CN105560888A - 一种提高铁皮石斛中多酚成分浸出率的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种提高铁皮石斛中多酚成分浸出率的方法，包括前处理、提取、后处理步骤，具体包括：将原料新鲜铁皮石斛条清洗干净、晾干，置于95~100℃干燥3.0~3.5h至含水率为15~30%，切成3.0~4.0cm的短条a；将短条a经膨化破壁后粉碎过100~300目筛得到铁皮石斛提取前料b,加入铁皮石斛提取前料b重量比4~8倍的醇类溶剂于60~80℃提取3~4次，每次1~3h，合并提取液，过滤、浓缩得到相对密度为1.1~1.3的浸膏c；将提取的浸膏c经干燥、粉碎过筛得到目标提取物。本发明生产设备投资少，工艺操作简单，条件容易达到，制备过程能耗低，成本低，加工方便，所用的试剂无毒无害，安全环保；制备的铁皮石斛制品中的多酚成分很容易浸出，提高了铁皮石斛中多酚成分的浸出率。

Description

一种提高铁皮石斛中多酚成分浸出率的方法
技术领域
本发明属于中药制备技术领域，具体涉及一种提高铁皮石斛中多酚成分浸出率的方法。
背景技术
铁皮石斛(DendrobiumofficinaleKimuraetMigo)为兰科石斛属植物，具有健脾养胃、滋阴补肾、润肺生津等功效，用于治疗慢性萎缩性胃炎、高血压、糖尿病、抗肿瘤、抗衰老等。铁皮石斛化学成分多样，含有多糖、多酚、生物碱、糖苷类及氨基酸等，其中多酚是铁皮石斛重要的生理活性成分之一，主要包括菲类、芪类、联苄类及木脂素类化合物。石斛中的联苄类化合物具有抗突变作用，作用机制为通过抑制umu基因表达以及诱导S0S反应；菲类化合物对人肺癌细胞A-549、人卵巢腺癌细胞Sk-OV-3、人体早幼粒细胞白血病HL-60、艾氏腹水癌等细胞株具有显著的细胞毒作用。
目前有相关文献及专利涉及铁皮石斛中多酚类化合物的提取技术，李燕、李榕生等人分别利用乙酸乙酯及乙醇回流提取法(LiYan,WangChunlan,WangYajun,GuoShunxing,YangJunshan,ChenXiaomei,XiaoPeigen.ThreenewbibenzylderivativesfromDendrobiumcandidum[J].ChemPharmBull,2009,57(2):218-219；LiYan,WangChunlan,WangYajun,WangFangfei,GuoShunxing,YangJunshan,XiaoPeigen.FournewbibenzylderivativesfromDendrobiumcandidum[J].ChemPharmBull,2009,57(9):997-999；李燕,王春兰,王芳菲,董海玲,郭顺星,杨峻山,肖培根；铁皮石斛中的酚酸类及二氢黄酮类成分.中国药学杂志,2010,45(13):975-979；李榕生,杨欣,何平,干宁.铁皮石斛根茎中菲类化学成分分析[J].中药材,2009,32(2):220-223.)对铁皮石斛中多酚类化合物进行提取，并从中分离芪类和联苄类化合物近30个，菲类化合物6个，酚类化合物15个，木脂素类化合物6个等。也有提供了酶解及超声波辅助浸提法一次性从铁皮石斛中分离提取石斛多糖、石斛碱及毛兰素的方法。这些制备方法多属常规方法，多酚提取率低、溶剂消耗量大、能耗大、耗时。因此，开发一种能解决上述技术问题的方法是非常必要的。
发明内容
本发明的目的在于提供一种提高铁皮石斛中多酚成分浸出率的方法。
本发明的目的是这样实现的，包括前处理、提取、后处理步骤，具体包括：
A、前处理：
1）将原料新鲜铁皮石斛条清洗干净、晾干，置于95~100℃干燥3.0~3.5h至含水率为15~30%，切成3.0~4.0cm的短条a；
2）将短条a经膨化破壁后粉碎过100~300目筛得到铁皮石斛提取前料b备用；
B、提取：将A步骤处理得到的铁皮石斛提取前料b中加入铁皮石斛提取前料b重量4~8倍的醇类溶剂于60~80℃提取3~4次，每次1~3h，合并提取液，过滤、浓缩得到相对密度为1.1~1.3的浸膏c；
C、后处理：将提取的浸膏c经干燥、粉碎过筛得到目标提取物。
本发明的工作原理是微波能量到达铁皮石斛物料深层转换成热能，将使物料深层水分迅速蒸发形成较高的内部蒸汽压力，迫使铁皮石斛物料在气体膨胀力的作用下实现结构膨胀，从而使之成为具有网状组织结构特征，定型成为多孔状铁皮石斛制品。
本发明的有益效果在于，利用微波膨化破壁法生产加工得到的铁皮石斛制品膨化率高，细胞破壁效果好，其多酚成分很容易浸出，提高了铁皮石斛中多酚成分的浸出率，从而大大提高了铁皮石斛的生物利用度，增强了铁皮石斛的保健功能。该方法生产设备投资少，工艺操作简单，条件容易达到，制备过程能耗低，成本低，加工方便，安全环保，具有较强的实用价值，为开发利用铁皮石斛植物资源提供了新的途径。
本发明生产设备投资少，工艺操作简单，制备过程能耗低，成本低，加工方便，同时制备的铁皮石斛制品中的多酚成分很容易浸出，大大提高了铁皮石斛中多酚成分的浸出率。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步的说明，但不以任何方式对本发明加以限制，基于本发明教导所作的任何变换或替换，均属于本发明的保护范围。
本发明所述的提高铁皮石斛中多酚成分浸出率的方法，包括前处理、提取、后处理步骤，具体包括：
A、前处理：
1）将原料新鲜铁皮石斛条清洗干净、晾干，置于95~100℃干燥3.0~3.5h至含水率为15~30%，切成3.0~4.0cm的短条a；
2）将短条a经膨化破壁后粉碎过100~300目筛得到铁皮石斛提取前料b备用；
B、提取：将A步骤处理得到的铁皮石斛提取前料b中加入铁皮石斛提取前料b重量比4~8倍的醇类溶剂于60~80℃提取3~4次，每次1~3h，合并提取液，过滤、浓缩得到相对密度为1.1~1.3的浸膏c；
C、后处理：将提取的浸膏c经干燥、粉碎过筛得到目标提取物。
A步骤中所述的含水率为20~25%。
A步骤中所述的膨化破壁是采用微波膨化破壁。
所述的膨化破壁的功率为650~7500w，膨化破壁的时间为30~35s。
B步骤中所述的醇类溶剂为体积百分浓度70~80%的甲醇、乙醇或丙醇。
所述的醇类溶剂为体积百分浓度70~80%的乙醇。
所述的乙醇的体积百分浓度为75%。
B步骤中所述的提取为浸渍法或渗漉法中的一种。
下面以具体实施案例对本发明进行进一步说明：
本发明的各实施例所用的设备型号及生产厂家的信息如下：
微波炉（M-NJL07-3，北京中西远大科技有限公司）；电热鼓风干燥箱（DHG-9070，上海一恒科技有限公司上海一恒科学仪器有限公司）。
对本发明制备得到目标提取物中多酚成分含量的测定方法如下：
（1）标准曲线的制备：取没食子酸适量，精密称定，加水制成浓度为0.050mg/mL的没食子酸标准储备液溶液。精密量取没食子酸标准储备液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0分别置于25mL的具塞试管中，加水补至1.0mL，加入0.3mL福林酚试剂，混匀，再加入1.5mL7%碳酸钠溶液，加水定容至10mL，充分振摇，室温下静置20min。以试剂空白作参比，用紫外-可见分光光度计测定波长760nm处的吸光度。以吸光度为纵坐标、浓度为横坐标绘制标准曲线。
（2）样品溶液制备及测定：取样品粉末(过三号筛)0.5g，加75%乙醇，称重，提取2h,称重并补足失重，作为样品液。吸取样品溶液1.00mL于具塞试管中，照标准曲线制备项下的方法，加入0.3mL福林酚试剂后依法测定吸光度。根据测得的吸光度和标准曲线回归方程，计算样品中的多酚含量（以没食子酸计）。
对比例：
A、将新鲜的铁皮石斛鲜条清洗干净，晾干；
B、将A步的铁皮石斛鲜条置于干燥箱中干燥；
C、将B步的铁皮石斛短条用螺杆食品挤压膨化机膨化破壁或其他常规破壁方法破壁即得；
D、将C步的破壁制品冷却，经粉碎（过200目筛）包装即得。
E、在D步骤处理得到的铁皮石斛粉末（10克）中加入60毫升的75%乙醇溶剂于74℃提取4次，每次2h，合并提取液，过滤、浓缩得到相对密度为1.2的浸膏；
F、将E步骤处理得到的浸膏在60℃下干燥12小时后，粉碎过筛（过200目筛）得到目标提取物。
经测定，铁皮石斛膨化破壁前多酚的溶出量占样品总量的0.18%，上述各种破壁方法破壁后的铁皮石斛多酚的溶出量占样品总量的0.20~0.22%。
实施例1
A、将新鲜的铁皮石斛鲜条清洗干净，晾干；
B、将A步的铁皮石斛鲜条置于干燥箱中，在97℃下干燥3.25小时，使其水分含量为20%，切成3.5厘米的短条；
C、将B步的铁皮石斛短条用微波膨化破壁即得；所述微波膨化破壁的工艺条件为功率700瓦，膨化破壁时间为33秒，得膨化破壁制品；
D、将C步的膨化破壁制品冷却15分钟后，经粉碎（过200目筛）包装即得。
E、在D步骤处理得到的铁皮石斛粉末（10克）中加入60毫升的75%乙醇溶剂于74℃提取4次，每次2h，合并提取液，过滤、浓缩得到相对密度为1.2的浸膏；
F、将E步骤处理得到的浸膏在60℃下干燥12小时后，粉碎过筛（过200目筛）得到目标提取物。
经测定，微波膨化破壁后多酚的溶出量占样品总量的0.26%，溶出量相对挤压膨化破壁法或其他常规破壁法破壁的铁皮石斛多酚溶出量增加了18.2~30.0%。
实施例2
A、将新鲜的铁皮石斛鲜条清洗干净，晾干；
B、将A步的铁皮石斛鲜条置于干燥箱中，在95℃下干燥3.5小时，使其水分含量为30%，切成4.0厘米的短条；
C、将B步的铁皮石斛短条用微波膨化破壁即得；所述微波膨化破壁的工艺条件为功率650w，膨化破壁时间为35秒，得膨化破壁制品；
D、将C步的膨化破壁制品冷却17分钟后，经粉碎（过200目筛）包装即得。
E、在D步骤处理得到的铁皮石斛粉末（10克）中加入80毫升的80%甲醇溶剂于60℃提取4次，每次3h，合并提取液，过滤、浓缩得到相对密度为1.3的浸膏；
F、将E步骤处理得到的浸膏在60℃下干燥14小时后，粉碎过筛（过300目筛）得到目标提取物。
经测定，微波膨化破壁后多酚的溶出量占样品总量的0.25%，溶出量相对挤压膨化破壁法或其他常规破壁法破壁的铁皮石斛多酚溶出量增加了13.6~25.0%。
实施例3
A、将新鲜的铁皮石斛鲜条清洗干净，晾干；
B、将A步的铁皮石斛鲜条置于干燥箱中，在100℃下干燥3.0小时，使其水分含量为15%，切成3.0厘米的短条；
C、将B步的铁皮石斛短条用微波膨化破壁即得；所述微波膨化破壁的工艺条件为功率750w，膨化破壁时间为30秒，得膨化破壁制品；
D、将C步的膨化破壁制品冷却20分钟后，经粉碎（过100目筛）包装即得。
E、在D步骤处理得到的铁皮石斛粉末（10克）中加入40毫升的70%丙醇溶剂于80℃提取3次，每次1h，合并提取液，过滤、浓缩得到相对密度为1.1的浸膏；
F、将E步骤处理得到的浸膏在60℃下干燥10小时后，粉碎过筛（过100目筛）得到目标提取物。
经测定，微波膨化破壁后多酚的溶出量占样品总量的0.25%，溶出量相对挤压膨化破壁法或其他常规破壁法破壁的铁皮石斛多酚溶出量增加了13.6~25.0%。
实施例4
A、将新鲜的铁皮石斛鲜条清洗干净，晾干；
B、将A步的铁皮石斛鲜条置于干燥箱中，在97℃下干燥3.25小时，使其水分含量为20%，切成3.5厘米的短条；
C、将B步的铁皮石斛短条用微波膨化破壁即得；所述微波膨化破壁的工艺条件为功率700瓦，膨化破壁时间为33秒，得膨化破壁制品；
D、将C步的膨化破壁制品冷却15分钟后，经粉碎（过200目筛）包装即得。
E、在D步骤处理得到的铁皮石斛粉末（10克）中加入60毫升的80%乙醇溶剂于74℃提取4次，每次2h，合并提取液，过滤、浓缩得到相对密度为1.2的浸膏；
F、将E步骤处理得到的浸膏在60℃下干燥12小时后，粉碎过筛（过200目筛）得到目标提取物。
经测定，微波膨化破壁后多酚的溶出量占样品总量的0.26%，溶出量相对挤压膨化破壁法或其他常规破壁法破壁的铁皮石斛多酚溶出量增加了18.2~30.0%。
以上显示和描述了本发明的基本原理、主要特征及本发明的优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提，本发明还会有各种变化和改进,这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等效物界定。

Claims (8)

1.一种提高铁皮石斛中多酚成分浸出率的方法，其特征在于包括前处理、提取、后处理步骤，具体包括：
A、前处理：
1）将原料新鲜铁皮石斛条清洗干净、晾干，置于95~100℃干燥3.0~3.5h至含水率为15~30%，切成3.0~4.0cm的短条a；
2）将短条a经膨化破壁后粉碎过100~300目筛得到铁皮石斛提取前料b备用；
B、提取：将A步骤处理得到的铁皮石斛提取前料b中加入铁皮石斛提取前料b重量4~8倍的醇类溶剂于60~80℃提取3~4次，每次1~3h，合并提取液，过滤、浓缩得到相对密度为1.1~1.3的浸膏c；
C、后处理：将提取的浸膏c经干燥、粉碎过筛得到目标提取物。
2.根据权利要求1所述的提高铁皮石斛中多酚成分浸出率的方法，其特征在于A步骤中所述的含水率为20~25%。
3.根据权利要求1所述的提高铁皮石斛中多酚成分浸出率的方法，其特征在于A步骤中所述的膨化破壁是采用微波膨化破壁。
4.根据权利要求1或3所述的提高铁皮石斛中多酚成分浸出率的方法，其特征在于所述的膨化破壁的功率为650~750w，膨化破壁的时间为30~35s。
5.根据权利要求1所述的提高铁皮石斛中多酚成分浸出率的方法，其特征在于B步骤中所述的醇类溶剂为体积百分浓度70~80%的甲醇、乙醇或丙醇。
6.根据权利要求1或5所述的提高铁皮石斛中多酚成分浸出率的方法，其特征在于所述的醇类溶剂为体积百分浓度70~80%的乙醇。
7.根据权利要求6所述的提高铁皮石斛中多酚成分浸出率的方法，其特征在于所述的乙醇的体积百分浓度为75%。
8.根据权利要求1所述的提高铁皮石斛中多酚成分浸出率的方法，其特征在于B步骤中所述的提取为浸渍法或渗漉法中的一种。
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