CN105578899A

CN105578899A - 用于预防感染的新防护用途

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Publication number: CN105578899A
Application number: CN201480037782.4A
Authority: CN
Inventors: B.洛恩纳达尔; O.赫内尔; L-B.肖伯格; C.田纳福斯
Original assignee: Hero AG
Current assignee: Hero AG
Priority date: 2013-07-01
Filing date: 2014-06-26
Publication date: 2016-05-11
Anticipated expiration: 2034-06-26
Also published as: EP3016529B1; ES2674868T3; RU2668871C2; US9889162B2; SE537951C2; SE1350804A1; US20160158287A1; CN105578899B; TR201807779T4; RU2015154452A; PT3016529T; DK3016529T3; WO2015000788A1; EP3016529A1; LT3016529T

Abstract

本发明关注营养组合物领域且关注营养组合物，特别是含有富含磷脂，富含MFGM的乳清蛋白/乳蛋白浓缩固体的婴儿配方物，用于防护和预防感染发病，特别是耳炎。同时减少了解热药的使用。

Description

用于预防感染的新防护用途

发明领域

本发明关注用于婴儿的营养组合物如婴儿配方物的新用途。

发明背景

在母乳喂养和配方物(formula)喂养的婴儿中可见发病率的差异。母乳喂养的婴儿有比配方物喂养的婴儿更少的呼吸感染、耳感染和肠胃炎。(A.L.Wright等.BMJ,vol.299,946-949,B.Duncan等.Pediatrics,2003,vol.91(5)867-873,G.Aniansson等.PediatrInfectDisJ,1994,vol.13(3)182-188和K.G.Dewey等.JPediatr,1992,vol.126(No.5)part1695-702)。一个可能的解释是母乳比牛乳含有更多的免疫调控物质。

在乳中发现唾液酸，其既结合蛋白质，例如kappa-酪蛋白及其糖巨肽(cGMP)内含物，又是神经节苷脂中脂质结合的。发现唾液酸在人脑和母乳中为高浓度，而且已提出其为能对中枢神经系统发育具有影响的乳因子(B.Wang等.EurJClinNutr,(2003)57,1351-1369)。已显示唾液酸在小猪饮食中的富集改进记忆和学习(B.Wang等.AmJClinNutr,2007；85:561-569)。

此外，长链多不饱和脂肪酸(LCPUFA)对于形成神经系统具有清晰的影响。与接受未添加ARA和DHA的配方物的孩子相比，母乳喂养的孩子在血液和脑两者中具有更高水平的花生四烯酸(ARA)和二十二碳六烯酸(DHA)(M.Makrides等.AmJ,ClinNutr1994；60:189-94)。

饮食性鞘磷脂可能对于婴儿神经系统的发育也是重要的。在大鼠研究中，显示饮食中富含鞘磷脂增加神经系统的髓鞘形成(K.S.T.Oshida等.PediatrRes,2003.53:p.589-593)。母乳含有鞘磷脂，量为5-13mg/100ml。

(García等FoodChem2012135(3):p1777-1783)Phospholipidfingerprintsofmilkfromdifferentmammaliansdeterminedby31NMR)

特别背景

描述母乳喂养针对耳炎、下呼吸道感染和胃肠感染提供保护的另一个文献是(Ip,S.,等.,AsummaryoftheAgencyforHealthcareResearchandQuality'sevidencereportonbreastfeedingindevelopedcountries.BreastfeedMed,2009.4Suppl1:p.S17-30.)。还有ESPGHANCommittee的评论(JPGN,2009,49:p112-125)。这可能是由于人乳中的抗微生物因子，包括保护性肠道细菌物质的生长促进物，裂解细菌的酶，抗体，寡糖，糖基化蛋白，抗病毒脂质和白细胞(Labbok,M.H.,D.Clark和A.S.Goldman,Breastfeeding:maintaininganirreplaceableimmunologicalresource.NatRevImmunol,2004.4(7):p.565-72.2)。在过去的数十年，乳脂肪球膜(MFGM,milkfatglobulemembrane)，一种小但生物学活性的乳级分，由于在包括感染在内的数个领域中具有健康促进效果而获得了关注(Spitsberg,V.L.,Invitedreview:Bovinemilkfatglobulemembraneasapotentialnutraceutical.JDairySci,2005.88(7):p.2289-94.3)。MFGM级分过去在制造婴儿配方物时是被弃去的。最近，富集牛MFGM的乳级分已变为商品化的，但据我们所知，对婴儿配方物补充MFGM来防护和预防感染，特别是耳炎以前从未研究过。MFGM包含在磷脂双层中的120种不同蛋白质，该磷脂双层包围乳中的脂肪液滴。

现有技术

现有技术中没有一个公开了用于婴儿的营养组合物，其可用于防护和预防感染，特别是耳炎，且因此减少解热药的使用。

发明目的

本研究是随机化对照试验的一部分，该试验的总目的是对婴儿评估健康效果，对该婴儿喂养具有降低的能量和蛋白含量且补充有牛MFGM级分的实验配方物(EF)。主要试验的主要结果是在6个月时的重量，在4个月时的身体组成(bodycomposition)和在12个月时的认知功能。如本发明人在WO2013/153071中描述的，EF组在干预期间上调了其摄入体积，因此总能量和蛋白质吸收在两组中在干预期间是类似的，且身高和重量生长(linearandponderalgrowth)和身体组成直至6个月时均是类似的。目前已估测的目标是阐明与标准配方物(SF)相比，EF是否能以有利的方式影响配方物喂养婴儿中感染疾病和其他疾病症状的风险，使其水平更接近母乳喂养的婴儿。假设是接受EF配方物的婴儿与接受SF配方物的婴儿相比将在头12个月期间具有更少的感染，且其水平更类似于母乳喂养的婴儿。

发明概述

使用所述营养组合物在婴儿生命的头6个月期间作为唯一的营养物，或从出生至12个月大时作为补充饮食可以例如使得母乳和配方物喂养的儿童之间在以下方面的差异最小化：生长和/或身体组成(按重量计(wt)％脂肪)和/或胆固醇水平和/或血尿素氮值和/或血浆氨基酸和/或唾液中唾液酸和/或空腹胰岛素水平和/或认知功能和/或童年期肥胖出现。现还鉴定出给定所述新营养配方(EF)的情况下，母乳喂养和配方物喂养的儿童之间的发病和/或感染参数以积极的方式变化，且在富含磷脂、含有生物活性化合物(如乳铁蛋白、α-乳清蛋白、嗜乳脂蛋白(butyrophilin)、MUC1、PAS6/7(乳凝集素(lactadherin))、神经节苷脂、CD14、TLR1和TLR4、IgG、cGMP、唾液酸和磷脂(例如鞘磷脂、磷脂酰胆碱、磷脂酰丝氨酸和磷脂酰乙醇胺))的乳清蛋白/乳蛋白浓缩固体中含有MFGM的这种新营养配方(EF)对于预防和防护感染特别是耳炎是有效的。

乳清蛋白浓缩固体(富含磷脂)

用作依照本发明的营养组合物中组分的富含磷脂的乳清蛋白浓缩固体是具有高浓度生物活性蛋白质和脂质的乳清蛋白浓缩物。该乳清蛋白浓缩物具有高营养价值，且适用于婴儿和临床营养学。富含磷脂的乳清蛋白/乳蛋白浓缩固体含有来自原本存在于乳清中的MFGM的大多数不可溶膜蛋白片段，除此之外还有剩余乳清组分、蛋白质、乳糖和盐。本发明利用了在通过已知的工业处理(如过滤、离子交换层析等)除去主要乳清蛋白后获得的富含磷脂的乳清蛋白浓缩固体。该级分含有大多数不可溶膜片段，其含有蛋白质和相关脂肪。来自不同供应者的类似原材料可在依照本发明的配方物中用作富集的磷脂乳清蛋白/乳蛋白浓缩固体。

富集的磷脂乳清蛋白浓缩固体的来源包含基于总脂质含量至少20wt％磷脂，例如20至70wt％，或基于富集的磷脂乳清蛋白浓缩固体来源的总脂质，25至55wt％的磷脂。

依照本发明的营养组合物中使用的富含磷脂的乳清蛋白浓缩固体没有消除cGMP。

相比于用依照本发明的标准婴儿配方物或对照配方物喂养的婴儿，对于用依照本发明的营养组合物喂养的婴儿，富含磷脂的乳清蛋白浓缩固体的组分可以以有利的方式影响神经系统的发育、发病和精神性运动发育。

磷脂是细胞膜的重要成分，其显著地促进膜结构和功能。

从该研究的结果，可以预期添加到标准配方的富含磷脂和MFGM的成分乳清蛋白/乳蛋白固体对于预防和防护在生命头6个月期间的儿童中的感染，特别是耳炎也将是有活性的。

LacprodanMFGM-10(来自Arla食品)或来自其他供应商的类似原材料可用作依照本发明的配方物中的富集磷脂的乳清蛋白浓缩固体。例如，富集磷脂的乳清蛋白浓缩固体的来源包含基于总脂质含量的至少20wt％的磷脂，例如基于富集磷脂的乳清蛋白浓缩固体来源的总脂质的20至70wt％或例如25至55wt％的磷脂。

富含磷脂的乳清蛋白浓缩固体作为乳脂肪膜MFGM施用或作为上文逐个限定但混合在一起的不同成分施用。重要的是，基于总脂质含量的磷脂的含量包含基于总脂质含量的至少wt20％的磷脂。

在最近提交但尚未公开得到的PCT/EP2013/057405中描述的配方物可用于防护感染，特别是耳炎。先前从未产生过具有低蛋白和低能量含量两者的配方物，其与此结合具有高唾液酸含量和高乳来源胆固醇含量以及另外的特征，即其对感染特别是耳炎具有防护效果。

文献中没有一处会指导本领域技术人员以如此方式使用类似的配方物。由于有许多必须考虑的不同参数，如何组成满足婴儿需要以及委员会指令、国家法条和儿科营养领域中的推荐的婴儿配方物不是显而易见的。进一步地，未预料到所述配方还对感染，特别是耳炎具有防护效果。

下文显示用于防护感染，特别是耳炎的不同实施方案。所述实施方案例示实施方案且不限制本发明的范围

市场上的营养婴儿配方物也将受益于添加如上文限定的富含磷脂和MFGM的乳清蛋白浓缩固体且产生防护或预防效果。

在本发明的一个实施方案中，依照本发明使用的营养组合物包含：

-67kcal/100ml或更低的总能量含量，例如62kcal/100ml或更低，特别是低于60kcal/100ml或58-62kcal/100ml或例如58-60kcal/100ml

-1.25g/100ml或更低的蛋白质含量，或例如低于1.25g/100ml或例如1.1-1.25g/100ml或1.1g/100ml至低于1.25g/100ml

-富含磷脂和MFGM的乳清蛋白/乳蛋白浓缩固体，其占据组合物总干重的按重量计5-7％。

-67kcal/100ml或更低的总能量含量

-1.5g/100ml或更低的蛋白质含量

-占所述营养组合物总能量含量的7.2-8.6％的来自蛋白质的能量含量，

-占所述营养组合物总能量含量的至少47％或更高的来自脂肪的能量含量，

-包含8至10个碳的中链脂肪酸含量，其低于脂肪酸总量的按重量计3％，

-10-25mg/100ml或更高的唾液酸含量，

-4-10mg/100ml的胆固醇含量，

-7-15mg/100ml的鞘磷脂含量。

在本发明的一个实施方案中，依照本发明使用的营养组合物具有62kcal/100ml或更低的总能量含量且该组合物包含：

-1.25g/100ml或更低的蛋白质含量，

-5-10mg/100ml的胆固醇含量。

-占所述营养组合物总干重量的按重量计5-7％的富含磷脂和MFGM的乳清蛋白/乳蛋白浓缩固体。

在依照本发明使用的一个实施方案中，所述营养组合物的总能量含量为67kcal/100ml或更低且该组合物包含：

-1.5g/100ml或更低的蛋白质含量，

-10-25mg/100ml或更高的唾液酸含量，

-4-10mg/100ml的胆固醇含量，

-7-15mg/100ml的鞘磷脂含量，

在一个实施方案中，依照本发明使用的营养组合物具有62kcal/100ml或更低的总能量含量且该组合物包含：

-1.25g/100ml或更低的蛋白质含量，

-占所述营养组合物总能量含量的7.8-8.4％的来自蛋白质的能量含量，

-占所述营养组合物总能量含量的至少49％或更高的来自脂肪的能量含量，

-10-25mg/100ml或更高的唾液酸含量，

-5-10mg/100ml的胆固醇含量，

-9-15mg/100ml的鞘磷脂含量，

-占所述组合物总干重量的按重量计5-7％的富含磷脂和MFGM的乳清蛋白/乳蛋白浓缩固体。

在本发明的另一个实施方案中，要依照本发明使用的营养组合物包含：

-62kcal/100ml或更低的总能量含量，或例如低于60kcal/100ml或58-62kcal/100ml或例如58-60kcal/100ml

-占所述营养组合物总能量含量的7.8-8.4％的来自蛋白质的能量含量，或例如所述营养组合物总能量含量的8.0-8.3％

-占所述营养组合物总能量含量的至少49％或更高的脂肪含量，或尤其是50％或更高，例如52-53能量％脂肪，例如52.5％的配方物能量源自脂肪

-包含8至10个碳的中链脂肪酸含量，其为脂肪酸总量的0.5-3wt％，或组合物中脂肪酸总量的例如1-3％或例如1-2％，

-18mg/100ml或更高，或18-25mg/100ml的唾液酸含量，

-9-15mg/100ml或超过10mg/100ml或特别是13mg/100ml的鞘磷脂含量

-5-10mg/100ml或7-10mg/100ml的胆固醇含量，或例如表示为配方物的总脂肪含量的百分比的按重量计0.2-0.3％的胆固醇，或例如8mg/100ml，其为表示为配方物总脂肪含量百分比的0.23wt％胆固醇。

-富含磷脂的乳清蛋白/乳蛋白浓缩固体，其含有组合物总干重的按重量计5-7％。

在另一个实施方案中，依照本发明使用的营养组合物还包含：

-脂质结合唾液酸(lipidboundsialicacid)，作为神经节苷脂，其为总唾液酸含量的1.5-5wt％，或例如总唾液酸含量的4wt％的脂质结合唾液酸。

在一个实施方案中，要依照本发明使用的营养组合物中使用的能量含量为例如58-60kcal/100ml和51.8-53.4能量％脂肪。蛋白质含量为例如1.1-1.25g/100ml和7.8-8.2能量％蛋白质，并且低NPN含量是例如0.015-0.020g/100ml的NPN含量，并且高唾液酸含量是例如18-20mg/100ml。乳来源的胆固醇的水平为例如7-9mg/100ml。

在另一个实施方案中，要依照本发明使用的营养组合物中的能量含量为60kcal/100ml且所述组合物包含52.5能量％脂肪。蛋白质含量为1.2g/100ml且所述组合物包含8能量％蛋白质。在本发明的另一个实施方案中，依照本发明的营养组合物中的能量含量为60kcal/100ml和52.5能量％脂肪，蛋白质含量为例如1.2g/100ml且该组合物包含8能量％蛋白质，非蛋白氮(NPN)含量为0.015-0.020g/100ml或例如0.016g/100ml，以及13mg/100ml的鞘磷脂，并且高唾液酸含量是例如19g/100ml。乳来源的胆固醇水平为例如8mg/100ml，且该组合物包含中链脂肪酸(包含8至10个碳)含量，其低于脂肪酸总量的3wt％。

要依照本发明使用的营养组合物还可以指作为粉末的本发明组合物，其适用于在用水重建后制备液体组合物。

要依照本发明使用的营养组合物可从粉末制备，其通过将114g的营养组合物粉末与900ml水混合来制备1000ml依照本发明的液体组合物。

要依照本发明使用的营养组合物还包含任意组合的以下特征；

在要依照本发明使用的其他实施方案中，所述配方物包含5-6wt％富含磷脂的乳清蛋白浓缩固体和12-15wt％乳脂固体(creamsolid)，其表示为组合物中固体总重的百分比。

在要依照本发明使用的一个实施方案中，所述配方物还包含在配方物中例如9-15mg/100ml，或10mg/100ml或更高例如13mg/100ml的鞘磷脂含量。

其他实施方案也是要依照本发明使用的备选实施方案。

在要依照本发明使用的营养组合物中，组合物包含完整或部分水解的乳蛋白。

在要依照本发明使用的营养组合物中，其中组合物的氨基酸含量源自选自例如甜乳清固体(sweetwheysolid)、酪蛋白固体(caseinsoild)、乳固体(milksolid)和乳脂固体(creamsolid)的来源。

在要依照本发明使用的营养组合物中，其中依照本发明的组合物中的鞘磷脂含量为9-15mg/100ml，或10mg/100ml或更高，特别是13mg/100ml。

在要依照本发明使用的营养组合物中，其中该组合物由以下原材料构成：

-甜乳清固体，32-40kg/1000kg干粉组合物，或32.6-39.9kg/1000kg干粉组合物

-酪蛋白酸钠，4.6-5.7kg/1000kg干粉组合物，或4.66-5.69kg/1000kg干粉组合物

-脱脂乳固体，66-81kg/1000kg干粉组合物，或66.3-81kg/1000kg干粉组合物

-富含磷脂的乳清蛋白浓缩固体，47-58kg/1000kg干粉组合物或47.1-57.6kg/1000kg干粉组合物

-乳脂固体，117-143kg/1000kg干粉组合物。

在要依照本发明使用的营养组合物中，其中该组合物包含36.3kg甜乳清固体/1000kg干粉组合物，5.18kg酪蛋白酸钠/1000kg干粉组合物，73.7kg脱脂乳固体/1000kg干粉组合物，52.4kg乳清蛋白浓缩固体/1000kg干粉组合物，130kg乳脂固体/1000kg干粉组合物。

在要依照本发明使用的营养组合物中，其中上文描述的以kg/1000kg粉末限定组合物中成分的值与通过kg/8770L即饮营养组合物来限定组合物中成分时是相同的。

另外，该组合物可包含维生素(见例如下文配方物EF中提到的维生素)，矿物质(见例如下文配方物EF中提到的矿物质)，脂肪(见例如下文配方物EF中或发明详述中提到的脂肪)，乳糖和/或其他基本营养物(例如胆碱、牛磺酸、肌醇，肉碱，果寡糖(FOS)，半乳寡糖(GOS)，益生菌或核苷酸)。

另外，依照本发明使用的营养组合物可包含较少量的其他成分，例如低于7wt％的总配方物重量。这类其他成分的例子是其他乳固体(未在规定的配方物中)例如酸性乳清蛋白浓缩物、酪乳固体(buttermilksolids)，全乳固体(wholemilksolids)等。所述其他成分可以存在，只要满足上文描述的本发明的营养组合物的规格。

在要依照本发明使用的营养组合物中，其中该组合物包含36.3kg甜乳清固体/1000kg干粉组合物，5.18kg酪蛋白酸钠/1000kg干粉组合物，73.7kg脱脂乳固体/1000kg干粉组合物，52.4kg富含磷脂的乳清蛋白浓缩固体/1000kg干粉组合物，130kg乳脂固体/1000kg干粉组合物。另外，该组合物可包含维生素(见例如下文配方物EF中提到的维生素)，矿物质(见例如下文配方物EF中提到的矿物质)，脂肪(见例如下文配方物EF中提到的脂肪)，乳糖和/或其他基本营养物(例如胆碱、牛磺酸、肌醇，肉碱)。

另外，要依照本发明使用的营养组合物可包含其他成分，只要满足上文描述的本发明的营养组合物的规格。

方法

纳入

从2008年3月至2012年2月，在通过电话邀请父母后，招募了160名配方物喂养的婴儿(80个女孩和80个男孩)和80名婴儿(40个女孩和40个男孩)的母乳喂养的参照(BFR)组，所有婴儿均在UniversityHospital,Sweden出生。纳入标准是年龄<2个月，分娩时胎龄37-42周，出生重量2500-4500克，没有慢性病，且完全配方物喂养或对于母乳喂养的参照(BFR)组，纳入时完全母乳喂养且母亲意图在6个月以前完全母乳喂养。所有组在4至6个月期间均推荐仅少量的补充食物(尝味份量(tasteportions))。

随机化和盲化

将配方物喂养的婴儿根据性别分层并在计算机化模型中随机化为8块，从纳入起到6个月大接受EF或SF。双胞胎被共随机化到同一个干预组。干预对于父母和工作人员均是盲的，直到所有婴儿均已完成干预为止。干预对于父母是盲的，直到所有婴儿均完成随访为止。将配方奶粉与准备说明书一起在用编码数字标记的相同盒子中分给家庭。

研究配方物

被用作SF且从其改良为EF。EF中4重量百分比的蛋白质来自用富集牛MFGM的乳清蛋白浓缩物(MFGM-10,ArlaFoodsIngredients,Denmark)补充。EF和SF的常量营养物组成在表1中呈现。

表1

实验配方物(EF)和标准配方物(SF)中的常量营养物含量每100ml。

测量

在纳入(<2个月)、4个月、6个月和12个月时进行访问。在每次访问时，获得人体测量数据、血液和粪便样品。要求父母在干预期内(直到6个月大)每天以大便稠度(stoolconsistency)和频率、任何疾病症状、用药或住院完成症状日记。每部分的大便稠度报告为从1(水样腹泻(waterydiarrhea))至4(硬便(hardstool))的打分。在6-12个月内，要求父母在日记中写下任何疾病症状、用药或住院。每次访问时收集日记。将所有收集的症状日记纳入分析中。

统计学分析

使用IBMSPSSStatistics版本19(IBM1989,2010)完成统计学计算。所有分析均在意图治疗(intention-to-treat)基础上进行。使用非参数Mann-WhitneyU检验比较有疾病症状和抗生素使用的时日。通过Chi-Square检验或者如果任何单元具有预期的计数<5则使用Fisher精确检验(2侧)来进行比例比较。

结果

离去和不依从性的比率显示于图1。从纳入至6个月大，对于EF、SF和BFR组，分别从75(94％)、74(93％)和74(93％)的婴儿收集父母记录的症状日记，其涵盖89％、89％和90％的研究日总数。在6至12个月大期间，分别从EF、SF和BFR组中57(75％)、58(81％)和64(89％)的婴儿收集症状日记。

对于实验配方物(EF)、标准配方物(SF)和母乳喂养参照(BFR)组，纳入研究的，纳入分析的(白框)和干预后/在6个月时仍母乳喂养(灰框)的婴儿数。

感染

在干预期间，从纳入至6个月大时，与用SF喂养的婴儿的父母相比，喂养EF的婴儿的父母报告了更少的用抗生素治疗的急性中耳炎(AOM)的事件。在用抗生素治疗的细菌感染或导致住院的病毒感染中，在6个月大之前或在6至12个月大期间在配方物组中没有其他显著差异(表2)。

表2

对于实验配方物(EF)、标准配方物(SF)和母乳喂养的参照(BFR)组，在生命的头12个月期间用抗生素处理的细菌感染和导致住院的病毒感染，婴儿数(％)。

^a尿道感染

^b结膜炎(n＝4)，皮肤感染(n＝1)

^c阻塞性支气管炎

^d结膜炎(n＝1)，皮肤感染(n＝1)

^e皮肤感染(n＝2)

^f皮肤感染(n＝1)，真菌口腔炎(n＝1)

^g阻塞性支气管炎(n＝1)，未另外详述的病毒感染(n＝1)，热性癫痫(n＝1)

^h阻塞性支气管炎

EF组相比于SF组报道了更少的在干预期间的解热药使用(表3)。在EF、SF和BFR组中，分别有61(81％),59(80％)和63(85％)的婴儿从3个月大起已接受了肺炎球菌疫苗。

表3

实验配方物(EF)、标准配方物(SF)和母乳喂养的参照(BFR)组消耗的感染相关药物(婴儿数目(％)和总天数).

总之，本研究显示将牛MFGM级分补充到婴儿配方物中将0-6个月大的配方物喂养的婴儿中的急性中耳炎(AOM)的发病率降至类似于母乳喂养的婴儿的水平。该效果可能是由于之前婴儿配方物中不存在或以低于人乳的浓度存在的MFGM的抗微生物和/或免疫刺激因子所致。

进一步依照以下实施方案描述了本发明的生产方法；

一种用于产生依照本发明使用的营养组合物从而得到高唾液酸含量、高鞘磷脂含量和高胆固醇含量与低蛋白质和能量含量的组合的方法，包括以下步骤：

-提供成分每1000kg干粉末或每8770L即饮营养组合物；

-32-40kg甜乳清固体/1000kg干粉组合物或每8770L即饮营养组合物

-4.6-5.7kg酪蛋白酸钠/1000kg干粉组合物或每8770L即饮营养组合物

-66-81kg脱脂乳固体/1000kg干粉组合物或每8770L即饮营养组合物

-47-58kg富含磷脂的乳清蛋白浓缩固体/1000kg干粉组合物或每8770L即饮营养组合物

-117-143kg的乳脂固体/1000kg干粉组合物或每8770L即饮营养组合物

-进一步地另外包含例如维生素、矿物质、脂肪、乳糖和其他基本营养物(例如胆碱、牛磺酸、肌醇、肉碱)；和

-混合该成分。

一种用于产生依照本发明使用的营养组合物的方法，其中除了存在于乳原材料中的天然存在的游离氨基酸以外没有添加游离氨基酸。

还可以将少量其他成分添加到依照本发明使用的组合物中，只要满足上文描述的本发明营养组合物的规格。例如，可以使用酸性乳清固体。

一种用于产生依照本发明使用的营养组合物的方法，其中除了通过添加来自选自以下来源的原材料进行的添加外，没有添加游离氨基酸：甜乳清固体、酪蛋白固体、乳固体和乳脂固体。

发明详述

婴儿的定义是低于12个月大的幼儿(child)。

使用乳制奶油(dairycream)作为本发明营养组合物的成分(或在制备要与水混合的营养组合物粉末时使用乳制奶油固体)促进了在依照本发明的营养组合物中有高水平的乳来源的胆固醇。该乳制奶油使用促进了在依照本发明的组合物中有高水平的胆固醇(5-10mg/100ml)。由于依照本发明的特殊组成，添加胆固醇作为成分(由于添加乳制奶油和富含磷脂的乳清蛋白浓缩物)对于用依照本发明的营养组合物喂养的那些婴儿在喂养时段期间但可能也在生命的更后期产生与在母乳喂养的婴儿中类似的血液胆固醇水平。

乳脂还改进本发明配方物的口味。该配方物还含有富含磷脂的乳清蛋白浓缩物，其也促进了本发明配方物中乳来源的胆固醇以及乳来源的磷脂鞘磷脂的含量。鞘磷脂以优选10mg/100ml或更高的量纳入。本发明配方物包含例如在干性基础上(ondrybasis)26-32重量百分比的脂肪或例如在干性基础上30.7重量百分比的脂肪，其中占脂肪总量的15-19重量百分比的脂肪是植物脂肪，或例如占脂肪总含量的18.5重量百分比的是植物脂肪。

在依照本发明的营养组合物中包含8至10个碳的中链脂肪酸(MCT)的含量为例如占组合物中脂肪酸总量的0.5–3重量百分比或占脂肪酸总量的例如1-2重量百分比。本发明配方物模拟母乳中MCT的含量。成熟的母乳具有占总脂肪酸1-2重量百分比的MCT(R.A.Gibson等.Am.J.Clin.Nutr.34:252-257,1981)。

另外，甜乳清、乳脂和富含磷脂的乳清蛋白浓缩物均包含cGMP。通过例如不从依照本发明的营养组合物除去cGMP，将唾液酸含量保持为较高。高唾液酸含量为例如约10-25mg/100ml或18-20mg/100ml依照本发明的营养组合物。通过不从用于产生配方物的原材料除去cGMP，依照本发明的营养组合物可能例如增加唾液中唾液酸的水平(更类似于母乳)。更高的唾液酸摄取可对本发明的配方物喂养的婴儿中的例如发病率和认知行为产生影响。

鞘磷脂是母乳中磷脂级分的主要成分，且发现在常规营养组合物中浓度比依照本发明的配方物要低。鞘磷脂被代谢为神经酰胺，其浓度与神经系统的髓鞘化程度相关。对具有经实验抑制的髓鞘化的大鼠的实验显示，鞘磷脂的补充提高髓鞘化(K.Oshida等.PediatrRes,2003,vol.53(4)589-593)。依照本发明的配方物中乳来源的鞘磷脂含量是9mg/100ml或更高，或9-15mg/100ml，或13mg/100ml。

依照本发明的营养组合物包含原材料的特定组合物。依照本发明的营养组合物对于用配方喂养的婴儿的代谢系统也具有较低的负担效应，尽管它包含cGMP。

依照本发明的营养组合物中花生四烯酸(ARA)和二十二碳六烯酸(DHA)的水平与母乳中存在的水平相似。(Brenna等DHAandARAconcentrationsinhumanbreastmilkworldwideAmJClinNutr85,p1457-1464)。

本发明提供营养组合物和用于产生这类组合物的方法。

非蛋白氮

非蛋白氮(NPN)这一术语用于统指存在于食品中且包含氮的非蛋白质组分。(乳中的NPN主要是尿素-氮(约50％)、肌酸、肌酸酐、NH3等)。

由于在用于婴儿的配方物中没有过多的氮是重要的，我们尽力使依照本发明的营养组合物中具有<20mg/100ml的较低水平的NPN，例如0.015-0.020g/100ml的非蛋白氮(NPN)值。令人惊讶的，尽管本发明配方物具有全新的原材料组成，其具有较低的NPN值。

氨基酸概况(profile)

已知婴儿配方物需要预定的氨基酸概况以满足儿童需要。这也由政府委员会指令2006/141/EC规定。婴儿生命头几个月中的氨基酸供应必须在数量和质量上是足够的以满足该生命时期的需要。对于婴儿配方物的氨基酸组成已建立了指南、对最低值的推荐方案。依照本发明的营养组合物的氨基酸概况呈现于下表。临床研究确认了本发明配方物中的氨基酸组成对于生长需要是充足的。

可以一起计算甲硫氨酸和半胱氨酸的浓度，因为氨基酸半胱氨酸可从甲硫氨酸形成。另外，可以一起计算酪氨酸和苯丙氨酸的浓度，因为氨基酸酪氨酸可从苯丙氨酸形成。因此在上表中还指出了这些氨基酸的组合水平*。

本发明营养组合物的氨基酸来源：

依照本发明的配方物具有以下组成，其使得在不添加任何游离氨基酸的情况下实现想要的氨基酸概况。在不添加任何游离氨基酸(或分离的氨基酸)的情况下制备依照本发明的配方物以得到期望的氨基酸概况。

本申请中词语游离氨基酸或分离的氨基酸意为说明作为游离酸或作为盐分离的氨基酸物质。

依照本发明的配方物因此未富集有分离的氨基酸，例如游离氨基酸。这是一个优点，因为游离的氨基酸通常口味上较苦。添加纯形式的氨基酸也是昂贵的。通过使用依照本发明的成分，依照本发明的营养组合物不需要进一步添加游离或分离的氨基酸且因此在口味上更类似于母乳。

生产方法

依照一个实施方案，依照本发明的配方物通过将以下成分以kg每1000kg营养组合物干粉末或kg每8770L完成的营养组合物混合而产生。

所述营养组合物可进一步包含维生素、矿物质、脂肪、乳糖和/或其他基本营养物(例如胆碱、牛磺酸、肌醇、肉碱、核苷酸)。

进一步地，依照本发明的营养组合物可以包含其他成分，只要满足本发明上文描述的营养组合物的规格。

甜乳清

甜乳清富含α-乳清蛋白。高α-乳清蛋白含量使其在婴儿配方物中理想地适用作蛋白质来源以满足期望的氨基酸模式。甜乳清还含有cGMP，其为唾液酸来源。

乳脂

乳脂是短链和中链脂肪酸以及乳来源胆固醇的天然和有价值的来源。乳脂中乳来源的磷脂除了是重要的营养物质外也是有价值的乳化剂。依照本发明的配方物可以使用乳脂或乳脂固体制备。依照本发明使用的乳脂的脂肪含量为例如36-40wt％脂肪或尤其是37wt％脂肪。

酪蛋白酸盐

酪蛋白酸钠或部分酪蛋白酸的其他盐可用于本发明的配方物中。

水解的蛋白质

要依照本发明使用的配方物中的蛋白质来源可以是水解的蛋白质。

下文是要依照本发明使用的配方物的生产过程的例示性描述，下文的本发明例子不限制本发明的范围：

本发明提供即饮营养组合物或意图用水重构成即饮营养组合物的粉末配方物，和产生这类组合物的方法。

在一个实施方案中，所述组合物是适用于在用水重建后制备液体组合物的粉末。或者，组合物是例如即用型液体产品。

下文是用于制备要依照本发明使用的营养组合物的成分的例子。

要依照本发明使用的干粉末配方物的成分的量的例子(kg/1000kg)，该干粉末配方意图在使用前用水重建(用于即饮型配方物的成分的量在下面以kg/8770L描述)；

依照本发明的生产方法的例子，不限制本发明的范围；

依照本发明的粉末营养组合物的生产方法：

将基于乳的原材料混合成浆体。将标准化的乳或乳粉与液体乳清或乳清粉末混合，如需要加上另外的水。适合的装备在槽体中以负压混合浆体以减少起泡和掺入空气。

添加乳化剂和脂溶性的维生素至植物油的混合物。然后，脂肪相掺入混合槽体中的乳相中，或者在匀浆化前有序供给(Inlinedosing)。有序供给油意为将部分乳相加热，将油供给到液流中，匀浆化并再次降温。

添加水溶性维生素，添加剂如牛磺酸和具有促氧化效果的矿物质如亚铁盐和铜盐，之后马上通过后缩聚器(finisher)浓缩浆体至最终干物质含量为50-55％。然后将浓缩物加热处理以确保微生物学质量，喷雾干燥，将粉末降温并储存。在质量监控后，将产品包装，或者如果它是半成品，首先混合，即将喷雾干燥的半成品与另外的矿物质、维生素、生物活性成分和柠檬酸组合。

依照本发明的即饮型营养组合物的生产方法：

将水(用氢氧化钙调成碱性)与乳清或乳清粉末混合。中和溶液，接着添加碳水化合物来源和标准化的乳。添加另外的成分如胆碱、牛磺酸、肌醇和肉碱，接着是巴氏杀菌和脂肪相注射和匀浆化。脂肪相由植物油、乳化剂和肪溶性维生素组成。在灭菌前，添加维生素并进行质量检查。将产物进行UHT处理(其为在约140℃快速热处理5秒)，降温并无菌包装。

(UHT意指超高温。来自UHT方法的产品具有较好的保存性能和保留的营养价值)。

下文是依照本发明的营养组合物的例子和还有对照配方物的描述，两者均用在一项比较研究中。本发明的下面例子不限于本发明的范围；

该研究中使用的婴儿配方物(配方物EF)是依照本发明的营养组合物的例子。对照配方物(SF)用于比较。比较性对照配方物(SF)是市场上可获的具有良好质量的代表性婴儿配方物。还比较上表1中配方物的规格。

本研究中包含的配方物具有以下组成(见下表)-配方物EF是依照本发明的营养组合物的例子；

作为要依照本发明使用的营养组合物，配方物EF具有上文描述的成分，包含以下作为即时可消费物(将114g粉末配方物EF与900ml水混合，产生1000ml即饮型产品)呈现的营养价值；

-60kcal/100ml的总能量含量，

-1.2g/100ml的蛋白质含量，

-占所述营养组合物总能量含量的8.0(E％)的来自蛋白质的能量含量，

-蛋白质:能量比为2.0/100kcal，

-占根据配方物EF的营养组合物总能量含量的52.5(E％)的脂肪含量，

-占配方物EF中脂肪酸总量的1.6wt％的中链脂肪酸(包含8至10个碳)含量，

-19mg/100ml的唾液酸含量，

-8mg/100ml的胆固醇含量，

-占总唾液酸含量的4wt％的作为神经节苷脂的脂质结合唾液酸，

-13mg/100ml的鞘磷脂含量。

配方物EF与标准配方物相比具有来自天然来源的高唾液酸含量。唾液酸含量来自两种不同来源，一种来自乳清蛋白浓缩固体(富含磷脂)，其是脂质结合的，另一种来自GMP，其结合碳水化合物。配方物EF与对照配方物(SF)相比具有来自天然来源的高乳源鞘磷脂含量，即乳清蛋白浓缩固体(富含磷脂)。使用唾液酸和鞘磷脂的所述天然来源是一个优点。

能量％(E％)是表示来自营养配方中脂肪、蛋白质和碳水化合物的kcal的量的通常方式。瑞典的国家食品管理局(Livsmedelsverket)已在http.//www.slv.se/sv/grupp1/Mat-ochnaring/naringsrekommendationer/Kalorier-kilojoule-ochenergiprocent---hurraknar-man/明确了这一点。

具有上表中描述的成分的对照配方物包含下文作为即时可消费物(将130g粉末对照配方物与900ml水混合，产生1000ml即饮产品)呈现的营养价值；

-66kcal/100ml的总能量含量，

-1.27g/100ml的蛋白质含量，

-占依照对照配方物的营养组合物总能量含量的7.7蛋白质能量％含量，

-占根据对照配方物的营养组合物总能量含量的44.7的脂肪能量％含量，

-占对照配方物中脂肪酸总量的1.5wt％的中链脂肪酸(包含8至10个碳)含量，

-16mg/100ml的唾液酸含量，

-4mg/100ml的胆固醇含量，

-占根据对照配方物的总唾液酸含量的2wt％的作为神经节苷脂的脂质结合唾液酸，

-鞘磷脂1.8mg。

研究

研究设计

本研究是一项随机化的双盲干预试验，使用完全母乳喂养的婴儿作为参照组，这意味着3组幼儿参与本研究：

1)母乳喂养的幼儿。

2)接受根据本发明的实验婴儿配方物(EF)的幼儿(见上文说明)。

3)接受质量较好的代表性婴儿配方物的幼儿，该配方在本文中称为“对照配方物”(SF)(见上文说明)。

本研究设置为对于每个结果变量检测可能的0.5标准偏差(SD)的差异，这对应于在6个月时约0.4kg的重量差异或在2个月大时通过体积扫描术测量的身体脂肪的3.25百分比的差异。与0.5SD相当的视敏度是在4个月大时0.25octaves，这是与用或不用DHA补充物喂养的幼儿相比看到的差异。对于80％的统计“功效”，需要刚好超过60名幼儿的组大小。每组招募80名幼儿，其产生每组充足数目的幼儿来完成本研究。图1。

讨论

将MFGM补充到婴儿配方物将引起感染发病率的降低的假设得到以下发现的支持：用EF喂养的婴儿具有更低的AOM发病率和在干预期内减少的使用解热药药物的天数。观察性研究已显示母乳喂养针对一些感染的明显保护效果(Ip,S.,等.,AsummaryoftheAgencyforHealthcareResearchandQuality'sevidencereportonbreastfeedingindevelopedcountries.BreastfeedMed,2009.4Suppl1:p.S17-30.)，且已实施了将不同因子补充到婴儿配方物的几项研究以试图缩窄该差距。乳铁蛋白补充到婴儿配方物中与在生命的第一年期间更少的下呼吸道感染有关(King,J.C.,Jr.,等.,Adouble-blind,placebo-controlled,pilotstudyofbovinelactoferrinsupplementationinbottle-fedinfants.JPediatrGastroenterolNutr,2007.44(2):p.245-514)。

MFGM的几种组分已被描述为具有抗微生物效果。在人MFGM的蛋白组学表征中，鉴定了191蛋白质，其中19.9％牵涉免疫功能(Liao,Y.,等.,Proteomiccharacterizationofhumanmilkfatglobulemembraneproteinsduringa12monthlactationperiod.JProteomeRes,2011.10(8):p.3530-41.6)。在牛MFGM中，鉴定了120种不同蛋白质，其中4％具有免疫效果且21％具有未知效果(Liao,Y.,等.,Proteomiccharacterizationofhumanmilkfatglobulemembraneproteinsduringa12monthlactationperiod.JProteomeRes,2011.10(8):p.3530-41.)。对富集MFGM的商业乳级分的分析显示在乳清蛋白浓缩物和酪乳(buttermilk)浓缩物两者中高浓度的相关MFGM蛋白(Affolter,M.,等.,Qualitativeandquantitativeprofilingofthebovinemilkfatglobulemembraneproteome.JProteomics,2010.73(6):p.1079-88.)。另外，牛MFGM的脂质级分具有体外抗病毒效果(Fuller,K.L.,等.,Milkfatglobulemembraneisolatedfrombuttermilkorwheycreamandtheirlipidcomponentsinhibitinfectivityofrotavirusinvitro.JDairySci,2013.96(6):p.3488-97.)，且已提出MFGM的神经节苷脂在肠道微生物群(microbiota)的形成、肠免疫及由此在感染防御中起着重要作用(Rueda,R.,Theroleofdietarygangliosidesonimmunityandthepreventionofinfection.BrJNutr,2007.98Suppl1:p.S68-73.)。

先前已显示用MFGM补充在年龄更大的幼儿上具有对感染的有利效果。在秘鲁的一项研究中，将MFGM富集到6-12个月大的婴儿的补充食物中显示对腹泻的有利效果(Zavaleta,N.,等.,EfficacyofanMFGM-enrichedcomplementaryfoodindiarrhea,anemia,andmicronutrientstatusininfants.JPediatrGastroenterolNutr,2011.53(5):p.561-8)，且在一项比利时的研究中，针对年龄为2.5-6岁的幼儿的富集MFGM的配方奶给出发热发作的减少(Veereman-Wauters,G.,等.,Milkfatglobulemembrane(INPULSE)enrichedformulamilkdecreasesfebrileepisodesandmayimprovebehavioralregulationinyoungchildren.Nutrition,2012.28(7-8):p.749-52.)。

在本研究中看到的对AOM效果背后的机制不清楚。一种可能的解释可以是MFGM的因子是细胞或体液免疫系统中的基本构建要素且促进其成熟。越来越多的证据还提示肠微生物群和周围免疫系统之间的关联(Cerf-Bensussan,N.和V.Gaboriau-Routhiau,Theimmunesystemandthegutmicrobiota:friendsorfoes？NatRevImmunol,2010.10(10):p.735-44)，而且来自MFGM的饮食性抗微生物和免疫刺激因子能通过影响肠微生物群来对婴儿针对病原体的防御具有有利效果。不管如何，我们的解释是EF具有了对免疫功能的总体效果而不是对AOM的专门效果，这由以下发现支持：SF组中解热药的使用更大且几个其他结果显示朝向对EF组有利的趋势，例如在12个月大之前由于肠胃炎住院和在6个月大之前的呼吸和咳嗽。见表4。

