CN105614855A - 一种小肽营养制剂及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种小肽营养制剂的制备方法，包括：步骤1：将鲜鱼肉清洗干净，并绞碎至鱼肉酱；步骤2：将由米曲霉、蜡状芽孢杆菌、长双岐杆菌、克鲁维酵母组成的多菌种在驯合培养基中进行驯合培养，获得驯培发酵菌剂；步骤3：将所述驯培发酵菌剂加入到所述鱼肉酱中进行发酵培养，得到发酵鱼肉酱；步骤4：将所述发酵鱼肉酱进行干燥、灭菌，得到所述小肽营养制剂。本发明的目的是提高蛋白肽的生产质量，扩大蛋白肽的生产原材料来源范围，为蛋白小肽的生产提供一种便于实施、扩大生产的生物发酵制作工艺。
Description
技术领域
本发明属于食品加工领域，主要涉及一种营养制剂，尤其涉及一种小肽营养制剂及其制备方法。
背景技术
由于动物体内存在大量的蛋白酶，过去人们一直认为，动植物蛋白质降解成小肽后，再降解为游离氨基酸才能被人体吸收利用，所以人们一直把氨基酸作为研究、制作、追求、服食的主要营养。直到20世纪60年代开始，科学家才逐步提出令人信服的证据，证明小肽也可以被完整吸收和利用。小肽和氨基酸的混合物在人体的吸收率和吸收速度都比单纯氨基酸更佳，不仅如此，小肽还能在肠道内保护易被破坏的氨基酸。此外，单纯的氨基酸在体内根据需要会重新组成肽和蛋白质，而小肽和氨基酸的混合物可省去一部分重新组合的过程，因此，其生物效价更高。
此后，进一步地，人们对动物体内的运转机制进行了大量研究，表明动物体内可以存在多种小肽的转运体系。目前的研究认为，二、三肽能被完整地吸收，大于二、三肽的小肽能否被完整吸收尚有疑问，但近来的研究发现4～6寡肽都能被动物直接吸收。
虽然现在对于小肽的生理运转机制和功能还不能够全面了解，然而以下功效是非常明确的，即小肽除了能够为动物提供氨基酸外，还具有多样性的生理活性：
1、血液循环中的小肽能直接参与组织蛋白质的合成，此外肝脏、肾脏、皮肤和其它组织也能完整地利用小肽，其中，肾脏是消化吸收肽和再吸收氨基酸的主要场所；
2、促进矿物质的吸收利用，主要以络合物形式与矿物质结合，增加矿物质吸收；
3、避免氨基酸间的吸收竞争；
4、具有生理调节作用，通过诱导小肠中一些酶活性的提高，使小肠消化功能发育提前，促进健康和提高其生产性能，促进营养物质的消化吸收。
介于以上所述小肽的生物活性优点，小肽营养已成为蛋白质营养研究的热点之一，人们把获取营养的关注从摄入氨基酸开始转向摄入小肽蛋白。小肽营养食品的出现除了对普通健康人群适用外，对于消化吸收功能不良、但又急需补充营养的胃肠系统病人、手术康复病患人群、体弱老人群体、大运动量或重体力劳动后体力恢复者来说，更是深受欢迎的一种营养补充剂。
目前来看，一方面，虽然市场亦开始出现肽蛋白营养补充剂，如“蛋白肽口服液”、“多肽蛋白粉”、“肽藻营养粉”等，但是这些市售的肽蛋白营养剂大多不能明确保证肽蛋白的含量，其中肽含量与一般蛋白粉质量并无太大差别，例如“蛋白肽口服液”中的多肽和氨基酸含量只有1g/100ml，而更多的产品并没有肽蛋白含量的标注；另一方面，目前生产蛋白肽的主要原料为大豆、玉米等植物，通过采用水解或酶解提取的方法制备，也有通过纯物理方法提取植物蛋白的技术，其中，酶法已经得到广泛的应用，但是蛋白质在酶解后经常会产生苦味，产生的苦味物质通常是一些特殊的寡肽，称为苦味肽，这使得酶解法在食品工业上的应用受到了严重的限制。
因此，寻求一种可靠的有效蛋白肽的生产工艺方法，主要以提高蛋白肽的生产质量，扩大蛋白肽的生产原材料来源范围，就成为蛋白肽生产的一项本领域技术人员极其重视并亟待解决的技术问题。
发明内容
本发明的目的是提高蛋白肽的生产质量，扩大蛋白肽的生产原材料来源范围，为蛋白小肽的生产提供一种便于实施、扩大生产的生物发酵制作工艺。
基于上述目的，本发明提供了一种小肽营养制剂及其制备方法，其中，所述营养制剂的有效蛋白肽的含量远远大于现有技术，尤其是小肽的含量可以保证在70％以上，而且由于制备过程中不会有苦味肽的产生，因此，口感适宜、没有腥味和苦味，大大提高了所述营养制剂的质量。进一步地，对应的营养制剂的制备方法，是本申请发明的创新之处，其中，选择了鲜鱼肉作为原料，采用微生物驯合培养技术进行培养，使得整个发酵过程易于控制，发酵转化率高，生物活性成分含量高且多样。
本发明的技术方案包括一种小肽营养制剂的制备方法，其特征在于，包括：
步骤1：将鲜鱼肉清洗干净，并绞碎至鱼肉酱；
步骤2：将由米曲霉、蜡状芽孢杆菌、长双岐杆菌、克鲁维酵母组成的多菌种在驯合培养基中进行驯合培养，获得驯培发酵菌剂；
步骤3：将所述驯培发酵菌剂加入到所述鱼肉酱中进行发酵培养，得到发酵鱼肉酱；
步骤4：将所述发酵鱼肉酱进行干燥、灭菌，得到所述小肽营养制剂。
在本发明的一个实施例中，所述多菌种的重量配比为：
进一步地，所述多菌种具体为米曲霉(Aspergillusoryzae，ACCC30155)、蜡状芽孢杆菌(Bacilluscereus，ACCC10603)、长双岐杆菌(Bifidobacteriumlongum，ACCC03961)、克鲁维酵母(Kluyveromyceslactis，ACCC21191)。
更优选地，所述多菌种在制备前，需要对各个单独菌种进行菌种扩培，其中，在一个实施例中，所述菌种扩培具体包括：
(1)从中国农业微生物菌种保藏管理中心购买菌种：米曲霉(Aspergillusoryzae，ACCC30155)、蜡状芽孢杆菌(Bacilluscereus，ACCC10603)、长双岐杆菌(Bifidobacteriumlongum，ACCC03961)、克鲁维酵母(Kluyveromyceslactis，ACCC21191)；
(2)将米曲霉转接入装有Czapeks液体培养基(蔗糖30g、NaNO33g、K2HPO41g、KCl0.5g、MgSO40.5g、FeSO40.01g、水1000ml)的锥形瓶中，在25-35℃条件下培养25-40小时，待培养基浑浊后取出，放入2-4℃冰箱保存待用；
(3)将蜡状芽孢杆菌转接入装有液体营养肉汁培养基的锥形瓶中，在20-48℃条件下培养20-35小时，待培养基浑浊后取出，然后放入2-4℃冰箱保存待用；
(4)将长双岐杆菌转接入BBL液体培养基(蛋白胨15.0g、酵母粉2.0g、葡萄糖20.0g、可溶性淀粉0.5g、氯化钠5.0g、L-半胱氨酸0.5g、番茄浸粉5.0g、肝浸粉2.0g、吐温80溶液1.0ml、蒸馏水1000.0ml、pH7.0)中，在35-40℃、厌氧条件下180-220rpm振荡培养60-80小时，待培养基浑浊后取出，然后放入2-4℃冰箱保存待用；
(5)将克鲁维酵母转接入马铃薯液体培养基的锥形瓶中，在28-32℃条件下180-220rpm振荡培养48-72小时，待培养基浑浊后取出，然后放入2-4℃冰箱保存待用。
可以理解的是，根据原料的不同或其它原料的添加，可以在所述多菌种的基础上，额外添加其它本领域技术人员认为可行的菌种，以实现发酵培养的目的。
进一步地，在一个实施例中，所述驯合培养基的组分及其重量配比为：太古黄糖2-5重量份、酵母粉0.5-1.0重量份、硫酸镁2-10重量份、磷酸二氢钾0.5-5重量份、氯化钠0.5-5重量份、硫酸铁0.01-0.05重量份、纯净水85-98重量份，进一步地，使用14wt.％的氨水调节pH在7.0-7.5。
当然，在此基础上，其它本领域技术人员认为必要的培养基组分，也可以通过合理选择进行适时地添加，以保证驯化培养的顺利进行。例如，可以进一步添加蔗糖、葡萄糖、麦芽糖、三氯蔗糖、低聚糖、蜂蜜中的任意一种或几种。
在驯化培养过程中，所述多菌种按1:80-120的重量配比添加到所述驯合培养基中进行驯合培养。具体地，所述驯化培养的条件为：先在24-32℃条件下半密闭培养0.5-2.0天，然后在28-35℃条件下密闭培养5-15天，pH＝5.0-6.5。
在本发明中，所述驯化培养技术，可以形成协同繁殖生长、共同作用的微生物环境，由此用于鱼肉酱的发酵培养中，可以实现蛋白的高效率地转化，提高各个微生物的整体利用率。
在本发明的一个优选实施例中，所述驯合培养具体包括：
(1)将扩培得到的菌种按以下重量配比进行配取：米曲霉25-40重量份、蜡状芽孢杆菌25-40重量份、长双岐杆菌20-30重量份、克鲁维酵母20-35重量份，得到所述多菌种；
(2)将所述多菌种按1：80-120重量配比添加到驯合培养基(太古黄糖2-5重量份、酵母粉0.5-1.0重量份、硫酸镁2-10重量份、磷酸二氢钾0.5-5重量份、氯化钠0.5-5重量份、硫酸铁0.01-0.05重量份、纯净水85-98重量份，使用14wt.％的氨水调节pH在7.0-7.5左右)中，放入发酵罐，培养温度24-32℃，半密闭培养0.5-2.0天，然后在28-35℃，密闭培养5-15天，pH＝5.0-6.5，得到驯培发酵菌剂，其呈淡黄至淡褐色，放入2-4℃冰箱保存待用。
其中，关于原料，所述鲜鱼肉是指任何新鲜的河鱼或海鱼的肉，包括活鱼、刚死可食用的鱼、冰冻鱼的可食部分鱼肉；是通过将鱼去除鱼头、内脏、脊骨和鱼鳍得到的。优选地，经过腌制、风干、烘干等加工的鱼制品是本发明所排斥的。
在本发明的一个实施例中，将市售的新鲜河鱼或海鱼，去除鱼头、内脏、脊骨和鱼鳍，清洗干净，切成块状，用绞肉机将其制成所述鱼肉酱。
关于鱼肉酱的发酵培养，具体包括：在所述鱼肉酱中加入太古黄糖得到鱼肉酱发酵培养基，然后加入所述驯培发酵菌剂，搅拌均匀，先在25-35℃条件下半密闭培养1-5天，然后再密闭培养10-20天，得到所述发酵鱼肉酱。
可以理解的是，其它本领域技术人员认为必要的培养基组分，也可以通过合理选择适时地添加到所述到鱼肉酱发酵培养基中，以保证发酵培养的顺利进行。例如，可以进一步添加蔗糖、葡萄糖、麦芽糖、三氯蔗糖、低聚糖、蜂蜜中的任意一种或几种。
在本发明的一个实施例中，所述鱼肉酱的发酵培养包括：将鱼肉酱装入干净的容器中，加入占所述鱼肉酱为1.0-3.5％重量百分比的太古黄糖，然后倒入占所述鱼肉酱为1-10％重量百分比的微生物菌剂，搅拌均匀，在25-35℃条件下半密闭培养1-5天，再密闭发酵培养10-20天，得到所述发酵鱼肉酱，其中，这一过程得到的产品没有腥味和苦味。
关于所述发酵鱼肉酱的进一步处理，使用肉制品微波烘干杀菌设备对所述发酵鱼肉酱进行干燥灭菌一体操作；其中，具体参数为：微波频率2450MHz±50Hz，传输速度0.1-5m/min，进出料高度30-50mm，传输速度0.5-5m/min，传输时间为10-120min。
在本发明的一个实施例中，所述制备方法还包括研磨的过程。
进一步地经过测定，其中，所述小肽营养制剂，其水分含量小于8％；分子量小于500道尔顿的小肽含量大于50％，优选地，可以大于70％。
在本发明的一个实施例中，所述小肽营养制剂是一种咖啡色粉状制剂，没有腥味。
本发明的技术方案还包括一种上述所述的制备方法得到的小肽营养制剂。
具体地，所述小肽营养制剂可以直接作为营养制剂使用，或进一步经过极细研磨加工作为高级综合营养制剂的配剂使用。
本发明的技术方案还包括一种小肽营养制剂的制备方法，其特征在于，如上述所述的制备方法中，将鱼替换为包括猪肉、牛肉、羊肉中的任意一种或几种的肉类进行发酵培养，同样可以获得一种小肽营养制剂。
进一步地，需要明确以下概念：
肽，是一种介于氨基酸与蛋白质之间的生化物质，它比蛋白质分子量小，比氨基酸分子量大，是蛋白质的一个片段。肽类可分为多肽、寡肽和小肽。多肽是分子量大于1000道尔顿，小于10000道尔顿的肽；寡肽是指氨基酸构成个数小于10个肽，分子量一般在500～1000道尔顿；小肽又叫纳米胶原蛋白，仅由2～4个氨基酸构成的高生物活性肽，分子量一般在180～500道尔顿，小肽能完整地被吸收并以二、三肽形式进入血液循环，小肽在蛋白质营养中有着重要的作用。
关于含量的表述中，没有特殊说明的情况下，均是指重量含量。
本发明发酵鲜鱼肉以生产小肽营养制剂的微生物菌剂特点是利用我国传统发酵食品(酱油、酒酿等)所用菌种以及保健食品的益生菌菌种和真菌菌种，因此，材料易得，购买方便；通过复合驯培获得的小肽营养制剂用微生物菌剂，使整个发酵制备过程易于控制，发酵制备成功率高。除了分解鱼肉蛋白成小肽蛋白以外，多元微生物菌剂在发酵过程中的代谢合成产物，因也令本发明的小肽营养制剂更具有效生物活性成分。
本发明提供的技术方案所获得的所述小肽营养制剂，弥补了当前食品和保健食品市场上明确小肽含量大于50％(甚至大于70％)的真正小肽营养制剂的缺口，为医疗康复、疗养保健提供了优质的小肽蛋白营养食品。
另外，本发明的特点在于建立了当前市售少见的肉类加工成肽蛋白的制备工艺，虽然本发明使用了鱼肉作为原材料，但本发明的制备工艺可以引用到猪肉，牛肉，羊肉等各种肉类，为当前世卫组织发布的红肉会引发癌症的消息而对红肉销售担忧的肉类协会提供了肉类新的开发途径。
具体实施方式
本发明提供了一种小肽营养制剂的制备方法，其特征在于，包括：
步骤1：将鲜鱼肉清洗干净，并绞碎至鱼肉酱；
步骤2：将由米曲霉、蜡状芽孢杆菌、长双岐杆菌、克鲁维酵母组成的多菌种在驯合培养基中进行驯合培养，获得驯培发酵菌剂；
步骤3：将所述驯培发酵菌剂加入到所述鱼肉酱中进行发酵培养，得到发酵鱼肉酱；
步骤4：将所述发酵鱼肉酱进行干燥、灭菌，得到所述小肽营养制剂。
在本发明的一个实施例中，所述多菌种的重量配比为：
进一步地，所述多菌种具体为米曲霉(Aspergillusoryzae，ACCC30155)、蜡状芽孢杆菌(Bacilluscereus，ACCC10603)、长双岐杆菌(Bifidobacteriumlongum，ACCC03961)、克鲁维酵母(Kluyveromyceslactis，ACCC21191)。
更优选地，所述多菌种在制备前，需要对各个单独菌种进行菌种扩培，其中，在一个实施例中，所述菌种扩培具体包括：
(1)从中国农业微生物菌种保藏管理中心购买菌种：米曲霉(Aspergillusoryzae，ACCC30155)、蜡状芽孢杆菌(Bacilluscereus，ACCC10603)、长双岐杆菌(Bifidobacteriumlongum，ACCC03961)、克鲁维酵母(Kluyveromyceslactis，ACCC21191)；
(2)将米曲霉转接入装有Czapeks液体培养基(蔗糖30g、NaNO33g、K2HPO41g、KCl0.5g、MgSO40.5g、FeSO40.01g、水1000ml)的锥形瓶中，在25-35℃条件下培养25-40小时，待培养基浑浊后取出，放入2-4℃冰箱保存待用；
(3)将蜡状芽孢杆菌转接入装有液体营养肉汁培养基的锥形瓶中，在20-48℃条件下培养20-35小时，待培养基浑浊后取出，然后放入2-4℃冰箱保存待用；
(4)将长双岐杆菌转接入BBL液体培养基(蛋白胨15.0g、酵母粉2.0g、葡萄糖20.0g、可溶性淀粉0.5g、氯化钠5.0g、L-半胱氨酸0.5g、番茄浸粉5.0g、肝浸粉2.0g、吐温80溶液1.0ml、蒸馏水1000.0ml、pH7.0)中，在35-40℃、厌氧条件下180-220rpm振荡培养60-80小时，待培养基浑浊后取出，然后放入2-4℃冰箱保存待用；
(5)将克鲁维酵母转接入马铃薯液体培养基的锥形瓶中，在28-32℃条件下180-220rpm振荡培养48-72小时，待培养基浑浊后取出，然后放入2-4℃冰箱保存待用。
可以理解的是，根据原料的不同或其它原料的添加，可以在所述多菌种的基础上，额外添加其它本领域技术人员认为可行的菌种，以实现发酵培养的目的。
