CN104823701A - 一种富硒羊肚菌深层发酵工艺 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种富硒羊肚菌深层发酵工艺，该富硒羊肚菌深层发酵工艺包括羊肚菌母种的转接及活化-接种到摇瓶深层发酵培养基中-加入亚硒酸钠-深层发酵培养-富硒羊肚菌菌丝体，本发明该发酵工艺简单易行，发酵效率高，成本低廉，制备出的富硒羊肚菌含硒高，产量高，安全系数好。
Description
技术领域
本发明属于食用菌培养技术领域，涉及一种羊肚菌的培养工艺，具体涉及一种富硒羊肚菌深层发酵工艺。
背景技术
利用食用菌对微量元素进行富集，所得到的有机态微量元素，比较容易被人体吸收利用；同时它在富集微量元素时表现出良好的稳定性，这种富集了微量元素的食用菌不仅便于贮存、运输，同时也避免了营养成分损失；人体对微量元素的摄取，在限制范围内对人体并无毒副作用；所以，现在越来越多的科研工作者们对食用菌富集微量元素进行了广泛的研究；目前以食用菌为载体，通过喷洒或者施加含硒肥料的方式对灵芝、金针菇、平菇、香菇和猴头菌等进行了人工培养，这种方式得到的富硒食用菌，不仅富集硒的程度低，而且其产量和安全系数也比较低；羊肚菌的子实体和菌丝体均含有丰富的营养成分，其氨基酸含量为食用菌之首，共含有 19 种氨基酸，是一种高营养低热量的高级营养滋补佳品，同时国内外均未实现羊肚菌商业化栽培，也没有利用发酵法获取富硒羊肚菌多糖的报道。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是，针对以上现有技术存在的缺点，提出一种富硒羊肚菌深层发酵工艺，该发酵工艺简单易行，发酵效率高，成本低廉，制备出的富硒羊肚菌含硒高，产量高，安全系数好。
本发明解决以上技术问题的技术方案是：
一种富硒羊肚菌深层发酵工艺，该深层发酵工艺的流程为：羊肚菌母种的转接及活化-接种到摇瓶深层发酵培养基中-加入亚硒酸钠-深层发酵培养-富硒羊肚菌菌丝体，其中：
（1）羊肚菌母种的转接，将母种转接在配制好的斜面培养基上具体为：首先将接种环、酒精灯、酒精棉球、打火机以及斜面培养基放在净化工作台里，打开紫外灯，对它们进行紫外照射杀菌20-28min，关闭紫外灯，然后从冰箱中取出保藏的母种，接种时先将接种环用酒精灯的火焰反复灼烧，待冷却后用接种环挑取母种，并快速接种至预先配制好的斜面培养基上，接种完成后，将斜面培养基的试管口用火焰进行杀菌，然后塞入棉塞或胶塞，将接种后的菌种放入恒温恒湿箱中，控制温度为24℃，静置培养1-3天，然后将其放入0-3℃的冰箱中保藏；
羊肚菌母种的活化，活化前要将接种环、酒精灯、酒精棉球、打火机以及配制好的斜面培养基放在净化工作台里，打开紫外灯，对相关的接种器具进行紫外照射杀菌28-35min，然后从冰箱中取出保藏的要活化的菌种，开始接种前先将净化工作台的紫外灯关闭，双手用酒精棉球进行消毒，接种时先将接种环用酒精灯的火焰反复灼烧，待冷却后用接种环挑取菌种的菌丝块，并快速接种至预先配制好的斜面培养基上，接种完毕后，将斜面培养基的试管口用火焰进行杀菌，然后方可塞入棉塞或胶塞；接种结束后，将接种后的菌种放入恒温恒湿箱中，设定温度为 25℃，静置培养24-48h即可完成菌种的活化；
其中，羊肚菌母种转接和活化时的斜面培养基按质量份数计包括以下组分：马铃薯：20-25份，葡萄糖：1-2份，琼脂：1-2份，磷酸二氢钾：0.2-0.5份，硫酸镁0.1-0.3份，蒸馏水10-20份；
（2）接种到摇瓶深层发酵培养基中，先配制深层发酵培养基，深层发酵培养基按质量份数计包括以下成份：亚硒酸钠5-10份，磷酸二氢钾：0.1-0.3份，蒸馏水：5-8份，硫酸镁：1-2份，黄豆粉：2-3份，麦麸：3-5份，玉米粉：1-3份；
深层发酵培养基的制备具体为：首先把麦麸、玉米粉、黄豆粉放入烧杯中，加水煮沸 25-29min，然后用纱布滤去杂质，加入磷酸二氢钾和硫酸镁，加水定容至100mL，再加热 7-10min，待所有药品充分溶解后，装入500ml的摇瓶中，放到灭菌锅里，在 121℃的条件下对其进行灭菌，20-26min 后取出，放入净化工作台中打开紫外杀菌灯，杀菌28-35min，等待其自然冷却，冷却后向摇瓶中中加入亚硒酸钠制得深层发酵培养基；
在净化工作台上，打开紫外灯，对相关的接种器具进行紫外照射杀菌30-35min，对接种环反复灼烧，然后从活化的斜面菌种中取一块接入液态深层发酵培养基中，然后用注射器向深层发酵培养基加入亚硒酸钠，最后将摇瓶的瓶口放在酒精灯的火焰上方消毒，然后塞上棉塞，并用消毒后的报纸将瓶口封严，把接入羊肚菌菌种后的摇瓶放入振荡培养箱中，控制培养温度为25-27℃，振荡培养箱转速为90-100r/min，振荡2-4天后取出，得到富硒羊肚菌菌丝体。
本发明进一步限定的技术方案为：
前述富硒羊肚菌深层发酵工艺中，在步骤（1）母种在转接时每支斜面培养基能用接种环接种2块母种，菌种在活化时每支斜面培养基能用接种环接种2块菌丝块。
前述富硒羊肚菌深层发酵工艺中，斜面培养基的制备具体为：首先把马铃薯洗净并去皮，用刀把马铃薯切块，大小均一，然后按照配方中的标准加入蒸馏水，煮沸30min后，用纱布对马铃薯溶液进行过滤，然后加入葡萄糖、琼脂、磷酸二氢钾和硫酸镁，然后加水定容至 100mL，再加热5-10min，待所有药品充分溶解后，装入试管中，放到灭菌锅里，在 120-125℃的条件下对其进行灭菌，灭菌25-30min后取出，放入净化工作台中打开紫外杀菌灯，杀菌24-28min 最后自然冷却至室温得到斜面培养基。
前述富硒羊肚菌深层发酵工艺中，富硒羊肚菌深层发酵得到的富硒羊肚菌菌丝生物量为9-10g/L，富硒羊肚菌多糖得率为3-5%，硒含量为9.0-9.3μg/mL。
本发明的有益效果是：
液态深层发酵培养基在灭菌后即可进行接种，采用 500ml 的摇瓶，液态深层发酵培养基可以装入 100 至 200mL，但不宜超过摇瓶容积的一半，因为在液态深层发酵过程中，应给予培养基中足够的氧气，否则容易抑制羊肚菌的生长。
在羊肚菌母种的转接盒活化，以及菌种在深层发酵培养基接种时，都统一的对接种环进行反复灼烧，是为了避免每次接种时染菌，导致日后羊肚菌菌种的非正常生长，提高了工作效率，降低了成本。
本发明中深层发酵培养基选用亚硒酸钠、磷酸二氢钾、蒸馏水、硫酸镁、黄豆粉、麦麸以及玉米粉，麦麸、黄豆粉、玉米粉它们不仅取材容易而且成本低廉，同时营养成分很丰富，在麦麸中含有丰富的碳源和氮源，有助于深层发酵过程中富硒羊肚菌菌丝体的生长季其多糖的合成，羊肚菌在含有黄豆粉和玉米粉的培养基中可以较好的生长，玉米粉还有多种复合因子，对富硒羊肚菌菌丝体的生长有促进作用，这些原材料价格低廉，且还是复合氮源。
具体实施方式
实施例1
本实施例提供一种富硒羊肚菌深层发酵工艺，该深层发酵工艺的流程为：羊肚菌母种的转接及活化-接种到摇瓶深层发酵培养基中-加入亚硒酸钠-深层发酵培养-富硒羊肚菌菌丝体，其中：
（1）羊肚菌母种的转接，将母种转接在配制好的斜面培养基上具体为：首先将接种环、酒精灯、酒精棉球、打火机以及斜面培养基放在净化工作台里，打开紫外灯，对它们进行紫外照射杀菌25min，关闭紫外灯，然后从冰箱中取出保藏的母种，接种时先将接种环用酒精灯的火焰反复灼烧，待冷却后用接种环挑取母种，能用接种环接种2块母种，并快速接种至预先配制好的斜面培养基上，接种完成后，将斜面培养基的试管口用火焰进行杀菌，然后塞入棉塞或胶塞，将接种后的菌种放入恒温恒湿箱中，控制温度为24℃，静置培养1天，然后将其放入2℃的冰箱中保藏；
