CN105660187A - 一种无菌蚕虫草菌种的接种系统及接种方法 - Google Patents

Abstract

<b>本发明公开了</b><b>一种无菌蚕虫草菌种的接种系统，</b><b>包括发酵罐、带封口的接种瓶，所述接种系统还包括设于所述发酵罐与所述接种瓶间的接种装置、设置在所述发酵罐上的空气过滤器，通过所述空气过滤器将空气过滤后向所述发酵罐内吹氧，所述接种装置的入口端通过连接管连接在所述发酵罐的出口端上，所述接种装置的出口端上还连接有接种软管，所述接种软管的另一端上还连接有可穿过所述接种瓶上的封口、将菌种喷施到所述接种瓶内的喷施件。采用本发明的接种系统在接种过程中，有效地隔绝了菌种与外界环境的接触，杜绝了杂菌的产生，有利于虫草的生长，同时提高了接种效率、降低了劳动强度。</b>

Description

一种无菌蚕虫草菌种的接种系统及接种方法

技术领域

本发明涉及一种虫草培育技术领域，特别涉及一种无菌蚕虫草菌种的接种系统及接种方法。

背景技术

现有技术中，在虫草的培育过程中，在接种时，因整个环境不是完全封闭的，从而导致在接种过程中，菌种与外界环境相接触，导致杂菌的产生，不利于虫草的生长。而目前，在专利号为201120081412.4的一种封闭式发酵罐接种系统中，提出了在盛种钢瓶与发酵罐之间增加一封闭连接单元，以确保将盛种钢瓶中的菌种导入发酵罐内的整个过程中，处于一封闭的环境，有效地防止了在倒菌种的过程中，原始菌种与外界环境相接触。但是在将发酵罐内的菌种接种至接种瓶内的这一过程中，通常仍是采用将发酵罐内的菌种倒至接种喷壶中，而后通过接种喷壶将菌种喷施到接种瓶内，再进行接种。在此过程中，通常需要将接种瓶内的封口掀开，将喷壶的喷嘴伸入接种瓶内进行接种。此方法，不仅造成了接种时，菌种与外界环境相接触，导致在虫草的培育过程中产生杂菌；同时采用喷壶在喷施过程中，喷施速度慢，耗费人工。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种无菌蚕虫草菌种的接种系统，该接种系统确保了发酵罐内的菌种在接种过程中处于一封闭的系统，有效地杜绝了菌种与空气的接触，杜绝了杂菌的产生。

为达到上述目的，本发明采用的技术方案是：一种无菌蚕虫草菌种的接种系统，包括发酵罐、带封口的接种瓶，所述接种系统还包括设于所述发酵罐与所述接种瓶间的接种装置、设置在所述发酵罐上的空气过滤器，通过所述空气过滤器将空气过滤后向所述发酵罐内吹氧，所述接种装置的入口端通过连接管连接在所述发酵罐的出口端上，所述接种装置的出口端上还连接有接种软管，所述接种软管的另一端上还连接有可穿过所述接种瓶上的封口、将菌种喷施到所述接种瓶内的喷施件。

优选地，所述接种装置为抽吸泵。

优选地，所述的喷施件为注射针头。

本发明的另一个目的是提供一种无菌蚕虫草菌种的接种方法，所述接种过程在上述接种系统中进行，具体步骤如下：

1）在发酵罐内加入50kg营养液，在0.10~0.12Mpa、120~125℃条件下进行灭菌，灭菌后，降低发酵罐内温度至19~22℃；

2）将待接种的母种稀释7~8倍后，取稀释液800~1000ml倒入所述发酵罐中，反应2~3天；

3）在22~23℃条件下，通过所述发酵罐上的空气过滤器向所述发酵罐内吹氧，使得母种在所述发酵罐内长菌丝；

4）经48~72小时后，通过所述接种装置将菌丝接种至所述接种瓶内；

其中，步骤1）中的营养液的配制方法如下：1L水中加入玉米粉250~350g、葡萄糖15~25g、柠檬酸三胺0.9~1.2g、硫酸镁0.9~1.2g、维生素B ₁ 25~50mg、维生素B ₁₂ 25~50mg。

优选地，步骤2）中的所述母种是通过如下步骤制得的：

a）制备培养基：将200~250g土豆、8~15g蚕蛹粉加入1000ml水中，烧开30~50min，过滤去渣，补水至1000ml，加入葡萄糖20~25g、柠檬酸三胺0.8~1.1g、硫酸镁0.8~1g、磷酸二氢钾2.5~3.5g、维生素B ₁ 30~40mg、维生素B ₁₂ 30~40mg、亚硒酸钠盐0.8~1g、琼脂15~20g，微火熔化，调节pH6.5~7.5间；

b）将配置好的培养基趁热加入空白试管中，试管口用牛皮纸或无纺布包扎，进行高压灭菌，将灭菌后的试管在55~65℃时取出，倾斜放置、自然冷却成为斜面；

c）将野生虫草菌种接种至斜面上，接种后在常温下生长15~20天后，转色即可用于生产。

进一步优选地，步骤a）所制备的培养基的pH值在6.5~7.0间。

由于上述技术方案的运用，本发明与现有技术相比具有下列优点：本发明的无菌蚕虫草菌种的接种系统，通过在发酵罐与接种瓶间增加了一接种装置，通过该接种装置，使得发酵罐内的菌种在接种至接种瓶内的过程中，不会与外界环境相接触，有效地防止了杂菌的产生，有利于虫草的生长；而采用的接种方法简单、易于操作，接种后，虫草在生长过程中，不易产生杂菌，有效地提高了虫草的营养成分含量。

附图说明

附图1为本发明所述的无菌蚕虫草菌种的接种系统的结构示意图；

其中：1、发酵罐；2、接种装置（抽吸泵）；3、接种瓶；4、连接管；5、接种软管；6、喷施件（注射针头）；7、盛种钢瓶。

具体实施方式

下面结合附图及具体实施例来对本发明的技术方案作进一步的阐述。

参见图1所示，一种无菌蚕虫草菌种的接种系统，包括发酵罐1、带封口的接种瓶3，以及设于该发酵罐1与接种瓶3间的接种装置2、设置在发酵罐1上的空气过滤器，通过空气过滤器将空气过滤后向发酵罐1内吹氧，该接种装置2的入口端通过连接管4连接在发酵罐1的出口端上，该接种装置2的出口端上还连接有接种软管5，该接种软管5的另一端上还连接有可穿过接种瓶3上的封口、将菌种喷施到接种瓶3内的喷施件6。

在本例中，该接种装置2为抽吸泵2，该喷施件6为注射针头6。

具体操作时，1）先对接种过程中所有需用到的各部件进行消毒、灭菌处理。在发酵罐1内加入营养液，在121℃、0.12Mpa的环境中进行高温灭菌，灭菌结束后，降温至19~22℃；

2）而后将母种稀释7~8倍，取800ml母种稀释液倒入可以采用火焰圈法或是在盛种钢瓶7与发酵罐1间增加专利号为201120081412.4中提到的封闭连接单元来进行倒种，从而在倒种过程中，有效地防止了原始菌种与外界环境相接触，杜绝了发酵罐1内杂菌的产生；

3）倒母种后，通过空气过滤器向发酵罐1内吹氧，在22~25℃温度条件下，使菌种发酵、长菌丝，经48~72小时后，即可接种；

4）接种时，将抽吸泵2通过连接管4连接在发酵罐1的出口端上，而后启动抽吸泵2，通过接种软管5向接种瓶3内接种。因接种时，采用的是软管，同时采用的喷施件6为注射针头6，从而在接种过程中，抓住接种软管5的带注射针头6一端的端部旋转360°，即可将菌种均匀地接种至接种瓶3内，且不会造成接种瓶3内半边接到菌种、半边未接到菌种的情况发生；同时，有效地提高了接种速度，降低了劳动强度。

这里的营养液的配制方法如下：1L水中加入玉米粉250~350g、葡萄糖15~25g、柠檬酸三胺0.9~1.2g、硫酸镁0.9~1.2g、维生素B ₁ 25~50mg、维生素B ₁₂ 25~50mg。

这里的母种是通过如下步骤制得的：

a）制备培养基：将200~250g土豆、8~15g蚕蛹粉加入1000ml水中，烧开30~50min，过滤去渣，补水至1000ml，加入葡萄糖20~25g、柠檬酸三胺0.8~1.1g、硫酸镁0.8~1g、磷酸二氢钾2.5~3.5g、维生素B ₁ 30~40mg、维生素B ₁₂ 30~40mg、亚硒酸钠盐0.8~1g、琼脂15~20g，微火熔化，调节pH6.5~7.5间；

b）将配置好的培养基趁热加入空白试管中，试管口用牛皮纸或无纺布包扎，进行高压灭菌，将灭菌后的试管在55~65℃时取出，倾斜放置、自然冷却成为斜面；

c）将野生虫草菌种接种至斜面上，接种后在常温下生长15~20天后，转色即可用于生产。

采用本发明的无菌蚕虫草菌种的接种系统，在接种时，有效地杜绝了菌种与外界环境相接触，杜绝了杂菌的产生，同时通过该接种装置，有效地克服了现有技术的不足，提高了接种效率、降低了劳动强度。

上述实施例只为说明本发明的技术构思及特点，其目的在于让熟悉此项技术的人士能够了解本发明的内容并加以实施，并不能以此限制本发明的保护范围，凡根据本发明精神实质所作的等效变化或修饰，都应涵盖在本发明的保护范围内。

Claims (6)

1.一种无菌蚕虫草菌种的接种系统，包括发酵罐、带封口的接种瓶，其特征在于，所述接种系统还包括设于所述发酵罐与所述接种瓶间的接种装置、设置在所述发酵罐上的空气过滤器，通过所述空气过滤器将空气过滤后向所述发酵罐内吹氧，所述接种装置的入口端通过连接管连接在所述发酵罐的出口端上，所述接种装置的出口端上还连接有接种软管，所述接种软管的另一端上还连接有可穿过所述接种瓶上的封口、将菌种喷施到所述接种瓶内的喷施件。

2.根据权利要求1所述的无菌蚕虫草菌种的接种系统，其特征在于，所述接种装置为抽吸泵。

3.根据权利要求1或2所述的无菌蚕虫草菌种的接种系统，其特征在于，所述的喷施件为注射针头。

4.一种无菌蚕虫草菌种的接种方法，其特征在于，所述接种过程在权利要求1中所述的接种系统中进行，具体步骤如下：

1）在发酵罐内加入50kg营养液，在0.10~0.12Mpa、120~125℃条件下进行灭菌，灭菌后，降低发酵罐内温度至19~22℃；

2）将待接种的母种稀释7~8倍后，取稀释液800~1000ml倒入所述发酵罐中，反应2~3天；

3）在22~23℃条件下，通过所述发酵罐上的空气过滤器向所述发酵罐内吹氧，使得母种在所述发酵罐内长菌丝；

4）经48~72小时后，通过所述接种装置将菌丝接种至所述接种瓶内；

其中，步骤1）中的营养液的配制方法如下：1L水中加入玉米粉250~350g、葡萄糖15~25g、柠檬酸三胺0.9~1.2g、硫酸镁0.9~1.2g、维生素B₁25~50mg、维生素B₁₂25~50mg。

5.根据权利要求4所述的无菌蚕虫草菌种的接种方法，其特征在于，步骤2）中的所述母种是通过如下步骤制得的：

a）制备培养基：将200~250g土豆、8~15g蚕蛹粉加入1000ml水中，烧开30~50min，过滤去渣，补水至1000ml，加入葡萄糖20~25g、柠檬酸三胺0.8~1.1g、硫酸镁0.8~1g、磷酸二氢钾2.5~3.5g、维生素B₁30~40mg、维生素B₁₂30~40mg、亚硒酸钠盐0.8~1g、琼脂15~20g，微火熔化，调节pH6.5~7.5间；

b）将配置好的培养基趁热加入空白试管中，试管口用牛皮纸或无纺布包扎，进行高压灭菌，将灭菌后的试管在55~65℃时取出，倾斜放置、自然冷却成为斜面；

c）将野生虫草菌种接种至斜面上，接种后在常温下生长15~20天后，转色即可用于生产。

6.根据权利要求5所述的无菌蚕虫草菌种的接种方法，其特征在于，步骤a）所制备的培养基的pH值在6.5~7.0间。