CN105394749B - 一种含有虾青素的保健食品配方及制备方法和应用 - Google Patents
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Classifications
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Abstract
本发明公开了一种含有虾青素的保健食品配方及制备方法和应用，本发明配方以虾青素为主要原料，辅以我国名贵食药兼用的优质原料：人参提取物、当归提取物、茶叶提取物；组方合理、优势互补，进一步增强了虾青素的抗氧化功能；本发明中所采用的雨生红球藻精粉提取方法，使得雨生红球藻精粉中的主要有效成分虾青素得以较大程度的保留。同时本发明提供的胶囊制备方法，添加了茶叶提取物和红花籽油等组方，二者即具有抗氧化的活性功能，又在配方中起到了避免虾青素氧化，稳定软胶囊的作用。
Description
技术领域:
本发明属于现代保健食品的研制技术领域，具体涉及一种含有虾青素的保健食品配方及制备方法和应用。
技术背景:
虾青素是目前国内外保健食品市场上一致公认的具有抗氧化活性、抗肿瘤和增强免疫力等许多重要的生理和生物学功能的天然保健食品的原料。其抗氧化性为维生素E的500-1000倍，为胡萝卜素的10倍。虾青素主要存在于天然的藻类雨生红球藻原料中，是藻类中公认的强抗氧化剂物资。虾青素对眼科疾病、心血管疾病和类风湿性关节炎也有缓解作用；虾青素对视频显示终端操作员视察疲劳具有明显的改善作用，还有助于消除因时差产生的身体不适感，其效果比常用的褪黑素还要明显。所以，虾青素具有重要的营养价值和保健作用。但虾青素与维生素一样不能被人体合成，只能从食物中摄取，因此，本保健食品中所含的虾青素活性成分是由配方中的雨生红球藻提取而成。
雨生红球藻又称为湖生红球藻或湖生血球藻，是一种普遍存在的绿藻，属于团藻目，红球藻科。当前，雨生红球藻被公认为自然界中生产天然虾青素的最好生物，利用这种微藻提取虾青素成分具有广阔的发展前景。虾青素，称为3，3，—二羟基-4，4，—二酮基—β，β，—胡萝卜素，分子式C40H52O4，分子量为596.86，呈粉红色，是一种脂溶性类胡萝卜素。虾青素具有抗氧化性、抗肿瘤和增强免疫力等许多重要的生理和生物学功能，其抗氧化性为维生素E的500-1000倍，为胡萝卜素的10倍，是水生藻类中公认的强抗氧化剂，通过抗氧化在人体内可以抑制老年斑的形成，对视频显示终端操作员视察疲劳具有明显的改善作用，还有助于消除因时差产生的身体不适感，其效果比常用的褪黑素还要明显。所以，虾青素具有重要的营养价值和保健作用。但虾青素与维生素一样不能被人体合成，只能从食物中摄取。
人参是多年生五加科草本植物。人参提取物中主要含有含人参皂甙、人参多糖、挥发油等成分。其中多糖和皂苷类成分为人参提取物的主要有效成分。实验研究表明：人参提取物具有增强人体免疫力和显著的抗氧化作用，同时对中枢神经系统具有兴奋作用，而大量时反而有抑制作用。能加强动物高级神经活动的兴奋和抑制过程。并能增强机体对一切非特异性刺激的适应能力，能减少疲劳感，研究表明人参的肉质根为著名强壮滋补药，适用于调整血压、恢复心脏功能、神经衰弱及身体虚弱等症，也有祛痰、健胃、利尿、兴奋等功效。
