CN105001351A - 香菇多糖的提取方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种香菇多糖的提取方法，包括以下步骤：1)将香菇乙醇提取，取滤渣备用；2)将滤渣水提，收集滤液备用；3)将滤液浓缩浸膏，乙醇沉淀，离心得沉淀；4)将沉淀依次无水乙醇、丙酮分别洗涤，将洗涤后的沉淀用蒸馏水溶解，过截留分子量为100万的中空纤维膜，收集浓缩液，然后将浓缩液过截留分子量为180万的中空纤维膜，收集透过液离心，过滤，取滤液备用；5)取滤液喷雾干燥，即为香菇多糖。本发明的香菇多糖纯度高，色泽洁白，且抗肿瘤活性强。

Description

香菇多糖的提取方法
技术领域
本发明属于生物提取技术领域，具体涉及香菇多糖的提取方法。
背景技术
香菇多糖是香菇的重要化学成分之一，能增强腹腔巨噬细胞的吞噬能力，提高机体抗肿瘤功效且无毒副作用，是理想的免疫促进剂。香菇中多糖成分复杂，主要有葡萄糖、木糖和半乳糖组成，香菇多糖的抗肿瘤活性与分子量有关。然而，香菇多糖由于提取工艺落后，得到的产品呈黄褐色，这是由于香菇多糖中色素含量较多，影响了香菇多糖的色泽，不仅如此，杂质含量过高的香菇多糖的抗肿瘤活性也较差。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种香菇多糖的提取方法，该方法得到的香菇多糖纯度高、颜色正，且抗癌活性好。
本发明提供的技术方案是香菇多糖的提取方法，包括以下步骤：
1)将香菇破碎，用6～12倍重量80～95v％乙醇回流提取2～3次，每次回流2～3h，过滤，取滤渣备用；
2)将滤渣用6～12倍重量的水回流提取2～3次，每次提取2～3h，过滤，收集滤液备用；
3)将滤液浓缩至60℃下相对密度为1.15～1.25的浸膏，加入乙醇沉淀，离心得沉淀；
4)将沉淀依次用2～4倍重量的无水乙醇、丙酮分别洗涤，将洗涤后的沉淀用2～4倍蒸馏水溶解，过截留分子量为100万的中空纤维膜，收集浓缩液，然后将浓缩液过截留分子量为180万的中空纤维膜，收集透过液离心，过滤，取滤液备用；
5)取滤液喷雾干燥，即为香菇多糖。
步骤3)中，往浸膏中加入90～95v％的乙醇至乙醇含量为80～85v％。
步骤4)中，洗涤后的沉淀溶于蒸馏水后，先过截留分子量为100万的中空纤维膜，这样活性分子量低于100万的多糖以及低聚糖、单糖和色素均随着透过液流出，收集的浓缩液过截留分子量为180万的中空纤维膜，大分子蛋白质以及分子量高于180万的多糖被截留，收集透过液。
本发明两次过中空纤维膜，不仅可以最大程度地去除杂质和色素，以保证成品纯度和色泽，且提取得到的香菇多糖分子量在100万～180万之间，其抗肿瘤活性比其他区间范围内的多糖活性高。
具体实施方式
以下具体实施例对本发明作进一步阐述，但不作为对本发明的限定。
实施例1
1)将香菇破碎，用6倍重量80v％乙醇回流提取2次，每次回流2h，过滤，取滤渣备用；
2)将滤渣用6倍重量的水回流提取2次，每次提取2h，过滤，收集滤液备用；
3)将滤液浓缩至60℃下相对密度为1.1的浸膏，往浸膏中加入90v％的乙醇至乙醇含量为80v％沉淀，离心，得到沉淀；
4)将沉淀依次用2倍重量的无水乙醇、丙酮分别洗涤，将洗涤后的沉淀用2倍蒸馏水溶解，过截留分子量为100万的中空纤维膜，收集浓缩液，然后将浓缩液过截留分子量为180万的中空纤维膜，收集透过液离心，过滤，取滤液备用；
5)取滤液喷雾干燥，即为香菇多糖。用苯酚-硫酸法测定多糖含量为90.0％，颜色为灰白色。
对照组
1)将香菇破碎，用6倍重量80v％乙醇回流提取2次，每次回流2h，过滤，取滤渣备用；
2)将滤渣用6倍重量的水回流提取2次，每次提取2h，过滤，收集滤液备用；
3)将滤液浓缩至60℃下相对密度为1.1的浸膏，往浸膏中加入90v％的乙醇至乙醇含量为80v％沉淀，离心，得到沉淀；
4)将沉淀依次用2倍重量的无水乙醇、丙酮分别洗涤，将洗涤后的沉淀用2倍蒸馏水溶解，上D303型大孔树脂，用水洗脱至流出液无色透明，收集流出液，浓缩，喷雾干燥，即为香菇多糖。用苯酚-硫酸法测定多糖含量为85.1％，颜色为浅黄色。
实施例2
1)将香菇破碎，用12倍重量95v％乙醇回流提取3次，每次回流3h，过滤，取滤渣备用；
2)将滤渣用12倍重量的水回流提取3次，每次提取3h，过滤，收集滤液备用；
3)将滤液浓缩至60℃下相对密度为1.3的浸膏，往浸膏中加入95v％的乙醇至乙醇含量为85v％沉淀，离心，得到沉淀；
4)将沉淀依次用4倍重量的无水乙醇、丙酮分别洗涤，将洗涤后的沉淀用4倍蒸馏水溶解，过截留分子量为100万的中空纤维膜，收集浓缩液，然后将浓缩液过截留分子量为180万的中空纤维膜，收集透过液离心，过滤，取滤液备用；
5)取滤液喷雾干燥，即为香菇多糖。用苯酚-硫酸法测定多糖含量为91.3％，颜色为灰白色。
实施例3
1)将香菇破碎，用10倍重量90v％乙醇回流提取2次，每次回流2h，过滤，取滤渣备用；
2)将滤渣用10倍重量的水回流提取2次，每次提取2h，过滤，收集滤液备用；
3)将滤液浓缩至60℃下相对密度为1.2的浸膏，往浸膏中加入95v％的乙醇至乙醇含量为85v％沉淀，离心，得到沉淀；
4)将沉淀依次用3倍重量的无水乙醇、丙酮分别洗涤，将洗涤后的沉淀用3倍蒸馏水溶解，过截留分子量为100万的中空纤维膜，收集浓缩液，然后将浓缩液过截留分子量为180万的中空纤维膜，收集透过液离心，过滤，取滤液备用；
5)取滤液喷雾干燥，即为香菇多糖。用苯酚-硫酸法测定多糖含量为91.6％，颜色为灰白色。
为验证本发明的香菇多糖具有较强的免疫促进作用，现进行以下动物实验。
1、抗Lewis肺癌活性实验
取清洁级C57BL/6小鼠30只，小鼠体重18～20g，随机分为3组，每组10只，分别为实验组，阴性对照组和阳性对照组。
取生长旺盛的小鼠Lewis肺癌肿瘤细胞以常规方法制成匀浆约1～2×107cfu/ml的癌细胞悬浮液，于每只小鼠的右腋皮下接种0.2ml癌细胞悬浮液，24h后，各组开始每日口服给药一次，实验组给药实施例1的香菇多糖，阴性对照组给药生理盐水，阳性对照组给药对照例1的香菇多糖，给药剂量见下表1，连续给药10天。停药后次日处死所有动物，截取足趾称重并计算肿瘤抑制率。肿瘤生长抑制率按下列公式计算，抑制率(％)＝(阴性对照组瘤重-实验组/阳性对照组瘤重)/阴性对照组瘤重×100。
表1
剂量(mg/kg) 动物增重(g) 瘤重(g) 抑制率(％)
阴性对照组 1ml 3.0 2.80±0.33
阳性对照组 2000 2.9 2.08±0.31 25.71*
实验组 2000 2.0 1.51±0.26 46.07**
注：与阴性对照组相比，*p＜0.05，**p＜0.01。
由上表可知，采用常规方法提取的香菇多糖对小鼠Lewis肺癌的抑制率达25.71％，而本发明提取的香菇多糖对小鼠Lewis肺癌的抑制率高达46.07％，明显优于常规香菇多糖。
2、抗C-26结肠癌活性实验
取清洁级C57BL/6小鼠30只，小鼠体重18～20g，随机分为3组，每组10只，分别为实验组，阴性对照组和阳性对照组。
取生长旺盛的小鼠C-26结肠癌肿瘤细胞以常规方法制成匀浆约1～2×107cfu/ml的癌细胞悬浮液，于每只小鼠的右腋皮下接种0.2ml癌细胞悬浮液，24h后，各组开始每日口服给药一次，实验组给药实施例1的香菇多糖，阴性对照组给药生理盐水，阳性对照组给药对照例1的香菇多糖，给药剂量见下表2，连续给药10天。停药后次日处死所有动物，截取足趾称重并计算肿瘤抑制率。肿瘤生长抑制率按下列公式计算，抑制率(％)＝(阴性对照组瘤重-实验组/阳性对照组瘤重)/阴性对照组瘤重×100。
表2
剂量(mg/kg) 动物增重(g) 瘤重(g) 抑制率(％)
阴性对照组 1ml 3.8 2.99±0.26
阳性对照组 2000 3.8 2.36±0.23 21.07**
实验组 2000 2.4 1.60±0.06 46.49**
注：与阴性对照组相比，，*p＜0.05，**p＜0.01。
由上表可知，采用常规方法提取的香菇多糖对小鼠C-26结肠癌的抑制率达21.07％，而本发明提取的香菇多糖对小鼠Lewis肺癌的抑制率高达46.49％，明显优于常规香菇多糖。