进一步地，在一个实施例中，所述驯合培养基的组分及其重量配比为：太古黄糖2-5重量份、酵母粉0.5-1.0重量份、硫酸镁2-10重量份、磷酸二氢钾0.5-5重量份、氯化钠0.5-5重量份、硫酸铁0.01-0.05重量份、纯净水85-98重量份，进一步地，使用14wt.％的氨水调节pH在7.0-7.5。
当然，在此基础上，其它本领域技术人员认为必要的培养基组分，也可以通过合理选择进行适时地添加，以保证驯化培养的顺利进行。例如，可以进一步添加蔗糖、葡萄糖、麦芽糖、三氯蔗糖、低聚糖、蜂蜜中的任意一种或几种。
在驯化培养过程中，所述多菌种按1:80-120的重量配比添加到所述驯合培养基中进行驯合培养。具体地，所述驯化培养的条件为：先在24-32℃条件下半密闭培养0.5-2.0天，然后在28-35℃条件下密闭培养5-15天，pH＝5.0-6.5。
在本发明中，所述驯化培养技术，可以形成协同繁殖生长、共同作用的微生物环境，由此用于鱼肉酱的发酵培养中，可以实现蛋白的高效率地转化，提高各个微生物的整体利用率。
在本发明的一个优选实施例中，所述驯合培养具体包括：
(1)将扩培得到的菌种按以下重量配比进行配取：米曲霉25-40重量份、蜡状芽孢杆菌25-40重量份、长双岐杆菌20-30重量份、克鲁维酵母20-35重量份，得到所述多菌种；
(2)将所述多菌种按1：80-120重量配比添加到驯合培养基(太古黄糖2-5重量份、酵母粉0.5-1.0重量份、硫酸镁2-10重量份、磷酸二氢钾0.5-5重量份、氯化钠0.5-5重量份、硫酸铁0.01-0.05重量份、纯净水85-98重量份，使用14wt.％的氨水调节pH在7.0-7.5左右)中，放入发酵罐，培养温度24-32℃，半密闭培养0.5-2.0天，然后在28-35℃，密闭培养5-15天，pH＝5.0-6.5，得到驯培发酵菌剂，其呈淡黄至淡褐色，放入2-4℃冰箱保存待用。
其中，关于原料，所述鲜鱼肉是指任何新鲜的河鱼或海鱼的肉，包括活鱼、刚死可食用的鱼、冰冻鱼的可食部分鱼肉；是通过将鱼去除鱼头、内脏、脊骨和鱼鳍得到的。优选地，经过腌制、风干、烘干等加工的鱼制品是本发明所排斥的。
在本发明的一个实施例中，将市售的新鲜河鱼或海鱼，去除鱼头、内脏、脊骨和鱼鳍，清洗干净，切成块状，用绞肉机将其制成所述鱼肉酱。
关于鱼肉酱的发酵培养，具体包括：在所述鱼肉酱中加入太古黄糖得到鱼肉酱发酵培养基，然后加入所述驯培发酵菌剂，搅拌均匀，先在25-35℃条件下半密闭培养1-5天，然后再密闭培养10-20天，得到所述发酵鱼肉酱。
可以理解的是，其它本领域技术人员认为必要的培养基组分，也可以通过合理选择适时地添加到所述到鱼肉酱发酵培养基中，以保证发酵培养的顺利进行。例如，可以进一步添加蔗糖、葡萄糖、麦芽糖、三氯蔗糖、低聚糖、蜂蜜中的任意一种或几种。
在本发明的一个实施例中，所述鱼肉酱的发酵培养包括：将鱼肉酱装入干净的容器中，加入占所述鱼肉酱为1.0-3.5％重量百分比的太古黄糖，然后倒入占所述鱼肉酱为1-10％重量百分比的微生物菌剂，搅拌均匀，在25-35℃条件下半密闭培养1-5天，再密闭发酵培养10-20天，得到所述发酵鱼肉酱，其中，这一过程得到的产品没有腥味和苦味。
关于所述发酵鱼肉酱的进一步处理，使用肉制品微波烘干杀菌设备对所述发酵鱼肉酱进行干燥灭菌一体操作；其中，具体参数为：微波频率2450MHz±50Hz，传输速度0.1-5m/min，进出料高度30-50mm，传输速度0.5-5m/min，传输时间为10-120min。
在本发明的一个实施例中，所述制备方法还包括研磨的过程。
进一步地经过测定，其中，所述小肽营养制剂，其水分含量小于8％；分子量小于500道尔顿的小肽含量大于50％，优选地，可以大于70％。
在本发明的一个实施例中，所述小肽营养制剂是一种咖啡色粉状制剂，没有腥味。
本发明还提供了一种上述所述的制备方法得到的小肽营养制剂，其特征在于，直接作为营养制剂使用，或进一步经过极细研磨加工作为高级综合营养制剂的配剂使用。
