CN105766656B

CN105766656B - 鹤顶兰假鳞茎快速繁殖的一步成苗方法

Info

Publication number: CN105766656B
Application number: CN201610273888.5A
Authority: CN
Inventors: 姚绍嫦; 蓝祖栽; 凌征柱
Original assignee: Guangxi Botanical Garden of Medicinal Plants
Current assignee: Guangxi Botanical Garden of Medicinal Plants
Priority date: 2016-04-28
Filing date: 2016-04-28
Publication date: 2018-02-27
Anticipated expiration: 2036-04-28
Also published as: CN105766656A

Abstract

本发明公开了一种鹤顶兰假鳞茎快速繁殖的一步成苗方法，将分化出根芽结构的鹤顶兰原球茎转接至增殖培养基上进行继代培养，培养60‑70天后得到具有根芽和丛生假鳞茎的增殖苗，增殖苗继续继代培养20‑30天后得到芽高3‑6cm、根长1‑2cm的试管苗进行炼苗移栽，增殖培养基的配方包括：MS、6‑BA 1.0～2.0mg/L、KT 0.5～1.0mg/L、TDZ 0.2～0.6mg/L、NAA0.5～1.5mg/L、活性炭0.1％～0.2％、椰子汁10％～20％，pH为6.0。本发明的方法在继代增殖实现假鳞茎增殖与生根同时进行，省略生根壮苗从而一步成苗，培养周期短，增殖系数高，生产成本低。

Description

鹤顶兰假鳞茎快速繁殖的一步成苗方法

技术领域

本发明涉及鹤顶兰组织培养技术领域。更具体地说，本发明涉及一种鹤顶兰假鳞茎快速繁殖的一步成苗方法。

背景技术

鹤顶兰(Phaius tankervilleae)属于兰科鹤顶兰属，是一种集观赏和药用于一体的多年生草本植物。花茎直立，生于假鳞茎的侧面，长达70～120cm，总状花序，具10～20朵花，花径约10cm，花冠中筒状的唇瓣形状十分独特，且颜色与其它花瓣不同，花色丰富，艳丽芳香，花期长达1个月以上，具有很高的观赏价值。鹤顶兰还适宜作为亲本，与兰科其它属的花卉进行杂交以培育新的兰花品种，现已杂交成功的鹤顶虾脊兰、鹤顶虎头兰等市场价值很高。假鳞茎可药用，具有清热止咳、祛痰活血、止血的功效，主治咳嗽多痰、咯血、外伤出血等。鹤顶兰原产于广东、广西等一些热带和亚热带地区，适应性强，生长势好，容易栽培，具有很好的市场开发前景。

鹤顶兰和其它兰科植物一样，种子发育不完全，不含有为种子萌发提供营养的胚乳或其它贮藏组织，在自然条件下通过种子繁殖需要极长的时间才能获得开花植株，而且发芽率和成活率都极低。另外，由于长期以来的过度采掘以及生境的破坏，鹤顶兰的野生资源大量减少，目前已处于濒危状态，单单依靠野生资源已无法满足人们对鹤顶兰的需求。近年来，人们尝试使用分株繁殖，但是分株繁殖的繁殖系数也非常低、生长速度也极慢，无法实现短时间内大量繁殖，而且这种繁殖方式使得种苗容易携带病毒，导致品种退化。为解决这一繁育瓶颈，我们开展鹤顶兰的组织培养技术研究，利用组织培养技术生产组培苗将是鹤顶兰规模化栽培的主要种苗来源。组织培养技术一般包括初代诱导、继代增殖、生根壮苗培养以及炼苗移栽等环节，一般将外植体诱导培养之后去除根部组织才能实现增殖，再通过生根培养进行生根壮苗，培养周期长，操作麻烦，增殖系数较低，而增殖系数和培养周期直接决定组培苗的生产成本。兰科植物的组培快繁一般通过原球茎进行增殖，一旦原球茎分化出具根芽结构的小植株之后很难实现其增殖，而利用本专利技术可实现原球茎分化之后假鳞茎的增殖并且一步成苗，为鹤顶兰的试管苗商业化生产提供了一条新的途径。

