CN105875653A - 一种球孢白僵菌微生物农药及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种球孢白僵菌微生物农药及其制备方法,该球孢白僵菌微生物农药包括石墨烯、海藻酸钠、蛋白粉、明胶、水、球孢白僵菌的孢子和植物油;其中,所述石墨烯、海藻酸钠、蛋白粉、明胶、球孢白僵菌的孢子和植物油的重量比为1:(10‑100):(10‑20):(10‑20):(60‑1000):(50‑140),所述球孢白僵菌微生物农药的含水量为7‑30重%。本发明方法制备的农药不仅储存时间长,而且效果好。

Description

一种球孢白僵菌微生物农药及其制备方法
技术领域
本发明涉及农药领域,具体涉及一种球孢白僵菌微生物农药及其制备方法。
背景技术
微生物农药(microbial pesticide)包括农用抗生素和活体微生物农药。为利用微生物或其代谢产物来防治危害农作物的病、虫、草、鼠害及促进作物生长。它包括以菌治虫、以菌治菌、以菌除草等。这类农药具有选择性强,对人、畜、农作物和自然环境安全,不伤害天敌,不易产生抗性等特点。这些微生物农药包括细菌、真菌、病毒或其代谢物,例如苏云金杆菌、白僵菌、核多角体病毒、井冈霉素、C型肉毒梭菌外毒素等。随着人们对环境保护越来越高的要求,微生物农药无疑是今后农药的发展方向之一。
中国专利CN105010438A公开了本发明涉及一种微生物农药,由如下重量份的原料组成:杀蚜素粉末10-20份,黄芩素1-5份,大蒜油0.5-2份,苦参碱2-6份,淀粉1-5份,圆葱4-30份,大肠杆菌粉末1-15份,轮枝孢粉末2-6份。该发明提供一种微生物农药,以微生物粉末和植物原料为主料,原料易得,价格低廉,所用原料配比简单,绿色环保,成本低廉。
中国专利CN102381912A公开了一种用于植物保护生长调节的微生物农药制剂,包括武夷菌孢子粉0.5-5%,氯化胆碱5-25%、轻稀土10-30%、蛋氨酸5-20%、硫酸锌1-8%、硫酸铜0.3-3%、硼酸1-5%、维生素B0.05-0.5%、维生素C0.05-0.5%、填充料高岭土余量;该发明的优点在于:以武夷生防菌孢子为主体,同时配合无植物毒性的水杨酸等有机酸、以及其他有利于植物抗逆促长的成分例如氯化胆碱、甜菜碱、轻稀土、氨基酸等,具有明显的防病、抗病、抗逆、提高农作物产量、改善农作物产品品质,且增产效果明显。
现有微生物农药储存时间短,其中的微生物容易死亡。
发明内容
为了解决现有技术存在的上述问题,本发明提供了一种球孢白僵菌微生物农药及其制备方法,本发明方法制备的农药不仅储存时间长,而且效果好。
本发明所采用的技术方案为:
本发明提供一种球孢白僵菌微生物农药,其特征在于,该球孢白僵菌微生物农药包括石墨烯、海藻酸钠、蛋白粉、明胶、水、球孢白僵菌的孢子和植物油;其中,所述石墨烯、海藻酸钠、蛋白粉、明胶、球孢白僵菌的孢子和植物油的重量比为1:(10-100):(10-20):(10-20):(60-1000):(50-140),所述球孢白僵菌微生物农药的含水量为7-30重%。
优选地,所述石墨烯、海藻酸钠、蛋白粉和明胶的重量比为1:(20-50):(13-18):(15-17):(60-1000):(50-140),所述球孢白僵菌微生物农药的含水量为8-13重%。
优选地,所述球孢白僵菌的孢子的含孢量为1011-1012个/克,含水量为4-6重%;所述植物油为菜籽油、亚麻籽油或蓖麻油。
本发明还提供一种球孢白僵菌微生物农药的制备方法,其特征在于,该方法包括:a、按照质量比1:(10-100):(10-20):(10-20):(50-200)将石墨烯、海藻酸钠、蛋白粉、明胶和水在15-35℃下混合并搅拌均匀,得到第一混合物;b、将步骤a中所得第一混合物在无菌条件下静置处理1-10天后加入球孢白僵菌的孢子,得到第二混合物,其中,所述石墨烯与所述球孢白僵菌的孢子的质量比为1:(60-1000);c、将步骤b中所得第二混合物进行真空干燥至含水量为7-30重%,得到第三混合物;d、将步骤c中所得第三混合物进行粉碎后过10-150目筛,得到第一粉末;e、将步骤d中所得第一粉末喷洒植物油后,得到球孢白僵菌微生物农药。
