CN105660392A - 一种半夏块茎的试管培养方法 - Google Patents

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杨跃文
钱子刚
刘小莉
李国栋
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    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
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    • A01G22/00—Cultivation of specific crops or plants not otherwise provided for
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
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Abstract

本发明公开了一种半夏块茎的试管培养方法，包括以下步骤：对半夏的幼嫩的叶和茎进行消毒和培养，培养基MS+BA？1.0mg/L+NAA0.1～0.25mg/L在无光照条件下进行培养，可诱导半夏的茎、叶形成带顶芽的小块茎丛。小块茎移栽一个月内长出单叶、三出复叶、正分化成三出复叶的单叶三种不同的叶形，块茎明显增大，并相应处于不规则块状、圆球形、椭圆形三种成形阶段。本发明是对保护野生半夏资源，降低栽培成本，实现人工集约化栽培，适应不断增长的市场需求的一种可行性尝试。

Description

一种半夏块茎的试管培养方法
技术领域
本发明属于植株培养技术领域，具体涉及一种半夏块茎的试管培养方法。
背景技术
半夏Pinelliaternata(Thunb)Breit.为天南星科植物，块茎入药，为大宗常用中药材。性温，味辛，有毒。归脾、胃、肺经。具有燥湿化痰，降逆止呕，消痞散结之功效。主治咳喘痰多，呕吐反胃，胸脘痞满，头痛眩晕，夜卧不安，瘿瘤痰核，痈疽肿毒。现代药理及临床研究表明：半夏具有抗癌、抗生育和抗早孕、抗心率失常等作用，可治疗食管、贲门癌梗阻，冠心病，宫颈糜烂，寻常疣，急性乳腺炎等症。
半夏生于山地、农田、溪边或林下；分布于我国大部分地区。作为运用广泛的大宗中药材，随着市场用量的有增无减，半夏野生资源逐年锐减，已不能满足日益增长的市场需求，人工栽培势在必行。块茎类药材繁殖率低，种质易退化，自然生长周期长，栽培成本高。
现在半夏的栽培通常采用块茎繁殖、珠芽繁殖、种子繁殖等传统方法。生长周期长、繁殖率低、种质易退化是在半夏生产中突出的问题。
发明内容
本发明的目的是提供一种半夏块茎的试管培养方法，利用组织培养技术，由外植体直接诱导出小块茎，作为种苗栽种，可提高繁殖率，防止种质退化；缩短其生长周期，有效降低栽种成本。
本发明所采用的技术方案是，一种半夏块茎的试管培养方法，包括以下步骤：
步骤1、消毒和接种：取半夏的幼嫩的叶、茎，洗衣粉水洗后，自来水冲洗净，用蒸馏水加吐温-80两滴浸泡10min，在超净工作台内用70％酒精消毒10s，漂白粉过饱和溶液上清液浸泡15min，0.05％砷汞浸泡4～6min，无菌水冲洗4～6次，无菌滤纸吸去表面水分，将叶、茎切一伤口，叶分成1cm×1cm的大小，茎分为1.0～1.5cm长的小段，再将有切口的一面接种到培养基上；
步骤2、诱导愈伤组织和芽分化及生根：在暗培养室培养5～8天后，切口部分逐渐长出淡黄色颗粒状的愈伤组织，到第10～20天时形成多个芽聚生在一起的芽丛，芽的基部逐渐扩大，渐渐长成带顶芽的小块茎丛；第21～30天后，小块茎基部长出根；25～30天继代一次；
步骤3、移栽：培养25～30天后，选取生长好的小块茎，用自来水洗净培养基，移栽入花盆中；移栽大约12天后有苗破土，大约4天后叶片展开，为单叶，大约7天后出现三出复叶；在移栽1个月内长出三种叶形：单叶、三出复叶、正分化成三出复叶的单叶；挖出块茎观察，发现块茎明显增大，并相应处于三种成形阶段：不规则块状、圆球形、椭圆形，即移栽成功。
进一步地，步骤2中暗培养室培养的培养条件为：培养基MS+BA1.0mg/L+NAA0.1～0.25mg/L在无光照条件下进行培养，诱导半夏的茎、叶形成带顶芽的小块茎丛。
本发明的有益效果是：培养诱导形成的带顶芽的半夏块茎与野生半夏在性状、显微特征及理化鉴别等多方面有相似性，初步证实组织培养诱导形成半夏块茎，是对保护野生半夏资源，降低栽培成本，实现人工集约化栽培，适应不断增长的市场需求的一种可行性尝试。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明进行详细说明。
本发明提供一种半夏块茎的试管培养方法，包括以下步骤：
步骤1、消毒和接种：取半夏的幼嫩的叶、茎，洗衣粉水洗后，自来水冲洗净，用蒸馏水加吐温-80两滴浸泡10min，在超净工作台内用70％酒精消毒10s，漂白粉过饱和溶液上清液浸泡15min，0.05％砷汞浸泡4～6min，无菌水冲洗4～6次，无菌滤纸吸去表面水分，将叶、茎切一伤口，叶可分成1cm×1cm的大小，茎可分为1.0～1.5cm长的小段，再将有切口的一面接种到培养基上。
步骤2、诱导愈伤组织和芽分化及生根：在暗培养室培养5～8天后，切口部分逐渐长出淡黄色颗粒状的愈伤组织，到第10～20天时形成多个芽聚生在一起的芽丛，芽的基部逐渐扩大，渐渐长成带顶芽的小块茎丛；第21～30天后，小块茎基部长出根。25～30天可继代一次。
步骤3、移栽：培养25～30天后，选取基部生根的小块茎，用自来水洗净培养基，移栽入花盆中。移栽大约12天后有苗破土，大约4天后叶片展开，为单叶，大约7天后出现三出复叶。在移栽1个月内长出三种叶形：单叶、三出复叶、正分化成三出复叶的单叶。挖出块茎观察，发现块茎明显增大，并相应处于三种成形阶段：不规则块状、圆球形、椭圆形。
在上述制备方法中，有以下优点：
1、培养基MS+BA1.0mg/L+NAA0.1～0.25mg/L在无光照条件下进行培养，可诱导半夏的茎、叶形成带顶芽的小块茎丛。25～30天可继代。
2、培养出来的小块茎，可以直接移栽，1个月内长出三种叶形：单叶、三出复叶、正分化成三出复叶的单叶。块茎明显增大，并相应处于三种成形阶段：不规则块状、圆球形、椭圆形。
3、在无光照条件下诱导半夏的茎、叶形成带顶芽的小块茎丛，一方面，暗培养无需光照；另一方面，块茎可直接移栽，省去炼苗过程。这个培养方法和常规的植物组织培养相比较，可以节约用电，节省人工。
4、移栽试验初步验证组培半夏块茎缩短了药材生长周期，对半夏的规模化种植可能是一种有益的尝试。
培养基MS+BA1.0mg/L+NAA0.1～0.25mg/L在无光照条件下进行培养，可诱导半夏的茎、叶形成带顶芽的小块茎丛。通常情况下，半夏在第一年只长一片叶，第2年才长出三出复叶，本发明的培养方法小块茎移栽一个月内长出单叶、三出复叶、正分化成三出复叶的单叶三种不同的叶形，块茎明显增大，并相应处于不规则块状、圆球形、椭圆形三种成形阶段。初步验证组培半夏块茎缩短了药材生长周期，对半夏的规模化种植可能是一种有益的尝试。

