JP7025112B2

JP7025112B2 - Ｂｄｎｆ産生促進剤

Info

Publication number: JP7025112B2
Application number: JP2016057667A
Authority: JP
Inventors: 聡志日暮; 裕子小野; 英彦横越; 貴史山田
Original assignee: Megmilk Snow Brand Co Ltd
Current assignee: Megmilk Snow Brand Co Ltd
Priority date: 2016-03-22
Filing date: 2016-03-22
Publication date: 2022-02-24
Anticipated expiration: 2036-03-22
Also published as: JP2017171595A

Description

本発明は、リン脂質を有効成分とするＢＤＮＦ産生促進剤、あるいはリン脂質を配合したＢＤＮＦ産生促進用飲食品又は飼料に関する。

加齢やストレスによる脳機能の低下は記憶力の低下やうつ病、不眠、認知症など引き起こし、生活の質（Ｑｕａｌｉｔｙｏｆｌｉｆｅ：ＱＯＬ）を著しく低下させる。高ストレス化、超高齢化が進行するわが国において、うつ病や認知症などの精神疾患の罹患者の増加が社会的問題となっており、脳機能を向上させる物質の探索研究が活発に行われている。

近年、神経細胞の生存維持、成長、シナプスの機能亢進などの機能を有し、認知能や記憶力の維持向上に寄与する因子として、脳由来神経栄養因子（Ｂｒａｉｎ－ｄｅｒｉｖｅｄｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃｆａｃｔｏｒ：ＢＤＮＦ）が注目されている。ＢＤＮＦの低下がうつ病などの精神神経疾患の発症に関わることが示唆されており、実際、うつ病患者では脳内のＢＤＮＦの濃度の減少が確認されている（非特許文献１）。また、うつ病モデル動物を用いた実験において、脳室へのＢＤＮＦ投与により行動異常が改善することが報告されている（非特許文献２）。

さらに、ＢＤＮＦの効果として、過食を抑制し体重増加を防ぐこと（非特許文献３）、エネルギー消費を亢進すること（非特許文献４）、褐色脂肪組織のｕｎｃｏｕｐｌｉｎｇｐｒｏｔｅｉｎ－１（ＵＣＰ１）の遺伝子発現を増加させること（非特許文献５）、
末梢組織での糖利用を促進して糖代謝改善に関与すること（非特許文献６）、加齢に伴って低下する勃起能を維持させること（非特許文献７）、卵子を成熟させること（非特許文献８）などといった様々な報告がなされている。

従って、ＢＤＮＦを増加させることにより、脳機能の向上又は改善作用、認知能又は記憶力向上、抗うつ又は抗不安作用、気力向上作用、精神安定化作用、体重軽減又は抗肥満作用、エネルギー代謝亢進作用、糖代謝向上又は改善作用、脂質代謝向上又は改善作用、勃起機能不全改善作用、卵細胞成熟促進作用、生殖能向上作用などの良好な機能が発揮されることが期待される。

上記のことから、ＢＤＮＦの発現を増強して脳機能を向上させる物質として、常用可能な医薬品としての開発と同時に、食品への添加が可能で日々の食生活を通じて継続的に摂取することができる安全性の高い剤の開発が望まれている。例えば、杏仁、麻黄、桂枝、人参、当帰、川きゅう、乾姜、甘草及び石膏、又はこれらの抽出物を有効成分とする神経栄養因子合成促進剤（特許文献１）や、ビフィドバクテリウム・ロンガムを含有する食用組成物を有効成分とするＢＤＮＦ発現剤が提案されている（特許文献２）。

一方、脳組織にはリン脂質が多量に含まれており、その乾燥重量の約半分を占める。そのため、リン脂質を経口摂取することによる脳機能向上が期待されている。例えば、ホスファチジルコリンやホスファチジルセリンの摂取による脳機能障害の改善が報告されている（非特許文献９）。また、スフィンゴミエリンを有効成分とする学習能向上剤（特許文献３）等が提案されている。しかし、リン脂質がＢＤＮＦの産生を促進することは何ら知られていない。

特開平７－２５７７７号公報特表２０１１－５１７５６８号公報特開２００７－２４６４０４号公報

Ｅｒｉｃｋｓｏｎら、Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｔｉｓｔ１８；８２－９７，２０１２Ｓｉｕｃｉａｋら、Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｅｈａｖ．５６；１３１－１３７，１９９７Ｋｅｒｎｉｅら、Ｅｍｂｏ. Ｊ. １９；１２９０－１３００，２０００Ｔｓｕｃｈｉｄａら、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｏｂｅｓ．Ｒｅｌａｔ．Ｍｅｔａｂ．Ｄｉｏｒｄ．２５；１２８６－１２９３，２００１Ｎｏｎｏｍｕｒａら、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｅｘｐ．ＤｉａｂｅｔｅｓＲｅｓ．２；２０１－２０９，２００１Ｙａｍａｎａｋａら、ＤｉａｂｅｔｅｓＯｂｅｓ．Ｍｅｔａｂ．９；５９－６４，２００７Ｂａｋｉｒｃｉｏｇｌｕら、Ｊ．Ｕｒｏｌ. １６５；２１０３－２１０９、２００１Ｌｉら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．１０７；１０２８０－１０２８４，２０１０永尾ら、オレオサイエンス２；１２９－１３５、２００２

本発明は、日常的に摂取することが可能であり、ＢＤＮＦ産生促進作用を持つ薬剤及び栄養組成物、飲食品、飼料を提供することを課題とする。

本発明者らは、上記課題を解決すべく鋭意研究を行ったところ、リン脂質を経口摂取することにより、組織中、特に脳におけるＢＤＮＦが増加することを見出し、本発明を完成するに至った。即ち本発明は以下の構成を有する
（１）
リン脂質を有効成分とするＢＤＮＦ産生促進剤。
（２）
乳由来リン脂質を有効成分とするＢＤＮＦ産生促進剤。
（３）
乳又は乳素材から得られる組成物であって、全固形中１０重量％以上のリン脂質を含有する組成物（乳由来リン脂質含有組成物）を乳由来リン脂質として使用する（２）記載のＢＤＮＦ産生促進剤。
（４）
乳又は乳素材から得られる組成物であって、全固形中３０重量％以上のリン脂質を含有する組成物（乳由来リン脂質含有組成物）を乳由来リン脂質として使用する（２）記載のＢＤＮＦ産生促進剤。
（５）
乳由来リン脂質含有組成物が、乳又は乳素材を孔径０．１～２．０μｍの精密濾過（ＭＦ）膜処理又は分画分子量５～５００ｋＤａの限外濾過（ＵＦ）膜処理することにより得られる組成物である（２）記載のＢＤＮＦ産生促進剤。
（６）
乳由来リン脂質含有組成物が、乳又は乳素材に酸を加えてｐＨを４．０～５．０に調整し、カゼインタンパク質を沈殿として除去した後、孔径０．１～２．０μｍのＭＦ膜処理又は分画分子量５～５００ｋＤａのＵＦ膜処理することにより得られる組成物である（２）記載のＢＤＮＦ産生促進剤。
（７）
乳又は乳素材が、バターセーラム又はバターミルクである（３）乃至（６）のいずれか１つ以上に記載のＢＤＮＦ産生促進剤。
（８）
（１）乃至（７）のいずれか１つ以上に記載のＢＤＮＦ産生促進剤を配合したＢＤＮＦ産生促進栄養組成物、飲食品又は飼料、治療薬。

本発明のリン脂質を有効成分とするＢＤＮＦ産生促進剤及び／又はリン脂質を配合したＢＤＮＦ産生促進用栄養組成物、飲食品又は飼料はヒト又は動物が経口摂取することにより、ＢＤＮＦの産生を促進させることができる。

本発明において用いることができるリン脂質の由来は、特に限定されず、化学的に合成されたものや、天然由来のものを使用可能であるが、大豆や卵黄等食品由来のものが好ましく、特に、乳由来であることが望ましい。乳由来のリン脂質としては、ウシやヤギ、ヒツジ、ヒト等の哺乳類の乳から調製したものを使用することができる。また、これらの哺乳類の乳から調製したバターセーラム、バターミルク等の乳素材から調製することも可能である。これらは、必ずしもリン脂質として精製されている必要は無く、全固形中に３０重量％以上のリン脂質を含むような乳由来リン脂質含有組成物を用いることもできる。実際に、牛乳から調製された乳由来リン脂質含有組成物として、リン脂質含量が３０重量％以上と高濃度で安価なものが上市されており、このような素材を用いることもできる。また、その他のリン脂質としても、大豆レシチンや卵黄レシチンといったものが上市されている。本発明のＢＤＮＦ産生促進剤は、上記の乳由来リン脂質や乳由来リン脂質含有組成物、大豆レシチン、卵黄レシチン等をそのままＢＤＮＦ産生促進剤として用いることも可能であるが、リン脂質の他に糖類や脂質、タンパク質、ビタミン類、ミネラル類、フレーバー等、他の医薬品、飲食品や飼料に通常使用する原材料等を混合することや、さらに常法に従い粉末剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤、ドリンク剤などに製剤化することも可能である。

本発明のＢＤＮＦ産生促進剤の有効量としては、後述するラットでの試験において、体重１ｋｇあたりリン脂質含有組成物を１００ｍｇ以上、好ましくは２５０ｍｇ以上経口摂取させることにより、ＢＤＮＦの産生が増加することが分かる。実験動物における摂取量は、血中薬物濃度において、成人一人あたりの摂取量に該当することから（中島光好（１９９３）「第８巻薬効評価」廣川書店２－１８頁）、通常、成人一人一日あたり、リン脂質含有組成物を１００ｍｇ以上、好ましくは２５０ｍｇ以上摂取することにより組織、特に、脳でのＢＤＮＦ産生促進が期待できるので、この必要量を確保できるようにすればよい。乳由来リン脂質含有組成物は、乳由来リン脂質を３０％以上含むので、乳由来リン脂質としては、約３０ｍｇ以上摂取することで、ＢＤＮＦ産生促進効果を期待できる。

本発明のＢＤＮＦ産生促進用栄養組成物の形態としては通常の錠剤、カプセル剤、散剤等が想定される。また、本発明のＢＤＮＦ産生促進用飲食品としては、通常の飲食品、例えばヨーグルト、乳飲料、ウエハース、デザート等にリン脂質を配合すればよい。これらのＢＤＮＦ産生促進用飲食品については、成人一人一日あたり、リン脂質含有組成物を１００ｍｇ以上摂取させるために、飲食品の形態にもよるが飲食品１００ｇあたりリン脂質含有組成物を１～３０００ｍｇ配合することが好ましい。また、本発明のＢＤＮＦ産生促進用飼料は、通常の飼料、例えば家畜用飼料やペットフード等にリン脂質を配合すればよい。たとえばこれらの飼料について、一日あたり、乳由来リン脂質含有組成物を配合する場合、リン脂質を３０ｍｇ以上摂取させるために飼料１００ｇあたり乳由来リン脂質含有組成物を１～５０００ｍｇ配合することが好ましい。

本発明では、リン脂質含有組成物を配合する方法に特に制限はないが、例えば、溶液中で添加、配合するには、当該組成物を脱イオン水に懸濁あるいは溶解し、撹拌混合した後、医薬品、飲食品や飼料の形態に調製して使用する。撹拌混合の条件としては、当該組成物が均一に混合されればよく、ウルトラディスパーサーやＴＫホモミクサー等を使用して撹拌混合することも可能である。また、当該組成物の溶液は、医薬品、飲食品や飼料に使用しやすいように、必要に応じて、ＲＯ膜等での濃縮や、凍結乾燥して使用することができる。本発明では、医薬品、飲食品や飼料の製造に通常使用される殺菌処理が可能であり、粉末状であっては乾熱殺菌も可能である。従って、本発明のリン脂質含有組成物を含有する液状、ゲル状、粉末状、顆粒状等様々な形態の医薬品、栄養組成物、飲食品や飼料を製造することができる。

以下に、実施例及び試験例を示し、本発明についてより詳細に説明するが、これらは単に例示するのみであり、本発明はこれらによって何ら限定されるものではない。

バターセーラム粉（ＳＭ２、Ｃｏｒｍａｎ社製）の２５％溶液を調製し、５Ｎ塩酸を添加してｐＨを４．５に調整した。この溶液を５０℃で１時間静置し、カゼインタンパク質を沈殿させた。フィルタープレスを用いてこの沈殿を除去し、得られた水溶液を孔径１．０μｍのＭＦ膜（ＳＣＴ社製）で処理して濃縮液画分を得た。この濃縮液画分を凍結乾燥処理し、リン脂質含有組成物を得た。この乳由来リン脂質含有組成物は全固形当たり脂質を５３％、リン脂質を３１％、タンパク質を２４％、糖質を１５％、灰分を８％含有しており、本発明のＢＤＮＦ産生促進剤としてそのまま使用可能である。

バターミルク粉（雪印メグミルク社製）の２０％溶液を調製し、２Ｎ塩酸を添加してｐＨを４．５に調整した。この溶液を４５℃で３０分間静置してカゼインタンパク質を沈殿させた。クラリファイヤーを用いてこの沈殿を除去した後、得られた上清を孔径０．１μｍのＭＦ膜（ＳＣＴ社製）で処理し、濃縮液画分を得た。この濃縮液画分を凍結乾燥処理し、乳由来リン脂質含有組成物を得た。この乳由来リン脂質含有組成物は固形当たり脂質を６２％、リン脂質を３８％、タンパク質を１５％、糖質を１８％、灰分を５％含有しており、本発明のＢＤＮＦ産生促進剤としてそのまま使用可能である。

バターセーラム粉（Ｂｅｔａｓｅｒｕｍｐｏｗｄｅｒ、Ｔａｔｕａ社製）の１０％溶液を調製し、５倍容の脱イオン水を加えながら孔径０．２μｍのＭＦ膜（旭化成製）でダイアフィルトレーション処理を行い濃縮液画分を得た。この濃縮液画分を凍結乾燥処理し、リン脂質含有組成物を得た。この乳由来リン脂質含有組成物は固形当たり脂質を３０．１％、リン脂質を１５．２％、タンパク質を６１．５％、糖質を０．６％、灰分を７．８％含有しており、本発明のＢＤＮＦ産生促進剤としてそのまま使用可能である。

［試験例１］
（動物実験によるＢＤＮＦ産生促進効果の確認）
２年齢のＷｉｓｔａｒ系雄性ラットを平均体重が均等になるように３群（ｎ＝１０）に分け、コントロール群、大豆レシチン群、ミルクリン脂質群とした。それぞれの群には、表１に示す配合の食餌を２週間自由摂食させた。なお、各食餌中に含まれるタンパク質含量、脂質含量および必須脂肪酸含量は同一になるように調整（リノール酸、リノレン酸の総量として３．１％）し、大豆レシチン群およびミルクリン脂質群についてはコリンを含むリン脂質であるホスファチジルコリンおよびスフィンゴミエリンの総量が同一になるように調整した（０．８％）。２週間の試験食摂取後に脳組織を摘出し神経栄養因子であるＢＤＮＦの含有量をＥＬＩＳＡキット（ＢＤＮＦＥｍａｘＩｍｍｕｎｏＡｓｓａｙＳｙｓｔｅｍ: Ｐｒｏｍｅｇａ社製, Ｍａｄｉｓｏｎ, ＷＩ, ＵＳＡ）を使用し測定した。その結果を表２に示す。

