CN105372337B - 一种检测维生素d滴剂中维生素d含量的方法 - Google Patents

一种检测维生素d滴剂中维生素d含量的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN105372337B
CN105372337B CN201410387198.3A CN201410387198A CN105372337B CN 105372337 B CN105372337 B CN 105372337B CN 201410387198 A CN201410387198 A CN 201410387198A CN 105372337 B CN105372337 B CN 105372337B
Authority
CN
China
Prior art keywords
vitamin
drops
reference substance
measured
content
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201410387198.3A
Other languages
English (en)
Other versions
CN105372337A (zh
Inventor
陶元景
胡醒
解春文
王凤英
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
SHANDONG DAYIN MARINE BIOTECHNOLOGICAL PHARM HOLDINGS CO Ltd
Original Assignee
SHANDONG DAYIN MARINE BIOTECHNOLOGICAL PHARM HOLDINGS CO Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by SHANDONG DAYIN MARINE BIOTECHNOLOGICAL PHARM HOLDINGS CO Ltd filed Critical SHANDONG DAYIN MARINE BIOTECHNOLOGICAL PHARM HOLDINGS CO Ltd
Priority to CN201410387198.3A priority Critical patent/CN105372337B/zh
Publication of CN105372337A publication Critical patent/CN105372337A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN105372337B publication Critical patent/CN105372337B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Landscapes

  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)

Abstract

本发明公开了一种检测维生素D滴剂中维生素D含量的方法。本发明通过大量优选出最佳的流动相组成,流速,检测波长和色谱柱等分析条件,经多次实验验证表明,本发明提供的维生素D滴剂的含量检测控制方法稳定性和重复性好、分析效率高、分离度好,可以灵敏准确的定性、定量检测维生素D3,从而客观、全面、准确的评价维生素D滴剂的质量,对控制维生素D滴剂的质量和保证临床疗效具有重要意义。