羊肚菌母种的活化，活化前要将接种环、酒精灯、酒精棉球、打火机以及配制好的斜面培养基放在净化工作台里，打开紫外灯，对相关的接种器具进行紫外照射杀菌35min，然后从冰箱中取出保藏的要活化的菌种，开始接种前先将净化工作台的紫外灯关闭，双手用酒精棉球进行消毒，接种时先将接种环用酒精灯的火焰反复灼烧，待冷却后用接种环挑取菌种的菌丝块，能用接种环接种2块菌丝块，并快速接种至预先配制好的斜面培养基上，接种完毕后，将斜面培养基的试管口用火焰进行杀菌，然后方可塞入棉塞或胶塞；接种结束后，将接种后的菌种放入恒温恒湿箱中，设定温度为 25℃，静置培养32h即可完成菌种的活化；
其中，羊肚菌母种转接和活化时的斜面培养基按质量份数计包括以下组分：马铃薯：20份，葡萄糖：2份，琼脂：1份，磷酸二氢钾：0.5份，硫酸镁0.1份，蒸馏水15份；
斜面培养基的制备具体为：首先把马铃薯洗净并去皮，用刀把马铃薯切块，大小均一，然后按照配方中的标准加入蒸馏水，煮沸30min后，用纱布对马铃薯溶液进行过滤，然后加入葡萄糖、琼脂、磷酸二氢钾和硫酸镁，然后加水定容至 100mL，再加热8min，待所有药品充分溶解后，装入试管中，放到灭菌锅里，在 121℃的条件下对其进行灭菌，灭菌25min后取出，放入净化工作台中打开紫外杀菌灯，杀菌28min 最后自然冷却至室温得到斜面培养基；
（2）接种到摇瓶深层发酵培养基中，先配制深层发酵培养基，深层发酵培养基按质量份数计包括以下成份：亚硒酸钠5份，磷酸二氢钾：0.3份，蒸馏水：8份，硫酸镁：1份，黄豆粉：3份，麦麸：4份，玉米粉：3份；
深层发酵培养基的制备具体为：首先把麦麸、玉米粉、黄豆粉放入烧杯中，加水煮沸 25min，然后用纱布滤去杂质，加入磷酸二氢钾和硫酸镁，加水定容至100mL，再加热 7min，待所有药品充分溶解后，装入500ml的摇瓶中，放到灭菌锅里，在 121℃的条件下对其进行灭菌，23min 后取出，放入净化工作台中打开紫外杀菌灯，杀菌35min，等待其自然冷却，冷却后向摇瓶中中加入亚硒酸钠制得深层发酵培养基；
在净化工作台上，打开紫外灯，对相关的接种器具进行紫外照射杀菌30min，对接种环反复灼烧，然后从活化的斜面菌种中取一块接入液态深层发酵培养基中，然后用注射器向深层发酵培养基加入亚硒酸钠，最后将摇瓶的瓶口放在酒精灯的火焰上方消毒，然后塞上棉塞，并用消毒后的报纸将瓶口封严，把接入羊肚菌菌种后的摇瓶放入振荡培养箱中，控制培养温度为27℃，振荡培养箱转速为100r/min，振荡4天后取出，得到富硒羊肚菌菌丝体；
富硒羊肚菌深层发酵得到的富硒羊肚菌菌丝生物量为9g/L，富硒羊肚菌多糖得率为4%，硒含量为9.3μg/mL。
实施例2
本实施例提供一种富硒羊肚菌深层发酵工艺，该深层发酵工艺的流程为：羊肚菌母种的转接及活化-接种到摇瓶深层发酵培养基中-加入亚硒酸钠-深层发酵培养-富硒羊肚菌菌丝体，其中：
（1）羊肚菌母种的转接，将母种转接在配制好的斜面培养基上具体为：首先将接种环、酒精灯、酒精棉球、打火机以及斜面培养基放在净化工作台里，打开紫外灯，对它们进行紫外照射杀菌28min，关闭紫外灯，然后从冰箱中取出保藏的母种，接种时先将接种环用酒精灯的火焰反复灼烧，待冷却后用接种环挑取母种，能用接种环接种2块母种，并快速接种至预先配制好的斜面培养基上，接种完成后，将斜面培养基的试管口用火焰进行杀菌，然后塞入棉塞或胶塞，将接种后的菌种放入恒温恒湿箱中，控制温度为24℃，静置培养3天，然后将其放入0℃的冰箱中保藏；