当归为伞形科植物当归的干燥根，别名秦归、云归、西当归、岷当归。始载于《神农本草经》，为无毒的上品药。国内外学者对其进行了深人的研究，发现当归含有苯酞类及其二聚体、酚酸类、多糖、黄酮等多种化学成分。当归为血家之圣药，具有补血调血、调经止痛、润肠通便的功效。临床上主要用于治疗血虚萎黄，眩晕心悸，月经不调，经闭痛经，虚寒腹痛，肠燥便秘，风湿痹痛，跌扑损伤，疮疡等症，当归提取物中主要含有当归内酯(ASDL)等成分。
茶在我国有着悠久的饮用历史。茶叶也是一种天然的抗氧化活性物质，其抗氧化功能已经得到了医药界的一致认可，迄今已在茶叶内鉴定出450种以上的有机成分和15种以上的无机元素，在这些化学成分中以各种有机物为主，约占茶叶重量的93％～95％。茶叶提取物中茶多酚约15％一30％、蛋白类20％一30％、茶色素15％左右、咖啡因3％—5％、氨基酸类1％一5％、维生素l％左右、芳香类0.005％一0.030％，还有少量的有机酸、脂质，决定了茶叶的色、香、味和营养水平。目前研究证明茶叶提取物具有十分显著的抗疲劳、抗衰老、抗辐射、清除人体自由基、降低人体血糖血脂等多种重要的药理功能。
红花籽油中含棕榈酸7-10％，硬脂酸2-5％，花生酸1-3％，油酸22-30％，亚油酸50-60，亚麻油酸5-9％。红花籽油的脂肪酸构成较好，它含有丰富的亚油酸，有显著的降低血清胆固醇含量，预防心血管疾病的功效，其中还含有大量的维生素E、维生素D以及丰富的卵磷脂，对人体健康均非常有益。另外，红花籽油的人体消化吸收率高达98％，所以也是一种营养价值很高的制药工业中常用的辅料，可用于软胶囊的囊皮制作。
卵磷脂(Lecithin)属于一种混合物，是存在于动植物组织以及卵黄之中的一组黄褐色的油脂性物质，卵磷脂的生物学名为磷脂酰胆碱，是人体组织中含量最高的膦脂，是构成神经组织的重要成分，属于高级神经营养素。卵磷脂在人体中占体重的1％左右，但在大脑中却占到脑重量的30％；而在脑细胞中更占到其干重的70～80％。卵磷脂集中存在于脑及神经系统，血液循环系统、免疫系统及心、肝、肺、肾等重要器官。其构成成分包括磷酸、胆碱、脂肪酸、甘油、糖脂、甘油三酸酯以及磷脂(如磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺和磷脂酰肌醇)。卵磷脂，被誉为与蛋白质、维生素并列的“第三营养素”，是目前制药工业常用的辅料。
蜂腊是蜜蜂科昆虫中华蜜蜂Apis cerana Fabricius或意大利蜂Apis melliferaLinnaeus分泌的蜡。主要成分可分为4大类，即酯类、游离酸类、游离醇类和烃类。此外还含微量的挥发油及色素。是一种营养价值很高的制药工业中常用的辅料，主要用于软胶囊的制作。
本发明发挥了中国食药兼用资源的优势，它以雨生红球藻中所提取的虾青素为主要原料配合人参提取物、当归提取物和茶叶提取物，再加入红花籽油、蜂腊、卵磷脂等辅料共同制成软胶囊剂型产品。本品具有抗氧化和增强人体免疫功能的作用。同时具有配方独特，工艺创新，功效显著，剂型先进，服用方便等优势。其特点就是配方完全依据中国传统的中医药理论为基础，从中国传统的人体保健思路的角度开发的一种新型的具有提高显著的抗氧化功能、能够增强人体免疫力等多种保健作用的保健食品，目前我国的保健食品市场上尚没有同类产品上市。产品制备工艺采用了现代制药工艺新技术和新思路，在雨生红球藻中虾青素活性成分的提取分离方面具有独特的优势。由于制备工艺科学合理，选用的剂型新颖，完全符合国际保健食品市场的技术要求。
发明内容:
本发明的目的是提供一种含有虾青素的保健食品配方，本发明提供的保健食品由天然的雨生红球藻精粉、人参提取物、当归提取物、茶叶提取物配伍制成，经试验证明，具有显著的抗氧化活性和提高人体免疫功能的保健功能。
