CN105494918A - 用布氏乳杆菌、黑曲霉和植物乳杆菌组合固态发酵木薯渣的方法 - Google Patents

Abstract

用布氏乳杆菌、黑曲霉和植物乳杆菌组合固态发酵木薯渣的方法，以木薯渣为发酵原料，将布氏乳杆菌、黑曲霉和植物乳杆菌的菌液以1:1:1的体积比混合，以木薯渣干物质5％的量进行接种，按木薯渣干物质的质量百分比添加0.6％的红糖调节木薯渣的可溶性糖浓度，按木薯渣干物质的质量百分比添加1％的尿素作为氮源，用生理盐水调制含水量为60～65％，混合均匀，装入聚乙烯薄膜袋中，用真空泵抽出袋内的空气至真空状态，密封，置于室温下贮藏发酵10天。经过发酵处理后，能显著降低木薯渣的中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维含量，能有效改善木薯渣品质。

Description

用布氏乳杆菌、黑曲霉和植物乳杆菌组合固态发酵木薯渣的方法

技术领域

本发明属于混菌固态发酵饲料制备技术领域，具体是用布氏乳杆菌、黑曲霉和植物乳杆菌组合固态发酵木薯渣的方法。

背景技术

木薯渣是木薯加工淀粉和酒精后的副产物，其干物质主要成分为淀粉、纤维素及少量的蛋白质，碳水化合物含量高，矿物质、微量元素和氨基酸含量丰富，而且价格低廉，是一种有开发潜力的新型饲料资源，但木薯渣在实际应用过程中存在水分含量高(新鲜木薯渣水分含量为80～90％)不易贮存，蛋白质含量低及适口性差等问题，成为制约木薯渣发展的瓶颈,导致木薯渣一直没有得到很好的利用，目前，木薯渣主要是用作生产酒精、饲料、栽培平菇等方面，使用量有限,绝大部分的木薯渣被丢弃,不仅造成资源浪费,而且对环境造成严重的污染。应用微生物混合固态发酵木薯渣，通过微生物和相关化学物质发生一系列的复杂的生物化学反应，不仅可以降解木薯渣中的纤维含量，改善其适口性，还可以全面的提高木薯渣的营养价值，从而解决上述问题。应用微生物发酵木薯渣，菌株的选择非常关键,许多研究表明，混合菌种发酵木薯渣比单一菌种效果好，目前菌种的选择由单一菌种向混合菌种方向发展。目前研究的微生物品种及搭配非常有限，布氏乳杆菌、黑曲霉和植物乳杆菌三菌组合处理木薯渣的研究基本未见报道。本发明为探索最佳木薯渣发酵条件，改善木薯渣品质，提高其适口性，为木薯渣在饲料行业中的更广泛的应用打下基础。

发明内容

本发明的目的是提供用布氏乳杆菌、黑曲霉和植物乳杆菌组合固态发酵木薯渣的方法。

本发明应用的微生物菌种来源：黑曲霉(Aspergillusniger)；植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)；布氏乳杆菌(Lactobasillusbuchneri)均购买于中国工业微生物菌种保藏管理中心。

本发明应用的尿素和红糖来源：尿素和红糖均为市购。

本发明应用的培养基：MRS的液体培养基用于植物乳杆菌、布氏乳杆菌活化和菌液培养；MRS固体培养基用于植物乳杆菌和布氏乳杆菌涂板计数；MEB液体培养基用于黑曲霉的活化和菌液培养；MEB固体培养基用于黑曲霉涂板计数；

试验菌种的活化及扩培：安瓿管冻干菌种→活化→按5％添加量接种到相应的液体培养基中，黑曲霉的培养条件为温度30℃，150rpm摇床培养，植物乳杆菌和布氏乳杆菌的培养条件为温度37℃，静态培养。

接种液计数：采用涂板对各菌种接种液进行计数。

用布氏乳杆菌、黑曲霉和植物乳杆菌组合固态发酵木薯渣的方法，包括如下步骤：

⑴将新鲜木薯渣在65℃下烘干后作为发酵原料；

⑵向经过步骤⑴处理过的木薯渣中按木薯渣干物质的质量百分比添加1％的尿素或者添加1％尿素+0.6％红糖，添加尿素作为氮源，添加红糖用于调节木薯渣的可溶性糖浓度；

⑶将布氏乳杆菌、黑曲霉和植物乳杆菌的菌液以1:1:1的体积比混合，以木薯渣干物质5％的量进行接种，使每克干木薯渣中布氏乳杆菌、黑曲霉和植物乳杆菌的活菌含量分别达到1.3×10⁵cfu/g，9.7×10²cfu/g，2.2×10⁵cfu/g；

⑷将步骤⑶添加了布氏乳杆菌、黑曲霉和植物乳杆菌混合制剂的木薯渣，用生理盐水调制含水量为60～65％，混合均匀，装入聚乙烯薄膜袋中，用真空泵抽出袋内的空气至真空状态，密封，置于室温下贮藏；

⑸将步骤⑷包装好的木薯渣在室温下固态发酵10天，得到木薯渣发酵产物。

除另有说明外，本发明所述的百分比均为质量百分比，各组分含量百分数之和为100％。

本发明的有益效果：

1.经产品检测，采用布氏乳杆菌+黑曲霉+植物乳杆菌+尿素固态发酵木薯渣后，得到木薯渣发酵产物中性洗涤纤维NDF含量由24.11％降低到19.48％，酸性洗涤纤维ADF含量由20.00％降低到15.77％；采用布氏乳杆菌+黑曲霉+植物乳杆菌+尿素+红糖固态发酵木薯渣后，得到木薯渣发酵产物中性洗涤纤维NDF含量由24.11％降低到19.42％，酸性洗涤纤维(ADF)含量由20.00％降低到15.66％。通过在木薯渣固体发酵过程中添加布氏乳杆菌、黑曲霉和植物乳杆菌能够有效改善木薯渣品质。