脳組織中のＢＤＮＦ濃度は、大豆レシチン群およびミルクリン脂質群でコントロール群に比べて増加し、ミルクリン脂質群でその増加は顕著に認められた。この結果から、リン脂質は神経栄養因子ＢＤＮＦを増加させる作用を有することが明らかとなった。なお、実施例３で調製した乳由来リン脂質含有組成物についても同様の評価を行い、試験例１の２倍量の乳由来リン脂質含有組成物を飼料に配合することにより、実施例１で調製した乳由来リン脂質含有組成物と同等のＢＤＮＦ産生促進効果が認められた。

（ＢＤＮＦ産生促進用液状栄養組成物の調製）
実施例１の乳由来リン脂質含有組成物５０ｇを４９５０ｇの脱イオン水に溶解し、５０℃まで加熱後、ＴＫホモミクサー（ＴＫＲＯＢＯＭＩＣＳ；特殊機化工業社製）にて、６０００ｒｐｍで３０分間撹拌混合して乳由来リン脂質３１０ｍｇ／１００ｇの乳由来リン脂質溶液を得た。この乳由来リン脂質含有組成物溶液４．０ｋｇに、カゼイン５．０ｋｇ、大豆タンパク質５．０ｋｇ、魚油１．０ｋｇ、シソ油３．０ｋｇ、デキストリン１８．０ｋｇ、ミネラル混合物６．０ｋｇ、ビタミン混合物１．９５ｋｇ、乳化剤２．０ｋｇ、安定剤４．０ｋｇ、香料０．０５ｋｇを配合し、２００ｍｌのレトルトパウチに充填し、レトルト殺菌機（第１種圧力容器、ＴＹＰＥ：ＲＣＳ－４ＣＲＴＧＮ、日阪製作所社製）で１２１℃、２０分間殺菌して、本発明のＢＤＮＦ産生促進用液状栄養組成物５０ｋｇを製造した。なお、このＢＤＮＦ産生促進用液状栄養組成物には、１００ｇあたり、乳由来リン脂質が２４．８ｍｇ含まれていた。

（ＢＤＮＦ産生促進用ゲル状食品の調製）
実施例１の乳由来リン脂質含有組成物１０ｇを７００ｇの脱イオン水に溶解し、５０℃まで加熱後、ウルトラディスパーサー（ＵＬＴＲＡ－ＴＵＲＲＡＸＴ－２５；ＩＫＡジャパン社製）にて、９５００ｒｐｍで３０分間撹拌混合した。この溶液に、ソルビトール４０ｇ、酸味料２ｇ、香料２ｇ、ペクチン５ｇ、乳清タンパク質濃縮物５ｇ、乳酸カルシウム１ｇ、脱イオン水２３５ｇを添加して、撹拌混合した後、２００ｍｌのチアパックに充填し、８５℃、２０分間殺菌後、密栓し、本発明のＢＤＮＦ産生促進用ゲル状食品５袋（２００ｇ入り）を調製した。このようにして得られたＢＤＮＦ産生促進用ゲル状食品は、すべて沈殿等は認められず、風味に異常は感じられなかった。なお、このＢＤＮＦ産生促進用ゲル状食品には、１００ｇあたり、乳由来リン脂質が３１０ｍｇ含まれていた。

