CN105749271A - 一种新城疫鸡胚接种疫苗的制备方法及应用 - Google Patents

一种新城疫鸡胚接种疫苗的制备方法及应用 Download PDF

Info

Publication number
CN105749271A
CN105749271A CN201610098726.2A CN201610098726A CN105749271A CN 105749271 A CN105749271 A CN 105749271A CN 201610098726 A CN201610098726 A CN 201610098726A CN 105749271 A CN105749271 A CN 105749271A
Authority
CN
China
Prior art keywords
chicken
embryo
chicken embryo
inoculation
egg
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201610098726.2A
Other languages
English (en)
Inventor
王红琳
温国元
邵华斌
罗青平
汪宏才
罗玲
张蓉蓉
张腾飞
艾地云
卢琴
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Institute of Animal Science and Veterinary of Hubei Academy of Agricultural Sciences
Original Assignee
Institute of Animal Science and Veterinary of Hubei Academy of Agricultural Sciences
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Institute of Animal Science and Veterinary of Hubei Academy of Agricultural Sciences filed Critical Institute of Animal Science and Veterinary of Hubei Academy of Agricultural Sciences
Priority to CN201610098726.2A priority Critical patent/CN105749271A/zh
Publication of CN105749271A publication Critical patent/CN105749271A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/18011—Paramyxoviridae
    • C12N2760/18111—Avulavirus, e.g. Newcastle disease virus
    • C12N2760/18134—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)

Abstract

本发明公开了一种新城疫鸡胚接种疫苗的制备方法及应用，其制备方法包括以下步骤：将新城疫病毒TS09?C株生产用毒种作适当稀释，接种发育良好的9～10日龄SPF鸡胚，每胚尿囊腔内接种0.1ml；接种后密封针孔，继续孵育，每4～8小时照蛋一次，死亡的鸡胚随时取出，将鸡胚取出，用碘酊消毒气室部位，吸取鸡胚液。收获后的胚液置于灭菌瓶中，加入适宜的抗生素，留样后，结冻保存。将检验合格的若干组鸡胚液滤过，混合于同一容器内，按规定羽份，加一定比例的蔗糖脱脂牛奶作稳定剂，同时加入适宜的抗生素，定量分装，迅速进行冷冻真空干燥。本发明鸡胚免疫方法具有安全、无任何毒副反应、减少应激、免疫效果好和成本低等优点。

Description

一种新城疫鸡胚接种疫苗的制备方法及应用
技术领域
本发明属于鸡病防控技术领域，具体地说，涉及一种新城疫鸡胚接种疫苗的制备方法及应用。
背景技术
新城疫的防控以免疫预防为主。国内外己广泛推广和使用的有灭活苗、中等毒力活疫苗(Ⅰ系)及低毒力活疫苗(Ⅱ系、IV系等)。灭活疫苗免疫效果较好，但需要肌肉注射，费工费时，且影响鸡肉品质；中等毒力活疫苗对雏鸡有较强的毒副反应；低毒力活疫苗使用较方便，毒副作用小，但冷藏条件要求高，常因保存或使用不当而影响疫苗免疫效果；而且现有疫苗均不能用于鸡胚免疫。因此，研发一种可18日龄鸡胚免疫疫苗，使雏鸡提前获得特异性免疫力(即超前免疫)，成为当前防控鸡新城疫的研究热点。现有技术中，急需一种鸡胚接种疫苗的制备方法及应用。
发明内容
为了弥补现有技术中的空白，本发明提出了一种新城疫鸡胚接种疫苗的制备方法及应用，采用本发明的疫苗进行鸡胚免疫，具有安全、无任何毒副反应、减少应激、免疫效果好和成本低等优点。
其技术方案如下：
一种鸡胚接种疫苗的制备方法，包括以下步骤：
步骤1：接种：将新城疫病毒TS09-C株生产用毒种进行适当稀释，接种发育良好的9～10日龄SPF鸡胚，每胚尿囊腔内接种0.1ml，接种后密封针孔，置36～37℃继续孵育，不必翻蛋；
步骤2：孵育和观察：鸡胚接种后，每日照蛋1次，将在48小时前死亡的鸡胚弃去，48小时后，每4～8小时照蛋一次，死亡的鸡胚随时取出，直到96或120小时，不论死亡与否，全部取出，气室向上直立，置于2～8℃冷却；
步骤3：收获：将冷却4～24小时的鸡胚取出，用碘酊消毒气室部位，然后以无菌手术剥除气室部卵壳，揭去卵壳膜，剪破绒毛尿囊膜及羊膜，勿使卵黄破裂，吸取鸡胚液，每若干个鸡胚的胚液混合为一组，收获后的胚液置于灭菌瓶中，加入抗生素，在2～8℃冷库处理4小时以上，留样后，结冻保存，在收获胚液的同时，应逐个检查鸡胚，如胎儿腐败、胚液混浊及有任何污染可疑者弃去不用；
步骤4：疫苗配制：将无菌检验、病毒含量测定合格的若干组鸡胚液滤过，混合于同一无菌容器内，按规定羽份，加入7％蔗糖、16％脱脂牛奶作稳定剂，同时加入抗生素充分摇匀，定量分装，每羽份病毒含量应不低于103.0EID50，分装后迅速进行冷冻真空干燥；
步骤5：疫苗检验：主要包括物理性状、无菌检验、支原体检验、外源病毒检验、鉴别检验、安全检验和效力检验。
优选地，步骤1中将新城疫病毒TS09-C株稀释至10－3或10－4。
优选地，步骤3中抗生素的用量为1000u/ml。
优选地，步骤4中抗生素的用量为1000u/ml。
本发明同时还提供一种上述鸡胚接种疫苗在预防鸡新城疫中的应用。
与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
鸡胚接种方法相对于传统的疫苗接种方法(如滴鼻或点眼、注射、喷雾、饮水、拌料等)来说，具有安全、无任何毒副反应、减少应激、免疫效果好等优点，同时，在养禽业中经鸡胚接种疫苗与雏鸡孵出后接种疫苗相比，因为实现了疫苗接种的机械化和自动化(使用自动消毒、注射、封孔于一体的多头蛋内注射器，与孵化场的落盘同步进行)，免疫剂量仅为现有活疫苗的1/1000，所以不仅节省了疫苗免疫成本，而且减少了劳动力开支。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明的技术方案作进一步详细地说明。
实施例1
一种鸡胚接种疫苗的制备方法，包括以下步骤：
步骤1：接种。将新城疫病毒TS09-C株生产用毒种稀释至10－3，接种发育良好的9日龄SPF鸡胚，每胚尿囊腔内接种0.1ml，接种后密封针孔，置36～37℃继续孵育，不必翻蛋；
步骤2：孵育和观察。鸡胚接种后，每日照蛋1次，将在48小时前死亡的鸡胚弃去，48小时后，每4～8小时照蛋一次，死亡的鸡胚随时取出，直到96或120小时，不论死亡与否，全部取出，气室向上直立，置于2～8℃冷却。
步骤3：收获。将冷却4～24小时的鸡胚取出，用碘酊消毒气室部位，然后以无菌手术剥除气室部卵壳，揭去卵壳膜，剪破绒毛尿囊膜及羊膜，勿使卵黄破裂，吸取鸡胚液，每若干个鸡胚的胚液混合为一组，收获后的胚液置于灭菌瓶中，加入适宜的抗生素(1000u/ml)，在2～8℃冷库处理4小时以上，留样后，结冻保存，在收获胚液的同时，应逐个检查鸡胚，如胎儿腐败、胚液混浊及有任何污染可疑者弃去不用；
步骤4：疫苗配制。将无菌检验、病毒含量测定合格的若干组鸡胚液滤过，混合于同一无菌容器内，按规定羽份，加入7％蔗糖、16％脱脂牛奶作稳定剂，同时加入适宜的抗生素(1000u/ml)，充分摇匀，定量分装，每羽份病毒含量应不低于103.0EID50，分装后迅速进行冷冻真空干燥。
步骤5：疫苗检验。主要包括物理性状、无菌检验、支原体检验、外源病毒检验、鉴别检验、安全检验和效力检验。
实施例2
一种鸡胚接种疫苗的制备方法，包括以下步骤：
步骤1：接种。将新城疫病毒TS09-C株生产用毒种稀释至10－4，接种发育良好的10日龄SPF鸡胚，每胚尿囊腔内接种0.1ml，接种后密封针孔，置36～37℃继续孵育，不必翻蛋；
步骤2：孵育和观察。鸡胚接种后，每日照蛋1次，将在48小时前死亡的鸡胚弃去，48小时后，每4～8小时照蛋一次，死亡的鸡胚随时取出，直到96或120小时，不论死亡与否，全部取出，气室向上直立，置于2～8℃冷却。
步骤3：收获。将冷却4～24小时的鸡胚取出，用碘酊消毒气室部位，然后以无菌手术剥除气室部卵壳，揭去卵壳膜，剪破绒毛尿囊膜及羊膜，勿使卵黄破裂，吸取鸡胚液，每若干个鸡胚的胚液混合为一组，收获后的胚液置于灭菌瓶中，加入适宜的抗生素(1000u/ml)，在2～8℃冷库处理4小时以上，留样后，结冻保存，在收获胚液的同时，应逐个检查鸡胚，如胎儿腐败、胚液混浊及有任何污染可疑者弃去不用；
步骤4：疫苗配制。将无菌检验、病毒含量测定合格的若干组鸡胚液滤过，混合于同一无菌容器内，按规定羽份，加入7％蔗糖、16％脱脂牛奶作稳定剂，同时加入适宜的抗生素(1000u/ml)，充分摇匀，定量分装，每羽份病毒含量应不低于103.0EID50，分装后迅速进行冷冻真空干燥。
步骤5：疫苗检验。主要包括物理性状、无菌检验、支原体检验、外源病毒检验、鉴别检验、安全检验和效力检验。
实施例3
一种鸡胚接种疫苗的制备方法，包括以下步骤：
步骤1：接种。将新城疫病毒TS09-C株生产用毒种稀释至10－3，接种发育良好的10日龄SPF鸡胚，每胚尿囊腔内接种0.1ml，接种后密封针孔，置36～37℃继续孵育，不必翻蛋；
步骤2：孵育和观察。鸡胚接种后，每日照蛋1次，将在48小时前死亡的鸡胚弃去，48小时后，每4～8小时照蛋一次，死亡的鸡胚随时取出，直到96或120小时，不论死亡与否，全部取出，气室向上直立，置于2～8℃冷却。
步骤3：收获。将冷却4～24小时的鸡胚取出，用碘酊消毒气室部位，然后以无菌手术剥除气室部卵壳，揭去卵壳膜，剪破绒毛尿囊膜及羊膜，勿使卵黄破裂，吸取鸡胚液，每若干个鸡胚的胚液混合为一组，收获后的胚液置于灭菌瓶中，加入适宜的抗生素(1000u/ml)，在2～8℃冷库处理4小时以上，留样后，结冻保存，在收获胚液的同时，应逐个检查鸡胚，如胎儿腐败、胚液混浊及有任何污染可疑者弃去不用；
步骤4：疫苗配制。将无菌检验、病毒含量测定合格的若干组鸡胚液滤过，混合于同一无菌容器内，按规定羽份，加入7％蔗糖、16％脱脂牛奶作稳定剂，同时加入适宜的抗生素(1000u/ml)，充分摇匀，定量分装，每羽份病毒含量应不低于103.0EID50，分装后迅速进行冷冻真空干燥。
步骤5：疫苗检验。主要包括物理性状、无菌检验、支原体检验、外源病毒检验、鉴别检验、安全检验和效力检验。
实施例4
实施例1、2、3制备所得的鸡胚接种疫苗的用法与用量：按瓶签注明羽份，用灭菌生理盐水稀释，稀释为每1羽份0.1ml(含103.0EID50)。鸡胚接种：选取发育良好的18日龄鸡胚，检卵后，标出气室边缘和胚胎位置，用碘酊消毒气室上方的蛋壳，在气室上方靠近胚胎侧的卵壳上钻一孔，用7号针头(针长3cm)经孔垂直刺入羊膜腔(避开胚胎)，注入0.1ml疫苗，熔蜡封孔；置于37℃继续孵育。
以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，本发明的保护范围不限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明披露的技术范围内，可显而易见地得到的技术方案的简单变化或等效替换均落入本发明的保护范围内。

Claims (5)

1.一种鸡胚接种疫苗的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1：接种：将新城疫病毒TS09-C株生产用毒种进行适当稀释，接种发育良好的9～10日龄SPF鸡胚，每胚尿囊腔内接种0.1ml，接种后密封针孔，置36～37℃继续孵育，不必翻蛋；
步骤2：孵育和观察：鸡胚接种后，每日照蛋1次，将在48小时前死亡的鸡胚弃去，48小时后，每4～8小时照蛋一次，死亡的鸡胚随时取出，直到96或120小时，不论死亡与否，全部取出，气室向上直立，置于2～8℃冷却；
步骤3：收获：将冷却4～24小时的鸡胚取出，用碘酊消毒气室部位，然后以无菌手术剥除气室部卵壳，揭去卵壳膜，剪破绒毛尿囊膜及羊膜，勿使卵黄破裂，吸取鸡胚液，每若干个鸡胚的胚液混合为一组，收获后的胚液置于灭菌瓶中，加入抗生素，在2～8℃冷库处理4小时以上，留样后，结冻保存，在收获胚液的同时，应逐个检查鸡胚，如胎儿腐败、胚液混浊及有任何污染可疑者弃去不用；
步骤4：疫苗配制：将无菌检验、病毒含量测定合格的若干组鸡胚液滤过，混合于同一无菌容器内，按规定羽份，加入7％蔗糖、16％脱脂牛奶作稳定剂，同时加入抗生素充分摇匀，定量分装，每羽份病毒含量应不低于103.0EID50，分装后迅速进行冷冻真空干燥；
步骤5：疫苗检验：主要包括物理性状、无菌检验、支原体检验、外源病毒检验、鉴别检验、安全检验和效力检验。
2.根据权利要求1中所述的鸡胚接种疫苗的制备方法，其特征在于，步骤1中将新城疫病毒TS09-C株稀释至10－3或10－4。
3.根据权利要求1中所述的鸡胚接种疫苗的制备方法，其特征在于，步骤3中抗生素的用量为1000u/ml。
4.根据权利要求1中所述的鸡胚接种疫苗的制备方法，其特征在于，步骤4中抗生素的用量为1000u/ml。
5.一种权利要求1所述鸡胚接种疫苗在预防鸡新城疫中的应用。
CN201610098726.2A 2016-02-23 2016-02-23 一种新城疫鸡胚接种疫苗的制备方法及应用 Pending CN105749271A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610098726.2A CN105749271A (zh) 2016-02-23 2016-02-23 一种新城疫鸡胚接种疫苗的制备方法及应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610098726.2A CN105749271A (zh) 2016-02-23 2016-02-23 一种新城疫鸡胚接种疫苗的制备方法及应用

