CN102630493B - 利用常规饮用水制备食药用菌液体菌种的方法及设备 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种利用常规饮用水制备食药用菌液体菌种的方法及设备，该方法的步骤为：对发酵容器的消毒；向培养液内灌入培养液并加入生料液体种专用调节剂；接入试管种或一级菌种；静置待菌丝萌发后通气培养至菌丝体均匀悬浮于培养液，停止通气立即使用。同时提供了实现该方法的设备，只需在料液中添加一定量的生料液体菌种专用调节剂，通入无菌空气搅拌即可成功制备菌丝纯度100％的液体菌种。由于利用生料技术制备的液体菌种料液未经高温高压灭菌，养分未被破坏，故而相对于常规液体菌种菌丝活力更强，萌发更快。同时由于发酵设备无需灭菌，故而对发酵设备也无严格要求，适合推广应用。
Description
技术领域
本发明属于食药用菌学与发酵工程学技术领域，涉及一种制备食药用菌液体菌种的方法及设备，特别涉及一种利用常规饮用水制备食药用菌液体菌种的方法及设备。
背景技术
食药用菌液体菌种生产技术是由食药用菌学与发酵工程学跨学科综合所产生的新型技术。由于液体菌种制备周期短，纯度高，成本小，发菌快，污染少，菌龄一致，接种快，同时还可以给菌袋补充一定的养分，有利于提高产量。伴随着食用菌工厂化的崛起，液体菌种生产技术的普遍应用已经成为食用菌工厂化菌种制备的发展趋势。但由于常规的液体菌种制备方法设备和技术要求很高，特别是需要严格的无菌环境，发酵设备和料液均需严格的高压灭菌，不但耗能很大，而且很容易由于灭菌不彻底而导致整罐菌种失败。
发明内容
本发明的目的在于克服上述技术缺陷，提供一种利用常规饮用水制备食药用菌液体菌种的方法及设备，本发明所涉及的生料液体菌种制备方法，只需在料液中添加一定量的生料液体菌种专用调节剂，通入无菌空气搅拌即可成功制备菌丝纯度100％的液体菌种。由于利用生料技术制备的液体菌种料液未经高温高压灭菌，养分未被破坏，故而相对于常规液体菌种菌丝活力更强，萌发更快。同时由于发酵设备无需灭菌，故而对发酵设备也无严格要求，可以利用三角瓶，纯净水桶，塑料桶等容器作为发酵容器，自制空气过滤系统，导入无菌空气即可进行生产。
其技术方案为
一种利用常规饮用水制备食药用菌液体菌种的方法，包括以下步骤：
1)选取合适的发酵罐，可以是三角瓶，纯净水桶，朔料桶或者正规的不锈钢发酵罐，25L以下可以利用气升原理，只需通气即可，25L以上必须同时具备搅拌和通气两个条件；
2)采用自制的空气过滤系统，将空气压缩机出气依次通入0.2％-0.5％的高锰酸钾溶液，1％-3％的氢氧化钠溶液，纤维过滤球即可；
3)制备菌种之前首先将发酵罐清洗干净，然后向发酵罐中加入A液和B液，根据容器大小每10L各加A液和B液2ml，密闭12小时；
A液为20％二氧化氯制剂，二氧化氯有很强的杀菌作用，0.7mg/L浓度的二氧化氯在水中5min内能杀灭绝大多数的肠道细菌；PH值在6至10的范围内其杀菌效果不受影响。二氧化氯杀灭病毒的效果比氯和臭氧都好，在PH值为7的废水中5mg/L的二氧化氯只需要半分钟就能灭活4个对数以上的病毒。另外，二氧化氯对人畜使用安全，不会对高等动物细胞结构产生影响。无致畸、致癌、致突变等作用。
二氧化氯在生产中主要用于饮用水的消毒，另外还用于原料保鲜、食品加工、器具消毒等领域。为世界卫生组织指定的A1级安全消毒剂。
将二氧化氯制剂应用于发酵容器消毒，有无残留、应用范围广、不产生抗药性、安全无害、可改善水质等优点。
B液为10％双乙酸钠制剂，双乙酸钠是乙酸钠和乙酸的分子化合物，由短氢键螯合，纯品为白色吸湿性晶状粉末，具有乙酸气味。双乙酸钠对霉菌、酵母有抑制作用，双乙酸钠中的游离乙酸能够有效渗透霉菌、酵母的细胞壁，可使细胞内蛋白质变性，从而起到抗菌作用。
双乙酸钠的毒性很低，无残留，无毒副作用，联合国粮农组织和世界卫生组织推荐将双乙酸钠应用于食品、饲料方面的防霉保鲜。但在食药用菌行业中并没有使用的先例将其用作食药用菌液体菌种消毒剂B剂将填补这一空白，减少传统高温高压灭菌所造成的能源消耗，消除环境污染，具有低碳、环保、节能的特点。
4)发酵罐消毒完成后，向发酵罐中加入熬制好的培养基，同时加入0.05％的生料液体菌种密闭12小时后移入培养室，在超净工作台或接种箱内接种，通气培养，培养室需严格消毒，并保持空气的相对洁净；
5)试管转接一级种时，培养基中需加入0.1％的琼脂，培养容器为1L的抽滤瓶，接入试管菌种后需静置24小时，待菌种块周围有菌丝萌发时方可通气培养，待菌丝体充满整个培养基时，培养液达到一定的5mm2/s(25C°)，即可停止通气。