Description

一种检测维生素D滴剂中维生素D含量的方法
技术领域
本方法属于药物分析技术领域,涉及一种检测维生素D滴剂中维生素D含量的方法。
背景技术
维生素D滴剂是一种用于儿童佝偻病的预防和治疗的药物。经过大量循证医学研究和基础研究发现,维生素D滴剂对癌症、高血压、糖尿病、结核病、免疫功能异常的治疗具有一定的疗效。目前,美国药典、英国药典、欧盟药典及中国药典中收载的维生素D滴剂含量检测方法,相当繁琐,检验效率低。经国内外文献专利检索,尚未发现有关维生素D滴剂含量快速检测文献及专利报道。
发明内容
本发明的目的是提供一种检测维生素D滴剂中维生素D含量的方法。
本发明提供的检测维生素D滴剂中维生素D含量的方法,包括如下步骤:
1)将已知浓度的维生素D对照品的正己烷溶液进行HPLC检测,并记录每个浓度的维生素D对照品的峰面积,按照如下公式计算对照品校正因子:
对照品校正因子=浓度/峰面积
2)将待测维生素D滴剂溶于正己烷中,进行HPLC检测,并记录所述待测维生素D滴剂中维生素D的峰面积;
3)按照外标法的方法,将步骤2)所得待测维生素D滴剂中维生素D的峰面积乘以步骤1)所得对照品校正因子,得到所述待测维生素D滴剂中维生素D的浓度,进而得到所述待测维生素D滴剂中维生素D的含量。
上述方法的步骤1)和2)HPLC检测步骤中,检测条件均如下所示:
所用色谱柱的固定相为硅胶,硅胶的粒径为3-10μm;柱高为100~250mm,内径为4.6mm;
进样量均为20-120μL,具体为100μL;
流动相均为由体积比为994~996:6~4的正己烷和异丙醇组成的混合液,具体为由体积比为995∶5的正己烷和异丙醇组成的混合液;所述流动相的流动方式为匀速流动;
流速均为1.0~2.0mL/min,具体为1.5mL/min;
柱温为25~35℃,具体为30℃;
检测波长均为250~270nm,具体为265nm;
保留时间均为10-30min,具体为20min。
所述步骤1)中,所述线性回归方程为Y=190.57X-5.42。所述步骤2)中,待测维生素D滴剂与正己烷的用量比为720mg:20mL。
具体的,所述维生素D为维生素D3
本发明通过大量优选出最佳的流动相组成,流速,检测波长和色谱柱等分析条件,经多次实验验证表明,本发明提供的维生素D滴剂的含量检测控制方法稳定性和重复性好、分析效率高、分离度好,可以灵敏准确的定性、定量检测维生素D3,从而客观、全面、准确的评价维生素D滴剂的质量,对控制维生素D滴剂的质量和保证临床疗效具有重要意义。
附图说明
图1为维生素D3含量测定谱图;
图2为对照品线性图;
图3为维生素D3对照品溶液的液相色谱图;
图4为维生素D3供试品溶液的液相色谱图;
图5为维生素D3阴性对照溶液的液相色谱图;
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步阐述,但本发明并不限于以下实施例。所述方法如无特别说明均为常规方法。所述原材料如无特别说明均能从公开商业途径而得。
实施例1、维生素D滴剂中维生素D3含量测定
仪器采用Agilent1200高效液相色谱仪;METTLER XP205电子天平。
材料为本公司软胶囊车间生产的维生素D滴剂。
维生素D3对照品购自中国药品生物制品检定所,批号为100061-201208;
正己烷为色谱纯;
其他试剂为分析纯。
一、配制供试品溶液
精密量取720mg左右(含20μg维生素D3)维生素D滴剂内容物,置20mL棕色容量瓶中,加正己烷溶解,定容,摇匀即得供试品溶液。
共设置两个供试品;其中,供试品1的称样量为719.5mg;供试品2的称样量为720.3mg;
二、配制维生素D3对照品溶液
精密称取10mg左右维生素D3对照品,置100mL棕色容量瓶中,加正己烷溶解,定容,摇匀即得维生素D3对照品储备液,然后精密量取1mL储备液至100mL棕色容量瓶中,加正己烷稀释定容至刻度,摇匀即得维生素D3对照品溶液。
共设置两个对照品;其中,对照品1中维生素D3的浓度为1.371ug/ml;对照品2中维生素D3的浓度为1.263ug/ml;
三、供试品溶液中维生素D3含量的测定
按照如下方法检测供试品溶液中维生素D3的含量:
将维生素D3对照品溶液和供试品溶液进行HPLC检测,检测条件均如下所示:
所用色谱柱的固定相为硅胶,硅胶的粒径为3-10μm;柱高为100mm,内径为4.6mm;
进样量均为100μL;
流动相为由体积比为995∶5的正己烷和异丙醇组成的混合液;流动方式为匀速流动;
流速均为1.5mL/min;
柱温为30℃;
检测波长为265nm;
保留时间为20min;
VWD检测器;理论塔板数按维生素D3峰计算应不低于2000。
记录每个浓度(也即1.371ug/ml和1.263ug/ml)的维生素D对照品的峰面积,按照如下公式计算对照品校正因子:
对照品校正因子=浓度/峰面积
根据图1所得对照品1和2的液相色谱图可知,
由对照品1所得对照品校正因子f1=1.371/244=0.005619;
由对照品2所得对照品校正因子f2=1.263/222.6=0.005674;
将f1和f2取平均值,得F=0.005646;
按外标法计算供试品中维生素D3的含量:
对于供试品1:
根据图1所得供试品1的液相色谱图可知,供试品1中维生素D3的峰面积176.8,将其乘以对照品校正因子F=0.005646,得到供试品1中维生素D3的浓度0.9982ug/ml,进而得到供试品中维生素D3的含量99.90%;
对于供试品2:
根据图1所得供试品2的液相色谱图可知,供试品2中维生素D3的峰面积174.2,将其乘以对照品校正因子F=0.005646,得到供试品2中维生素D3的浓度0.9835ug/ml,进而得到供试品中维生素D3的含量98.32%;
所得结果如表1所示。
表1、维生素D3含量测定
实施例2、线性试验
一、配制一系列不同浓度的维生素D3对照品溶液
精密量取维生素D3对照品溶液(20μg/ml)0.6、0.8、1.0、1.2、1.4μL分别置于20ml棕色量瓶中,加正己烷稀释至刻度摇匀,即得维生素D3对照品溶液。
二、将维生素D3对照品溶液进行HPLC检测,检测条件均如下所示:
所用色谱柱的固定相为硅胶,硅胶的粒径为3-10μm;柱高为100mm,内径为4.6mm;
进样量均为100μL;
流动相为由体积比为995∶5的正己烷和异丙醇组成的混合液;
流速均为1.5mL/min;
柱温为30℃;
检测波长为265nm;
保留时间为20min;
VWD检测器;理论塔板数按维生素D3峰计算应不低于2000。
HPLC检测完毕记录每个浓度的维生素D3对照品的峰面积,以浓度为自变量,以其对应的峰面积为因变量,得到线性回归方程;
所得结果如表2所示。
表2、维生素D3线性关系
结果表明:维生素D3在0.636~1.484μg/ml浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系。线性回归方程:Y=190.57X-5.42,R=0.999,该方程对应的线性曲线见图2。
实验例3、专属性试验
一、配制供试品溶液
同实施例1;
二、配制维生素D3对照品溶液
精密称取10mg维生素D3对照品,置100mL棕色容量瓶中,加正己烷溶解,定容,摇匀即得维生素D3对照品储备液,然后精密量取1mL储备液至100mL棕色容量瓶中,加正己烷稀释定容至刻度,摇匀即得维生素D3对照品溶液。
三、供试品溶液和阴性对照溶液中维生素D3含量的测定
对上述供试品溶液、维生素D3对照品溶液、阴性对照溶液进行色谱分析,色谱图见图4、3、5,表明阴性对照溶液对测定基本无干扰,供试品溶液中维生素D3与杂质峰分离良好,不干扰测定。
实验例4、精密度试验
精密吸取对照品溶液100μL,按实施例1的色谱条件,重复进样6次,峰面积平均值为205.8,RSD%为0.30%。表明本方法精密度较好。结果见表3。
表3、精密度试验结果
实验例5、稳定性试验
同一供试品溶液,按实施例1的色谱条件,分别于配置后0,2,4,8,12小时进样,每次进样量为100μL,测定峰面积积分值平均为186.9,RSD%为0.73,结果见表4。
表4、维生素D3稳定性试验结果
由表3可知,供试品溶液具有很好的稳定性。
实验例6、重复性试验
取同一批供试品6份,按实施例1供试品溶液制备方法制成供试品溶液,进样测定,结果见表5,平均含量为99.6%,RSD%为0.37,表明本法有良好的重复性。
表5、重复性试验结果
实验例7、回收率试验
精密称取维生素D3对照10mg,置100ml棕色量瓶中,加正己烷溶解稀释,摇匀即得对照品储备液。
取储备液10ml置50ml棕色量瓶中,加正己烷稀释定容至刻度,摇匀即得维生素D3对照溶液。
分别称取9份720mg辅料花生油,置20ml棕色量瓶中,分别加入0.8ml、1.0ml、1.2ml维生素D3对照品溶液,每种浓度各3份。然后加正己烷稀释定容至刻度,摇匀即得,回收率供试品溶液。
所得结果见表6。
表6、回收率试验结果
由表6可知,9份样品的平均回收率为99.2%,RSD%为1.38%,表明该方法准确度较好。