Claims (2)

1.香菇多糖的提取方法，其特征在于：包括以下步骤：
1)将香菇破碎，用6～12倍重量80～95v％乙醇回流提取2～3次，每次回流2～3h，过滤，取滤渣备用；
2)将滤渣用6～12倍重量的水回流提取2～3次，每次提取2～3h，过滤，收集滤液备用；
3)将滤液浓缩至60℃下相对密度为1.15～1.25的浸膏，加入乙醇沉淀，离心得沉淀；
4)将沉淀依次用2～4倍重量的无水乙醇、丙酮分别洗涤，将洗涤后的沉淀用2～4倍蒸馏水溶解，过截留分子量为100万的中空纤维膜，收集浓缩液，然后将浓缩液过截留分子量为180万的中空纤维膜，收集透过液离心，过滤，取滤液备用；
5)取滤液喷雾干燥，即为香菇多糖。
2.根据权利要求1所述的香菇多糖的提取方法，其特征在于：步骤3)中，往浸膏中加入90～95v％的乙醇至乙醇含量为80～85v％。
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Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107373150A (zh) * 2017-08-31 2017-11-24 桂林兴安县唐培开畜牧养殖有限公司 一种哺乳母猪饲料及其制备方法
CN107509872A (zh) * 2017-08-31 2017-12-26 桂林兴安县唐培开畜牧养殖有限公司 一种怀孕母猪饲料及其制备方法
CN108186801A (zh) * 2018-03-01 2018-06-22 漯河食品职业学院 一种香菇多糖保健口服液及其制备方法

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1297946A (zh) * 1999-12-01 2001-06-06 上海国宝企业发展中心 一种用菇根为原料提取香菇多糖的方法
CN1613876A (zh) * 2004-09-14 2005-05-11 武汉大学 一种具有抗肿瘤活性的三螺旋香菇多糖及其制法和用途
CN101265303A (zh) * 2008-04-24 2008-09-17 吉林大学 一种以废弃香菇培养基为原料提取香菇多糖的方法
CN101632641A (zh) * 2009-08-14 2010-01-27 上海慈瑞医药科技有限公司 一种香菇多糖冻干粉针剂及其制备方法
CN201990619U (zh) * 2011-03-16 2011-09-28 厦门市威士邦膜科技有限公司 一种香菇多糖的提取、分离纯化及浓缩装置
CN104119456A (zh) * 2014-07-04 2014-10-29 中国科学院过程工程研究所 一种利用多级膜过程分离提纯食（药）用菌活性组分的方法

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1297946A (zh) * 1999-12-01 2001-06-06 上海国宝企业发展中心 一种用菇根为原料提取香菇多糖的方法
CN1613876A (zh) * 2004-09-14 2005-05-11 武汉大学 一种具有抗肿瘤活性的三螺旋香菇多糖及其制法和用途
CN101265303A (zh) * 2008-04-24 2008-09-17 吉林大学 一种以废弃香菇培养基为原料提取香菇多糖的方法
CN101632641A (zh) * 2009-08-14 2010-01-27 上海慈瑞医药科技有限公司 一种香菇多糖冻干粉针剂及其制备方法
CN201990619U (zh) * 2011-03-16 2011-09-28 厦门市威士邦膜科技有限公司 一种香菇多糖的提取、分离纯化及浓缩装置
CN104119456A (zh) * 2014-07-04 2014-10-29 中国科学院过程工程研究所 一种利用多级膜过程分离提纯食（药）用菌活性组分的方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
张红旭 等: "特定分子量范围内香菇多糖的分离研究", 《中国药房》 *
王应平 等: "膜技术在多糖分离 、浓缩中的应用研究进展", 《甘肃科技》 *

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107373150A (zh) * 2017-08-31 2017-11-24 桂林兴安县唐培开畜牧养殖有限公司 一种哺乳母猪饲料及其制备方法
CN107509872A (zh) * 2017-08-31 2017-12-26 桂林兴安县唐培开畜牧养殖有限公司 一种怀孕母猪饲料及其制备方法
CN108186801A (zh) * 2018-03-01 2018-06-22 漯河食品职业学院 一种香菇多糖保健口服液及其制备方法

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