本发明的另一个目的是提供一种含有虾青素的保健食品配方在制备保健食品中的应用，包括利用该配方制备成软胶囊。
一种含有虾青素的保健食品配方，包含以下成分：
所述的雨生红球藻精粉的制备方法包括：
以雨生红球藻为原料，经过30-65％的乙醇30-70℃下提取2-3次、每次40-120min，合并各次提取液后回收乙醇，浓缩后采用喷雾干燥法制备雨生红球藻精粉。其中喷雾干燥工艺为关键工艺，，最终确定最佳生产工艺参数为：进料液固形物质量分数6％、进风温度126℃和热风流速0.4m3/min，
所述的雨生红球藻优选购自于湖北省荆州天然虾青素有限公司的雨生红球藻。
所述的人参提取物、当归提取物、茶叶提取物为市购的检验合格产品。
一种含有虾青素的保健食品配方，包含以下成分：
一种含有虾青素的保健食品配方的制备方法，包括：
按比例称取雨生红球藻精粉、人参提取物、当归提取物及茶叶提取物，进行充分混合后在60-65℃下干燥1-2h，冷却后过100目筛，即得。
一种含有虾青素的保健食品配方在制备保健食品中的应用，包括直接利用该配方制成保健品制剂口服，或是与其他辅料联合制成保健品制剂。
所述配方与其他辅料联合制成保健品的方法包括：
辅料：蜂蜡：红花籽油：卵磷脂的质量比为38:1:1，将全部量的蜂蜡和半数红花籽油加热至70-80℃溶解后、搅拌加入剩余红花籽油和全部卵磷脂，后冷却至45℃以下，得混合辅料。
原料药：按比例称取雨生红球藻精粉、人参提取物、当归提取物及茶叶提取物，进行充分混合后在60-65℃下干燥1-2h，冷却后过100目筛，即得。
将上述混合原料药和混合辅料按混合原料：混合辅料质量比为1:2至1:1的比例范围进行混合，均质20min后，过80-100目筛后制备得胶囊内容物。
将明胶：甘油：水按质量比为1:0.4:1的比例混合后加热至60-65℃制备成明胶，再经抽真空后制备成胶液，采用软胶囊机将上述胶液和胶囊内容物进一步制备成虾青素人参当归茶叶软胶囊。
与现有技术相比，本发明具有以下优点：
1、本品中含有的抗氧化活性物质虾青素是来源于天然雨生红球藻，经过现代保健食品制备方法制备，具有显著的抗氧化和提高人体免疫力的作用。
2、本品原料全部来源于中国食药兼用的优质原料，经过现代制备工艺研制而成，无任何化学添加剂。
3、配方以虾青素为主要原料，辅以我国名贵食药兼用的优质原料，组方合理、优势互补，进一步增强了虾青素的抗氧化功能；
4、配方中添加了茶叶提取物和红花籽油等组方，二者即具有抗氧化的活性功能，又在配方中起到了避免虾青素氧化，稳定软胶囊的作用。
5、本发明中所采用的雨生红球藻精粉提取方法使得雨生红球藻精粉中的主要有效成分虾青素得以较大程度的保留。
附图说明
图1为本发明所述虾青素人参当归茶叶软胶囊制备流程示意图。
图2为各样品溶液不同时间点的抗氧化效果趋势图。
具体实施方式
下面通过实施例对本发明做进一步说明，但本发明不仅仅限于实施例。
实施例1：
虾青素人参当归茶叶软胶囊的制备
本实施例中所述软胶囊的单位剂量处方组成如下：
表1：实施例1软胶囊单位剂量处方组成
本实施例中软胶囊制备方法如下：
1、雨生红球藻精粉的制备方法包括：