2.制备方法简单，便于操作，原料丰富易得。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明的技术方案作进一步说明。

以下实施例仅为本发明示意性的具体实施方式，并非用以限定本发明的范围。任何本领域的技术人员，在不脱离本发明的构思和原则的前提下所作的等同变化、修改与结合，均应属于本发明保护范围。

实施例1

本发明所述的用布氏乳杆菌、黑曲霉和植物乳杆菌组合固态发酵木薯渣的方法的一个实例，操作步骤如下：

⑴将新鲜木薯渣在65℃下烘干后作为发酵原料；

⑵向经过步骤⑴处理过的木薯渣中按木薯渣干物质的质量百分比添加1％的尿素作为氮源；

⑶将布氏乳杆菌、黑曲霉和植物乳杆菌的菌液以1:1:1的体积比混合，以木薯渣干物质5％的量进行接种，使每克干木薯渣中布氏乳杆菌、黑曲霉和植物乳杆菌的活菌含量分别达到1.3×10⁵cfu/g，9.7×10²cfu/g，2.2×10⁵cfu/g；

⑷将步骤⑶添加了布氏乳杆菌、黑曲霉和植物乳杆菌混合制剂的木薯渣，用生理盐水调制含水量为60～65％，混合均匀，装入聚乙烯薄膜袋中，用真空泵抽出袋内的空气至真空状态，密封，置于室温下贮藏；

⑸将步骤⑷包装好的木薯渣在室温下固态发酵10天，得到木薯渣发酵产物。

应用ANKOM2000纤维测定仪测定木薯渣发酵产物中的DNF和ADF含量，产品检测结果为：

采用布氏乳杆菌+黑曲霉+植物乳杆菌+尿素固态发酵木薯渣后，得到木薯渣发酵产物中性洗涤纤维NDF含量由24.11％降低到19.48％，酸性洗涤纤维ADF含量由20.00％降低到15.77％。

实施例2

本发明所述的用布氏乳杆菌、黑曲霉和植物乳杆菌组合固态发酵木薯渣的方法的另一个实例，操作步骤如下：

⑴新鲜木薯渣在65℃下烘干后作为发酵原料；

⑵向经过步骤⑴处理过的木薯渣中按木薯渣干物质的质量百分比添加1％的尿素+0.6％红糖，添加尿素作为氮源，添加红糖用于调节木薯渣的可溶性糖浓度。

⑶将布氏乳杆菌、黑曲霉和植物乳杆菌的菌液以1:1:1的体积比混合，以木薯渣干物质5％的量进行接种，使每克干木薯渣中布氏乳杆菌、黑曲霉和植物乳杆菌的活菌含量分别达到1.3×10⁵cfu/g，9.7×10²cfu/g，2.2×10⁵cfu/g。

⑷将步骤⑶添加了布氏乳杆菌、黑曲霉和植物乳杆菌混合制剂的木薯渣，用生理盐水调制含水量为60～65％，混合均匀，装入聚乙烯薄膜袋中，用真空泵抽出袋内的空气至真空状态，密封，置于室温下贮藏；

⑸将步骤⑷包装好的木薯渣在室温下固态发酵10天，得到木薯渣发酵产物。

应用ANKOM2000纤维测定仪测定木薯渣发酵产物中的DNF和ADF含量；应用FOSS8400凯氏定氮仪测定木薯渣发酵产物中的粗蛋白质含量，产品检测结果为：

采用布氏乳杆菌+黑曲霉+植物乳杆菌+尿素+红糖固态发酵木薯渣后，得到木薯渣发酵产物中性洗涤纤维NDF含量由24.11％降低到19.42％，酸性洗涤纤维ADF含量由20.00％降低到15.66％。

不同微生物添加剂对木薯渣营养成分的影响见表1。

表1不同微生物添加剂对木薯渣营养成分的影响(风干基础)

注：同列无字母或肩标相同字母表示差异不显著(P>0.05)，不同小写字母表示差异显著(P<0.05)。

Claims (1)

1.用布氏乳杆菌、黑曲霉和植物乳杆菌组合固态发酵木薯渣的方法，其特征在于，操作步骤如下：

⑴将新鲜木薯渣在65℃下烘干后作为发酵原料；

⑵向经过步骤⑴处理过的木薯渣中按木薯渣干物质的质量百分比添加1％的尿素或者添加1％尿素+0.6％红糖，添加尿素作为氮源，添加红糖用于调节木薯渣的可溶性糖浓度；

⑶将布氏乳杆菌、黑曲霉和植物乳杆菌的菌液以1:1:1的体积比混合，以木薯渣干物质5％的量进行接种，使每克干木薯渣中布氏乳杆菌、黑曲霉和植物乳杆菌的活菌含量分别达到1.3×10⁵cfu/g，9.7×10²cfu/g，2.2×10⁵cfu/g；

⑷将步骤⑶添加了布氏乳杆菌、黑曲霉和植物乳杆菌混合制剂的木薯渣，用生理盐水调制含水量为60～65％，混合均匀，装入聚乙烯薄膜袋中，用真空泵抽出袋内的空气至真空状态，密封，置于室温下贮藏；

⑸将步骤⑷包装好的木薯渣在室温下固态发酵10天，得到木薯渣发酵产物。