Claims (1)

1.一种检测维生素D滴剂中维生素D含量的方法,包括如下步骤:
1)将已知浓度的维生素D对照品的正己烷溶液进行HPLC检测,并记录每个浓度的维生素D对照品的峰面积,按照如下公式计算对照品校正因子:
对照品校正因子=浓度/峰面积
2)将待测维生素D滴剂溶于正己烷中,进行HPLC检测,并记录所述待测维生素D滴剂中维生素D的峰面积;
3)按照外标法的方法,将步骤2)所得待测维生素D滴剂中维生素D的峰面积乘以步骤1)所得对照品校正因子的平均值,得到所述待测维生素D滴剂中维生素D的浓度,进而得到所述待测维生素D滴剂中维生素D的含量;
所述步骤1)和2)HPLC检测步骤中,检测条件均如下所示:
所用色谱柱的固定相为硅胶,硅胶的粒径为3-10μm;柱高为100~250mm,内径为4.6mm;
进样量均为100μL;
流动相均为由体积比为995:5的正己烷和异丙醇组成的混合液,所述流动相的流动方式为匀速流动;
流速均为1.5mL/min;
柱温为30℃;
检测波长均为265nm;
保留时间均为20min;
所述步骤2)中,待测维生素D滴剂与正己烷的用量比为720mg:20mL;
所述维生素D为维生素D3
CN201410387198.3A 2014-08-07 2014-08-07 一种检测维生素d滴剂中维生素d含量的方法 Active CN105372337B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201410387198.3A CN105372337B (zh) 2014-08-07 2014-08-07 一种检测维生素d滴剂中维生素d含量的方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201410387198.3A CN105372337B (zh) 2014-08-07 2014-08-07 一种检测维生素d滴剂中维生素d含量的方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN105372337A CN105372337A (zh) 2016-03-02
CN105372337B true CN105372337B (zh) 2017-11-10

Family

ID=55374719

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201410387198.3A Active CN105372337B (zh) 2014-08-07 2014-08-07 一种检测维生素d滴剂中维生素d含量的方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN105372337B (zh)

Families Citing this family (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105974035A (zh) * 2016-07-31 2016-09-28 合肥远志医药科技开发有限公司 一种维d钙咀嚼片制剂中维生素d3含量的检测方法
CN106290619A (zh) * 2016-07-31 2017-01-04 合肥远志医药科技开发有限公司 一种儿童维d钙咀嚼片制剂中维生素d3含量的检测方法
CN109490435A (zh) * 2018-11-02 2019-03-19 济南维瑞医药科技开发有限公司 一种检测复方碳酸钙咀嚼片中维生素d3杂质的方法
CN109541110A (zh) * 2018-12-07 2019-03-29 浙江核力欣健药业有限公司 一种检测小儿碳酸钙d3颗粒中维生素d3有关物质的方法
CN112697905A (zh) * 2020-12-09 2021-04-23 国药控股星鲨制药(厦门)有限公司 一种高效液相色谱-串联质谱法测定维生素d制剂中维生素d3含量的方法
CN115308338A (zh) * 2022-08-24 2022-11-08 哈药集团技术中心 一种维生素d3滴剂中维生素d3有关物质的检测方法
CN115453033A (zh) * 2022-09-29 2022-12-09 山东达因金控儿童制药有限公司 一种维生素d滴剂中维生素d含量的检测方法