选取优质的雨生红球藻原材料(购自湖北省荆州天然虾青素有限公司)，除去其中的杂质及异物后，用滚筒式洗药机对其进行清洗，洗净的雨生红球藻送入热风循环烘箱，在60℃条件下进行干燥，干燥至水分≤10％，得到经预处理后的雨生红球藻原料。称取经预处理后的雨生红球藻原料200.0g于提取罐中，加45％乙醇溶液2.0L于40℃下提取60min后，回收乙醇提取液。过滤所剩药渣按照上述条件再次提取，合并两次获得的乙醇提取液，回收乙醇得浓缩液。将上述浓缩液进行喷雾干燥，设置工艺参数为进料液固形物质量分数6％、进风温度126℃和热风流速0.4m3/min，获得雨生红球藻精粉。将上述雨生红球藻精粉进行灭菌处理。灭菌条件:辐照源Co60，辐照剂量4000格瑞，灭菌4h，备用。该条件下制得的雨生红球藻精粉中总虾青素含量为28.6mg/g，雨生红球藻精粉水分含量为2.10％。
2.物料混合及干燥:
取检验合格的人参提取物、当归提取物、茶叶提取物(均购自陕西中鑫生物技术有限公司)和雨生红球藻精粉适量，分别过100目筛。精密称取过筛后物料，其中雨生红球藻精粉120g、人参提取物80g、当归提取物30g、茶叶提取物70g。将已称定的各原料，投入混合机中混合约15s，混匀后的原料在60℃下干燥2h，得混合原料。
3.软胶囊内容物的制备：
称取红花籽油380g、蜂蜡10g、卵磷脂5g，将蜂蜡和半数红花籽油混合加热至75℃，至蜂蜡全部溶解后搅拌加入卵磷脂和剩余的红花籽油，冷却至40℃，得混合辅料。将混合原料和混合辅料进行总混，入胶体磨均质20min，然后过100目筛制备成软胶囊内容物，备用，其中混合原料与混合物料的质量比为1:1.67。
4.化胶及软胶囊成品的制备：
按明胶：甘油：纯化水质量比为1:0.4:1的比例将适量甘油、明胶和纯化水投料入溶胶罐中，加热至65℃，待罐内胶液全部融化时，抽真空至0.08Mpa以上，待罐内胶液无气泡时，用滤布过滤胶液，后制备成胶液。将胶囊内容物和胶液采用软胶囊机进一步制备成软胶囊1000粒，相当于单粒含主要有效成分为0.3g/粒，虾青素含量为3.43mg/粒。建议食用方法：每日一次，每次1粒。
实施例2：虾青素人参当归茶叶软胶囊的制备
本实施例中所述软胶囊的单位剂量处方组成如下：
表2：实施例2软胶囊的单位剂量处方组成
本实施例中软胶囊制备方法如下：
1、雨生红球藻精粉的制备：
同实施例1。
2.物料混合及干燥:
取检验合格的人参提取物、当归提取物、茶叶提取物(均购自陕西中鑫生物技术有限公司)和雨生红球藻精粉适量，分别过80目筛。精密称取过筛后物料，其中雨生红球藻精粉54g、人参提取物45g、当归提取物16.5g、茶叶提取物34.5g。将已称定的各原料，投入混合机中混合约15s，混匀后的原料在60℃下干燥2h，得混合原料。
3.软胶囊内容物的制备：
称取红花籽油285g、蜂蜡7.5g、卵磷脂7.5g，将蜂蜡和部分红花籽油混合加热至75℃，至蜂蜡全部溶解后搅拌加入卵磷脂和剩余的红花籽油，冷却至40℃，得混合辅料。将混合原料和混合辅料进行总混，入胶体磨均质20min，然后过100目筛制备成软胶囊内容物，备用，
其中混合原料与混合物料的质量比为1:2。
4.化胶及软胶囊成品的制备：
按明胶：甘油：纯化水质量比为1:0.4:1的比例将适量甘油、明胶和纯化水投料入溶胶罐中，加热至65℃，待罐内胶液全部融化时，抽真空至0.08Mpa以上，待罐内胶液无气泡时，用滤布过滤胶液，后制备成胶液。将胶囊内容物和胶液采用软胶囊机进一步制备成软胶囊1000粒，相当于单粒含主要有效成分为0.15g/粒，虾青素含量为1.54mg/粒。建议食用方法：每日一次，每次2粒。
实施例3：虾青素人参当归茶叶软胶囊的制备
本实施例中所述软胶囊的单位剂量处方组成如下：
表3：实施例3软胶囊的单位剂量处方组成
本实施例中软胶囊制备方法如下：
1、雨生红球藻精粉的制备：
同实施例1.