羊肚菌母种的活化，活化前要将接种环、酒精灯、酒精棉球、打火机以及配制好的斜面培养基放在净化工作台里，打开紫外灯，对相关的接种器具进行紫外照射杀菌28min，然后从冰箱中取出保藏的要活化的菌种，开始接种前先将净化工作台的紫外灯关闭，双手用酒精棉球进行消毒，接种时先将接种环用酒精灯的火焰反复灼烧，待冷却后用接种环挑取菌种的菌丝块，能用接种环接种2块菌丝块，并快速接种至预先配制好的斜面培养基上，接种完毕后，将斜面培养基的试管口用火焰进行杀菌，然后方可塞入棉塞或胶塞；接种结束后，将接种后的菌种放入恒温恒湿箱中，设定温度为 25℃，静置培养24h即可完成菌种的活化；
其中，羊肚菌母种转接和活化时的斜面培养基按质量份数计包括以下组分：马铃薯：25份，葡萄糖：1份，琼脂：2份，磷酸二氢钾：0.2份，硫酸镁0.2份，蒸馏水20份；
斜面培养基的制备具体为：首先把马铃薯洗净并去皮，用刀把马铃薯切块，大小均一，然后按照配方中的标准加入蒸馏水，煮沸30min后，用纱布对马铃薯溶液进行过滤，然后加入葡萄糖、琼脂、磷酸二氢钾和硫酸镁，然后加水定容至 100mL，再加热5min，待所有药品充分溶解后，装入试管中，放到灭菌锅里，在 120℃的条件下对其进行灭菌，灭菌30min后取出，放入净化工作台中打开紫外杀菌灯，杀菌26min 最后自然冷却至室温得到斜面培养基；
（2）接种到摇瓶深层发酵培养基中，先配制深层发酵培养基，深层发酵培养基按质量份数计包括以下成份：亚硒酸钠10份，磷酸二氢钾：0.1份，蒸馏水：5份，硫酸镁：2份，黄豆粉：2份，麦麸：5份，玉米粉：2份；
深层发酵培养基的制备具体为：首先把麦麸、玉米粉、黄豆粉放入烧杯中，加水煮沸 29min，然后用纱布滤去杂质，加入磷酸二氢钾和硫酸镁，加水定容至100mL，再加热 8min，待所有药品充分溶解后，装入500ml的摇瓶中，放到灭菌锅里，在 121℃的条件下对其进行灭菌，20min 后取出，放入净化工作台中打开紫外杀菌灯，杀菌28min，等待其自然冷却，冷却后向摇瓶中中加入亚硒酸钠制得深层发酵培养基；
在净化工作台上，打开紫外灯，对相关的接种器具进行紫外照射杀菌32min，对接种环反复灼烧，然后从活化的斜面菌种中取一块接入液态深层发酵培养基中，然后用注射器向深层发酵培养基加入亚硒酸钠，最后将摇瓶的瓶口放在酒精灯的火焰上方消毒，然后塞上棉塞，并用消毒后的报纸将瓶口封严，把接入羊肚菌菌种后的摇瓶放入振荡培养箱中，控制培养温度为26℃，振荡培养箱转速为95r/min，振荡2天后取出，得到富硒羊肚菌菌丝体；
富硒羊肚菌深层发酵得到的富硒羊肚菌菌丝生物量为10g/L，富硒羊肚菌多糖得率为3%，硒含量为9.0μg/mL。
实施例3
本实施例提供一种富硒羊肚菌深层发酵工艺，该深层发酵工艺的流程为：羊肚菌母种的转接及活化-接种到摇瓶深层发酵培养基中-加入亚硒酸钠-深层发酵培养-富硒羊肚菌菌丝体，其中：
（1）羊肚菌母种的转接，将母种转接在配制好的斜面培养基上具体为：首先将接种环、酒精灯、酒精棉球、打火机以及斜面培养基放在净化工作台里，打开紫外灯，对它们进行紫外照射杀菌20min，关闭紫外灯，然后从冰箱中取出保藏的母种，接种时先将接种环用酒精灯的火焰反复灼烧，待冷却后用接种环挑取母种，能用接种环接种2块母种，并快速接种至预先配制好的斜面培养基上，接种完成后，将斜面培养基的试管口用火焰进行杀菌，然后塞入棉塞或胶塞，将接种后的菌种放入恒温恒湿箱中，控制温度为24℃，静置培养2天，然后将其放入3℃的冰箱中保藏；
