CN105420115B - 一种用于蜜环菌孢子分离、培养的培养基及方法和应用 - Google Patents

一种用于蜜环菌孢子分离、培养的培养基及方法和应用 Download PDF

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Abstract

本发明涉及食用菌种培养技术领域，特别涉及一种用于蜜环菌孢子分离、培养的培养基及方法和应用。所述培养基包括基础培养基：马铃薯150‑220份，蔗糖15‑25份，琼脂15‑25份，水1000份；固体基质：150‑200份。所述固体基质为谷类或豆类或杂粮或其组合；所述培养基为斜面培养基。采用所述的培养基进行蜜环菌孢子的分离、培养方法为：先制作基础培养基；再将固体基质在水中浸泡后，装入基础培养基中，消毒灭菌冷却后；接入蜜环菌孢子培养成菌种。本发明既适于蜜环菌基质，菌索、组织块分离，更适用于孢子的分离，一次性将孢子繁育成原种，从分离到纯化的时间为25‑30天，中途不转管，且此菌种既可当试管母种，又可直接当原种用；缩短了蜜环菌种的分离时间和选育周期。

Description

一种用于蜜环菌孢子分离、培养的培养基及方法和应用
技术领域
本发明涉及食用菌种培养技术领域，特别涉及一种用于蜜环菌孢子分离、培养及方法和应用。
背景技术
蜜环菌(Armillariella mellea) 是真菌界、担子菌门、层菌纲、伞菌目、白磨科、小蜜环菌属的一种食药用真菌。蜜环菌在自然界中与天麻、猪苓等生物相互作用和协同进化有着密切的关系。在天麻、猪苓栽培中，蜜环菌种的活性或是优劣，直接影响或是决定着它们的产量和质量。
蜜环菌种的获得或是分离技术方法，有从低级到高级，简单到复杂的五种技术和方法。一是菌材分离，二是菌索分离，三是种麻分离，四是组织分离，五是孢子分离。目前我国的研究所和菌种生产厂家主要是用菌索和种麻分离，少用组织分离，更少用孢子分离获得菌种。用孢子分离的困难之一是，蜜环菌子实体在自然界中一年只出现一次（即重阳节前后），且孢子弹射的时间很短（约30个小时左右），人为采取孢子的季节和时间受到限制。之二是，人工用菌材培育蜜环菌子实体周期长（一至三年），且有技术难度和环境限制。之三是，分离过程中易感杂，须要有一定的设备和相当的技术。
目前蜜环菌种分离和制种工艺是：从分离材料（基质、菌索、子实体）上获得菌种即试管种（15d）－试管种(15d)－原种(45d)－栽培种（50d）。且一支试管种只能扩接原种6瓶左右。
有人报道用蜜环菌索为材料的免消毒分离方法所用是PDA培养基（张方玉 一种简便的蜜环菌分离方法[J]微生物学通报 1995 20（6）：382）；一种优化的蜜环菌分离与纯化方法（王传华 王义敏等 一种优化的蜜环菌分离与纯化方法 [J]武汉植物学研究 2005，23（5）：478～481），均在不同程度上有效提高了蜜环菌种的分离成功率，其不足点是，前者基质易裂口，皱缩；后者基质胶质状程度不如琼脂。其它杂菌还能深入到此种培养基中生长，因而降低了分离或纯化的成功率。根据蜜环菌生活史特性，孢子－菌丝－菌索－子实体。尤其是菌丝（分解吃料）与菌索（穿越传输）有不同的功能和互相转换的特性，配制的培养基既要满足孢子和菌丝及菌索的生长，还要能抵挡或阻隔其它真菌和细菌的生长。
发明内容
