CN105338812A - 苯并咪唑衍生物及其用途 - Google Patents

苯并咪唑衍生物及其用途 Download PDF

Info

Publication number
CN105338812A
CN105338812A CN201480027084.6A CN201480027084A CN105338812A CN 105338812 A CN105338812 A CN 105338812A CN 201480027084 A CN201480027084 A CN 201480027084A CN 105338812 A CN105338812 A CN 105338812A
Authority
CN
China
Prior art keywords
certain embodiments
unsubstituted
replacement
ring
group
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201480027084.6A
Other languages
English (en)
Inventor
S.L.林奎斯特
S.L.布赫瓦尔德
D.塔迪夫
N.朱伊
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Whitehead Institute for Biomedical Research
Massachusetts Institute of Technology
Original Assignee
Whitehead Institute for Biomedical Research
Massachusetts Institute of Technology
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Whitehead Institute for Biomedical Research, Massachusetts Institute of Technology filed Critical Whitehead Institute for Biomedical Research
Publication of CN105338812A publication Critical patent/CN105338812A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D235/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, condensed with other rings
    • C07D235/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, condensed with other rings condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D235/04—Benzimidazoles; Hydrogenated benzimidazoles
    • C07D235/06—Benzimidazoles; Hydrogenated benzimidazoles with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached in position 2
    • C07D235/16—Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/4164—1,3-Diazoles
    • A61K31/4184—1,3-Diazoles condensed with carbocyclic rings, e.g. benzimidazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4439—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. omeprazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A61P21/02—Muscle relaxants, e.g. for tetanus or cramps
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A61P25/16—Anti-Parkinson drugs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D235/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, condensed with other rings
    • C07D235/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, condensed with other rings condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D235/04—Benzimidazoles; Hydrogenated benzimidazoles
    • C07D235/06—Benzimidazoles; Hydrogenated benzimidazoles with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached in position 2
    • C07D235/08—Radicals containing only hydrogen and carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/04—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D409/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Psychology (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Abstract

本发明提供了新的式(I)化合物，以及其可药用盐、溶剂合物、水合物、多晶型物、共结晶物、互变异构体、立体异构体、同位素标记的衍生物、前药及4其药物组合物。本发明还提供了使用本发明的化合物和药物组合物的方法和试剂盒，所述方法和试剂盒用于在有需要的受试者中治疗和/或预防与蛋白质聚集有关的疾病，例如淀粉样变性(例如帕金森病和阿尔茨海默氏病)，治疗和/或预防神经变性疾病，治疗和/或预防与Tar？DNA结合蛋白43kDa有关的疾病，减少或预防蛋白质聚集，和/或调节E3泛素连接酶。

Description

苯并咪唑衍生物及其用途
相关申请
本申请要求根据35U.S.C.§119(e)于2013年3月15日提交的美国临时专利申请U.S.S.N.61/794,870的优先权，将其引入本申请作为参考。
政府支持
本发明是在美国政府的支持下，在美国国家卫生研究院(NationalInstituteofHealth)授权号GM58160下做出的。美国政府享有本发明的一定权利。
发明背景
因人类对引起疾病分子扰动的不完全理解，以及对鲁棒模型系统的有限理论贮备，以致未能成功开发出针对普通和进展性神经变性疾病(ND)，例如帕金森病(PD)和阿尔茨海默氏症(AD)的疾病改善治疗方法。这些局限性，加上“可药化(druggable)”蛋白质组普遍可预期的限制性，成为靶向性药物研发的主要挑战。尽管这种策略有优势，但在过去的15年里，无偏的(unbiased)表型筛选比靶向性筛选确认了超过50％具有新作用机理(MOA)的更多新化学实体药物(1)。这一成功激起人们对基于细胞无偏筛选以意想不到的方式起作用的化合物的新兴趣(2)。在ND的情况下，建立神经元筛选平台极具挑战性(3)。然而，当神经元病理学是源于保守的真核细胞过程的扰动时，更简单的基于细胞模型提供了潜在的解决方案。在酵母菌里建立的作为α-突触核蛋白病(包括PD)的基础的细胞病理学模型，概括了在神经元及PD患者中常见的蛋白质运输紊乱以及线粒体功能障碍(4)。酵母菌的易培养及α-突触核蛋白诱导的强劲生长表型极大促进了高通量化合物筛选(3，4)。当表型筛选无偏时，作用机理解密的艰巨挑战可通过阻碍靶标导向药物化学和目标功效的早期临床评价来限制先导化合物的进展。因此，有必要确认在ND中参与潜在细胞病理学的化合物以及确定它们起作用的具体靶标空间。
发明简述
发现新的苯并咪唑衍生物，例如式(I)化合物(例如ABI，下图1A中所示)可强烈并特定地保护酵母菌和神经元模型免受PD蛋白,α-突触核蛋白(α-syn)的损害。
一方面，本发明提供了式(I)化合物：
及其可药用盐、溶剂合物、水合物、多晶型物、共结晶物、互变异构体、立体异构体、同位素标记的衍生物和前药，其中环A、环B、X、RA、RB、RC、RD、RE、RF、k、m和p如本申请所定义。
示例性的式(I)化合物包括但不限于：
及其可药用盐、溶剂合物、水合物、多晶型物、共结晶物、互变异构体、立体异构体、同位素标记的衍生物和前药。
另一方面，本发明提供了药物组合物，其包括本发明化合物和任选地可药用赋形剂。在某些实施方案中，本发明的药物组合物用于在有需要的受试者中治疗和/或预防与蛋白质聚集相关的疾病。在某些实施方案中，本发明的药物组合物用于在有需要的受试者中减少和/或预防蛋白质聚集。在某些实施方案中，本发明的药物组合物用于在有需要的受试者中调节E3泛素连接酶。在某些实施方案中，本发明的药物组合物用于治疗和/或预防患者中的神经变性疾病(例如PD、AD)。在某些实施方案中，本发明的药物组合物用于治疗和/或预防与TarDNA结合蛋白43kDa(TDP-43)相关的疾病(例如肌萎缩侧索硬化(ALS)和额颞叶痴呆)。
本发明的另一方面涉及在有需要的受试者中治疗和/或预防与蛋白质聚集相关的疾病或神经变性疾病的方法。可由本发明的方法和组合物治疗和/或预防的与蛋白质聚集相关的疾病包括但不限于淀粉样变性(例如帕金森病或阿尔茨海默氏病)或朊病毒疾病。
另一方面，本发明提供了治疗和/或预防与TarDNA结合蛋白43kDa(TDP-43)相关的疾病(例如肌萎缩侧索硬化(ALS)和额颞叶痴呆)的方法。
另一方面，本发明提供了在有需要的受试者中减少和/或预防蛋白质聚集的方法。
另一方面，本发明提供了在有需要的受试者中调节E3泛素连接酶的方法。
本发明的方法包括给药于患者有效量的本申请所述的化合物或其药物组合物。在某些实施方案中，有效量是治疗有效量。在某些实施方案中，有效量是预防有效量。
本发明另一方面涉及筛选用于识别本发明方法中使用的一个或多个化合物的化合物库的方法。在某些实施方案中，通过该筛选方法识别的化合物可用于在有需要的受试者中治疗和/或预防与蛋白质聚集相关的疾病，治疗和/或预防神经变性疾病，治疗和/或预防与TDP-43相关的疾病，减少和/或预防蛋白质聚集和/或调节E3泛素连接酶。
另一方面，本发明提供了本申请所述的化合物及其药物组合物，其用于在有需要的受试者中治疗和/或预防与蛋白质聚集相关的疾病，治疗和/或预防神经变性疾病，治疗和/或预防与TDP-43相关的疾病，减少和/或预防蛋白质聚集，和/或调节E3泛素连接酶。
本发明的另一方面涉及试剂盒，其包括含有本申请所述的化合物或其药物组合物的容器。本发明的试剂盒可包括单剂量或多剂量的化合物或药物组合物。所提供的试剂盒可用于治疗和/或预防与蛋白质聚集相关的疾病，治疗和/或预防神经变性疾病，治疗和/或预防与TDP-43相关的疾病，减少和/或预防蛋白质聚集，和/或在有需要的受试者中调节E3泛素连接酶。在某些实施方案中，该试剂盒还包括给药化合物或药物组合物于患者的说明书。
本申请中描述了本发明具体实施方案的细节。本发明的其它特征、目标和优点通过详细的说明书、附图、实施例和权利要求而变得明显。
定义
具体官能团和化学术语的定义更详细地描述在下文中。化学元素根据HandbookofChemistryandPhysics,75thEd.,CAS版本，内封面的元素周期表确认，并且具体的官能团通常如本申请所述定义。另外，有机化学的一般原则，以及具体的官能团和反应性描述在ThomasSorrell,OrganicChemistry,UniversityScienceBooks,Sausalito,1999；Smith和March,March’sAdvancedOrganicChemistry,5thEdition,JohnWiley&Sons,Inc.,NewYork,2001；Larock,ComprehensiveOrganicTransformations,VCHPublishers,Inc.,NewYork,1989；以及Carruthers,SomeModernmothodofOrganicSynthesis,3rdEdition,CambridgeUniversityPress,Cambridge,1987中。
本申请所述的化合物可包含一个或多个不对称中心，因此可以各种异构形式存在，例如对映异构体和/或非对映异构体。例如，本申请所述的化合物可为单独的对映异构体、非对映异构体或几何异构体的形式，或可为立体异构体的混合物，包括外消旋混合物和富含一个或多个立体异构体的混合物的形式。异构体可通过本领域熟练技术人员已知的方法由混合物分离出来，所述方法包括手性高效液相色谱法(HPLC)和手性盐的形成和结晶；或者优选的异构体可通过不对称合成制备。参见例如Jacques等,Enantiomers,RacematesandResolutions(WileyInterscience,NewYork,1981)；Wilen等,Tetrahedron33：2725(1977)；Eliel,StereochemistryofCarbonCompounds(McGraw–Hill,NY,1962)；和Wilen,TablesofResolvingAgentsandOpticalResolutionsp.268(E.L.Eliel,Ed.,Univ.ofNotreDamePress,NotreDame,IN1972)。本发明另外还包括作为基本上不含其它异构体的单独异构体，或者作为不同异构体的混合物形式的本申请所述的化合物。
当列出值的范围时，其意指包括该范围内的每个值和亚范围。例如“C1–6”意指包括C1、C2、C3、C4、C5、C6、C1–6、C1–5、C1–4、C1–3、C1–2、C2–6、C2–5、C2–4、C2–3、C3–6、C3–5、C3–4、C4–6、C4–5和C5–6。
术语“脂肪族的”指的是烷基、烯基、炔基和碳环基团。同样地，术语“卤代脂肪族的”指的是杂烷基、杂烯基、杂炔基和杂环基。
“烷基”指的是具有1-10个碳原子的直链或支链的饱和烃基(“C1–10烷基”)。在一些实施方案中，烷基具有1至9个碳原子(“C1–9烷基”)。在一些实施方案中，烷基具有1至8个碳原子(“C1–8烷基”)。在一些实施方案中，烷基具有1至7个碳原子(“C1–7烷基”)。在一些实施方案中，烷基具有1至6个碳原子(“C1–6烷基”)。在一些实施方案中，烷基具有1至5个碳原子(“C1–5烷基”)。在一些实施方案中，烷基具有1至4个碳原子(“C1–4烷基”)。在一些实施方案中，烷基具有1至3个碳原子(“C1–3烷基”)。在一些实施方案中，烷基具有1至2个碳原子(“C1–2烷基”)。在一些实施方案中，烷基具有1个碳原子(“C1烷基”)。在一些实施方案中，烷基具有2至6个碳原子(“C2–6烷基”)。C1–6烷基的实例包括甲基(C1)、乙基(C2)、正丙基(C3)、异丙基(C3)、正丁基(C4)、叔丁基(C4)、仲丁基(C4)、异丁基(C4)、正戊基(C5)、3–戊基(C5)、戊烷基(C5)、新戊基(C5)、3–甲基–2–丁基(C5)、叔戊基(C5)和正己基(C6)。烷基的另外实例包括正庚基(C7)、正辛基(C8)等。除非另外指出，每种情况下的烷基未被取代(“未取代的烷基”)或独立地被一个或多个取代基所取代(“取代的烷基”)。在某些实施方案中，烷基为未取代的C1–10烷基(例如–CH3)。在某些实施方案中，烷基为取代的C1–10烷基。
“卤代烷基”为如本申请所定义的取代的烷基，其中一个或多个氢原子独立地被卤素例如氟、氯、溴或碘所代替。“全卤代烷基”是卤代烷基的亚类，并且指的是其中所有的氢原子独立地被卤素例如氟、氯、溴或碘所代替的烷基。在一些实施方案中，卤代烷基具有1至8个碳原子(“C1–8卤代烷基”)。在一些实施方案中，卤代烷基具有1至6个碳原子(“C1–6卤代烷基”)。在一些实施方案中，卤代烷基具有1至4个碳原子(“C1–4卤代烷基”)。在一些实施方案中，卤代烷基具有1至3个碳原子(“C1–3卤代烷基”)。在一些实施方案中，卤代烷基具有1至2个碳原子(“C1–2卤代烷基”)。在一些实施方案中，卤代烷基的所有氢原子被氟所代替以获得全氟烷基。在一些实施方案中，卤代烷基的所有氢原子被氯所代替以获得“全氯烷基”。卤代烷基的实例包括–CF3、–CF2CF3、–CF2CF2CF3、–CCl3、–CFCl2、–CF2Cl等。
“烯基”指的是具有2至20个碳原子的直链或支链的烃基，其具有一个或多个碳–碳双键，并且没有三键(“C2–20烯基”)。在一些实施方案中，烯基具有2至10个碳原子(“C2–10烯基”)。在一些实施方案中，烯基具有2至9个碳原子(“C2–9烯基”)。在一些实施方案中，烯基具有2至8个碳原子(“C2–8烯基”)。在一些实施方案中，烯基具有2至7个碳原子(“C2–7烯基”)。在一些实施方案中，烯基具有2至6个碳原子(“C2–6烯基”)。在一些实施方案中，烯基具有2至5个碳原子(“C2–5烯基”)。在一些实施方案中，烯基具有2至4个碳原子(“C2–4烯基”)。在一些实施方案中，烯基具有2至3个碳原子(“C2–3烯基”)。在一些实施方案中，烯基具有2个碳原子(“C2烯基”)。一个或多个碳–碳双键可为内部的(例如2–丁烯基)或末端的(例如1–丁烯基)。C2–4烯基的实例包括乙烯基(C2)、1–丙烯基(C3)、2–丙烯基(C3)、1–丁烯基(C4)、2–丁烯基(C4)、丁二烯基(C4)等。C2–6烯基的实例包括上述C2–4烯基以及戊烯基(C5)、戊二烯基(C5)、己烯基(C6)等。烯基的另外的实例包括庚烯基(C7)、辛烯基(C8)、辛三烯基(C8)等。除非另外指出，在每种情况下的烯基独立地为任选被取代的，即未取代的(“未取代的烯基”)或被一个或多个取代基取代的(“取代的烯基”)。在某些实施方案中，烯基为未取代的C2–10烯基。在某些实施方案中，烯基为取代的C2–10烯基。
“炔基”指的是具有2至20个碳原子的直链或支链烃基，其具有一个或多个碳–碳三键，并任选地具有一个或多个双键(“C2–20炔基”)。在一些实施方案中，炔基具有2至10个碳原子(“C2–10炔基”)。在一些实施方案中，炔基具有2至9个碳原子(“C2–9炔基”)。在一些实施方案中，炔基具有2至8个碳原子(“C2–8炔基”)。在一些实施方案中，炔基具有2至7个碳原子(“C2–7炔基”)。在一些实施方案中，炔基具有2至6个碳原子(“C2–6炔基”)。在一些实施方案中，炔基具有2至5个碳原子(“C2–5炔基”)。在一些实施方案中，炔基具有2至4个碳原子(“C2–4炔基”)。在一些实施方案中，炔基具有2至3个碳原子(“C2–3炔基”)。在一些实施方案中，炔基具有2个碳原子(“C2炔基”)。一个或多个碳–碳三键可以是内部的(例如2–丁炔基)或末端的(例如1–丁炔基)。C2–4炔基的实例包括但不限于乙炔基(C2)、1–丙炔基(C3)、2–丙炔基(C3)、1–丁炔基(C4)、2–丁炔基(C4)等。C2–6炔基的实例包括上述C2–4炔基以及戊炔基(C5)、己炔基(C6)等。炔基的另外的实例包括庚炔基(C7)、辛炔基(C8)等。除非另外指出，每种情况下的炔基独立地为任选被取代的，即未取代的(“未取代的炔基”)或被一个或多个取代基取代的(“取代的炔基”)。在某些实施方案中，炔基为未取代的C2–10炔基。在某些实施方案中，炔基为取代的C2–10炔基。
“碳环基”或“碳环的”指的是在非芳香的环系统中具有3-10个环碳原子(“C3–10碳环基”)和零个杂原子的非芳香的环烃基。在一些实施方案中，碳环基具有3至8个环碳原子(“C3–8碳环基”)。在一些实施方案中，碳环基具有3至6个环碳原子(“C3–6碳环基”)。在一些实施方案中，碳环基具有3至6个环碳原子(“C3–6碳环基”)。在一些实施方案中，碳环基具有5至10个环碳原子(“C5–10碳环基”)。示例性的C3–6碳环基包括但不限于环丙基(C3)、环丙烯基(C3)、环丁基(C4)、环丁烯基(C4)、环戊基(C5)、环戊烯基(C5)、环己基(C6)、环己烯基(C6)、环己二烯基(C6)等。示例性的C3–8碳环基包括但不限于上述C3–6碳环基以及环庚基(C7)、环庚烯基(C7)、环庚二烯基(C7)、环庚三烯基(C7)、环辛基(C8)、环辛烯基(C8)、二环[2.2.1]庚烷基(C7)、二环[2.2.2]辛烷基(C8)等。示例性的C3–10碳环基的实例包括但不限于上述C3–8碳环基以及环壬基(C9)、环壬烯基(C9)、环癸基(C10)、环癸烯基(C10)、八氢–1H–茚基(C9)、十氢萘基(C10)、螺[4.5]癸基(C10)等。如上述实例中示出的，在某些实施方案中，碳环基为单环(“单环碳环基”)或含有稠合的、桥连的或螺环系统，例如二环系统(“二环碳环基”)，并且可为饱和的或可为部分不饱和的。“碳环基”还包括环系统，其中如上所定义的碳环与一个或多个芳基或杂芳基稠合，其中连接点在碳环上，并且在这种情况下，碳原子的数目继续被指定为碳环的环系统中的碳原子的数目。除非另外指出，每种情况下的碳环基独立地为任选被取代的，即未取代的(“未取代的碳环基”)或被一个或多个取代基取代的(“取代的碳环基”)。在某些实施方案中，碳环基为未取代的C3–10碳环基。在某些实施方案中，碳环基为取代的C3–10碳环基。
在一些实施方案中，“碳环基”为具有3-10个环碳原子的单环、饱和的碳环基(“C3–10环烷基”)。在一些实施方案中，环烷基具有3至8个环碳原子(“C3–8环烷基”)。在一些实施方案中，环烷基具有3至6个环碳原子(“C3–6环烷基”)。在一些实施方案中，环烷基具有5至6个环碳原子(“C5–6环烷基”)。在一些实施方案中，环烷基具有5至10个环碳原子(“C5–10环烷基”)。C5–6环烷基的实例包括环戊基(C5)和环己基(C5)。C3–6环烷基的实例包括上述C5–6环烷基以及环丙基(C3)和环丁基(C4)。C3–8环烷基的实例包括上述C3–6环烷基以及环庚基(C7)和环辛基(C8)。除非另外指出，每种情况下的环烷基独立地为未取代的(“未取代的环烷基”)或被一个或多个取代基所取代的(“取代的环烷基”)。在某些实施方案中，环烷基为未取代的C3–10环烷基。在某些实施方案中，环烷基为取代的C3–10环烷基。