2.物料混合及干燥:
取检验合格的人参提取物、当归提取物、茶叶提取物(均购自陕西中鑫生物技术有限公司)和雨生红球藻精粉适量，分别过100目筛。精密称取过筛后物料，其中雨生红球藻精粉66g、人参提取物37.5g、当归提取物15g、茶叶提取物31.5g。将已称定的各原料，投入混合机中混合约15s，混匀后的原料在60℃下干燥2h，得混合物料。
3.软胶囊内容物的制备：
称取红花籽油142.5g、蜂蜡3.75g、卵磷脂3.75g，将蜂蜡和半数红花籽油混合加热至75℃，至蜂蜡全部溶解后搅拌加入卵磷脂和剩余的红花籽油，冷却至40℃，得混合辅料。将混合原料和混合辅料进行总混，入胶体磨均质20min，然后过100目筛制备成软胶囊内容物，备用，其中混合原料与混合物料的质量比为1:1。
4.化胶及软胶囊成品的制备：
按明胶：甘油：纯化水质量比为1:0.4:1的比例将适量甘油、明胶和纯化水投料入溶胶罐中，加热至65℃，待罐内胶液全部融化时，抽真空至0.08Mpa以上，待罐内胶液无气泡时，用滤布过滤胶液，后制备成胶液。将胶囊内容物和胶液采用软胶囊机进一步制备成软胶囊1000粒，相当于单粒含主要有效成分为0.15g/粒，虾青素含量为1.89mg/粒。建议食用方法：每日一次，每次2粒。
实施例4：
本发明所述含有虾青素的保健食品配方抗氧化活性研究
1.试验材料及来源：雨生红球藻精粉，自制获得；人参提取物、当归提取物、茶叶提取物，均购自陕西中鑫生物技术有限公司；艾诗诗虾青素软胶囊(功效成分：每100g含虾青素0.31g)，生产商：湖北雅仕达生物技术有限公司，批准文号：国食健字G20120275。
2.样品溶液及阳性对照溶液及配制：
(1)样品溶液-1：取实施例1中所得软胶囊1粒(总有效成分含量300mg)置于150ml容量瓶中，加适量无水乙醇溶解后，加无水乙醇定容至刻度，摇匀。精密移取上述定容后溶液2.5ml于100ml容量瓶中，加无水乙醇定容至刻度，摇匀，即得样品溶液-1，溶液浓度(按总有效成分计)为50μg/ml，溶液中虾青素浓度为0.572μg/ml。其中，实施例1中软胶囊主要有效成分含量为雨生红球藻精粉120mg、人参提取物80mg、当归提取物30mg、茶叶提取物70mg，各有效成分质量比为雨生红球藻精粉：人参提取物：当归提取物：茶叶提取物为40:26.7:10:23.3，总有效成分含量为300mg/粒，经测定虾青素含量为3.43mg/粒。
(2)样品溶液-2：取实施例2中所得软胶囊1粒(总有效成分含量150mg)置于150ml容量瓶中，加适量无水乙醇溶解后，加无水乙醇定容至刻度，摇匀。精密移取上述定容后溶液5ml于100ml容量瓶中，加无水乙醇定容至刻度，摇匀，即得样品溶液-1，溶液浓度(按总有效成分计)为50μg/ml，溶液中虾青素浓度为0.513μg/ml。其中，实施例1中软胶囊主要有效成分含量为雨生红球藻精粉54mg、人参提取物45mg、当归提取物16.5mg、茶叶提取物34.5mg，各有效成分质量比为雨生红球藻精粉：人参提取物：当归提取物：茶叶提取物为36:30:11:23，总有效成分含量为150mg/粒，经测定虾青素含量为1.54mg/粒。
(3)样品溶液-3：取实施例3中所得软胶囊1粒(总有效成分含量150mg)置于150ml容量瓶中，加适量无水乙醇溶解后，加无水乙醇定容至刻度，摇匀。精密移取上述定容后溶液5ml于100ml容量瓶中，加无水乙醇定容至刻度，摇匀，即得样品溶液-1，溶液浓度(按总有效成分计)为50μg/ml，溶液中虾青素浓度为0.63μg/ml。其中，实施例1中软胶囊主要有效成分含量为雨生红球藻精粉66mg、人参提取物37.5mg、当归提取物15mg、茶叶提取物31.5mg，各有效成分质量比为雨生红球藻精粉：人参提取物：当归提取物：茶叶提取物为44:25:10:21，总有效成分含量为150mg/粒，经测定虾青素含量为1.89mg/粒。
(4)阳性对照溶液：取艾诗诗虾青素软胶囊(功效成分：每100g含虾青素0.31g)1粒，置于150ml容量瓶中，加适量无水乙醇溶解后，加无水乙醇定容至刻度，摇匀。精密移取上述定容后溶液5ml于100ml容量瓶中，加无水乙醇定容至刻度，摇匀，即得阳性对照溶液，溶液中虾青素浓度为0.62μg/ml。
(5)空白溶液：无水乙醇。
3.试验方法：
采用亚油酸乳化体系-硫氰酸铁法。亚油酸乳化体系是用来检测抗氧化剂抗氧化作用最常用的方法。
4.试验步骤：
取上述样品溶液-1、样品溶液-2、样品溶液-3、阳性对照溶液各1ml，以及无水乙醇1ml作为空白溶液，分别加入具塞试管中，在各试管中顺序加入2.50％亚油酸无水乙醇溶液1ml、0.05mol/L pH为7.0的磷酸盐缓冲溶液2ml、蒸馏水1ml，密封。在40℃的恒温条件下保存，从0时刻开始分别每隔24h进行检测。检测时，从具塞试管中取出0.1ml乳化溶液加入空试管中，随后顺序加入75％乙醇溶液9.7ml、30％硫氰酸氨溶液0.1ml、0.02mol/L溶于3.5％盐酸的氯化亚铁溶液0.1ml，迅速混匀，反应3min后，在500nm条件下测定吸光值，重复测定3次。根据吸光值作图比较各溶液对亚油酸体系的抗氧化效果。
5.试验结果：
下表为各样品溶液在500nm下的平均吸光值(n＝3)。
表4：抗氧化活性试验结果
| 样品 | 0h | 24h | 48h | 72h | 96h | 120h | 144h | 168h |
| 空白 | 0 | 0.145 | 0.206 | 0.305 | 0.411 | 0.579 | 0.667 | 0.742 |
| 阳性对照溶液 | 0 | 0.134 | 0.165 | 0.253 | 0.341 | 0.377 | 0.452 | 0.542 |
| 样品溶液-1 | 0 | 0.128 | 0.156 | 0.203 | 0.251 | 0.285 | 0.354 | 0.396 |
| 样品溶液-2 | 0 | 0.133 | 0.178 | 0.241 | 0.302 | 0.333 | 0.401 | 0.465 |
| 样品溶液-3 | 0 | 0.132 | 0.159 | 0.234 | 0.281 | 0.302 | 0.376 | 0.441 |
按照上表数据作图，图2所示为浓度均为50μg/ml的样品溶液和阳性对照溶液在相同的亚油酸体系中，不同时间点的抗氧化效果趋势。由图2可知，0h的未经反应的乳化液吸光值均为0,24h后，各吸光值均呈现上升趋势，其中空白溶液上升趋势最为明显，说明亚油酸自动氧化作用十分显著。各样品溶液和阳性对照溶液随虽然也有上升趋势，但上升趋势相对缓慢，说明亚油酸的氧化作用受到了抑制，说明各样品溶液均具有一定的抗氧化活性。
另外，经对CFDA数据库检索，含虾青素或以雨生红球藻为主要有效成分且获得国家食品药品监督管理局批准的保健食品制剂仅有艾诗诗虾青素软胶囊。本发明以艾诗诗虾青素软胶囊作为阳性对照，对比说明本发明所述制剂的抗氧化活性。由图2可知，各时间所有样品溶液的曲线均低于阳性对照，说明本发明所述软胶囊对亚油酸自氧化的抑制效能明显高于市售虾青素软胶囊。对比各溶液虾青素浓度，可知样品溶液在含有低于或近似等于阳性对照溶液中所含虾青素含量时，具有比阳性对照更强的抗氧化活性，说明本发明所述制剂处方中，除雨生红球藻外的其他有效成分能够对虾青素的抗氧化活性产生协同效应，表明本发明所述制剂处方具有一定的科学性和有效性，能够优于目前市售含虾青素软胶囊。在所有样品溶液中，样品溶液-1效果最为显著，表明实施例1所述有效成分配比，雨生红球藻精粉：人参提取物：当归提取物：茶叶提取物质量比为40:26.7:10:23.3具有较优的抗氧化活性。
实施例5：
本发明所述含有虾青素的保健食品配方增强免疫功能活性研究
1.试验动物
昆明种小鼠，雌性，体重18-22g，清洁级标准，共440只，分四批进行试验：试验一批进行脏器/体重比值测定、迟发性变态反应试验、半数溶血值的测定和抗体生成细胞数的测定，试验二批进行碳廓清试验，试验三批进行小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验，实验四批进行ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化试验和NK细胞活性测定。每批随机分为11组，每组10只。每批各样品组设高、中、低剂量组，同时每批还包括阴性对照组和阳性对照组。
2.试验样品
(1)样品-1组：本组给予实施例1中所得软胶囊的大豆油溶液。该软胶囊建议成人(按体重60kg计)服用剂量为每日一粒，按该给药剂量设置低剂量组、中剂量组和高剂量组。其中，实施例1中软胶囊主要有效成分含量为雨生红球藻精粉120mg、人参提取物80mg、当归提取物30mg、茶叶提取物70mg，各有效成分质量比为雨生红球藻精粉：人参提取物：当归提取物：茶叶提取物为40:26.7:10:23.3，总有效成分含量为300mg/粒，经测定虾青素含量为3.43mg/粒。
(2)样品-2组：本组给予实施例2中所得软胶囊的大豆油溶液。该软胶囊建议成人(按体重60kg计)服用剂量为每日两粒，按该给药剂量设置低剂量组、中剂量组和高剂量组。其中，实施例1中软胶囊主要有效成分含量为雨生红球藻精粉54mg、人参提取物45mg、当归提取物16.5mg、茶叶提取物34.5mg，各有效成分质量比为雨生红球藻精粉：人参提取物：当归提取物：茶叶提取物为36:30:11:23，总有效成分含量为150mg/粒，经测定虾青素含量为1.54mg/粒。
(3)样品-3组：本组给予实施例3中所得软胶囊的大豆油溶液。按该给药剂量设置低剂量组、中剂量组和高剂量组。其中，实施例1中软胶囊主要有效成分含量为雨生红球藻精粉66mg、人参提取物37.5mg、当归提取物15mg、茶叶提取物31.5mg，各有效成分质量比为雨生红球藻精粉：人参提取物：当归提取物：茶叶提取物为44:25:10:21，总有效成分含量为150mg/粒，经测定虾青素含量为1.89mg/粒。
(4)阳性对照组：艾诗诗软胶囊的大豆油溶液。该软胶囊建议成人(按体重60kg计)服用剂量为每日两粒，其中虾青素含量为1.86mg/粒。
(5)阴性对照(空白)组：大豆油
3.试验方法：
本试验以国家食品药品监督管理局公布的《增强免疫力功能评价方法》为参考依据进行。低剂量样品组给药剂量为成人(按体重60kg计)推荐剂量的5倍，中剂量样品组给药剂量为成人(按体重60kg计)推荐剂量的10倍，高剂量样品组给药剂量为成人(按体重60kg计)推荐剂量的30倍，阳性对照组的给药剂量为成人(按体重60kg计)推荐剂量的10倍，所有动物按0.2mL/10g体重灌胃给予受试药物，空白组给予等量的大豆油。连续给药30天后开始各项试验，具体试验项目和试验方法见下表5。应用SPSS软件进行统计学分析。