本发明还提供了一种小肽营养制剂的制备方法，其特征在于，如上述所述的制备方法中，将鱼替换为包括猪肉、牛肉、羊肉中的任意一种或几种的肉类进行发酵培养，同样可以获得一种小肽营养制剂。
根据上述技术方案，现通过以下实施例，对本发明的内容作进一步地解释和说明。
实施例1——驯培发酵菌剂的制备
(1)将从中国农业微生物菌种保藏管理中心购买的米曲霉(Aspergillusoryzae，ACCC30155)菌种转接入装有Czapeks液体培养基(蔗糖30g、NaNO33g、K2HPO41g、KCl0.5g、MgSO40.5g、FeSO40.01g、水1000ml)的锥形瓶中，在30℃条件下培养30小时，待培养基浑浊后取出，放入3℃冰箱保存待用；
(2)将从中国农业微生物菌种保藏管理中心购买的蜡状芽孢杆菌(BacilluscereusACCC10603)菌种转接入装有液体营养肉汁培养基的锥形瓶中，在32℃条件下培养30小时，待培养基浑浊后取出，然后放入3℃冰箱保存待用；
(3)将从中国农业微生物菌种保藏管理中心购买的克鲁维酵母(Kluyveromyceslactis，ACCC21191)菌种转接入装有马铃薯液体培养基的锥形瓶中，在28℃条件下200rpm振荡培养45小时，待培养基浑浊后取出，然后放入3℃冰箱保存待用；
(4)将从中国农业微生物菌种保藏管理中心购买的长双岐杆菌(Bifidobacteriumlongum，ACCC03961)菌种转接入BBL液体培养基(蛋白胨15.0g、酵母粉2.0g、葡萄糖20.0g、可溶性淀粉0.5g、氯化钠5.0g、L-半胱氨酸0.5g、番茄浸粉5.0g、肝浸粉2.0g、吐温80溶液1.0ml、蒸馏水1000.0ml、pH7.0)中，在35℃厌氧条件下200rpm振荡培养70小时，待培养基浑浊后取出，然后放入3℃冰箱保存待用；
(5)将上述菌种按以下重量百分比配取：米曲霉30％，蜡状芽孢杆菌25％，长双岐杆菌20％，克鲁维酵母25％，得到多菌种；
(6)将所述多菌种按1：100比例放入驯合培养基(太古黄糖5重量份、酵母粉1重量份、硫酸镁3重量份、磷酸二氢钾3重量份、氯化钠2重量份、硫酸铁0.03重量份、纯净水86重量份，使用14％的氨水调节pH在7.2左右)中放入发酵罐，培养温度30℃，半密闭培养1天，然后在32℃，密闭培养10天，pH＝5.6，得到驯培发酵菌剂，呈淡黄至淡褐色，放入3℃冰箱保存待用。
实施例2——小肽营养制剂的制备
(1)将市售的花鲢鱼，去除鱼头、内脏、脊骨和鱼鳍，清洗干净，切成块状，用绞肉机将其制成鱼肉酱；
(2)将鱼肉酱装入干净的容器中，加入太古黄糖2.0％，倒入实施例1制备的驯培发酵菌剂5％，搅拌均匀，在28℃半密闭培养2天，再密闭发酵培养15天，得到发酵鱼肉酱，其中发酵完毕的鲜鱼肉没有鱼腥味；
(3)将所述发酵鱼肉酱在肉制品微波烘干杀菌机中进行干燥灭菌，加工参数为微波频率2450MHz，进出料口高度30mm，传输速度2m/min，传输时间为80min，得到小肽营养制剂。
实施例3——检测
对实施例2得到的所述小肽营养制剂进行检测，其中：
(1)水分检测结果：水分为6％。
(2)蛋白质分子量分布的检测，使用高效液相色谱仪+紫外分光光度计联机分析，其中，测定条件如下：
色谱柱：TSKgelG2500PW,7.8mm×300mm
色谱柱温度：40℃
流动相：water55:acetonitrile45:trifluoroaceticacid0.1
测定波长：220nm
测定结果如下表所示：
| 分子量 | 含量 |
| 6,000以上 | 4％ |
| 3,000-6000 | 3％ |
| 1,000-3,000 | 8％ |
| 500-1,000 | 9％ |
| <500 | 76％ |
