干后立即粉碎并过20-40mm筛，马上装入不透气的包装袋，以防吸潮引起发霉变质，包装后的产品放在干燥环境中贮存。

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