羊肚菌母种的活化，活化前要将接种环、酒精灯、酒精棉球、打火机以及配制好的斜面培养基放在净化工作台里，打开紫外灯，对相关的接种器具进行紫外照射杀菌30min，然后从冰箱中取出保藏的要活化的菌种，开始接种前先将净化工作台的紫外灯关闭，双手用酒精棉球进行消毒，接种时先将接种环用酒精灯的火焰反复灼烧，待冷却后用接种环挑取菌种的菌丝块，能用接种环接种2块菌丝块，并快速接种至预先配制好的斜面培养基上，接种完毕后，将斜面培养基的试管口用火焰进行杀菌，然后方可塞入棉塞或胶塞；接种结束后，将接种后的菌种放入恒温恒湿箱中，设定温度为 25℃，静置培养48h即可完成菌种的活化；
其中，羊肚菌母种转接和活化时的斜面培养基按质量份数计包括以下组分：马铃薯：22份，葡萄糖：2份，琼脂：1份，磷酸二氢钾：0.3份，硫酸镁0.3份，蒸馏水10份；
斜面培养基的制备具体为：首先把马铃薯洗净并去皮，用刀把马铃薯切块，大小均一，然后按照配方中的标准加入蒸馏水，煮沸30min后，用纱布对马铃薯溶液进行过滤，然后加入葡萄糖、琼脂、磷酸二氢钾和硫酸镁，然后加水定容至 100mL，再加热10min，待所有药品充分溶解后，装入试管中，放到灭菌锅里，在 1125℃的条件下对其进行灭菌，灭菌28min后取出，放入净化工作台中打开紫外杀菌灯，杀菌24min 最后自然冷却至室温得到斜面培养基；
（2）接种到摇瓶深层发酵培养基中，先配制深层发酵培养基，深层发酵培养基按质量份数计包括以下成份：亚硒酸钠8份，磷酸二氢钾：0.2份，蒸馏水：7份，硫酸镁：2份，黄豆粉：3份，麦麸：3份，玉米粉：1份；
深层发酵培养基的制备具体为：首先把麦麸、玉米粉、黄豆粉放入烧杯中，加水煮沸 27min，然后用纱布滤去杂质，加入磷酸二氢钾和硫酸镁，加水定容至100mL，再加热 10min，待所有药品充分溶解后，装入500ml的摇瓶中，放到灭菌锅里，在 121℃的条件下对其进行灭菌，26min 后取出，放入净化工作台中打开紫外杀菌灯，杀菌31min，等待其自然冷却，冷却后向摇瓶中中加入亚硒酸钠制得深层发酵培养基；
在净化工作台上，打开紫外灯，对相关的接种器具进行紫外照射杀菌35min，对接种环反复灼烧，然后从活化的斜面菌种中取一块接入液态深层发酵培养基中，然后用注射器向深层发酵培养基加入亚硒酸钠，最后将摇瓶的瓶口放在酒精灯的火焰上方消毒，然后塞上棉塞，并用消毒后的报纸将瓶口封严，把接入羊肚菌菌种后的摇瓶放入振荡培养箱中，控制培养温度为25℃，振荡培养箱转速为90r/min，振荡3天后取出，得到富硒羊肚菌菌丝体；
富硒羊肚菌深层发酵得到的富硒羊肚菌菌丝生物量为9g/L，富硒羊肚菌多糖得率为5%，硒含量为9.2μg/mL。
除上述实施例外，本发明还可以有其他实施方式。凡采用等同替换或等效变换形成的技术方案，均落在本发明要求的保护范围。
Claims (4)
1.一种富硒羊肚菌深层发酵工艺，其特征在于，该深层发酵工艺的流程为：羊肚菌母种的转接及活化-接种到摇瓶深层发酵培养基中-加入亚硒酸钠-深层发酵培养-富硒羊肚菌菌丝体，其中：
（1）羊肚菌母种的转接，将母种转接在配制好的斜面培养基上具体为：首先将接种环、酒精灯、酒精棉球、打火机以及斜面培养基放在净化工作台里，打开紫外灯，对它们进行紫外照射杀菌20-28min，关闭紫外灯，然后从冰箱中取出保藏的母种，接种时先将接种环用酒精灯的火焰反复灼烧，待冷却后用接种环挑取母种，并快速接种至预先配制好的斜面培养基上，接种完成后，将斜面培养基的试管口用火焰进行杀菌，然后塞入棉塞或胶塞，将接种后的菌种放入恒温恒湿箱中，控制温度为24℃，静置培养1-3天，然后将其放入0-3℃的冰箱中保藏；
