CN109661972A

CN109661972A - 一种耐高温香菇的选育方法

Info

Publication number: CN109661972A
Application number: CN201910111393.6A
Authority: CN
Inventors: 黄震
Original assignee: Shaanxi Jinxi Biotechnology Development Co Ltd
Current assignee: Shaanxi Jinxi Biotechnology Development Co Ltd
Priority date: 2019-02-12
Filing date: 2019-02-12
Publication date: 2019-04-23
Anticipated expiration: 2039-02-12
Also published as: CN109661972B

Abstract

本发明公开了一种耐高温香菇的选育方法，具体按照以下步骤实施：步骤1：亲本选择；步骤2：配制斜面培养基步骤3：孢子分离；步骤4：菌株培养；步骤5：筛选；对步骤4的菌株首先在室内按菌丝体的标准要求，通过培养特性观察、菌丝生长速度测量和综合评价，优选出表现较好菌丝粗壮、浓白、生长匀称、边缘整齐、抗杂能力强、表现良好的香菇菌株若干个；再将入选的品种在材积量、点种量以及栽培环境相同的条件下进行比较试验，选择出遗传稳定性高、产量高和具有优良商品性状的菌株；即为耐高温香菇。本发明选育了一种适合气温高于35℃时仍能正常出菇、生长的耐高温香菇品种，填补了夏季出菇少、不出菇的市场空白。

Description

一种耐高温香菇的选育方法

技术领域

本发明属于食用菌培育技术领域，具体涉及一种耐高温香菇的选育方法。

背景技术

袋料香菇栽培是我国上世纪80年代兴起的香菇生产新技术。该技术应用工农业生产的废料或下脚料代替传统的段木栽培香菇，具有原料来源广、产量高、周期短、经济效益好等特点。随着传统香菇生产所需的树木资源日益短缺和维护生态平衡的需要，香袋料栽培面积不断扩大。目前，我国袋料生产的香菇已占总产量的80％，为提高我国香菇产量起了重大的作用。

近年来，受全球气候变暖的影响，特别是夏季高温给袋料香菇栽培带来了新的挑战。每年7-8月份，高温对全国各大香菇产区造成很大的影响：病虫害严重，香菇产量下降，市场供应量减少等；给菇农造成很大的经济损失。因此，选育袋料香菇高温品种具有十分重要的意义。

发明内容

本发明的目的是提供一种耐高温香菇的选育方法，填补了高温香菇的市场空白。

本发明所采用的技术方案是，一种耐高温香菇的选育方法，具体按照以下步骤实施：

步骤1：亲本选择；日间最高气温达40℃时，采集若干个不同生态区域发育健壮、无病虫害、即将开伞的野生香菇标本，并除去附着在菇体表面的杂物；

步骤2：配制斜面培养基；配制CPDA培养基，灭菌制斜面；取若干个试管a或培养皿a，装入10～15ml的CPDA培养基；其中，试管a或培养皿a的数量与香菇标本数量一致；

步骤3：孢子分离；切去步骤1中每个野生香菇标本的菌柄基部，用0.1％～0.2％的升汞溶液或75％的酒精将野生香菇标本的子实体表面消毒1～2分钟；然后置于无菌水中漂洗，漂洗后用无菌纱布吸干子实体表面的水分及药液；将子实体进行固定，并在每个子实体下方放置一个培养皿b，静置1～2天；待菌褶上的孢子大量散落到培养皿b内，形成一层粉末状孢子时；为每个培养皿b中注入3～5ml无菌水，轻轻搅动使孢子均匀地悬浮于水上；

步骤4：菌株培养；用注射器吸取步骤3中培养皿b中沉于底部的饱满孢子，注1～2滴悬液于步骤2中的试管a或培养皿a，并使其均匀地分布于培养基表面；进行菌株培养；其中，每个标本使用不同的注射器并注于不同的试管a或培养皿a；

步骤5：筛选；对步骤4的菌株首先在室内按菌丝体的标准要求，通过培养特性观察、菌丝生长速度测量和综合评价，优选出表现较好菌丝粗壮、浓白、生长匀称、边缘整齐、抗杂能力强、表现良好的香菇菌株若干个；再将入选的品种在材积量、点种量以及栽培环境相同的条件下进行比较试验，选择出遗传稳定性高、产量高和具有优良商品性状的菌株；即为耐高温香菇。

本发明的特点还在于：

步骤2中，斜面培养基包括培养料及水；培养料由马铃薯、葡萄糖、KH₂PO₄、MgSO₄·7H₂O、VB₁组成。

马铃薯、葡萄糖、KH₂PO₄、MgSO₄·7H₂O、VB₁的质量比依次为：90％±5％:9％±3％:0.9％±0.3％:0.22％±0.1％:0.004％±0.002％；培养料与水的质量比为4.5±0.5:1。

马铃薯、葡萄糖、KH₂PO₄、MgSO₄·7H₂O、VB₁、水的质量比依次为：200:20:2:0.5:0.01:1000。

本发明的有益效果是：选育了一种适合气温高于35℃时仍能正常出菇、生长的耐高温香菇品种，填补了夏季出菇少、不出菇的市场空白。

具体实施方式

下面结合具体实施方式对本发明进行详细说明。

本发明一种耐高温香菇的选育方法，具体按照以下步骤实施：

步骤2：配制斜面培养基；配制CPDA培养基，灭菌制斜面；取若干个试管a或培养皿a，装入10～15ml的CPDA培养基；其中，试管a或培养皿a的数量与香菇标本数量一致；其中，斜面培养基包括培养料及水；培养料由马铃薯、葡萄糖、KH₂PO₄、MgSO₄·7H₂O、VB₁组成；马铃薯、葡萄糖、KH₂PO₄、MgSO₄·7H₂O、VB₁的质量比依次为：90％±5％:9％±3％:0.9％±0.3％:0.22％±0.1％:0.004％±0.002％；培养料与水的质量比为4.5±0.5:1。

步骤5：筛选；对步骤4的菌株首先在室内按菌丝体的标准要求，通过培养特性观察、菌丝生长速度测量和综合评价，优选出表现较好菌丝粗壮、浓白、生长匀称、边缘整齐、抗杂能力强、表现良好的香菇菌株若干个；再将入选的品种在材积量、点种量以及栽培环境相同的条件下进行比较试验，选择出遗传稳定性高、产量高和具有优良商品性状的菌株；

步骤6：驯化；对步骤5选出的菌株进行驯化；24℃开始以0.5℃为阶梯对本菌株开始高温驯化，不断提高温度，选用最高温度下，菌丝仍然可以正常萌发生长的菌种，即为耐高温香菇菌株。

实施例

步骤1：亲本选择

2011年7月上旬，西乡县已进入高温期，日间最高气温达40℃。课题组先后在高川、五里坝、茶镇等乡镇的不同生态类型自然环境采集野生香菇标本8个。

步骤2：配制斜面培养基

配制CPDA培养基，灭菌制斜面，斜面培养基包括培养料及水；培养料由马铃薯、葡萄糖、KH₂PO₄、MgSO₄·7H₂O、VB₁组成；马铃薯、葡萄糖、KH₂PO₄、MgSO₄·7H₂O、VB₁的质量比依次为：90％±5％:9％±3％:0.9％±0.3％:0.22％±0.1％:0.004％±0.002％；培养料与水的质量比为4.5±0.5:1。

取若干个试管a或培养皿a，装入10～15ml的CPDA培养基；其中，试管a或培养皿a的数量与香菇标本数量一致；

步骤3：孢子分离

切去步骤1中每个野生香菇标本的菌柄基部，用0.1％～0.2％的升汞溶液或75％的酒精将野生香菇标本的子实体表面消毒1～2分钟；然后置于无菌水中漂洗，漂洗后用无菌纱布吸干子实体表面的水分及药液；将子实体进行固定，并在每个子实体下方放置一个培养皿b，静置1～2天；待菌褶上的孢子大量散落到培养皿b内，形成一层粉末状孢子时；为每个培养皿b中注入3～5ml无菌水，轻轻搅动使孢子均匀地悬浮于水上；

步骤4：菌株培养

用注射器吸取步骤3中培养皿b中沉于底部的饱满孢子，注1～2滴悬液于步骤2中的试管a或培养皿a，并使其均匀地分布于培养基表面；进行菌株培养；其中，每个标本使用不同的注射器并注于不同的试管a或培养皿a；

从高川、五里坝、茶镇采集的8个标本中分离出5个菌株，纯化后编码，编号是：分离1号、分离2号、分离3号、分离4号、分离5号；

步骤5：筛选

对步骤4的菌株首先在室内按菌丝体的标准要求，通过培养特性观察、菌丝生长速度测量和综合评价，优选出表现较好菌丝粗壮、浓白、生长匀称、边缘整齐、抗杂能力强、表现良好的香菇菌株若干个；再将入选的品种在材积量、点种量以及栽培环境相同的条件下进行比较试验，选择出遗传稳定性高、产量高和具有优良商品性状的菌株；

筛选的具体过程如下：

(一)系统选育

生物学性状及产量试验采用袋栽方式，栽培培养料配方：阔叶木屑78.0％±8％、麦麸16.0％±8％、蔗糖1.0％±0.5％、石膏l.0％±0.5％、石灰1.0％±0.5％、豆饼粉1.5％±0.5％、玉米粉1.5％±0.5％；上述质量百分比之和为100％；加水至手握料时指缝有水珠而不下滴，即含水量58±5％；得到香菇培养基；

2011年课题组从华中农大食用菌研究所、福建三明真菌研究所引进高温型袋料香菇品种武香1号、南山1号两个高温型袋料香菇优良品种，与分离获得的5个菌株进行品种比较试验。以引进、分离获得的7个香菇菌株作为优良品种选育的基本材料。

采用袋栽方式，每袋(规格：17cm×33cm的聚乙烯袋)，装入的培养料为袋高的80％，常压灭菌，冷却后接种。试验采用随机区组设计，每一个品种为一个处理，每个处理10袋，设3次重复，观察记载不同品种菌丝生长及出菇产量情况。

通过品种比较试验，以分离2号菌株的菌丝生长速度最快，平均长速为0.313cm/d。同时，武香1号、南山1号及分离2号三个菌株可以在30℃以上正常出菇，而且分离2号最高出菇温度可达40℃。其中分离2号的转色期最早，南山1号、分离2号的出菇期最早。从产量上来看，分离2号的产量最高，达到0.975kg/袋，生物转化率达到88.64％。达到香菇新品种选育目标，见表1。

表1不同品种菌丝生长及出菇产量比较

经多次系统选育，通过测定菌丝生长速度、菌龄、出菇温度范围等指标，从5个供试菌种中筛选出可以在30℃以上正常出菇，且菇形好，产量高，抗逆性强的分离2号品。该菌株菌龄期60天以上，培养温度降低菌龄延长，属高温型早熟品系。

(二)栽培试验

以菌种驯化过程中表现良好的分离2号为试验材料，汉中目前夏季主栽品种武香1号、南山1号作为对照进行栽培试验，进行产量、质量比较试验。

采用袋栽方式，栽培培养料配方：木屑82％±8％、麸皮或米糠12％±8％、豆粕3％±1％、白糖1％±0.5％、磷肥1％±0.5％、石膏1％±0.5％，含水量(58±5％)。每袋(规格：17㎝×33㎝的聚乙烯袋)装入的培养料为袋高的80％常压灭菌，冷却后接种。试验采用随机区组设计，分别采用覆沙、斜靠、架式三种出菇方式。每一个品种为一个处理，每个处理200袋，设3次重复，观察记载不同品种的子实体性状、产量及生物转化率，同时观察记载不同出菇方式的子实体性状、产量及生物转化率，为了更为详细地记录每一茬出菇的产量与质量，分别对每一茬出菇的不同品种及不同出菇方式进行详细的记录，最后进行汇总，见表2。

表2不同品种及出菇方式的农艺性状及产量比较

由上表数据可知，从出菇方式的性状来说，覆沙栽培的性状最好，其次是斜靠栽培，架式栽培的性状最差；从出菇方式的产量来说，斜靠栽培产量最高，覆沙栽培其次，架式栽培产量最低；从品种的性状来说，分离2号的性状最好，其次是武香1号，南山1号的性状最差；从品种的产量来说，分离2号的产量最高，南山1号其次，武香1号产量最低。

根据出菇季节各试验示范点的调查情况和示范户反馈的意见，分离2号与武香1号、南山1号比较，在菌丝生长速度、转色时间、菇型及产量等方面差异较小，但分离2号菌株出菇温度范围更广，在7月20日至8月20日日间最高气温达到40℃的条件下，本县范围内其它香菇品种已不能出菇，分离2号仍能正常出菇，是夏季袋料香菇中表现较好的品种之一。

袋栽的具体过程如下：

步骤a，拌料

照以下质量百分比称取各原料：木屑82％±8％、麸皮或米糠12％±8％、豆粕3％±1％、白糖1％±1％、磷肥1％±1％；加水至手握料时指缝有水珠而不下滴，即含水量58±5％；再用石膏将pH调节至4.4～6.6，得到培养基；

步骤b：装袋

将步骤a得到的培养基装入17cm×33cm的聚丙烯塑料袋；装入量为袋高的80％时用力震动，使料的松紧一致压平表面，料的高度为袋高的80％，得到培养基袋；

步骤c：灭菌

对步骤b得到的培养基袋进行灭菌；高压蒸汽灭菌或者常压蒸汽灭菌；高压蒸汽灭菌条件为，压力1.5kgf/cm²，温度126℃，时间3～3.5h；常压蒸汽灭菌条件为，时间8～10h；得到灭菌后的培养基袋；

步骤d：接种

待步骤c得到的灭菌后的培养基袋冷却至24℃以下时移入接种室或无菌室内，接入栽培种，每袋装入5～10g，得到菌袋；放入培养室培养；培养温度22～28℃，湿度50～60％；60d菌丝接口长满全袋；培养期间不宜翻动；

步骤e：开孔

待菌丝长满菌袋移入栽培室，进行开孔栽培；开孔前，用0.1％高锰酸钾溶液对香菇袋表面进行清洗，然后去掉菌袋的棉塞、塑料环并除去菌袋内的老菌块；用绳子扎口；在菌袋表面均匀开孔，孔的直径1cm，孔与孔之间的距离5～6cm，每个菌袋开孔10±2个孔；开孔时注意不要损伤菌丝体；开孔后将菌袋置于地表下10cm深处，然后覆沙；每天进行数次喷雾，保持菇棚内的空气湿度为85％-95％，并加强通风透光；开孔后在15～20℃的环境下培养7～10d即可出菇；

步骤f：出菇

子实体形成温度范围为12～38℃，最适宜温度18～28℃，子实体分化时需5℃以上的昼夜温差刺激；

步骤g：出菇后管理

出菇后，随着子实体增大，需水量增多，每天可喷水2～3次，保持菇棚内空气湿度为90％-95％，并加强通气；

还包括合理疏蕾：第一茬菇正值5月下旬至6月，此时气温较适，菇蕾丛生集中涌现，对菇蕾密集的香菇袋，保留蕾体饱满、圆正、柄短且分布合理的6～8朵，其余菇蕾阻止其发育；

7～8月高温期间以养菌为主；每天结合采菇，注意观察；发现病虫害或萎蕾、烂菇，应及时摘除，并把烂根铲除；菌袋表面铲除烂根的部位用石灰水擦净，防止污染蔓延；

7～8月，日间最高气温可达40℃，用洁净的河沙覆盖菌袋进行栽培；注意采菇前进行清洗。

步骤h：采收

子实体在香菇袋位置不同，成熟不一，对香菇进行分批采收；

夏菇生长速度较快，从菇蕾到成菇只需1～2d，气温高时只需半天；需每天采收；盛发期早晚各一次；及时采收，避免香菇品质下降；一茬香菇采收后停止喷水，延长通风时间增加菌丝活力；待采菇部位重新长出白色菌丝时再催蕾。

步骤i：补水

采收后2～3d内不喷水，让菌丝休养生息；2～3d后给菌袋在覆沙层灌一次大水浸泡10-12小时，然后排放水，一周后可再次形成子实体，进行二次采收。

Claims

1.一种耐高温香菇的选育方法，其特征在于，具体按照以下步骤实施：

2.如权利要求1所述的耐高温香菇的选育方法，其特征在于，所述步骤2中，斜面培养基包括培养料及水；培养料由马铃薯、葡萄糖、KH₂PO₄、MgSO₄·7H₂O、VB₁组成。

3.如权利要求2所述的耐高温香菇的选育方法，其特征在于，所述马铃薯、葡萄糖、KH₂PO₄、MgSO₄·7H₂O、VB₁的质量比依次为：90％±5％:9％±3％:0.9％±0.3％:0.22％±0.1％:0.004％±0.002％；培养料与水的质量比为4.5±0.5:1。

4.如权利要求2所述的耐高温香菇的选育方法，其特征在于，所述马铃薯、葡萄糖、KH₂PO₄、MgSO₄·7H₂O、VB₁、水的质量比依次为：200:20:2:0.5:0.01:1000。