CN105561327B - 一种β-环糊精-三七微粉组合物及其制备方法和制剂 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种β‑环糊精‑三七微粉组合物，其主要是由β‑环糊精和三七所制成。本发明还公开了所述组合物的制备方法、含有所述组合物的制剂以及该制剂的制备方法。相对于现有技术，本发明β‑环糊精‑三七微粉组合物及其制剂，能够促进三七有效成分释放、提高有效成分水溶性、增强三七总皂苷稳定性、改进制剂性能，适合工业化生产。

Description

一种β-环糊精-三七微粉组合物及其制备方法和制剂

技术领域

本发明涉及一种β-环糊精-三七微粉组合物及其制备方法和制剂，属于药物制剂领域。

背景技术

三七(pseudo-giiseig)，始载于《本草纲目》，为五加科人参属多年生草本植物，以其根部入药，味甘、微苦、性温、归肝、胃、心、小肠经，是我国特有的传统珍贵中药材，具有止血、活血、补血、保护心肌细胞、保护脑组织、降血脂、抗血栓、增强免疫力、抗冠心病、消炎镇痛、抗肿瘤、抗衰老、保肝、滋补等多种药理作用，临床已广泛用于心脑血管疾病、神经性疾病、肿瘤及外科疾病等多种疾病的治疗。

三七的主要有效成分有三七总皂苷、黄酮、三七素、三七多糖、挥发油、氨基酸及各种微量元素等。其中三七总皂苷总含量可达8.19％-29.4％，包括三七皂苷、人参皂苷等多种皂苷，在心脑血管系统、中枢神经系统、免疫系统和血液系统等方面有较强的生理活性。三七中黄酮类成分主要有两种，一种是槲皮素，另一种苷元为槲皮素，糖元为木糖、葡萄糖、葡萄糖醛酸，黄酮类化合物具有降低心肌耗氧量、增加冠脉和脑血管流量、抗心律不齐、软化血管、降血糖和血脂等功能。三七多糖具有调节免疫、增强免疫力的功能。从三七挥发油分离得到的四十多个化合物中，有些能促进骨细胞的增殖和分化。三七含有19种以上的氨基酸，有8种人体必需的氨基酸，《本草新编》上说：“三七根止血神药也”，止血有效成分为三七素(三七氨酸)，是从三七根中分离的一种非蛋白水溶性氨基酸。三七中含有26种无机元素，其中含量较高的分别是K、Na、P、Ca。它们与人体的抗肿瘤、抗菌、抗风湿作用相关，而且在人体内经络合作用后产生更强的活性作用及协同的抗病意义。此外，三七中还含有甾醇、聚炔醇类、有机酸等成分。

使用三七的药物制剂种类很多，有复方单方制剂，剂型主要有注射液、胶囊剂、散剂、丸和片剂等，还有以三七单味入药的片剂、颗粒剂保健品。这些剂型产品在治疗脑梗死上具有一定功效，也可用于冠心病心绞痛的治疗。众多三七制剂中口服三七粉及三七片由于服用方便，效果好而广受欢迎。但是，三七原粉具特殊的苦味，口感欠佳，主要有效成分总皂苷的光、热稳定性差，易分解，黄酮类成分水溶性小，药材利用率低，加之传统制剂技术的欠缺，服用人群的增加，药材需求逐年攀升，形成资源的过度需求，因此，提升质量改进产品性能是三七制剂产品急需解决的技术问题。