“杂环基”或“杂环的”指的是具有环碳原子和1至4个环杂原子的3–至10–元非芳香的环系统，其中每个杂原子独立地选自氮、氧、硫、硼、磷和硅(“3–10元杂环基”)。在含有一个或多个氮原子的杂环基中，当化合价允许时连接点可为碳或氮原子。杂环基可为单环(“单环杂环基”)或稠合的、桥连的或螺环系统例如二环系统(“二环杂环基”)，并且可为饱和的或可为部分不饱和的。杂环基二环环系统可在一个或两个环中包括一个或多个杂原子。“杂环基”还包括环系统，其中如上所定义的杂环与一个或多个碳环基稠合，其中连接点在碳环或杂环上，或者“杂环基”还包括环系统，其中如上所定义的杂环与一个或多个芳基或杂芳基稠合，其中连接点在杂环上，并且在这种情况下，环成员的数目也继续被指定为杂环环系统中环成员的数目。除非另外指出，每种情况下的杂环基独立地为任选被取代的，即未取代的(“未取代的杂环基”)或被一个或多个取代基取代的(“取代的杂环基”)。在某些实施方案中，杂环基为未取代的3–10元杂环基。在某些实施方案中，杂环基为取代的3–10元杂环基。
在一些实施方案中，杂环基为具有环碳原子和1–4个环杂原子的5–10元非芳香的环系统，其中每个杂原子独立地选自氮、氧、硫、硼、磷和硅(“5–10元杂环基”)。在一些实施方案中，杂环基为具有环碳原子和1–4个环杂原子的5–8元非芳香的环系统，其中每个杂原子独立地选自氮、氧和硫(“5–8元杂环基”)。在一些实施方案中，杂环基为具有环碳原子和1–4个环杂原子的5–6元非芳香的环系统，其中每个杂原子独立地选自氮、氧和硫(“5–6元杂环基”)。在一些实施方案中，5–6元杂环基具有1–3个选自氮、氧和硫的环杂原子。在一些实施方案中，5–6元杂环基具有1–2个选自氮、氧和硫的环杂原子。在一些实施方案中，5–6元杂环基具有一个选自氮、氧和硫的环杂原子。
示例性含有一个杂原子的3–元杂环基包括但不限于氮杂环丙烷基、氧杂环丙烷基和硫杂环丙烷基。示例性含有一个杂原子的4-元杂环基包括但不限于氮杂环丁烷基、氧杂环丁烷基和硫杂环丁烷基。示例性含有一个杂原子的5-元杂环基包括但不限于四氢呋喃基、二氢呋喃基、四氢噻吩基、二氢噻吩基、吡咯烷基、二氢吡咯基和吡咯–2,5–二酮基。示例性含有两个杂原子的5-元杂环基包括但不限于二氧杂环戊基、氧硫杂环戊基(oxasulfuranyl)、二硫杂环戊基(disulfuranyl)和噁唑烷-2-酮。示例性含有三个杂原子的5-元杂环基包括但不限于三唑啉基、噁二唑啉基和噻二唑啉基。示例性含有一个杂原子的6-元杂环基包括但不限于哌啶基、四氢吡喃基、二氢吡啶基和噻烷基。示例性含有两个杂原子的6-元杂环基包括但不限于哌嗪基、吗啉基、二噻烷基和二噁烷基。示例性含有三个杂原子的6-元杂环基包括但不限于三氮杂环己烷基(triazinanyl)。示例性含有一个杂原子的7-元杂环基包括但不限于氮杂环庚烷基、氧杂环庚烷基和硫杂环庚烷基。示例性含有一个杂原子的8-元杂环基包括但不限于氮杂环辛烷基、氧杂环辛烷基和硫杂环辛烷基。示例性的与C6芳基环稠合的5-元杂环基(本申请还称为5,6-二环杂环)包括但不限于二氢吲哚基、异二氢吲哚基、二氢苯并呋喃基、二氢苯并噻吩基、苯并噁唑啉酮基等。示例性的与芳基环稠合的6-元杂环基(本申请还称为6,6-二环杂环)包括但不限于四氢喹啉基、四氢异喹啉基等。
“芳基”是指在芳族环系中具有6-14个环碳原子和0个杂原子的单环或多环(如二环或三环)4n+2芳族环系(如在环状排列中共享6、10或14个电子)的残基(“C6-14芳基”)。在一些实施方案中，芳基具有6个环碳原子(“C6芳基”；如苯基)。在一些实施方案中，芳基具有10个环碳原子(“C10芳基”；如萘基诸如1-萘基和2-萘基)。在一些实施方案中，芳基具有14个环碳原子(“C14芳基”；如蒽基)。“芳基”还包括这样的环系，其中如上定义的芳基环与一个或多个碳环基或杂环基稠合，其中残基或连接点在芳基环上，并且在所述情况中，碳原子的数目仍然指定为芳基环系中碳原子的数目。除非另有说明，在每种情况下芳基独立为任选取代的，即未取代的(“未取代的芳基”)或被一个或多个取代基取代的(“取代的芳基”)。在具体实施方案中，芳基为未取代的C6-14芳基。在具体实施方案中，芳基为取代的C6-14芳基。
“芳烷基”为如本申请所定义的烷基和芳基的亚类，并且指的是被任选取代的芳基所取代的任选取代的烷基。在某些实施方案中，芳烷基为任选取代的苄基。在某些实施方案中，芳烷基为苄基。在某些实施方案中，芳烷基为任选取代的苯乙基。在某些实施方案中，芳烷基为苯乙基。
“杂芳基”指的是在芳香环系统中具有环碳原子和1–4个环杂原子的5–10元单环或二环4n+2芳香环系统的基团(例如具有在环状排列中共享的6或10个π电子)，其中每个杂原子独立地选自氮、氧和硫(“5–10元杂芳基”)。在含有一个或多个氮原子的杂芳基中，当化合价允许时连接点可为碳或氮原子。杂芳基二环环系统在一个或两个环中可包括一个或多个杂原子。“杂芳基”包括环系统，其中如上所定义的杂芳基环与一个或多个碳环基或杂环基稠合，其中连接点在杂芳基环上，并且在这种情况下，环成员的数目也继续被指定为杂芳基环系统的环成员的数目。“杂芳基”还包括环系统，其中如上所定义的杂芳基环与一个或多个芳基稠合，其中连接点在芳环或杂芳基环上，并且在这种情况下，环成员的数目指定为稠合的(芳基/杂芳基)环系统中环成员的数目。二环杂芳基，其中一个环不含有杂原子(例如吲哚基、喹啉基、咔唑基等)，连接点可在任一环上，即在带有杂原子的环(例如2–吲哚基)或不含有杂原子的环(例如5–吲哚基)上。
在一些实施方案中，杂芳基为在芳族环系中具有环碳原子和1-4个环杂原子的5-10元芳族环系，其中各杂原子独立选自氮、氧和硫(“5-10元杂芳基”)。在一些实施方案中，杂芳基为在芳族环系中具有环碳原子和1-4个环杂原子的5-8元芳族环系，其中各杂原子独立选自氮、氧和硫(“5-8元杂芳基”)。在一些实施方案中，杂芳基为在芳族环系中具有环碳原子和1-4个环杂原子的5-6元芳族环系，其中各杂原子独立选自氮、氧和硫(“5-6元杂芳基”)。在一些实施方案中，5-6元杂芳基具有1-3个选自氮、氧和硫的环杂原子。在一些实施方案中，5-6元杂芳基具有1-2个选自氮、氧和硫的环杂原子。在一些实施方案中，5-6元杂芳基具有1个选自氮、氧和硫的环杂原子。除非另有说明,各杂芳基独立为任选取代的，即未取代的(“未取代的杂芳基”)或被一个或多个取代基取代的(“取代的杂芳基”)。在具体实施方案中，杂芳基为未取代的5-14元杂芳基。在具体实施方案中，杂芳基为取代的5-14元杂芳基。
含有1个杂原子的示例性5元杂芳基包括而不限于，吡咯基、呋喃基和噻吩基。含有2个杂原子的示例性5元杂芳基包括而不限于，咪唑基、吡唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基和异噻唑基。含有3个杂原子的示例性5元杂芳基包括而不限于，三唑基、噁二唑基和噻二唑基。含有4个杂原子的示例性5元杂芳基包括而不限于，四唑基。含有1个杂原子的示例性6元杂芳基包括而不限于，吡啶基。含有2个杂原子的示例性6元杂芳基包括而不限于，哒嗪基、嘧啶基和吡嗪基。含有3或4个杂原子的示例性6元杂芳基分别包括而不限于，三嗪基和四嗪基。含有1个杂原子的示例性7元杂芳基包括而不限于，氮杂环庚烯基、氧杂环庚烯基和硫杂环庚烯基。示例性5,6-二环杂芳基包括而不限于，吲哚基、异吲哚基、吲唑基、苯并三唑基、苯并噻吩基、异苯并噻吩基、苯并呋喃基、苯并异呋喃基、苯并咪唑基、苯并噁唑基、苯并异噁唑基、苯并噁二唑基、苯并噻唑基、苯并异噻唑基、苯并噻二唑基、吲嗪基和嘌呤基。示例性6,6-二环杂芳基包括而不限于，萘啶基、喋啶基、喹啉基、异喹啉基、噌啉基、喹噁啉基、酞嗪基和喹唑啉基。
“杂芳烷基”为如本申请所定义的烷基和杂芳基的亚类，并且指的是被任选取代的杂芳基取代的任选取代的烷基。
“部分不饱和的”指的是包括至少一个双键或三键的基团。“部分不饱和的”环系统还包括具有多个不饱和位点的环，但不包括本申请所定义的芳基(例如芳基或杂芳基)。同样地，“饱和的”指的是不含有双键或三键(即所有都为单键)的基团。
如本申请所定义的烷基、烯基、炔基、碳环基、杂环基、芳基和杂芳基是二价的桥连基团，其还使用后缀-亚基(–ene)，例如亚烷基、亚烯基、亚炔基、亚碳环基、亚杂环基、亚芳基和亚杂芳基。
如本申请所用的术语“任选取代的”指的是取代的或未取代的。
如本申请所定义的烷基、烯基、炔基、碳环基、杂环基、芳基和杂芳基是任选取代的(例如“取代的”或“未取代的”烷基、“取代的”或“未取代的”烯基、“取代的”或“未取代的”炔基、“取代的”或“未取代的”碳环基、“取代的”或“未取代的”杂环基、“取代的”或“未取代的”芳基或“取代的”或“未取代的”杂芳基)。通常，术语“取代的”，无论是否前面有术语“任选地”，指的是在该基团(例如碳或氮原子)上至少一个氢被可允许的取代基代替，该取代基例如为取代后生成稳定化合物(例如不通过如重排、环化、消除或其它反应自发地进行转化的化合物)的取代基。除非另外指明，“取代的”基团在该基团的一个或多个可取代的位置上具有取代基，并且当在任何给定的结构中多于一个位置被取代时，所述取代基在每个位置可相同或不同。术语“取代的”意欲包括被有机化合物的所有可允许的取代基、任何导致形成稳定化合物的本申请所述的取代基所取代。本发明意欲包括任何和所有组合以获得稳定化合物。为了本发明的目的，杂原子例如氮可具有氢取代基和/或任何本申请所述的合适的取代基，其满足杂原子的化合价并导致形成稳定的稳定的基团。
示例性的碳原子取代基包括但不限于卤素、–CN、–NO2、–N3、–SO2H、–SO3H、–OH、–ORaa、–ON(Rbb)2、–N(Rbb)2、–N(Rbb)3 +X–、–N(ORcc)Rbb、–SH、–SRaa、–SSRcc、–C(＝O)Raa、–CO2H、–CHO、–C(ORcc)2、–CO2Raa、–OC(＝O)Raa、–OCO2Raa、–C(＝O)N(Rbb)2、–OC(＝O)N(Rbb)2、–NRbbC(＝O)Raa、–NRbbCO2Raa、–NRbbC(＝O)N(Rbb)2、–C(＝NRbb)Raa、–C(＝NRbb)ORaa、–OC(＝NRbb)Raa、–OC(＝NRbb)ORaa、–C(＝NRbb)N(Rbb)2、–OC(＝NRbb)N(Rbb)2、–NRbbC(＝NRbb)N(Rbb)2、–C(＝O)NRbbSO2Raa、–NRbbSO2Raa、–SO2N(Rbb)2、–SO2Raa、–SO2ORaa、–OSO2Raa、–S(＝O)Raa、–OS(＝O)Raa、–Si(Raa)3、–OSi(Raa)3–C(＝S)N(Rbb)2、–C(＝O)SRaa、–C(＝S)SRaa、–SC(＝S)SRaa、–SC(＝O)SRaa、–OC(＝O)SRaa、–SC(＝O)ORaa、–SC(＝O)Raa、–P(＝O)2Raa、–OP(＝O)2Raa、–P(＝O)(Raa)2、–OP(＝O)(Raa)2、–OP(＝O)(ORcc)2、–P(＝O)2N(Rbb)2、–OP(＝O)2N(Rbb)2、–P(＝O)(NRbb)2、–OP(＝O)(NRbb)2、–NRbbP(＝O)(ORcc)2、–NRbbP(＝O)(NRbb)2、–P(Rcc)2、–P(Rcc)3、–OP(Rcc)2、–OP(Rcc)3、–B(Raa)2、–B(ORcc)2、–BRaa(ORcc)、C1–10烷基、C1–10全卤代烷基、C2–10烯基、C2–10炔基、C3–10碳环基、3–14元杂环基、C6–14芳基和5–14元杂芳基，其中每个烷基、烯基、炔基、碳环基、杂环基、芳基和杂芳基独立地被0、1、2、3、4或5个Rdd基团所取代；
或碳原子上的两个孪位氢被以下基团替代：＝O、＝S、＝NN(Rbb)2、＝NNRbbC(＝O)Raa、＝NNRbbC(＝O)ORaa、＝NNRbbS(＝O)2Raa、＝NRbb，或＝NORcc替代；
每种情况下Raa独立地选自C1–10烷基、C1–10全卤代烷基、C2–10烯基、C2–10炔基、C3–10碳环基、3–14元杂环基、C6–14芳基和5–14元杂芳基，或者两个Raa基团相连形成3–14元杂环基或5–14元杂芳基环，其中每个烷基、烯基、炔基、碳环基、杂环基、芳基和杂芳基独立地被0、1、2、3、4或5个Rdd基团所取代；
每种情况下Rbb独立地选自氢、–OH、–ORaa、–N(Rcc)2、–CN、–C(＝O)Raa、–C(＝O)N(Rcc)2、–CO2Raa、–SO2Raa、–C(＝NRcc)ORaa、–C(＝NRcc)N(Rcc)2、–SO2N(Rcc)2、–SO2Rcc、–SO2ORcc、–SORaa、–C(＝S)N(Rcc)2、–C(＝O)SRcc、–C(＝S)SRcc、–P(＝O)2Raa、–P(＝O)(Raa)2、–P(＝O)2N(Rcc)2、–P(＝O)(NRcc)2、C1–10烷基、C1–10全卤代烷基、C2–10烯基、C2–10炔基、C3–10碳环基、3–14元杂环基、C6–14芳基和5–14元杂芳基，或者两个Rbb基团相连形成3–14元杂环基或5–14元杂芳基环，其中每个烷基、烯基、炔基、碳环基、杂环基、芳基和杂芳基独立地被0、1、2、3、4或5个Rdd基团所取代；
每种情况下Rcc独立地选自氢、C1–10烷基、C1–10全卤代烷基、C2–10烯基、C2–10炔基、C3–10碳环基、3–14元杂环基、C6–14芳基和5–14元杂芳基，或两个Rcc基团相连形成3–14元杂环基或5–14元杂芳基环，其中每个烷基、烯基、炔基、碳环基、杂环基、芳基和杂芳基独立地被0、1、2、3、4或5个Rdd所取代；
每种情况下Rdd独立地选自卤素、–CN、–NO2、–N3、–SO2H、–SO3H、–OH、–ORee、–ON(Rff)2、–N(Rff)2、–N(Rff)3 +X–、–N(ORee)Rff、–SH、–SRee、–SSRee、–C(＝O)Ree、–CO2H、–CO2Ree、–OC(＝O)Ree、–OCO2Ree、–C(＝O)N(Rff)2、–OC(＝O)N(Rff)2、–NRffC(＝O)Ree、–NRffCO2Ree、–NRffC(＝O)N(Rff)2、–C(＝NRff)ORee、–OC(＝NRff)Ree、–OC(＝NRff)ORee、–C(＝NRff)N(Rff)2、–OC(＝NRff)N(Rff)2、–NRffC(＝NRff)N(Rff)2、-NRffSO2Ree、–SO2N(Rff)2、–SO2Ree、–SO2ORee、–OSO2Ree、–S(＝O)Ree、–Si(Ree)3、–OSi(Ree)3、–C(＝S)N(Rff)2、–C(＝O)SRee、–C(＝S)SRee、–SC(＝S)SRee、–P(＝O)2Ree、–P(＝O)(Ree)2、–OP(＝O)(Ree)2、–OP(＝O)(ORee)2、C1–6烷基、C1–6全卤代烷基、C2–6烯基、C2–6炔基、C3–10碳环基、3–10元杂环基、C6–10芳基、5–10元杂芳基，其中每个烷基、烯基、炔基、碳环基、杂环基、芳基和杂芳基独立地被0、1、2、3、4或5个Rgg基团所取代，或者两个孪位的Rdd取代基可相连形成＝O或＝S；
每种情况下Ree独立地选自C1–6烷基、C1–6全卤代烷基、C2–6烯基、C2–6炔基、C3–10碳环基、C6–10芳基、3–10元杂环基和3–10元杂芳基，其中每个烷基、烯基、炔基、碳环基、杂环基、芳基和杂芳基独立地被0、1、2、3、4或5个Rgg基团所取代；
每种情况下Rff独立地选自氢、C1–6烷基、C1–6全卤代烷基、C2–6烯基、C2–6炔基、C3–10碳环基、3–10元杂环基、C6–10芳基和5–10元杂芳基，或者两个Rff基团相连形成3–14元杂环基或5–14元杂芳基环，其中每个烷基、烯基、炔基、碳环基、杂环基、芳基和杂芳基独立地被0、1、2、3、4或5个Rgg基团所取代；和
每种情况下Rgg独立地为卤素、–CN、–NO2、–N3、–SO2H、–SO3H、–OH、–OC1–6烷基、–ON(C1–6烷基)2、–N(C1–6烷基)2、–N(C1–6烷基)3 +X–、–NH(C1–6烷基)2 +X–、–NH2(C1–6烷基)+X–、–NH3 +X–、–N(OC1–6烷基)(C1–6烷基)、–N(OH)(C1–6烷基)、–NH(OH)、–SH、–SC1–6烷基、–SS(C1–6烷基)、–C(＝O)(C1–6烷基)、–CO2H、–CO2(C1–6烷基)、–OC(＝O)(C1–6烷基)、–OCO2(C1–6烷基)、–C(＝O)NH2、–C(＝O)N(C1–6烷基)2、–OC(＝O)NH(C1–6烷基)、–NHC(＝O)(C1–6烷基)、–N(C1–6烷基)C(＝O)(C1–6烷基)、–NHCO2(C1–6烷基)、–NHC(＝O)N(C1–6烷基)2、–NHC(＝O)NH(C1–6烷基)、–NHC(＝O)NH2、–C(＝NH)O(C1–6烷基)、-OC(＝NH)(C1–6烷基)、–OC(＝NH)OC1–6烷基、–C(＝NH)N(C1–6烷基)2、–C(＝NH)NH(C1–6烷基)、–C(＝NH)NH2、–OC(＝NH)N(C1–6烷基)2、–OC(NH)NH(C1–6烷基)、–OC(NH)NH2、–NHC(NH)N(C1–6烷基)2、–NHC(＝NH)NH2、–NHSO2(C1–6烷基)、–SO2N(C1–6烷基)2、–SO2NH(C1–6烷基)、–SO2NH2、-SO2C1–6烷基、–SO2OC1–6烷基、–OSO2C1–6烷基、–SOC1–6烷基、–Si(C1–6烷基)3、–OSi(C1–6烷基)3–C(＝S)N(C1–6烷基)2、C(＝S)NH(C1–6烷基)、C(＝S)NH2、–C(＝O)S(C1–6烷基)、–C(＝S)SC1–6烷基、–SC(＝S)SC1–6烷基、–P(＝O)2(C1–6烷基)、–P(＝O)(C1–6烷基)2、–OP(＝O)(C1–6烷基)2、–OP(＝O)(OC1–6烷基)2、C1–6烷基、C1–6全卤代烷基、C2–6烯基、C2–6炔基、C3–10碳环基、C6–10芳基、3–10元杂环基、5–10元杂芳基；或两个孪位的Rgg取代基可相连形成＝O或＝S；其中X–为抗衡离子。
“抗衡离子”或“阴离子抗衡离子”是为了维持电中性而与带正电的季胺基团缔合的带负电的基团。示例性抗衡离子包括卤化物离子(如F-、Cl-、Br-、I-)、NO3 -、ClO4 -、OH-、H2PO4 -、HSO4 -、磺酸根离子(如甲磺酸根、三氟甲磺酸根、对甲苯磺酸根、苯磺酸根、10-樟脑磺酸根、萘-2-磺酸根、萘-1-磺酸-5-磺酸根、乙-1-磺酸-2-磺酸根等)和羧酸根离子(如乙酸根、乙醇化物、丙酸根、苯甲酸根、甘油酸根、乳酸根、酒石酸根、羟乙酸根等)。
“卤代”或“卤素”指的是氟(氟代、–F)、氯(氯代、–Cl)、溴(溴代、–Br)或碘(碘代、–I)。
如本申请所用的“酰基”指的是选自–C(＝O)Raa、-CHO、–CO2Raa、–C(＝O)N(Rbb)2、–C(＝NRbb)Raa、–C(＝NRbb)ORaa、–C(＝NRbb)N(Rbb)2、–C(＝O)NRbbSO2Raa、–C(＝S)N(Rbb)2、–C(＝O)SRaa或–C(＝S)SRaa的基团，其中Raa和Rbb如本申请所定义。
氮原子可以是取代的或未取代的，只要化合价允许，且包括伯、仲、叔和季氮原子。示例性氮原子取代基包括但不限于，氢、-OH、-ORaa、-N(Rcc)2、-CN、-C(＝O)Raa、-C(＝O)N(Rcc)2、-CO2Raa、-SO2Raa、-C(＝NRbb)Raa、-C(＝NRcc)ORaa、-C(＝NRcc)N(Rcc)2、-SO2N(Rcc)2、-SO2Rcc、-SO2ORcc、-SORaa、-C(＝S)N(Rcc)2、-C(＝O)SRcc、-C(＝S)SRcc、-P(＝O)2Raa、-P(＝O)(Raa)2、-P(＝O)2N(Rcc)2、-P(＝O)(NRcc)2、C1-10烷基、C1-10全卤代烷基、C2-10烯基、C2-10炔基、C3-10碳环基、3-14元杂环基、C6-14芳基和5-14元杂芳基，或与N原子连接的两个Rcc基团连接在一起形成3-14元杂环基或5-14元杂芳基环，其中各烷基、烯基、炔基、碳环基、杂环基、芳基和杂芳基独立地被0、1、2、3、4或5个Rdd基团取代，且其中Raa、Rbb、Rcc和Rdd如上定义。
在具体实施方案中，氮原子上存在的取代基为氮保护基(本申请中也称为“氨基保护基”)。氮保护基包括但不限于，-OH、-ORaa、-N(Rcc)2、-C(＝O)Raa、-C(＝O)N(Rcc)2、-CO2Raa、-SO2Raa、-C(＝NRcc)Raa、-C(＝NRcc)ORaa、-C(＝NRcc)N(Rcc)2、-SO2N(Rcc)2、-SO2Rcc、-SO2ORcc、-SORaa、-C(＝S)N(Rcc)2、-C(＝O)SRcc、-C(＝S)SRcc、C1-10烷基(如芳烷基、杂芳烷基)、C2-10烯基、C2-10炔基、C3-10碳环基、3-14元杂环基、C6-14芳基和5-14元杂芳基，其中各烷基、烯基、炔基、碳环基、杂环基、芳烷基、芳基和杂芳基独立地被0、1、2、3、4或5个Rdd基团取代，且其中Raa、Rbb、Rcc和Rdd如本申请中定义。氮保护基是本领域熟知的且包括ProtectingGroupsinOrganicSynthesis,T.W.GreeneandP.G.M.Wuts,3rdedition,JohnWiley&Sons,1999中详细描述的保护基，将其引入本申请作为参考。
例如，氮保护基诸如酰胺基(如-C(＝O)Raa)包括但不限于，甲酰胺、乙酰胺、氯乙酰胺、三氯乙酰胺、三氟乙酰胺、苯基乙酰胺、3-苯基丙酰胺、吡啶-2-甲酰胺、3-吡啶基甲酰胺、N-苯甲酰基苯基丙氨酰基衍生物、苯甲酰胺、对苯基苯甲酰胺、邻硝基苯基乙酰胺、邻硝基苯氧基乙酰胺、乙酰乙酰胺、(N’-二硫代苄基氧基酰基氨基)乙酰胺、3-(对羟基苯基)丙酰胺、3-(邻硝基苯基)丙酰胺、2-甲基-2-(邻硝基苯氧基)丙酰胺、2-甲基-2-(邻苯基偶氮苯氧基)丙酰胺、4-氯丁酰胺、3-甲基-3-硝基丁酰胺、邻硝基肉桂酰胺、N-乙酰基蛋氨酸衍生物、邻硝基苯甲酰胺和邻(苯甲酰基氧基甲基)苯甲酰胺。
