CN105362285B - 一种具有促进胃排空作用的复合多糖的制备方法及复合多糖的应用 - Google Patents
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Abstract
一种具有促进胃排空作用的复合多糖的制备方法及复合多糖的应用,属于天然产物提取技术,其工艺步骤为:(1)将一定量炒麦芽、太子参、山楂和陈皮混合后,沸水浴提取后再浓缩;(2)往上述浓缩液中加入乙醇沉淀多糖,多糖再经有机试剂脱蛋白、透析等步骤,制备到高糖含量的复合多糖。本发明的优点是:多糖制备步骤简单,多糖得率达到5%以上,糖含量达到90%以上;制备所得多糖具有较好的促进胃排空功能;生产工艺简单、应用前景广。
Description
技术领域
本发明属于天然产物提取技术领域。
背景技术
多糖由单糖通过糖苷键连接而成,由几十至几万个单糖构成,相对分子质量较大,是高分子化合物。依据多糖来源不同,可分为植物多糖、动物多糖和微生物多糖。现今,已有几百种多糖从天然产物中分离出来,诸多研究发现灵芝多糖、人参多糖、黄芪多糖、山药多糖、黑木耳多糖、冬虫夏草多糖及茶叶多糖等都具有良好的生物活性,其中一些多糖组分具有良好的胃肠道调节功能,如交叉菜属多糖能抑制结肠炎,海藻硫酸化多糖能抑制非甾体抗炎药引起的胃肠道损伤,党参多糖有提高小肠动力,促进胃液分泌,增加胃粘膜的厚度和胃壁,促进微型肠道绒毛的增长等作用。太子参、陈皮、麦芽(炒)、山楂,均为食源性或者药食同源性材料,因此广受民众青睐,常用于改善胃肠道消化功能障碍。上述药材均富含多糖组分,因此拟依据中医药物复配思想,将上述几种原料进行复配后提取混合多糖组分并进行初步纯化,以期获得具有较好地促进胃排空功能的复合多糖,进一步提升原料价值和拓宽应用范围。
发明内容
本发明的目的在于提供一种具有促进胃排空作用的复合多糖的制备方法及复合多糖的应用。
本发明是通过以下技术方案实现的。
本发明所述的一种具有促进胃排空作用的复合多糖的制备方法,其特征是按以下步骤。
(1)原料提取:取17质量份数炒麦芽、11质量份数太子参、11质量份数山楂和2质量份数陈皮,经除杂后混合,于沸水浴条件下浸煮2 h后,将水提混合物过滤;剩余残渣再加水于沸水浴下浸煮2 h,继续收集水提混合物并过滤,然后将上述滤液合并,真空减压浓缩至一定体积。
(2)多糖制备:往步骤(1)提取浓缩液中加入质量分数为95%的乙醇进行沉淀,乙醇的终浓度为质量分数60~80%,静置12 h以上再4800 rpm离心10 min,收集沉淀,之后加水复溶,用Sevag法脱蛋白,反复脱除至无明显蛋白层,4800 rpm离心10 min,收集多糖溶液;再将该多糖溶液装入截留相对分子质量为3500 Da的透析袋中透析3天;透析结束后取出多糖溶液,旋转浓缩、冷冻干燥,便可得到复合多糖。
本发明所述的一种具有促进胃排空作用的复合多糖的制备方法制备的复合多糖在促进胃排空功能中的应用。
本发明的优点是:1、制备工艺简单,多糖得率达到5%以上,糖含量达到90%以上;2、复合多糖具有较好的促进胃排空功能;3、应用前景广。
具体实施方式
本发明将通过以下实施例作进一步说明。
实施例1。
取170 g炒麦芽、110 kg太子参、110 g山楂和20 g陈皮,经除杂后混合,于沸水浴条件下浸煮2 h后,将水提混合物过滤;剩余残渣再加水于沸水浴下浸煮2 h,继续收集水提混合物并过滤,然后将上述滤液合并,真空减压浓缩至2.8 L。加入质量分数为95%的乙醇进行沉淀,乙醇的终浓度为质量分数80%,静置12 h以上再4800 rpm离心10 min,收集沉淀,之后加水复溶,用Sevag法脱蛋白,反复脱除至无明显蛋白层,4800 rpm离心10 min,收集多糖溶液;再将该多糖溶液装入截留相对分子质量为3500 Da的透析袋中透析3天;透析结束后取出多糖溶液,旋转浓缩、冷冻干燥,便可得到复合多糖,得率为5.4%。
实施例2。
取170 g炒麦芽、110 kg太子参、110 g山楂和20 g陈皮,经除杂后混合,于沸水浴条件下浸煮2 h后,将水提混合物过滤;剩余残渣再加水于沸水浴下浸煮2 h,继续收集水提混合物并过滤,然后将上述滤液合并,真空减压浓缩至2.8 L。加入质量分数为95%的乙醇进行沉淀,乙醇的终浓度为质量分数60%,静置12 h以上再4800 rpm离心10 min,收集沉淀,之后加水复溶,用Sevag法脱蛋白,反复脱除至无明显蛋白层,4800 rpm离心10 min,收集多糖溶液;再将该多糖溶液装入截留相对分子质量为3500 Da的透析袋中透析3天;透析结束后取出多糖溶液,旋转浓缩、冷冻干燥,便可得到复合多糖,得率为5.7%。
实施例3。
取170 g炒麦芽、110 kg太子参、110 g山楂和20 g陈皮,经除杂后混合,于沸水浴条件下浸煮2 h后,将水提混合物过滤;剩余残渣再加水于沸水浴下浸煮2 h,继续收集水提混合物并过滤,然后将上述滤液合并,真空减压浓缩至4.6 L。加入质量分数为95%的乙醇进行沉淀,乙醇的终浓度为质量分数80%,静置12 h以上再4800 rpm离心10 min,收集沉淀,之后加水复溶,用Sevag法脱蛋白,反复脱除至无明显蛋白层,4800 rpm离心10 min,收集多糖溶液;再将该多糖溶液装入截留相对分子质量为3500 Da的透析袋中透析3天;透析结束后取出多糖溶液,旋转浓缩、冷冻干燥,便可得到复合多糖,得率为5.1%。
实施例4。
取170 g炒麦芽、110 kg太子参、110 g山楂和20 g陈皮,经除杂后混合,于沸水浴条件下浸煮2 h后,将水提混合物过滤;剩余残渣再加水于沸水浴下浸煮2 h,继续收集水提混合物并过滤,然后将上述滤液合并,真空减压浓缩至4.6 L。加入质量分数为95%的乙醇进行沉淀,乙醇的终浓度为质量分数60%,静置12 h以上再4800 rpm离心10 min,收集沉淀,之后加水复溶,用Sevag法脱蛋白,反复脱除至无明显蛋白层,4800 rpm离心10 min,收集多糖溶液;再将该多糖溶液装入截留相对分子质量为3500 Da的透析袋中透析3天;透析结束后取出多糖溶液,旋转浓缩、冷冻干燥,便可得到复合多糖,得率为5.3%。
下面结合上述具体实施例中所得复合多糖促进胃排空的功能作进一步说明。
1、材料与方法。
昆明小鼠(体重20.0±2.0 g,雌雄各半)由南昌大学实验动物科学部提供;按照上述具体实施例1所得复合多糖。透析袋(截留分子量3500)、葡萄糖、半乳糖醛酸购于上海国药集团化学试剂有限公司。
2、主要仪器与设备。
TU-1900紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司)、Milli-Q超纯水仪(美国Millipore公司)等。
3、实验方法。
3.1中性糖含量测定。
以葡萄糖为标准品,采用苯酚-硫酸法测定样品中中性糖的含量。
3.2糖醛酸含量测定。
以半乳糖醛酸为标准品,采用硫酸-咔唑法测定样品中糖醛酸的含量。
3.3对小鼠胃排空的影响。
取昆明小鼠24只,体重20.0±2.0 g,雌雄各半,随机分成空白组、复合多糖组(灌胃剂量分别为100 mg/kg小鼠体重)2组。实验前称体质量,非空白组按照每10 g小鼠体重灌胃多糖体积数0.1 mL给药,空白组给予等体积生理盐水,每日一次,连续7天。第7天禁食不禁水12 h,称体质量,给药2 h后,灌胃质量体积浓度(mg/mL)为0.1甲基橙溶液0.2 mL,眼球取血,15 min后,将小鼠脱臼处死,剖腹取胃,置于烧杯中,加入10 mL蒸馏水,用手术剪沿胃大弯剪开,将胃内容物用蒸馏水冲洗,再用NaHCO3(质量体积浓度为0.05 g/mL)调节pH至6.0~6.5,所得溶液再离心(离心速度5000 r/min,离心时间10 min),所得上清液在波长为420 nm处测定吸光度。取0.2 mL质量体积浓度(mg/mL)为0.1甲基橙溶液,用蒸馏水定容至10 mL,摇匀后测定吸光度,作为基数甲基橙吸光度。按下列公式计算小鼠胃排空率。
式中A 1为基数甲基橙吸光度,A 2位胃中残留甲基橙吸光度。采用SPASS 19.0进行方差齐性和正态检验。
4、实验结果。
复合多糖的中性糖含量为46.6%,糖醛酸含量为45.7%,即总糖含量高达92.3%。表1显示,与空白对照组比较,发现复合多糖能显著促进小鼠胃排空(P<0.01)。
表1 复合多糖胃排空功能
组别 | 给药剂量/(mg/kg小鼠体重) | 胃排空率/% |
空白对照组 | - | 66.43±6.89 |
复合多糖组 | 100 | 81.20±8.26** |
注:与空白对照组比较:**P<0.01。
Claims (2)
1.一种具有促进胃排空作用的复合多糖的制备方法,其特征是按如下步骤:
(1)取17质量份数炒麦芽、11质量份数太子参、11质量份数山楂和2质量份数陈皮,经除杂后混合,于沸水浴条件下浸煮2 h后,将水提混合物过滤;剩余残渣再加水于沸水浴下浸煮2 h,继续收集水提混合物并过滤,然后将上述滤液合并,真空减压浓缩;
(2)往步骤(1)提取浓缩液中加入质量分数为95%的乙醇进行沉淀,乙醇的终浓度为质量分数60~80%,静置12 h以上再4800 rpm离心10 min,收集沉淀,之后加水复溶,用Sevag法脱蛋白,反复脱除至无明显蛋白层,4800 rpm离心10 min,收集多糖溶液;再将该多糖溶液装入截留相对分子质量为3500 Da的透析袋中透析3天;透析结束后取出多糖溶液,旋转浓缩、冷冻干燥,得到复合多糖。
2.权利要求1所述的制备方法制备的复合多糖在制备促进胃排空功能药物中的应用。
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