目前单味三七口服制剂的加工采用通常的机械粉碎处理药材，以提高药物利用率。三七药材经除杂、烘干、粗粉后再进行细粉碎，收集100～120目的细粉，包装灭菌即成为产品(首都医药，2009，3：44-45)；零售药店为保证药材的地道避免以次充好，则普遍采用小型旋片式粉碎机，用户选购三七药材后现场直接粉碎以粗粉售出供口服使用。这些生产和销售产品的技术方法仍是粗粉材料，药材利用率低，同时无消毒灭菌处理的也使卫生洁净度难以有效保证。为此，近年来提出应用超微粉碎技术改善三七产品的技术方法。研究发现：随三七粉体粒度的减小，其比表面积及孔隙率增加，吸湿性增加，流动性减弱；微粉有效成分的溶出速率和累积溶出量均得以提高，超微粉碎技术应用于三七具有可行性和必要性，然而，当超微粉碎至一定程度时，溶出的速度和程度将不再增大，因此认为适度的微粉化能促进三七有效成分的充分利用(中华中医药杂志，2011，26(9)：1871-1874)。研究三七药材粉碎的粉粒大小与三种皂苷(人参皂苷Rg1、Rb1和三七皂苷R1)的溶出总量关系，测定表明，粉粒大小对三七粉粒径均匀度及三种皂苷的溶出量有很大影响，超微粉碎使药材颗粒粒径变小并且均一化，更有利于有效成分的释放或溶出，增加疗效(中国中药杂志，2014，39(8)：1430-1434)；另一项研究认为，超微粉碎后3种皂苷类成分的溶出速率均显著提高，超微粉碎有助于三七饮片中皂苷类成分的溶出，粉碎粒度对有效成分的溶出有显著的影响(中草药，2013，44(24)：3489-3492)；中国专利CN102085224A公开了一种“纳米级”三七粉的制备方法，将三七药材粉碎、除杂、风干、研磨得到三七粗粉，再将粗粉高速搅拌加水混悬过1000目以上钢筛，收集含有1000目以上微粒的混悬液并低温干燥而获得三七粉。该方法操作简单、药材破壁率高、有效成分极易溶于水，有利于增强吸收率，但该方案以1000目以上粒度制备的产品并非纳米级微粉，大量水浸、反复过滤、加热干燥的烦琐过程不仅极大增加了成本，也难保产品质量的稳定。CN103054922B采用除杂、晾干、初碎、干燥，最后降温-20℃以下低温超微粉碎等步骤制备100～1000目(13～150μm)的三七微粉，产品能够保持药材的天然特性，方便使用，但设备条件苛刻、操作烦琐、制备成本高难以大批量生产。CN1219522C将三七超微粉碎至600目以上，再与灵芝超微粉混合装入胶囊，明显提高了人体的吸收率。但是，近年来已有多项研究指出三七药材的粉体粒度对药材或制剂有效成分的含量和溶出无明显影响，认为对三七药材进行超微粉碎是不必要的：通过比较三七微粉(20μm)和普通粉(粗粉、中粉、细粉、极细粉)的含量和溶出度，发现在含量和溶出度方面,三七微粉不比普通粉有优势(上海中医药杂志，2009，43(10)：79-81)；对不同粒径三七粉的物理性质及体外溶出度进行比较，结果显示，三七超微粉相比80目的普通细粉，其一般物理性质虽然发生了一定变化，但体外溶出度并无显著性差异。因此认为：在散结镇痛胶囊制剂粉碎工艺中，三七仍可以采用80目细粉，而并不适宜超微粉碎(世界科学技术—中医药现代化，2013，15(2)：305-309)。三七粉的应用更多的是制剂方面，单纯的三七粉粒度对制剂的影响仍是考察的重点，也是微粉技术运用于实际产品的成功与否的实用性体现。将三七药材粉碎成4种粒度(50目、100目、150目、200目),按处方工艺要求制成固体制剂,以人工胃液作为溶剂,按药典中主要成分含量测定方法,分别测定固体制剂在人工胃液中的溶出度，结果发现，制剂主要成分的溶出量并没有随药材粉碎度的增加而增加(特产研究，2013(10)：25-31)。由此可见，简单的粉碎技术对改善三七制剂产品性能存在较大的不确定性，微粉化对改善三七纯微粉性能结论不一致，而且对伴有辅料制作的制剂的改进效果目前仍无肯定的结论，迫切需要有新的改进方法以实现三七制剂技术的新突破。