氮保护基诸如氨基甲酸酯基(如-C(＝O)ORaa)包括但不限于，氨基甲酸甲基酯、氨基甲酸乙基酯、氨基甲酸9-芴基甲基酯(Fmoc)、氨基甲酸9-(2-磺基)芴基甲基酯、氨基甲酸9-(2,7-二溴)芴基甲基酯、氨基甲酸2,7-二-叔丁基-[9-(10,10-二氧代-10,10,10,10-四氢噻吨酮基)]甲基酯(DBD-Tmoc)、氨基甲酸4-甲氧基苯酰基酯(Phenoc)、氨基甲酸2,2,2-三氯乙基酯(Troc)、氨基甲酸2-三甲基甲硅烷基乙基酯(Teoc)、氨基甲酸2-苯基乙基酯(hZ)、氨基甲酸1-(1-金刚烷基)-1-甲基乙基酯(Adpoc)、氨基甲酸1,1-二甲基-2-卤代乙基酯、氨基甲酸1,1-二甲基-2,2-二溴乙基酯(DB-t-BOC)、氨基甲酸1,1-二甲基-2,2,2-三氯乙基酯(TCBOC)、氨基甲酸1-甲基-1-(4-联苯基)乙基酯(Bpoc)、氨基甲酸1-(3,5-二-叔丁基苯基)-1-甲基乙基酯(t-Bumeoc)、氨基甲酸2-(2’-和4’-吡啶基)乙基酯(Pyoc)、氨基甲酸2-(N,N-二环己基甲酰胺基)乙基酯、氨基甲酸叔丁基酯(BOC或Boc)、氨基甲酸1-金刚烷基酯(Adoc)、氨基甲酸乙烯基酯(Voc)、氨基甲酸烯丙基酯(Alloc)、氨基甲酸1-异丙基烯丙基酯(Ipaoc)、氨基甲酸肉桂酰基酯(Coc)、氨基甲酸4-硝基肉桂酰基酯(Noc)、氨基甲酸8-喹啉基酯、氨基甲酸N-羟基哌啶基酯、氨基甲酸烷基二硫代酯、氨基甲酸苄基酯(Cbz)、氨基甲酸对甲氧基苄基酯(Moz)、氨基甲酸对硝基苄基酯、氨基甲酸对溴苄基酯、氨基甲酸对氯苄基酯、氨基甲酸2,4-二氯苄基酯、氨基甲酸4-甲基亚磺酰基苄基酯(Msz)、氨基甲酸9-蒽基甲基酯、氨基甲酸二苯基甲基酯、氨基甲酸2-甲基硫基乙基酯、氨基甲酸2-甲基磺酰基乙基酯、氨基甲酸2-(对甲苯磺酰基)乙基酯、氨基甲酸[2-(1,3-二硫杂环己烷基)]甲基酯(Dmoc)、氨基甲酸4-甲基噻吩基酯(Mtpc)、氨基甲酸2,4-二甲基噻吩基酯(Bmpc)、氨基甲酸2-膦酰基乙基酯(Peoc)、氨基甲酸2-三苯基膦酰基异丙基酯(Ppoc)、氨基甲酸1,1-二甲基-2-氰基乙基酯、氨基甲酸间氯-对酰基氧基苄基酯、氨基甲酸对(二羟基硼基)苄基酯、氨基甲酸5-苯并异噁唑基甲基酯、氨基甲酸2-(三氟甲基)-6-色酮基甲基酯(Tcroc)、氨基甲酸间硝基苯基酯、氨基甲酸3,5-二甲氧基苄基酯、氨基甲酸邻硝基苄基酯、氨基甲酸3,4-二甲氧基-6-硝基苄基酯、氨基甲酸苯基(邻硝基苯基)甲基酯、氨基甲酸叔戊基酯、硫代氨基甲酸S-苄基酯、氨基甲酸对氰基苄基酯、氨基甲酸环丁基酯、氨基甲酸环己基酯、氨基甲酸环戊基酯、氨基甲酸环丙基甲基酯、氨基甲酸对癸基氧基苄基酯、氨基甲酸2,2-二甲氧基酰基乙烯基酯、氨基甲酸邻(N,N-二甲基甲酰胺基)苄基酯、氨基甲酸1,1-二甲基-3-(N,N-二甲基甲酰胺基)丙基酯、氨基甲酸1,1-二甲基丙炔基酯、氨基甲酸二(2-吡啶基)甲基酯、氨基甲酸2-呋喃基甲基酯、氨基甲酸2-碘代乙基酯、氨基甲酸异冰片基酯、氨基甲酸异丁基酯、氨基甲酸异烟酰基酯、氨基甲酸对(p’-甲氧基苯基偶氮)苄基酯、氨基甲酸1-甲基环丁基酯、氨基甲酸1-甲基环己基酯、氨基甲酸1-甲基-1-环丙基甲基酯、氨基甲酸1-甲基-1-(3,5-二甲氧基苯基)乙基酯、氨基甲酸1-甲基-1-(对苯基偶氮苯基)乙基酯、氨基甲酸1-甲基-1-苯基乙基酯、氨基甲酸1-甲基-1-(4-吡啶基)乙基酯、氨基甲酸苯基酯、氨基甲酸对(苯基偶氮)苄基酯、氨基甲酸2,4,6-三-叔丁基苯基酯、氨基甲酸4-(三甲基铵)苄基酯和氨基甲酸2,4,6-三甲基苄基酯。
氮保护基诸如磺酰胺基团(如-S(＝O)2Raa)包括但不限于，对甲苯磺酰胺(Ts)、苯磺酰胺、2,3,6,-三甲基-4-甲氧基苯磺酰胺(Mtr)、2,4,6-三甲氧基苯磺酰胺(Mtb)、2,6-二甲基-4-甲氧基苯磺酰胺(Pme)、2,3,5,6-四甲基-4-甲氧基苯磺酰胺(Mte)、4-甲氧基苯磺酰胺(Mbs)、2,4,6-三甲基苯磺酰胺(Mts)、2,6-二甲氧基-4-甲基苯磺酰胺(iMds)、2,2,5,7,8-五甲基色满-6-磺酰胺(Pmc)、甲磺酰胺(Ms)、β-三甲基甲硅烷基乙烷磺酰胺(SES)、9-蒽磺酰胺、4-(4’,8’-二甲氧基萘基甲基)苯磺酰胺(DNMBS)、苄基磺酰胺、三氟甲基磺酰胺和苯酰基磺酰胺。
其他氮保护基包括但不限于，吩噻嗪基-(10)-酰基衍生物、N’-对甲苯磺酰基氨基酰基衍生物、N’-苯基氨基硫基酰基衍生物、N-苯甲酰基苯丙氨基衍生物、N-乙酰基蛋氨酸衍生物、4,5-二苯基-3-噁唑啉-2-酮、N-邻苯二甲酰亚胺、N-二硫杂琥珀酰亚胺(Dts)、N-2,3-二苯基马来酰亚胺、N-2,5-二甲基吡咯、N-1,1,4,4-四甲基二甲硅烷基氮杂环戊烷加合物(STABASE)、5-取代的1,3-二甲基-1,3,5-三氮杂环己-2-酮、5-取代的1,3-二苄基-1,3,5-三氮杂环己-2-酮、1-取代的3,5-二硝基-4-吡啶酮、N-甲基胺、N-烯丙基胺、N-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基胺(SEM)、N-3-乙酰氧基丙基胺、N-(1-异丙基-4-硝基-2-氧代-3-二氢吡咯-3-基)胺、季铵盐、N-苄基胺、N-二(4-甲氧基苯基)甲基胺、N-5-二苯并环庚基胺、N-三苯基甲基胺(Tr)、N-[(4-甲氧基苯基)二苯基甲基]胺(MMTr)、N-9-苯基芴基胺(PhF)、N-2,7-二氯-9-芴基亚甲基胺、N-二茂铁基甲基氨基(Fcm)、N-吡啶-2-甲基氨基N’-氧化物、N-1,1-二甲基硫基亚甲基胺、N-亚苄基胺、N-对甲氧基亚苄基胺、N-二苯基亚甲基胺、N-[(2-吡啶基)均三甲苯基]亚甲基胺、N-(N’,N’-二甲基氨基亚甲基)胺、N,N’-异亚丙基二胺、N-对硝基亚苄基胺、N-亚水杨基胺、N-5-氯亚水杨基胺、N-(5-氯-2-羟基苯基)苯基亚甲基胺、N-亚环己基胺、N-(5,5-二甲基-3-氧代-1-环己烯基)胺、N-硼烷衍生物、N-二苯基硼酸衍生物、N-[苯基(戊酰基铬-或钨)酰基]胺、N-铜螯合物、N-锌螯合物、N-硝基胺、N-亚硝基胺、胺N-氧化物、二苯基膦酰胺(diphenylphosphinamide)(Dpp)、二甲基硫基膦酰胺(Mpt)、二苯基硫基膦酰胺(Ppt)、二烷基磷酰胺、二苄基磷酰胺、二苯基磷酰胺、苯次磺酰胺、邻硝基苯次磺酰胺(Nps)、2,4-二硝基苯次磺酰胺、五氯苯次磺酰胺、2-硝基-4-甲氧基苯次磺酰胺、三苯基甲基次磺酰胺和3-硝基吡啶次磺酰胺(Npys)。
在某些实施方案中，氧原子上的存在的取代基为氧保护基(还称为羟基保护基)。氧保护基包括但不限于–Raa、–N(Rbb)2、–C(＝O)SRaa、–C(＝O)Raa、–CO2Raa、–C(＝O)N(Rbb)2、–C(＝NRbb)Raa、–C(＝NRbb)ORaa、–C(＝NRbb)N(Rbb)2、–S(＝O)Raa、–SO2Raa、–Si(Raa)3、–P(Rcc)2、–P(Rcc)3、–P(＝O)2Raa、–P(＝O)(Raa)2、–P(＝O)(ORcc)2、–P(＝O)2N(Rbb)2和–P(＝O)(NRbb)2，其中Raa、Rbb和Rcc如本申请所定义。氧保护基是本领域众所周知的，并包括在ProtectingGroupsinOrganicSynthesis,T.W.GreeneandP.G.M.Wuts,3rdedition,JohnWiley&Sons,1999中详述的那些，在此引入作为参考。
示例性的氧保护基包括但不限于甲基、叔丁氧基羰基(BOC或Boc)、甲氧基甲基(MOM)、甲硫基甲基(MTM)、叔丁硫基甲基、(苯基二甲基甲硅烷基)甲氧基甲基(SMOM)、苯甲氧基甲基(BOM)、对甲氧基苯甲氧基甲基(PMBM)、(4–甲氧基苯氧基)甲基(p-AOM)、愈创木酚甲基(GUM)、叔丁氧基甲基、4–戊烯氧基甲基(POM)、甲硅烷氧基甲基、2–甲氧基乙氧基甲基(MEM)、2,2,2–三氯乙氧基甲基、双(2–氯乙氧基)甲基、2–(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基(SEMOR)、四氢吡喃基(THP)、3–溴四氢吡喃基、四氢硫代吡喃基、1–甲氧基环己基、4–甲氧基四氢吡喃基(MTHP)、4–甲氧基四氢硫代吡喃基、S,S–二氧化4–甲氧基四氢硫代吡喃基、1–[(2–氯–4–甲基)苯基]–4–甲氧基哌啶-4–基(CTMP)、1,4–二氧杂环己烷-2–基、四氢呋喃基、四氢硫代呋喃基、2,3,3a,4,5,6,7,7a–八氢–7,8,8–三甲基–4,7–亚甲基苯并呋喃–2–基、1–乙氧基乙基、1–(2–氯乙氧基)乙基、1–甲基–1–甲氧基乙基、1–甲基–1–苯甲氧基乙基、1–甲基–1–苯甲氧基–2-氟乙基、2,2,2–三氯乙基、2–三甲基甲硅烷基乙基、2–(苯基氢硒基)乙基、叔丁基、烯丙基、对氯苯基、对甲氧基苯基、2,4–二硝基苯基、苄基(Bn)、对甲氧基苄基、3,4–二甲氧基苄基、邻硝基苄基、对硝基苄基、对卤代苄基、2,6–二氯苄基、对氰基苄基、对苯基苄基、2–甲基吡啶基、4–甲基吡啶基、3–甲基–2–甲基吡啶基N–氧化物、二苯基甲基、p,p′–二硝基二苯甲基、5–二苯并环庚烯基(5–dibenzosuberyl)、三苯基甲基、α–萘基二苯基甲基、对甲氧基苯基二苯基甲基、二(对甲氧基苯基)苯基甲基、三(对甲氧基苯基)甲基、4–(4′–溴苯甲酰氧基苯基)二苯基甲基、4,4′,4″–三(4,5–二氯苯二甲酰亚氨基苯基)甲基、4,4′,4″–三(乙酰丙酰氧基苯基)甲基(4,4′,4″–tris(levulinoyloxyphenyl)methyl)、4,4′,4″–三(苯甲酰氧基苯基)甲基、3–(咪唑-1–基)双(4′,4″–二甲氧基苯基)甲基、1,1–双(4–甲氧基苯基)–1′–芘基甲基、9–蒽基、9–(9–苯基)呫吨基、9–(9–苯基–10–氧代)蒽基、1,3–苯并二硫杂环戊烷(benzodisulfuran)–2–基、S,S–二氧化苯并异噻唑基、三甲基甲硅烷基(TMS)、三乙基甲硅烷基(TES)、三异丙基甲硅烷基(TIPS)、二甲基异丙基甲硅烷基(IPDMS)、二乙基异丙基甲硅烷基(DEIPS)、二甲基叔己基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基(TBDMS)、叔丁基二苯基甲硅烷基(TBDPS)、三苄基甲硅烷基、三–对二甲苯基甲硅烷基、三苯基甲硅烷基、二苯基甲基甲硅烷基(DPMS)、叔丁基甲氧基苯基甲硅烷基(TBMPS)、甲酸酯、苯甲酰基甲酸酯、乙酸酯、氯乙酸酯、二氯乙酸酯、三氯乙酸酯、三氟乙酸酯、甲氧基乙酸酯、三苯基甲氧基乙酸酯、苯氧基乙酸酯、对氯苯氧基乙酸酯、3–苯基丙酸酯、4–氧代戊酸酯(乙酰丙酸酯)、4,4–(亚乙基二硫代)戊酸酯(乙酰丙酰基二硫代乙缩醛)、新戊酸酯、金刚酸酯、巴豆酸酯、4–甲氧基巴豆酸酯、苯甲酸酯、对苯基苯甲酸酯、2,4,6–三甲基苯甲酸酯(mesitoate),烷基甲基碳酸酯、9–芴基甲基碳酸酯(Fmoc)、烷基乙基碳酸酯、烷基2,2,2–三氯乙基碳酸酯(Troc)、2–(三甲基甲硅烷基)乙基碳酸酯(TMSEC)、2–(苯基磺酰基)乙基碳酸酯(Psec)、2–(三苯基磷鎓基)乙基碳酸酯(Peoc)、烷基异丁基碳酸酯、烷基乙烯基碳酸酯、烷基烯丙基碳酸酯、烷基对硝基苯基碳酸酯、烷基苄基碳酸酯、烷基对甲氧基苄基碳酸酯、烷基3,4–二甲氧基苄基碳酸酯、烷基邻硝基苄基碳酸酯、烷基对硝基苄基碳酸酯、烷基S–苄基硫代碳酸酯、4–乙氧基–1–萘基碳酸酯、甲基二硫代碳酸酯、2–碘苯甲酸酯、4–叠氮基丁酸酯、4–硝基–4–甲基戊酸酯、邻(二溴甲基)苯甲酸酯、2–甲酰基苯磺酸酯、2–(甲硫基甲氧基)乙基、4–(甲硫基甲氧基)丁酸酯、2–(甲硫基甲氧基甲基)苯甲酸酯、2,6–二氯–4–甲基苯氧基乙酸酯、2,6–二氯–4–(1,1,3,3–四甲基丁基)苯氧基乙酸酯、2,4–双(1,1–二甲基丙基)苯氧基乙酸酯、氯二苯基乙酸酯、异丁酸酯、单琥珀酸酯、(E)–2–甲基–2–丁烯酸酯、邻(甲氧基酰基)苯甲酸酯、α–萘甲酸酯、硝酸酯、烷基N,N,N′,N′–四甲基磷二酰胺(alkylN,N,N′,N′–tetramethylphosphorodiamidate)、烷基N–苯基氨基甲酸酯、硼酸酯、二甲基硫代磷酰基(dimethylphosphinothioyl)、烷基2,4–二硝基苯基次磺酸酯(2,4–dinitrophenylsulfenate)、硫酸酯、甲磺酸酯(mesylate)、苄基磺酸酯和甲苯磺酸酯(Ts)。
在某些实施方案中，硫原子上存在的取代基为硫保护基(也称为硫醇保护基)。硫保护基包括但不限于–Raa、–N(Rbb)2、–C(＝O)SRaa、–C(＝O)Raa、–CO2Raa、–C(＝O)N(Rbb)2、–C(＝NRbb)Raa、–C(＝NRbb)ORaa、–C(＝NRbb)N(Rbb)2、–S(＝O)Raa、–SO2Raa、–Si(Raa)3、–P(Rcc)2、–P(Rcc)3、–P(＝O)2Raa、–P(＝O)(Raa)2、–P(＝O)(ORcc)2、–P(＝O)2N(Rbb)2和–P(＝O)(NRbb)2，其中Raa、Rbb和Rcc如本申请所定义。硫保护基是本领域公知的，并且包括在ProtectingGroupsinOrganicSynthesis,T.W.GreeneandP.G.M.Wuts,3rdedition,JohnWiley&Sons,1999中详述的那些，在此引入作为参考。
这些和其它示例性的取代基更加详细地描述在发明详述、附图、实施例和权利要求中。本发明并不以任何方式被上述示例性的取代基列表限定。
其他定义
下列定义是本申请中更通常使用的术语。
本申请使用的术语“可药用盐”是指在合理的医学判断范围内适于与人类和低等动物的组织接触而没有异常毒性、刺激性和过敏反应等、并且与合理的益处/风险比相称的盐。药用盐是本领域熟知的。例如，Berge等人在J.PharmaceuticalSciences,1977,66,1–19中详细描述了药用盐。本发明化合物的药用盐包括衍生自合适的无机和有机酸和碱的盐。药用无毒性酸加成盐的实例是与无机酸或有机酸形成的氨基的盐，所述无机酸诸如氢氯酸、氢溴酸、磷酸、硫酸和高氯酸，所述有机酸诸如乙酸、草酸、马来酸、酒石酸、柠檬酸、琥珀酸或丙二酸，或通过使用本领域已知的其他方法诸如离子交换法形成的盐。其他药用盐包括己二酸盐、海藻酸盐、抗坏血酸盐、天冬氨酸盐、苯磺酸盐、苯甲酸盐、重硫酸盐、硼酸盐、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、柠檬酸盐、环戊烷丙酸盐、二葡萄糖酸盐、十二烷基硫酸盐、乙烷磺酸盐、甲酸盐、富马酸盐、葡庚糖酸盐、甘油磷酸盐、葡萄糖酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、氢碘酸盐、2-羟基-乙烷磺酸盐、乳糖醛酸盐、乳酸盐、月桂酸盐、月桂基硫酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、甲烷磺酸盐、2-萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、油酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、扑酸盐、果胶酸盐、过硫酸盐、3-苯基丙酸盐、磷酸盐、苦味酸盐、特戊酸盐、丙酸盐、硬脂酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、酒石酸盐、硫氰酸盐、对甲苯磺酸盐、十一酸盐、戊酸盐等。衍生自合适的碱的盐包括碱金属、碱土金属、铵和N+(C1-4烷基)4 -盐。代表性的碱金属或碱土金属盐包括钠、锂、钾、钙、镁等。适当时，其他药用盐包括使用抗衡离子形成的非毒性铵、季铵和胺阳离子的盐，所述抗衡离子诸如卤化物、氢氧化物、羧酸根、硫酸根、磷酸根、硝酸根、低级烷基磺酸根和芳基磺酸根。
术语“溶剂合物”指的是通常通过溶剂分解反应与溶剂结合的化合物形式。该物理结合可包括氢键。常规的溶剂包括水、甲醇、乙醇、乙酸、DMSO、THF、乙醚等。本申请所述的化合物可例如以结晶形式制备，并可为溶剂合物。合适的溶剂合物包括可药用溶剂合物，并进一步包括化学计量的溶剂合物和非-化学计量的溶剂合物。在一些实施方案中，例如，当一个或多个溶剂分子并入到结晶固体的晶格中时，可将溶剂合物分离出来。“溶剂合物”包括溶液相和可分离的溶剂合物。代表性的溶剂合物包括水合物、乙醇化物和甲醇化物。
术语“水合物”指的是与水结合的化合物。通常，包含在化合物的水合物中的水分子数目与水合物中的化合物分子的数目为确定的比例。因此，化合物的水合物可例如，由通式R·xH2O所代表，其中R为化合物，且其中x为大于0的数目。特定的化合物可形成不止一种水合物，包括例如单水合物(x为1)、低级水合物(x为大于0且小于1的数，例如半水合物(R·0.5H2O))和多水合物(x为大于1的数，例如二水合物(R·2H2O)和六水合物(R·6H2O))。
术语“互变异构体”是指特定的化合物结构的可互变形式以及氢原子和电子位移不同的化合物。因此，两种结构可能通过π电子和原子(通常为H)的运动处于平衡状态。例如，烯醇和酮类是互变异构体，因为经过酸或碱处理它们可迅速互变。另一个互变异构例子是经过酸或碱处理同样形成酸-和硝基-形式的苯基硝基甲烷。互变异构形式可能与所关注的化合物达到最理想化学反应性和生物活性有关。
还应当理解，具有相同分子式但在特性或它们的原子的结合顺序或它们的原子在空间中的排列方面不同的化合物称为“异构体”。它们的原子在空间中的排列不同的异构体称为“立体异构体”。
彼此不互为镜像的立体异构体称为“非对映异构体”，彼此互为不可重叠镜像的立体异构体的立体异构体称为“对映异构体”。当化合物存在非对称中心时，例如，该中心与四个不同的基团相连，则有可能存在一对对映异构体。对映异构体可以以其非对称中心的绝对构型为特征，并按Cahn-PrelogR-和S-顺序规则来描述，或者通过分子旋转平面偏振光的方式来描述并指定该对映异构体为右旋的或左旋的(即分别为(+)或(-)-异构体)。手性化合物可以以任意一种单独的对映异构体或者其混合物的形式存在。由相同比例对映异构体组成的混合物称为“外消旋混合物”。
术语“多晶型物”是指化合物(或其盐、水合物或溶剂合物)在特定晶体堆积排列中的结晶形式。所有多晶型物都具有相同的元素组成。不同的结晶形式通常有不同的X-射线衍射图谱、红外光谱、熔点、密度、硬度、晶形、光学及电学性质、稳定性和溶解度。重结晶溶剂、结晶速率、贮存温度和其它因素可能导致某种晶型占优势。通过在不同的条件下进行结晶可以制备化合物的各种多晶型物。
术语“前药”是指含有可裂解基团的化合物，包括本申请所述化合物的衍生物，通过溶剂分解作用或在生理条件下能够变成在体内具有药学活性的本申请化合物。这类例子包括但不限于胆碱酯类衍生物、N-烷基吗啉酯等。本发明化合物其它衍生物的酸性形式或酸性衍生物形式具有活性，但对酸敏感的形式通常在溶解性、组织相容性或者在哺乳类动物体内延迟释放方面具有优势(参见，Bundgard,H.,DesignofProdrugs,pp.7-9,21-24,Elsevier,Amsterdam1985)。前药包括本领域技术人员公知的酸性衍生物，例如母体酸与相应的乙醇反应得到的酯类、母体酸化合物与取代或未取代胺反应得到的酰胺类、酸酐类或者混合酸酐。衍生自本发明化合物侧链酸性基团的简单脂肪族或芳香族酯类、酰胺类和酸酐类是具体的前药。在某些情况下，需要制备双酯型前药，例如(酰氧基)烷基酯或((烷氧羰基)氧基)烷基酯。优选本发明所述化合物的C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、芳基、C7-C12取代的芳基、C7-C12芳烷基酯。
预期被给药的“受试者”包括但不限于人类(即任何年龄组的男性或女性，如儿科受试者(如婴儿、儿童、青少年)或成人受试者(如年轻成人、中年成人或老年成人)和/或其他非人类动物例如哺乳动物[如灵长类(如短尾猴、猕猴)；商业相关的哺乳动物诸如牛、猪、马、绵羊、山羊、猫和/或狗]和鸟(如商业相关的鸟诸如鸡、鸭、鹅和/或火鸡)。在某些实施方案中，该动物为哺乳动物。所述动物可以是雄性或雌性并处于任何发育阶段。所述动物可以是转基因动物或基因工程化的动物。在某些实施方案中，所述受试者为非人类动物。在某些实施方案中，所述动物为鱼。
如本申请所用的术语“给药(administer)”“给药(administering)”或“给药(administration)”指的以植入、吸收、消化、摄取、注射、吸入或其它方式将本发明化合物或其药物组合物引入至受试者中或受试者上。
如本申请所用的术语“治疗(treatment)”“治疗(treat)”和“治疗(treating)”指的是逆转、减轻、延迟本申请所述的“病理状态”(例如疾病、障碍或病症，或其一个或多个征兆或症状)，例如与蛋白质聚集相关的疾病(例如帕金森病)的发作或抑制其的进展。在一些实施方案中，可在一个或多个征兆或症状已经发展或者已经观察到之后给予治疗。在另外的实施方案中，可在没有疾病或病症的征兆或症状时给予治疗。例如，可在症状发作之前将治疗给予易感的个体(例如根据症状的病史和/或根据对病原体的暴露)。还可在症状已经消退之后继续给予治疗，例如，延迟或防止复发。
如本申请所用的术语“病症”“疾病”和“障碍”可互换使用。
本申请所述的化合物的“有效量”是指足以引起预期生物应答即治疗病症的量。正如本领域技术人员所知，本申请所描述的化合物有效量可能发生变化，这种变化取决于这样的因素，如预期生物学终末点、化合物的药代动力学、所治疗的病症、给药模式以及受试者的年龄及健康状况。有效量包括治疗有效量和预防有效量。
本申请所述的化合物的“治疗有效量”是指在治疗病症、延迟或最小化与所述病症相关的一个或多个症状中足以提供治疗益处的量。化合物的治疗有效量意味着单独治疗或与其它治疗方案联用的治疗剂的量，并在治疗病症中能够提供治疗益处。术语“治疗有效量”包含改善总体治疗、减少或避免疾病症状或起因，和/或增强另一种治疗剂的治疗效果的量。
本申请所述的化合物的“预防有效量”是指足以预防病症、预防与所述病症相关的一个或多个症状、或者预防所述病症复发的量。化合物的预防有效量意味着单独治疗或与其它药物联合使用的治疗剂的量，并在疾病预防中提供预防益处。术语“预防有效量”包含改善总体预防或增强另一种预防药剂的预防效果的量。
“蛋白质”或“肽”包含通过肽键连接在一起的氨基酸残基聚合物。如本申请所用的术语，指的是蛋白质、多肽和任何大小、结构或功能的肽。通常，蛋白质至少为三个氨基酸长。蛋白质既可指单个的蛋白质也可指蛋白质的集合体。尽管非天然氨基酸(即虽不存在于自然中，但可并入多肽链中的化合物)和/或本领域技术人员公知的氨基酸类似物可替换使用，但本发明的蛋白质优选仅包含天然的氨基酸。同样，本发明蛋白质的一个或多个氨基酸可被修饰，例如，通过添加化学实体如碳水化合物基团、羟基、磷酸基、法呢基、异法呢基、脂肪酸基、用于缀合或官能化的连接基，或其它修饰。蛋白质还可以是单个分子或多分子复合物。蛋白质可以是天然存在的蛋白质或肽的片段。蛋白质可以是天然存在的、重组的、合成的或它们的任意组合。
本申请涉及各种授权专利、公开的专利申请、期刊文章和其它出版物，所有这些作为参考加以引用。
本发明的一个或多个实施方案的详述见下文。本发明的其它特征、目的和优点将通过发明详述、附图、实施例和权利要求变得显而易见。
附图简述
图1显示ABI保护酵母菌以对抗α-syn毒性。(A)先导化合物ABI的结构。(B)剂量-响应曲线显示ABI(log2,μM)在5个酵母菌蛋白病模型中的相对挽救。挽救是相对于阳性对照化合物而言，其通过生长(OD600)来测定。(C)随着毒性的增加菌株中α-syn-GFP的定位：NoTox、InTox、HiTox和用10μMABI的处理的HiTox。(D)ABI(10μM)降低HiTox菌株中ROS-阳性细胞的百分比。(E)(左侧面板)带有抗α-syn抗体的NoTox、InTox和HiTox菌株α-syn-GFP的蛋白质印迹。(右侧面板)蛋白质印迹的定量(考马斯凝胶中α-syn相对于总蛋白的定量，并且对于HiTo归一化至100％)。根据单因素方差分析和Tukey检验，**：P<0.01；和***：P<0.001。
图2显示ABI对神经元的保护以对抗α-syn的毒性。(A)经DMSO(顶部)或ABI(底部)处理后在6个前部DA神经元中表达人α-syn和GFP的代表性线虫(C.elegans)的荧光显微镜检查。箭头代表DA神经元。(B)(A)的定量，以带有WT数量的DA神经元的蠕虫的百分比(％)记录。(C)由胚胎大鼠中脑建立的腹侧中脑培养物的代表性图像。在不存在或存在0.1μMABI的情况下，不转导(‘con’)或转导A53Tα-syn病毒的培养物。(顶部)酪氨酸羟化酶(TH)阳性神经元(绿色或灰色)。(底部)含MAP2(标记所有神经元的神经元微管蛋白；红色或灰色)的整合(白色)。(D)相对于MAP2阳性神经元而言，TH阳性神经元的百分比(对照组设定为100％)。(E)神经突长度的定量。误差棒是平均标准误差(SEM)。在所有面板中，根据单因素方差分析和Tukey检验，*：P<0.05；**：P<0.01；***：P<0.001。
图3显示，ABI2化学基因学筛选揭示了以E3连接酶即Rsp5p为中心的网络。(A)WT(红色或正方形：相对于无ABI)或α-syn(黑色或圆圈：相对于最大化的ABI挽救)酵母菌菌株中ABI1(log2，μM)的剂量-响应曲线。(B)α-syn的EC50(y-轴)vs.WT的IC50(x-轴)。附加的甲基基团(红色或箭头)显示在ABI2和ABI3的咪唑连接的苯基环上。(C)将使用生长抑制浓度的ABI2处理的时间(天)延长后从单个孔中回收的存活的菌落形成单位(Y-轴)。(D)过表达(绿色或顶部面板)、转座子缺失(蓝色或中部面板)、自发性突变(红色或底部面板)筛选示意图。注明了选择条件及“命中”识别方法。(E)ABI2修饰物的网络。根据源于(D)的筛选采用三种不同的阴影对节点进行颜色编码：黑色-、灰色-和白色-阴影节点分别依据(D)的底部面板、顶部面板和中间面板进行编码。边界是基于String数据库及文献管理系统的相互作用：实线，基因/功能相互作用；长虚线，物理相互作用；短虚线，基因与物理双重相互作用。(F-H)耐ABI2突变体的大规模并行DNA测序，鉴定(F)RSP5，(G)BUL1和(H)DOA4。灰色棒是单独的测序度数(Illumina)，用IGVv.2.2观察。底部面板的彩色垂直线表示SNP。下面测序面板指示了核苷酸和氨基酸取代。在(F)中，Rsp5p结构(PDB3OLM(16))突出了活性位点半胱氨酸(黄色，C777)和G747E(红色)。(G)和(H)显示了带有相关近端特征的蛋白质序列。(I)ABI2(log2,μM)剂量-响应曲线显示了杂合子缺失(+/-)或WT二倍体(+/+)菌株的相对生长。(J)细胞中Rsp5p或Bul1p增加表达(半乳糖诱导型质粒，记为“P”)或减少表达(Δbul1或Δp.rsp5亚效等位基因，其中启动子的500bp上游插入点降低了约80％的表达(32))的ABI2剂量-响应曲线。
图4显示ABI2靶向Rsp5p活性以挽救α-syn毒性。(A)ABI2(log2，μM)剂量-响应曲线显示过表达pUBP7或pUBP11的α-syn株的最大响应百分比(％)。(B)α-syn株缺失Δbul1或Δsla1，或者表达rsp5G747E突变体时的ABI2剂量-响应曲线。(C)α-syn和ABI2基因修饰物的相互作用网络。α-syn节点为蓝色，ABI2节点红色，α-syn和ABI2网络所共享的节点为带有蓝边的红/粉色节点。节点间边界表示物理或基因相互作用(Biogrid)。粗线意味着基因和物理双重相互作用。红边连接核心ABI网络成员。其它所有边界都是蓝色。(D)α-syn表达16小时后WTα-syn和rsp5G747E菌株的存活率百分比。采用斯氏t检验(Student’st-test)，****：P<0.0001。(E)经DMSO或ABI2处理后表达α-syn的菌株中内源性Cpy的蛋白质印迹。均显示了未成熟ER和经加工的ER后形式。ER形式的累积表明ER-高尔基体运输阻塞。*：P<0.05。(F)含有DMSO(左侧)或ABI2(中间)的WTα-syn细胞和经ABI2处理且含有rsp5G747E的α-syn细胞的α-syn-GFP定位。嵌入的值表明含有大量的α-syn集中点的细胞的百分比(％)，具有标准偏差。(G)模型，其描述Rsp5p的直接或间接激活可通过调节囊泡运输的方向来拮抗α-syn的毒性。
图5显示ABI挽救A53Tα-syn毒性腹侧中脑培养物。(A)三个代表性区域(20×放大倍数)：对照，A53T和A53T+0.1μMABI。绿色或深灰色：TH阳性神经元。红色或浅灰色：MAP2神经元标记。黄色或白色：整合。箭头表示TH阳性神经元。A53Tα-syn降低TH阳性神经元的百分比(％)，这种降低通过ABI逆转。(B)在对照中和含有或不含0.1μMABI的A53Tα-syn转导神经元中的神经突长度累积频数绘图。由A53Tα-syn引起的频数至更短的神经突的移位被0.1μMABI逆转。
图6显示ABI对抗α-syn毒性的功效与WT细胞的生长抑制相关。(A)WT细胞中ABI1-3(μM)的剂量-响应曲线。Y-轴是相对于未经处理细胞的生长。(B)表达α-syn的酵母菌中ABI1-3(μM)的剂量-响应曲线。Y-轴是ABI1最大挽救的百分比(％)。生长和分析如方法中所描述。由这些曲线的数据来生成图3B，显示生长抑制与对抗α-syn毒性相关的功效相关。
图7显示，化学基因揭示了缓解WT细胞生长抑制的ABI网络。(A)细胞中ABI2(μM)的剂量-响应曲线，所述细胞含有载体对照(vectorcontrol)或含有具有来源于过表达筛选的命中的构建体。Y-轴是相对于未经处理细胞的生长。(B)过表达若干氨基酸通透酶(和生物合成酶，LEU2)的WT细胞中ABI2的剂量-响应曲线显示挽救的特异性。仅TAT1，一种色氨酸和支链氨基酸通透酶，也逆转ABI2的生长抑制。X-和Y-轴与(A)中的一样。(C)ABI2在过表达若干UBPs的WT细胞中的剂量-响应曲线。ABI2生长抑制的挽救对UBP7和UBP11具有高度特异性。X-和Y-轴与(A)中的一样。(D)在Tn7和自发性突变筛选中经鉴定为基因突变的菌株中ABI2的剂量-响应曲线。除了Δp.rsp5和rsp5G747E菌株，所有菌株都是完全基因组缺失。X-和Y-轴与(A)中的一样。(E)ABI2在原始的自发性ABI2耐药突变中的剂量-响应曲线。X-和Y-轴与(A)中的一样。在图例中注明单一氨基酸取代。“停止”表示定点突变产生一个功能可能是完全缺失的提前终止密码子。(F)WT及Δp.rsp5的蛋白质印迹显示在启动子约500bp上游插入的HygMX盒可显著降低Rsp5p蛋白质水平。采用抗Rsp5的多克隆抗体探测内源性蛋白质。Pgk1为内参照(loadingcontrol)。(G)WT和rsp5G747E细胞中Rsp5的蛋白质印迹。在WT和突变菌株之间蛋白水平仅轻微下降，表明通过降低活性实现的对该突变的影响，而并非是降低Rsp5水平。注意，rsp5G747E突变实际上使蛋白质的运行比WTRsp5p的稍慢。(H)WT(RSP5/RSP5)杂合子缺失(RSP5/Δrsp5)或二倍体酵母菌菌株中Rsp5的蛋白质印迹分析。由于RSP5是必需的，故仅在二倍体菌株中检测完全缺失。该菌株中的蛋白质约下降2倍。
图8显示RSP5过表达抑制WT细胞的生长，而Δdoa4抑制RSP5的过表达。在384孔板上诱导40小时后，在GAL1启动子的控制下对含有空载体或编码RSP5质粒的WT或Δdoa4细胞进行分析。RSP5过表达抑制了约80％的生长，而Δdoa4很大程度上挽救了这种生长。显示经ABI2处理的Δdoa4用作对照。分别相对于ABI2和RSP5未经处理的对照或载体对照进行数据归一化。
图9显示ABI促进Bap2以Rsp5-依赖方式降解。(A)ABI2(μM)在缺失或过表达BAP2菌株中的剂量-响应曲线。Y-轴是相对于未经处理细胞的生长。(B)对于RSP5rsp5G747E酵母菌菌株，亮氨酸浓度(μg/mL)的剂量-响应曲线。Y-轴是相对于正常亮氨酸浓度(100μg/mL)下细胞的生长。(C)亮氨酸浓度为100μg/mL或40μg/mL时WT酵母菌的ABI剂量-响应曲线。在完全合成培养基中标准亮氨酸浓度是100μg/mL。40μg/mL是不降低WT细胞生长速率的亮氨酸浓度(见面板(B)中的箭头)。(D)蛋白质A标记的Bap2表达以形成GAL1调节结构的构建物的蛋白质印迹分析。用半乳糖诱导Bap2表达2小时，然后加入化合物并保持1.5小时。定量是指将Bap2-蛋白A(光密度法)相对于总蛋白归一化(来自考马斯染色的凝胶)。(E)改变亮氨酸水平不能解释对α-syn毒性的挽救。亮氨(μg/mL)既可能增加也可能降低，而ABI2剂量-响应不发生移位，除了增加对低亮氨酸水平的敏感度。(F)缺Δbap2可增强ABI生长抑制，但不能解α-syn毒性。总之，(E)和(F)表明与ABI有关的亮氨酸代谢不是其对抗α-syn毒性功效的一部分，而是Rsp5过度激活的结果。
图10显示ABI2的基因修饰物影响其挽救α-syn毒性的能力。(A)ABI2(μM)在带有化学基因修饰物缺失的α-syn中的剂量-响应曲线。Y-轴是WTα-syn菌株中最大响应相对ABI2的百分比(％)。右边Y-轴是针对Δdoa4的，其自身挽救了α-syn毒性，因此需要扩大的比例尺。(B)具有过表达抑制剂的ABI2的剂量-响应曲线。图例中“p”表明基因从质粒中表达。坐标轴与(A)中的相同，不同之处在于右边Y-轴是针对BAP2的，其自身部分挽救α-syn的毒性。
图11显示共享的ABIα-syn网络基因对α-syn毒性的影响。(A)RSP5过表达挽救α-syn毒性。在液体培养基中RSP5的过表达抑制生长。然而，在表达水平更低的板上，RSP5过表达挽救α-syn毒性。未被ABI挽救的Htt72Q示出用于比较。将3倍系列稀释液点样在含葡萄糖(左)或半乳糖(右)的板上并生长3天。(B)ABI2(μM)在缺失或过表达pUBP7或pUBP11WT菌株中的剂量-响应曲线。Y-轴是未经处理条件下的相对生长。(C)ABI2(μM)在缺失Δubp7和Δubp11的表达的α-syn菌株中的剂量-响应曲线。Y-轴是相对于WTα-syn菌株中ABI2的最大响应百分比(％)。
图12显示化合物ABI2校正酵母菌和人iPS细胞突触核蛋白病模型的类似缺陷。(A)ABI2改善通过ER的向前的蛋白质运输和降低酵母菌突触核蛋白病模型的亚硝化应激。CPY蛋白的ER和后ER(液泡)形式相比较以评估源于ER(n＝3)的运输。亚硝化应激是通过使用3-NT抗体的蛋白质亚硝化水平监测。(B)ABI2在aSynA53TiPS神经元中改善通过ER的蛋白质运输。在神经元分化的8-10周之间用20μMABI2处理细胞7-10天。通过探测经过或未经EndoH处理的nicastrin及GCase来评估从ER的运输。使用图6中建立的校正的/A53T比率进行数据归一化以便更真实地描述出小分子作用的生物学意义(n＝3)。(C)ABI2降低αSynA53TiPS神经元中的亚硝化应激。在突触蛋白启动子作用下用慢病毒属编码的RFP转导A53T或突变校正的神经元前体细胞。一旦分化，神经元用RFP标记。在为期8-12周的分化中，用5μMABI2处理神经元7-10天，并装载有FL2和用NO传感器FL2实时成像(C：代表性试验，其显示每个条件从18-54神经元的定量，在另一个独立实验中获得相同的结果。)所有数据表示为平均值±SEM(*：p<0.05；**：p<0.01，双尾t检验(twotailt-test)与对照条件进行比较)。
图13显示，ABI2的化学基因筛选揭示了以E3连接酶即Rsp5为中心的网络。R：红色；G：绿色；B：蓝色；Y：黄色。(A)化合物ABI1和ABI2在α-syn细胞中的功效(EC40)vs.在WT细胞中的生长抑制(IC40)。(B)延长ABI2处理后存活细胞恢复。(C)ABI2相互作用网络。节点颜色反映如下所示的筛选起点。边界是根据String数据库和文献的相互作用(见图例，右上方)。其它命中鉴别后删除VPS23。(D)与未处理细胞相比较，响应于ABI2浓度增加的RSP5变种细胞的生长的热图。突变体包括rsp5G747E和亚效等位基因Δp.rsp5。(E)(顶部)蛋氨酸-和Rsp5-依赖性Mup1-GFP的内吞作用；(底部)指定条件下Mup1-GFP在野生型和rsp5G747E菌株中的定位。(F)(左边)Sna3-GFP内体运输至液泡的图解，其中将GFP断裂；(右边)经ABI2处理的WT和rsp5G747E细胞中的Sna3-GFP的免疫印迹分析。
图14显示ABI2直接拮抗α-syn诱导的内体缺陷。(A)含DMSO或ABI2的野生型或未标记的α-syn菌株中蛋氨酸-刺激的Mup1-GFP内吞作用。用FM4-64脉冲标记的细胞在α-syn表达的第一个小时内对液泡进行标记。(B)α-syn对Sna3-GFP定位的作用。免疫印迹显示Sna3-GFP在响应于α-syn和ABI2而断裂。FM4-64标记与(A)中相同。箭头表明含有Sna3-GFP的停滞的内体小泡。(C)存在或缺乏ABI2时表达4小时后α-syn细胞的FM4-64脉冲标记。(D)ABI2拮抗核心和二级α-syn病理学的机理的示意图。
本发明一些实施方案的详述
本发明提供了苯并咪唑衍生物及其用途。一方面，本发明提供了式(I)化合物及其可药用盐、溶剂合物、水合物、多晶型物、共结晶物、互变异构体、立体异构体、同位素标记的衍生物、前药及药物组合物。已发现这些化合物可调节E3泛素连接酶，并因此可用于治疗和/或预防与蛋白质聚集相关的疾病(例如淀粉样变性(例如帕金森病、阿尔茨海默氏病和朊病毒病))和用于在有需要的受试者中减少和/或预防蛋白质聚集。这些化合物也可用作生物探针以发现复杂疾病网络中的新结点，并研究生物学过程。
化合物
在本发明的一方面中，本发明提供了式(I)化合物：
及其可药用盐、溶剂合物、水合物、多晶型物、共结晶物、互变异构体、立体异构体、同位素标记的衍生物和前药；
其中：
环A为取代的或未取代的芳基或取代的或未取代的杂芳基；
环B为取代的或未取代的芳基或取代的或未取代的杂芳基；
X为–C(＝O)–、–C(＝S)–、–C(＝NRG)–、–S(＝O)–或–S(＝O)2–；
每种情况下RA独立地为氢、卤素、取代的或未取代的酰基、取代的或未取代的烷基、取代的或未取代的烯基、取代的或未取代的炔基、取代的或未取代的碳环基、取代的或未取代的杂环基、取代的或未取代的芳基、取代的或未取代的杂芳基、–ORA1、–N(RA1)2、–SRA1、–CN、–SCN、–C(＝NRA1)RA1、–C(＝NRA1)ORA1、–C(＝NRA1)N(RA1)2、–C(＝O)RA1、–C(＝O)ORA1、–C(＝O)N(RA1)2、–NO2、–NRA1C(＝O)RA1、–NRA1C(＝O)ORA1、–NRA1C(＝O)N(RA1)2、–OC(＝O)RA1、–OC(＝O)ORA1、–OC(＝O)N(RA1)2，或当与氮原子相连时RA为氮保护基，或者两个RA基团相连形成取代的或未取代的碳环、取代的或未取代的杂环、取代的或未取代的芳基环、或取代的或未取代的杂芳基环；
每种情况下RA1独立地为氢、取代的或未取代的酰基、取代的或未取代的烷基、取代的或未取代的烯基、取代的或未取代的炔基、取代的或未取代的碳环基、取代的或未取代的杂环基、取代的或未取代的芳基、取代的或未取代的杂芳基，或当与氮原子相连时RA1为氮保护基，当与氧原子相连时RA1为氧保护基，或当与硫原子相连时RA1为硫保护基，或者两个RA1基团相连形成取代的或未取代的杂环；
RB为氢、卤素或取代的或未取代的C1-6烷基；
RC为氢、卤素或取代的或未取代的C1-6烷基；
每种情况下RD独立地为氢、卤素、取代的或未取代的酰基、取代的或未取代的烷基、取代的或未取代的烯基、取代的或未取代的炔基、取代的或未取代的碳环基、取代的或未取代的杂环基、取代的或未取代的芳基、取代的或未取代的杂芳基、–ORD1、–N(RD1)2、–SRD1、–CN、–SCN、–C(＝NRD1)RD1、–C(＝NRD1)ORD1、–C(＝NRD1)N(RD1)2、–C(＝O)RD1、–C(＝O)ORD1、–C(＝O)N(RD1)2、–NO2、–NRD1C(＝O)RD1、–NRD1C(＝O)ORD1、–NRD1C(＝O)N(RD1)2、–OC(＝O)RD1、–OC(＝O)ORD1、–OC(＝O)N(RD1)2，或当与氮原子相连时RD为氮保护基，或者两个RD基团相连形成取代的或未取代的碳环、取代的或未取代的杂环、取代的或未取代的芳基环或取代的或未取代的杂芳基环；
每种情况下RD1独立地为氢、取代的或未取代的酰基、取代的或未取代的烷基、取代的或未取代的烯基、取代的或未取代的炔基、取代的或未取代的碳环基、取代的或未取代的杂环基、取代的或未取代的芳基、取代的或未取代的杂芳基，当与氮原子相连时RD1为氮保护基，当与氧原子相连时RD1为氧保护基，或当与硫原子相连时RD1为硫保护基，或者两个RD1基团相连形成取代的或未取代的杂环；
RE为氢、取代的或未取代的C1-6烷基或氮保护基；
每种情况下RF独立地为氢、卤素、取代的或未取代的酰基、取代的或未取代的烷基、取代的或未取代的烯基、取代的或未取代的炔基、取代的或未取代的碳环基、取代的或未取代的杂环基、取代的或未取代的芳基、取代的或未取代的杂芳基、–ORF1、–N(RF1)2、–SRF1、–CN、–SCN、–C(＝NRF1)RF1、–C(＝NRF1)ORF1、–C(＝NRF1)N(RF1)2、–C(＝O)RF1、–C(＝O)ORF1、–C(＝O)N(RF1)2、–NO2、–NRF1C(＝O)RF1、–NRF1C(＝O)ORF1、–NRF1C(＝O)N(RF1)2、–OC(＝O)RF1、–OC(＝O)ORF1、–OC(＝O)N(RF1)2，或当与氮原子相连时RF为氮保护基，或者两个RF基团相连形成取代的或未取代的碳环、取代的或未取代的杂环、取代的或未取代的芳基环或取代的或未取代的杂芳基环；
每种情况下RF1独立地为氢、取代的或未取代的酰基、取代的或未取代的烷基、取代的或未取代的烯基、取代的或未取代的炔基、取代的或未取代的碳环基、取代的或未取代的杂环基、取代的或未取代的芳基、取代的或未取代的杂芳基，当与氮原子相连时RF1为氮保护基，当与氧原子相连时RF1为氧保护基，或当与硫原子相连时RF1为硫保护基，或者两个RF1基团相连形成取代的或未取代的杂环；
RG为氢、取代的或未取代的C1-6烷基或氮保护基；
k为0、1、2、3、4或5；
p为0、1、2、3、4或5；和
m为0、1、2或3。
在一些实施方案中，本发明提供了式(I)化合物及其可药用盐。
式(I)化合物包括环A为取代的或未取代的芳基或取代的或未取代的杂芳基的那些。在某些实施方案中，环A为取代的芳基。在某些实施方案中，环A为未取代的芳基。在某些实施方案中，环A为取代的或未取代的6-至14-元芳基。在某些实施方案中，环A为单环芳基。在某些实施方案中，环A为取代的苯基。在某些实施方案中，环A具有下式：在某些实施方案中，环A具有下式：在某些实施方案中，环A具有下式：在某些实施方案中，环A具有下式：在某些实施方案中，环A具有下式： 在某些实施方案中，环A具有下式：在某些实施方案中，环A具有下式：在某些实施方案中，环A具有下式：在某些实施方案中，环A具有下式：在某些实施方案中，环A具有下式：在某些实施方案中，环A具有下式：在某些实施方案中，环A具有下式： 在某些实施方案中，环A为未取代的苯基。在某些实施方案中，环A为取代的或未取代的二环芳基。在某些实施方案中，环A为取代的萘基。在某些实施方案中，环A为未取代的萘基。在某些实施方案中，环A为三环芳基。在某些实施方案中，环A为取代的蒽基。在某些实施方案中，环A为未取代的蒽基。在某些实施方案中，环A为任选取代的芳基，其与一个或多个任选取代的碳环基、任选取代的杂环基、任选取代的芳基、或任选取代的杂芳基稠合，其中连接点在芳基上。
式(I)的环A也可为任选取代的杂芳基。在某些实施方案中，环A为取代的杂芳基。在某些实施方案中，环A为未取代的杂芳基。在某些实施方案中，环A为单环杂芳基。在某些实施方案中，环A为取代的或未取代的5-或6-元单环杂芳基，其中杂芳基环中的1、2或3个原子独立地选自氮、氧和硫。在某些实施方案中，环A为取代的或未取代的6-元单环杂芳基。在某些实施方案中，环A为取代的或未取代的6-元单环杂芳基，其中杂芳基环中的六个原子中只有一个为氮。在某些实施方案中，环A具有下式：
在某些实施方案中，环A为取代的或未取代的6-元单环杂芳基，其中杂芳基环中的六个原子中只有两个为氮。在某些实施方案中，环A具有下式：在某些实施方案中，环A具有下式： 在某些实施方案中，环A具有下式：
在某些实施方案中，环A为取代的或未取代的6-元单环杂芳基，其中杂芳基环中的六个原子中只有三个为氮。在某些实施方案中，环A具有下式：在某些实施方案中，环A具有下式： 在某些实施方案中，环A具有下式：
在某些实施方案中，环A为取代的或未取代的5-元单环杂芳基。在某些实施方案中，环A为取代的或未取代的5-元单环杂芳基，其中杂芳基环中的五个原子中只有一个为氮、氧或硫。在某些实施方案中，环A具有下式：在某些实施方案中，环A具有下式：在某些实施方案中，环A具有下式：
在某些实施方案中，环A为取代的或未取代的5-元单环杂芳基，其中杂芳基环中的五个原子中只有两个独立地为氮、氧或硫。在某些实施方案中，环A具有下式：在某些实施方案中，环A具有下式：在某些实施方案中，环A具有下式：在某些实施方案中，环A具有下式：在某些实施方案中，环A具有下式：在某些实施方案中，环A具有下式：
在某些实施方案中，环A为取代的或未取代的5-元单环杂芳基，其中杂芳基环中的五个原子中只有三个独立地为氮、氧或硫。在某些实施方案中，环A具有下式： 在某些实施方案中，环A具有下式： 在某些实施方案中，环A具有下式：
在某些实施方案中，环A为取代的或未取代的5-元单环杂芳基，其中杂芳基环中的五个原子中只有四个为氮、氧或硫。在某些实施方案中，环A具有下式：
在某些实施方案中，环A为二环杂芳基，其中当化合价允许时连接点可在二环杂芳基环系统的任何原子上。在某些实施方案中，环A为与苯基稠合的单环杂芳基环。在某些实施方案中，环A是与苯基稠合的5-元单环杂芳基环。在某些实施方案中，环A为与苯基稠合的6-元单环杂芳基环。在某些实施方案中，环A为与另一个单环杂芳基稠合的单环杂芳基环。在某些实施方案中，环A是与另一个5-元单环杂芳基稠合的5-元单环杂芳基环。在某些实施方案中，环A是与6-元单环杂芳基稠合的5-元单环杂芳基环。在某些实施方案中，环A为与另一个6-元单环杂芳基稠合的6-元单环杂芳基环。本申请所述的二环杂芳基可为取代的或未取代的。在某些实施方案中，环A为取代的或未取代的9-或10-元二环杂芳基，其中杂芳基环中的1、2、3或4个原子独立地选自氮、氧和硫。在某些实施方案中，环A为取代的或未取代的9-元二环杂芳基，其中杂芳基环中只有一个原子为氮、氧或硫。在某些实施方案中，环A为取代的或未取代的9-元二环杂芳基，其中杂芳基环中只有一个原子为氮。在某些实施方案中，环A具有下式：
在某些实施方案中，环A具有下式：