以上对本发明的具体实施例进行了详细描述，但其只是作为范例，本发明并不限制于以上描述的具体实施例。对于本领域技术人员而言，任何对本发明进行的等同修改和替代也都在本发明的范畴之中。因此，在不脱离本发明的精神和范围下所作的均等变换和修改，都应涵盖在本发明的范围内。
Claims (10)
1.一种小肽营养制剂的制备方法，其特征在于，包括：
步骤1：将鲜鱼肉清洗干净，并绞碎为鱼肉酱；
步骤2：将由米曲霉、蜡状芽孢杆菌、长双岐杆菌、克鲁维酵母组成的多菌种在驯合培养基中进行驯合培养，获得驯培发酵菌剂；
步骤3：将所述驯培发酵菌剂加入到所述鱼肉酱中进行发酵培养，得到发酵鱼肉酱；
步骤4：将所述发酵鱼肉酱进行干燥、灭菌，得到所述小肽营养制剂。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤2中多菌种中各个菌种的重量配比为：
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤2中，驯合培养基的制备方法为：太古黄糖2-5重量份、酵母粉0.5-1.0重量份、硫酸镁2-10重量份、磷酸二氢钾0.5-5重量份、氯化钠0.5-5重量份、硫酸铁0.01-0.05重量份、纯净水85-98重量份相混合，并使用14wt.％的氨水调节pH在7.0-7.5。
4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述多菌种按1:80-120的重量配比添加到所述驯合培养基中进行驯合培养。
5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述驯合培养的条件为：在24-32℃条件下半密闭培养0.5-2.0天，然后在28-35℃条件下密闭培养5-15天，pH＝5.0-6.5。
6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述鲜鱼肉是指新鲜的河鱼肉或海鱼肉。
7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤3中，鱼肉酱的发酵培养具体包括：在所述鱼肉酱中加入太古黄糖得到鱼肉酱发酵培养基，然后加入所述驯培发酵菌剂，搅拌均匀，先在25-35℃条件下半密闭培养1-5天，然后再密闭培养10-20天，得到所述发酵鱼肉酱。
8.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤4中的干燥、灭菌为使用肉制品微波烘干杀菌设备对所述发酵鱼肉酱进行干燥灭菌一体操作；其中，具体参数为：微波频率2450MHz±50Hz，传输速度0.1-5m/min，进出料高度30-50mm，传输速度0.5-5m/min，传输时间为10-120min。
9.一种根据权利要求1-9中任意一项所述的制备方法得到的小肽营养制剂。
10.一种小肽营养制剂的制备方法，其特征在于，如权利要求1-9所述的制备方法中，将鱼替换为包括猪肉、牛肉、羊肉中的任意一种或几种的肉类进行发酵培养，获得的小肽营养制剂。
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| CN102251002A (zh) * | 2011-06-23 | 2011-11-23 | 淮海工学院 | 固态发酵矛尾刺虾虎鱼肌肉蛋白制备抗氧化多肽的方法 |
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| CN104232728A (zh) * | 2014-09-12 | 2014-12-24 | 四川大学 | 菜籽肽蛋白及其制备方法 |
-
2015
- 2015-12-28 CN CN201511000003.6A patent/CN105614855B/zh active Active
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