表5：试验项目和试验方法
4.试验结果：
(1)对小鼠体重及小鼠脏器/体重比值的影响
小鼠的初始体重在各组间均衡，给药30天后，各样品组、阳性对照组和空白组间体重均无显著差异，各试验租间小鼠脾脏/体重、胸腺/体重比值与空白组比较也无显著差异，表明受试物对小鼠体重和小鼠脏器/体重比值无特别不良影响。
(2)对小鼠细胞免疫功能、体液免疫、单核-巨噬细胞吞噬功能和NK细胞活性的影响
试验结果见下表6、7、8，小鼠经口给药30天后，与空白组比较，各样品的中、高剂量组和阳性对照组的小鼠足跖肿胀、淋巴细胞增殖能力、抗体生成细胞数、半数溶血值、碳廓清能力以及巨噬细胞吞噬鸡红细胞吞噬率和吞噬指数均有显著性差异(P＜0.05)，试验结果显阳性。NK细胞活性测定试验中，各试验组与空白组间均无显著性差异。
表6：小鼠细胞免疫功能测定试验结果
表7：体液免疫功能测定试验结果
表8：单核-巨噬细胞吞噬功能测定试验结果
注：*：与空白组比较有显著性差异
5.试验结果分析
根据国家食品药品监督管理局公布的《增强免疫力功能评价方法》，在健康小鼠体液免疫、细胞免疫、单核-巨噬细胞功能测定和NK细胞活性测定四个方面测定中，任两个方面试验结果为阳性，可以判定该受试样品具有增强免疫力作用。上述试验结果中，各样品组和阳性对照组在体液免疫、细胞免疫、单核-巨噬细胞功能测定三个试验中呈阳性结果，表明具有增强免疫功能。
在各项试验中，将各样品中剂量组(给药剂量为成人推荐剂量的10倍)与阳性对照组(给药剂量为成人推荐剂量的10倍)对比发现，各样品中剂量组试验结果均优于阳性对照组，表明本发明所述含虾青素软胶囊制剂的抗免疫功能优于目前市售的含虾青素软胶囊。在所有样品中剂量组中，各项试验中均是样品-1组的试验结果最优，表明本发明实施例1所述有效成分配比，雨生红球藻精粉：人参提取物：当归提取物：茶叶提取物质量比为40:26.7:10:23.3具有较优的增强免疫功能。
实施例6：
稳定性考察
按照实施例1、实施例2、实施例3中所述软胶囊各连续生产三批，每批均用药用高密度聚乙烯瓶(符合国家药品包装材料标准YBB00122002)和铝箔封口包装，60粒/瓶。将样品放入相对湿度为75±5％，温度40±2℃的恒温恒湿箱内，进行加速试验。按照企业内控标准(Q/WLZ 0004S-2014)，分别于0、1、2、3、6月取样检测样品中感官、功能成分、理化指标、净含量、微生物等25项指标，考察各批次样品的稳定性情况。试验结果见下表5、6、7。由各加速试验结果可知本发明所述软胶囊在加速试验条件下放置6个月内各检验指标均符合标准要求，表明本发明所述软胶囊具有良好的稳定性。
表5：实施例1中连续生产的三批样品加速试验考察结果
表6：实施例2中连续生产的三批样品加速试验考察结果
表7：实施例2中连续生产的三批样品加速试验考察结果
Claims (2)
1.一种含有虾青素的保健食品，其特征在于，包含以下成分：
所述的雨生红球藻精粉的制备步骤包括：以雨生红球藻为原料，经过30-65％的乙醇30-70℃下提取2-3次、每次40-120min，合并各次提取液后回收乙醇，浓缩后采用喷雾干燥法制备雨生红球藻精粉，喷雾干燥的参数为：进料液固形物质量分数6％、进风温度126℃，热风流速0.4m3/min。
2.根据权利要求1所述的一种含有虾青素的保健食品，其特征在于，：
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |