CN108658843B

CN108658843B - 乙酰苄胺哌啶酰胺类衍生物及其作为脑神经保护剂的应用

Info

Publication number: CN108658843B
Application number: CN201710203702.3A
Authority: CN
Inventors: 李建其; 张庆伟; 姜玲; 张子学
Original assignee: Shanghai Institute of Pharmaceutical Industry; China State Institute of Pharmaceutical Industry
Current assignee: Shanghai Institute of Pharmaceutical Industry; China State Institute of Pharmaceutical Industry
Priority date: 2017-03-30
Filing date: 2017-03-30
Publication date: 2021-06-04
Anticipated expiration: 2037-03-30
Also published as: CN108658843A

Abstract

本发明公开了一类具有脑神经保护作用的乙酰苄胺哌啶酰胺类衍生物及其应用，药理实验表明，本发明化合物具有较好的神经元细胞保护作用及显著的体内耐缺氧活性，herg试验表明本发明化合物潜在心脏毒性小，安全性高。所述乙酰苄胺哌啶酰胺类衍生物，为具有如下化学结构通式化合物的游离碱或盐：

Description

乙酰苄胺哌啶酰胺类衍生物及其作为脑神经保护剂的应用

技术领域

本发明涉及一种乙酰苄胺哌啶酰胺类衍生物或其药学上可接受的盐，及其作为脑神经保护剂的应用。

背景技术

脑卒中(cerebral stroke)又称“中风”或“脑血管意外”(cerebral vascularaccident，CVA)是由于脑部血管突然破裂或因血管阻塞导致血液不能流入大脑而引起脑组织损伤的一组疾病，包括出血性和缺血性卒中。脑卒中具有发病率高、致残率高、复发率高、致死率高的特点，是世界性的健康难题。目前使用的抗脑卒中药物主要为溶栓和抗凝血剂、血管扩张剂、自由基清除剂、神经保护剂及一些活血化瘀中药组方等。研究表明，神经保护剂可减小脑梗死面积,不引发出血,无溶栓、抗凝治疗出血的并发症,用前无需进行详细的病因鉴别诊断,其使脑卒中早期预防或治疗成为可能。同时，神经保护剂也是阿尔茨海默病、帕金森氏病或脑肿瘤等脑神经损伤类疾病治疗的主要选择方案之一。

大量神经保护剂药物在临床前研究中具有很好的活性，但进入临床后却因疗效不确切或毒副作用太强而被终止临床(如：selfotel、aptiganel、eliprodil、licostinel、gavestinel、lanicemine、UK-240455、SM-31900等)。分析其可能的原因有以下几个方面(1)进入脑内的药物浓度未达到治疗浓度；(2)治疗时间窗较窄；(3)临床实验方案不完善；(4)出现严重的毒副反应，如精神病样的副反应、运动障碍、认知障碍等；(5)在活性、毒性方面存在人和动物的种属差异。

因此，临床医生及患者仍迫切需要新作用机制、疗效确切、安全可靠的既有抗脑梗塞治疗作用、又能保护受损神经元，尤其是减少中风脑组织损伤，改善卒中后果的脑神经保护剂问世。

在专利CN1381448(申请号02111614.8)中公开了一类芳烷甲酰烷基哌嗪衍生物具有较好脑神经保护及抗脑卒中活性，其中最优选化合物为N1-苯甲酰甲基-N4-苄胺基甲酰甲基哌嗪(IV-23，结构式见式1)，其治疗急性局灶性脑梗塞效果显著、神经系统副作用少，于2006年获得SFDA的新药临床批文。但临床研究发现，IV-23在人体内主要代谢产物羟基代谢产物M1(结构式见式2)属心脏毒性高危险化合物。

因此，现有技术中需要解决的技术问题是公开一类乙酰苄胺哌啶酰胺类衍生物及其作为脑神经保护剂的应用，以克服现有神经保护剂类药物存在的活性弱、心脏毒性大等缺陷。

发明内容

本发明人经研究发现：通过对IV-23结构中的“苯乙酮”结构片段进行合理改造，可避免式2中“苯甲醇”片段类毒性代谢物的产生，从而减少此类化合物心脏毒性风险，最终可获得神经保护活性高、心脏毒性副作用小的化合物。经结构改造得到神经保护作用好，但同时心脏毒性低的化合物需经合成、药理等试验来验证。

本发明人经大量试验最终发现一类乙酰苄胺哌啶酰胺类衍生物，作为脑神经保护剂对神经元细胞保护活性较高，且潜在心脏毒性副作用小，具有深入开发价值。

根据本发明的一个方面，本发明提供了乙酰苄胺哌啶酰胺类衍生物，所述乙酰苄胺哌啶酰胺类衍生物为具有以下化学结构通式的化合物游离碱或盐：

其中：

Ar代表：

R₁，R₂代表氢、甲基、甲氧基、三氟甲基、F或Cl中的一种。

根据本发明的某些实施方式，所述乙酰苄胺哌啶酰胺类衍生物中R₁，R₂为氢、甲氧基或羟基。

根据本发明的某些实施方式，所述化合物的盐为含有药物的化学上可接受的阴离子盐，优选盐酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐、醋酸盐、三氟醋酸盐、柠檬酸盐、酒石酸盐、马来酸盐、富马酸盐、甲磺酸盐、对甲苯磺酸盐、草酸盐。

本发明涉及的化合物可包括，但不限于下表所示的化合物：

表1：

根据本发明的一个方面，本发明提供了一种组合物，所述组合物包含所述的乙酰苄胺哌啶酰胺类衍生物或其盐和医药学上可接受的载体。

根据本发明的一个方面，本发明提供了一种制备所述组合物的方法，所述方法所述乙酰苄胺哌啶酰胺类衍生物或其盐与医药学上可接受的载体混合来制备。

根据本发明的一个方面，本发明提供了一种药盒，所述药盒包含所述的乙酰苄胺哌啶酰胺类衍生物或其盐和医药学上可接受的载体。

根据本发明的一个方面，本发明提供了一种治疗脑神经损伤类疾病的方法，所述方法给予患者所述乙酰苄胺哌啶酰胺类衍生物或其盐。

根据本发明的某些实施方式，所述脑神经损伤类疾病为脑卒中及相关疾病。

根据本发明的一个方面，本发明提供了所述乙酰苄胺哌啶酰胺类衍生物或其盐在制备治疗脑神经损伤类疾病药物中的应用。

定义

除非另外定义，本文使用的所有专业术语或专有词汇具有本发明技术领域的普通技术人员通常所理解的含义。

术语“药物组合物”或“组合物”表示含有治疗有效量的一种或多种所述化合物及其药学上可接受的水合物或盐，与其他药学上可接受的载体的混合物。将所述化合物制备成药物组合物的目的是为了更方便地向对象给药。

本发明的化合物可采用本领域公知的方法，制成常见的药用制剂。例如可以为片剂、丸剂、胶囊剂、颗粒剂、粉剂、栓剂、散剂、膏剂、贴剂、注射液、溶液、混悬液、喷雾剂、洗剂、滴剂、糖浆、擦剂。所述药物组合物可制成干粉形式，并且在给药前与无菌水或缓冲液混合以制成溶液形式。

本申请所述化合物或药物组合物可以单独给药，也可以与其他合适的药物联合给药。所述联合给药可以是例如与其他药物同时给药或先后给药。当先后给药时，可以以间隔任意时间的方式。

术语“有效量”或“治疗有效量”的所述化合物是指向对象给药后足以获得所需的治疗效果的量。所述治疗效果如有效改善或治疗对象中的脑神经损伤类疾病。

在本申请中当“约”用于修饰数值时，是指所述数值可以上下浮动±5％、±9％、±8％、±7％、±6％、±5％、±4％、±3％、±2％或±1％的范围内。

合成路线

根据本发明的一个方面，本发明公开了所述化合物的合成方法。所述化合物可采用以下方法进行合成：

化合物T-1～T-12合成通法：

将取代肉桂酸或苯甲酰甲酸(1.0eq)、HBTU(1.1eq)溶于20mL DMF中，室温搅拌1h后，加入I(1.0eq)，并滴加三乙胺(3.0eq)，室温搅拌过夜。反应毕，将反应液滴加入50ml冰水中，白色固体析出，继续冰浴下搅拌1h。抽滤，滤饼用少量乙醚洗涤，真空干燥，得白色粉末状固体。用甲醇重结晶得目标化合物。

将目标化合物T-1～T-12置于5％酸/乙醇中回流溶解，冷却析出化合物相关盐，所述的酸为盐酸、氢溴酸、硫酸、醋酸、三氟醋酸、柠檬酸、酒石酸、马来酸、富马酸、甲磺酸、对甲苯磺酸或草酸。

上述制备过程中中间体1可参照专利CN 105418506 A中V-15的合成进行制备，其余所涉及的原料、试剂可以通过商业渠道购买。

本发明所述化合物或其盐是为克服专利CN1381448(申请号02111614.8)中化合物潜在心脏毒性，通过改变CN1381448中化合物的苯乙酮片段，而获得的整体结构完全不同的新化合物，结构上具有新颖性。

药物组合物和药盒

根据本申请的某些实施方式，所述药盒还包含一种或多种其他的治疗剂。根据本申请的某些实施方式，所述药盒还包含使用说明书。根据本申请的某些实施方式，所述药盒还包含用于相应给药方式的装置，例如但不限于针头。

本发明还涉及一种组合物，包括治疗有效量的所述化合物或其盐和医药学上可接受的载体，所述的载体如香料、甜味剂、液体或固体填料或稀释剂等常用载体物质，并采用本领域公知的方法，制成常用的药用制剂，如片剂、胶囊、粉剂、糖浆、液剂、悬浮剂或针剂。

制剂通常含有重量百分比为0.1％～99.5％的有效成分，例如含有例如可以为0.1％～99％、0.1％～90％、0.1％～80％、0.1％～50％、0.1％～30％、1％～100％、1％～99％、1％～90％、1％～80％、1％～50％、50％～100％、50％～99％、50％～90％、50％～80％、80％～100％、80％～99％、90％～100％、90％～99％、95％～100％、或95％～99％等。较佳重量含量为5～50％，例如5％～40％、5％～30％、5％～20％、5％～10％、10％～50％、10％～40％、10％～30％、10％～20％、20％～50％、20％～40％、20％～30％、30％～50％、30％～40％、或40％～50％等。

本发明所述的化合物或其盐临床上可以通过口服或静脉注射方式对哺乳动物(包括人)进行给药，其中尤以静脉注射方式最佳。用药剂量为每日1～100mg\kg(po)或1～50mg\kg(iv)，例如1～80mg\kg(po)、1～60mg\kg(po)、1～40mg\kg(po)、1～20mg\kg(po)、1～10mg\kg(po)、10～100mg\kg(po)、10～80mg\kg(po)、10～60mg\kg(po)、10～40mg\kg(po)、10～20mg\kg(po)、20～100mg\kg(po)、20～80mg\kg(po)、20～60mg\kg(po)、20～40mg\kg(po)、40～100mg\kg(po)、40～80mg\kg(po)、40～60mg\kg(po)、60～100mg\kg(po)、60～80mg\kg(po)、或80～100mg\kg(po)；或者1～30mg\kg(iv)、1～20mg\kg(iv)、1～10mg\kg(iv)、10～50mg\kg(iv)、10～30mg\kg(iv)、10～20mg\kg(iv)、20～50mg\kg(iv)、20～30mg\kg(iv)、或30～50mg\kg(iv)。最佳剂量视个体而定，通常开始时剂量较小，然后逐渐增加用量。

治病方法和用途

药理实验

药理实验表明，本发明化合物在体外表现出明显的对抗谷氨酸诱发的神经元兴奋毒性的作用，其中化合物T-2,T-4和T-12体外活性优于阳性药IV-23(专利CN1381448中的最优选化合物)；小鼠体内耐缺氧活性测试显示化合物T-2,T-4和T-12在高剂量条件下均有延长小鼠存活时间的趋势，其中化合物T-4和T-12在三个剂量下均可显著延长小鼠存活时间，且较阳性药IV-23活性更强；herg试验表明化合物T-4和T-12心脏毒性风险小于阳性化合物IV-23；化合物T-4和T-12对小鼠灌胃给药最大耐受量大于600mg/kg，动物耐受性较好。

因此，本发明化合物具有神经保护作用活性高、心脏副作用小、安全性高的优点，较专利CN1381448化合物相比，结构新颖，活性及安全性具有创造性优势，具有深入研究的价值。

病症

所述脑神经损伤类疾病包括脑外伤,脑血管硬化(脑溢血,脑血栓)后遗症,脑炎与脑膜炎后遗症,脱髓鞘疾病等脑血管病后遗症，本专利所涉及的脑神经损伤类疾病主要为脑血管硬化(脑溢血,脑血栓)后遗症，即由于脑部血管突然破裂或因血管阻塞导致血液不能流入大脑而引起脑组织损伤的系列疾病。

根据本发明的某些实施方式，所述脑神经损伤类系列疾病为脑卒中及相关疾病。

除非在本申请中另有说明或与上下文明显矛盾，在描述本申请的上下文中(包括权利要求的上下文中)使用的术语“一种”、“一个”、“所述”、“该”以及“至少一个”和类似指代被解释为覆盖单数和复数。除非在本申请中另有说明或与上下文明显矛盾，本申请中所使用的术语“包含”、“具有”、“包括”和“含有”被解释为开放式术语(即“包括但不限于”)。除非在本申请中另有说明或与上下文明显矛盾，本申请所述的所有方法可以根据本领域技术人员的理解，以任何合适的顺序进行。

本申请中引用的所有专利、专利申请和参考文献均通过引用的方式全文并入本申请，其并入程度就如同每一篇文献单独引用作为参考。如果本申请和本文提供的文献之间存在冲突，应以本申请中的内容为准。

综上，本发明的优点在于，所述化合物及其药用制剂对于治疗脑神经损伤类疾病，如脑中风及相关疾病有很好的疗效，急性毒性低且不具有心脏毒性风险。

具体实施方式

结合实例进一步阐明本发明的内容，但本发明的保护范围并不局限于这些实例。本发明所述的百分比除特别注明外，均为质量百分比。

实施例1：(E)-N-(1-(2-(苄胺)-2-乙氧基)哌啶)-3-(4-甲氧基苯基)丙烯酰胺(T- 1)及其盐的制备

以4-甲氧基肉桂酸为原料，按照合成通法操作，得目标产物1.45g，收率85％。

ESI-MS[M+H]⁺m/z＝408.2；¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm:10.17(s,1H),9.30(t,J＝8.0Hz,1H),8.38(d,J＝8.0Hz,1H),7.50(d,J＝12.0Hz,2H),7.41(s,1H),7.37～7.25(m,5H),6.98(d,J＝8.0Hz,2H),6.53(d,J＝16.0Hz,1H),4.36(d,J＝4.0Hz,2H),4.15～4.00(m,3H),3.79(s,3H),3.51(d,J＝12.0Hz,2H),3.25～3.18(m,2H),2.08～1.98(m,2H),1.88～1.79(m,2H).

化合物T-1盐酸盐的制备

将化合物T-1(0.3g)、5％盐酸水溶液(0.8mmol)加入到乙醇(10mL)中，回流溶解，冷却析出白色固体，过滤，得0.3g白色T-1盐酸盐固体。

化合物T-1甲磺酸盐的制备

将化合物T-1(0.3g)、甲磺酸水溶液(0.8mmol)加入到乙醇(10mL)中，回流溶解，冷却析出白色固体，过滤，得0.28g白色T-1甲磺酸盐固体。

化合物T-1氢溴酸酸盐的制备

将化合物T-1(0.3g)、5％氢溴酸水溶液(0.8mmol)加入到乙醇(10mL)中，回流溶解，冷却析出白色固体，过滤，得0.34g白色T-1氢溴酸酸盐固体。

化合物T-1草酸盐的制备

将化合物T-1(0.3g)、草酸二水合物(0.8mmol)加入到乙醇(10mL)中，回流溶解，冷却析出白色固体，过滤，得0.35g白色T-1草酸盐固体。

实施例2：(E)-N-(1-(2-(苄胺)-2-乙氧基)哌啶)-3-(3,4,5-三甲氧基苯基)丙烯酰胺(T-2)及其盐的制备

以3,4,5-三甲氧基肉桂酸为原料，按照合成通法操作，得目标产物1.45g，收率85％。

ESI-MS[M+H]⁺m/z＝468.1；¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm:10.08(s,1H),9.25(t,J＝8.0Hz,1H),8.35(d,J＝8.0Hz,1H),7.40(s,1H),7.37～7.26(m,5H),6.90(d,J＝4.0Hz,2H),6.61(d,J＝16.0Hz,1H),4.36(d,J＝4.0Hz,2H),4.06～3.99(m,3H),3.81(s,6H),3.68(s,3H),3.52～3.47(m,2H),3.25～3.11(m,2H),1.99(s,2H),1.86～1.78(m,2H).

化合物T-2氢溴酸酸盐的制备

以化合物T-2(2.0mmol)、5％氢溴酸水溶液(2.1mmol)为原料，采用化合物T-1氢溴酸盐的制备方法，得0.9g白色T-2氢溴酸酸盐固体。

实施例3：(E)-N-(1-(2-(苄胺)-2-乙氧基)哌啶)-3-(3,4-二甲氧基苯基)丙烯酰胺(T-3)及其盐的制备

以3,4-二甲氧基肉桂酸为原料，按照通法操作，得目标产物1.45g，收率85％。

ESI-MS[M+H]⁺m/z＝438.2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm:10.06(s,1H),9.23(d,J＝8.0Hz,1H),8.29(d,J＝8.0Hz,1H),7.38(d,J＝8.0Hz,2H),7.35～7.25(m,5H),7.13(t,J＝8.0Hz,2H),6.99(d,J＝8.0Hz,1H),6.53(d,J＝12.0Hz,1H),4.36(d,J＝4.0Hz,2H),4.12～3.88(m,3H),3.78(d,J＝4.0Hz,6H),3.50(d,J＝12.0Hz,2H),3.20(q,J＝12.0Hz,2H),2.06～1.98(m,2H),1.85～1.77(m,2H).

化合物T-3富马酸盐的制备

以化合物T-3(2.3mmol)、富马酸(2.4mmol)为原料，采用化合物T-1氢溴酸盐的制备方法，得1.0g白色固体。

实施例4：(E)-N-(1-(2-(苄胺)-2-乙氧基)哌啶)-3-(2,3-二甲氧基苯基)丙烯酰胺(T-4)及其盐的制备

以2,3-二甲氧基苯甲酸为原料，按照合成通法操作，得目标产物。

ESI-MS[M+H]+m/z＝438.2；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δppm:9.99(s,1H),9.19(t,J＝8.0Hz,1H),8.41(d,J＝8.0Hz,1H),7.63(t,J＝8.0Hz,1H),7.37～7.26(m,5H),7.14～7.06(m,3H),6.67(d,J＝16.0Hz,1H),4.37(d,J＝8.0Hz,2H),4.12～3.89(m,3H),3.82(s,3H),3.74(s,3H),3.50～3.35(m,2H),3.24～3.16(m,2H),2.01(d,J＝16.0Hz,2H),1.85～1.77(m,2H).

化合物T-4丁二酸盐的制备

以化合物T-4(2.2mmol)、丁二酸(2.4mmol)为原料，采用化合物T-1氢溴酸盐的制备方法，得1.1g白色固体。

实施例5：(E)-N-(1-(2-(苄胺)-2-乙氧基)哌啶)-3-(3,5-二甲氧基苯基)丙烯酰胺(T-5)及其盐的制备

以3,5-二甲氧基苯甲酸为原料，按照通法操作，得目标产物。

ESI-MS[M+H]+m/z＝438.2；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δppm:10.10(s,1H),9.26(t,J＝4.0Hz,1H),8.42(d,J＝8.0Hz,1H),7.37(d,J＝4.0Hz,1H),7.35～7.25(m,5H),6.73(s,2H),6.66(d,J＝16.0Hz,1H),6.52(t,J＝4.0Hz,1H),4.36(d,J＝4.0Hz,2H),4.13～3.89(m,3H),3.77(s,6H),3.50(d,J＝12.0Hz,2H),3.21(d,J＝8.0Hz,2H),1.98(d,J＝4.0Hz,2H),1.87～1.78(m,2H).

以化合物T-5(2.0mmol)、酒石酸(2.1mmol)为原料，采用化合物T-1氢溴酸盐的制备方法，得1.0g白色固体。

实施例6：(E)-N-(1-(2-(苄胺)-2-乙氧基)哌啶)-3-(2,4-二甲氧基苯基)丙烯酰胺(T-6)及其盐的制备

以2,4-二甲氧基苯甲酸为原料，按照通法操作，得目标产物。

ESI-MS[M+H]+m/z＝438.2；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δppm:10.19(s,1H),9.33(t,J＝8.0Hz,1H),8.32(d,J＝8.0Hz,1H),7.62～7.56(m,1H),7.44(t,J＝8.0Hz,1H),7.37～7.25(m,5H),6.61(t,J＝4.0Hz,2H),6.57(d,J＝8.0Hz,1H),4.36(d,J＝4.0Hz,2H),4.13～4.00(m,3H),3.86(s,3H),3.81(s,3H),3.51(d,J＝12.0Hz,2H)),3.26～3.18(m,2H),1.99(t,J＝8.0Hz,2H),1.88～1.79(m,2H).

化合物T-6盐酸盐的制备

以化合物T-6(1.8mmol)、5％盐酸水溶液(1.9mmol)为原料，采用化合物T-1氢溴酸盐的制备方法，得0.85g白色固体。

实施例7：(E)-N-(1-(2-(苄胺)-2-乙氧基)哌啶)-3-(2,5-二甲氧基苯基)丙烯酰胺(T-7)及其盐的制备

以2,5-二甲氧基苯甲酸为原料，按照通法操作，得目标产物。

ESI-MS[M+H]+m/z＝438.3；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δppm:8.25(t,J＝8.0Hz,1H),8.03(d,J＝8.0Hz,1H),7.61(d,J＝16.0Hz,1H),7.32(t,J＝8.0Hz,2H),7.26～7.21(m,3H),7.05(d,J＝4.0Hz,1H),7.00(d,J＝8.0Hz,1H),6.95～6.92(m,1H),6.86(d,J＝16.0Hz,1H),4.30(d,J＝4.0Hz,2H),3.80(s,3H),3.73(s,3H),3.69～3.60(s,1H),2.97(s,2H),2.78(d,J＝12.0Hz,2H),2.18(t,J＝8.0Hz,2H),1.77(d,J＝8.0Hz,2H),1.53～1.45(m,2H).

化合物T-7氢溴酸盐的制备

以化合物T-7(1.9mmol)、5％氢溴酸水溶液(2.0mmol)为原料，采用化合物T-1氢溴酸盐的制备方法，得0.93g白色固体。

实施例8：(E)-N-(1-(2-(苄胺)-2-乙氧基)哌啶)-3-(3-甲氧基苯基)丙烯酰胺(T- 8)及其盐的制备

以3-甲氧基苯甲酸为原料，按照通法操作，得目标产物。

ESI-MS[M+H]+m/z＝408.1；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δppm:10.13(s,1H),9.28(t,J＝8.0Hz,1H),8.46(d,J＝8.0Hz,1H),7.41(d,J＝16.0Hz,2H),7.37～7.25(m,6H),7.13(d,J＝12.0Hz,2H),6.96(dd,J＝4.0Hz,8.0Hz,1H),6.68(d,J＝16.0Hz,1H),4.36(d,J＝4.0Hz,2H),4.15～3.90(m,3H),3.78(s,3H),3.51(d,J＝12.0Hz,2H),3.21(d,J＝12.0Hz,2H),2.08～1.99(m,2H),1.88～1.79(m,2H).

化合物T-8草酸盐的制备

以化合物T-8(2.4mmol)、二水合草酸(2.5mmol)为原料，采用化合物T-1氢溴酸盐的制备方法，得1.2g白色固体，收率85％。

实施例9：(E)-N-(1-(2-(苄胺)-2-乙氧基)哌啶)-3-(2-甲氧基苯基)丙烯酰胺(T- 9)及其盐的制备

以2-甲氧基苯甲酸为原料，按照通法操作，得目标产物。

ESI-MS[M+H]+m/z＝408.1；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δppm:8.25(t,J＝8.0Hz,1H),8.03(d,J＝8.0Hz,1H),7.63(d,J＝12.0Hz,1H),7.50(d,J＝4.0Hz,1H),7.38～7.34(m,3H),7.26～7.21(m,3H),7.07(d,J＝8.0Hz,1H),6.98(t,J＝8.0Hz,1H),6.65(d,J＝16.0Hz,1H),4.30(d,J＝4.0Hz,2H),3.85(s,3H),3.66～3.63(m,1H),2.97(s,2H),2.77(d,J＝12.0Hz,2H),2.17(t,J＝8.0Hz,2H),1.77(d,J＝8.0Hz,2H),1.54～1.45(m,2H).

以化合物T-9(2.2mmol)、冰醋酸(2.3mmol)为原料，采用化合物T-1氢溴酸盐的制备方法，得1.1g白色固体。

实施例10：(E)-N-(1-(2-(苄胺)-2-乙氧基)哌啶)-3-(2,3,4-三甲氧基苯基)丙烯酰胺(T-10)及其盐的制备

以2,3,4-三甲氧基苯甲酸为原料，按照通法操作，得目标产物。

ESI-MS[M+H]+m/z＝468.1；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δppm:8.25(t,J＝8.0Hz,1H),8.00(d,J＝8.0Hz,1H),7.50(d,J＝16.0Hz,1H),7.34～7.23(m,6H),6.88(d,J＝8.0Hz,1H),6.57(d,J＝16.0Hz,1H),4.30(d,J＝4.0Hz,2H),3.83(s,3H),3.80(s,3H),3.75(s,3H),3.67～3.60(m,1H),2.97(s,2H),2.77(d,J＝12.0Hz,2H),2.18(t,J＝8.0Hz,2H),1.77(d,J＝8.0Hz,2H),1.53～1.45(m,2H).

化合物T-10盐酸盐的制备

以化合物T-10(2.3mmol)、5％盐酸水溶液(2.4mmol)为原料，采用化合物T-1氢溴酸盐的制备方法，得0.9g白色固体。

实施例11：N-(1-(2-(苄胺)-2-乙氧基)哌啶)肉桂酰胺(T-11)及其盐的制备

以肉桂酸为原料，按照通法操作，得目标产物。

ESI-MS[M+H]+m/z＝378.1；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δppm:8.50(t,J＝8.0Hz,2H),8.25(t,J＝4.0Hz,1H),8.10(dd,J＝3.6Hz,4.4Hz,1H),7.87～7.85(m,1H),7.32(t,J＝8.0Hz,2H),7.26～7.22(m,4H),6.29(d,J＝8.0Hz,1H),4.30(t,J＝4.0Hz,2H),3.48(s,1H),2.97(s,2H),2.72(d,J＝4.0Hz,2H),2.21(t,J＝4.0Hz,2H),1.80(d,J＝8.0Hz,2H),1.49～1.43(m,2H).

化合物T-11马来酸盐的制备

以化合物T-11(2.1mmol)、马来酸(2.2mmol)为原料，采用化合物T-1氢溴酸盐的制备方法，得1.06g白色固体。

实施例12：N-(1-(2-(苄胺)-2-乙氧基)哌啶)-2-氧基-2-苯乙酰胺(T-12)及其盐的制备

按照通法操作，将目标化合物。ESI-MS[M+H]+m/z＝380.2；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δppm:10.06(s,1H),9.19(t,J＝8.0Hz,2H),7.96(d,J＝8.0Hz,2H),7.77～7.73(m,1H),7.60(d,J＝8.0Hz,2H),7.37～7.26(m,5H),4.37(d,J＝8.0Hz,2H),4.00(s,3H),3.52(d,J＝12.0Hz,2H),3.27～3.19(m,2H),2.06(d,J＝12.0Hz,2H),1.95～1.86(m,2H).

化合物T-12对甲苯磺酸盐的制备

以化合物T-12(2.4mmol)、对甲苯磺酸(2.5mmol)为原料，采用化合物T-1氢溴酸盐的制备方法，得1.35g白色固体。

实施例13化合物拮抗谷氨酸诱导的神经元损伤作用试验

在细胞模型上观察谷氨酸诱发的神经元损伤以及乙酰苄胺哌啶酰胺类衍生物可能的保护作用，并与阳性受试品比较。专利CN1381448中的最优选化合物IV-23在以往的研究中已显示其具有对抗NMDA诱发的神经元兴奋毒性作用，在本研究中作为阳性对照药。

应用谷氨酸诱导的神经元兴奋毒性模型(SHSY5Y细胞损伤模型)，对包括阳性药IV-23在内的共13个化合物对抗谷氨酸兴奋毒性作用进行药效学筛选。

结果显示，给予谷氨酸(100μM)可明显减低神经元细胞的活力；阳性药IV-23显示一定神经元细胞保护作用，且呈现剂量依赖性。

本专利所述化合物中，T-1，T-2,T-4和T-12具有一定的对抗谷氨酸诱发的神经元兴奋毒性的作用。其中，化合物T-2,T-4和T-12体外活性优于阳性药IV-23(专利CN1381448中的最优选化合物)，且呈现量效关系。结果见表2。

表2：化合物对谷氨酸引起的神经元损伤模型的影响

实施例14：化合物抗小鼠耐缺氧活性

观察三个化合物T-2,T-4和T-12尾静脉给药对小鼠常压耐缺氧能力的影响。

方法：取雄性ICR小鼠200只，体重25～30g，分为20组，分别为DMSO对照组，T-2低、中、高剂量组(2、6、20mg/kg)，T-4低、中、高剂量组(2、6、20mg/kg)，T-12低、中、高剂量组(2、6、20mg/kg)，阳性药IV-23(6mg/kg)，每组10只动物。给药体积为0.1ml/10g，小鼠尾静脉注射给予各样品后，将各组小鼠分别放入盛有5g钠石灰的250ml磨口瓶内(每瓶1只)，加盖密封，以呼吸停止为死亡指征，观察小鼠存活时间。统计学处理采用t检验，所有数据以均数±标准偏差(x±SD)表示。

结果：阳性药IV-23小鼠的存活时间明显长于对照组(P<0.05)。各给药组小鼠的存活时间均长于对照组，其中，T-2,T-4和T-12在高剂量条件下均有延长小鼠存活时间的趋势，其中化合物T-4和T-12在三个剂量下均可显著延长小鼠存活时间，且较阳性药IV-23(专利CN1381448中的最优选化合物)活性更强，具有深入研究价值。试验结果见表3。

表3：药物对小鼠常压耐缺氧存活时间的影响(x±s)

实施例15：hERG实验考察化合物潜在心脏毒性

对体内外活性均优的化合物T-4和T-12进行体外hERG钾离子抑制实验，以考察两个化合物的潜在心脏毒性风险。以专利CN1381448中化合物IV-23作为阳性对照药。

结果显示，2个化合物的心脏毒性风险都小于化合物IV-23，显示较低的心脏毒性风险。

表4：心脏hERG钾电流检测结果

●>40μM指该化合物抑制效应在40μM时小于50％

实施例16：化合物灌胃给药最大耐受量毒性试验

取ICR小鼠40只，雌雄各半，体重18～20g，分为4组，每组10只动物。禁食6小时后，每组分别用灭菌塑料注射器抽取受试样品按0.3ml/10g体积口服灌胃。给药后1、2、4小时均对动物的一般体征以及动物的死亡情况进行记录。给药后连续观察14天，每天对动物的体重以及体征死亡情况进行观察和记录。对死亡动物进行解剖，观察动物脏器有没有出现肉眼可见的病理变化，对可疑的组织和器官进行病理学检查。

实验结果表明：化合物T-4和T-12对小鼠灌胃给药最大耐受量大于600mg/kg，动物耐受性较好。

实施例17：片剂制备

制备方法：将实施例1-12中任一化合物或其药用盐与蔗糖、玉米淀粉混合，加水湿润，搅拌均匀，干燥，粉碎过筛，加入硬脂酸钙，混合均匀，压片。每片重200mg，活性成分含量为10mg。

实施例18：针剂制备

实施例1-12中任一的化合物20mg

注射用水80mg

制备方法：将活性成分溶解与注射用水，混合均匀，过滤，将所获得的溶液在无菌条件下分装与安瓿瓶中，每瓶10mg，活性成分含量为2mg/瓶。

综上，本发明化合物具有神经保护作用活性高、心脏副作用小、安全性高、药用制备简便(包括合成及制剂制备)的特点，较专利CN1381448化合物相比，活性及安全性具有优势，有广泛的的应用价值。

本发明虽然已以较佳实施例公开如上，但其并不是用来限定本发明，任何本领域技术人员在不脱离本发明的精神和范围内，都可以利用上述揭示的方法和技术内容对本发明技术方案做出可能的变动和修改，因此，凡是未脱离本发明技术方案的内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化及修饰，均属于本发明技术方案的保护范围。

Claims

1.乙酰苄胺哌啶酰胺类衍生物，其特征在于，为以下化合物游离碱或盐：

T-4 (E)-N-(1-(2-(苄胺)-2-乙氧基)哌啶)-3-(2,3-二甲氧基苯基)丙烯酰胺；

T-12 N-(1-(2-(苄胺)-2-乙氧基)哌啶)-2-氧基-2-苯乙酰胺。

2.根据权利要求1所述的乙酰苄胺哌啶酰胺类衍生物，其特征在于，所述化合物的盐为含有药物的化学上可接受的阴离子盐。

3.根据权利要求1所述的乙酰苄胺哌啶酰胺类衍生物，其特征在于，所述化合物的盐为盐酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐、醋酸盐、三氟醋酸盐、柠檬酸盐、酒石酸盐、马来酸盐、富马酸盐、甲磺酸盐、对甲苯磺酸盐、草酸盐。

4.一种组合物，包括治疗有效量的权利要求1～3任一项所述的乙酰苄胺哌啶酰胺类衍生物或其盐和医药学上可接受的载体。

5.一种制备如权利要求4所述的药物组合物的方法，其特征在于，所述方法将权利要求1～3任一项所述的乙酰苄胺哌啶酰胺类衍生物或其盐与医药学上可接受的载体混合来制备。

6.一种药盒，其特征在于，所述药盒包含根据权利要求1～3中任一项所述的乙酰苄胺哌啶酰胺类衍生物或其盐。

7.权利要求1～3任一项所述的乙酰苄胺哌啶酰胺类衍生物或其盐在制备治疗脑神经损伤类疾病药物中的应用。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述的治疗脑神经损伤类疾病为脑卒中及相关疾病。