本发明在于提供一种用于蜜环菌孢子分离、培养的培养基及方法和应用，能够分离纯化、利于孢子萌发，进而生长为菌索和菌丝，即菌种。
本发明的具体方案如下：
一种用于蜜环菌孢子分离、培养的培养基，所述培养基包括按重量份的以下组分：
马铃薯150-220份，蔗糖15-25份，琼脂15-25份，水1000份，固体基质150-220份；
所述固体基质为谷类或豆类或杂粮或其组合。
本发明优选方案，所述培养基包括按重量份的以下组分：
马铃薯180-210份，蔗糖18-22份，琼脂18-22份，水1000份，固体基质180-200份；
所述谷类为小麦或大麦或燕麦或黑麦或玉米或其组合；
所述豆类为蚕豆或绿豆或赤豆或黑豆或其组合；
所述杂粮为或薏米或高粱或黑米或高粱或荞麦或其组合。
所述培养基为斜面培养基。
采用所述的培养基进行蜜环菌孢子的分离、培养，所述方法包括以下步骤：
1）将固体基质在水中浸泡，得到物料1；
2）将培养基组分马铃薯切片沸水煮15分钟过滤，过滤液、蔗糖、琼脂溶解于水中，分装至三角瓶中，得到基础培养基；
3）将物料1加入所述步骤2）中的基础培养基中，封口、灭菌、冷却得到用于蜜环菌孢子分离、培养的培养基；
4）从蜜环菌子实体上收集蜜环菌孢子，挑取蜜环菌孢子接种在所述步骤3）的培养基上进行培养，并剔除感染杂菌的接种瓶；
完成孢子的分离、培养。
所述步骤1）固体基质在水中浸泡浸泡时间为20-30 h。
所述步骤4）蜜环菌孢子培养温度为20-22℃，培养时间为10-15天。
所述步骤4）接种的蜜环菌孢子收集方法为：
蜜环菌子实体菌衣开裂25-30h，菌盖边缘成铜罗边时，用消毒的剪刀在紧靠菌褶部位剪去菌柄，将菌盖放在已消毒的滤纸上，菌盖上面盖上一张滤纸，再在上面盖一张干净薄膜；
25-30 h后，蜜环菌孢子大量弹射在滤纸上，得到接种孢子。
还包括对所得到的接种孢子优良性的检测方法，所述检测方法为将得到的蜜环菌种，在室内1月上旬培养好菌材，在3月上旬室外栽培天麻，当年10月挖取天麻，并测定天麻产量。
所述的培养基在食用菌菌种分离、培养中的应用。
本发明提供一种用于蜜环菌孢子分离、培养的培养基及方法和应用，有益效果如下：
1、本配方培养基，科学地配制出适合蜜环菌菌丝和菌索，分离、培养生长，而不适合其它杂菌生长的培养基配方，既能提供和满足蜜环菌种生长所需的营养物质，又能有效的阻隔其它杂菌类的生长，即其它杂菌不能穿越琼脂生长，只能在琼脂的表层面上生长，但蜜环菌索能穿入琼脂，并深入到被琼脂包裹的固体基质中生长，所以本发明培养基与常规培养基比较，不仅能大大提高分离或纯化的成功率，还能最大程度地提高菌丝和菌索生长的数量和质量；
2、本培养基配方既适于蜜环菌基质，菌索、组织块分离，更适用于孢子的分离。用无性时期的料材（基质，菌索、组织块）获得的菌种在生产上易退化，用有性时期的材料（孢子）获得的菌种能恢复和提高物种的活力和抗性，因此，用蜜环菌子实体产生的孢子分离获得的菌种，是新一代的生命个体或群体，因而活力最强，用这种菌种生产蜜环菌原种和栽培种，其活力和抗性（抗杂性、抗逆性）最强，因而能提高菌种的生产效益和经济效益；
3、采用本发明技术，不转管扩接成原种，一次性将孢子繁育成原种从分离到纯化的时间为25-30天，中途不转管，一次性将分离的母种扩大50倍，且此种既可当试管母种，又可直接当原种用；
4、采用本发明获得的菌种发菌材，由于具有新一代的生命力和生活力，其“吃料”能力，即分解木材的活力旺盛，菌索很快就能缠绕到木材，并钻入到木材的韧皮部和木质部产生菌丝体，菌丝体又形成菌索，木材上长满了菌丝体和菌索，为天麻生长准备好了丰富，纯洁（无杂菌）的食粮即营养物质，因而能显著提高天麻产量和质量；
5、采用本发明缩短了蜜环菌种的分离培养时间，常规方法要125-130天，本专利方法只需要70-80天；
6、采用本发明缩短了蜜环菌种选育的生产周期，常规方法要750天，时间历经周期三年，本方法只需390天，时间历经周期二年；
7、本发明培养基中没有添加其他真菌和细菌抑制药物，组分简单且有利于蜜环菌种的生长；
8、采用本发明培养的蜜环菌菌材，栽培天麻，天麻产量提高20%-30%。
附图说明
图1：基础培养基分离培养蜜环菌种状态示意图；
图2：蜜环菌盖示意图；
图3：蜜环菌盖弹射出的孢子示意图。
图4：本发明专利培养基（斜面）分离培养蜜环菌种状态示意图；
图5：本发明专利培养基（直立）培养蜜环菌种状态示意图；
图6：传统方法采用的培养基状态示意图。
具体实施方式
下面结合实施例来进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于实施例表述的范围。
根据蜜环菌生活史特性，孢子－菌丝－菌索－子实体。尤其是菌丝（分解吃料）与菌索（穿越传输）有不同的功能和互相转换的特性，配制的培养基既要满足孢子和菌丝及菌索的生长，还要能抵挡或阻隔其它真菌和细菌的生长。
实施例1 基础培养基培养分离培养蜜环菌种
一种用于蜜环菌孢子分离、培养的培养基，其特征在于：所述培养基包括按重量份的以下组分：
马铃薯200份，蔗糖20份，琼脂18份，水1000份；
将培养基组分马铃薯切片沸水煮15分钟过滤，过滤液、蔗糖、琼脂溶解于水中，分装至三角瓶中，封口、灭菌、冷却得到基础培养基；
从蜜环菌子实体上收集蜜环菌孢子，挑取蜜环菌孢子接种在所述基础培养基上进行培养，培养温度为20℃，培养时间为10天，并剔除感染杂菌的接种瓶；
完成孢子的分离、培养。其培养的情况见图1。由图可知，菌索、菌丝少量生长在基础培养基上。
所述蜜环菌孢子收集方法为：
蜜环菌子实体菌衣开裂25 h，菌盖边缘成铜罗边时，紧靠菌褶部位剪去菌柄，将菌盖放在已消毒的滤纸上，如图2，菌盖上面盖上一张滤纸，再在上面盖一张干净薄膜；
25 h后，蜜环菌孢子大量弹射在滤纸上，如图3，得到接种孢子。
实施例2 本发明专利培养基分离培养蜜环菌种
一种用于蜜环菌孢子分离、培养的培养基，所述培养基包括按重量份的以下组分：
马铃薯200份，蔗糖20份，琼脂20份，固体基质180份，水1000份；所述固体基质为小麦。
采用所述的培养基进行蜜环菌孢子的分离、培养，所述方法包括以下步骤：
1）将固体基质在水中浸泡28 h，得到物料1；
2）将培养基组分马铃薯切片沸水煮15分钟过滤，过滤液、蔗糖、琼脂溶解于水中，分装至三角瓶中，得到基础培养基；
3）将物料1加入所述步骤2）中的基础培养基中，封口、灭菌、冷却得到用于蜜环菌孢子分离、培养的培养基，培养基分斜面、直立状进行摆放；
4）从蜜环菌子实体上收集蜜环菌孢子，挑取蜜环菌孢子接种在所述步骤3）的培养基上进行培养，培养温度为20℃，培养时间为10天，并剔除感染杂菌的接种瓶；
完成孢子的分离、培养。
培养后的菌种见图4、5，图4为本发明专利培养基斜面分离培养蜜环菌种状态示意图；图5为本发明专利培养基直立培养蜜环菌种状态示意图；由图4、图5可知，采用斜面培养，更有利于菌丝、菌索生长和深入至在整个培养基中。
实施例3
一种用于蜜环菌孢子分离、培养的培养基，所述培养基包括按重量份的以下组分：马铃薯150份，蔗糖15份，琼脂25份，固体基质200份，水1000份；
所述固体基质为大麦；
所述培养基为斜面培养基。
采用所述的培养基进行蜜环菌孢子的分离、培养，所述方法包括以下步骤：
1）将固体基质在水中浸泡25 h，得到物料1；
2）将培养基组分马铃薯切片沸水煮15分钟过滤，过滤液、蔗糖、琼脂溶解于水中，分装至三角瓶中，得到基础培养基；
3）将物料1加入所述步骤2）中的基础培养基中，封口、灭菌、冷却得到用于蜜环菌孢子分离、培养的培养基，培养基分斜面、直立状进行摆放；
4）从蜜环菌子实体上收集蜜环菌孢子，挑取蜜环菌孢子接种在所述步骤3）的培养基上进行培养，培养温度为20℃，培养时间为10天，并剔除感染杂菌的接种瓶；
完成孢子的分离、培养。
所述蜜环菌孢子收集方法为：
蜜环菌子实体菌衣开裂30h，菌盖边缘成铜罗边时，用消毒的剪刀在紧靠菌褶部位剪去菌柄，将菌盖放在已消毒的滤纸上，菌盖上面盖上一张滤纸，再在上面盖一张干净薄膜；
30 h后，蜜环菌孢子大量弹射在滤纸上，得到接种孢子。
对所得到的接种孢子优良性的检测方法，所述检测方法为将得到的蜜环菌种，在室内1月上旬培养好菌材，在3月上旬室外栽培天麻，当年10月挖取天麻，并测定天麻产量，天麻产量提高25%。
实施例4
一种用于蜜环菌孢子分离、培养的培养基，所述培养基包括按重量份的以下组分：
马铃薯200份，蔗糖20份，琼脂20份，固体基质180份，水1000份；所述固体基质为小麦。
采用所述的培养基进行蜜环菌孢子的分离、培养，所述方法包括以下步骤：
1）将固体基质在水中浸泡30 h，得到物料1；
2）将培养基组分马铃薯切片沸水煮15分钟过滤，过滤液、蔗糖、琼脂溶解于水中，分装至三角瓶中，得到基础培养基；
3）将物料1加入所述步骤2）中的基础培养基中，封口、灭菌、冷却得到用于蜜环菌孢子分离、培养的培养基，培养基分斜面、直立状进行摆放；
4）从蜜环菌子实体上收集蜜环菌孢子，挑取蜜环菌孢子接种在所述步骤3）的培养基上进行培养，培养温度为21℃，培养时间为11天，并剔除感染杂菌的接种瓶；
完成孢子的分离、培养。
所述蜜环菌孢子收集方法为：
蜜环菌子实体菌衣开裂28 h，菌盖边缘成铜罗边时，用消毒的剪刀在紧靠菌褶部位剪去菌柄，将菌盖放在已消毒的滤纸上，菌盖上面盖上一张滤纸，再在上面盖一张干净薄膜；
27 h后，蜜环菌孢子大量弹射在滤纸上，得到接种孢子。
对所得到的接种孢子优良性的检测方法，所述检测方法为将得到的蜜环菌种，在室内1月上旬培养好菌材，在3月上旬室外栽培天麻，当年10月挖取天麻，并测定天麻产量，天麻产量提高25%。
实施例5
一种用于蜜环菌孢子分离、培养的培养基，所述培养基包括按重量份的以下组分：马铃薯190份，蔗糖19份，琼脂22份，固体基质190份，水1000份；
所述固体基质为小麦140份，薏米50份；
所述培养基为斜面培养基。
采用所述的培养基进行蜜环菌孢子的分离、培养，所述方法包括以下步骤：
1）将固体基质在水中浸泡29 h，得到物料1；
2）将培养基组分马铃薯切片沸水煮15分钟过滤，过滤液、蔗糖、琼脂溶解于水中，分装至三角瓶中，得到基础培养基；
3）将物料1加入所述步骤2）中的基础培养基中，封口、灭菌、冷却得到用于蜜环菌孢子分离、培养的培养基，培养基分斜面、直立状进行摆放；
4）从蜜环菌子实体上收集蜜环菌孢子，挑取蜜环菌孢子接种在所述步骤3）的培养基上进行培养，培养温度为20℃，培养时间为10天，并剔除感染杂菌的接种瓶；
完成孢子的分离、培养。
所述蜜环菌孢子收集方法为：
蜜环菌子实体菌衣开裂29h，菌盖边缘成铜罗边时，用消毒的剪刀在紧靠菌褶部位剪去菌柄，将菌盖放在已消毒的滤纸上，菌盖上面盖上一张滤纸，再在上面盖一张干净薄膜；
28 h后，蜜环菌孢子大量弹射在滤纸上，得到接种孢子。
对所得到的接种孢子优良性的检测方法，所述检测方法为将得到的蜜环菌种，在室内1月上旬培养好菌材，在3月上旬室外栽培天麻，当年10月挖取天麻，并测定天麻产量。
对所得到的接种孢子优良性的检测方法，所述检测方法为将得到的蜜环菌种，在室内1月上旬培养好菌材，在3月上旬室外栽培天麻，当年10月挖取天麻，并测定天麻产量，天麻产量提高28%。
实施例6
一种用于蜜环菌孢子分离、培养的培养基，所述培养基包括按重量份的以下组分：
马铃薯210份，蔗糖22份，琼脂23份，固体基质180份，水1000份；
所述固体基质为大麦60份，燕麦20份，黑麦50份，赤豆20份，高粱30份；
所述培养基为斜面培养基。
采用所述的培养基进行蜜环菌孢子的分离、培养，所述方法包括以下步骤：
1）将固体基质在水中浸泡25 h，得到物料1；
2）将培养基组分马铃薯切片沸水煮15分钟过滤，过滤液、蔗糖、琼脂溶解于水中，分装至三角瓶中，得到基础培养基；
3）将物料1加入所述步骤2）中的基础培养基中，封口、灭菌、冷却得到用于蜜环菌孢子分离、培养的培养基，培养基分斜面、直立状进行摆放；
4）从蜜环菌子实体上收集蜜环菌孢子，挑取蜜环菌孢子接种在所述步骤3）的培养基上进行培养，培养温度为20℃，培养时间为11天，并剔除感染杂菌的接种瓶；
完成孢子的分离、培养。
所述蜜环菌孢子收集方法为：
蜜环菌子实体菌衣开裂28h，菌盖边缘成铜罗边时，用消毒的剪刀在紧靠菌褶部位剪去菌柄，将菌盖放在已消毒的滤纸上，菌盖上面盖上一张滤纸，再在上面盖一张干净薄膜；
28 h后，蜜环菌孢子大量弹射在滤纸上，得到接种孢子。
还包括对所得到的接种孢子优良性的检测方法，所述检测方法为将得到的蜜环菌种，在室内1月上旬培养好菌材，在3月上旬室外栽培天麻，当年10月挖取天麻，并测定天麻产量，天麻产量提高30%。
实施例7
一种用于蜜环菌孢子分离、培养的培养基，所述培养基包括按重量份的以下组分：
马铃薯200份，蔗糖20份，琼脂20份，固体基质190份，水1000份；
所述固体基质为大麦30份，燕麦20份，玉米30份，蚕豆20份，黑豆30份，黑米30份，荞麦30份；
所述培养基为斜面培养基。
采用所述的培养基进行蜜环菌孢子的分离、培养，所述方法包括以下步骤：
1）将固体基质在水中浸泡27 h，得到物料1；
2）将培养基组分马铃薯切片沸水煮15分钟过滤，过滤液、蔗糖、琼脂溶解于水中，分装至三角瓶中，得到基础培养基；
3）将物料1加入所述步骤2）中的基础培养基中，封口、灭菌、冷却得到用于蜜环菌孢子分离、培养的培养基，培养基分斜面、直立状进行摆放；
4）从蜜环菌子实体上收集蜜环菌孢子，挑取蜜环菌孢子接种在所述步骤3）的培养基上进行培养，培养温度为20℃，培养时间为10天，并剔除感染杂菌的接种瓶；
完成孢子的分离、培养。
所述蜜环菌孢子收集方法为：
蜜环菌子实体菌衣开裂25h，菌盖边缘成铜罗边时，用消毒的剪刀在紧靠菌褶部位剪去菌柄，将菌盖放在已消毒的滤纸上，菌盖上面盖上一张滤纸，再在上面盖一张干净薄膜；
25 h后，蜜环菌孢子大量弹射在滤纸上，得到接种孢子。
还包括对所得到的接种孢子优良性的检测方法，所述检测方法为将得到的蜜环菌种，在室内2月底培养好菌材，在3月上旬室外栽培天麻，当年10月挖取天麻，并测定天麻产量。
对所得到的接种孢子优良性的检测方法，所述检测方法为将得到的蜜环菌种，在室内1月上旬培养好菌材，在3月上旬室外栽培天麻，当年10月挖取天麻，并测定天麻产量，天麻产量提高30%。
实施例8
一种用于蜜环菌孢子分离、培养的培养基，所述培养基包括按重量份的以下组分：
马铃薯220份，蔗糖25份，琼脂25份，固体基质200份，水1000份；
所述固体基质为蚕豆50份，高粱50份，黑米50份，荞麦50份；
所述培养基为斜面培养基。
采用所述的培养基进行蜜环菌孢子的分离、培养，所述方法包括以下步骤：
1）将固体基质在水中浸泡20-30 h，得到物料1；
2）将培养基组分马铃薯切片沸水煮15分钟过滤，过滤液、蔗糖、琼脂溶解于水中，分装至三角瓶中，得到基础培养基；
3）将物料1加入所述步骤2）中的基础培养基中，封口、灭菌、冷却得到用于蜜环菌孢子分离、培养的培养基，培养基分斜面、直立状进行摆放；
4）从蜜环菌子实体上收集蜜环菌孢子，挑取蜜环菌孢子接种在所述步骤3）的培养基上进行培养，培养温度为22℃，培养时间为12天，并剔除感染杂菌的接种瓶；
完成孢子的分离、培养。
所述蜜环菌孢子收集方法为：
蜜环菌子实体菌衣开裂28h，菌盖边缘成铜罗边时，用消毒的剪刀在紧靠菌褶部位剪去菌柄，将菌盖放在已消毒的滤纸上，菌盖上面盖上一张滤纸，再在上面盖一张干净薄膜；
28 h后，蜜环菌孢子大量弹射在滤纸上，得到接种孢子。
对所得到的接种孢子优良性的检测方法，所述检测方法为将得到的蜜环菌种，在室内1月上旬培养好菌材，在3月上旬室外栽培天麻，当年10月挖取天麻，并测定天麻产量，天麻产量提高30%。
实施例9
一种用于蜜环菌孢子分离、培养的培养基，所述培养基包括按重量份的以下组分：
马铃薯180份，蔗糖19份，琼脂22份，固体基质180份，水1000份；
所述固体基质为薏米60份，高粱60份，黑米60份；
所述培养基为斜面培养基。
采用所述的培养基进行蜜环菌孢子的分离、培养，所述方法包括以下步骤：
1）将固体基质在水中浸泡25h，得到物料1；
2）将培养基组分马铃薯切片沸水煮15分钟过滤，过滤液、蔗糖、琼脂溶解于水中，分装至三角瓶中，得到基础培养基；
3）将物料1加入所述步骤2）中的基础培养基中，封口、灭菌、冷却得到用于蜜环菌孢子分离、培养的培养基，培养基分斜面、直立状进行摆放；
4）从蜜环菌子实体上收集蜜环菌孢子，挑取蜜环菌孢子接种在所述步骤3）的培养基上进行培养，培养温度为22℃，培养时间为12天，并剔除感染杂菌的接种瓶；
完成孢子的分离、培养。
所述蜜环菌孢子收集方法为：
蜜环菌子实体菌衣开裂29h，菌盖边缘成铜罗边时，用消毒的剪刀在紧靠菌褶部位剪去菌柄，将菌盖放在已消毒的滤纸上，菌盖上面盖上一张滤纸，再在上面盖一张干净薄膜；
29 h后，蜜环菌孢子大量弹射在滤纸上，得到接种孢子。
对所得到的接种孢子优良性的检测方法，所述检测方法为将得到的蜜环菌种，在室内1月上旬培养好菌材，在3月上旬室外栽培天麻，当年10月挖取天麻，并测定天麻产量，天麻产量提高30%。
上述的实施例仅为本发明的优选技术方案，而不应视为对于本发明的限制，本申请中的实施例及实施例中的特征在不冲突的情况下，可以相互任意组合。本发明的保护范围应以权利要求记载的技术方案，包括权利要求记载的技术方案中技术特征的等同替换方案为保护范围。即在此范围内的等同替换改进，也在本发明的保护范围之内。

Claims (7)

1.一种用于蜜环菌孢子分离、接种、培养的培养基，其特征在于：所述培养基包括按重量份的以下组分：
马铃薯150-220份，蔗糖15-25份，琼脂15-25份，水1000份，固体基质150-220份；
所述固体基质为小麦或大麦或燕麦或黑麦或玉米或蚕豆或绿豆或赤豆或黑豆或薏米或高粱或黑米或荞麦或其组合。
2.根据权利要求1所述的培养基，其特征在于：所述培养基包括按重量份的以下组分：
马铃薯180-210份，蔗糖18-22份，琼脂18-22份，水1000份，固体基质180-200份。
3.根据权利要求1或2所述的培养基，其特征在于：所述培养基为斜面培养基。
4.采用权利要求1或2所述的培养基进行蜜环菌孢子的分离、接种、培养的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
1）将固体基质在水中浸泡，得到物料1；
2）将培养基组分马铃薯切片沸水煮15分钟过滤，过滤液、蔗糖、琼脂溶解于水中，分装至三角瓶中，得到基础培养基；
3）将物料1加入所述步骤2）中的基础培养基中，封口、灭菌、冷却得到用于蜜环菌孢子分离、培养的培养基；
4）从蜜环菌子实体上收集蜜环菌孢子，挑取蜜环菌孢子接种在所述步骤3）的培养基上进行培养，并剔除感染杂菌的接种瓶；所述步骤4）接种的蜜环菌孢子收集方法为：
蜜环菌子实体菌衣开裂25-30h，菌盖边缘成铜罗边时，紧靠菌褶部位剪去菌柄，将菌盖放在已消毒的滤纸上，菌盖上面盖上一张滤纸，再在上面盖一张干净薄膜；
25-30 h后，蜜环菌孢子大量弹射在滤纸上，得到接种孢子；
完成孢子的分离、接种、培养，
所述方法中不需要转管操作。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：所述步骤1）固体基质在水中浸泡浸泡时间为20-30 h。
6.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：所述步骤4）蜜环菌孢子培养温度为20-22℃，培养时间为10-15天。
7.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：还包括对所得到的接种孢子优良性的检测方法，所述检测方法为将得到的蜜环菌种，在室内1月上旬培养好菌材，在3月上旬室外栽培天麻，当年10月挖取天麻，并测定天麻产量。
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