CN103254322A - 怀牛膝多糖的闪式提取方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种怀牛膝多糖的闪式提取方法,其特征在于所述的方法包括下列步骤:将怀牛膝粉末加水闪式提取,将提取液离心并闪式浓缩;向浓缩液中加入无水乙醇自然醇沉,静置后离心得到沉淀物;将沉淀物加水充分溶解,过滤后通过闪式浓缩器浓缩;将浓缩液通过真空干燥得到怀牛膝多糖产品。本发明可以缩短提取时间,减少提取溶剂用量,提高提取率。本发明提取工艺简便,设备运行和维护成本低。利于保持多糖的结构完整性和生物活性。
Description
技术领域
本发明涉及一种植物多糖的制备方法,具体地说是涉及一种怀牛膝多糖的闪式提取方法。
背景技术
怀牛膝是著名的道地药材“四大怀药”之一,产自河南省焦作市。是常用而又珍贵的保健药材,因具有神奇的药效、独特的滋补作用和悠久的历史而被我国历代中医典籍视为中药珍品,在历史上享有贡品之誉。河南省焦作市以其独特的地理环境、传统的种植技术和炮制工艺,造就了怀牛膝作为道地药材区别于其他产地牛膝的优良品质,获得国家原产地域产品保护,国家已把怀牛膝等“四大怀药”列人“国药之宝”的开发计划中。
怀牛膝是我国的传统中药,有极高的医疗保健价值。怀牛膝富含的可溶性多糖具有显著的抑制肿瘤生长、抗放射、抗衰老、抗菌镇痛等功效,能明显增强人体免疫功能。此外,牛膝多糖还具有分子量小、无毒副作用等优点,即可以口服,又可以注射,拥有较好的应用前景。
CN102617749A公开了一种牛膝多糖的提取方法,其中牛膝粉在蒸馏水中浸泡的时间为50至70小时,提取时间过长。CN102558380A公开了一种制备牛膝多糖的方法,该方法除了提取时间长较长外,最大的问题是提取温度为80℃,高温可能引起多糖的分解、氧化等现象发生,对多糖高级结构和生物活性也可能带来不利影响。而且,上述两专利所述均不是“四大怀药”之一的怀牛膝。
发明内容
本发明的目的在于提供一种怀牛膝多糖的提取与纯化方法,以克服现有技术中存在的不足,主要解决现有的提取过程中提取时间较长,提取率较低,多糖结构和生物活性破坏较大的问题。
本发明是通过以下技术方案实现:
本发明涉及一种怀牛膝多糖的提取与纯化方法,它包括如下工艺步骤:
(1)闪式提取:称取一定重量怀牛膝粉,加入粗粉重量10~15倍的纯净水,混合均匀后转移至闪式提取器容器中,用闪式提取器进行提取。残渣同法再提取一次,单次提取时间2~3min,提取温度50~60℃,合并两次提取液。
(2)离心:将步骤(1)中得到的提取液在4℃、4000~5000转/min下离心8~10min。
(3)浓缩:将步骤(2)中得到的上清液用闪式浓缩器进行浓缩。
(4)醇沉:向步骤(3)得到的浓缩液中加入浓缩液3~4倍体积的无水乙醇进行醇沉,4℃条件下静置24h后离心得到沉淀物。
(5)除杂:将步骤(4)得到的沉淀物用沉淀物质量30~40倍的纯净水溶解,将得到的溶液过滤、浓缩即为怀牛膝多糖溶液。
(6)干燥:将第步骤(5)得到的多糖溶液在40~60℃条件下真空干燥,得到怀牛膝多糖粉末。
本发明所述怀牛膝多糖的闪式提取方法与已有生产技术相比具有突出的实质性特点和显著进步:
1.多糖提取溶剂用量少、提取时间短、提取率高。提取工艺简便,设备运行和维护成本低。
2.提取过程处于适宜低温下,有效保持了多糖的结构完整性和生物活性。
具体实施方式
以下实例将对本发明作进一步说明。本实施例在以本发明技术方案为前提下进行,给出了详细的实施方式和过程。尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细的说明,所属领域的技术人员应当理解:依然可以对本发明的具体实施方式进行修改或者对部分技术特征进行等同替换,而不脱离本发明技术方案的精神,其均应涵盖在本发明请求保护的技术方案范围中。
实施例1
本实施方式从怀牛膝中提取牛膝多糖的方法按以下步骤实现:
(1)闪式提取:称取20g怀牛膝粉,加入200mL纯净水,混合均匀后转移至闪式提取器容器中,用闪式提取器进行提取。残渣同法再提取一次,单次提取时间2min,提取温度50℃,合并两次提取液。
(2)离心:将步骤(1)中得到的提取液在4℃、4000转/min下离心8min。
(3)浓缩:将步骤(2)中得到的上清液用闪式浓缩器进行浓缩。
(4)醇沉:向步骤(3)得到的浓缩液中加入浓缩液3倍体积的无水乙醇进行醇沉,4℃条件下静置24h后离心得到沉淀物。
(5)除杂:将步骤(4)得到的沉淀物用沉淀物质量30倍的纯净水溶解,将得到的溶液过滤、浓缩即为怀牛膝多糖溶液。
(6)干燥:将第步骤(5)得到的多糖溶液在40℃条件下真空干燥,得到怀牛膝多糖提取物2.52g,产品得率12.6%。
实施例2
本实施方式从怀牛膝中提取牛膝多糖的方法按以下步骤实现:
(1)闪式提取:称取50g怀牛膝粉,加入750mL纯净水,混合均匀后转移至闪式提取器容器中,用闪式提取器进行提取。残渣同法再提取一次,单次提取时间3min,提取温度60℃,合并两次提取液。
(2)离心:将步骤(1)中得到的提取液在4℃、5000转/min下离心10min。
(3)浓缩:将步骤(2)中得到的上清液用闪式浓缩器进行浓缩。
(4)醇沉:向步骤(3)得到的浓缩液中加入浓缩液4倍体积的无水乙醇进行醇沉,4℃条件下静置24h后离心得到沉淀物。
(5)除杂:将步骤(4)得到的沉淀物用沉淀物质量40倍的纯净水溶解,将得到的溶液过滤、浓缩即为怀牛膝多糖溶液。
(6)干燥:将第步骤(5)得到的多糖溶液在60℃条件下真空干燥,得到怀牛膝多糖提取物5.3g,产品得率10.6%。
实施例3
(1)闪式提取:称取100g怀牛膝粉,加入1500mL纯净水,混合均匀后转移至闪式提取器容器中,用闪式提取器进行提取。残渣同法再提取一次,单次提取时间3min,提取温度50℃,合并两次提取液。
(2)离心:将步骤(1)中得到的提取液在4℃,转速5000转/min条件下离心8min。
(3)浓缩:将步骤(2)中得到的上清液用闪式浓缩器进行浓缩。
(4)醇沉:向步骤(3)得到的浓缩液中加入浓缩液4倍体积的无水乙醇进行醇沉,4℃条件下静置24h后离心得到沉淀物。
(5)除杂:将步骤(4)得到的沉淀物用沉淀物质量30倍的纯净水溶解,将得到的溶液过滤、浓缩即为怀牛膝多糖溶液。
(6)干燥:将第步骤(5)得到的多糖溶液在50℃条件下真空干燥,得到怀牛膝多糖提取物12.1g,产品得率12.1%。
当然,以上所述仅是本发明的一种实施方式而已,应当指出本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明原理的前提下,还可以做出若干改进和润饰,这些改进和润饰均属于本发明权利要求的保护范围之内。
Claims (7)
1.一种怀牛膝多糖的闪式提取方法,它包括如下工艺步骤:
(1)闪式提取:称取一定重量怀牛膝粉,加入粗粉重量10~15倍的纯净水,混合均匀后转移至闪式提取器容器中,用闪式提取器进行提取,保留提取液,将过滤后剩余的残渣同法再提取一次,每次提取时间2~3min,提取温度50~60℃,合并两次提取液。
(2)离心:将步骤(1)中得到的提取液在4℃、4000~5000转/min条件下离心8~10min,得到上清液。
(3)浓缩:将步骤(2)中得到的上清液用闪式浓缩器进行浓缩,得到浓缩液。
(4)醇沉:向步骤(3)得到的浓缩液中加入浓缩液3~4倍体积的无水乙醇进行醇沉,4℃条件下静置24h后离心得到沉淀物。
(5)除杂:将步骤(4)得到的沉淀物用沉淀物质量30~40倍的纯净水溶解,将得到的溶液过滤、浓缩即为怀牛膝多糖溶液。
(6)干燥:将第步骤(5)得到的多糖溶液在40~60℃条件下真空干燥,得到怀牛膝多糖粉末。
2.根据权利要求1所述的怀牛膝多糖的闪式提取方法,其特征在于:步骤(1)中所述提取过程在闪式提取器中进行,提取温度50~60℃。
3.根据权利要求1所述怀牛膝多糖的闪式提取方法,其特征在于:步骤(2)中所述离心温度是4℃,离心速度是4000~5000转/min,离心时间是8~10min。
4.根据权利要求1所述怀牛膝多糖的闪式提取方法,其特征在于:步骤(3)或(5)中所述的浓缩是在闪式浓缩器中进行,真空度-0.6~-0.8MPa,温度50~60℃,浓缩时间20~25s。
5.根据权利要求1所述怀牛膝多糖的闪式提取方法,其特征在于:步骤(4)所述醇沉采用的是无水乙醇,加入量为所述浓缩液体积的3~4倍,温度4℃。
6.根据权利要求1所述怀牛膝多糖的闪式提取方法,其特征在于:步骤(5)所述纯净水的添加量为沉淀物质量的30~40倍,保证沉淀物被充分溶解。过滤采用的是砂芯漏斗。
7.根据权利要求1所述怀牛膝多糖的闪式提取方法,其特征在于:步骤(6)所述的干燥温度是40~60℃。
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