Claims (2)

1.一种半夏块茎的试管培养方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤1、消毒和接种：取半夏的幼嫩的叶、茎，洗衣粉水洗后，自来水冲洗净，用蒸馏水加吐温-80两滴浸泡10min，在超净工作台内用70％酒精消毒10s，漂白粉过饱和溶液上清液浸泡15min，0.05％砷汞浸泡4～6min，无菌水冲洗4～6次，无菌滤纸吸去表面水分，将叶、茎切一伤口，叶分成1cm×1cm的大小，茎分为1.0～1.5cm长的小段，再将有切口的一面接种到培养基上；
步骤2、诱导愈伤组织和芽分化及生根：在暗培养室培养5～8天后，切口部分逐渐长出淡黄色颗粒状的愈伤组织，到第10～20天时形成多个芽聚生在一起的芽丛，芽的基部逐渐扩大，渐渐长成带顶芽的小块茎丛；第21～30天后，小块茎基部长出根；25～30天继代一次；
步骤3、移栽：培养25～30天后，选取生长好的小块茎，用自来水洗净培养基，移栽入花盆中；移栽大约12天后有苗破土，大约4天后叶片展开，为单叶，大约7天后出现三出复叶；在移栽1个月内长出三种叶形：单叶、三出复叶、正分化成三出复叶的单叶；挖出块茎观察，发现块茎明显增大，并相应处于三种成形阶段：不规则块状、圆球形、椭圆形，即移栽成功。
2.根据权利要求1所述的半夏块茎的试管培养方法，其特征在于，所述步骤2中暗培养室培养的培养条件为：培养基MS+BA1.0mg/L+NAA0.1～0.25mg/L在无光照条件下进行培养，诱导半夏的茎、叶形成带顶芽的小块茎丛。
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Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110278871A (zh) * 2019-07-01 2019-09-27 长江大学 利用荆半夏组培丛生苗一步成种的组培方法
CN111202006A (zh) * 2020-04-15 2020-05-29 广西壮族自治区农业科学院 一种以半夏愈伤组织诱导块茎的方法

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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110278871A (zh) * 2019-07-01 2019-09-27 长江大学 利用荆半夏组培丛生苗一步成种的组培方法
CN110278871B (zh) * 2019-07-01 2021-03-23 长江大学 利用荆半夏组培丛生苗一步成种的组培方法
CN111202006A (zh) * 2020-04-15 2020-05-29 广西壮族自治区农业科学院 一种以半夏愈伤组织诱导块茎的方法
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