式(I)化合物包括环B为取代的或未取代的芳基或取代的或未取代的杂芳基的那些。在某些实施方案中，环B为取代的芳基。在某些实施方案中，环B为未取代的芳基。在某些实施方案中，环B为取代的或未取代的6-至14-元芳基。在某些实施方案中，环B为单环芳基。在某些实施方案中，环B为取代的苯基。在某些实施方案中，环B具有下式：在某些实施方案中，环B具有下式：在某些实施方案中，环B具有下式：在某些实施方案中，环B具有下式：在某些实施方案中，环B具有下式：在某些实施方案中，环B具有下式：在某些实施方案中，环B具有下式：在某些实施方案中，环B具有下式：在某些实施方案中，环B具有下式：在某些实施方案中，环B具有下式：在某些实施方案中，环B具有下式：在某些实施方案中，环B具有下式：在某些实施方案中，环B为未取代的苯基。在某些实施方案中，环B为取代的或未取代的二环芳基。在某些实施方案中，环B为取代的萘基。在某些实施方案中，环B为未取代的萘基。在某些实施方案中，环B为三环芳基。在某些实施方案中，环B为取代的蒽基。在某些实施方案中，环B为未取代的蒽基。在某些实施方案中，环B为任选取代的芳基，其与一个或多个任选取代的碳环基、任选取代的杂环基、任选取代的芳基或任选取代的杂芳基稠合，其中连接点在芳基上。
式(I)的环B也可为任选取代的杂芳基。在某些实施方案中，环B为取代的杂芳基。在某些实施方案中，环B为未取代的杂芳基。在某些实施方案中，环B为单环杂芳基。在某些实施方案中，环B为取代的或未取代的5-或6-元单环杂芳基，其中杂芳基环中的1、2或3个原子独立地选自氮、氧和硫。在某些实施方案中，环B为取代的或未取代的6-元单环杂芳基。在某些实施方案中，环B为取代的或未取代的6-元单环杂芳基，其中杂芳基环中的六个原子中只有一个为氮。在某些实施方案中，环B具有下式：
在某些实施方案中，环B为取代的或未取代的6-元单环杂芳基，其中杂芳基环中的六个原子中只有两个为氮。在某些实施方案中，环B具有下式：
在某些实施方案中，环B为取代的或未取代的6-元单环杂芳基，其中杂芳基环中的六个原子中只有三个为氮。在某些实施方案中，环B具有下式：
在某些实施方案中，环B为取代的或未取代的5-元单环杂芳基。在某些实施方案中，环B为取代的或未取代的5-元单环杂芳基，其中杂芳基环中的五个原子中只有一个为氮、氧或硫。在某些实施方案中，环B具有下式：
在某些实施方案中，环B为取代的或未取代的5-元单环杂芳基，其中杂芳基环中的五个原子中只有两个独立地为氮、氧或硫。在某些实施方案中，环B具有下式：
在某些实施方案中，环B为取代的或未取代的5-元单环杂芳基，其中杂芳基环中的五个原子中只有三个独立地为氮、氧或硫。在某些实施方案中，环B具有下式：
在某些实施方案中，环B为取代的或未取代的5-元单环杂芳基，其中杂芳基环中的五个原子中只有四个为氮、氧或硫。在某些实施方案中，环B具有下式：
在某些实施方案中，环B为二环杂芳基，其中当化合价允许时连接点可在二环杂芳基环系统的任何原子上。在某些实施方案中，环B为与苯基稠合的单环杂芳基环。在某些实施方案中，环B是与苯基稠合的5-元单环杂芳基环。在某些实施方案中，环B为与苯基稠合的6-元单环杂芳基环。在某些实施方案中，环B为与另一个单环杂芳基稠合的单环杂芳基环。在某些实施方案中，环B是与另一个5-元单环杂芳基稠合的5-元单环杂芳基环。在某些实施方案中，环B是与6-元单环杂芳基稠合的5-元单环杂芳基环。在某些实施方案中，环B为与另一个6-元单环杂芳基稠合的6-元单环杂芳基环。本申请所述的二环杂芳基可为取代的或未取代的。在某些实施方案中，环B为取代的或未取代的9-或10-元二环杂芳基，其中杂芳基环中的1、2、3或4个原子独立地选自氮、氧和硫。在某些实施方案中，环B为取代的或未取代的9-元二环杂芳基，其中杂芳基环中只有一个原子为氮、氧或硫。
式(I)化合物包括二价的连接基部分X。在某些实施方案中，X为–C(＝O)–。在某些实施方案中，X为–C(＝S)–。在某些实施方案中，X为–C(＝NRG)–。在某些实施方案中，X为–C(＝NH)–。在某些实施方案中，X为–S(＝O)–。在某些实施方案中，X为–S(＝O)2–。
式(I)化合物的环A可包括一个或多个取代基RA。在某些实施方案中，至少一个RA为H。在某些实施方案中，至少一个RA为卤素。在某些实施方案中，至少一个RA为F。在某些实施方案中，至少一个RA为Cl。在某些实施方案中，至少一个RA为Br。在某些实施方案中，至少一个RA为I(碘)。在某些实施方案中，至少一个RA为取代的酰基。在某些实施方案中，至少一个RA为未取代的酰基。在某些实施方案中，至少一个RA为取代的烷基。在某些实施方案中，至少一个RA为未取代的烷基。在某些实施方案中，至少一个RA为C1-6烷基。在某些实施方案中，至少一个RA为甲基。在某些实施方案中，至少一个RA为取代的甲基。在某些实施方案中，至少一个RA为–CH2F。在某些实施方案中，至少一个RA为–CHF2。在某些实施方案中，至少一个RA为–CF3。在某些实施方案中，至少一个RA为Bn。在某些实施方案中，至少一个RA为乙基。在某些实施方案中，至少一个RA为取代的乙基。在某些实施方案中，至少一个RA为–(CH2)2Ph。在某些实施方案中，至少一个RA为丙基。在某些实施方案中，至少一个RA为丁基。在某些实施方案中，至少一个RA为戊基。在某些实施方案中，至少一个RA为己基。在某些实施方案中，至少一个RA为取代的烯基。在某些实施方案中，至少一个RA为未取代的烯基。在某些实施方案中，至少一个RA为乙烯基。在某些实施方案中，至少一个RA为取代的炔基。在某些实施方案中，至少一个RA为未取代的炔基。在某些实施方案中，至少一个RA为乙炔基。在某些实施方案中，至少一个RA为取代的碳环基。在某些实施方案中，至少一个RA为未取代的碳环基。在某些实施方案中，至少一个RA为环丙基。在某些实施方案中，至少一个RA为环丁基。在某些实施方案中，至少一个RA为环戊基。在某些实施方案中，至少一个RA为环己基。在某些实施方案中，至少一个RA为环庚基。在某些实施方案中，至少一个RA为取代的杂环基。在某些实施方案中，至少一个RA为未取代的杂环基。在某些实施方案中，至少一个RA为取代的芳基。在某些实施方案中，至少一个RA为未取代的芳基。在某些实施方案中，至少一个RA为取代的苯基。在某些实施方案中，至少一个RA为未取代的苯基。在某些实施方案中，至少一个RA为取代的萘基。在某些实施方案中，至少一个RA为未取代的萘基。在某些实施方案中，至少一个RA为取代的杂芳基。在某些实施方案中，至少一个RA为未取代的杂芳基。在某些实施方案中，至少一个RA为单环杂芳基。在某些实施方案中，至少一个RA为5-元单环杂芳基。在某些实施方案中，至少一个RA为5-元单环杂芳基，其中杂芳基环中的五个原子中只有一个为氮、氧或硫。在某些实施方案中，至少一个RA为5-元单环杂芳基，其中杂芳基环中的五个原子中只有两个独立地为氮、氧或硫。在某些实施方案中，至少一个RA为5-元单环杂芳基，其中杂芳基环中的五个原子中只有三个独立地为氮、氧或硫。在某些实施方案中，至少一个RA为四唑基。在某些实施方案中，至少一个RA为6-元单环杂芳基。在某些实施方案中，至少一个RA为6-元单环杂芳基，其中杂芳基环中的六个原子中只有一个为氮。在某些实施方案中，至少一个RA为6-元单环杂芳基，其中杂芳基环中的六个原子中只有两个为氮。在某些实施方案中，至少一个RA为三嗪基。在某些实施方案中，至少一个RA为四嗪基。在某些实施方案中，至少一个RA为二环杂芳基，其中当化合价允许时连接点可在二环杂芳基环系统上的任何原子上。在某些实施方案中，至少一个RA为与苯基稠合的单环杂芳基环。在某些实施方案中，至少一个RA是与苯基稠合的5-元单环杂芳基环。在某些实施方案中，至少一个RA为与苯基稠合的6-元单环杂芳基环。在某些实施方案中，至少一个RA为与另一个单环杂芳基稠合的单环杂芳基环。在某些实施方案中，至少一个RA是与另一个5-元单环杂芳基稠合的5-元单环杂芳基环。在某些实施方案中，至少一个RA是与6-元单环杂芳基稠合的5-元单环杂芳基环。在某些实施方案中，至少一个RA为与另一个6-元单环杂芳基稠合的6-元单环杂芳基。在某些实施方案中，至少一个RA为–ORA1。在某些实施方案中，至少一个RA为–OMe。在某些实施方案中，至少一个RA为–OEt。在某些实施方案中，至少一个RA为–OPr。在某些实施方案中，至少一个RA为–OBu。在某些实施方案中，至少一个RA为–O(戊基)。在某些实施方案中，至少一个RA为–O(己基)。在某些实施方案中，至少一个RA为–OPh。在某些实施方案中，至少一个RA为–OBn。在某些实施方案中，至少一个RA为–O(CH2)2Ph。在某些实施方案中，至少一个RA为–OH。在某些实施方案中，至少一个RA为–SRA1。在某些实施方案中，至少一个RA为–SH。在某些实施方案中，至少一个RA为–N(RA1)2。在某些实施方案中，至少一个RA为–NH2。在某些实施方案中，至少一个RA为–CN。在某些实施方案中，至少一个RA为–SCN。在某些实施方案中，至少一个RA为–C(＝NRA1)RA1、–C(＝NRA1)ORA1或–C(＝NRA1)N(RA1)2。在某些实施方案中，至少一个RA为–C(＝O)RA1、–C(＝O)ORA1或–C(＝O)N(RA1)2。在某些实施方案中，至少一个RA为–NO2。在某些实施方案中，至少一个RA为–NRA1C(＝O)RA1、–NRA1C(＝O)ORA1或–NRA1C(＝O)N(RA1)2。在某些实施方案中，至少一个RA为–OC(＝O)RA1、–OC(＝O)ORA1或–OC(＝O)N(RA1)2。在某些实施方案中，当与氮原子相连时至少一个RA为氮保护基。在某些实施方案中，当与氮原子相连时至少一个RA为Bn、BOC、Cbz、Fmoc、三氟乙酰基、三苯基甲基或Ts。
在式(I)化合物中，两个RA基团可相连形成取代的或未取代的碳环。在某些实施方案中，两个RA基团相连形成取代的或未取代的环丙环。在某些实施方案中，两个RA基团相连形成取代的或未取代的环丁环。在某些实施方案中，两个RA基团相连形成取代的或未取代的环戊环。在某些实施方案中，两个RA基团相连形成取代的或未取代的环己环。在某些实施方案中，两个RA基团相连形成取代的或未取代的环庚环。
在某些实施方案中，两个RA基团相连形成取代的或未取代的杂环。在某些实施方案中，两个RA基团相连形成取代的或未取代的4-元杂环。在某些实施方案中，两个RA基团相连形成取代的或未取代的5-元杂环。在某些实施方案中，两个RA基团相连形成取代的或未取代的6-元杂环。在某些实施方案中，两个RA基团相连形成取代的或未取代的7-元杂环。
在某些实施方案中，两个RA基团相连形成取代的或未取代的芳环。在某些实施方案中，两个RA基团相连形成取代的或未取代的单环芳环。在某些实施方案中，两个RA基团相连形成取代的或未取代的苯环。在某些实施方案中，两个RA基团相连形成取代的或未取代的二环芳环。在某些实施方案中，两个RA基团相连形成取代的或未取代的萘环。
在某些实施方案中，两个RA基团相连形成取代的或未取代的杂芳基环。在某些实施方案中，两个RA基团相连形成取代的或未取代的单环杂芳基环。在某些实施方案中，两个RA基团相连形成取代的或未取代的5-元单环杂芳基环。在某些实施方案中，两个RA基团相连形成取代的或未取代的6-元单环杂芳基环。在某些实施方案中，两个RA基团相连形成取代的或未取代的二环杂芳基环。在某些实施方案中，两个RA基团相连形成取代的或未取代的5,6-元二环杂芳基环。在某些实施方案中，两个RA基团相连形成取代的或未取代的6,5-元二环杂芳基环。在某些实施方案中，两个RA基团相连形成取代的或未取代的6,6-元二环杂芳基环。
在某些实施方案中，至少一个RA为卤素、取代的或未取代的C1-6烷基或–ORA1。在某些实施方案中，至少一个RA为F、Cl、–CH3、–CF3、Et、Bn、–OMe或–OEt。
在某些实施方案中，至少一个RA1为H。在某些实施方案中，至少一个RA1为取代的酰基。在某些实施方案中，至少一个RA1为未取代的酰基。在某些实施方案中，至少一个RA1为乙酰基。在某些实施方案中，至少一个RA1为取代的烷基。在某些实施方案中，至少一个RA1为未取代的烷基。在某些实施方案中，至少一个RA1为C1-6烷基。在某些实施方案中，至少一个RA1为甲基。在某些实施方案中，至少一个RA1为乙基。在某些实施方案中，至少一个RA1为丙基。在某些实施方案中，至少一个RA1为丁基。在某些实施方案中，至少一个RA1为戊基。在某些实施方案中，至少一个RA1为己基。在某些实施方案中，至少一个RA1为取代的烯基。在某些实施方案中，至少一个RA1为未取代的烯基。在某些实施方案中，至少一个RA1为乙烯基。在某些实施方案中，至少一个RA1为取代的炔基。在某些实施方案中，至少一个RA1为未取代的炔基。在某些实施方案中，至少一个RA1为乙炔基。在某些实施方案中，至少一个RA1为取代的碳环基。在某些实施方案中，至少一个RA1为未取代的碳环基。在某些实施方案中，至少一个RA1为环丙基。在某些实施方案中，至少一个RA1为环丁基。在某些实施方案中，至少一个RA1为环戊基。在某些实施方案中，至少一个RA1为环己基。在某些实施方案中，至少一个RA1为环庚基。在某些实施方案中，至少一个RA1为取代的杂环基。在某些实施方案中，至少一个RA1为未取代的杂环基。在某些实施方案中，至少一个RA1为取代的芳基。在某些实施方案中，至少一个RA1为未取代的芳基。在某些实施方案中，至少一个RA1为取代的苯基。在某些实施方案中，至少一个RA1为未取代的苯基。在某些实施方案中，至少一个RA1为取代的杂芳基。在某些实施方案中，至少一个RA1为未取代的杂芳基。在某些实施方案中，至少一个RA1为取代的吡啶基。在某些实施方案中，至少一个RA1为未取代的吡啶基。在某些实施方案中，当与氮原子相连时至少一个RA1为氮保护基。在某些实施方案中，当与氮原子相连时至少一个RA1为Bn、Boc、Cbz、Fmoc、三氟乙酰基、三苯基甲基或Ts。在某些实施方案中，当与氧原子相连时RA1为氧保护基。在某些实施方案中，当与氧原子相连时RA1为甲硅烷基、TBDPS、TBDMS、TIPS、TES、TMS、MOM、THP、t-Bu、Bn、烯丙基、乙酰基、特戊酰基或苯甲酰基。在某些实施方案中，当与硫原子相连时RA1为硫保护基。在某些实施方案中，当与硫原子相连时RA1为乙酰氨基甲基、t-Bu、3-硝基-2-吡啶硫基(sulfenyl)、2-吡啶-硫基或三苯基甲基。在某些实施方案中，两个RA1基团相连形成取代的杂环。在某些实施方案中，两个RA1基团相连形成未取代的杂环。在某些实施方案中，两个RA1基团相连形成取代的杂芳基环。在某些实施方案中，两个RA1基团相连形成未取代的杂芳基环。
式(I)化合物可包括苯并咪唑部分上的取代基RB。在某些实施方案中，RB为H。在某些实施方案中，RB为卤素。在某些实施方案中，RB为F。在某些实施方案中，RB为Cl。在某些实施方案中，RB为Br。在某些实施方案中，RB为I(碘)。在某些实施方案中，RB为取代的C1-6烷基。在某些实施方案中，RB为未取代的C1-6烷基。在某些实施方案中，RB为甲基。在某些实施方案中，RB为取代的甲基。在某些实施方案中，RB为–CH2F。在某些实施方案中，RB为–CHF2。在某些实施方案中，RB为–CF3。在某些实施方案中，RB为Bn。在某些实施方案中，RB为乙基。在某些实施方案中，RB为取代的乙基。在某些实施方案中，RB为–(CH2)2Ph。在某些实施方案中，RB为丙基。在某些实施方案中，RB为丁基。在某些实施方案中，RB为戊基。在某些实施方案中，RB为己基。
式(I)化合物可包括取代基RC。在某些实施方案中，RC为H。在某些实施方案中，RC为卤素。在某些实施方案中，RC为F。在某些实施方案中，RC为Cl。在某些实施方案中，RC为Br。在某些实施方案中，RC为I(碘)。在某些实施方案中，RC为取代的C1-6烷基。在某些实施方案中，RC为未取代的C1-6烷基。在某些实施方案中，RC为甲基。在某些实施方案中，RC为取代的甲基。在某些实施方案中，RC为–CH2F。在某些实施方案中，RC为–CHF2。在某些实施方案中，RC为–CF3。在某些实施方案中，RC为Bn。在某些实施方案中，RC为乙基。在某些实施方案中，RC为取代的乙基。在某些实施方案中，RC为–(CH2)2Ph。在某些实施方案中，RC为丙基。在某些实施方案中，RC为丁基。在某些实施方案中，RC为戊基。在某些实施方案中，RC为己基。
式(I)化合物的环B可包括一个或多个取代基RD。在某些实施方案中，至少一个RD为H。在某些实施方案中，至少一个RD为卤素。在某些实施方案中，至少一个RD为F。在某些实施方案中，至少一个RD为Cl。在某些实施方案中，至少一个RD为Br。在某些实施方案中，至少一个RD为I(碘)。在某些实施方案中，至少一个RD为取代的酰基。在某些实施方案中，至少一个RD为未取代的酰基。在某些实施方案中，至少一个RD为取代的烷基。在某些实施方案中，至少一个RD为未取代的烷基。在某些实施方案中，至少一个RD为C1-6烷基。在某些实施方案中，至少一个RD为甲基。在某些实施方案中，至少一个RD为取代的甲基。在某些实施方案中，至少一个RD为–CH2F。在某些实施方案中，至少一个RD为–CHF2。在某些实施方案中，至少一个RD为–CF3。在某些实施方案中，至少一个RD为Bn。在某些实施方案中，至少一个RD为乙基。在某些实施方案中，至少一个RD为取代的乙基。在某些实施方案中，至少一个RD为–(CH2)2Ph。在某些实施方案中，至少一个RD为丙基。在某些实施方案中，至少一个RD为丁基。在某些实施方案中，至少一个RD为戊基。在某些实施方案中，至少一个RD为己基。在某些实施方案中，至少一个RD为取代的烯基。在某些实施方案中，至少一个RD为未取代的烯基。在某些实施方案中，至少一个RD为乙烯基。在某些实施方案中，至少一个RD为取代的炔基。在某些实施方案中，至少一个RD为未取代的炔基。在某些实施方案中，至少一个RD为乙炔基。在某些实施方案中，至少一个RD为取代的碳环基。在某些实施方案中，至少一个RD为未取代的碳环基。在某些实施方案中，至少一个RD为环丙基。在某些实施方案中，至少一个RD为环丁基。在某些实施方案中，至少一个RD为环戊基。在某些实施方案中，至少一个RD为环己基。在某些实施方案中，至少一个RD为环庚基。在某些实施方案中，至少一个RD为取代的杂环基。在某些实施方案中，至少一个RD为未取代的杂环基。在某些实施方案中，至少一个RD为取代的芳基。在某些实施方案中，至少一个RD为未取代的芳基。在某些实施方案中，至少一个RD为取代的苯基。在某些实施方案中，至少一个RD为未取代的苯基。在某些实施方案中，至少一个RD为取代的萘基。在某些实施方案中，至少一个RD为未取代的萘基。在某些实施方案中，至少一个RD为取代的杂芳基。在某些实施方案中，至少一个RD为未取代的杂芳基。在某些实施方案中，至少一个RD为单环杂芳基。在某些实施方案中，至少一个RD为5-元单环杂芳基。在某些实施方案中，至少一个RD为5-元单环杂芳基，其中杂芳基环中的五个原子中只有一个为氮、氧或硫。在某些实施方案中，至少一个RD为5-元单环杂芳基，其中杂芳基环中的五个原子中只有两个独立地为氮、氧或硫。在某些实施方案中，至少一个RD为5-元单环杂芳基，其中杂芳基环中的五个原子中只有三个独立地为氮、氧或硫。在某些实施方案中，至少一个RD为四唑基。在某些实施方案中，至少一个RD为6-元单环杂芳基。在某些实施方案中，至少一个RD为6-元单环杂芳基，其中杂芳基环中的六个原子中只有一个为氮。在某些实施方案中，至少一个RD为6-元单环杂芳基，其中杂芳基环中的六个原子中只有两个是氮。在某些实施方案中，至少一个RD是三嗪基。在某些实施方案中，至少一个RD为四嗪基。在某些实施方案中，至少一个RD为二环杂芳基，其中当化合价允许时连接点可在二环杂芳基环系统的任何原子上。在某些实施方案中，至少一个RD为与苯基稠合的单环杂芳基环。在某些实施方案中，至少一个RD是与苯基稠合的5-元单环杂芳基环。在某些实施方案中，至少一个RD为与苯基稠合的6-元单环杂芳基环。在某些实施方案中，至少一个RD为与另一个单环杂芳基稠合的单环杂芳基环。在某些实施方案中，至少一个RD是与另一个5-元单环杂芳基稠合的5-元单环杂芳基环。在某些实施方案中，至少一个RD是与6-元单环杂芳基稠合的5-元单环杂芳基环。在某些实施方案中，至少一个RD为与另一个6-元单环杂芳基稠合的6-元单环杂芳基。在某些实施方案中，至少一个RD为–ORD1。在某些实施方案中，至少一个RD为–OMe。在某些实施方案中，至少一个RD为–OEt。在某些实施方案中，至少一个RD为–OPr。在某些实施方案中，至少一个RD为–OBu。在某些实施方案中，至少一个RD为–O(戊基)。在某些实施方案中，至少一个RD为–O(己基)。在某些实施方案中，至少一个RD为–OPh。在某些实施方案中，至少一个RD为–OBn。在某些实施方案中，至少一个RD为–O(CH2)2Ph。在某些实施方案中，至少一个RD为–OH。在某些实施方案中，至少一个RD为–SRD1。在某些实施方案中，至少一个RD为–SH。在某些实施方案中，至少一个RD为–N(RD1)2。在某些实施方案中，至少一个RD为–NH2。在某些实施方案中，至少一个RD为–CN。在某些实施方案中，至少一个RD为–SCN。在某些实施方案中，至少一个RD为–C(＝NRD1)RD1、–C(＝NRD1)ORD1或–C(＝NRD1)N(RD1)2。在某些实施方案中，至少一个RD为–C(＝O)RD1、–C(＝O)ORD1或–C(＝O)N(RD1)2。在某些实施方案中，至少一个RD为–NO2。在某些实施方案中，至少一个RD为–NRD1C(＝O)RD1、–NRD1C(＝O)ORD1或–NRD1C(＝O)N(RD1)2。在某些实施方案中，至少一个RD为–OC(＝O)RD1、–OC(＝O)ORD1或–OC(＝O)N(RD1)2。在某些实施方案中，当与氮原子相连时至少一个RD为氮保护基。在某些实施方案中，当与氮原子相连时至少一个RD为Bn、BOC、Cbz、Fmoc、三氟乙酰基、三苯基甲基或Ts。
在式(I)化合物中，两个RD基团可相连形成取代的或未取代的碳环。在某些实施方案中，两个RD基团相连形成取代的或未取代的环丙环。在某些实施方案中，两个RD基团相连形成取代的或未取代的环丁环。在某些实施方案中，两个RD基团相连形成取代的或未取代的环戊环。在某些实施方案中，两个RD基团相连形成取代的或未取代的环己环。在某些实施方案中，两个RD基团相连形成取代的或未取代的环庚环。
在某些实施方案中，两个RD基团相连形成取代的或未取代的杂环。在某些实施方案中，两个RD基团相连形成取代的或未取代的4-元杂环。在某些实施方案中，两个RD基团相连形成取代的或未取代的5-元杂环。在某些实施方案中，两个RD基团相连形成取代的或未取代的6-元杂环。在某些实施方案中，两个RD基团相连形成取代的或未取代的7-元杂环。
在某些实施方案中，两个RD基团相连形成取代的或未取代的芳环。在某些实施方案中，两个RD基团相连形成取代的或未取代的单环芳环。在某些实施方案中，两个RD基团相连形成取代的或未取代的苯环。在某些实施方案中，两个RD基团相连形成取代的或未取代的二环芳环。在某些实施方案中，两个RD基团相连形成取代的或未取代的萘环。
在某些实施方案中，两个RD基团相连形成取代的或未取代的杂芳基环。在某些实施方案中，两个RD基团相连形成取代的或未取代的单环杂芳基环。在某些实施方案中，两个RD基团相连形成取代的或未取代的5-元单环杂芳基环。在某些实施方案中，两个RD基团相连形成取代的或未取代的6-元单环杂芳基环。在某些实施方案中，两个RD基团相连形成取代的或未取代的二环杂芳基环。在某些实施方案中，两个RD基团相连形成取代的或未取代的5,6-元二环杂芳基环。在某些实施方案中，两个RD基团相连形成取代的或未取代的6,5-元二环杂芳基环。在某些实施方案中，两个RD基团相连形成取代的或未取代的6,6-元二环杂芳基环。