研究表明，环糊精及其衍生物由于其特殊的空间结构，在医药食品领域应用广泛：可用于增强成分水溶性，提高成分稳定性，掩盖不良气味，改善品质及口感，控制成分释放，提高生物利用度及降低毒副作用等。β-环糊精应用于三七的提取物或单体成分的产品性能改进已有较多的研究报道，但对三七药材(全药成分)的口服制剂应用环糊精目前尚无成熟技术，也未见相关产品的使用和销售。本发明将微粉化与超分子技术相结合，采用β-环糊精与三七药材同时微粉化并且形成超分子(包合物)达到显著改进药物制剂性能的效果。

发明内容

发明目的：本发明的目的是提供一种β-环糊精-三七微粉，系环糊精与三七有效成分通过分子识别过程形成超分子体(包合物)，从而得到多成分包合的三七微粉，使有效成分容易释放、水溶性好、稳定性强、易于制剂。本发明还将提供这种组合物的制备及制剂方法。本发明是一种能够促进三七有效成分释放、提高有效成分水溶性、增强三七总皂苷稳定性、改进制剂性能的三七新产品及其制备技术。

技术方案：为了实现上述发明目的，本发明提供了一种β-环糊精-三七微粉组合物，其主要是由β-环糊精和三七所制成。

作为优选，所述三七和β-环糊精的质量比为1：(1～3)。

进一步优选，所述三七和β-环糊精的质量比为1：1。

本发明还提供了所述β-环糊精-三七微粉组合物的制备方法，包括以下步骤：

(1)将三七超声清洗后，烘干，粉碎，得三七药材粉；

(2)制备β-环糊精的悬浮液或悬浮体，加入上述三七药材粉，混合均匀，胶体磨研磨0.5小时，除水，干燥，过筛，即得β-环糊精-三七微粉组合物。

本发明最后还提供了所述β-环糊精-三七微粉组合物的制剂，所述制剂包括散剂、颗粒剂、片剂、胶囊、缓释片或分散片等。

所述制剂的制备方法主要包括以下步骤：以所述β-环糊精-三七微粉组合物为主要成分，添加常规辅料，按照常规制剂方法制成括散剂、颗粒剂、片剂、胶囊、缓释片或分散片等。辅料可从以下物质中选用：环糊精、微晶纤维素、淀粉、微粉硅胶、预胶化淀粉、甘露醇、滑石粉、羧甲基纤维素钠、硬脂酸镁、高膨胀羧甲基淀粉钠、交联聚维酮、PEG4000、PEG6000、低取代羟丙纤维素、羟丙甲纤维素、柠檬酸。

辅料的用量按现有的技术规范。

本发明技术特点如下：

(1)包合可行性：

称取适量三七药材粉，溶于适量0.3M磷酸盐缓冲液(pH 7.00)，过滤，得三七有效成分水溶液。

将三七有效成分水溶液作全波长扫描，200～350nm间有较弱的紫外吸收，加入自身无紫外吸收的β-环糊精后，三七有效成分水溶液紫外吸收随β-环糊精浓度的增大呈现规律性增强(见说明书附图1)。通过β-环糊精浓度与三七有效成分的紫外吸收强度变化的定量关系，测定三七有效成分与β-环糊精的表观包合常数Ka如表1。

表1药材粉/β-环糊精包合常数的测定结果

多波长皆有较大的表观包合常数表明β-环糊精与三七的多种有效成分存在较强的包合作用，可形成稳定的包合物，预测包合后有效成分的水溶性和稳定性会有所提高。

(2)以总皂苷为指标的增溶试验

方法：称取本发明制备的β-环糊精-三七微粉，以及三七含量相当的药材粉适量，分别混合于适量超纯水中，180r/min，37℃振荡24h，取出，静置20min，0.45μm的微孔滤膜过滤，取少量滤液，80℃水浴挥干溶剂，加5％香草醛-冰乙酸溶液0.4ml，高氯酸1.6ml，混合后在60℃恒温水浴中加热15min,冷却5min，加冰醋酸至刻度，进行UV检测，得552nm处的吸光值。平行试验，求出β-环糊精-三七微粉中总皂苷浓度平均值，与药材粉中总皂苷的浓度比较求得其增溶倍数。结果见表2：

表2三七总皂苷增溶情况

β-CD作为包合材料，可增加药物有效成分的溶解性，从表2看出：β-环糊精-三七微粉中总皂苷溶解性相对于药材粉有提高，这利于提高人体对总皂苷的吸收。

(3)以黄酮为指标的增溶试验

方法：称取本发明制备的β-环糊精-三七微粉，以及三七含量相当的药材粉，分别混合于适量超纯水中，180r/min，37℃振荡24h取出，静置20min，0.45μm的微孔滤膜过滤，取少量滤液于10ml容量瓶中，加5％亚硝酸钠溶液0.3ml，静置6min，加10％的硝酸铝溶液0.3ml，摇匀，再放置6min，分别加4％氢氧化钠溶液4ml，用60％乙醇溶液稀释至刻度，摇匀，静置12min，采用紫外-分光光度法测510nm处的吸光值。平行试验，求出β-环糊精-三七微粉中黄酮浓度平均值，与药材粉中黄酮的浓度比较求得其增溶倍数。结果见表3：

表3黄酮增溶情况

从上表可以看出，包合处理后，黄酮溶解性显著提高，水溶性增强，有助于提高人体对三七中黄酮的生物利用度。

(4)总皂苷稳定性试验

根据《中国药典》(2010版)附录中药物稳定性试验指导原则项下影响因素考察的要求，以样品中总皂苷含量为检测指标，考察温度和光照对β-环糊精-三七微粉、药材粉的影响。

(5)高温试验

称取本发明制备的β-环糊精-三七微粉以及三七含量相当的药材粉分装于透明自封袋，置于适宜的洁净容器中，40℃温度下放置25天，于0、5、10、15、25天取样对比，药材粉与β-环糊精-三七微粉在外观气味上无明显变化，运用紫外-可见分光光度计检测，并计算总皂苷含量，如下表所示：

表4高温试验结果

(6)光照试验

称取本发明制备的β-环糊精-三七微粉以及三七含量相当的药材粉分装于透明自封袋，置于适宜的洁净容器中，4500±500LX光照度下放置25天，于0、5、10、15、25天取样对比，药材粉与β-环糊精-三七微粉在外观气味上无明显变化，运用紫外-可见分光光度计检测，并计算总皂苷含量，如下表所示：

表5光照试验结果

结合表4、5数据和附图2(高温)、附图3(光照)趋势线，高温、光照条件下，β-环糊精-三七微粉中总皂苷的稳定性优于药材粉，且总皂苷含量下降缓慢，说明β-CD的加入可以提高三七总皂苷高温、光照环境下的稳定性。

(7)溶出度考察

方法：取本发明制备的β-环糊精-三七微粉片，依照中国药典2010年版二部溶出度测定法(浆法)的要求，总皂苷浓度为指标，测定其溶出度，结果见表6(附图4)：

表6β-环糊精-三七微粉片溶出度结果

(8)微粉的粒度测定

透射电子显微镜(日立，H7650)取微量β-环糊精-三七微粉均匀分散于纯水中，吸取微量溶液于洁净铜网上，烘干，采用透射电子显微镜(×1200)观察，电压为80kV，如说明书附图5所示：β-环糊精-三七微粉由规则的β-环糊精微晶体和不规则的三七药材微粒组成，其中较规则的β-环糊精微晶粒径≤3μm，不规则的三七微粒粒径分布在1μm～6μm间，分散较均匀，其中最大的微粒最长仅约6μm，产品粒度达到中药超微粉粒径≤15μm的要求。

本发明以水体系中悬浮环糊精制备超微粉，三七药材软化而极易粉碎，水中微粉有效成分溶出充分且能够及时与环糊精包合形成包合物，达到粉碎包合同步的技术效果。下列效果试验证明，本发明制备的三七微粉稳定性强、溶出充分而溶解度高、易于制剂、口感味觉好，具有很强的实用特性。

与现有技术对照片剂的对比

(1)有效成分含量的检测

对比β-环糊精-三七微粉片(实施例1)与现有技术制备的三七片(对照)总皂苷及黄酮含量。步骤如下：

对照三七片的制备：取三七药材洗净凉干，粗粉碎后以气引式粉碎机粉碎得的纯三七微粉与等量微晶纤维素混合得到对照微粉；(以实施例1的比例)取250g对照微粉与微晶纤维素50g、微粉硅胶24g、立崩8.4g、硬脂酸镁1.2g配伍制备片剂；对照微粉与微晶纤维素、微粉硅胶和半数立崩充分混匀后，0.5％羧甲纤维素钠溶液湿法制粒，整粒后与半数立崩及硬脂酸镁混合，充分混匀后压片制得约471片三七微粉片(片重：700mg/片；含量：三七药材265mg/片)。

含量测定：取β-环糊精-三七微粉片、对照三七片各10片，研磨至粉状，分别精密称取0.1g，采用UV法测定，并依据标准曲线，计算总皂苷和黄酮含量，结果如下表7所示：

表7片剂有效成分含量对比

对比可见：β-环糊精-三七微粉片中有效成分含量远远高于对照三七片，这为制备出高质量的三七制剂提供了依据。

(2)有效成分溶出量测定

比较β-环糊精-三七微粉片(实施例1)与对照三七片(同上)有效成分总皂苷溶出量。具体步骤如下：依据药典规定，采用浆法分别测β-环糊精-三七微粉片与对照三七片的肠液中溶出度，对比二者有效成分溶出量，并求增溶倍数。结果对比如下表8所示：

表8片剂中总皂苷溶出结果对比

从溶出度试验中看出，β-环糊精-三七微粉片有效成分释放较快，10min时，累积溶出度就达到89.6％；相对于对照三七片，其有效成分溶出明显提高，溶出浓度差达到4.6倍。说明β-环糊精对三七中有效成分起到了显著增溶作用。

(3)稳定性试验

比较高温(40℃)、光照(4500±500LX)条件下，无包装的裸片产品β-环糊精-三七微粉片与对照三七片(同上)中总皂苷的稳定性。具体方法如下：取β-环糊精-三七微粉片、对照三七片若干片分别置于透明、洁净、密封容器中，高温(40℃)、光照(4500±500LX)下放置30天，于0、15、30天取样，以总皂苷含量为指标，采用紫外可见分光光度计检测，根据标准曲线求得样品中总皂苷含量并进行比较，样品总皂苷的相对含量对比见下表9。

表9高温、光照条件下片剂总皂苷的相对含量

加速试验条件下，本发明制备的β-环糊精-三七微粉片有效成分的稳定性明显优于对照三七片。

技术效果：相对于现有技术，本发明具有以下优点：

(1)有效的解决了目前超微粉碎无法改善三七制剂溶解度及溶出度的难题，制剂产品有效成分及难溶性成分溶解性和溶出度有明显提高，有利于人体吸收利用；

(2)掩盖原料极苦口感，改善产品的适应性；

(3)产品总皂苷稳定性增强，很好的解决皂苷类易降解的问题；

(4)制备技术方法简单，设备简单，生产周期短，成本低廉。

附图说明

图1：β-环糊精浓度与三七有效成分的紫外吸收强度变化关系图；

图2：高温条件下，本发明微粉组合物和三七微粉中总皂苷的相对含量随着天数的变化趋势图；

图3：光照条件下，本发明微粉组合物和三七微粉中总皂苷的相对含量随着天数的变化趋势图；

图4：本发明所得β-环糊精-三七微粉片的溶出曲线图；

图5：本发明微粉组合物的透射电子显微镜(×1200)图；

具体实施方式

下面结合附图进一步描述本发明的具体实施方案。

实施例1

三七200g，温水浸泡10min，超声清洗5min，50℃鼓风干燥24h，粉碎，过100目筛，得三七药材粉195g。

所得药材粉加入到195gβ-环糊精的悬浮液或悬浮体，混合均匀，胶体磨研磨0.5小时，除水，干燥3小时，过100目筛，即得β-环糊精-三七微粉。微粉DTA谱：100以下℃的吸热峰明显减弱并移至68.71℃，222.28℃的β-环糊精相变特征峰消失(β-环糊精完全参与包合)，高温区的体系吸热峰由混合物的320.26℃上移至324.14℃，混合物的357.86℃放热峰消失，微粉体系无放热峰，DTA谱显示微粉与混合物是完全不同的物相。

所得β-环糊精-三七微粉250g加入下列辅料：微晶纤维素50g、微粉硅胶24g、立崩8.4g、硬脂酸镁1.2g；微粉与微晶纤维素、微粉硅胶和半数立崩充分混匀后，0.5％羧甲纤维素钠溶液湿法制粒，整粒后与半数立崩及硬脂酸镁混合，充分混匀后压片制得约471片β-环糊精-三七微粉片(片重：700mg/片；含量：三七药材265mg/片)。

实施例2

与实施例1基本相同，但是将100g药材粉加入到150gβ-环糊精的悬浮液或悬浮体中制备β-环糊精-三七微粉，湿法制粒，即得β-环糊精-三七微粉颗粒。微粉DTA谱：100以下℃的吸热峰明显减弱并移至70.13℃，221.76℃的β-环糊精相变特征峰消失，高温区的体系吸热峰由混合物的318.67℃上移至323.63℃，混合物的303.15℃弱放热峰和351.14℃强放热峰消失，微粉体系无放热峰，DTA谱显示微粉与混合物是完全不同的物相。

所得微粉颗粒经20目筛，整粒，包装即得β-环糊精-三七微粉颗粒剂。

实施例3

与实施例1基本相同，但是将100g药材粉加入到50gβ-环糊精的悬浮液或悬浮体中制备β-环糊精-三七微粉。

实施例4

与实施例1基本相同，但是将100g药材粉加入到200gβ-环糊精的悬浮液或悬浮体中制备β-环糊精-三七微粉。

实施例5

与实施例1基本相同，但是将100g药材粉加入到250gβ-环糊精的悬浮液或悬浮体中制备β-环糊精-三七微粉。

实施例6

与实施例1基本相同，但是将100g药材粉加入到300gβ-环糊精的悬浮液或悬浮体中制备β-环糊精-三七微粉。

实施例7

与实施例2基本相同，所得β-环糊精-三七微粉240g加入下列辅料：立崩12g、硬脂酸镁1.2g；各种辅料充分混匀后，加粘合剂，湿法制粒，整粒后，与β-环糊精-三七微粉混合，充分混匀后压片制得约500片β-环糊精-三七微粉片剂。

实施例8

与实施例2基本相同，所得β-环糊精-三七微粉240g加入下列辅料：微晶纤维素12g、微粉硅胶12g、立崩10.8g、硬脂酸镁1.2g；各种辅料充分混匀后，加粘合剂，湿法制粒，整粒后，与β-环糊精-三七微粉混合，充分混匀后压片制得约520片β-环糊精-三七微粉片剂。

Claims (7)

1.一种β-环糊精-三七微粉组合物，其特征在于，其主要是由β-环糊精和三七所制成，包括以下步骤：

(1)将三七超声清洗后，烘干，粉碎，得三七药材粉；

(2)制备β-环糊精的悬浮液或悬浮体，加入上述三七药材粉，混合均匀，研磨，干燥，过筛，即得β-环糊精-三七微粉组合物。

2.根据权利要求1所述的β-环糊精-三七微粉组合物，其特征在于，所述三七和β-环糊精的质量比为1：(1～3)。

3.根据权利要求1所述的β-环糊精-三七微粉组合物，其特征在于，所述三七和β-环糊精的质量比为1：1。

4.权利要求1-3任一项所述β-环糊精-三七微粉组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)将三七超声清洗后，烘干，粉碎，得三七药材粉；

(2)制备β-环糊精的悬浮液或悬浮体，加入上述三七药材粉，混合均匀，研磨，干燥，过筛，即得β-环糊精-三七微粉组合物。

5.含有权利要求1-3任一项所述β-环糊精-三七微粉组合物的制剂。

6.根据权利要求5所述的制剂，其特征在于，所述制剂包括散剂、颗粒剂、片剂或胶囊。

7.权利要求6所述制剂的制备方法，其特征在于，主要包括以下步骤：以所述β-环糊精-三七微粉组合物为主要成分，添加常规辅料，按照常规制剂方法制成制剂。