（ＢＤＮＦ産生促進用飲料の調製）
酸味料２ｇを７００ｇの脱イオン水に溶解した後、実施例２の乳由来リン脂質含有組成物１０ｇを溶解し、５０℃まで加熱後、ウルトラディスパーサー（ＵＬＴＲＡ－ＴＵＲＲＡＸＴ－２５；ＩＫＡジャパン社製）にて、９５００ｒｐｍで３０分間撹拌混合した。マルチトール１００ｇ、還元水飴２０ｇ、香料２ｇ、脱イオン水１６６ｇを添加した後、１００ｍｌのガラス瓶に充填し、９０℃、１５分間殺菌後、密栓し、ＢＤＮＦ産生促進用飲料１０本（１００ｍｌ入り）を調製した。このようにして得られたＢＤＮＦ産生促進用飲料は、すべて沈殿は認められず、風味に異常は感じられなかった。なお、このＢＤＮＦ産生促進用飲料には、１００ｇあたり、乳由来リン脂質が３８０ｍｇ含まれていた。

（ＢＤＮＦ産生促進用飼料の調製）
実施例２の乳由来リン脂質含有組成物２ｋｇを９８ｋｇの脱イオン水に溶解し、５０℃まで加熱後、ＴＫホモミクサー（ＭＡＲＫＩＩ１６０型；特殊機化工業社製）にて、３６００ｒｐｍで４０分間撹拌混合して乳由来リン脂質７６０ｍｇ／１００ｇの乳由来リン脂質溶液を得た。この乳由来リン脂質溶液１０ｋｇに大豆粕１２ｋｇ、脱脂粉乳１４ｋｇ、大豆油４ｋｇ、コーン油２ｋｇ、パーム油２３．２ｋｇ、トウモロコシ澱粉１４ｋｇ、小麦粉９ｋｇ、ふすま２ｋｇ、ビタミン混合物５ｋｇ、セルロース２．８ｋｇ、ミネラル混合物２ｋｇを配合し、１２０℃、４分間殺菌して、本発明のＢＤＮＦ産生促進用イヌ飼育飼料１００ｋｇを製造した。なお、このＢＤＮＦ産生促進用イヌ飼育飼料には、１００ｇあたり、乳由来リン脂質が７６ｍｇ含まれていた。

（ＢＤＮＦ産生促進剤（錠剤）の調製）
表３に示す配合で原料を混合後、常法１ｇに成型、打錠して本発明のＢＤＮＦ産生促進剤を製造した。なお、この感覚改善剤１ｇ中には、乳由来リン脂質が３１ｍｇ含まれていた。

本発明のリン脂質を有効成分とするＢＤＮＦ産生促進剤及び／又はリン脂質は配合したＢＤＮＦ産生促進用栄養組成物、飲食品又は飼料により、ＢＤＮＦの産生を促進させ、様々な疾患を予防可能な薬剤を提供できる。

Claims

乳又は乳素材から得られる、乳由来リン脂質を含有する組成物（乳由来リン脂質含有組成物）であって、１日用量当たり３０ｍｇ以上の乳由来リン脂質を摂取するために使用される、脳組織におけるＢＤＮＦ産生促進剤。
乳又は乳素材が、バターセーラム又はバターミルクである、請求項１に記載のＢＤＮＦ産生促進剤。
請求項１又は２に記載のＢＤＮＦ産生促進剤を配合したＢＤＮＦ産生促進用の栄養組成物、飲食品又は飼料、治療薬。
乳又は乳素材から得られる、乳由来リン脂質を含有する組成物（乳由来リン脂質含有組成物）であって、１日用量当たり３０ｍｇ以上の乳由来リン脂質を摂取するために使用される、脳組織におけるＢＤＮＦ産生促進剤の製造方法であって、
乳由来リン脂質含有組成物が、乳又は乳素材を孔径０．１～２．０μｍの精密濾過（ＭＦ）膜処理又は分画分子量５～５００ｋＤａの限外濾過（ＵＦ）膜処理することにより得られる組成物である、製造方法。
乳由来リン脂質含有組成物が、乳又は乳素材に酸を加えてｐＨを４．０～５．０に調整し、カゼインタンパク質を沈殿として除去した後、孔径０．１～２．０μｍのＭＦ膜処理又は分画分子量５～５００ｋＤａのＵＦ膜処理することにより得られる組成物である、請求項４に記載の製造方法。