优选地,所述石墨烯、海藻酸钠、蛋白粉、明胶和水的混合质量比为1:(20-50):(13-18):(15-17):(70-150),步骤a中所述混合的温度为20至30℃。
优选地,步骤b中所述静置处理在无菌室中进行,静置处理的时间为2-5天,步骤b中所述球孢白僵菌的孢子的含孢量为1011-1012个/克,含水量为4-6重%。
优选地,步骤c中所述真空干燥的条件为:温度为10-25℃,压力为-80千帕~-30千帕,第三混合物的含水量为8-13重%。
优选地,步骤d中所述筛的目数为30-100目。
优选地,步骤e中所述植物油为菜籽油、亚麻籽油或蓖麻油。
优选地,步骤e中所述植物油与石墨烯的重量比为1:(50-140)。
本发明的有益效果为:
其一,本发明采用石墨烯作为孢子的保护剂,可以延长孢子的储存时间,并提高活孢率;
其二,本发明的微生物农药中加入了蛋白粉和明胶,使球孢白僵菌存活时间更长;
其三,本发明制备方法简单,容易进行,易于工业化和大规模生产。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚,下面将对本发明的技术方案进行详细的描述。显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所得到的所有其它实施方式,都属于本发明所保护的范围。
本发明提供一种球孢白僵菌微生物农药,其特征在于,该球孢白僵菌微生物农药包括石墨烯、海藻酸钠、蛋白粉、明胶、水、球孢白僵菌的孢子和植物油;其中,所述石墨烯、海藻酸钠、蛋白粉、明胶、球孢白僵菌的孢子和植物油的重量比为1:(10-100):(10-20):(10-20):(60-1000):(50-140),所述球孢白僵菌微生物农药的含水量为7-30重%。
球孢白僵菌Beauveria bassiana属于子囊菌门、肉座菌目、虫草菌科、白僵菌属,是广谱性昆虫病原真菌,主要进行无性繁殖,产生分生孢子;可进行有性生殖并产生子实体,被鉴定为球孢虫草。球孢白僵菌在世界范围被用于害虫生物防治,其中我国使用球孢白僵菌防治马尾松毛虫和玉米螟是国际上最大的害虫防治项目,取得良好的害虫持续控制效果。
根据本发明,蛋白粉一般是采用提纯的大豆蛋白、或酪蛋白、或乳清蛋白(缺乏异亮氨酸)、或上述几种蛋白的组合体,构成的粉剂,所述石墨烯、海藻酸钠、蛋白粉和明胶的重量比可以为1:(20-50):(13-18):(15-17):(60-1000):(50-140),所述球孢白僵菌微生物农药的含水量可以为8-13重%。
根据本发明,所述球孢白僵菌的孢子的含孢量可以为1011-1012个/克,含水量可以为4-6重%;所述植物油可以为菜籽油、亚麻籽油或蓖麻油。
本发明提供一种球孢白僵菌微生物农药的制备方法,该方法包括:a、按照质量比1:(10-100):(10-20):(10-20):(50-200)将石墨烯、海藻酸钠、蛋白粉、明胶和水在15-35℃下混合并搅拌均匀,得到第一混合物;b、将步骤a中所得第一混合物在无菌条件下静置处理1-10天后加入球孢白僵菌的孢子,得到第二混合物,其中,所述石墨烯与所述球孢白僵菌的孢子的质量比为1:(60-1000);c、将步骤b中所得第二混合物进行真空干燥至含水量为7-30重%,得到第三混合物;d、将步骤c中所得第三混合物进行粉碎后过10-150目筛,得到第一粉末;e、将步骤d中所得第一粉末喷洒植物油后,得到球孢白僵菌微生物农药。
根据本发明,所述石墨烯、海藻酸钠、蛋白粉、明胶和水的混合质量比可以为1:(20-50):(13-18):(15-17):(70-150),步骤a中所述混合的温度可以为20至30℃。
根据本发明,步骤b中所述静置处理可以在无菌室中进行,静置处理的时间可以为2-5天,步骤b中所述球孢白僵菌的孢子的含孢量可以为1011-1012个/克,含水量可以为4-6重%。
根据本发明,步骤c中所述真空干燥的条件可以为:温度为10-25℃,压力为-80千帕~-30千帕,第三混合物的含水量为8-13重%。
根据本发明,步骤d中所述筛的目数可以为30-100目。
根据本发明,植物油是由不饱和脂肪酸和甘油化合而成的化合物,广泛分布于自然界中,是从植物的果实、种子、胚芽中得到的油脂。如花生油、豆油、亚麻油、蓖麻油、菜子油等。植物油的主要成分是直链高级脂肪酸和甘油生成的酯,脂肪酸除软脂酸、硬脂酸和油酸外,还含有多种不饱和酸,如芥酸、桐油酸、蓖麻油酸等。植物油主要含有维生素E、K、钙、铁、磷、钾等矿物质、脂肪酸等。步骤e中所述植物油可以为菜籽油、亚麻籽油或蓖麻油。
根据本发明,步骤e中所述植物油与石墨烯的重量比可以为1:(50-140)。
下面将通过实施例来进一步说明本发明,但是本发明并不因此而受到任何限制。
如无特别说明,本发明所用仪器和试剂均为商购,不同品牌的商品不影响具体使用。
本发明实施例所用球孢白僵菌的孢子的培养方法为:采用萨氏培养液(4%葡萄糖加1%蛋白陈)为种子培养基,大米为其产孢培养基。少量刮取萨氏培养基(SDAY)产孢完全的分生孢子粉接入种子培养液,摇床中振荡(120r/min)培养(25±1℃)3天。以10%接种量接菌于大米培养基并添加营养液,其中KNO3:0.20,0、KH2PO4:0.05%、MgS04:0.01%,共20盘(1509米/盘)。培养基均匀分散于托盘(24cm×18cm)中,覆上保鲜膜,置于25±1℃下培养。待大米培养基上球孢白僵菌产孢完全,揭去皿盖,覆吸水纸于培养皿上,于34(±)l℃烘24h后取出,经标准振筛机过筛收获孢子粉。孢子粉含孢量为4.5×1011个/克。
实施例1
a、按照质量比1:10:10:10:50将石墨烯、海藻酸钠、蛋白粉、明胶和水在35℃下混合并搅拌均匀,得到第一混合物;b、将步骤a中所得第一混合物在无菌条件下静置处理5天后加入球孢白僵菌的孢子,得到第二混合物,其中,所述石墨烯与所述球孢白僵菌的孢子的质量比为1:500;c、将步骤b中所得第二混合物进行真空干燥至含水量为10重%,得到第三混合物;d、将步骤c中所得第三混合物进行粉碎后过120目筛,得到第一粉末;e、将步骤d中所得第一粉末喷洒蓖麻油后,得到球孢白僵菌微生物农药1。
将蜡封的孢子粉Buffer管分别贮存于4℃恒温下,每隔12个月取一小瓶,分别测定农药的活孢率。连续观察48个月。
实施例2
a、按照质量比1:50:15:15:100将石墨烯、海藻酸钠、蛋白粉、明胶和水在15℃下混合并搅拌均匀,得到第一混合物;b、将步骤a中所得第一混合物在无菌条件下静置处理1天后加入球孢白僵菌的孢子,得到第二混合物,其中,所述石墨烯与所述球孢白僵菌的孢子的质量比为1:80;c、将步骤b中所得第二混合物进行真空干燥至含水量为30重%,得到第三混合物;d、将步骤c中所得第三混合物进行粉碎后过100目筛,得到第一粉末;e、将步骤d中所得第一粉末喷洒蓖麻油后,得到球孢白僵菌微生物农药2。
将蜡封的孢子粉Buffer管分别贮存于4℃恒温下,每隔12个月取一小瓶,分别测定农药的活孢率。连续观察48个月。
实施例3
a、按照质量比1:100:20:20:500将石墨烯、海藻酸钠、蛋白粉、明胶和水在20℃下混合并搅拌均匀,得到第一混合物;b、将步骤a中所得第一混合物在无菌条件下静置处理10天后加入球孢白僵菌的孢子,得到第二混合物,其中,所述石墨烯与所述球孢白僵菌的孢子的质量比为1:1000;c、将步骤b中所得第二混合物进行真空干燥至含水量为7重%,得到第三混合物;d、将步骤c中所得第三混合物进行粉碎后过10目筛,得到第一粉末;e、将步骤d中所得第一粉末喷洒菜籽油后,得到球孢白僵菌微生物农药3。
将蜡封的孢子粉Buffer管分别贮存于4℃恒温下,每隔12个月取一小瓶,分别测定农药的活孢率。连续观察48个月。
应用实施例1-3用于说明本发明方法制备的微生物农药的储存效果。
将实施例1-3制备的待测农药用0.5%OP配成浓度为107个孢子m/L的悬液,吸取1mL加入到盛有9mL萌发营养液(蛋白陈0.5%、蔗糖2%、另加0.5%OP)的三角瓶中,25±1℃振荡(120mr/in)培养24h后,用血球计数器计数液样中发芽和未发芽的孢子数,重复取样测定3次,计算平均萌发率,即为孢子粉的活孢率。孢子萌发的标准为可见芽管长度等于或者大于孢子直径。
表1
项目 0月,% 12月,% 24月,% 36月,% 48月,%
实施例1活孢率 100 99.7 98.3 97.5 96.1
实施例2活孢率 100 98.6 97.2 95.3 94.5
实施例3活孢率 100 99.5 98.1 97.3 96.9
从表1的数据中可以看出,本发明的微生物农药储存时间长。

Claims (10)

1.一种球孢白僵菌微生物农药,其特征在于,该球孢白僵菌微生物农药包括石墨烯、海藻酸钠、蛋白粉、明胶、水、球孢白僵菌的孢子和植物油;其中,所述石墨烯、海藻酸钠、蛋白粉、明胶、球孢白僵菌的孢子和植物油的重量比为1:(10-100):(10-20):(10-20):(60-1000):(50-140),所述球孢白僵菌微生物农药的含水量为7-30重%。
2.根据权利要求1所述的球孢白僵菌微生物农药,其特征在于,所述石墨烯、海藻酸钠、蛋白粉和明胶的重量比为1:(20-50):(13-18):(15-17):(60-1000):(50-140),所述球孢白僵菌微生物农药的含水量为8-13重%。
3.根据权利要求1的球孢白僵菌微生物农药,其特征在于,所述球孢白僵菌的孢子的含孢量为1011-1012个/克,含水量为4-6重%;所述植物油为菜籽油、亚麻籽油或蓖麻油。
4.一种球孢白僵菌微生物农药的制备方法,其特征在于,该方法包括:
a、按照质量比1:(10-100):(10-20):(10-20):(50-200)将石墨烯、海藻酸钠、蛋白粉、明胶和水在15-35℃下混合并搅拌均匀,得到第一混合物;
b、将步骤a中所得第一混合物在无菌条件下静置处理1-10天后加入球孢白僵菌的孢子,得到第二混合物,其中,所述石墨烯与所述球孢白僵菌的孢子的质量比为1:(60-1000);
c、将步骤b中所得第二混合物进行真空干燥至含水量为7-30重%,得到第三混合物;
d、将步骤c中所得第三混合物进行粉碎后过10-150目筛,得到第一粉末;
e、将步骤d中所得第一粉末喷洒植物油后,得到球孢白僵菌微生物农药。
5.根据权利要求4的制备方法,其特征在于,所述石墨烯、海藻酸钠、蛋白粉、明胶和水的混合质量比为1:(20-50):(13-18):(15-17):(70-150),步骤a中所述混合的温度为20至30℃。
6.根据权利要求4的制备方法,其特征在于,步骤b中所述静置处理在无菌室中进行,静置处理的时间为2-5天,步骤b中所述球孢白僵菌的孢子的含孢量为1011-1012个/克,含水量为4-6重%。
7.根据权利要求4的制备方法,其特征在于,步骤c中所述真空干燥的条件为:温度为10-25℃,压力为-80千帕~-30千帕,第三混合物的含水量为8-13重%。
8.根据权利要求4的制备方法,其特征在于,步骤d中所述筛的目数为30-100目。
9.根据权利要求4的制备方法,其特征在于,步骤e中所述植物油为菜籽油、亚麻籽油或蓖麻油。
10.根据权利要求4的制备方法,其特征在于,步骤e中所述植物油与石墨烯的重量比为1:(50-140)。
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