6)一级菌种转接二级菌种时，接种量控制在5％-10％，培养3-4天即可。
步骤4)中所述的生料液体菌种专用调节剂为30％二氯异氰尿酸钠，10％柠檬酸，60％山梨酸钾。
一种利用常规饮用水制备食药用菌液体菌种的设备，包括空气压缩机12，油水分离器11，止回阀3、4，高锰酸钾洗气罐10，氢氧化钠洗气罐8，纤维过滤器7，发酵罐6，其中发酵罐6罐体开有进气口9、出气口5、加液口2、接种口1共四个口，其中进气口9的导管需伸入罐底。
与现有技术相比，本发明的有益效果为：
本发明的制备方法，只需在料液中添加一定量的生料液体菌种专用调节剂，通入无菌空气搅拌即可成功制备菌丝纯度100％的液体菌种。由于利用生料技术制备的液体菌种料液未经高温高压灭菌，养分未被破坏，故而相对于常规液体菌种菌丝活力更强，萌发更快。同时由于发酵设备无需灭菌，故而对发酵设备也无严格要求，可以利用三角瓶，纯净水桶，塑料桶等容器作为发酵容器，自制空气过滤系统，导入无菌空气即可进行生产。
附图说明
图1是本发明的设备结构图。
具体实施方式
下面结合附图与具体实施方式对本发明作进一步详细地说明。
参照图1，一种利用常规饮用水制备食药用菌液体菌种的设备，包括空气压缩机12，油水分离器11，止回阀3、4，高锰酸钾洗气罐10，氢氧化钠洗气罐8，纤维过滤器7，发酵罐6，其中发酵罐6罐体开有进气口9，出气口5，加液口2，接种口1，四个口，其中进气口导管伸入罐底。
空气经过空气压缩机12加压，依次泵入氢氧化钠洗气罐10，高猛酸钾洗气罐进8行杀菌。氢氧化钠洗气罐10和高猛酸钾洗气罐8的末端分别安装有止回阀4和止回阀3，防止液体倒流。经过氢氧化钠洗气罐10和高猛酸钾洗气罐8消毒的空气，再经过纤维过滤器7的过滤进入发酵罐6。使用时，纤维过滤器7需提前高温高压灭菌。
杏鲍菇生料液体菌种的制备
取一1L的抽滤瓶，配套橡胶塞，橡胶塞中央插入一根玻璃管，通入瓶底。向瓶内加入1mlA液和1mlB液密闭12小时后，向瓶内注入11杏鲍菇液体培养基(150g/L土豆，玉米珍50g/L，琼脂0.2g/L，硫酸镁0.5g/L，磷酸二氢钾1g/L，蛋白胨5g/L)加入0.5g生料液体种专用调节剂，密闭12小时。在超净工作台中接入试管种，静置三天，待菌丝萌发后，通入无菌空气。无菌空气的获得依次通过0.6％的高锰酸钾，2％的氢氧化钠溶液，棉花玻璃管即可。培养六天即可获得一级菌种。将一级菌种同法转接入10L的发酵桶培养三天即可运用于生产。
以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，本发明的保护范围不限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明披露的技术范围内，可显而易见地得到的技术方案的简单变化或等效替换均落入本发明的保护范围内。
Claims (1)
1.一种利用常规饮用水制备食药用菌液体菌种的方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)选取发酵罐，可以是三角瓶，纯净水桶，塑料桶或者不锈钢发酵罐，25L以下可以利用气升原理，只需通气即可，25L以上必须同时具备搅拌和通气两个条件；
2)将空气压缩机出气依次通入0.2％-0.5％的高锰酸钾溶液，1％-3％的氢氧化钠溶液，纤维过滤球即可；
3)制备菌种之前首先将发酵罐清洗干净，然后向发酵罐中加入A液和B液，根据容器大小每10L各加A液和B液2ml，密闭12小时，A液为20％二氧化氯制剂，B液为10％双乙酸钠制剂；
4)发酵罐消毒完成后，向发酵罐中加入熬制好的培养基，同时加入0.05％的生料液体菌种专用调节剂密闭12小时后移入培养室，在超净工作台或接种箱内接种，通气培养，培养室需严格消毒，并保持空气的相对洁净，所述的生料液体菌种专用调节剂为30％二氯异氰尿酸钠，10％柠檬酸，60％山梨酸钾；
5)试管转接一级种时，培养基中需加入0.1％的琼脂，培养容器为1L的抽滤瓶，接入试管菌种后需静置24小时，待菌种块周围有菌丝萌发时方可通；
6)一级菌种转接二级菌种时，接种量控制在5％-10％，培养3-4天即可。
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2012
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