CN105558347A - 用热带假丝酵母、枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌组合固态发酵木薯渣的方法 - Google Patents
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Abstract
用热带假丝酵母、枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌组合固态发酵木薯渣的方法，以木薯渣为发酵原料，用热带假丝酵母、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌的菌液以1:1:1的体积比混合，按木薯渣干物质5％的量进行接种，按木薯渣干物质的质量百分比添加0.6％的红糖用于调节木薯渣的可溶性糖浓度，按木薯渣干物质的质量百分添加1％尿素作为氮源，用生理盐水调制含水量为60～65％，混合均匀，装入聚乙烯薄膜袋中，用真空泵抽出袋内的空气至真空状态，密封，置于室温下贮藏10天。经过发酵处理后，能显著降低发酵木薯渣的pH值，提高木薯渣的粗蛋白含量。
Description
技术领域
本发明属于混合菌固态发酵饲料技术领域，具体是用热带假丝酵母、枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌组合固态发酵木薯渣的方法。
背景技术
木薯渣是生产木薯淀粉和酒精后的副产物，主要成分是纤维素，含有少量的蛋白质，目前主要用作动物饲料。但因木质化程度高，适口性差，动物消化利用率低，而且新鲜木薯渣水分含量高，在储存过程中容易变黑、发酸变质，现在仍有大量的木薯渣被丢弃，既是一种资源浪费，也会对环境造成一定程度的污染破坏，随着木薯渣产量的不断增加，木薯渣的处理和利用已成为一个亟需解决的问题。微生物发酵处理木薯渣可以改善木薯渣的适口性，提高营养价值和饲料转化率，同时有利于解决贮存时发霉变质问题。许多研究表明采用单一菌种处理木薯渣，使其营养价值提高不多，实际应用不理想，混合菌发酵可以利用菌种之间的协调互作关系，扩大对发酵底物的适应性和生产菌的防杂菌能力，处理效果较为理想，混合菌发酵木薯渣选择菌种是关键，有益微生物菌种品种繁多，但是目前研究的品种及搭配非常有限，植物乳杆菌、热带假丝酵母和枯草芽孢杆菌这三种菌之间的组合处理木薯渣的研究基本未见报道。
发明内容
本发明的目的是提供一种用热带假丝酵母、枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌组合固态发酵木薯渣的方法，为探索最佳木薯渣发酵条件，改善木薯渣品质，提高其适口性，为木薯渣的开发及利用提供参考。
本发明的技术方案是：用热带假丝酵母、枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌组合固态发酵木薯渣的方法，包括如下步骤：
(1)将新鲜木薯渣在65℃下烘干后作为发酵原料；
(2)向经过步骤(1)处理过的木薯渣中按木薯渣干物质的质量百分添加1％的尿素或者添加1％尿素+0.6％红糖，添加尿素作为氮源，添加红糖用于调节木薯渣的可溶性糖浓度；
(3)将热带假丝酵母、枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌的菌液以1:1:1的体积比混合，按木薯渣干物质5％的量进行接种，使每克干木薯渣中热带假丝酵母、枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌的活菌含量分别达到1.5×106cfu/g，6.3×104cfu/g，2.2×105cfu/g；
(4)将步骤(3)添加了热带假丝酵母、枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌混合制剂的木薯渣，用生理盐水调制含水量为60～65％，混合均匀，装入聚乙烯薄膜袋中，用真空泵抽出袋内的空气至真空状态，密封，置于室温下贮藏；
(5)将步骤(4)包装好的木薯渣在室温下固态发酵10天，得到木薯渣发酵产物。
本发明应用的微生物菌种来源：枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)；植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)；布氏乳杆菌(Lactobasillusbuchneri)均购买于中国工业微生物菌种保藏管理中心。
本发明应用的尿素和红糖均为市购。
本发明应用的培养基：MRS的液体培养基用于植物乳杆菌活化和菌液培养；MRS固体培养基用于植物乳杆菌涂板计数；MEB液体培养基用于热带假丝酵母的活化和菌液培养；MEB固体培养基用于热带假丝酵母涂板计数；葡萄糖营养液体使用于枯草芽孢杆菌的菌种活化和菌液培养；葡萄糖营养琼脂使用于枯草芽孢杆菌的涂板计数。
试验菌种的活化及扩培：安瓿管冻干菌种→活化→按5％添加量接种到相应的液体培养基中，热带假丝酵母和枯草芽孢杆菌的培养条件为温度30℃，150rpm摇床培养，植物乳杆菌的培养条件为温度37℃，静态培养。
接种液计数：采用涂板对各菌种接种液进行计数。
除另有说明外，本发明所述的百分比均为质量百分比，各组分含量百分数之和为100％。
本发明的有益效果：
1、经产品检测，采用热带假丝酵母+枯草芽孢杆菌+植物乳杆菌+尿素固态发酵木薯渣后，得到木薯渣发酵产物中pH值由3.49降至3.14，粗蛋白CP含量由2.58％提高到4.82％；采用热带假丝酵母+枯草芽孢杆菌+植物乳杆菌+尿素+红糖固态发酵木薯渣后，得到木薯渣发酵产物中pH值由3.49降至3.17，粗蛋白CP含量由2.58％提高到4.84％，有效改善了木薯渣的品质。