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN105749271A true CN105749271A (zh) 2016-07-13

Family

ID=56330264

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201610098726.2A Pending CN105749271A (zh) 2016-02-23 2016-02-23 一种新城疫鸡胚接种疫苗的制备方法及应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN105749271A (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108379575A (zh) * 2018-04-24 2018-08-10 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所 一种以新城疫病毒热稳定毒株制备的灭活疫苗及其制备方法
CN109432414A (zh) * 2018-10-18 2019-03-08 山西省农业科学院畜牧兽医研究所 新城疫鸡胚接种免疫液的制备方法

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102268410A (zh) * 2011-06-17 2011-12-07 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所 一株适应幼仓鼠肾传代细胞的新城疫病毒耐热弱毒株及其制备方法和应用

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102268410A (zh) * 2011-06-17 2011-12-07 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所 一株适应幼仓鼠肾传代细胞的新城疫病毒耐热弱毒株及其制备方法和应用

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
王雅华 邢钊编著: "《兽用生物制品技术》", 30 April 2009 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108379575A (zh) * 2018-04-24 2018-08-10 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所 一种以新城疫病毒热稳定毒株制备的灭活疫苗及其制备方法
CN109432414A (zh) * 2018-10-18 2019-03-08 山西省农业科学院畜牧兽医研究所 新城疫鸡胚接种免疫液的制备方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN111000993B (zh) 一种鸭病毒性肝炎、鸭呼肠孤病毒病二联灭活疫苗及其制备方法
JP7448475B2 (ja) 細胞関連アルファヘルペスウイルスワクチン用の改善された希釈液
CN104946600B (zh) 一种h9亚型禽流感病毒株
CN108992674A (zh) 一种耐热保护剂及其应用
CN109207436B (zh) 一株i群4型禽腺病毒毒株及其应用
CN103495167B (zh) 一种鸡传染性法氏囊病复合活疫苗的制备方法
CN105749271A (zh) 一种新城疫鸡胚接种疫苗的制备方法及应用
CN102965344B (zh) 用细胞系生产鸡传染性支气管炎病毒与疫苗
CN109055320B (zh) 一株传染性支气管炎病毒分离株及在疫苗制备中的应用
CN104195114A (zh) 一种禽肺病毒及其应用
CN112646750B (zh) 一种血清18型鸭疫里默氏杆菌及应用
CN112608382B (zh) 鸭呼肠孤病毒病、鸭病毒性肝炎二联卵黄抗体及其制备方法
US20210162040A1 (en) Triple vaccine against avibacterium paragallinarum and avian encephalomyelitis virus and fowl pox virus
CN110951698A (zh) 禽流感病毒tj株、禽流感灭活疫苗及其制备方法
CN104031888B (zh) 鸡新城疫病毒弱毒株、灭活疫苗及其应用
CN107982532B (zh) 一种鸭甲肝病毒抗原抗体复合物疫苗及其制备方法
CN106075424B (zh) 一种禽流感病毒疫苗
RU2658351C1 (ru) Штамм "гс-11" вируса инфекционного бронхита кур для производства инактивированных сорбированных и эмульгированных вакцин, а также диагностических целей
Banani et al. Isolation of Ornithobacterium rhinotracheale from the brains of commercial broiler breeder chickens with meningitis and encephalitis
CN108624522B (zh) 一种副鸡禽杆菌菌株及其应用
CN106075426B (zh) 一种小鹅瘟病毒疫苗
CN105132497A (zh) 一种重组禽干扰素α成品冻干制剂的制备工艺
TWI580786B (zh) Vaccine of avian VII genotype new disease and its preparation method
RU2744744C1 (ru) Вакцина против манхеймиоза, биберштейниоза и пастереллёза крупного и мелкого рогатого скота ассоциированная инактивированная, способ её получения
Saif et al. Diagnosis of Major Poultry Diseases

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20160713