羊肚菌母种的活化，活化前要将接种环、酒精灯、酒精棉球、打火机以及配制好的斜面培养基放在净化工作台里，打开紫外灯，对相关的接种器具进行紫外照射杀菌28-35min，然后从冰箱中取出保藏的要活化的菌种，开始接种前先将净化工作台的紫外灯关闭，双手用酒精棉球进行消毒，接种时先将接种环用酒精灯的火焰反复灼烧，待冷却后用接种环挑取菌种的菌丝块，并快速接种至预先配制好的斜面培养基上，接种完毕后，将斜面培养基的试管口用火焰进行杀菌，然后方可塞入棉塞或胶塞；接种结束后，将接种后的菌种放入恒温恒湿箱中，设定温度为 25℃，静置培养24-48h即可完成菌种的活化；
其中，所述的羊肚菌母种转接和活化时的斜面培养基按质量份数计包括以下组分：马铃薯：20-25份，葡萄糖：1-2份，琼脂：1-2份，磷酸二氢钾：0.2-0.5份，硫酸镁0.1-0.3份，蒸馏水10-20份；
（2）接种到摇瓶深层发酵培养基中，先配制深层发酵培养基，所述的深层发酵培养基按质量份数计包括以下成份：亚硒酸钠5-10份，磷酸二氢钾：0.1-0.3份，蒸馏水：5-8份，硫酸镁：1-2份，黄豆粉：2-3份，麦麸：3-5份，玉米粉：1-3份；
所述深层发酵培养基的制备具体为：首先把麦麸、玉米粉、黄豆粉放入烧杯中，加水煮沸 25-29min，然后用纱布滤去杂质，加入磷酸二氢钾和硫酸镁，加水定容至100mL，再加热 7-10min，待所有药品充分溶解后，装入500ml的摇瓶中，放到灭菌锅里，在 121℃的条件下对其进行灭菌，20-26min 后取出，放入净化工作台中打开紫外杀菌灯，杀菌28-35min，等待其自然冷却，冷却后向摇瓶中中加入亚硒酸钠制得深层发酵培养基；
在净化工作台上，打开紫外灯，对相关的接种器具进行紫外照射杀菌30-35min，对接种环反复灼烧，然后从活化的斜面菌种中取一块接入液态深层发酵培养基中，然后用注射器向深层发酵培养基加入亚硒酸钠，最后将摇瓶的瓶口放在酒精灯的火焰上方消毒，然后塞上棉塞，并用消毒后的报纸将瓶口封严，把接入羊肚菌菌种后的摇瓶放入振荡培养箱中，控制培养温度为25-27℃，振荡培养箱转速为90-100r/min，振荡2-4天后取出，得到富硒羊肚菌菌丝体。
2.根据权利要求1所述的富硒羊肚菌深层发酵工艺，其特征在于：在步骤（1）母种在转接时每支斜面培养基能用接种环接种2块母种，菌种在活化时每支斜面培养基能用接种环接种2块菌丝块。
3.根据权利要求1所述的富硒羊肚菌深层发酵工艺，其特征在于：所述斜面培养基的制备具体为：首先把马铃薯洗净并去皮，用刀把马铃薯切块，大小均一，然后按照配方中的标准加入蒸馏水，煮沸30min后，用纱布对马铃薯溶液进行过滤，然后加入葡萄糖、琼脂、磷酸二氢钾和硫酸镁，然后加水定容至 100mL，再加热5-10min，待所有药品充分溶解后，装入试管中，放到灭菌锅里，在 120-125℃的条件下对其进行灭菌，灭菌25-30min后取出，放入净化工作台中打开紫外杀菌灯，杀菌24-28min 最后自然冷却至室温得到斜面培养基。
4.根据权利要求1所述的富硒羊肚菌深层发酵工艺，其特征在于：富硒羊肚菌深层发酵得到的富硒羊肚菌菌丝生物量为9-10g/L，富硒羊肚菌多糖得率为3-5%，硒含量为9.0-9.3μg/mL。
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| CN105154342A (zh) * | 2015-10-27 | 2015-12-16 | 宋瑞鹏 | 一种羊肚菌液态菌种的培养方法 |
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2015
- 2015-04-21 CN CN201510189879.3A patent/CN104823701A/zh active Pending
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