CN105418506A - 乙酰苄胺哌嗪类衍生物及其作为脑神经保护剂的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种乙酰苄胺哌嗪类衍生物及其作为脑神经保护剂的应用，药理实验表明，本发明化合物不仅在体外表现出明显的对抗谷氨酸诱发的神经元兴奋毒性的作用，小鼠体内有显著耐缺氧活性，herg试验亦表明本发明化合物不具有心脏毒性风险。因此，本发明化合物具有活性高、副作用小、成药性好的优点，所述化合物及其药用制剂对于治疗脑神经损伤类疾病，如脑中风及相关疾病有很好的疗效，且不具有心脏毒性风险。所述乙酰苄胺哌嗪类衍生物，为具有如下化学结构通式化合物的游离碱或盐：
Description
技术领域
本发明涉及一类乙酰苄胺哌嗪类衍生物，以及该化合物作为脑神经保护剂的用途。
背景技术
脑卒中(尤其缺血性脑卒中)是一种高发病率、高死亡率、高致残率，已经严重威胁到广大人民群众身体健康的常见疾病。脑卒中是目前人类第三大死因，其死亡率仅次于癌症和心肌梗塞。据世界卫生组织统计，全球脑卒中死亡率：约460万人/年，我国：约150万人/年。估计今后十年，我国将有1,500万人面临中风死亡的威胁。脑卒中亦是导致长期严重丧失自理能力的第一位因素，我国现约有500万中风幸存者，其中75％有不同程度的残废，重症致残者占40％以上，丧失工作和生活自理能力。5年内复发率为41％，患者需要长期治疗，对病人、亲属和社会都是沉重的负担，亦将成为严重的社会问题。对于缺血性卒中，临床上缺乏安全有效，针对性强的治疗药物。目前使用的抗脑卒中的药物主要为溶栓和抗凝血剂、血管扩张剂、自由基清除剂、脑功能促进剂及一些活血化瘀中药组方等，如文献：MarshJD,KeyrouzSG.Strokepreventionandtreatment[J].JAmCollCardiol,2010,56(9):683-691.；FisherM,BastanB.Treatingacuteischemicstroke[J].CurrOpinDrugDiscovDevel,2008,11(5):626-632.；成俊义.急性缺血性脑卒中药物治疗[J].天津药学,2009,2l(4):50-52.报道的技术；
常用的为溶栓疗法，即在中风脑梗塞后6小时内用溶栓药，进行溶栓治疗。常用的溶栓药物有链激酶、尿激酶、蛇毒抗栓酶、人组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)、胰激肽释放酶，但由于此类药物的安全性和有效性因个体差异存在不同争议，且某些上述药物如链激酶、尿激酶有诱发出血，使缺血加重，病情恶化造成早期死亡增加等危险性，使患者望而生畏。临床医生在未确证患者脑卒中类型，严重程度及预后情况前提下，不敢冒然用药。
至于其它配合治疗的扩管扩容疗法、降粘度疗法、抗血小板聚集疗法以及中药等，如低分子右旋醣酐、复方丹参、维脑路通、脑益嗪、阿司匹林、人参再造丸、消栓再造丸、华佗再造丸等药物不能代替溶栓治疗，仅起到缓解病情，减轻症状的作用。
近年来上市的化学合成药物、脑神经保护剂依达拉奉(商品名：必存)和丁苯酞(商品名：恩必普)对急性脑梗死具有较好的神经保护作用，对脑神经保护剂的研究起到了积极推动作用，但仍然不能满足临床需要。
国外抗缺血性脑卒中新药的研究尚处于各期临床研究阶段，作用靶点主要包括：氨基酸释放抑制剂；NMDA受体拮抗剂；AMPA拮抗剂；钙和钠通道阻滞剂；抗氧化剂；自由基抑制剂；r-氨基丁酸激动剂；干扰NO合成途径；神经膜稳定剂；钾通道阻滞剂；胺拮抗剂；阿片拮抗剂；蛋白酶抑制剂等方面，但能够成功上市的例子寥寥无几。
大量药物在临床前研究中具有很好的活性，进入临床后却因疗效不确切或毒副作用太强而被终止临床(如：selfotel、aptiganel、eliprodil、licostinel、gavestinel、lanicemine、UK-240455、SM-31900等)。分析其可能的原因有以下几个方面[21,22]：(1)进入脑内的药物浓度未达到治疗浓度(2)治疗时间窗较窄(3)临床实验方案不完善(4)出现严重的毒副反应，如精神病样的副反应、运动障碍、认知障碍等(5)在活性、毒性方面存在人和动物的种属差异。
因此，临床医生及患者仍迫切需要新作用机制、疗效确切、安全可靠的既有抗脑梗塞治疗作用、又能保护受损神经元，尤其是减少中风脑组织损伤，改善卒中后果的脑神经保护剂问世。
本发明人在专利CN1381448(申请号0211614.8)中公开了一种芳烷甲酰烷基哌嗪衍生物具有较好脑神经保护及抗脑卒中活性，其中最优选化合物为N1-苯甲酰甲基-N4-苄胺基甲酰甲基哌嗪(IV-23，结构式见式1)。后经深入研究发现，IV-23在人体内具有潜在的心脏毒性风险，不适合作为药物进行临床开发。同样专利CN1381448(申请号0211614.8)中公开的系列芳烷甲酰烷基哌嗪衍生物均具有相似风险。
本发明人经研究发现化合物IV-23在人体代谢后主要产生羟基代谢产物M1(结构式见式2)，hERG钾通道抑制试验显示：M1对hERG钾通道抑制的IC50为0.43μM，IV-23对hERG钾通道抑制的IC50为8.64μM；代谢产物的心脏毒性为原型药物的20倍，属于导致心脏毒性高危险化合物。
因此，本发明人认为：式2中的“苯乙醇”片段是导致心脏毒性的主要原因，如对IV-23结构中的“芳烷甲酰甲基”结构片段进行改造，则有可能避免“苯乙醇”片段类毒性代谢物的产生，从而避免此类化合物存在的心脏毒性，得到活性高、心脏毒性副作用小的化合物。
发明内容
本发明需要解决的技术问题是公开一类乙酰苄胺哌嗪类衍生物及其作为脑神经保护剂的应用，以克服现有抗脑卒中药物存在的活性低、难以透过血脑屏障、心脏毒性大等缺陷；
本发明所述的乙酰苄胺哌嗪类衍生物，为具有如下化学结构通式化合物的游离碱或盐：
所述的盐为盐酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐中的一种。
其中：
Ar1代表：或中的一种；
X1代表CH或N；
X2代表N、CH其中一种；或者不含X2基团；
m,n为0或1，且m＝n；
R1代表H或1-3个碳原子的烷基；
R2,R3代表氢、甲氧基、F、Cl中的一种；
Y代表C或N；
Z代表CH2、O或NH
优选化合物包括：