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1240209A (zh) * 1998-06-23 2000-01-05 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 维生素d3的分离方法
CN1837813A (zh) * 2006-04-29 2006-09-27 山东达因海洋生物制药股份有限公司 一种测定泡腾制剂中维生素d含量的方法
CN101467048A (zh) * 2006-06-06 2009-06-24 霍夫曼-拉罗奇有限公司 改良的维生素d测量方法
CN102253130A (zh) * 2010-12-24 2011-11-23 天津天狮生物发展有限公司 测定复合维生素中维生素a、维生素d和维生素e的方法

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1240209A (zh) * 1998-06-23 2000-01-05 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 维生素d3的分离方法
CN1837813A (zh) * 2006-04-29 2006-09-27 山东达因海洋生物制药股份有限公司 一种测定泡腾制剂中维生素d含量的方法
CN101467048A (zh) * 2006-06-06 2009-06-24 霍夫曼-拉罗奇有限公司 改良的维生素d测量方法
CN102253130A (zh) * 2010-12-24 2011-11-23 天津天狮生物发展有限公司 测定复合维生素中维生素a、维生素d和维生素e的方法

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
HPLC法测定多维片中痕量维生素D3的含量;王乔飞;《淮阴工学院学报》;20100630;第19卷(第3期);第82-84页 *
正相高效液相测法定碳酸钙颗粒剂中微量维生素D3含量;张学农 等;《新疆医科大学学报》;20020331;第25卷(第1期);第39-41页 *
正相高效液相色谱法测定鱼肝油中的维生素D3;黄秋研 等;《食品研究与开发》;20121130;第33卷(第11期);第173-175页 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN105372337A (zh) 2016-03-02

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN105372337B (zh) 一种检测维生素d滴剂中维生素d含量的方法
WO2017152689A1 (zh) 伊马替尼基因杂质的高灵敏度分析方法
Mhaske et al. RP-HPLC method for simultataneous determination of amlodipine besylate, valsartan, telmisartan, hydrochlorothiazide and chlorthalidone: application to commercially available drug products
CN105699524B (zh) 一种替格瑞洛中异构体杂质含量的检测方法
CN107543872B (zh) 通过手性高效液相色谱法分离测定甲苯磺酸依度沙班水合物与其异构体杂质的方法
CN101876650A (zh) 一种烟用水基胶中甲醛含量的测定方法
CN115097023A (zh) 佐米胺有关物质的高效液相色谱检测方法
Ghosh et al. Development of stability indicating RP-HPLC method and validation for the estimation of vilazodone hydrochloride
CN108982695A (zh) 衍生化hplc法测定药物或其中间体中叠氮化合物的方法
CN106093238A (zh) 一种同时测定丁苯酞及其有关物质的方法
CN110082448A (zh) 一种d-泛酸钙杂质的检测方法
CN106033079B (zh) 甲磺酸达比加群酯起始物料f中有关物质咪唑的检测方法
CN108828089A (zh) 衍生化HPLC-UV/Vis法测定氯霉素或其制剂中4-硝基苯甲醛的方法
CN103149311B (zh) 一种烟用香精香料中芝麻酚含量的测定方法
CN111122727A (zh) 人血浆中同时测定伊马替尼及伊马替尼代谢物浓度的方法
CN103558312B (zh) 一种测定卷烟主流烟气中苯并[a]芘含量的方法
CN105301131A (zh) 一种使用upc2-elsd测定分子蒸馏单硬脂酸甘油酯中单甘酯的方法
CN109507350A (zh) 一种测定坎地沙坦乙酯中2-氰基-4’-溴甲基联苯含量的方法
CN104597157A (zh) 一种脂溶性铂配合物及其制剂有关物质的测定方法
CN111426760B (zh) 一种多索茶碱原料药中基因毒性杂质的测定方法
CN104655757B (zh) Bc-02的液相色谱检测方法
Singh et al. Development and validation of a RP-HPLC method for estimation of prulifloxacin in tablet dosage form
CN110231416B (zh) 一种利用hplc测定2-碘酰基苯甲酸有关物质的方法
CN1785306B (zh) 复方四维女贞子制剂的质量控制方法
CN105628807B (zh) 一种1‑Boc‑4‑氨基哌啶的质量检测方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant