CN105767593A - 一种含植物提取组合物的鱿鱼膏及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种含植物提取组合物的鱿鱼膏，所述植物提取组合物的组分为下列重量份比原料混合的提取物：益智40‑50份，春黄菊35‑45份，北五味子30‑50份，油橄榄30‑40份。鱿鱼膏中植物提取组合物的添加比例为鱿鱼膏总重的2％‑15％。本发明提供的一种含植物提取组合物的鱿鱼膏，具有植物芳香，能促进对虾的索饵和摄食行为，提高饲料的适口性和利用率。植物提取物中所含的植物抗生素，不仅能够抑制鱿鱼膏自身在存储过程中细菌的滋生，对虾食用后还能帮助其实现“智能杀菌”。
Description
技术领域
本发明涉及一种鱿鱼膏，特别是涉及一种含植物提取组合物的鱿鱼膏。
背景技术
鱿鱼属头足纲的头足类动物，生命周期短、繁殖力强、资源恢复迅速，是一种营养丰富、高蛋白、低脂肪的营养保健型水产品资源，被广泛应用于鱿鱼生鱼片、鱿鱼菜肴、调味料等鱿鱼制品的生产中。在鱿鱼制品的加工过程中会产生大量的诸如内脏、头、骨和皮等的副产物，这些副产物中残留有大量的蛋白质、钙质、脂肪等营养成分，鱿鱼膏就是将这些副产物(主要是鱿鱼内脏)通过酶解、高温熟化、杀菌、油脂分离、烘干的方法制备而成的，是对虾饲料的重要组成部分。然而酶解常会导致苦味物质的产生，同时烘干的鱿鱼粉与酵母粉、豆粕等饲料载体混合易分层、发涨，甚至发霉。
对虾是对虾科对虾属的节肢动物，因常成对出售，故名对虾。近年来，我国对虾养殖业发展迅速，但是养殖环境的保护、病害防治却跟不上生产发展的需要，因而爆发了前所未有的大面积虾病，使对虾养殖业蒙受了巨大损失。究其原因虾病的出现主要由养虾的残饵、对虾本身的排泄物使虾池内积聚大量有机物，有机物腐烂分解从而滋生各种细菌病毒，污染水体，恶性循环。对于虾病的防治主要依赖于化学合成抗生素，虽然化学合成抗生素对防病、治病做出了巨大的贡献，促进动物生长，并且可能降低养殖成本，但是长期广泛使用不仅不可避免的导致耐药菌的出现，同时会残留于对虾体内，被人们摄食后逐渐蓄积于体内，可能引发各种器官的病变、过敏、致癌、致畸等危害。开发天然、健康安全、无污染、无残留的抗生素迫在眉睫。
发明内容
本发明的目的在于针对现有技术中化学合成抗生素广泛应用于虾病的治疗，诱导了耐药菌株的出现，并且残留于对虾体内的化学合成抗生素被人摄食后对人体健康具有潜在的危险而提供一种具有杀菌功效的含植物提取组合物的鱿鱼膏。
实现上述发明目的，本发明采用的技术方案如下：
本发明提供一种植物提取组合物，所述植物提取组合物的组分为下列重量份比原料混合的提取物：益智40-50份，春黄菊35-45份，北五味子30-50份，油橄榄30-40份，所述植物提取组合物的制备方法包括以下步骤：
(1)按重量份比称取原料，粉碎，混合，以料液比1:10-1:12(g/ml)于混合物中加入50％-70％乙醇，用电动搅拌器搅拌至粉状原料均匀的溶于乙醇后置于微波炉中，高档火力处理80-110s，冷却，过滤，滤液以旋转蒸发器减压浓缩至干，得初级植物提取组合物；
(2)按1:4-1:6(g/ml)的料液比用1,3-丁二醇溶解初级植物提取组合物，微波高档火力处理50-70s,冷却，过滤，蒸干，得次级植物提取组合物；
(3)将次级植物提取组合物于2-4倍体积的蒸馏水浸泡1min，过滤蒸干，即得本发明植物提取组合物。
优选的，所述植物提取组合物的组分为下列重量份比原料混合的提取物：益智45份，春黄菊40份，北五味子35份，油橄榄35份。
益智又名益智仁、益智子，为姜科植物益智的果实。包含挥发油、糖分、氨基酸及矿质元素等化学成分，其挥发油中的酚类化合物，黄酮类化合物能够直接抑制细菌的生长，同时益智提取物可抑制有利于细菌生长的组胺的释放，另外，益智挥发油的风味独特强烈，可用作香原料。
春黄菊别名甘菊、母菊，为菊科多年生或一年生草本植物。包含金合欢烯、a-红没药醇等挥发性成分及黄酮类化合物、咖啡酸、糖类、氨基酸等挥发性营养物质。其提取物对巨噬细胞的活性有极强的激活作用，从而吞噬及消化病原体。春黄菊精油的抗菌效果仅略低于等浓度的标准抗菌剂氯霉素和酮康唑，对表皮葡萄球菌也有很强的抑制作用。
北五味子又名山花椒、软枣子，是北温带阔叶红松林的组成树种之一，包含17种氨基酸、有机酸、微量元素、维生素、木脂素及多糖等化学成分。北五味子的提取物具有很强的抗菌和抑菌作用，有研究报道其抑菌圈可达40mm。
油橄榄为木樨科植物，又名洋橄榄、其墩果。提取物中包含木质素类、黄酮类、香豆素类、裂环烯醚萜类、有机酸类等化合物。油橄榄叶提取物对巨噬细胞活性有极强的激活作用，能够吞噬及消化细胞残片和病原体，同时对杆菌也有很好的抑制作用。
植物提取物中含有大量具有杀菌功效的植物抗生素，而植物抗生素，是在真菌、其它病原微生物的感染或者在毒性化学药品及紫外光照射下，植物体内重新合成的物质。目前已经发现并鉴定了的植物抗生素主要有黄酮类植物抗生素、萜类植物抗生素、香豆素类植物抗生素、吲哚类植物抗生素、二苯乙烯植物抗生素等。因植物抗生素具有“智能杀菌”的功效即识别自身有益菌群，抵御杀灭外源有害菌，从根本上杜绝了细菌耐药、二次感染等危害，安全、温和、高效、无残留、无副作用，避免了化学合成抗生素“通杀”的缺陷，是理想的化学合成抗生素替代品。
本发明的又一个技术方案为提供上述植物提取组合物在鱿鱼膏中的应用。
本发明还有一个技术方案为提供含上述植物提取组合物的鱿鱼膏，所述含上述植物提取组合物的鱿鱼膏中植物提取组合物的添加比例为2％-15％。
优选的，所述含上述植物提取组合物的鱿鱼膏中植物提取组合物的添加比例为5％-12％。
本发明还有一个技术方案为提供含上述植物提取组合物的鱿鱼膏的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：
(1)将鱿鱼内脏切块，置真空斩拌机中斩拌成浆，按料液比1:2-1:4加入蒸馏水在48℃下用自身酶酶解3-5.5h；
(2)将步骤(1)所得酶解产物离心，收集上清液，调节上清液pH至7.0-9.5，然后同时添加0.25％-0.5％的碱性蛋白酶和风味蛋白酶，50-60℃下酶解6-8h；
(3)将步骤(2)所得酶解产物离心，收集上清液，于100℃保温2min使酶失活，然后加入上述植物提取组合物，用电动搅拌器搅拌10min，最后于68-80℃下真空浓缩至水份含量为20％-40％的膏体，即得本发明含植物提取组合物的鱿鱼膏。
与现有技术相比，本发明提供的一种含植物提取组合物的鱿鱼膏，
具有植物芳香，能缓解鱿鱼膏制作过程中因酶解带来的苦味，适口性好；植物提取组合物具有的抑菌、杀菌功效能够抑制鱿鱼膏自身在存储过程中细菌的滋生；对虾食用后能够抵御外源有害菌，识别自身有益菌群，维持对虾体内菌群的平衡。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步地描述，需要说明的是，实施例并不构成对本发明要求保护范围的限定。
下述实施例中所用方法如无特别说明，均为常规方法。
下述实施例中所用的仪器、试剂、材料等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
下述电动搅拌器购于上海司乐仪器有限公司，旋转蒸发器购于上海常豫仪器有限公司，斩拌机购于山东诸城威尔食品机械有限公司，酶购于郑州荔诺生物科技有限公司，离心机购于上海化工机械厂有限公司，抗生素购于北京启维益成科技有限公司，培养基购于青岛海博生物技术有限公司，培养箱购于上海诵诚实业发展有限公司。
实施例1
(1)按重量份比称取益智40份，春黄菊35份，北五味子30份，油橄榄30，粉碎，混合，以料液比1:10(g/ml)于混合物中加入50％乙醇，用电动搅拌器搅拌至粉状原料均匀的溶于乙醇后置于微波炉中，高档火力处理80s，冷却，过滤，滤液以旋转蒸发器减压浓缩至干，得初级植物提取组合物；
(2)按1:4(g/ml)的料液比用1,3-丁二醇溶解初级植物提取组合物，微波高档火力处理50s,冷却，过滤，蒸干，得次级植物提取组合物；
(3)将次级植物提取组合物于2倍体积的蒸馏水浸泡1min，过滤蒸干，即得本发明植物提取组合物。
对比例1
(1)按重量份比称取益智40份，粉碎，混合，以料液比1:10(g/ml)于混合物中加入50％乙醇，用电动搅拌器搅拌至粉状原料均匀的溶于乙醇后置于微波炉中，高档火力处理80s，冷却，过滤，滤液以旋转蒸发器减压浓缩至干，得初级植物提取组合物；
(2)按1:4(g/ml)的料液比用1,3-丁二醇溶解初级植物提取组合物，微波高档火力处理50s,冷却，过滤，蒸干，得次级植物提取组合物；
(3)将次级植物提取组合物于2倍体积的蒸馏水浸泡1min，过滤蒸干，即得本发明植物提取组合物。
实施例2
(1)按重量份比称取益智45份，春黄菊40份，北五味子35份，油橄榄35份，粉碎，混合，以料液比1:11(g/ml)于混合物中加入60％乙醇，用电动搅拌器搅拌至粉状原料均匀的溶于乙醇后置于微波炉中，高档火力处理95s，冷却，过滤，滤液以旋转蒸发器减压浓缩至干，得初级植物提取组合物；
(2)按1:5(g/ml)的料液比用1,3-丁二醇溶解初级植物提取组合物，微波高档火力处理60s,冷却，过滤，蒸干，得次级植物提取组合物；
(3)将次级植物提取组合物于3倍体积的蒸馏水浸泡1min，过滤蒸干，即得本发明植物提取组合物。
对比例2
(1)按重量份比称取益智45份，春黄菊40份，粉碎，混合，以料液比1:11(g/ml)于混合物中加入60％乙醇，用电动搅拌器搅拌至粉状原料均匀的溶于乙醇后置于微波炉中，高档火力处理95s，冷却，过滤，滤液以旋转蒸发器减压浓缩至干，得初级植物提取组合物；
(2)按1:5(g/ml)的料液比用1,3-丁二醇溶解初级植物提取组合物，微波高档火力处理60s,冷却，过滤，蒸干，得次级植物提取组合物；
(3)将次级植物提取组合物于3倍体积的蒸馏水浸泡1min，过滤蒸干，即得本发明植物提取组合物。
实施例3
(1)按重量份比称取益智50份，春黄菊45份，北五味子50份，油橄榄40份，粉碎，混合，以料液比1:12(g/ml)于混合物中加入70％乙醇，用电动搅拌器搅拌至粉状原料均匀的溶于乙醇后置于微波炉中，高档火力处理110s，冷却，过滤，滤液以旋转蒸发器减压浓缩至干，得初级植物提取组合物；
(2)按1:6(g/ml)的料液比用1,3-丁二醇溶解初级植物提取组合物，微波高档火力处理70s,冷却，过滤，蒸干，得次级植物提取组合物；
(3)将次级植物提取组合物于4倍体积的蒸馏水浸泡1min，过滤蒸干，即得本发明植物提取组合物。
对比例3
(1)按重量份比称取益智50份，春黄菊45份，北五味子50份，粉碎，混合，以料液比1:12(g/ml)于混合物中加入70％乙醇，用电动搅拌器搅拌至粉状原料均匀的溶于乙醇后置于微波炉中，高档火力处理110s，冷却，过滤，滤液以旋转蒸发器减压浓缩至干，得初级植物提取组合物；
(2)按1:6(g/ml)的料液比用1,3-丁二醇溶解初级植物提取组合物，微波高档火力处理70s,冷却，过滤，蒸干，得次级植物提取组合物；
(3)将次级植物提取组合物于4倍体积的蒸馏水浸泡1min，过滤蒸干，即得本发明植物提取组合物。
实施例4
(1)将鱿鱼内脏切块，置真空斩拌机中斩拌成浆，按料液比1:2加入蒸馏水在48℃下用自身酶酶解3h；
(2)将步骤(1)所得酶解产物离心，收集上清液，调节上清液pH至7.0，然后同时添加0.25％的碱性蛋白酶和风味蛋白酶，50℃下酶解6h；
(3)将步骤(2)所得酶解产物离心，收集上清液，于100℃保温2min使酶失活，然后加入2％实施例2制得的植物提取组合物，用电动搅拌器搅拌10min，最后于68℃下真空浓缩至水份含量为20％的膏体，即得本发明含植物提取组合物的鱿鱼膏。
实施例5
(1)将鱿鱼内脏切块，置真空斩拌机中斩拌成浆，按料液比1:2.5加入蒸馏水在48℃下用自身酶酶解3.5h；
(2)将步骤(1)所得酶解产物离心，收集上清液，调节上清液pH至7.5，然后同时添加0.3％的碱性蛋白酶和风味蛋白酶，53℃下酶解6.5h；
(3)将步骤(2)所得酶解产物离心，收集上清液，于100℃保温2min使酶失活，然后加入5％实施例2制得的植物提取组合物，用电动搅拌器搅拌10min，最后于70℃下真空浓缩至水份含量为25％的膏体，即得本发明含植物提取组合物的鱿鱼膏。
实施例6
(1)将鱿鱼内脏切块，置真空斩拌机中斩拌成浆，按料液比1:3加入蒸馏水在48℃下用自身酶酶解4.5h；
(2)将步骤(1)所得酶解产物离心，收集上清液，调节上清液pH至8.5，然后同时添加0.38％的碱性蛋白酶和风味蛋白酶，55℃下酶解7h；
(3)将步骤(2)所得酶解产物离心，收集上清液，于100℃保温2min使酶失活，然后加入8.5％实施例2制得的植物提取组合物，用电动搅拌器搅拌10min，最后于74℃下真空浓缩至水份含量为30％的膏体，即得本发明含植物提取组合物的鱿鱼膏。
实施例7
(1)将鱿鱼内脏切块，置真空斩拌机中斩拌成浆，按料液比1:3.5加入蒸馏水在48℃下用自身酶酶解5h；
(2)将步骤(1)所得酶解产物离心，收集上清液，调节上清液pH至9.0，然后同时添加0.45％的碱性蛋白酶和风味蛋白酶，58℃下酶解7.5h；
(3)将步骤(2)所得酶解产物离心，收集上清液，于100℃保温2min使酶失活，然后加入12％实施例2制得的植物提取组合物，用电动搅拌器搅拌10min，最后于75℃下真空浓缩至水份含量为35％的膏体，即得本发明含植物提取组合物的鱿鱼膏。
实施例8
(1)将鱿鱼内脏切块，置真空斩拌机中斩拌成浆，按料液比1:4加入蒸馏水在48℃下用自身酶酶解5.5h；
(2)将步骤(1)所得酶解产物离心，收集上清液，调节上清液pH至9.5，然后同时添加0.5％的碱性蛋白酶和风味蛋白酶，60℃下酶解8h；
(3)将步骤(2)所得酶解产物离心，收集上清液，于100℃保温2min使酶失活，然后加入15％实施例2制得的植物提取组合物，用电动搅拌器搅拌10min，最后于80℃下真空浓缩至水份含量为40％的膏体，即得本发明含植物提取组合物的鱿鱼膏。
实施例9
(1)将鱿鱼内脏切块，置真空斩拌机中斩拌成浆，按料液比1:3加入蒸馏水在48℃下用自身酶酶解4.5h；
(2)将步骤(1)所得酶解产物离心，收集上清液，调节上清液pH至8.5，然后同时添加0.38％的碱性蛋白酶和风味蛋白酶，55℃下酶解7h；
(3)将步骤(2)所得酶解产物离心，收集上清液，于100℃保温2min使酶失活，然后加入8.5％实施例1制得的植物提取组合物，用电动搅拌器搅拌10min，最后于74℃下真空浓缩至水份含量为30％的膏体，即得本发明含植物提取组合物的鱿鱼膏。
实施例10
(1)将鱿鱼内脏切块，置真空斩拌机中斩拌成浆，按料液比1:3加入蒸馏水在48℃下用自身酶酶解4.5h；
(2)将步骤(1)所得酶解产物离心，收集上清液，调节上清液pH至8.5，然后同时添加0.38％的碱性蛋白酶和风味蛋白酶，55℃下酶解7h；
(3)将步骤(2)所得酶解产物离心，收集上清液，于100℃保温2min使酶失活，然后加入8.5％实施例3制得的植物提取组合物，用电动搅拌器搅拌10min，最后于74℃下真空浓缩至水份含量为30％的膏体，即得本发明含植物提取组合物的鱿鱼膏。
对比例4
(1)将鱿鱼内脏切块，置真空斩拌机中斩拌成浆，按料液比1:2加入蒸馏水在48℃下用自身酶酶解3h；
(2)将步骤(1)所得酶解产物离心，收集上清液，调节上清液pH至7.0，然后同时添加0.25％的碱性蛋白酶和风味蛋白酶，50℃下酶解6h；
(3)将步骤(2)所得酶解产物离心，收集上清液，于100℃保温2min使酶失活，最后于68℃下真空浓缩至水份含量为20％的膏体，即得不含本发明植物提取组合物的鱿鱼膏。
对比例5
(1)将鱿鱼内脏切块，置真空斩拌机中斩拌成浆，按料液比1:2.5加入蒸馏水在48℃下用自身酶酶解3.5h；
(2)将步骤(1)所得酶解产物离心，收集上清液，调节上清液pH至7.5，然后同时添加0.3％的碱性蛋白酶和风味蛋白酶，53℃下酶解6.5h；
(3)将步骤(2)所得酶解产物离心，收集上清液，于100℃保温2min使酶失活，最后于70℃下真空浓缩至水份含量为25％的膏体，即得不含本发明植物提取组合物的鱿鱼膏。
对比例6
(1)将鱿鱼内脏切块，置真空斩拌机中斩拌成浆，按料液比1:3加入蒸馏水在48℃下用自身酶酶解4.5h；
(2)将步骤(1)所得酶解产物离心，收集上清液，调节上清液pH至8.5，然后同时添加0.38％的碱性蛋白酶和风味蛋白酶，55℃下酶解7h；
(3)将步骤(2)所得酶解产物离心，收集上清液，于100℃保温2min使酶失活，最后于74℃下真空浓缩至水份含量为30％的膏体，即得不含本发明植物提取组合物的鱿鱼膏。
对比例7
(1)将鱿鱼内脏切块，置真空斩拌机中斩拌成浆，按料液比1:3.5加入蒸馏水在48℃下用自身酶酶解5h；
(2)将步骤(1)所得酶解产物离心，收集上清液，调节上清液pH至9.0，然后同时添加0.45％的碱性蛋白酶和风味蛋白酶，58℃下酶解7.5h；
(3)将步骤(2)所得酶解产物离心，收集上清液，于100℃保温2min使酶失活，最后于75℃下真空浓缩至水份含量为35％的膏体，即得不含本发明植物提取组合物的鱿鱼膏。
对比例8
(1)将鱿鱼内脏切块，置真空斩拌机中斩拌成浆，按料液比1:4加入蒸馏水在48℃下用自身酶酶解5.5h；
(2)将步骤(1)所得酶解产物离心，收集上清液，调节上清液pH至9.5，然后同时添加0.5％的碱性蛋白酶和风味蛋白酶，60℃下酶解8h；
(3)将步骤(2)所得酶解产物离心，收集上清液，于100℃保温2min使酶失活，最后于80℃下真空浓缩至水份含量为40％的膏体，即得不含本发明植物提取组合物的鱿鱼膏。
对比例9
(1)将鱿鱼内脏切块，置真空斩拌机中斩拌成浆，按料液比1:3.5加入蒸馏水在48℃下用自身酶酶解5h；
(2)将步骤(1)所得酶解产物离心，收集上清液，调节上清液pH至9.0，然后同时添加0.45％的碱性蛋白酶和风味蛋白酶，58℃下酶解7.5h；
(3)将步骤(2)所得酶解产物离心，收集上清液，于100℃保温2min使酶失活，然后加入12％对比例1制得的植物提取组合物，用电动搅拌器搅拌10min，最后于75℃下真空浓缩至水份含量为35％的膏体，即得本发明含植物提取组合物的鱿鱼膏。
对比例10
(1)将鱿鱼内脏切块，置真空斩拌机中斩拌成浆，按料液比1:3.5加入蒸馏水在48℃下用自身酶酶解5h；
(2)将步骤(1)所得酶解产物离心，收集上清液，调节上清液pH至9.0，然后同时添加0.45％的碱性蛋白酶和风味蛋白酶，58℃下酶解7.5h；
(3)将步骤(2)所得酶解产物离心，收集上清液，于100℃保温2min使酶失活，然后加入12％对比例2制得的植物提取组合物，用电动搅拌器搅拌10min，最后于75℃下真空浓缩至水份含量为35％的膏体，即得本发明含植物提取组合物的鱿鱼膏。
对比例11
(1)将鱿鱼内脏切块，置真空斩拌机中斩拌成浆，按料液比1:3.5加入蒸馏水在48℃下用自身酶酶解5h；
(2)将步骤(1)所得酶解产物离心，收集上清液，调节上清液pH至9.0，然后同时添加0.45％的碱性蛋白酶和风味蛋白酶，58℃下酶解7.5h；
(3)将步骤(2)所得酶解产物离心，收集上清液，于100℃保温2min使酶失活，然后加入12％对比例3制得的植物提取组合物，用电动搅拌器搅拌10min，最后于75℃下真空浓缩至水份含量为35％的膏体，即得本发明含植物提取组合物的鱿鱼膏。
实施例11
对上述实施例4-10和对比例9-11中所得鱿鱼膏进行感官评价，以对比例6不含植物提取组合物的鱿鱼膏为参照，采用综合评分原则，由15名视觉、嗅觉均正常的评分员从色泽、气味这两个角度分别进行评分，若气味、色泽与对比例6不含植物提取组合物的鱿鱼膏一样则得0分；若气味、色泽比对比例6不含植物提取组合物的鱿鱼膏差则得负分；若气味、色泽比对比例6不含植物提取组合物的鱿鱼膏好则得正分；评分最高不得超过5分，最低不得少于-5分，综合得分为各评分员评分结果的平均值。综合得分结果见表1。
表1实施例4-10和对比例9-11所得鱿鱼膏的综合感官评价结果
从表1可知4-10实施例中的鱿鱼膏均无苦味、色泽均匀并且还带有植物芳香味，实施例5-7的得分都高于实施例4和实施例7，同时实施例5-7的得分逐渐递增，表明在同时添加实施例2所得植物提取组合物的情况下，植物提取组合物在鱿鱼膏中的较佳添加范围为5％-12％，并且在此范围内随着植物提取组合物含量的增加，综合感官评价的得分也逐渐升高。将实施例6与实施例9、10进行对比，发现实施例6的得分明显高于实施例9、10的得分，表明在鱿鱼膏中添加相同比例的植物提取组合物的前提下，添加实施例2制得的植物提取组合物制得的鱿鱼膏综合感官得分优于添加实施例1或3制得的植物提取组合物制得的鱿鱼膏。另外，对比实施例7与对比例9-11的综合感官得分可知在植物提取组合物添加比例相同的前提下，同时添加本发明提供的4种植物提取组合物制得的鱿鱼膏气味、色泽显著优于只添加本发明提供的1种、2种或3种植物提取组合物制得的鱿鱼膏的气味、色泽，表明本发明提供的4种植物提取组合物之间存在协同作用。
实施例12
选取新鲜制备并经高温灭菌的实施例4-10及对比例4-11制得的鱿鱼膏各5g，每隔15d检测膏体上的细菌含量，连续检测8次，结果见表2。
表2实施例4-10及对比例4-11制得的鱿鱼膏每隔15d的细菌变化情况
从表2可知实施例4-10制得的鱿鱼膏细菌滋生的速度缓慢，120d后细菌数量(低于104)明显少于对比例4-11制得的鱿鱼膏的细菌数量(高达108)，对比实施例4-8制得的鱿鱼膏发现实施例5-7制得的鱿鱼膏细菌数量(低于856)低于实施例4和8制得的鱿鱼膏细菌数量(104)，表明实施例5-7制得的鱿鱼膏具有较好的抑菌效果，并且实施例7制得的鱿鱼膏抑菌效果最佳。将实施例6制得的鱿鱼膏与实施例9、10制得的鱿鱼膏进行对比，发现实施例6制得的鱿鱼膏细菌滋生速度及数量明显(556)低于实施例9、10制得的鱿鱼膏细菌数量(104)，表明实施例6制得的鱿鱼膏具有较好的抑菌效果。另外，对比实施例7制得的鱿鱼膏与对比例9-11制得的鱿鱼膏，发现实施例7制得的鱿鱼膏120d后细菌数量只有256个，而对比例9-11制得的鱿鱼膏120d后细菌数量高达108。表明本发明提供的4种植物提取组合物能协同的抑制鱿鱼膏中细菌的滋生，单独添加其中1种、2种或3种植物提取组合物无法达到添加4种植物提取组合物所达到的抑菌效果。
以下对虾饲料除鱿鱼膏使用由本发明制得的外，其余组分均为常规对虾饲料组分。
实施例13
随机挑选300只大小均匀处于养殖初期阶段的对虾，分成15组，7组分别喂食含实施例4-10制得的鱿鱼膏饲料，8组喂食含对比例4-11制得的鱿鱼膏饲料，每天早晚各喂1次，并且每次均喂食1.5g，分别称量记录其初始重量平均值，40d后，再次称量记录各组对虾的重量平均值，结果见表3。
表3含对比例4-11制得鱿鱼膏的饲料与含实施例4-10制得鱿鱼膏的饲料喂食对虾40d后的重量对比表
从表3可知喂食含实施例4-10制得鱿鱼膏饲料的对虾40d后体重均已高于56.3g，而喂食含对比例4-11制得鱿鱼膏饲料的对虾40d后体重均轻于46.7g，可见含本发明植物提取组合物鱿鱼膏的饲料具有较好的适口性，可以提高对虾对饲料的利用率。对比喂食含实施例4-8制得鱿鱼膏饲料的对虾40d后的体重，可以看出喂食含实施例5-7制得鱿鱼膏饲料的对虾体重(65.3g以上)高于喂食含实施例4、8制得鱿鱼膏饲料的对虾体重(58.3g以下)，表明在饲料中添加实施例5-7制得的鱿鱼膏更有利于对虾的生长，并且添加实施例7制得鱿鱼膏的对虾饲料促生长效果最佳。将喂食含实施例7制得鱿鱼膏饲料的对虾40d后的体重与喂食含对比例9-11制得鱿鱼膏饲料的对虾体重进行比较，发现喂食含实施例7制得鱿鱼膏饲料的对虾40d后体重达到75.2g，而喂食含对比例9-11制得鱿鱼膏饲料的对虾体重均在46.7g以下，表明往对虾饲料中添加含4种植物提取组合物的鱿鱼膏对对虾生长的促进作用明显优于对虾饲料中仅添加含1种、2种或3种植物提取组合物的鱿鱼膏对对虾生长的促进作用。
实施例14
随机挑选60只大小均匀处于养殖中期的健康对虾和90只生病对虾，分成5组，早晚各喂食饲料1次，其中1组健康对虾和1组生病对虾分别喂食含实施例10制得鱿鱼膏的饲料和含对比例10制得鱿鱼膏的饲料，另外3组生病对虾分别喂食含实施例10制得鱿鱼膏的饲料、含对比例10制得鱿鱼膏的饲料和加有0.1％氯霉素、0.1％磺胺药、0.1％四环素和0.1％吠喃哇酮的含对比例10制得鱿鱼膏的饲料，7d后分别解剖各组对虾中肠，研磨后稀释至10- 7涂布于营养琼脂培养基，麦康凯培养基，TCBS培养基的平板上，置于30℃的恒温培养箱中培养，待菌长出后做菌液PCR，送诺禾致源基因测序公司进行16s RNA测序，鉴定菌种，菌种个数取各实验组结果的平均值，结果见表4。
表4喂食含对比例10制得鱿鱼膏的饲料与含实施例10制得鱿鱼膏的饲料前后健康对虾与生病对虾的肠道菌群情况表
如表4所示含实施例10制得鱿鱼膏的饲料喂食健康对虾后，对虾肠道菌群的结构、数量与喂食含对比例10制得鱿鱼膏饲料的健康对虾基本没有差别，都是主要由发光杆菌属、弧菌属、气单胞菌属、肠杆菌科、黄单胞菌属、土壤杆菌属、芽孢杆菌属、棒状杆菌属、小球菌属、黄杆菌属、产碱杆菌属、假单胞菌属和色杆菌属细菌构成。喂食含实施例10制得鱿鱼膏的饲料与添加有0.1％氯霉素、0.1％磺胺药、0.1％四环素和0.1％吠喃哇酮化学合成抗生素的含对比例10制得鱿鱼膏的饲料均能杀死对虾中感染的副溶血弧菌(引起对虾红腿病)、柱状曲桡杆菌(引起对虾烂鳃病)、嗜水气单胞菌(引起对虾肠炎病)、水霉菌(引起对虾水霉病)，不同的是化学合成抗生素在杀死致病菌的同时也会对对虾中正常的菌群起毒害作用，而喂食含实施例10制得鱿鱼膏的饲料的生病对虾中正常菌群并未受影响。说明本发明提供的植物提取物中含有的植物抗生素具有“智能杀菌”的作用。
Claims (6)
1.一种植物提取组合物，其特征在于，所述植物提取组合物的组分为下列重量份比原料混合的提取物：益智40-50份，春黄菊35-45份，北五味子30-50份，油橄榄30-40份，所述植物提取组合物的制备方法包括以下步骤：
(1)按重量份比称取原料，粉碎，混合，以料液比1:10-1:12(g/ml)于混合物中加入50％-70％乙醇，用电动搅拌器搅拌至粉状原料均匀的溶于乙醇后置于微波炉中，高档火力处理80-110s，冷却，过滤，滤液以旋转蒸发器减压浓缩至干，得初级植物提取组合物；
(2)按1:4-1:6(g/ml)的料液比用1,3-丁二醇溶解初级植物提取组合物，微波高档火力处理50-70s,冷却，过滤，蒸干，得次级植物提取组合物；
(3)将次级植物提取组合物于2-4倍体积的蒸馏水浸泡1min，过滤蒸干，即得本发明植物提取组合物。
2.根据权利要求1所述的植物提取组合物，其特征在于，
所述植物提取组合物的组分为下列重量份比原料混合的提取物：益智45份，春黄菊40份，北五味子35份，油橄榄35份。
3.根据权利要求1或2所述的植物提取组合物在鱿鱼膏中的应用。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述鱿鱼膏中植物提取组合物的添加比例为2％-15％。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述鱿鱼膏中植物提取组合物的添加比例为5％-12％。
6.一种含植物提取组合物的鱿鱼膏，其特征在于，所述含植物提取组合物的鱿鱼膏的制备方法包括以下步骤：
(1)将鱿鱼内脏切块，置真空斩拌机中斩拌成浆，按料液比1:2-1:4加入蒸馏水在48℃下用自身酶酶解3-5.5h；
(2)将步骤(1)所得酶解产物离心，收集上清液，调节上清液pH至7.0-9.5，然后同时添加0.25％-0.5％的碱性蛋白酶和风味蛋白酶，50-60℃下酶解6-8h；
(3)将步骤(2)所得酶解产物离心，收集上清液，于100℃保温2min使酶失活，然后加入权利要求1或2所述植物提取组合物，用电动搅拌器搅拌10min，最后于68-80℃下真空浓缩至水份含量为20％-40％的膏体，即得本发明含植物提取组合物的鱿鱼膏。
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