V-1N-苄基-2-(4-{2-[(5-甲基-1,3,4-噻二唑-2-基)氨基]-2-羰乙基}哌嗪-1-基)乙酰胺
V-2[4-(2-苄基氨基-2-羰乙基)哌嗪-1-基]-N-苯基丙酰胺
V-32-[4-(2-苄基氨基-2-羰乙基)哌嗪-1-基]-N-(4-甲氧基苯基)丙酰胺；
V-42-[4-(2-苄基氨基-2-羰乙基)哌嗪-1-基]-N-(4-甲基苯基)丙酰胺；
V-5N-苄基-2-{4-[2-(4-氟苯基氨基)-2-羰乙基]哌嗪-1-基}乙酰胺；
V-6N-苄基-2-{4-[(苯基磺酰基)甲基]哌嗪-1-基}乙酰胺；
V-7N-苄基-2-{4-[(2,4-二氧代-1,3-二氮杂螺[4.4]壬烷-3-基)甲基]哌嗪-1-基}乙酰胺；
V-8N-苄基-2-{4-[(2-苯并唑啉酮-1-基)甲基]哌嗪-1-基}乙酰胺；
V-9N-苄基-2-(4-{[2-氧代苯并[d]恶唑-3(2H)-基]甲基}哌嗪-1-基)乙酰胺；
V-10N-苄基-2-{4-[(2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)甲基]哌嗪-1-基}乙酰胺；
V-11N-苄基-2-[4-(5-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑-3-基)哌嗪-1-基]乙酰胺；
V-12N-苄基-2-{4-[(5-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑-3-基)甲基]哌嗪-1-基}乙酰胺；
V-13N-苄基-2-{4-[2-氧代-2-(吡啶-4-基氨基)乙基]哌嗪-1-基}乙酰胺；
V-14N-苄基-2-{4-[(6-氟-2-吲哚酮-1-基)甲基]哌嗪-1-基}乙酰胺；
V-15N-苄基-2-{4-[3-(5-甲基-1,3,4-噻二唑-2-基)脲基]哌啶-1-基}乙酰胺；
V-16N-苄基-2-{4-[(6-甲氧基-2-吲哚酮-1-基)甲基]哌嗪-1-基}乙酰胺；
V-17N-苄基-2-{4-[(5-氟-2-吲哚酮-1-基)甲基]哌嗪-1-基}乙酰胺；
V-18N-苄基-2-{4-[(5-甲氧基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)甲基]哌嗪-1-基}乙酰胺；
V-19N-苄基-2-{4-[(5-氟-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)甲基]哌嗪-1-基}乙酰胺；
最优选化合物为：V-15N-苄基-2-{4-[3-(5-甲基-1,3,4-噻二唑-2-基)脲基]哌啶-1-基}乙酰胺；
优选化合物结构见表1.
表1化合物结构
本发明的化合物可采用以下方法进行合成：
方法1：化合物V-1～V-5，V-13的合成
Ar1为：苯环、取代苯环、其中之一
R1为H或CH3
a:HCl,EtOH；b:K2CO3,KI,Acetone；c：K2CO3,KI,Acetone；d：HCl/EA
以氯乙酰苄胺I为原料，与哌嗪，浓盐酸进行亲核取代反应生成中间体II；氯乙酰氯或2-氯丙酰氯与相应的胺(Ar1-NH2)反应生成中间体III，中间体II与中间体III发生亲核取代反应，再经成盐后生成V-1～V-5，V-13。
方法2：化合物V-6～V-10，V-14，V-16～V-19的合成
Ar1代表：其中的一种；
R4为OH或H
f:HCHO，EtOH；g：HCl，EtOH或EtOAc
中间体II与甲醛、相应的Ar1R4反应，再经成盐后生成V-6～V-10，V-14，V-16～V-19。
方法3：化合物V-11、V-12的合成
中间体II与丙二酸单乙酯或4-氯乙酰乙酸乙酯反应生成相应的中间体，再与苯胺发生缩合反应，最后成盐酸盐生成V-11～V-12。
方法4：V-15的合成，采用单独的合成方法
上述制备过程中所涉及的原料均可采用商业化产品；
发明人发现，本发明公开的化合物具有神经细胞保护活性及抗脑缺氧活性，可用于制备缺血性脑梗塞急性治疗剂和预防及治疗缺血性脑卒中的脑神经保护剂。
本发明还涉及一种组合物，包括治疗有效量的所述化合物或其盐和医药学上可接受的载体，所述的载体如香料、甜味剂、液体或固体填料或稀释剂等常用载体物质，并采用本领域公知的方法，制成常用的药用制剂，如片剂、胶囊、粉剂、糖浆、液剂、悬浮剂或针剂，制剂通常含有重量百分比为0.1％-99.5％的有效成分，较佳重量含量为5-50％；
本发明所述的化合物临床上可以通过口服或静脉注射方式对哺乳动物(包括人)进行给药，其中尤以静脉注射方式最佳。用药剂量为每日1～100mg\kg(po)或1～50mg\kg(iv)，最佳剂量视个体而定，通常开始时剂量较小，然后逐渐增加用量。
本发明的特点在于：为克服专利CN1381448(申请号0211614.8)化合物对心脏毒性作用，改变专利CN1381448化合物的苯乙酮片段，得到整体结构不同的新化合物。
药理实验表明，本发明化合物不仅在体外表现出明显的对抗谷氨酸诱发的神经元兴奋毒性的作用，小鼠体内有显著耐缺氧活性，herg试验亦表明本发明化合物不具有心脏毒性风险。因此，本发明化合物具有活性高、副作用小、成药性好的优点、较专利CN1381448公开的化合物具有新颖性、创造性及显著的科学进步。
本发明的优点在于，所述化合物及其药用制剂对于治疗脑神经损伤类疾病，如脑中风及相关疾病有很好的疗效，且不具有心脏毒性风险。
具体实施方式
结合实例进一步阐明本发明的内容，但本发明的保护范围并不局限于这些实例。本发明所述的百分比除特别注明外，均为质量百分比。
通法一：N-乙酰苄胺哌嗪(II)的合成
20-25℃下，将无水哌嗪(国药集团化学试剂公司售)43g(0.5mol)置于350ml乙醇溶液中搅匀溶解，向其中滴加37％的盐酸(0.5mol)后，补加50ml水，加热至50-55℃助溶。1.5h后，向其中加入氯乙酰苄胺46g(0.25mol)，在该温度下继续反应8h后，停止加热，降至室温。减压过滤除掉未反应的哌嗪盐酸盐。滤液减压浓缩后加水460ml，用二氯甲烷230ml连续萃取2次，舍弃有机相。水相用饱和Na2CO3水溶液调节PH至9-10后，用二氯甲烷230ml连续萃取3次，合并有机相，用饱和NaCl溶液洗涤后再用无水Mg2SO4干燥。减压浓缩除掉有机相，得N-乙酰苄胺哌嗪(II)的白色蜡状固体22g，收率46％。
通法二：N-芳基氯乙酰胺(III)的合成
室温下，将芳酰胺(国药集团化学试剂公司售)(20mmol)置于乙腈25ml中，依次加入氯乙酰氯或2-氯丙酰氯(24mmol)，三乙胺(30mmol)，室温下反应8h，减压蒸馏除去溶剂及未反应的氯乙酰氯或2-氯丙酰氯和三乙胺，得到N-芳基氯乙酰胺(III)的粗品，用无水乙醇进行重结晶，得到N-芳基氯乙酰胺(III)，收率60-76％。
实施例1
N-苄基-2-(4-{2-[(5-甲基-1,3,4-噻二唑-2-基)氨基]-2-羰乙基}哌嗪-1-基)乙酰胺(V-1)及其盐酸盐
将2-氨基-5-甲基-3,4-二氮噻吩(20mmol)，氯乙酰氯(24mmol)，三乙胺(30mmol)，置于乙腈25ml中，室温下反应8h，按通法二的操作处理，得N-(5-甲基-3,4-二氮噻吩)-2-氯乙酰胺，收率67％。
将上述得到的N-(5-甲基-3,4-二氮噻吩)-2-氯乙酰胺(12.8mmol)，以及N-乙酰苄胺哌嗪(II)中间体(19.6mmol)，投入30ml丙酮溶液中，加入K2CO3(19.6mmol)，KI(6.4mmol)，室温下反应8h。过滤除去不溶物，滤液减压浓缩得到粗品。粗品经硅胶柱层析得到游离碱N-苄基-2-(4-{2-[(5-甲基-1,3,4-噻二唑-2-基)氨基]-2-羰乙基}哌嗪-1-基)乙酰胺(V-1)，3.9g，收率78.31％
将游离碱加乙酸乙酯10ml加热溶解，用HCl\EtOAc(5N)调PH＝2，过滤析出的固体，得N-苄基-2-(4-{2-[(5-甲基-1,3,4-噻二唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}哌嗪-1-基)乙酰胺盐酸盐，成盐收率88.3％。
1H-NMR(DMSO-d6):δ2.61(s,3H,-CH3),3.56-3.37(m,8H,A-H),4.03(m,2H,-CH2-),4.11(s,2H,-CH2-),4.33(s,2H,-CH2-),7.47-7.21(m,5H,Ar-H),9.07(m,2H,-CONH-)
ESI-MS[M+H]+：m/z389.2
实施例2
[4-(2-苄基氨基-2-羰乙基)哌嗪-1-基]-N-苯基丙酰胺(V-2)及其氢溴酸盐
将苯胺(20mmol)，2-氯丙酰氯(24mmol)，三乙胺(30mmol)，置于乙腈25ml中，室温下反应8h，按通法二的操作处理，得N-苯胺-2-氯丙酰胺，收率66％。
将上述得到的N-苯胺-2-氯丙酰胺(12.8mmol)，以及N-乙酰苄胺哌嗪(II)中间体(19.6mmol)，投入30ml丙酮溶液中，加入K2CO3(19.6mmol)，KI(6.4mmol)，室温下反应8h。过滤除去不溶物，滤液减压浓缩得到粗品。粗品经硅胶柱层析得到游离碱[4-(2-苄基氨基-2-羰乙基)哌嗪-1-基]-N-苯基丙酰胺(V-2),4.0g，收率81.87％。
将游离碱加乙醇8ml加热溶解，用40％氢溴酸水溶液调PH＝2，过滤析出的固体，得目标化合物{4-[2-(苄基氨基)-2-氧代乙基]哌嗪-1-基}-N-苯基丙酰胺氢溴酸盐，收率60％。
1H-NMR(DMSO-d6):δ1.70-1.68(d,3H,-CH3),3.37-3.66(m,8H,A-H),4.06(s,2H,-CH2-),4.18(q,1H,-CH-),4.67(s,2H,-CH2-),7.66-7.64(d,2H,Ar-H),7.37-7.34(m,2H,Ar-H,),7.20-7.18(m,1H,Ar-H),7.64(d,2H,Ar-H),7.36(m,2H,Ar-H,),7.20(m,1H,Ar-H)
ESI-MS[M+H]+：m/z381.2
实施例3
2-[4-(2-苄基氨基-2-羰乙基)哌嗪-1-基]-N-(4-甲氧基苯基)丙酰胺(V-3)及其硫酸盐；
将对甲氧基苯胺(20mmol)，2-氯丙酰氯(24mmol)，三乙胺(30mmol)，置于乙腈25ml中，室温下反应8h，按通法二的操作处理，得N-对甲氧基苯胺-2-氯丙酰胺，收率64％。
将上述得到的N-对甲氧基苯胺-2-氯丙酰胺(12.8mmol)，以及N-乙酰苄胺哌嗪(II)中间体(19.6mmol)，投入30ml丙酮溶液中，加入K2CO3(19.6mmol)，KI(6.4mmol)，室温下反应8h。过滤除去不溶物，滤液减压浓缩得到粗品。粗品经硅胶柱层析得到游离碱2-[4-(2-苄基氨基-2-羰乙基)哌嗪-1-基]-N-(4-甲氧基苯基)丙酰胺(V-3)，3.4g，收率64.63％。
将游离碱加乙醇10ml加热溶解，用40％硫酸水溶液调PH＝2，过滤析出的固体，得目标化合物2-[4-(2-苄基氨基-2-羰乙基)哌嗪-1-基]-N-(4-甲氧基苯基)丙酰胺硫酸盐，收率66.3％。
ESI-MS[M+H]+：m/z411.2
实施例4
2-[4-(2-苄基氨基-2-羰乙基)哌嗪-1-基]-N-(4-甲基苯基)丙酰胺(V-4)及其盐酸盐；
将对甲基苯胺(20mmol)，2-氯丙酰氯(24mmol)，三乙胺(30mmol)，置于乙腈25ml中，室温下反应8h，按通法二的操作处理，得N-对甲基苯胺-2-氯丙酰胺，收率65％。
将上述得到的N-对甲基苯胺-2-氯丙酰胺(12.8mmol)，以及N-乙酰苄胺哌嗪(II)中间体(19.6mmol)，投入30ml丙酮溶液中，加入K2CO3(19.6mmol)，KI(6.4mmol)，室温下反应8h。过滤除去不溶物，滤液减压浓缩得到粗品。粗品经硅胶柱层析得到游离碱2-[4-(2-苄基氨基-2-羰乙基)哌嗪-1-基]-N-(4-甲基苯基)丙酰胺(V-4)，3.1g，收率61.26％。
将游离碱加乙酸乙酯10ml加热溶解，用HCl\EtOAc(5N)调PH＝2，过滤析出的固体，得目标化合物2-[4-(2-苄基氨基-2-羰乙基)哌嗪-1-基]-N-(4-甲基苯基)丙酰胺盐酸盐，收率85.1％。
ESI-MS[M+H]+：m/z395.2
实施例5
N-苄基-2-{4-[2-(4-氟苯基氨基)-2-羰乙基]哌嗪-1-基}乙酰胺(V-5)及其盐酸盐；
将对氟苯胺(20mmol)，氯乙酰氯(24mmol)，三乙胺(30mmol)，置于乙腈25ml中，室温下反应8h，按通法二的操作处理，得N-对氟苯胺-1-氯乙酰胺，收率65％。
将上述得到的N-对氟苯胺-1-氯乙酰胺(12.8mmol)，以及N-乙酰苄胺哌嗪(II)中间体(19.6mmol)，投入30ml丙酮溶液中，加入K2CO3(19.6mmol)，KI(6.4mmol)，室温下反应8h。减压过滤除去不溶物，滤液减压浓缩得到粗品。粗品经硅胶柱层析得到游离碱N-苄基-2-{4-[2-(4-氟苯基氨基)-2-羰乙基]哌嗪-1-基}乙酰胺(V-5)，3.59g，收率73.0％。
将游离碱加乙酸乙酯10ml加热溶解，用HCl\EtOAc(5N)调PH＝2，过滤析出的固体，得目标化合物N-苄基-2-{4-[2-(4-氟苯基氨基)-2-羰乙基]哌嗪-1-基}乙酰胺盐酸盐，收率84.5％。
ESI-MS[M+H]+：m/z385.2
实施例6
N-苄基-2-{4-[(苯基磺酰基)甲基]哌嗪-1-基}乙酰胺(V-6)及其盐酸盐
将通法一得到的N-乙酰苄胺哌嗪(II)中间体(19.6mmol)，甲醛醇溶液(16.3mmol)，苯基磺酸(16.3mmol)投入30ml无水乙醇中，室温下反应15h。反应液减压浓缩，得油状粗品。粗品经硅胶柱层析后得游离碱N-苄基-2-{4-[(苯基磺酰基)甲基]哌嗪-1-基}乙酰胺(V-6)，4.50g，收率71.3％。
将游离碱加乙酸乙酯10ml加热溶解，用HCl\EtOAc(5N)调PH＝2，过滤析出的固体，得目标化合物N-苄基-2-{4-[(苯基磺酰基)甲基]哌嗪-1-基}乙酰胺盐酸盐，收率80.9％。
1H-NMR(DMSO-d6):δ3.38-3.43(s,2H,-CH2-),3.43(m,4H,A-H),3.55(m,4H,A-H),4.03(s,2H,-CH2-),4.37-4.36(d,2H,-CH2-),5.32(s,2H,-CH2-),7.37-7.25(m,5H,Ar-H),7.74-7.70(t,2H,Ar-H),7.85-7.82(t,1H,Ar-H),7.99-7.96(d,2H,Ar-H),9.18(s,1H,-CONH-),10.13(br,1H,HCl)
ESI-MS[M+H]+：m/z388.2
实施例7
N-苄基-2-{4-[(2,4-二氧代-1,3-二氮杂螺[4.4]壬烷-3-基)甲基]哌嗪-1-基}乙酰胺(V-7)及其盐酸盐
将通法一得到的N-乙酰苄胺哌嗪(II)中间体(19.6mmol)，甲醛醇溶液(16.3mmol)，1,3-二氮杂螺[4.4]壬烷-2,4-二酮(16.3mmol)投入30ml无水乙醇中，室温下反应15h。反应液减压浓缩，得油状粗品。粗品经硅胶柱层析后得游离碱N-苄基-2-{4-[(2,4-二氧代-1,3-二氮杂螺[4.4]壬烷-3-基)甲基]哌嗪-1-基}乙酰胺(V-7)，5.07g，收率78.0％。
将游离碱加乙酸乙酯15ml加热溶解，用HCl\EtOAc(5N)调PH＝2，过滤析出的固体，得目标化合物N-苄基-2-{4-[(2,4-二氧代-1,3-二氮杂螺[4.4]壬烷-3-基)甲基]哌嗪-1-基}乙酰胺盐酸盐，收率81％。
1H-NMR(DMSO-d6):δ1.22-1.90(m,8H,-CH2-),3.46(s,4H,A-H),3.52(s,4H,A-H),4.02(s,2H,-CH2-),4.09(s,2H,-CH2-),4.35(s,2H,-CH2-),7.35-7.24(m,5H,Ar-H),9.15-9.13(m,2H,-CONH-)
ESI-MS[M+H]+：m/z400.2
实施例8
N-苄基-2-{4-[(2-苯并唑啉酮-1-基)甲基]哌嗪-1-基}乙酰胺(V-8)及其盐酸盐
将通法一得到的N-乙酰苄胺哌嗪(II)中间体(19.6mmol)，甲醛醇溶液(16.3mmol)，2-吲哚酮(16.3mmol)投入30ml无水乙醇中，室温下反应15h。反应液减压浓缩，得油状粗品。粗品经硅胶柱层析后得游离碱N-苄基-2-{4-[(2-苯并唑啉酮-1-基)甲基]哌嗪-1-基}乙酰胺(V-8)，4.25g，收率69.1％。
将游离碱加乙酸乙酯15ml加热溶解，用HCl\EtOAc(5N)调PH＝2，过滤析出的固体，得目标化合物N-苄基-2-{4-[(2-苯并唑啉酮-1-基)甲基]哌嗪-1-基}乙酰胺盐酸盐，收率77.3％
1H-NMR(DMSO-d6):δ2.96(s,2H,-CH2-),3.51-3.41(m,8H,A-H),3.54-3.51(s,2H,-CH2-),4.11(s,2H,-CH2-),4.41(s,2H,-CH2-),6.88-6.86(d,1H,Ar-H),6.70-6.98(d,1H,Ar-H),7.18-7.22(m,2H,Ar-H),7.24-7.14(m,5H,Ar-H)
ESI-MS[M+H]+：m/z379.2
实施例9
N-苄基-2-(4-{[2-氧代苯并[d]恶唑-3(2H)-基]甲基}哌嗪-1-基)乙酰胺(V-9)及其盐酸盐
将通法一得到的N-乙酰苄胺哌嗪(II)中间体(19.6mmol)，甲醛醇溶液(16.3mmol)，苯并[D]噁唑-2(3H)-酮(16.3mmol)投入30ml无水乙醇中，室温下反应15h。反应液减压浓缩，得油状粗品。粗品经硅胶柱层析后得游离碱N-苄基-2-(4-{[2-氧代苯并[d]恶唑-3(2H)-基]甲基}哌嗪-1-基)乙酰胺(V-9)，4.09g，收率66.0％。
将游离碱加乙酸乙酯15ml加热溶解，用HCl\EtOAc(5N)调PH＝2，过滤析出的固体，得目标化合物N-苄基-2-(4-{[2-氧代苯并[d]恶唑-3(2H)-基]甲基}哌嗪-1-基)乙酰胺盐酸盐，收率83.2％。
1H-NMR(DMSO-d6):δ8.13-7.59(m,4H,Ar-H),8.03(t,1H,-NH-),7.33(m,2H,Ar-H),7.26(dd,1H,Ar-H,J1＝2.4Hz,J2＝8.8Hz),7.23(dd,2H,Ar-H,J1＝2.4Hz,J2＝8.8Hz),4.24(d,2H,-CH2-),4.03(s,2H,-CH2-),3.39-3.29(s,2H,-CH2-),3.51-3.41(m,8H,A-H)
ESI-MS[M+H]+：m/z381.2
实施例10
N-苄基-2-{4-[(2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)甲基]哌嗪-1-基}乙酰胺(V-10)及其盐酸盐
将通法一得到的N-乙酰苄胺哌嗪(II)中间体(19.6mmol)，甲醛醇溶液(16.3mmol)，1,3-二氢苯并咪唑-2-酮(16.3mmol)投入30ml无水乙醇中，室温下反应15h。反应液减压浓缩，得油状粗品。粗品经硅胶柱层析后得游离碱N-苄基-2-{4-[(2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)甲基]哌嗪-1-基}乙酰胺(V-10)，3.65g，收率64.2％。
将游离碱加乙酸乙酯15ml加热溶解，用HCl\EtOAc(5N)调PH＝2，过滤析出的固体，得目标化合物N-苄基-2-{4-[(2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)甲基]哌嗪-1-基}乙酰胺盐酸盐，收率79.4％。
1H-NMR(DMSO-d6):δ3.37-3.41(s,2H,-CH2-),3.41(m,4H,A-H),3.49(m,4H,A-H),3.98(s,2H,-CH2-),4.38-4.36(d,2H,-CH2-),6.96-6.91(m,4H,Ar-H),7.37-7.26(m,5H,Ar-H),9.09(s,1H,-CONH-),9.97(s,1H,-CONH-),10.56(br,2H,HCl)
ESI-MS[M+H]+：m/z380.2
实施例11
N-苄基-2-[4-(5-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑-3-基)哌嗪-1-基]乙酰胺(V-11)及其盐酸盐
N1-(丙二酸乙酯基)-N4-(乙酰苄胺基)哌嗪
室温下，将HOBT.H2O(11.0mmol)，三乙胺(22.8mmol)，丙二酸单乙酯(11.0mmol)投入30ml乙腈中，搅拌均匀至完全溶解。再向其中加入EDCI(11.0mmol)，以及N-乙酰苄胺哌嗪(II)(9.1mmol)，搅拌，室温下反应16h。将反应液减压浓缩得粗品，柱层析得目标化合物N1-(丙二酸乙酯基)-N4-(乙酰苄胺基)哌嗪，收率63.45％。
V-11制备
5-10℃下，将得到的N1-(丙二酸乙酯基)-N4-(乙酰苄胺基)哌嗪(16.3mmol)溶于30ml无水乙醇中，在该温度下滴加苯肼(17.2mmol)。回流条件下反应10h，冷却至室温。将反应液减压浓缩得粗品。粗品经硅胶柱层析后得游离碱N-苄基-2-[4-(5-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑-3-基)哌嗪-1-基]乙酰胺(V-11)，3.76g，收率59.1％。
游离碱加乙酸乙酯15ml加热溶解，用HCl\EtOAc(5N)调PH＝2，过滤析出的固体，得目标化合物N-苄基-2-[4-(5-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑-3-基)哌嗪-1-基]乙酰胺盐酸盐，收率64.37％。
1H-NMR(DMSO-d6):δ8.03(t,1H,-NH-),7.94-7.19(m,5H,Ar-H),7.33-7.26(m,5H,Ar-H),4.24(d,2H,-CH2-),3.29(s,2H,-CH2-),2.79-2.37(m,8H,A-H),2.3(s,2H,-CH2-)
ESI-MS[M+H]+：m/z392.2
实施例12
N-苄基-2-{4-[(5-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑-3-基)甲基]哌嗪-1-基}乙酰胺(V-12)及其盐酸盐
N1-(乙酰乙酸乙酯)-N4-(乙酰苄胺基)哌嗪
将通法一得到的N-乙酰苄胺哌嗪(II)中间体(19.6mmol)，以及4-氯乙酰乙酸乙酯(12.8mmol)投入30ml丙酮溶液中，加入K2CO3(19.6mmol)，KI(6.4mmol)，室温下反应8h。过滤除去不溶物，滤液减压浓缩得到粗品。粗品经硅胶柱层析得到N1-(乙酰乙酸乙酯)-N4-(乙酰苄胺基)哌嗪，收率50.60％。
V-12制备
5-10℃下，将得到的N1-(乙酰乙酸乙酯)-N4-(乙酰苄胺基)哌嗪(16.3mmol)溶于30ml无水乙醇中，在该温度下滴加苯肼(17.2mmol)。回流条件下反应10h。冷却至室温。将反应液减压浓缩得粗品。粗品经硅胶柱层析后得游离碱N-苄基-2-{4-[(5-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑-3-基)甲基]哌嗪-1-基}乙酰胺(V-12)，3.60g，收率54.3％。
游离碱加乙酸乙酯15ml加热溶解，用HCl\EtOAc(5N)调PH＝2，过滤析出的固体，得目标化合物N-苄基-2-{4-[(5-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑-3-基)甲基]哌嗪-1-基}乙酰胺盐酸盐，收率78.40％。
1H-NMR(DMSO-d6):δ8.03(t,1H,-NH-),7.94-7.19(m,5H,Ar-H),7.33-7.26(m,5H,Ar-H),4.24(d,2H,-CH2-),3.29(s,2H,-CH2-),2.79-2.37(m,8H,A-H),2.68(s,2H,-CH2-),2.3(s,2H,-CH2-)
ESI-MS[M+H]+：m/z406.2
实施例13
N-苄基-2-{4-[2-氧代-2-(吡啶-4-基氨基)乙基]哌嗪-1-基}乙酰胺(V-13)及其盐酸盐
将4-吡啶胺(20mmol)，氯乙酰氯(24mmol)，三乙胺(30mmol)，置于乙腈25ml中，室温下反应8h，按通法二的操作处理，得N-(4-吡啶)-1-氯乙酰胺，收率64.3％。
将上述得到的N-(4-吡啶)-1-氯乙酰胺(12.8mmol)，以及通法一得到的N-乙酰苄胺哌嗪(II)中间体(19.6mmol)，投入30ml丙酮溶液中，加入K2CO3(19.6mmol)，KI(6.4mmol)，室温下反应8h。过滤除去不溶物，滤液减压浓缩得到粗品。粗品经硅胶柱层析得到游离碱N-苄基-2-{4-[2-氧代-2-(吡啶-4-基氨基)乙基]哌嗪-1-基}乙酰胺(V-13)，3.53g，收率58.9％。
将游离碱加乙酸乙酯15ml加热溶解，用HCl\EtOAc(5N)调PH＝2，过滤析出的固体，得目标化合物N-苄基-2-{4-[2-氧代-2-(吡啶-4-基氨基)乙基]哌嗪-1-基}乙酰胺盐酸盐，收率78.9％。
1H-NMR(DMSO-d6):δ3.44(s,8H,A-H),3.79-3.74(s,2H,-CH2-),3.99(s,2H,-CH2-),4.37(s,2H,-CH2-),4.52(s,2H,-CH2-),5.21(s,2H,-CH2CO-),6.78(s,1H,Ar-H),7.31-7.18(m,2H,Ar-H),7.38-7.28(m,5H,Ar-H),9.37(t,1H,-CONH-),10.20(s,1H,-CONH-),11.55(br,1H,HCl)
ESI-MS[M+H]+：m/z368.2
实施例14
N-苄基-2-{4-[(6-氟-2-吲哚酮-1-基)甲基]哌嗪-1-基}乙酰胺(V-14)及其盐酸盐
将通法一得到的N-乙酰苄胺哌嗪(II)中间体(19.6mmol)，甲醛醇溶液(16.3mmol)，6-氟吲哚-2-酮(16.3mmol)投入30ml无水乙醇中，室温下反应15h。反应液减压浓缩，得油状粗品。粗品经硅胶柱层析后得游离碱N-苄基-2-{4-[(6-氟-2-吲哚酮-1-基)甲基]哌嗪-1-基}乙酰胺(V-14)，4.59g，收率71.0％。
将游离碱加乙酸乙酯15ml加热溶解，用HCl\EtOAc(5N)调PH＝2，过滤析出的固体，得目标化合物N-苄基-2-{4-[(6-氟-2-吲哚酮-1-基)甲基]哌嗪-1-基}乙酰胺盐酸盐，收率82.3％。
1H-NMR(DMSO-d6):δ3.44(s,8H,A-H),3.79-3.74(d,2H,-CH2-),3.99(s,2H,-CH2-),4.37(s,2H,-CH2-),4.52(s,2H,-CH2-),7.34-7.18(m,5H,Ar-H),7.38-7.26(m,3H,Ar-H),9.04(t,1H,-CONH-)
ESI-MS[M+H]+：m/z397.2
实施例15
N-苄基-2-{4-[3-(5-甲基-1,3,4-噻二唑-2-基)脲基]哌啶-1-基}乙酰胺(V-15)及其盐酸盐
室温下，将N-乙酰苄胺-4-氨基哌啶盐酸盐0.60g(1.68mmol，1.0eq)投入20mlDMF中，再向其中投入N-甲酸苯酯-2-氨基-5-甲基-1,3,4-噻二唑0.40g(1.68mmol，1.0eq)，滴加吡啶2滴。室温下反应1.5h，升温至回流状态下，反应6h。反应结束后，冷却至室温。减压浓缩反应液，得淡黄色油状物，向油状物中加入饱和碳酸钠溶液，调节PH至9-10。用二氯甲烷20ml连续萃取2次，合并萃取液，再用饱和食盐水20ml洗涤后，加入无水硫酸镁干燥。减压浓缩除去二氯甲烷，得N-苄基-2-(4-[3-(5-甲基-1,3,4-噻二唑-2-基)脲基]哌啶-1-基)乙酰胺(V-15)淡黄色固体0.43g，收率63％。
将此淡黄色固体0.43g投入6ml乙酸乙酯溶液中，向其中滴加HCl/EA溶液至PH3-4，搅拌反应1h。减压过滤得N-乙酰苄胺-4-氨基哌啶盐酸盐的白色固体，用乙醇重结晶后得目标化合物N-苄基-2-(4-[3-(5-甲基-1,3,4-噻二唑-2-基)脲基]哌啶-1-基)乙酰胺盐酸盐0.34g，收率72％。
1H-NMR(DMSO-d6):δ1.96-2.06(m,2H,-CH2-),2.17-2.14(m,2H,-CH2-),2.45(s,3H,-CH3),3.21-3.16(m,2H,-CH2-),3.31(m,1H,-CH-),3.56-3.53(m,2H,-CH2-),3.93(s,2H,-CH2-),4.38-4.36(d,2H,-CH2-),7.37-7.08(m,5H,Ar-H),8.59(s,1H,-CONH-),9.18(s,1H,-CONH-)
ESI-MS[M+H]+：m/z389.2
实施例16
N-苄基-2-{4-[(6-甲氧基-2-吲哚酮-1-基)甲基]哌嗪-1-基}乙酰胺(V-16)及其盐酸盐
将通法一得到的N-乙酰苄胺哌嗪(II)中间体(19.6mmol)，甲醛醇溶液(16.3mmol)，6-甲氧基吲哚-2-酮(16.3mmol)投入30ml无水乙醇中，室温下反应15h。反应液减压浓缩，得油状粗品。粗品经硅胶柱层析后得游离碱N-苄基-2-{4-[(6-甲氧基-2-吲哚酮-1-基)甲基]哌嗪-1-基}乙酰胺(V-16)，4.76g，收率71.5％。
将游离碱加乙酸乙酯15ml加热溶解，用HCl\EtOAc(5N)调PH＝2，过滤析出的固体，得目标化合物N-苄基-2-{4-[(6-甲氧基-2-吲哚酮-1-基)甲基]哌嗪-1-基}乙酰胺盐酸盐，收率77.2％。
1H-NMR(DMSO-d6):δ3.44(s,8H,A-H),3.56(s,3H,-OCH3),3.79-3.74(d,2H,-CH2-),3.99(s,2H,-CH2-),4.37(s,2H,-CH2-),4.52(s,2H,-CH2-),6.78(s,1H,Ar-H),7.31-7.18(m,2H,Ar-H),7.38-7.28(m,5H,Ar-H),9.04(t,1H,-CONH-)
ESI-MS[M+H]+：m/z409.2
实施例17
N-苄基-2-{4-[(5-氟-2-吲哚酮-1-基)甲基]哌嗪-1-基}乙酰胺(V-17)及其盐酸盐
将通法一得到的N-乙酰苄胺哌嗪(II)中间体(19.6mmol)，甲醛醇溶液(16.3mmol)，5-氟吲哚-2-酮(16.3mmol)投入30ml无水乙醇中，室温下反应15h。反应液减压浓缩，得油状粗品。粗品经硅胶柱层析后得游离碱N-苄基-2-{4-[(5-氟-2-吲哚酮-1-基)甲基]哌嗪-1-基}乙酰胺(V-17)，4.64g，收率69.8％。
将游离碱加乙酸乙酯15ml加热溶解，用HCl\EtOAc(5N)调PH＝2，过滤析出的固体，得目标化合物N-苄基-2-{4-[(5-氟-2-吲哚酮-1-基)甲基]哌嗪-1-基}乙酰胺盐酸盐，收率85.9％。
1H-NMR(DMSO-d6):δ3.44(s,8H,A-H),3.79-3.74(d,2H,-CH2-),3.99(s,2H,-CH2-),4.37(s,2H,-CH2-),4.52(s,2H,-CH2-),7.34-7.18(m,5H,Ar-H),7.38-7.29(m,3H,Ar-H),9.04(t,1H,-CONH-)
ESI-MS[M+H]+：m/z397.2
实施例18
N-苄基-2-{4-[(5-甲氧基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)甲基]哌嗪-1-基}乙酰胺(V-18)及其盐酸盐
将通法一得到的N-乙酰苄胺哌嗪(II)中间体(19.6mmol)，甲醛醇溶液(16.3mmol)，5-甲氧基-1,3-二氢苯并咪唑-2-酮(16.3mmol)投入30ml无水乙醇中，室温下反应15h。反应液减压浓缩，得油状粗品。粗品经硅胶柱层析后得游离碱N-苄基-2-{4-[(5-甲氧基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)甲基]哌嗪-1-基}乙酰胺(V-18)，4.44g，收率66.6％。
将游离碱加乙酸乙酯15ml加热溶解，用HCl\EtOAc(5N)调PH＝2，过滤析出的固体，得目标化合物N-苄基-2-{4-[(5-甲氧基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)甲基]哌嗪-1-基}乙酰胺盐酸盐，收率83.2％。
1H-NMR(DMSO-d6):3.44-3.37(m,4H,A-H),3.60(m,4H,A-H),3.60(s,2H,-CH2-),3.70(s,3H,-OCH3),3.93(s,2H,-CH2-),4.35(s,2H,-CH2-),6.86-6.52(m,3H,Ar-H),7.36-7.25(m,5H,Ar-H),
ESI-MS[M+H]+：m/z410.2
实施例19
N-苄基-2-{4-[(5-氟-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)甲基]哌嗪-1-基}乙酰胺(V-19)及其盐酸盐
将通法一得到的N-乙酰苄胺哌嗪(II)中间体(19.6mmol)，甲醛醇溶液(16.3mmol)，5-氟-1,3-二氢苯并咪唑-2-酮(16.3mmol)投入30ml无水乙醇中，室温下反应15h。反应液减压浓缩，得油状粗品。粗品经硅胶柱层析后得游离碱N-苄基-2-{4-[(5-氟-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)甲基]哌嗪-1-基}乙酰胺(V-19)，4.67g，收率72.1％。
将游离碱加乙酸乙酯15ml加热溶解，用HCl\EtOAc(5N)调PH＝2，过滤析出的固体，得目标化合物N-苄基-2-{4-[(5-氟-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)甲基]哌嗪-1-基}乙酰胺盐酸盐，收率81.0％。
1H-NMR(DMSO-d6):δ3.39-3.37(m,4H,A-H),3.63(m,4H,A-H),3.63(s,2H,-CH2-),3.91(s,2H,-CH2-),4.35(s,2H,-CH2-),6.95-6.73(m,3H,Ar-H),7.36-7.24(m,5H,Ar-H),
ESI-MS[M+H]+：m/z398.2
实施例20
片剂：
采用本领域公知的方法，制备成为片剂。
针剂：
本发明的化合物3mg
氯化钠10mg
水50mg
采用本领域公知的方法，制备成为针剂；
实施例21化合物拮抗谷氨酸诱导的神经元损伤作用
在细胞模型上观察谷氨酸诱发的神经元损伤以及乙酰苄胺哌嗪类化合物可能的保护作用，并与阳性受试品比较。
专利CN1381448中的最优选化合物IV-23在以往的研究中已显示其具有对抗NMDA诱发的神经元兴奋毒性作用，在本研究中作为阳性对照药。
应用谷氨酸诱导的神经元兴奋毒性模型，对包括阳性药IV-23在内的18个化合物是否具有对抗谷氨酸兴奋毒性作用进行了药效学筛选。结果显示，给予谷氨酸(300μM)可明显减低神经元细胞的活力；这种作用可用阳性药IV-23剂量依赖性地翻转。在所筛选的11个化合物中，V-1、V-4、V-6～V-9、V-12、V-148个化合物具有一定的对抗谷氨酸诱发的神经元兴奋毒性的作用。其中，V-12和V-14体外活性与阳性药IV-23(专利CN1381448中的最优选化合物)相比，活性更强，且具有良好量效关系，具有深入研究的价值。结果见表2。
表2化合物对谷氨酸引起的神经元损伤模型的影响
实施例22化合物抗小鼠耐缺氧活性
观察样品V-1、V-4、V-6～V-9、V-12、V-148个化合物尾静脉给药对小鼠常压耐缺氧能力的影响。
方法：
取雄性ICR小鼠200只，体重25～30g，分为20组，分别为DMSO对照组，V-1低、中、高剂量组(2、6、20mg/kg)，V-4低、中、高剂量组(2、6、20mg/kg)，V-6低、中、高剂量组(2、6、20mg/kg)，V-7低、中、高剂量组(2、6、20mg/kg)，V-8低、中、高剂量组(2、6、20mg/kg)，V-9低、中、高剂量组(2、6、20mg/kg)，阳性药IV-23(6mg/kg)，每组10只动物。给药体积为0.1ml/10g，小鼠尾静脉注射给予各样品后，将各组小鼠分别放入盛有5g钠石灰的250ml磨口瓶内(每瓶1只)，加盖密封，以呼吸停止为死亡指征，观察小鼠存活时间。统计学处理采用t检验，所有数据以均数±标准偏差(x±SD)表示。
结果：
阳性药IV-23小鼠的存活时间明显长于对照组(P<0.05)。各给药组小鼠的存活时间均长于对照组，其中，V-4、V-7、V-8、V-9在高剂量条件下有延长小鼠存活时间的趋势，而V-12、V-14三个剂量下均显著延长了小鼠存活时间，且较阳性药IV-23(专利CN1381448中的最优选化合物)活性更强，具有深入研究价值。试验结果见表3。
表3药物对小鼠常压耐缺氧存活时间的影响(x±s)
实施例23hERG实验考察潜在的心脏毒性
对体内外活性均优的化合物V-12、V-14进行体外hERG钾离子抑制实验，以考察两个化合物的潜在心脏毒性。
方法:
细胞准备:
1.CHO-hERG细胞培养于175cm2培养瓶中，待细胞密度生长到60～80％，移走培养液，用7mlPBS洗一遍，然后加入3mlDetachin消化。
2.待消化完全后加入7ml培养液中和，然后离心，吸走上清液，再加入5ml培养液重悬，以确保细胞密度为2～5×106/ml。
溶液配制:
表4细胞内液和外液的组成成分
电生理记录过程
单细胞高阻抗封接和全细胞模式形成过程全部由Qpatch仪器自动完成，在获得全细胞记录模式后，细胞钳制在-80毫伏，在给予一个5秒的+40毫伏去极化刺激前，先给予一个50毫秒的-50毫伏前置电压，然后复极化到-50毫伏维持5秒，再回到-80毫伏。每15秒施加此电压刺激，记录2分钟后给予细胞外液记录1分钟，然后开始给药过程，化合物浓度从最低测试浓度开始，每个测试浓度给予1分钟，连续给完所有浓度后，给予阳性对照化合物10μMCisapride。每个浓度至少测试3个细胞(n≥3)。
化合物准备:
1.将20mM的化合物母液用细胞外液进行稀释，取2μl20mM的化合物母液加入998μl细胞外液，然后在含0.2％DMSO的细胞外液中依次进行5倍连续稀释得到需要测试的最终浓度。
2.最高测试浓度为40μM，依次分别为40，8，1.6，0.32，0.064，0.0128μM共6个浓度。最终测试浓度中的DMSO含量不超过0.2％，此浓度的DMSO对hERG钾通道没有影响。
数据分析:
实验数据由XLFit软件进行分析。
质量控制:
1.环境：湿度20～50％，温度22～25℃
2.试剂：所用实验试剂购买于Sigma公司，纯度>98％
3.报告中的实验数据必须满足以下标准：
全细胞封接阻抗>100MΩ
尾电流幅度>400pA
电流稳定性：每分钟衰减<2％
4.药理学参数：
多浓度Cisapride对hERG通道的抑制效应设为阳性对照。
实验结果：
经上述处理，对化合物SIPI7463，SIPI7465的心脏毒性测试结果见表5：
表5心脏hERG钾电流检测结果
结果显示，V-12和V-14的心脏毒性明显小于IV-23(专利CN1381448中的最优选化合物)，且化合物V-14的IC50值>40，表示该化合物在40μM的高浓度下对心脏hERG钾电流的抑制效应仍小于50％，心脏毒性极小，具有作为候选化合物进行深入研究开发价值。
Claims (7)
1.乙酰苄胺哌嗪类衍生物，其特征在于，为具有如下化学结构通式化合物的游离碱或盐：
其中：
Ar1代表：或中的一种；
X1代表CH或N；
X2代表N、CH其中一种；或者不含X2基团；
m,n为0或1，且m＝n；
R1代表H或1-3个碳原子的烷基；
R2,R3代表氢、甲氧基、F、Cl中的一种；
Y代表C或N；
Z代表CH2、O或NH。
2.根据权利要求1所述的乙酰苄胺哌嗪类衍生物，其特征在于，所述的盐为盐酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐中的一种。
3.乙酰苄胺哌嗪类衍生物，其特征在于，为：
V-1N-苄基-2-(4-{2-[(5-甲基-1,3,4-噻二唑-2-基)氨基]-2-羰乙基}哌嗪-1-基)乙酰胺
V-2[4-(2-苄基氨基-2-羰乙基)哌嗪-1-基]-N-苯基丙酰胺
V-32-[4-(2-苄基氨基-2-羰乙基)哌嗪-1-基]-N-(4-甲氧基苯基)丙酰胺；
V-42-[4-(2-苄基氨基-2-羰乙基)哌嗪-1-基]-N-(4-甲基苯基)丙酰胺；
V-5N-苄基-2-{4-[2-(4-氟苯基氨基)-2-羰乙基]哌嗪-1-基}乙酰胺；
V-6N-苄基-2-{4-[(苯基磺酰基)甲基]哌嗪-1-基}乙酰胺；
V-7N-苄基-2-{4-[(2,4-二氧代-1,3-二氮杂螺[4.4]壬烷-3-基)甲基]哌嗪-1-基}乙酰胺；
V-8N-苄基-2-{4-[(2-苯并唑啉酮-1-基)甲基]哌嗪-1-基}乙酰胺；
V-9N-苄基-2-(4-{[2-氧代苯并[d]恶唑-3(2H)-基]甲基}哌嗪-1-基)乙酰胺；
V-10N-苄基-2-{4-[(2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)甲基]哌嗪-1-基}乙酰胺；
V-11N-苄基-2-[4-(5-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑-3-基)哌嗪-1-基]乙酰胺；
V-12N-苄基-2-{4-[(5-氧代-1-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑-3-基)甲基]哌嗪-1-基}乙酰胺；
V-13N-苄基-2-{4-[2-氧代-2-(吡啶-4-基氨基)乙基]哌嗪-1-基}乙酰胺；
V-14N-苄基-2-{4-[(6-氟-2-吲哚酮-1-基)甲基]哌嗪-1-基}乙酰胺；
V-15N-苄基-2-{4-[3-(5-甲基-1,3,4-噻二唑-2-基)脲基]哌啶-1-基}乙酰胺；
V-16N-苄基-2-{4-[(6-甲氧基-2-吲哚酮-1-基)甲基]哌嗪-1-基}乙酰胺；
V-17N-苄基-2-{4-[(5-氟-2-吲哚酮-1-基)甲基]哌嗪-1-基}乙酰胺；
V-18N-苄基-2-{4-[(5-甲氧基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)甲基]哌嗪-1-基}乙酰胺；
V-19N-苄基-2-{4-[(5-氟-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)甲基]哌嗪-1-基}乙酰胺。
4.乙酰苄胺哌嗪类衍生物，其特征在于，为V-15N-苄基-2-{4-[3-(5-甲基-1,3,4-噻二唑-2-基)脲基]哌啶-1-基}乙酰胺。
5.一种组合物，包括治疗有效量的权利要求1～4任一项所述化合物或其盐和医药学上可接受的载体。
6.权利要求1～4任一项所述化合物或其盐在制备治疗脑神经损伤类疾病药物中的应用。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述脑神经损伤类疾病为脑中风。
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