发明内容

本发明的一个目的是解决至少上述问题，并提供至少后面将说明的优点。

本发明还有一个目的是提供一种鹤顶兰假鳞茎快速繁殖的一步成苗方法，在继代增殖阶段实现假鳞茎增殖与生根同时进行，可省略生根壮苗的环节从而一步成苗，缩短培养周期，提高增殖系数，降低生产成本。

为了实现根据本发明的这些目的和其它优点，提供了一种鹤顶兰假鳞茎快速繁殖的一步成苗方法，将分化出根芽结构的鹤顶兰原球茎转接至增殖培养基上进行继代培养，继代培养60-70天后得到具有根芽和丛生假鳞茎的增殖苗，所述增殖苗继续继代培养20-30天后得到芽高3-6cm、根长1-2cm的试管苗进行炼苗移栽，所述增殖培养基的配方包括：MS、6-BA1.0～2.0mg/L、KT 0.5～1.0mg/L、TDZ 0.2～0.6mg/L、NAA0.5～1.5mg/L、活性炭0.1％～0.2％、椰子汁10％～20％，pH为6.0。

优选的是，所述的鹤顶兰假鳞茎快速繁殖的一步成苗方法，所述增殖培养基的配方包括：MS、6-BA2.0mg/L、KT 0.5mg/L、TDZ 0.5mg/L、NAA0.75mg/L、活性炭0.15％、椰子汁15％。

优选的是，所述的鹤顶兰假鳞茎快速繁殖的一步成苗方法，继代培养的条件为：温度为24-28℃，光照强度为2000Lx，光照时间为10h/天。

优选的是，所述的鹤顶兰假鳞茎快速繁殖的一步成苗方法，以鹤顶兰成熟未开裂荚果内部的种子为外植体，在萌发培养基上诱导培养至鹤顶兰先萌发后形成分化出根芽结构的原球茎进行继代培养，其中，所述萌发培养基的配方包括：MS、6-BA 0.5mg/L、蔗糖25g/L、琼脂5g/L，pH为6.0，诱导培养的条件为：温度为24-28℃，光照强度为2000Lx，光照时间为10h/天。

优选的是，所述的鹤顶兰假鳞茎快速繁殖的一步成苗方法，还包括至少一次扩繁培养，所述扩繁培养具体是指将所述增殖苗用解剖刀从其基部切分成具有根芽和单个假鳞茎的扩繁苗，将单个扩繁苗转接至新的增殖培养基上增殖培养40-50天形成具有根芽和丛生假鳞茎的另一增殖苗的循环过程。

优选的是，所述的鹤顶兰假鳞茎快速繁殖的一步成苗方法，所述炼苗移栽具体包括：将所述试管苗在室内开盖炼苗3-5天，取试管苗的根部洗净，用解剖刀将试管苗从基部切分成单个假鳞茎得到多个含有单个假鳞茎的移栽苗，将移栽苗用消毒液浸泡30s后移栽至苗床上，所述消毒液配方为高锰酸钾800倍液与多菌灵1500倍液的混合液，所述苗床为红心土和椰糠按体积比为1:2混合得到的pH为4.5-6.5的基质，移栽前12～24h将基质用质量分数为0.2％～0.3％的高锰酸钾溶液消毒，移栽10天内保持所述苗床的湿度为80％～90％，移栽10天之后保持所述苗床的湿度为60％～80％，移栽过程中控制温度为22-30℃，移栽苗长出新叶起，每隔10～15天淋施质量分数为0.1％～0.3％的N:P:K＝15:15:15的复混肥。

优选的是，所述的鹤顶兰假鳞茎快速繁殖的一步成苗方法，所述增殖培养基的配方还包括：芦荟汁液0.4％～0.6％、山绿茶水5％～10％、中药提取液0.2％～0.4％，所述山绿茶水为山绿茶与沸水按照质量比为1:100冲泡后静置3-4h过滤山绿茶得到，所述中药提取液为圆叶薄荷、仙人掌、积雪草和莳萝按照质量比为1:3:3:1混合后碾碎，加入其重量的3倍的磁化水，混合均匀后置于28-32℃下恒温振荡5h后过滤滤渣得到。

本发明至少包括以下有益效果：

1)本发明提供的整套方法操作简便，生产成本低，增殖系数高，移栽成活率高，便于大规模工业化生产应用，可大量、快速、持续获得高质量的移栽苗，实用性强；

2)本发明在继代增殖阶段实现鹤顶兰假鳞茎增殖与生根同时进行，可省略生根壮苗的环节，从而实现假鳞茎快速繁殖的一步成苗，周期大大缩短，并且能显著降低生产成本；

3)本发明的增殖培养基配方，每扩繁一次增殖倍数达6～9倍，能实现较好的经济效益。

本发明的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现，部分还将通过对本发明的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。

需要说明的是，下述实施方案中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法，所述试剂和材料，如无特殊说明，均可从商业途径获得。

实施例1：

一种鹤顶兰假鳞茎快速繁殖的一步成苗方法，将分化出根芽结构的鹤顶兰原球茎转接至增殖培养基上进行继代培养，继代培养60-70天后得到具有根芽和丛生假鳞茎的增殖苗，所述增殖苗继续继代培养20-30天后得到芽高3-6cm、根长1-2cm的试管苗进行炼苗移栽，所述增殖培养基的配方包括：MS、6-BA1.0mg/L、KT 0.5mg/L、TDZ 0.2mg/L、NAA0.5mg/L、活性炭0.1％、椰子汁10％，pH为6.0，其中0.1％、10％分别为活性炭和椰子汁占增殖培养基的质量比百分数。

其中，继代培养的条件为：温度为24-28℃，光照强度为2000Lx，光照时间为10h/天。

其中，所述炼苗移栽具体包括：将所述试管苗在室内开盖炼苗3-5天，取试管苗的根部洗净，用解剖刀将试管苗从基部切分成单个假鳞茎得到多个含有单个假鳞茎的移栽苗，将移栽苗用消毒液浸泡30s后移栽至苗床上，所述消毒液配方为高锰酸钾800倍液与多菌灵1500倍液的混合液，所述苗床为红心土和椰糠按体积比为1:2混合得到的pH为4.5-6.5的基质，移栽前12～24h将基质用质量分数为0.2％～0.3％的高锰酸钾溶液消毒，移栽10天内保持所述苗床的湿度为80％～90％，移栽10天之后保持所述苗床的湿度为60％～80％，移栽过程中控制温度为22-30℃，移栽苗长出新叶起，每隔10～15天淋施质量分数为0.1％～0.3％的N:P:K＝15:15:15的复混肥。这里的0.1％～0.3％是指复混肥中氮磷钾肥的质量分数。

本实施例的方法能实现假鳞茎的增殖，增殖倍数为2.83倍，同时也能实现一步成苗，移栽成活率达87.8％。

实施例2：

一种鹤顶兰假鳞茎快速繁殖的一步成苗方法，将分化出根芽结构的鹤顶兰原球茎转接至增殖培养基上进行继代培养，继代培养60-70天后得到具有根芽和丛生假鳞茎的增殖苗，所述增殖苗继续继代培养20-30天后得到芽高3-6cm、根长1-2cm的试管苗进行炼苗移栽，所述增殖培养基的配方包括：MS、6-BA2.0mg/L、KT 0.5mg/L、TDZ 0.5mg/L、NAA0.75mg/L、活性炭0.15％、椰子汁15％，pH为6.0，其中0.15％、15％分别为活性炭和椰子汁占增殖培养基的质量比百分数。

其中，所述炼苗移栽具体包括：将所述试管苗在室内开盖炼苗3-5天，取试管苗的根部洗净，用解剖刀将试管苗从基部切分成单个假鳞茎得到多个含有单个假鳞茎的移栽苗，将移栽苗用消毒液浸泡30s后移栽至苗床上，所述消毒液配方为高锰酸钾800倍液与多菌灵1500倍液的混合液，所述苗床为红心土和椰糠按体积比为1:2混合得到的pH为4.5-6.5的基质，移栽前12～24h将基质用质量分数为0.2％～0.3％的高锰酸钾溶液消毒，移栽10天内保持所述苗床的湿度为80％～90％，移栽10天之后保持所述苗床的湿度为60％～80％，移栽过程中控制温度为22-30℃，移栽苗长出新叶起，每隔10～15天淋施质量分数0.1％～0.3％的N:P:K＝15:15:15的复混肥。

本实施例的方法能实现假鳞茎的增殖，增殖倍数为6.77倍，同时也能实现一步成苗，移栽成活率达92.5％。

实施例3：

一种鹤顶兰假鳞茎快速繁殖的一步成苗方法，在实施例1的基础上，所述增殖培养基的配方为：MS、6-BA 2.0mg/L、KT1.0mg/L、TDZ 0.6mg/L、NAA1.5mg/L、活性炭0.2％、椰子汁20％，pH为6.0，其中0.2％、20％分别为活性炭和椰子汁占增殖培养基的质量比百分数。

除增殖培养基的配方外，其他与实施例1相同。

本实施例的方法能实现假鳞茎的增殖，增殖倍数为5.68倍，同时也能实现一步成苗，移栽成活率达88.2％。

实施例4：

一种鹤顶兰假鳞茎快速繁殖的一步成苗方法，在实施例1的基础上，所述增殖培养基的配方为：MS、6-BA1.5mg/L、KT 0.75mg/L、TDZ 0.4mg/L、NAA1.0mg/L、活性炭0.15％、椰子汁15％。其中0.15％、15％分别为活性炭和椰子汁占增殖培养基的质量比百分数。

除增殖培养基的配方外，其他与实施例1相同。

本实施例的方法能实现假鳞茎的增殖，增殖倍数为5.28倍，同时也能实现一步成苗，移栽成活率达90.3％。

实施例5：

在实施例2的基础上，所述的鹤顶兰假鳞茎快速繁殖的一步成苗方法，以鹤顶兰成熟未开裂荚果内部的种子为外植体，在萌发培养基上诱导培养至鹤顶兰先萌发后形成分化出根芽结构的原球茎进行继代培养，其中，所述萌发培养基的配方包括：MS、6-BA 0.5mg/L、蔗糖25g/L、琼脂5g/L，pH为6.0，诱导培养的条件为：温度为24-28℃，光照强度为2000Lx，光照时间为10h/天。

实施例6：

在实施例2的基础上，所述的鹤顶兰假鳞茎快速繁殖的一步成苗方法，还包括至少一次扩繁培养，所述扩繁培养具体是指将所述增殖苗用解剖刀从其基部切分成具有根芽和单个假鳞茎的扩繁苗，将单个扩繁苗转接至新的增殖培养基上增殖培养40～50天形成具有根芽和丛生假鳞茎的另一增殖苗的循环过程。

实施例7：

一种鹤顶兰假鳞茎快速繁殖的一步成苗的方法，以鹤顶兰成熟荚果为外植体进行无菌萌发，在继代增殖阶段实现试管苗的假鳞茎增殖与生根同时进行，可省略生根壮苗的环节。具体包括以下步骤：

(1)外植体灭菌与无菌萌发过程

取鹤顶兰成熟未开裂荚果(授粉约120天)，用蘸有0.75％乙醇溶液的棉花拭擦荚果以清洁表面，在超净工作台上用0.1％HgCl₂溶液灭菌10min，然后用无菌水轻微震荡洗涤4次，再用无菌滤纸将荚果表面水分吸干。用无菌镊子将荚果转移至无菌碟子上，用无菌手术刀将荚果纵切成两半以露出果实内粉末状的种子，用无菌镊子夹取种子均匀撒在萌发培养基上以诱导种子萌发。萌发培养基配方为MS+6-BA0.5mg/L。培养20天，种子开始萌发；培养40～50天，原球茎开始分化出根芽结构，此时即可将分化的原球茎转接至继代增殖培养基培养。

所述萌发培养基附加25g/L蔗糖和5g/L琼脂，pH 6.0，配制分装成25ml/瓶后，于121℃灭菌20分钟。培养条件为(26±2)℃、光照强度2000Lx、光照时间10h/天。

(2)继代增殖过程

将步骤(1)中开始分化的原球茎转接至增殖培养基中继代培养，继代培养第20～30天，芽开始展开1～2片叶，并且在芽的基部长出2～3条根，同时根芽交界处膨大形成假鳞茎；继代培养第40～50天，假鳞茎周围新长出3～5个小的假鳞茎，并且在鳞茎基部开始长根；继代培养第60～70天，形成丛生假鳞茎，并且每个假鳞茎基部均有3～4条根，顶部形成具1～2片叶的芽，用手术刀可将丛生假鳞茎从每个假鳞茎的基部切分成单个假鳞茎。继代培养60～70天的丛生假鳞茎可以进行切下单个假鳞茎转接至新的继代增殖培养基进行继续扩繁，也可以再培养20～30天待试管苗长至5～10cm后开盖炼苗移栽。增殖培养基配方为MS+6-BA 1.0～2.0mg/L+KT 0.5～1.0mg/L+TDZ 0.2～0.6mg/L+NAA0.5～1.5mg/L+0.1％～0.2％活性炭+10％～20％椰子汁。

增殖培养基附加25g/L蔗糖和5g/L琼脂，pH 6.0，配制分装成40ml/瓶后，于121℃灭菌20分钟。培养条件为(26±2)℃、光照强度2000Lx、光照时间10h/天。

炼苗移栽过程同实施例1。

实施例8：

在实施例2的基础上，所述的鹤顶兰假鳞茎快速繁殖的一步成苗方法，增殖培养基的配方替换为：MS、6-BA2.0mg/L、KT 0.5mg/L、TDZ 0.5mg/L、NAA0.75mg/L、活性炭0.15％、椰子汁15％，芦荟汁液0.4％、山绿茶水5％、中药提取液0.2％，pH为6.0，其中0.15％、15％分别为活性炭和椰子汁占增殖培养基的质量比百分数，这里的芦荟汁液、山绿茶水、中药提取液的百分数也同样为其占增殖培养基的质量比百分数，所述芦荟汁液为芦荟去皮搅拌研磨后所得的汁液，所述山绿茶水为山绿茶与沸水按照质量比为1:100冲泡后静置3-4h过滤山绿茶得到，所述中药提取液为圆叶薄荷、仙人掌、积雪草和莳萝按照质量比为1:3:3:1混合后碾碎，加入其重量的3倍的磁化水，混合均匀后置于28-32℃下恒温振荡5h后过滤滤渣得到。

本实施例的方法能实现假鳞茎的增殖，增殖倍数为7.85倍，同时也能实现一步成苗。

实施例9：

在实施例2的基础上，所述的鹤顶兰假鳞茎快速繁殖的一步成苗方法，增殖培养基的配方替换为：MS、6-BA 2.0mg/L、KT 0.5mg/L、TDZ 0.5mg/L、NAA0.75mg/L、活性炭0.15％、椰子汁15％，芦荟汁液0.5％、山绿茶水8％、中药提取液0.3％，pH为6.0，其中0.15％、15％分别为活性炭和椰子汁占增殖培养基的质量比百分数，这里的芦荟汁液、山绿茶水、中药提取液的百分数也同样为其占增殖培养基的质量比百分数，所述芦荟汁液为芦荟去皮搅拌研磨后所得的汁液，所述山绿茶水为山绿茶与沸水按照质量比为1:100冲泡后静置3-4h过滤山绿茶得到，所述中药提取液为圆叶薄荷、仙人掌、积雪草和莳萝按照质量比为1:3:3:1混合后碾碎，加入其重量的3倍的磁化水，混合均匀后置于28-32℃下恒温振荡5h后过滤滤渣得到。

本实施例的方法能实现假鳞茎的增殖，增殖倍数为9.02倍，同时也能实现一步成苗。

实施例10：

在实施例2的基础上，所述的鹤顶兰假鳞茎快速繁殖的一步成苗方法，增殖培养基的配方替换为：MS、6-BA 2.0mg/L、KT 0.5mg/L、TDZ 0.5mg/L、NAA0.75mg/L、活性炭0.15％、椰子汁15％，芦荟汁液0.6％、山绿茶水10％、中药提取液0.4％，pH为6.0，其中0.15％、15％分别为活性炭和椰子汁占增殖培养基的质量比百分数，这里的芦荟汁液、山绿茶水、中药提取液的百分数也同样为其占增殖培养基的质量比百分数，所述芦荟汁液为芦荟去皮搅拌研磨后所得的汁液，所述山绿茶水为山绿茶与沸水按照质量比为1:100冲泡后静置3-4h过滤山绿茶得到，所述中药提取液为圆叶薄荷、仙人掌、积雪草和莳萝按照质量比为1:3:3:1混合后碾碎，加入其重量的3倍的磁化水，混合均匀后置于28-32℃下恒温振荡5h后过滤滤渣得到。

本实施例的方法能实现假鳞茎的增殖，增殖倍数为8.33倍，同时也能实现一步成苗。

实施例11：

在实施例7的基础上，移栽过程为：用解剖刀将试管苗切分成单个假鳞茎，移栽至苗床上，所述苗床为红心土和椰糠按体积比为1:2混合得到的pH为4.5-6.5的基质，移栽10天内保持所述苗床的湿度为80％～90％，移栽10天之后保持所述苗床的湿度为60％～80％，移栽过程中控制温度为22-30℃。苗长出新叶起，每隔10～15天淋施质量分数为0.1％～0.3％的N:P:K＝15:15:15的复混肥。即相对实施例7本实施例移栽时不用消毒液浸泡试管苗与苗床基质未经消毒处理，本实施例的方法移栽成活率大大降低，仅为15.6％，移栽几天后伤口处开始长霉或出现水渍状，容易烂根而影响成活率。

对比例1：

在实施例1的基础上，将增殖培养基的配方替换为：MS+6-BA 1.0mg/L+NAA0.2mg/L+0.1％活性炭，pH 6.0。其它条件保持一致。

本对比例的方法不能实现假鳞茎的增殖。增殖培养后得到单个试管苗。

对比例2：

在实施例1的基础上，将增殖培养基的配方替换为：MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 1.5mg/L+0.1％％活性炭，pH 6.0。其它条件保持一致。

本对比例的方法不能实现假鳞茎的增殖，增殖培养后得到单个试管苗，试管苗生根能力增强，根数增加与生根快。

对比例3：

在实施例1的基础上，将增殖培养基的配方替换为：MS+6-BA 1.0mg/L+KT0.5mg/L+TDZ 0.2mg/L+0.1％活性炭+10％％椰子汁，pH 6.0。其它条件保持一致。

本对比例的方法能实现假鳞茎的增殖，增殖倍数为2.83倍，同时也能实现部分一步成苗，但不是每个假鳞茎均能长根，也就不能直接进行练苗移栽。

尽管本发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用，它完全可以被适用于各种适合本发明的领域，对于熟悉本领域的人员而言，可容易地实现另外的修改，因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下，本发明并不限于特定的细节和这里示出与描述的实施例。

Claims

1.一种鹤顶兰假鳞茎快速繁殖的一步成苗方法，其特征在于，将分化出根芽结构的鹤顶兰原球茎转接至增殖培养基上进行继代培养，继代培养60-70天后得到具有根芽和丛生假鳞茎的增殖苗，所述增殖苗继续继代培养20-30天后得到芽高3-6cm、根长1-2cm的试管苗进行炼苗移栽，所述增殖培养基的配方包括：MS、6-BA 1.0～2.0mg/L、KT 0.5～1.0mg/L、TDZ 0.2～0.6mg/L、NAA0.5～1.5mg/L、活性炭0.1％～0.2％、椰子汁10％～20％，pH为6.0；继代培养的条件为：温度为24-28℃，光照强度为2000Lx，光照时间为10h/天；

还包括至少一次扩繁培养，所述扩繁培养具体是指将所述增殖苗用解剖刀从其基部切分成具有根芽和单个假鳞茎的扩繁苗，将单个扩繁苗转接至新的增殖培养基上增殖培养40-50天形成具有根芽和丛生假鳞茎的另一增殖苗的循环过程。

2.如权利要求1所述的鹤顶兰假鳞茎快速繁殖的一步成苗方法，其特征在于，所述增殖培养基的配方包括：MS、6-BA 2.0mg/L、KT 0.5mg/L、TDZ 0.5mg/L、NAA0.75mg/L、活性炭0.15％、椰子汁15％。

3.如权利要求1所述的鹤顶兰假鳞茎快速繁殖的一步成苗方法，其特征在于，以鹤顶兰成熟未开裂荚果内部的种子为外植体，在萌发培养基上诱导培养至鹤顶兰先萌发后形成分化出根芽结构的原球茎进行继代培养，其中，所述萌发培养基的配方包括：MS、6-BA 0.5mg/L、蔗糖25g/L、琼脂5g/L，pH为6.0，诱导培养的条件为：温度为24-28℃，光照强度为2000Lx，光照时间为10h/天。

4.如权利要求1所述的鹤顶兰假鳞茎快速繁殖的一步成苗方法，其特征在于，所述炼苗移栽具体包括：将所述试管苗在室内开盖炼苗3-5天，取试管苗的根部洗净，用解剖刀将试管苗从基部切分成单个假鳞茎得到多个含有单个假鳞茎的移栽苗，将移栽苗用消毒液浸泡30s后移栽至苗床上，所述消毒液配方为高锰酸钾800倍液与多菌灵1500倍液的混合液，所述苗床为红心土和椰糠按体积比为1:2混合得到的pH为4.5-6.5的基质，移栽前12～24h将基质用质量分数为0.2％～0.3％的高锰酸钾溶液消毒，移栽10天内保持所述苗床的湿度为80％～90％，移栽10天之后保持所述苗床的湿度为60％～80％，移栽过程中控制温度为22-30℃，移栽苗长出新叶起，每隔10～15天淋施质量分数为0.1％～0.3％的N:P:K＝15:15:15的复混肥。

5.如权利要求2所述的鹤顶兰假鳞茎快速繁殖的一步成苗方法，其特征在于，所述增殖培养基的配方还包括：芦荟汁液0.4％～0.6％、山绿茶水5％～10％、中药提取液0.2％～0.4％，所述山绿茶水为山绿茶与沸水按照质量比为1:100冲泡后静置3-4h过滤山绿茶得到，所述中药提取液为圆叶薄荷、仙人掌、积雪草和莳萝按照质量比为1:3:3:1混合后碾碎，加入其重量的3倍的磁化水，混合均匀后置于28-32℃下恒温振荡5h后过滤滤渣得到。