2、本发明制备方法简单，便于操作，原料丰富易得。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明的技术方案作进一步说明。
以下实施例仅为本发明示意性的具体实施方式，并非用以限定本发明的范围。任何本领域的技术人员，在不脱离本发明的构思和原则的前提下所作的等同变化、修改与结合，均应属于本发明保护范围。
实施例1
本发明所述的用热带假丝酵母、枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌组合固态发酵木薯渣的方法的一个实例，具体操作步骤如下：
(1)将新鲜木薯渣在65℃下烘干后作为发酵原料；
(2)向经过步骤(1)处理过的木薯渣中按木薯渣干物质的质量百分添加1％的尿素作为氮源；
(3)将热带假丝酵母、枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌的菌液以1:1:1的体积比混合，按木薯渣干物质5％的量进行接种，使每克干木薯渣中热带假丝酵母、枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌的活菌含量分别达到1.5×106cfu/g，6.3×104cfu/g，2.2×105cfu/g；
(4)将步骤(3)添加了布氏乳杆菌、黑曲霉、热带假丝酵母、枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌混合制剂的木薯渣，用生理盐水调制含水量为60～65％，混合均匀，装入聚乙烯薄膜袋中，用真空泵抽出袋内的空气至真空状态，密封，置于室温下贮藏；
(5)将步骤(4)包装好的木薯渣在室温下固态发酵10天，得到木薯渣发酵产物。
应用FOSS8400凯氏定氮仪测定木薯渣发酵产物中的粗蛋白质含量，经产品检测，采用热带假丝酵母+枯草芽孢杆菌+植物乳杆菌+尿素固态发酵木薯渣后，得到木薯渣发酵产物中PH值由3.49降至3.14，粗蛋白(CP)含量由2.58％提高到4.82％；
实施例2
本发明所述的用热带假丝酵母、枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌组合固态发酵木薯渣的方法的另一个实例，具体操作步骤如下：
(1)将新鲜木薯渣在65℃下烘干后作为发酵原料；
(2)向经过步骤(1)处理过的木薯渣中按木薯渣干物质的质量百分添加1％的尿素+0.6％红糖，添加尿素作为氮源，添加红糖用于调节木薯渣的可溶性糖浓度；
(3)将热带假丝酵母、枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌的菌液以1:1:1的体积比混合，按木薯渣干物质5％的量进行接种，使每克干木薯渣中热带假丝酵母、枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌的活菌含量分别达到1.5×106cfu/g，6.3×104cfu/g，2.2×105cfu/g；
(4)将步骤(3)添加了热带假丝酵母、枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌混合制剂的木薯渣，用生理盐水调制含水量为60～65％，混合均匀，装入聚乙烯薄膜袋中，用真空泵抽出袋内的空气至真空状态，密封，置于室温下贮藏；
(5)将步骤(4)包装好的木薯渣在室温下固态发酵10天，得到木薯渣发酵产物。
应用FOSS8400凯氏定氮仪测定木薯渣发酵产物中的粗蛋白质含量，使用HANNAHI8424便捷式pH计测定木薯渣发酵产物中的pH值。经产品检测：采用热带假丝酵母+枯草芽孢杆菌+植物乳杆菌+尿素+红糖固态发酵木薯渣后，得到木薯渣发酵产物中pH值由3.49降至3.17，粗蛋白CP含量由2.58％提高到4.84％。
不同微生物添加剂对木薯渣发酵品质及营养成分的影响见表1。
表1不同微生物添加剂对木薯渣发酵品质及营养成分的影响
注：同列无字母或肩标相同字母表示差异不显著(P＞0.05)，不同小写字母表示差异显著(P＜0.05)。
Claims (1)
1.用热带假丝酵母、枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌组合固态发酵木薯渣的方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)将新鲜木薯渣在65℃下烘干后作为发酵原料；
(2)向经过步骤(1)处理过的木薯渣中按木薯渣干物质的质量百分添加1％的尿素或者添加1％尿素+0.6％红糖，添加尿素作为氮源，添加红糖用于调节木薯渣的可溶性糖浓度；
(3)将热带假丝酵母、枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌的菌液以1:1:1的体积比混合，按木薯渣干物质5％的量进行接种，使每克干木薯渣中热带假丝酵母、枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌的活菌含量分别达到1.5×106cfu/g，6.3×104cfu/g，2.2×105cfu/g；
(4)将步骤(3)添加了热带假丝酵母、枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌混合制剂的木薯渣，用生理盐水调制含水量为60～65％，混合均匀，装入聚乙烯薄膜袋中，用真空泵抽出袋内的空气至真空状态，密封，置于室温下贮藏；
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