表4

对于实验配方物(EF)、标准配方物(SF)和母乳喂养的参照(BFR)组报告的感染相关症状(报告每种症状的父母的数目(％)和总天数)。

在发达国家头6个月期间感染疾病的发病率较低，AOM是最常见的抗生素治疗的起因(McCaig,L.F.,R.E.Besser,和J.M.Hughes,Trendsinantimicrobialprescribingratesforchildrenandadolescents.JAMA,2002.287(23):p.3096-102)。抗生素在不到2岁龄的患有双侧AOM或患有AOM和耳漏两者的幼儿中最有用(Venekamp,R.P.,等.,Antibioticsforacuteotitismediainchildren.CochraneDatabaseSystRev,2013.1:p.CD000219.)。在本发明研究中，所有诊断有AOM的婴儿均接受抗生素治疗。将肺炎球菌疫苗接种引入婴儿在许多国家改变了婴儿中耳炎的流行病学(Coker,T.R.,等.,Diagnosis,microbialepidemiology,andantibiotictreatmentofacuteotitismediainchildren:asystematicreview.JAMA,2010.304(19):p.2161-9.)，且在本发明研究中在对于2008年10月后出生在区域的婴儿引入一般性肺炎球菌疫苗接种后约80％的婴儿从3个月大起接受了10价肺炎球菌疫苗。

使用的瓶子的通风也可影响在用瓶喂养的婴儿中中耳炎的风险，通风不够或未通风的瓶子创建连续到中耳的负压且可能增加AOM的风险(Brown,C.E.和B.Magnuson,Onthephysicsoftheinfantfeedingbottleandmiddleearsequela:eardiseaseininfantscanbeassociatedwithbottlefeeding.IntJPediatrOtorhinolaryngol,2000.54(1):p.13-20.)。不幸的是，我们在我们的研究群体中没有关于瓶制造商的数据，但因为有随机化，我们没有预期在EF和SF组之间的任何差异。

EF组具有比SF组稍微更硬的粪便，但其父母并未报告更多的胃肠炎症状或使用轻泻药。BFR组的粪便比配方物组中松散，且BFR组具有更少的胃肠炎症状和更少的轻泻药的使用，这与先前的研究较好地吻合(Tunc,V.T.,等.,Factorsassociatedwithdefecationpatternsin0-24-month-oldchildren.EurJPediatr,2008.167(12):p.1357-62)。

总之，本发明研究显示将牛MFGM级分补充到婴儿配方物将0-6个月大的用配方物喂养的婴儿中AOM的发病率降低至与母乳喂养的婴儿相似的水平。该效果可能是由于之前不存在于婴儿配方物中或以低于人乳中的浓度存在的MFGM的抗微生物和/或免疫刺激因子。该结果对于将来婴儿配方物组成的推荐具有意义。

Claims

1.一种用于婴儿的营养组合物，特别是婴儿配方物，其为即用型产品或用水从制备的粉末重构的即用型产品，其含有富含磷脂、富含乳脂肪球膜(MFGM)的乳清蛋白或乳蛋白浓缩固体，用于减少感染发病，特别是预防和防护耳炎。

2.依照权利要求1使用的营养组合物，其中所述乳清蛋白浓缩固体富含乳脂肪球膜(MFGM)本身或以下一种或多种：乳铁蛋白、α-乳清蛋白、嗜乳脂蛋白(butyrophilin)、MUC1、PAS6/7(乳凝集素)、神经节苷脂、CD14、TLR1和TLR4、IgG、cGMP、唾液酸和磷脂(例如鞘磷脂、磷脂酰胆碱、磷脂酰丝氨酸和磷脂酰乙醇胺)。

3.依照权利要求1-2中任一项使用的营养组合物，其中总能量含量为67kcal/100ml或更低且所述组合物包含：

-1.5g/100ml或更低的蛋白质含量，

-10-25mg/100ml或更高的唾液酸含量，

-4-10mg/100ml的胆固醇含量，

-7-15mg/100ml的鞘磷脂含量，

4.依照权利要求1-3中任一项使用的营养组合物，其中总能量含量为67kcal/100ml或更低且所述组合物包含：

-1.5g/100ml或更低的蛋白质含量，

-占所述营养组合物总能量含量的7.2-8.4％的来自蛋白质的能量含量，

-10-25mg/100ml或更高的唾液酸含量，

-5-10mg/100ml的胆固醇含量，

-9-15mg/100ml的鞘磷脂含量，

5.依照权利要求3或4使用的营养组合物，其中所述组合物还包含作为神经节苷脂的脂质结合唾液酸且其中所述作为神经节苷脂的脂质结合唾液酸的含量为总唾液酸含量的按重量计1.5-5％或按重量计4％。

6.依照前述权利要求中任一项使用的营养组合物，其中胆固醇含量为所述营养组合物总脂肪含量的按重量计0.2-0.3％或总脂肪含量的按重量计0.23％。

7.依照前述权利要求中任一项使用的营养组合物，其中胆固醇含量为7-10mg/100ml或8mg/100ml。

8.依照前述权利要求中任一项使用的营养组合物，其中胆固醇是乳来源的胆固醇。

9.依照前述权利要求中任一项使用的营养组合物，其中所述组合物包含完整或部分水解的乳蛋白。

10.依照前述权利要求中任一项使用的营养组合物，其中所述组合物中的氨基酸内含物来自乳固体、甜乳清固体、酪蛋白固体、和乳脂固体、富含磷脂的乳清蛋白浓缩物。

11.依照前述权利要求中任一项使用的营养组合物，其中来自蛋白质的能量含量占所述营养组合物总能量含量的8-9％。

12.依照前述权利要求中任一项使用的营养组合物，其中来自脂肪的能量含量占所述营养组合物总能量含量的47-54％或所述营养组合物总能量含量的52-53％。

13.依照前述权利要求中任一项使用的营养组合物，其中所述营养组合物中的能量含量低于60kcal/100ml或例如58，低于60kcal/100ml。

14.依照前述权利要求中任一项使用的营养组合物，其中唾液酸为10-30mg/100ml。

15.依照前述权利要求中任一项使用的营养组合物，其中所述组合物包含鞘磷脂，且其中依照本发明的组合物中鞘磷脂的含量为9-17mg/100ml，或特别是13mg/100ml。

16.一种用于减少感染发病，特别是耳炎的方法，其通过对需要这类治疗的婴儿施用有效量的作为婴儿配方物的营养组合物，该组合物为即用型产品或用水从制备的粉末重构的即用型产品，其含有富含磷脂、富含乳脂肪球膜(MFGM)的乳清蛋白/乳蛋白浓缩固体。