在某些实施方案中，至少一个RD为卤素、取代的或未取代的C1-6烷基或–ORD1。在某些实施方案中，至少一个RD为F、Cl、Br、Me、–CH2F、–CHF2、–CF3、Et、–OMe或–OEt。
在某些实施方案中，至少一个RD1为H。在某些实施方案中，至少一个RD1为取代的酰基。在某些实施方案中，至少一个RD1为未取代的酰基。在某些实施方案中，至少一个RD1为乙酰基。在某些实施方案中，至少一个RD1为取代的烷基。在某些实施方案中，至少一个RD1为未取代的烷基。在某些实施方案中，至少一个RD1为C1-6烷基。在某些实施方案中，至少一个RD1为甲基。在某些实施方案中，至少一个RD1为乙基。在某些实施方案中，至少一个RD1为丙基。在某些实施方案中，至少一个RD1为丁基。在某些实施方案中，至少一个RD1为戊基。在某些实施方案中，至少一个RD1为己基。在某些实施方案中，至少一个RD1为取代的烯基。在某些实施方案中，至少一个RD1为未取代的烯基。在某些实施方案中，至少一个RD1为乙烯基。在某些实施方案中，至少一个RD1为取代的炔基。在某些实施方案中，至少一个RD1为未取代的炔基。在某些实施方案中，至少一个RD1为乙炔基。在某些实施方案中，至少一个RD1为取代的碳环基。在某些实施方案中，至少一个RD1为未取代的碳环基。在某些实施方案中，至少一个RD1为环丙基。在某些实施方案中，至少一个RD1为环丁基。在某些实施方案中，至少一个RD1为环戊基。在某些实施方案中，至少一个RD1为环己基。在某些实施方案中，至少一个RD1为环庚基。在某些实施方案中，至少一个RD1为取代的杂环基。在某些实施方案中，至少一个RD1为未取代的杂环基。在某些实施方案中，至少一个RD1为取代的芳基。在某些实施方案中，至少一个RD1为未取代的芳基。在某些实施方案中，至少一个RD1为取代的苯基。在某些实施方案中，至少一个RD1为未取代的苯基。在某些实施方案中，至少一个RD1为取代的杂芳基。在某些实施方案中，至少一个RD1为未取代的杂芳基。在某些实施方案中，至少一个RD1为取代的吡啶基。在某些实施方案中，至少一个RD1为未取代的吡啶基。在某些实施方案中，当与氮原子相连时至少一个RD1为氮保护基。在某些实施方案中，当与氮原子相连时至少一个RD1为Bn、Boc、Cbz、Fmoc、三氟乙酰基、三苯基甲基或Ts。在某些实施方案中，当与氧原子相连时RD1为氧保护基。在某些实施方案中，当与氧原子相连时RD1为甲硅烷基、TBDPS、TBDMS、TIPS、TES、TMS、MOM、THP、t-Bu、Bn、烯丙基、乙酰基、特戊酰基或苯甲酰基。在某些实施方案中，当与硫原子相连时RD1为硫保护基。在某些实施方案中，当与硫原子相连时RD1为乙酰氨基甲基、t-Bu、3-硝基-2-吡啶硫基、2-吡啶-硫基或三苯基甲基。在某些实施方案中，两个RD1基团相连形成取代的杂环。在某些实施方案中，两个RD1基团相连形成未取代的杂环。在某些实施方案中，两个RD1基团相连形成取代的杂芳基环。在某些实施方案中，两个RD1基团相连形成未取代的杂芳基环。
式(I)化合物可包括取代基RE。在某些实施方案中，RE为H。在某些实施方案中，RE为取代的C1-6烷基。在某些实施方案中，RE为未取代的C1-6烷基。在某些实施方案中，RE为甲基。在某些实施方案中，RE为取代的甲基。在某些实施方案中，RE为–CH2F。在某些实施方案中，RE为–CHF2。在某些实施方案中，RE为–CF3。在某些实施方案中，RE为Bn。在某些实施方案中，RE为乙基。在某些实施方案中，RE为取代的乙基。在某些实施方案中，RE为–(CH2)2Ph。在某些实施方案中，RE为丙基。在某些实施方案中，RE为丁基。在某些实施方案中，RE为戊基。在某些实施方案中，RE为己基。在某些实施方案中，RE为氮保护基。在某些实施方案中，RE为Bn、BOC、Cbz、Fmoc、三氟乙酰基、三苯基甲基或Ts。
式(I)化合物可包括一个或多个在苯并咪唑部分上的取代基RF。在某些实施方案中，至少一个RF为H。在某些实施方案中，至少一个RF为卤素。在某些实施方案中，至少一个RF为F。在某些实施方案中，至少一个RF为Cl。在某些实施方案中，至少一个RF为Br。在某些实施方案中，至少一个RF为I(碘)。在某些实施方案中，至少一个RF为取代的酰基。在某些实施方案中，至少一个RF为未取代的酰基。在某些实施方案中，至少一个RF为取代的烷基。在某些实施方案中，至少一个RF为未取代的烷基。在某些实施方案中，至少一个RF为C1-6烷基。在某些实施方案中，至少一个RF为甲基。在某些实施方案中，至少一个RF为取代的甲基。在某些实施方案中，至少一个RF为–CH2F。在某些实施方案中，至少一个RF为–CHF2。在某些实施方案中，至少一个RF为–CF3。在某些实施方案中，至少一个RF为Bn。在某些实施方案中，至少一个RF为乙基。在某些实施方案中，至少一个RF为取代的乙基。在某些实施方案中，至少一个RF为–(CH2)2Ph。在某些实施方案中，至少一个RF为丙基。在某些实施方案中，至少一个RF为丁基。在某些实施方案中，至少一个RF为戊基。在某些实施方案中，至少一个RF为己基。在某些实施方案中，至少一个RF为取代的烯基。在某些实施方案中，至少一个RF为未取代的烯基。在某些实施方案中，至少一个RF为乙烯基。在某些实施方案中，至少一个RF为取代的炔基。在某些实施方案中，至少一个RF为未取代的炔基。在某些实施方案中，至少一个RF为乙炔基。在某些实施方案中，至少一个RF为取代的碳环基。在某些实施方案中，至少一个RF为未取代的碳环基。在某些实施方案中，至少一个RF为环丙基。在某些实施方案中，至少一个RF为环丁基。在某些实施方案中，至少一个RF为环戊基。在某些实施方案中，至少一个RF为环己基。在某些实施方案中，至少一个RF为环庚基。在某些实施方案中，至少一个RF为取代的杂环基。在某些实施方案中，至少一个RF为未取代的杂环基。在某些实施方案中，至少一个RF为取代的芳基。在某些实施方案中，至少一个RF为未取代的芳基。在某些实施方案中，至少一个RF为取代的苯基。在某些实施方案中，至少一个RF为未取代的苯基。在某些实施方案中，至少一个RF为取代的萘基。在某些实施方案中，至少一个RF为未取代的萘基。在某些实施方案中，至少一个RF为取代的杂芳基。在某些实施方案中，至少一个RF为未取代的杂芳基。在某些实施方案中，至少一个RF为单环杂芳基。在某些实施方案中，至少一个RF为5-元单环杂芳基。在某些实施方案中，至少一个RF为5-元单环杂芳基，其中杂芳基环中的五个原子中只有一个为氮、氧或硫。在某些实施方案中，至少一个RF为5-元单环杂芳基，其中杂芳基环中的五个原子中只有两个独立地为氮、氧或硫。在某些实施方案中，至少一个RF为5-元单环杂芳基，其中杂芳基环中的五个原子中只有三个独立地为氮、氧或硫。在某些实施方案中，至少一个RF为四唑基。在某些实施方案中，至少一个RF为6-元单环杂芳基。在某些实施方案中，至少一个RF为6-元单环杂芳基，其中杂芳基环中的六个原子中只有一个为氮。在某些实施方案中，至少一个RF为6-元单环杂芳基，其中杂芳基环中的六个原子中只有两个为氮。在某些实施方案中，至少一个RF为三嗪基。在某些实施方案中，至少一个RF为四嗪基。在某些实施方案中，至少一个RF为二环杂芳基，其中当化合价允许时连接点可在二环杂芳基环系统的任何原子上。在某些实施方案中，至少一个RF为与苯基稠合的单环杂芳基环。在某些实施方案中，至少一个RF是与苯基稠合的5-元单环杂芳基环。在某些实施方案中，至少一个RF为与苯基稠合的6-元单环杂芳基环。在某些实施方案中，至少一个RF为与另一个单环杂芳基稠合的单环杂芳基环。在某些实施方案中，至少一个RF是与另一个5-元单环杂芳基稠合的5-元单环杂芳基环。在某些实施方案中，至少一个RF是与6-元单环杂芳基稠合的5-元单环杂芳基环。在某些实施方案中，至少一个RF为与另一个6-元单环杂芳基稠合的6-元单环杂芳基。在某些实施方案中，至少一个RF为–ORF1。在某些实施方案中，至少一个RF为–OMe。在某些实施方案中，至少一个RF为–OEt。在某些实施方案中，至少一个RF为–OPr。在某些实施方案中，至少一个RF为–OBu。在某些实施方案中，至少一个RF为–O(戊基)。在某些实施方案中，至少一个RF为–O(己基)。在某些实施方案中，至少一个RF为–OPh。在某些实施方案中，至少一个RF为–OBn。在某些实施方案中，至少一个RF为–O(CH2)2Ph。在某些实施方案中，至少一个RF为–OH。在某些实施方案中，至少一个RF为–SRF1。在某些实施方案中，至少一个RF为–SH。在某些实施方案中，至少一个RF为–N(RF1)2。在某些实施方案中，至少一个RF为–NH2。在某些实施方案中，至少一个RF为–CN。在某些实施方案中，至少一个RF为–SCN。在某些实施方案中，至少一个RF为–C(＝NRF1)RF1、–C(＝NRF1)ORF1或–C(＝NRF1)N(RF1)2。在某些实施方案中，至少一个RF为–C(＝O)RF1、–C(＝O)ORF1或–C(＝O)N(RF1)2。在某些实施方案中，至少一个RF为–NO2。在某些实施方案中，至少一个RF为–NRF1C(＝O)RF1、–NRF1C(＝O)ORF1或–NRF1C(＝O)N(RF1)2。在某些实施方案中，至少一个RF为–OC(＝O)RF1、–OC(＝O)ORF1或–OC(＝O)N(RF1)2。在某些实施方案中，当与氮原子相连时至少一个RF为氮保护基。在某些实施方案中，当与氮原子相连时至少一个RF为Bn、BOC、Cbz、Fmoc、三氟乙酰基、三苯基甲基或Ts。
在式(I)化合物中，两个RF基团可相连形成取代的或未取代的碳环。在某些实施方案中，两个RF基团相连形成取代的或未取代的环丙环。在某些实施方案中，两个RF基团相连形成取代的或未取代的环丁环。在某些实施方案中，两个RF基团相连形成取代的或未取代的环戊环。在某些实施方案中，两个RF基团相连形成取代的或未取代的环己环。在某些实施方案中，两个RF基团相连形成取代的或未取代的环庚环。
在某些实施方案中，两个RF基团相连形成取代的或未取代的杂环。在某些实施方案中，两个RF基团相连形成取代的或未取代的4-元杂环。在某些实施方案中，两个RF基团相连形成取代的或未取代的5-元杂环。在某些实施方案中，两个RF基团相连形成取代的或未取代的6-元杂环。在某些实施方案中，两个RF基团相连形成取代的或未取代的7-元杂环。
在某些实施方案中，两个RF基团相连形成取代的或未取代的芳环。在某些实施方案中，两个RF基团相连形成取代的或未取代的单环芳环。在某些实施方案中，两个RF基团相连形成取代的或未取代的苯环。在某些实施方案中，两个RF基团相连形成取代的或未取代的二环芳环。在某些实施方案中，两个RF基团相连形成取代的或未取代的萘环。
在某些实施方案中，两个RF基团相连形成取代的或未取代的杂芳基环。在某些实施方案中，两个RF基团相连形成取代的或未取代的单环杂芳基环。在某些实施方案中，两个RF基团相连形成取代的或未取代的5-元单环杂芳基环。在某些实施方案中，两个RF基团相连形成取代的或未取代的6-元单环杂芳基环。在某些实施方案中，两个RF基团相连形成取代的或未取代的二环杂芳基环。在某些实施方案中，两个RF基团相连形成取代的或未取代的5,6-元二环杂芳基环。在某些实施方案中，两个RF基团相连形成取代的或未取代的6,5-元二环杂芳基环。在某些实施方案中，两个RF基团相连形成取代的或未取代的6,6-元二环杂芳基环。
在某些实施方案中，至少一个RF1为H。在某些实施方案中，至少一个RF1为取代的酰基。在某些实施方案中，至少一个RF1为未取代的酰基。在某些实施方案中，至少一个RF1为乙酰基。在某些实施方案中，至少一个RF1为取代的烷基。在某些实施方案中，至少一个RF1为未取代的烷基。在某些实施方案中，至少一个RF1为C1-6烷基。在某些实施方案中，至少一个RF1为甲基。在某些实施方案中，至少一个RF1为乙基。在某些实施方案中，至少一个RF1为丙基。在某些实施方案中，至少一个RF1为丁基。在某些实施方案中，至少一个RF1为戊基。在某些实施方案中，至少一个RF1为己基。在某些实施方案中，至少一个RF1为取代的烯基。在某些实施方案中，至少一个RF1为未取代的烯基。在某些实施方案中，至少一个RF1为乙烯基。在某些实施方案中，至少一个RF1为取代的炔基。在某些实施方案中，至少一个RF1为未取代的炔基。在某些实施方案中，至少一个RF1为乙炔基。在某些实施方案中，至少一个RF1为取代的碳环基。在某些实施方案中，至少一个RF1为未取代的碳环基。在某些实施方案中，至少一个RF1为环丙基。在某些实施方案中，至少一个RF1为环丁基。在某些实施方案中，至少一个RF1为环戊基。在某些实施方案中，至少一个RF1为环己基。在某些实施方案中，至少一个RF1为环庚基。在某些实施方案中，至少一个RF1为取代的杂环基。在某些实施方案中，至少一个RF1为未取代的杂环基。在某些实施方案中，至少一个RF1为取代的芳基。在某些实施方案中，至少一个RF1为未取代的芳基。在某些实施方案中，至少一个RF1为取代的苯基。在某些实施方案中，至少一个RF1为未取代的苯基。在某些实施方案中，至少一个RF1为取代的杂芳基。在某些实施方案中，至少一个RF1为未取代的杂芳基。在某些实施方案中，至少一个RF1为取代的吡啶基。在某些实施方案中，至少一个RF1为未取代的吡啶基。在某些实施方案中，当与氮原子相连时至少一个RF1为氮保护基。在某些实施方案中，当与氮原子相连时至少一个RF1为Bn、Boc、Cbz、Fmoc、三氟乙酰基、三苯基甲基或Ts。在某些实施方案中，当与氧原子相连时RF1为氧保护基。在某些实施方案中，当与氧原子相连时RF1为甲硅烷基、TBDPS、TBDMS、TIPS、TES、TMS、MOM、THP、t-Bu、Bn、烯丙基、乙酰基、特戊酰基或苯甲酰基。在某些实施方案中，当与硫原子相连时RF1为硫保护基。在某些实施方案中，当与硫原子相连时RF1为乙酰氨基甲基、t-Bu、3-硝基-2-吡啶硫基、2-吡啶-硫基或三苯基甲基。在某些实施方案中，两个RF1基团相连形成取代的杂环。在某些实施方案中，两个RF1基团相连形成未取代的杂环。在某些实施方案中，两个RF1基团相连形成取代的杂芳基环。在某些实施方案中，两个RF1基团相连形成未取代的杂芳基环。
在式(I)化合物中，当X为–C(＝NRG)–时，RG可为氢、取代的或未取代的C1-6烷基或氮保护基。在某些实施方案中，RG为H。在某些实施方案中，RG为取代的C1-6烷基。在某些实施方案中，RG为未取代的C1-6烷基。在某些实施方案中，RG为甲基。在某些实施方案中，RG为取代的甲基。在某些实施方案中，RG为–CH2F。在某些实施方案中，RG为–CHF2。在某些实施方案中，RG为–CF3。在某些实施方案中，RG为Bn。在某些实施方案中，RG为乙基。在某些实施方案中，RG为取代的乙基。在某些实施方案中，RG为–(CH2)2Ph。在某些实施方案中，RG为丙基。在某些实施方案中，RG为丁基。在某些实施方案中，RG为戊基。在某些实施方案中，RG为己基。在某些实施方案中，RG为氮保护基。在某些实施方案中，RG为Bn、BOC、Cbz、Fmoc、三氟乙酰基、三苯基甲基或Ts。
在某些实施方案中，k为0。在某些实施方案中，k为1。在某些实施方案中，k为2。在某些实施方案中，k为3。在某些实施方案中，k为4。在某些实施方案中，k为5。
在某些实施方案中，p为0。在某些实施方案中，p为1。在某些实施方案中，p为2。在某些实施方案中，p为3。在某些实施方案中，p为4。在某些实施方案中，p为5。
在某些实施方案中，m为0。在某些实施方案中，m为1。在某些实施方案中，m为2。在某些实施方案中，m为3。
在某些实施方案中，式(I)化合物为下式化合物：
或其可药用盐、溶剂合物、水合物、多晶型物、共结晶物、互变异构体、立体异构体、同位素标记的衍生物或前药。
在某些实施方案中，式(I)化合物为下式化合物：
或其可药用盐、溶剂合物、水合物、多晶型物、共结晶物、互变异构体、立体异构体、同位素标记的衍生物或前药。
在某些实施方案中，式(I)化合物为下式化合物：
或其可药用盐、溶剂合物、水合物、多晶型物、共结晶物、互变异构体、立体异构体、同位素标记的衍生物或前药。
在某些实施方案中，式(I)化合物为下式化合物：
或其可药用盐、溶剂合物、水合物、多晶型物、共结晶物、互变异构体、立体异构体、同位素标记的衍生物或前药。
在某些实施方案中，式(I)化合物为下式化合物：
或其可药用盐、溶剂合物、水合物、多晶型物、共结晶物、互变异构体、立体异构体、同位素标记的衍生物或前药。
在某些实施方案中，式(I)化合物为下式化合物：
或其可药用盐、溶剂合物、水合物、多晶型物、共结晶物、互变异构体、立体异构体、同位素标记的衍生物或前药。
本发明化合物可用于在有需要的受试者中治疗和/或预防与蛋白质聚集相关的疾病。
药物组合物、试剂盒和给药方法
本发明还提供了药物组合物，其包含本申请所述的化合物、或其可药用盐、溶剂合物、水合物、多晶型物、共结晶物、互变异构体、立体异构体、同位素标记的衍生物、或前药，以及任选地可药用赋形剂。
在某些实施方案中，在药物组合物中提供了有效量的本申请所述的化合物或其可药用盐、溶剂合物、水合物、多晶型物、共结晶物、互变异构体、立体异构体、同位素标记的衍生物或前药。在某些实施方案中，有效量是治疗有效量。在某些实施方案中，有效量是预防有效量。在某些实施方案中，有效量是用于在有需要的受试者中治疗和/或预防与蛋白质聚集相关的疾病的量。在某些实施方案中，有效量是用于在有需要的受试者中减少和/或预防蛋白质聚集的量。在某些实施方案中，有效量是用于在有需要的受试者中调节E3泛素连接酶的量。
组合物中化合物的有效量可以单一药剂或与其他的药剂组合用于治疗和/或预防与蛋白质聚集相关的疾病、减少和/或预防蛋白质聚集和/或调节E3泛素连接酶。
在某些实施方案中，有效量是用于在有需要的受试者中预防和/或治疗与蛋白质聚集相关的疾病、减少和/或预防蛋白质聚集和/或调节E3泛素连接酶的量。在给药一天或多天的一个或多个剂量中，化合物的有效量可在约0.001mg/kg至约1000mg/kg的范围内变化(取决于给药方式)。在某些实施方案中，每个剂量的有效量在约0.001mg/kg至约1000mg/kg，约0.01mg/kg至约750mg/kg，约0.1mg/kg至约500mg/kg，约1.0mg/kg至约250mg/kg，和约10.0mg/kg至约150mg/kg的范围内变化。
本申请所述的药物组合物可通过药学领域上任何已知的方法制备。通常，该制备方法包括下列步骤：将本申请所述的化合物(即“活性成分”)与载体或赋形剂、和/或一种或多种其它的辅助成分结合，然后，如果需要和/或期望地将产物成型和/或包装到期望的单剂量或多剂量单位中。
药物组合物可作为单一单位剂量和/或多个单一单位剂量制备、包装和/或成批出售。如本申请所使用的“单位剂量”是指包含预定量的活性成分的离散量的药物组合物。活性成分的量一般等于给予受试者的所述活性成分的剂量和/或所述剂量的方便分数，例如，二分之一或三分之一的所述剂量。
本发明的药物组合物中的活性成分、可药用赋形剂和/或任何另外成分的相对量将取决于待治疗的受试者的特性、体型和/或状况，并进一步取决于组合物的给药途径而变化。该组合物可包括0.1％至100％(w/w)的活性成分。
所提供的药物组合物的制备中所用的可药用赋形剂包括惰性稀释剂、分散和/或造粒剂、表面活性剂和/或乳化剂、崩解剂、粘合剂、防腐剂、缓冲剂、润滑剂、和/或油。赋形剂例如可可脂和栓剂蜡、着色剂、包衣剂、甜味剂、调味剂和芳香剂也可存在于组合物中。
示例性的稀释剂包括碳酸钙、碳酸钠、磷酸钙、磷酸氢钙、硫酸钙、磷酸氢钙、磷酸钠、乳糖、蔗糖、纤维素、微晶纤维素、高岭土、甘露醇、山梨糖醇、肌醇、氯化钠、干淀粉、玉蜀黍淀粉、糖粉、及其混合物。
示例性造粒和/或分散剂包括马铃薯淀粉、玉米淀粉、木薯淀粉、淀粉乙醇酸钠、粘土、海藻酸、瓜尔胶、柑桔果浆、琼脂、膨润土、纤维素以及木制品、天然海绵、阳离子交换树脂、碳酸钙、硅酸盐、碳酸钠、交联的聚(乙烯-吡咯烷酮)(交聚维酮)、羧甲基淀粉钠(淀粉乙醇酸钠)、羧甲基纤维素、交联的羧甲基纤维素钠(交联羧甲基纤维素)、甲基纤维素、预胶凝淀粉(淀粉1500)、微晶淀粉、水不溶性淀粉、羧甲基纤维素钙、硅酸镁铝(Veegum)、月桂基硫酸钠、季铵化合物、以及其混合物。
示例性表面活性剂和/或乳化剂包括天然乳化剂(例如，阿拉伯树胶、琼脂、海藻酸、海藻酸钠、黄芪胶，角叉菜胶(chondrux)、胆固醇、黄原胶、果胶、明胶、蛋黄、酪蛋白、羊毛脂、胆固醇、蜡、以及卵磷脂)、胶状粘土(例如膨润土(硅酸铝)和Veegum(硅酸镁铝))、长链氨基酸衍生物、高分子量醇类(例如硬脂醇、鲸蜡醇、油醇、单硬脂酸三乙酸甘油酯、乙二醇二硬脂酸酯、单硬脂酸甘油酯、以及丙二醇单硬脂酸酯、聚乙烯醇)、卡波姆(例如羧基聚亚甲基、聚丙烯酸、丙烯酸聚合物、以及羧乙烯聚合物)、卡拉胶、纤维素衍生物(例如羧甲基纤维素钠、粉末状纤维素、羟甲基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、甲基纤维素)、脱水山梨糖醇脂肪酸酯(例如，聚氧乙烯脱水山梨糖醇单月桂酸酯(Tween20)、聚氧乙烯脱水山梨糖醇(Tween60)、聚氧乙烯脱水山梨糖醇单油酸酯(Tween80)、脱水山梨糖醇单棕榈酸酯(Span40)、脱水山梨糖醇单硬脂酸酯(Span60)、脱水山梨糖醇三硬脂酸酯(Span65)、单油酸甘油酯、脱水山梨糖醇单油酸酯(Span80))、聚氧乙烯酯(例如聚氧乙烯单硬脂酸酯(Myrj45)、聚氧乙烯氢化蓖麻油、聚乙氧基化蓖麻油、聚甲醛硬脂酸酯、以及Solutol)、蔗糖脂肪酸酯、聚乙二醇脂肪酸酯(例如CremophorTM)、聚氧乙烯醚(例如聚氧乙烯月桂基醚(Brij30))、聚(乙烯-吡咯烷酮)、二乙二醇单月桂酸酯、三乙醇胺油酸酯、油酸钠、油酸钾、油酸乙酯、油酸、月桂酸乙酯、月桂基硫酸钠、普郎尼克F68、泊洛沙姆188、溴化十六烷基三甲基铵(cetrimoniumbromide)、氯化十六烷基吡啶、苯扎氯铵、多库酯钠、和/或其混合物。
示例性粘合剂包括淀粉(例如玉米淀粉和淀粉糊剂)、明胶、糖(例如蔗糖、葡萄糖、右旋糖、糊精、糖蜜、乳糖、乳糖醇、甘露醇等)、天然和合成树胶(例如阿拉伯树胶、海藻酸钠、爱尔兰藓的提取物、潘沃(panwar)胶、印度树胶(ghattigum)、isapol皮的粘液、羧甲基纤维素、甲基纤维素、乙基纤维素、羟乙基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、微晶纤维素、乙酸纤维素、聚(乙烯-吡咯烷酮)、硅酸镁铝(Veegum)、以及落叶松阿拉伯半乳聚糖)、海藻酸盐、聚环氧乙烷、聚乙二醇、无机钙盐、硅酸、聚甲基丙烯酸酯、蜡、水、醇、和/或其混合物。
示例性的防腐剂包括抗氧化剂、螯合剂、抗菌防腐剂、抗真菌防腐剂、抗原生动物防腐剂、醇防腐剂、酸性防腐剂和其它防腐剂。在某些实施方案中，防腐剂为抗氧化剂。在其它实施方案中，防腐剂为螯合剂。
示例性抗氧化剂包括α生育酚、抗坏血酸、抗坏血酸棕榈酸酯、丁羟茴醚、丁羟甲苯、单硫代甘油、焦亚硫酸钾、丙酸、没食子酸丙酯、抗坏血酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、以及亚硫酸钠。
示例性螯合剂包括乙二胺四乙酸(EDTA)及其盐和水合物(例如，依地酸钠、依地酸二钠、依地酸三钠、依地酸二钠钙、依地酸二钾等)、柠檬酸及其盐和水合物(例如一水合柠檬酸)、富马酸及其盐和水合物、苹果酸及其盐和水合物、磷酸及其盐和水合物、以及酒石酸及其盐和水合物。示例性抗微生物防腐剂包括苯扎氯铵、苄索氯铵、苯甲醇、溴硝丙二醇、西曲溴铵、西吡氯铵、双氯苯双胍己烷、氯代丁醇、氯甲酚、氯二甲酚、甲酚、乙醇、甘油、海克替啶、咪脲(imidurea)、苯酚、苯氧乙醇、苯乙醇、硝酸苯汞、丙二醇、以及硫柳汞。
示例性抗真菌防腐剂包括对羟基苯甲酸丁酯(butylparaben)、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、苯甲酸、羟基苯甲酸、苯甲酸钾、山梨酸钾、苯甲酸钠、丙酸钠、以及山梨酸。
示例性醇防腐剂包括乙醇、聚乙二醇、苯酚、酚类化合物、双酚、氯代丁醇、羟基苯甲酸酯、以及苯乙醇。
示例性酸性防腐剂包括维生素A、维生素C、维生素E、β-胡萝卜素、柠檬酸、乙酸、脱水乙酸、抗坏血酸、山梨酸、以及植酸(phyticacid)。
其他防腐剂包括生育酚、乙酸生育酚酯、甲磺酸去铁胺(deteroximemesylate)、西曲溴铵、丁羟茴醚(BHA)、丁羟甲苯(BHT)、乙二胺、月桂基硫酸钠(SLS)、月桂基乙醚硫酸钠(SLES)、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、亚硫酸钾、焦亚硫酸钾、嘉兰丹(Glydant)Plus、非诺尼普(Phenonip)、对羟基苯甲酸甲酯、杰马尔(Germall)115、杰马(Germaben)II、尼奥龙(Neolone)、卡松(Kathon)、以及舒美(Euxyl)。
示例性缓冲剂包括柠檬酸盐缓冲溶液、乙酸盐缓冲溶液、磷酸盐缓冲溶液、氯化铵、碳酸钙、氯化钙、柠檬酸钙、葡乳醛酸钙、葡庚糖酸钙、葡萄糖酸钙、D-葡糖酸、甘油磷酸钙、乳酸钙、丙酸、戊酮酸钙、戊酸、磷酸氢钙、磷酸、磷酸三钙、磷酸氢氧化钙、乙酸钾、氯化钾、葡萄糖酸钾、钾混合物、磷酸氢二钾，磷酸二氢钾、磷酸钾混合物、乙酸钠、碳酸氢钠、氯化钠、柠檬酸钠、乳酸钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、磷酸钠混合物、氨丁三醇、氢氧化镁、氢氧化铝、海藻酸、无热原水、等渗盐水、林格氏溶液、乙醇、以及其混合物。
示例性润滑剂包括硬脂酸镁、硬脂酸钙、硬脂酸、二氧化硅、滑石、麦芽、山嵛酸甘油酯、氢化植物油、聚乙二醇、苯甲酸钠、乙酸钠、氯化钠、亮氨酸、月桂基硫酸镁、月桂基硫酸钠、以及其混合物。
示例性天然油包括扁桃仁油、杏仁油、鳄梨油、巴巴苏油、香柠檬油、黑加仑种子油、琉璃苣油、杜松(cade)油、甘菊油、菜籽油、葛缕子(caraway)油、巴西棕榈油、蓖麻油、肉桂油、可可脂油、椰子油、鳕鱼肝油、咖啡油、玉米油、棉花籽油、鸸鹋(emu)油、桉树油、月见草油、鱼油、亚麻籽油、香叶醇油、葫芦油、葡萄种子油、榛子油、牛膝草(hyssop)油、肉豆寇酸异丙酯油、荷荷巴油、夏威夷果油、醒目薰衣草油、熏衣草油、柠檬油、山苍子(litseacubeba)油、澳洲坚果油、锦葵油、芒果种子油、白芒花籽油、水貂油、肉豆蔻油、橄榄油、橙油、橙连鳍鲑(orangeRoughy)油、棕榈油、棕榈仁油、桃仁油、花生油、罂粟籽油、南瓜籽油、油菜籽油、米糠油、迷迭香油、红花油、檀香油、山茶花(sasquana)油、香薄荷(savoury)油、沙棘油、芝麻油、乳木果油、硅酮油、大豆油、向日葵油、茶树油、蓟油、山茶(tsubaki)油、岩兰草油、胡桃油、以及小麦胚芽油。示例性合成油包括但不限于，硬脂酸丁酯、辛酸甘油三酯、癸酸甘油三酯、环甲硅油、癸二酸二乙酯、二甲硅油360、肉豆蔻酸异丙酯、矿物油、辛基十二烷醇、油醇、硅酮油、以及其混合物。
用于口服和肠胃外给药的液体剂型包括可药用乳剂、微乳剂、溶液、悬浮液、糖浆剂和酏剂。除了活性成分，该液体剂型还可包括本领域通常使用的惰性稀释剂例如，如水或其他溶剂、增溶剂和乳化剂例如乙醇、异丙基醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苄基醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1,3-丁二醇、二甲基甲酰胺、油类(例如棉籽油、花生油、玉米油、胚油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油)、甘油、四氢糠醇、聚乙二醇和去水山梨糖醇的脂肪酸酯，及其混合物。除了惰性稀释剂，该口服组合物还可包括辅料例如润湿剂、乳化剂和助悬剂、甜味剂、调味剂和芳香剂。在一些用于肠胃外给药的实施方案中，本发明的螯合剂与增溶剂混合，所述增溶剂例如CremophorTM、醇类、油类、改良的油类、二醇类、聚山梨醇酯类、环糊精类、聚合物及其混合物。
可注射制剂例如，无菌可注射水溶液或油质的悬浮液可使用合适的分散剂或润湿剂和助悬剂根据本领域已知的方法配制。该无菌可注射制剂可为在非毒性肠胃外可接受的稀释剂或溶剂中的无菌可注射溶液、悬浮液或乳液，例如，在1,3-丁二醇中的溶液。可使用的可接受的载体和溶剂为水、林格氏液、U.S.P.和等渗氯化钠溶液。此外，无菌非挥发油通常用作溶剂或助悬介质。为了该目的，可使用任何温和的非挥发油包括合成的甘油单酯或甘油二酯。此外，可将脂肪酸例如油酸用于可注射剂的制备中。
可注射制剂可为灭菌的，例如，通过抗菌过滤器过滤或通过将灭菌剂并入到无菌固体组合物的形式中(可在使用前将灭菌剂溶于或分散于无菌水或其它无菌可注射介质中)。
为了延长药物的效果，通常期望通过皮下或肌内注射来减慢药物吸收。这可以通过使用水溶性差的结晶或无定形物质的液体悬浮液来实现。药物的吸收速率则取决于其溶解速度，这又可能取决于晶体的大小和结晶形式。或者，肠胃外给药形式的药物延迟吸收可通过将药物溶解或悬浮于油性载体中来实现。
用于直肠或阴道给药的组合物通常为栓剂，可通过将本发明的结合物与合适的非刺激性赋形剂或载体例如可可脂、聚乙二醇或栓剂蜡(其在环境温度下为固体但在体温下为液体，并因此能在直肠或阴道腔中熔化而释放活性成分)混合来制备。
用于口服给药的固体剂型包括胶囊、片剂、丸剂、粉末剂和颗粒剂。在所述固体剂型中，可将活性成分与下列成分混合：至少一种惰性的、可药用赋形剂或载体，例如柠檬酸钠或磷酸氢钙和/或(a)填充剂或增量剂，如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇、以及硅酸；(b)粘合剂，例如，羧甲基纤维素、海藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖、以及阿拉伯树胶；(c)湿润剂，如甘油；(d)崩解剂，如琼脂-琼脂、碳酸钙、马铃薯或木薯淀粉、海藻酸、某些硅酸盐、以及碳酸钠；(e)溶液阻滞剂，如石蜡；(f)吸收加速剂，如季铵化合物；(g)润湿剂，例如，鲸蜡醇和单硬脂酸甘油酯；(h)吸收剂，如高岭土和膨润土；以及(i)润滑剂，如滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、月桂基硫酸钠、及其混合物。在胶囊、片剂以及丸剂的情况下，剂型可以包含缓冲剂。
相似类型的固体组合物也可以用作软填充和硬填充明胶胶囊中的填充剂，使用如乳糖或奶糖连同高分子量聚乙二醇等这类赋形剂。可以制备含有包衣和壳如肠溶包衣和为药理学领域所公知的其它包衣的片剂、糖锭剂、胶囊、丸剂和颗粒的固体剂型。它们可任选包含遮光剂和仅在或优选在肠道特定部位任选以延迟释放方式释放活性成分的组合物。可使用的包囊组合物实例可包含聚合物和蜡。相似类型的固体组合物也可以用作软填充和硬填充明胶胶囊中的填充剂，使用如乳糖或奶糖连同高分子量聚乙二醇等这类赋形剂。
活性成分可以是含有如上所述一种或多种赋形剂的微胶囊形式。可以制备含有包衣和壳如肠溶包衣、控释包衣和为药剂学领域所公知的其它包衣的片剂、糖锭剂、胶囊、丸剂和颗粒的固体剂型。在这类固体剂型中，活性成分可与至少一种惰性稀释剂例如蔗糖、乳糖或淀粉混合。通常，这样的剂型可包括除惰性稀释剂以外的其它添加物，例如压片润滑剂和其它压片助剂如硬脂酸镁和微晶纤维素。在胶囊、片剂和丸剂的情况下，剂型可包含缓冲剂。它们可任选包含遮光剂和仅在或优选在肠道特定部位任选以延迟释放方式释放活性成分的组合物。可使用的胶囊组合物实例可包含聚合物和蜡。
用于本发明化合物局部和/或透皮给药的剂型可包括软膏剂、糊剂、乳剂、洗剂、凝胶、粉剂、溶液、喷雾剂、吸入剂和/或贴剂。通常，在无菌条件下将活性成分与可药用载体或赋形剂和/或任何所需的防腐剂和/或所要求的缓冲剂进行混合。此外，本发明涵盖了透皮贴剂的应用，其通常具有提供活性成分至机体的受控递送的额外优点。例如，通过将活性成分溶解和/或分散于适当的介质中可以制备这样的剂型。可选择地或另外，所述速率可通过提供速率控制膜和/或通过在聚合物基质和/或凝胶中分散活性成分来控制。
用于递送本申请所述的皮内药物组合物的合适装置包括短针装置例如美国专利4,886,499；5,190,521；5,328,483；5,527,288；4,270,537；5,015,235；5,141,496；和5,417,662中所述的那些。皮内给药组合物可通过将针的有效穿透长度限制在皮肤内的装置进行给药，例如描述在PCT公开WO99/34850及其功能等价物中的那些装置。可选择地或另外地，在皮内给药的经典mantoux的方法中可使用常规的注射器。通过液体喷射注射器和/或通过能刺穿角质层并产生到达真皮的喷射流的针将液体疫苗递送至真皮的喷射注射装置是合适的。喷射注射装置描述在例如，美国专利5,480,381；5,599,302；5,334,144；5,993,412；5,649,912；5,569,189；5,704,911；5,383,851；5,893,397；5,466,220；5,339,163；5,312,335；5,503,627；5,064,413；5,520,639；4,596,556；4,790,824；4,941,880；4,940,460；和PCT公开WO97/37705和WO97/13537中。使用压缩气体以促进粉末形式的化合物通过皮肤的外层至真皮的发射粉末/颗粒的递送装置是合适的。
适于局部给药的制剂包括但不限于液体和/或半液体制剂例如搽剂、洗剂、水包油和/或油包水乳液例如乳膏、软膏和/或糊剂，和/或溶液和/或悬浮液。尽管活性成分的浓度可尽可能高，以致达到溶剂中活性成分溶解度的限度，但是典型地可给药的制剂可例如包括约1％至约10％(w/w)的活性成分。用于局部给药的制剂还可包括一种或多种其他本申请所述的成分。
本发明的药物组合物可以适于通过口腔经肺给药的制剂形式制备、包装和/或销售。该制剂可包括具有约0.5至约7纳米或约1至约6纳米范围的直径的干颗粒，其中含有活性成分。该组合物通常为使用包含干粉贮器的装置(其中推进剂的气流可直接将粉末分散到干粉贮器中)和/或使用自推进溶剂/粉末分配容器给药的干粉形式，例如在密封容器中包含溶于和/或悬浮于低沸点推进剂中的活性成分的装置。该粉末包括这样的颗粒，其中至少98重量％的颗粒具有大于0.5纳米的直径，以及至少95数量％的颗粒具有小于7纳米的直径。或者，至少95重量％的颗粒具有大于1纳米的直径，以及至少90数量％的颗粒具有小于6纳米的直径。干粉组合物可包括固体的微细粉末稀释剂例如糖，并可方便地提供在单位剂型中。
低沸点推进剂通常包括在大气压下具有低于65°F沸点的液体推进剂。通常，该推进剂可构成50至99.9％(w/w)的组合物，并且活性成分可构成0.1至20％(w/w)的组合物。该推进剂还可包括其他的成分例如液体非离子和/或固体阴离子表面活性剂和/或固体稀释剂(其可具有与包含活性成分的颗粒相同数量级的粒径)。
本发明配制的、用于肺部给药的药物组合物中，活性成分以溶液和/或悬浮液液滴的形式存在。可以制备、包装和/或出售这样的制剂：包含活性成分的水性和/或稀的醇溶液和/或悬浮液，其任选是无菌的，并且为方便给药使用任何喷雾和/或雾化装置。这类制剂可以进一步包含一种或多种其它成分，包括但不限于调味剂如糖精钠、挥发性油、缓冲剂、表面活性剂和/或防腐剂例如羟基苯甲酸甲酯。通过这种给药途径所提供的液滴的平均直径范围为约0.1至约200纳米。
经肺递送的本申请所述的制剂用于鼻内递送本发明的药物组合物。适于鼻内给药的另外的制剂是包含活性成分且具有约0.2至500微米平均颗粒的粗粉。通过快速吸入由靠近鼻孔握着的粉末容器经鼻通道给药该制剂。
例如用于经鼻给药制剂，包含从约0.1％(w/w)至高达100％(w/w)的活性成分，并且可包括本申请所述的一种或多种其它成分。本发明的药物组合物可以用于口腔给药的制剂形式被制备、包装和/或销售。这样的制剂可以，例如，是使用常规方法制得的片剂和/或锭剂形式，并且可以包含，例如，0.1至20％(W/W)的活性成分，余量包含口服可溶解和/或降解的成分和任选地一种或多种本申请所述的其它成分。或者，口腔给药制剂可包括含有活性成分的粉末和/或气溶胶化和/或雾化溶液和/或悬浮液。这样的粉状、气溶胶化和/或雾化制剂，分散时，具有的平均颗粒和/或液滴的尺寸范围为约0.1至约200纳米，并且可进一步包含一种或多种本发明所述的其它成分。
本发明的药物组合物可以用于眼科给药的制剂被制备、包装和/或销售。这样的制剂可以，例如，是滴眼剂的形式，包括，例如，水性或油性液体载体或赋形剂中含有0.1/1.0％(W/W)活性成分的溶液和/或悬浮液。这样滴眼剂可进一步包含缓冲剂、盐和/或一种或多种本申请所述的其它成分。其它经眼给药的有用制剂包括那些包含在微晶形式和/或在脂质体中的活性成分。滴耳剂和/或滴眼剂涵盖在本发明的范围之内。
虽然本发明所提供的药物组合物的描述主要涉及适合于人类给药的药物组合物，但本领域技术人员应理解，这样的组合物一般也适合于各种动物给药。更改适合人类给药的药物组合物以便实施适合各种动物给药的组合物是很好理解的，并且本领域的普通技术兽医药理学家可以设计和/或通过普通的实验来进行这样的更改。.
本发明所提供的化合物通常配制成易于给药和剂量均匀的单位剂量形式。然而，应当理解，本发明组合物的每日总用量应由主治医师在合理的医学判断范围内来决定。任何特定受试者或有机体的具体治疗有效剂量水平将取决于多种因素，包括所治疗的疾病和病症的严重程度、所采用具体活性成分的活性、所采用的具体组合物；受试者的年龄、体重、一般健康状况、性别、饮食；给药时间、给药途径，所使用具体活性成分的排泄速率；治疗的持续时间；与所采用具体活性成分联合使用或共同使用的药物；以及医学领域公知的类似因素。
本申请所提供的化合物和组合物可通过任何途径给药，包括肠内(例如经口)、肠胃外、静脉内、肌内、动脉内、髓内、鞘内、皮下、心室内、经皮、皮内、直肠、阴道内、腹膜内、局部(作为粉末、软膏、乳膏、和/或滴剂)、经粘膜、经鼻、经颊、舌下给药；通过气管内滴入、支气管滴入、和/或吸入；和/或作为口服喷雾剂、鼻喷雾剂、和/或气雾剂。特别地，期望的途径是口服给药、静脉内给药(例如全身性静脉内注射),通过血液和/或淋巴供给进行区域给药和/或直接给药于受侵袭的位点。通常，最合适的给药途径取决于不同的因素包括药剂的性质(例如其在胃肠道环境中的稳定性)和/或受试者的状况(例如是否受试者能忍受口服给药)。
需要获得有效量的化合物的确切量将根据受试者例如物种、年龄和受试者的一般状况、副作用或疾病的严重性、具体化合物的特性和给药方式等变化。可一天三次、一天两次、一天一次、每隔一天、每隔两天、每周、每隔一周、每隔两周或每隔三周递送所需的剂量。在某些实施方案中，可使用多种给药方式递送所需的剂量(例如两种、三种、四种、五种、六种、七种、八种、九种、十种、十一种、十二种、十三种、十四种或更多种给药方式)。
在某些实施方案中，每天一次或多次给药于70kg成人的化合物的有效量可在每个单位剂型中包括约0.0001mg至约3000mg，约0.0001mg至约2000mg，约0.0001mg至约1000mg，约0.001mg至约1000mg，约0.01mg至约1000mg，约0.1mg至约1000mg，约1mg至约1000mg，约1mg至约100mg，约10mg至约1000mg或约100mg至约1000mg的化合物。
在某些实施方案中，本申请所述的化合物可一天一次或多次以足以递送约0.001mg/kg至约100mg/kg，约0.01mg/kg至约50mg/kg，优选约0.1mg/kg至约40mg/kg，优选约0.5mg/kg至约30mg/kg，约0.01mg/kg至约10mg/kg，约0.1mg/kg至约10mg/kg，且更优选约1mg/kg至约25mg/kg的受试者体重/天的剂量水平获得所需的治疗和/或预防效果。
应当理解，本申请所述的剂量范围用于指导成人施用所提供的药物组合物。例如，儿童或青少年的给药的剂量，可以由执业医师或本领域技术人员来确定，并且可以低于或与给予成人的剂量相同。
还应当理解可将本申请所述的化合物或组合物与一种或多种其它的药剂(例如治疗和/或预防活性剂)组合给药。化合物或组合物可与其它的药剂组合给药以改善它们的活性(例如在有需要的受试者中预防和/或治疗与蛋白质聚集相关的疾病中的活性，预防和/或治疗神经变性疾病中的活性、预防和/或治疗与TDP-43相关的疾病中的活性、减少和/或预防蛋白质聚集,和/或调节E3泛素连接酶的活性)，生物利用度，减少和/或改变它们的代谢，抑制它们的排泄和/或改变它们在受试者体内的分布。还应当理解所用的治疗对于相同的病症可以获得所需的效果，和/或其可获得不同的效果。
所述化合物或组合物在可能有用的情况下，例如联合疗法，可同时与、先于或后于一种或多种另外的药剂给药。药剂包括治疗有效的药剂。药物还包括预防性活性剂。每种其他的药剂可以以剂量和/或该药剂的确定时间表来给药。所述其他的药物也可以单剂量与彼此和/或与本发明所述化合物或组合物同时给药，或分不同剂量分开给药。在给药方案中的特定组合，将考虑本发明化合物与另外的药物和/或要实现的所需治疗和/或预防效果的兼容性。通常，期望在联合治疗中所采用的另外药物在不超过它们单独使用时的水平下使用。在某些实施方案中，联合治疗中所采用的水平可能低于单独使用时的。
另外的药剂包括但不限于抗增殖剂(例如抗癌剂)、抗糖尿病剂、抗炎剂、免疫抑制剂、抗真菌剂、抗原生动物剂、抗菌剂、抗病毒剂、抗炎剂、抗变应性剂和疼痛缓解剂。在某些实施方案中，该另外的药剂为E3泛素连接酶调节剂。在某些实施方案中，该另外的药剂为E3泛素连接酶激活剂。药剂包括小的有机分子例如药物化合物(例如美国食品和药品管理局在联邦管理法规(CodeofFederalRegulations，CFR)中规定的，用于人或兽医用途的化合物)、肽、蛋白质、碳水化合物、单糖、寡糖、多糖、核蛋白类、粘蛋白类、脂蛋白类、合成多肽或蛋白质、连接蛋白质、糖蛋白、甾体、核酸、DNA、RNA、核苷酸、核苷、寡核苷酸、反义寡核苷酸、脂类、激素、维生素和细胞的小分子。在某些实施方案中，其它的药剂为用于治疗和/或预防帕金森病的药剂，例如例如l-多巴、多巴脱羧酶抑制剂(例如卡比多巴、左旋多巴、苄丝肼、卡比多巴/左旋多巴的组合制剂(例如SINEMET、PARCOPA)、苄丝肼/左旋多巴(例如MADOPAR))、卡比多巴/左旋多巴/恩他卡朋(STALEVO)、COMT抑制剂(例如恩他卡朋(COMTAN)和托卡朋(TASMAR))、多巴胺激动剂(例如溴隐亭(PARLODEL)、培高利特(PERMA)、普拉克索(MIRAPE)、透皮罗替戈汀(NEUPRO)、罗匹尼罗(REQUIP)、卡麦角林、阿扑吗啡(APOKYN)和麦角乙脲)、多巴胺激动剂、MAO-B抑制剂(例如雷沙吉兰(AZILECT)、司来吉兰(ELDEPRYL、CARBEX、DEPRENYL)、甲磺酸苯托品(COGENTIN)、司来吉兰的代谢物(L-安非他明和L-甲基苯丙胺)、金刚烷胺(SYMMETREL)和三己基苯基(ARTANE))。在某些实施方案中，其它的药剂为用于治疗和/或预防阿尔茨海默氏病的药剂，例如胆碱酯酶抑制剂(例如ARICEPT、利凡斯的明(EXELON)、加兰他敏(REMINYL、目前RAZADYNE))、NMDA拮抗剂(例如美金刚(NAMENDA)和PDE4抑制剂例如西洛司特(ARIFLO))、非甾类抗炎药(NSAIDs)(例如R-氟比洛芬(FLURIZAN))、降胆固醇的他汀类药物(例如普伐他汀、辛伐他汀和阿托伐他汀)、抗淀粉样蛋白和抗-Aβ免疫治疗、抑制Aβ聚集的化合物(例如鲨肌醇和氯碘羟喹)、抑制或改变Aβ生成或加工的化合物(例如γ-分泌酶抑制剂、β-分泌酶抑制剂、γ-分泌酶调节剂、Aβ调节剂和GSK-3抑制剂)、调节Aβ周转的化合物(例如PAI-1抑制剂)、调节τ磷酰化的化合物(例如GSK-3和CDK-5抑制剂)、PPARγ激动剂(例如罗格列酮)、调节τ或磷-τ周转或低聚反应的化合物(例如HSP90抑制剂、HDAC抑制剂和抗-τ免疫治疗)、稳定或结合微管的化合物(例如紫杉烷衍生物和埃坡霉素衍生物)和调节线粒体功能的化合物(例如latrepirdine)。
本发明还包括试剂盒(例如，药物包)。所提供的试剂盒包含本发明的药物组合物或化合物与容器(例如，玻璃小瓶、安瓿、瓶子、注射器和/或分装包，或其它合适的容器)。在一些实施方案中，所提供的试剂盒可任选进一步包含用于稀释的药用赋形剂或包含本发明药物组合物或化合物悬浮液的第二容器。在一些实施方案中，第一容器和第二容器中所提供的本发明药物组合物或化合物被组合成为一个单位剂量。
因此，一方面提供了试剂盒，其包括含有本申请所述的化合物或其可药用盐、溶剂合物、水合物、多晶型物、共结晶物、互变异构体、立体异构体、同位素标记的衍生物或前药或其药物组合物的第一容器。在某些实施方案中，本申请所述试剂盒用于预防和/或治疗神经变性疾病。在某些实施方案中，本申请所述试剂盒用于在有需要的受试者中预防和/或治疗与蛋白质聚集相关的疾病。在某些实施方案中，该试剂盒用于在有需要的受试者中减少和/或预防蛋白质聚集。在某些实施方案中，该试剂盒用于预防和/或治疗与TDP-43相关的疾病。在某些实施方案中，该试剂盒用于在有需要的受试者中调节E3泛素连接酶。在某些实施方案中，该试剂盒还包括给药所述化合物或其可药用盐、溶剂合物、水合物、多晶型物、共结晶物、互变异构体、立体异构体、同位素标记的衍生物或前药或其药物组合物的说明书。在某些实施方案中，提供了该试剂盒和说明书以在有需要的受试者中治疗和/或预防与蛋白质聚集相关的疾病。在某些实施方案中，提供该试剂盒和说明书以在有需要的受试者中减少和/或预防蛋白质聚集。在某些实施方案中，提供该试剂盒和说明书以在有需要的受试者中调节E3泛素连接酶。本发明的试剂盒可包括本申请所述的一种或多种其它的药剂作为分开的组合物。
治疗方法和用途
蛋白质聚集是生物学现象，其中错折叠的蛋白质在细胞内或细胞外聚集(即堆积和聚合在一起)。这些蛋白质聚集物经常是毒性的；蛋白质聚集与大量不同的疾病如淀粉样变性，包括阿尔茨海默氏病、帕金森病和朊病毒病有关。
蛋白聚集可由各种原因引起。个体可能存在对错折叠和聚集特别敏感蛋白质的编码突变。或者，再折叠蛋白质(伴侣蛋白)的通路或降解错折叠蛋白质的通路(泛素-蛋白酶体通路)的中断可导致蛋白质聚集。许多蛋白质聚集相关疾病的发生频率随年龄增加，这似乎是随着时间的流逝细胞失去了清除错折叠蛋白及其聚集物的能力。这意味着蛋白聚集是细胞反应至非平衡蛋白稳态的第二线路，而非有害的随机过程。还发现了进入包涵位置的、错折叠的易聚集蛋白的隔离是一个活跃的有机体的细胞过程，这依赖于质量控制元件如热休克蛋白和共伴侣蛋白。此外，表明真核细胞具有将错折叠蛋白分拣进入两个质量控制室的能力：1.JUNQ(JUxta核质量控制室)；2.IPOD(不溶性蛋白质沉积室)。分隔成两个质量控制室是由于不同类型的错折叠的聚集蛋白的处理和加工方式不同：IPOD作为非泛素化末端聚集蛋白质如亨廷顿蛋白的隔离场所。在应激条件下，如热，当细胞质量控制机构是饱和的，泛素化蛋白被分拣到JUNQ隔室，在那里它们最终降解。因此，蛋白质聚集可通过例如泛素化来调节和/或控制。
泛素是在真核生物几乎所有组织中发现的小的调节蛋白。它引导蛋白质到细胞的隔室中，包括破坏和回收蛋白质的蛋白酶体。泛素可连接到蛋白质并标记它们从而毁灭所述蛋白质。泛素标记也可以引导蛋白质到细胞中的其它位置，在那里它们控制其它蛋白质和细胞机制。
E3泛素连接酶是一种与用E2泛素结合酶结合的蛋白质，这种结合导致泛素经异肽键(例如，酰胺键是不存在于蛋白质主链上的)连接至靶蛋白上的赖氨酸；E3泛素连接酶以特定蛋白底物被蛋白酶体降解为目标。所述的E3泛素连接酶可参与泛素化，如聚泛素化和单泛素化。在聚泛素化中，第二泛素连接着第一泛素，第三泛素连接着第二泛素，以此类推。聚泛素化标记蛋白从而通过蛋白酶体降解。也有一些泛素化活动被限制于只有一个泛素由泛素连接酶增加到底物分子中的单泛素化。单泛素化的蛋白不是蛋白酶体降解的目标，但相反地可改变它们在细胞中位置或功能，例如，通过结合拥有能够结合泛素的结构域的其它蛋白质。
有近600个人类基因组编码的泛素连接酶，它们对涉及蛋白质稳态问题(例如，蛋白质聚集的调节)的众多人类疾病，例如与蛋白聚集有关的疾病(例如淀粉样变性)，至关重要。目前尚无以神经变性疾病(如帕金森病(PD))的细胞病理学为基础的治疗靶标。由于这些疾病和控制它们的蛋白质稳态网络的复杂性，表型筛选为基于靶标的药物发现提供了一个强大的可供替代的选择。使用这种无偏的方法，发现了强烈且特异性保护酵母菌和神经元模型免受PD蛋白(α-突触核蛋白(α-syn))的损害的式(I)化合物(例如，化合物ABI)。野生型酵母菌细胞的三种化学基因筛选确认了ABI激活E3泛素连接酶Rsp5/NEDD4。既定的基因和物理相互作用网络分析表明了ABI、Rsp5，以及由α-syn引起的高度特异性细胞扰动之间的多面性关系。表型筛选和酵母菌的化学基因使打破用于神经变性疾病化合物识别的早期障碍并确定其作用机制成为可能。
一方面，本发明提供了在有需要的受试者中调节E3泛素连接酶的方法。
在某些实施方案中，本发明方法包括给药于受试者有效量的本申请所述的化合物或其药物组合物。
在某些实施方案中，本申请所述的受试者为人。在某些实施方案中，所述受试者为动物。该动物可为任何性别，并可为发育的任何阶段。在某些实施方案中，所述受试者为鱼。在某些实施方案中，所述受试者为哺乳动物。在某些实施方案中，所述受试者为家养动物，例如狗、猫、牛、猪、马、绵羊或山羊。在某些实施方案中，所述受试者为宠物，例如狗或猫。在某些实施方案中，所述受试者为家畜动物，例如牛、猪、马、绵羊或山羊。在某些实施方案中，所述受试者为动物园动物。在另外的实施方案中，所述受试者为研究动物，例如啮齿目动物(例如小鼠、大鼠)、狗、猪或非人灵长类动物。在某些实施方案中，该动物为基因工程化动物。在某些实施方案中，该动物为转基因动物。
不受任何特定理论的限制，本发明的化合物、药物组合物和/或方法可调节(例如激活)E3泛素连接酶，例如Rsp5/Nedd4。因此，本发明的化合物、药物组合物和/或方法可用于调节(例如促进)由E3连接酶控制的泛素-介导的过程，例如蛋白质聚集。
本发明的另一方面涉及在有需要的受试者中激活E3泛素连接酶的方法。
另一方面，本发明提供了在有需要的受试者中治疗和/或预防与泛素和/或E3泛素连接酶相关的疾病的方法。与泛素和/或E3泛素连接酶相关的疾病可导致大脑中神经元的变性，并且其特征可在于在受侵袭的神经元中存在包括泛素化的成分的异常纤维。在某些实施方案中，可通过本发明方法治疗和/或预防的与泛素和/或E3泛素连接酶有关的疾病包括但不限于AD(包括阿尔茨海默氏类型的老年痴呆)、PD、皮克氏病、进行性核上麻痹(PSP)和弥漫性Lewy体疾病。
另一方面，本发明提供了在有需要的受试者中减少和/或预防蛋白质聚集的方法。
本发明的另一方面涉及在有需要的受试者中治疗和/或预防与蛋白质聚集相关的疾病的方法。在某些实施方案中，可通过本发明方法治疗和/或预防的疾病为神经变性疾病。在某些实施方案中，可通过本发明方法治疗和/或预防的与蛋白质聚集相关的疾病为淀粉样变性。在某些实施方案中，本申请所述的淀粉样变性为帕金森病。在某些实施方案中，本申请所述的淀粉样变性为阿尔茨海默氏病。在某些实施方案中，本申请所述的淀粉样变性为朊病毒疾病。在某些实施方案中，本申请所述的朊病毒病为传播性海绵状脑病(TSE)，例如克-雅二氏病(CJD)、Gerstmann--Scheinker(GSS)、致死性失眠(FI)、牛海绵样脑病(BSE)或慢性消耗性疾病(CWD)。其它本领域已知的与蛋白质聚集相关的疾病也视为在本发明的范围内。
本发明的另一方面涉及在有需要的受试者中治疗和/或预防神经变性疾病的方法。神经变性疾病的病理学，包括多聚谷氨酰胺病，特征在于受侵袭患者脑组织中存在包涵体。通常，这些包涵体由不溶性的、未折叠的、普遍带有泛素标记的蛋白质组成。带有泛素链的蛋白质的共价标记一般靶向所述蛋白质从而降解。泛素/蛋白酶体系统(UPS)可能是调节细胞内蛋白水解作用的主要途径。这意味着USP在这些与疾病相关的包涵体中，无论是由于机能障碍(特定的UPS组分)还是由于系统过载(例如，由于蛋白质(例如，未折叠/突变蛋白质)的聚集)，导致随后的细胞毒性。靶向蛋白质从而降解是一个高度调控的过程。它依赖于经过酶级联反应泛素分子向靶蛋白的转移以及通过E3泛素连接酶对底物蛋白质的特异性识别。E3泛素连接酶在神经变性疾病中可能起到关键作用，例如，E3泛素连接酶可能是神经变性疾病的原因。因此，调节E3泛素连接酶可对治疗和/或预防神经变性疾病有用。
在某些实施方案中，可通过本发明方法治疗和/或预防的神经变性疾病包括但不限于亚历山大病、Alper病、AD、肌萎缩侧索硬化、运动失调性毛细血管扩张症、卡纳万病、科凯恩综合征、皮质基底变性、克-雅二氏病、亨廷顿病、肯尼迪病、克拉伯病、Lewy体痴呆、马查多-约瑟夫病、多发性硬化、PD、佩利措伊斯-梅茨巴赫病(Pelizaeus-Merzbacherdisease)、皮克氏病、原发性侧索硬化、雷夫叙姆病、桑德霍夫病、弥漫性硬化症、斯-里-奥三氏综合征、脊髓痨和格林-巴利综合征。
本发明的另一方面涉及在有需要的受试者中治疗和/或预防与TDP-43相关的疾病的方法。TDP-43是一种43kDa的正常细胞蛋白。43kDa最初作为参与包含RNA结合基序的HIVDNA反式激活区域结合的细胞蛋白被发现。在患有疾病如额颞叶变性(FTLD)和ALS患者受侵袭区域的神经元的泛素化细胞质和神经炎包涵体中发现TDP-43。在一个家族性额颞叶痴呆病例中发现存在非泛素化神经胶质阻塞。在额颞叶痴呆患者的曼彻斯特群组中缺乏遗传连锁，暗示蛋白质聚集可能与疾病有关。还发现TDP-43累积在关岛帕金森痴呆、海马硬化、神经变性疾病(例如，路易体疾病，AD和皮克氏病)患者的大脑中，并提出将TDP-43用于神经退行疾病的诊断。已发现许多突变关联TDP-43与神经变性疾病。TDP-43已被证明与额颞叶痴呆和ALS的SOD有关。TDP-43还被证明与α-突触核蛋白及τ有关。核蛋白TDP-43被发现是FTLD非τ蛋白形式、ALS和其它神经变性疾病中的神经病理学底物。当TDP-43过表达，它对神经元有毒。含AAV9TDP-43的基因转移为细胞质和泛素化病变、细胞凋亡、小胶质细胞增生和星形胶质细胞增生(micro-andastrogliosis)、黑质中多巴胺能神经元载体剂量依赖性损耗及其在纹状体的轴突、进展性肌肉运动行为缺陷和TDP-43在神经元质膜上的表达提供了明确的实例。
在某些实施方案中，可通过本发明方法治疗和/或预防的与TDP-43相关的疾病包括但不限于肌萎缩侧索硬化(ALS)、额颞叶痴呆、FTLD、AD和海马硬化。
本发明另一方面涉及筛选用于识别本发明方法所用的一种或多种化合物的化合物库的方法。在某些实施方案中，识别的一种或多种化合物可用于在有需要的受试者中治疗和/或预防与蛋白质聚集相关的疾病。在某些实施方案中，识别的一种或多种化合物可用于在有需要的受试者中减少和/或预防蛋白质聚集。在某些实施方案中，识别的一种或多种化合物可用于在有需要的受试者中调节E3泛素连接酶。在某些实施方案中，化合物库为本申请所述的化合物库。在某些实施方案中，所述库的筛选方法包括提供至少两种不同的本申请所述的化合物；并使用本申请所述的不同化合物进行至少一种试验，以识别用于本发明方法中的一种或多种化合物。
本发明所描述的不同化合物可通过合成的方法例如组合化学(参见例如Ecker等,Bio/Technology,(1995)13：351-360和美国专利号5,571,902)来制备。在某些实施方案中，所述不同的化合物通过液相或溶液合成提供。在某些实施方案中，所述不同的化合物通过固相合成提供。在某些实施方案中，所述不同的化合物通过高通量、并行或组合合成提供。在某些实施方案中，所述不同的化合物通过低通量合成提供。在某些实施方案中，所述不同的化合物通过一锅法合成提供。不同的化合物可机械或手动提供。在某些实施方案中，提供本发明至少两种不同的化合物的步骤包括将本发明至少两种不同的化合物排列到至少两个容器中(在该容器中化合物被结合在固体载体上)，化合物从固体载体上断裂和断裂的化合物溶解在溶剂中。固体载体包括，但不限制于，小珠子(例如，树脂珠和磁性珠)、中空纤维、实心纤维、板、碟、烧瓶、网、筛子、和膜。在某些实施方案中，固体载体是珠子。在某些实施方案中，一种固体载体能够支撑至少50nmol的化合物。在某些实施方案中，一种固体载体能够支撑至少100nmol的化合物。在某些实施方案中，一种固体载体能够支撑至少200nmol的化合物。每个容器可以含有本发明的一种或多种载体结合的化合物。在某些实施方案中，每个容器含有本发明的一种与载体结合的化合物。为了鉴别或检测化合物，固体载体和/或化合物可以被一种或多种标记物标记。所述容器可以是微量滴定板的小孔。溶剂可以是无机溶剂、有机溶剂或它们的混合物。可以用机械或手动进行排列、断裂和溶解的步骤。
通常，筛选化合物库的方法包括至少一种测定。在某些实施方案中，进行这种测定以检测一种或多种特性，这类特性与在有需要的受试者中治疗和/或预防与蛋白质聚集相关疾病以及减少和/或预防蛋白质聚集，和/或调节E3泛素连接酶有关。该测定法可以是免疫分析法，如三明治型测定(sandwich-typeassay)、竞争性结合测定、一步法直接试验、两步法试验或印迹测定。至少一个测定步骤可以机械或手动进行。
另一方面，本发明提供了本申请所述的化合物和药物组合物，其用于在有需要的受试者中治疗和/或预防与蛋白质聚集相关的疾病。
另一方面，本发明提供了本申请所述的化合物和药物组合物，其用于在有需要的受试者中减少和/或预防蛋白质聚集。
另一方面，本发明提供了本申请所述的化合物和药物组合物，其用于在有需要的受试者中调节E3泛素连接酶。
实施例
为了可以更充分地理解本申请所述的发明列出了下面的实施例。提供了申请中所述的合成和生物学实施例以解释说明本申请所提供的化合物、药物组合物和方法，并不以任何方式构成对本发明范围的限制。
实施例1.化合物的制备
式(I)化合物可通过下面方案1中所示的合成顺序进行制备。或者，式(I)化合物可通过本申请所述的其它方法合成。
方案1.式(I)化合物的示例性合成
最初的筛选中的化合物ABI购自ChemDiv(K783-0286)。根据下面的方案进行下面的合成。
O-(苯并三唑-1-基)-N,N,N′,N′-四甲基脲鎓六氟磷酸盐(HBTU,99％)购自OakwoodProducts,Inc.，且铁粉(99％,325目)购自AcrosOrganics。所有其他的起始物和溶剂购自AldrichChemicalCo.或AlfaAesar，并且所有的试剂以购得时的形式直接使用。将混合物通过使用SilicycleSiliaFlashP60(230-400目)硅胶的快速色谱法纯化。所有新的化合物以1HNMR、13CNMR、IR光谱、熔点和元素分析进行表征。NMR数据在VarianXL500MHz光谱仪上记录，化学位移(δ)以溶剂的残余质子为内标。红外(IR)光谱使用安装有iD5ATR钻石板的ThermoScientificNicoletiS5FT-IR光谱仪获得。元素分析通过AtlanticMicrolabsInc.,Norcross,GA进行。
N-(2-氯苄基)-4-氟-3-硝基苯甲酰胺。在室温下，向搅拌下的4-氟-3-硝基苯甲酸(925mg,5.0mmol)、HBTU(1.90g,5.0mmol)、N,N-二异丙基乙基胺(1.05mL,6.0mmol)和DMF(10mL)的溶液中缓慢地加入2-氯苄基胺(0.65mL,5.5mmol)。30min后，将溶液使用乙酸乙酯(50mL)稀释，并依次用水、1MHCl(aq)、1MKOH(aq)和盐水洗涤。将有机层干燥(Na2SO4)，过滤，并使用旋转蒸发仪浓缩。将残余物使用BiotageIsolera4(填充硅胶的25gSNAP柱；10-45％EtOAC/己烷；使用甲苯装载物质)的硅胶色谱法纯化，得到标题化合物，为黄色固体(1.26g,82％产率),mp149-150℃。1HNMR(500MHz,CDCl3)δ8.47(dd,J＝6.9,2.3Hz,1H),8.10(ddd,J＝8.7,4.1,2.3Hz,1H),7.44-7.32(m,3H),7.28-7.22(m,2H),6.94(t,J＝5.8Hz,1H),4.70(d,J＝5.8Hz,2H).13CNMR(126MHz,CDCl3)δ164.77,158.98,156.83,135.46,135.25,135.17,134.44,131.79,131.76,131.21,130.41,130.11,127.95,125.73,125.71,119.77,119.60,43.17(由于碳-氟的偶合观察到裂分)。IR(纯的)3292,1640,1620,1531,1347,1318,1266,845,753,658cm-1。C14H10ClFN2O3的分析计算值C,54.47；H,3.27。实测值：C,54.52；H,3.22。
N-(2-氯苄基)-4-氟-3-硝基苯甲酰胺向化合物ABI1、ABI2、ABI3转化的一般方法.将含有N-(2-氯苄基)-4-氟-3-硝基苯甲酰胺(100mg,0.32mmol)、碳酸氢钠(54mg,0.64mmol)、芳基胺(0.64mmol)和水(0.75mL)的带螺旋盖的试管用特氟隆螺旋瓶盖密封，置于在110℃预热的油浴中，并且在该温度下搅拌24小时来熟化。冷却至室温后，将混合物倒入到乙酸乙酯(和任何溶解的固体)中，并将溶液依次用1MHCl(aq)、水和盐水洗涤。将有机层干燥(Na2SO4)，过滤并使用旋转蒸发仪浓缩。在所有情况下，通过TLC(30％EtOAc/己烷)观察到反应完全。将生成的粗的硝基苯胺溶于正丁醇(2mL)中，转移到第二个带螺旋盖的试管中，并将溶液用甲酸(2mL)、铁粉(180mg,3.2mmol)和浓HCl(0.40mL)处理。将试管用特氟隆螺旋瓶盖密封，再次置于110℃预热的油浴中，并搅拌1小时来熟化。冷却至室温后，将混合物倒入到分液漏斗中的乙酸乙酯(25mL)和饱和的碳酸氢钠(150mL)的混合物中。将混合物在通风下振荡(小心：由于释放CO2压力积聚)，并加入固体碳酸氢钠直至pH约12。分离各层，并将有机层用水洗涤，干燥并按照先前进行浓缩。将残余物通过使用BiotageIsolera4(填充硅胶的25gSNAP柱；40-100％EtOAC/己烷；使用氯仿负载的物质)的硅胶色谱法纯化，得到标题化合物。
N-(2-氯苄基)-1-(间-甲苯基)-1H-苯并[d]咪唑-5-甲酰胺(ABI1)。使用间-氨基甲苯(69μL,0.64mmol)，经一般方法后获得117.0mg(97％产率)的标题化合物，为白色固体，mp129-131℃.1HNMR(500MHz,CDCl3)δ8.40(dd,J＝1.7,0.6Hz,1H),8.01(s,1H),7.92(dd,J＝8.5,1.7Hz,1H),7.55-7.42(m,4H),7.35(dd,J＝7.6,2.1Hz,1H),7.32-7.14(m,5H),4.79(d,J＝5.9Hz,2H),2.46(s,3H).13CNMR(126MHz,CDCl3)δ168.41,144.46,144.16,141.14,136.65,136.50,136.40,134.25,130.74,130.64,130.19,130.05,129.92,129.50,127.80,125.28,124.36,121.74,119.97,111.44,42.71,22.16.IR(纯的)3293,1655,1500,1475,1312,1244,781,747,692cm-1.C22H18ClN3O的分析计算值C,70.30；H,4.83。实测值：C,70.07；H,4.90.
N-(2-氯苄基)-1-(2,5-二甲基苯基)-1H-苯并[d]咪唑-5-甲酰胺(ABI2).使用2,5-二甲基苯胺(80μL,0.64mmol)，经一般方法后获得112.7mg(90％产率)标题化合物，为白色固体，mp141-142℃。1HNMR(500MHz,CDCl3)δ8.47(d,J＝1.5Hz,1H),7.90(dd,J＝8.5,1.6Hz,1H),7.85(s,1H),7.69(t,J＝5.9Hz,1H),7.47(dd,J＝7.3,2.1Hz,1H),7.32(dd,J＝7.5,1.7Hz,1H),7.28(d,J＝7.9Hz,1H),7.26-7.22(m,1H),7.21-7.12(m,3H),7.05(s,1H),4.78(d,J＝5.9Hz,2H),2.38(s,3H),1.97(s,3H).13CNMR(126MHz,CDCl3)δ168.56,145.15,143.44,137.99,137.51,136.73,134.65,134.16,132.54,132.11,131.12,130.55,130.15,129.89,129.40,128.63,127.76,124.31,119.89,111.46,42.64,21.49,17.80.IR(纯的)3290,1642,1614,1510,1471,1309,1038,816,748cm-1.C23H20ClN3O的分析计算值C,70.85；H,5.17。实测值：C,70.34；H,5.19
N-(2-氯苄基)-1-(3,5-二甲基苯基)-1H-苯并[d]咪唑-5-甲酰胺(ABI3).使用3,5-二甲基苯胺(80μL,0.64mmol)，经一般方法得到95.2mg(76％产率)的标题化合物，为白色固体，mpXX-XX℃。1HNMR(500MHz,CDCl3)δ8.39(d,J＝1.2Hz,1H),8.01(s,1H),7.92(dd,J＝8.6,1.7Hz,1H),7.54(dd,J＝8.6,0.7Hz,1H),7.49(dd,J＝7.2,2.1Hz,1H),7.43(t,J＝6.0Hz,1H),7.36(dd,J＝7.3,2.0Hz,1H),7.25-7.18(m,2H),7.11(s,1H),7.06(s,2H),4.80(d,J＝5.9Hz,2H),2.42(s,6H).13CNMR(126MHz,CDCl3)δ168.41,144.54,144.17,140.83,136.66,136.56,136.33,134.27,130.77,130.20,129.97,129.51,127.82,124.26,122.37,119.91,111.53,42.72,22.04.IR(纯的)3278,1642,1598,1489,1308,1213,1038,748,693cm-1.C23H20ClN3O的分析计算值：C,70.85；H,5.17。实测值：C,70.37；H,5.32。
实施例2.高通量小分子筛选
利用酵母菌培养容易且能够同时诱导可强烈抑制生长的毒蛋白表达的优点，就恢复表达ND-相关蛋白TDP-43的细胞的生长而言，对190,000种不同的化合物进行了筛选(6)。化合物ABI(图1A)，经鉴定具有适度对抗TDP-43的功效，被证实对抗α-syn(图1B)具有更大的效力及功效。然而，ABI无法有效对抗其它ND-相关蛋白，包括htt72Q、FUS/TLS和Aβ肽(图1B)。因此，挽救不是靶向于错折叠蛋白毒性的共同特征，而是体现了ABI对α-syn相关具体病理学的靶向(以及降低TDP-43水平的能力)。
发现ABI能够逆转α-syn毒性的几个关键致病特征。第一，ABI阻止了细胞质α-syn灶的累积，这是与目标膜融合失败的停滞囊泡的积聚(图1C)(7，8)。第二，ABI完全消除活性氧簇的产生，这种活性氧簇的产生在线粒体功能中是α-syn介导作用的一部分(图1D)(9)。最后，ABI直接改善ER-高尔基体运输阻塞，并预防过高的局部亚硝化应激(一种新鉴定的中毒表型)的产生。α-syn对酵母菌及人类的有害作用极其具有剂量依赖性(11，12)。然而，ABI并不能通过降低α-syn的水平来逆转α-syn的表型(图1E)。
实施例3.化学基因的筛选
过表达筛选
通过采用转变至损害药物流出的WT酵母菌中的汇集FlexGene库(35)进行过表达筛选。汇集酵母菌库的冷冻等份在补充有30mL0.05％葡萄糖的SGalUra中解冻并于30℃生长约8小时。在此期间，培养基增加约0.5-1倍。然后，在SGalUra中稀释酵母菌至OD600为0.0005，相当于库中多样性大约20倍的覆盖度和40μMABI2。生长约3天后，在384孔板中的明显菌落生长得到恢复，并各自验证。通过采用酵母菌质粒隔离试剂盒(ZymoResearch)来回收质粒并在大肠杆菌中扩增并测序。然后用BlastN(NCBI)查询结果序列并确认可靠的ORF。
转座子(Tn7)筛选
因技术原因进行基于转座子缺失的筛选以取代传统的单倍体缺失筛选。缺失库中BY4741宿主菌株因为完整的药物排出系统对化合物很不敏感，故阻碍了这种筛选策略的应用。因此，采用不同的方法，其中在体外生产的转座子库(Tn7)在基因组DNA(不一定是ORF)中包含随机插入的转座子(14)。转座子用URA3基因进行标记从而进行挑选。汇集Tn7库用NotI线性化并转化至缺失Δpdr1和Δpdr3的WT酵母菌中。选择SDUra板上的酵母菌(得到约200,000菌落)、合并以及等分冻干。为了筛选，解冻酵母菌并基本上如在过表达筛选中那样处理。在OD600为0.005条件下将细胞铺板并生长约3天。确认了耐ABI2的菌落且使用已建立的连接反应介导的PCR策略进行转座子测序。
自发的抗ABI2突变
通过分配384孔板上的WT酵母菌和OD600为0.01和选择生长3-4天后的菌落，完成了耐ABI2突变的选择。确认了耐药物的菌落并核对其对抗的其它毒性化合物，以及通过条码的、多重HiSeqIllumina测序对它们的基因组进行测序。分离来源于5mL饱和YPD培养液的酵母菌基因组DNA并用4个ZymoResearchDNA分离试剂盒尽最大可能进行回收。超声粉碎2μg的DNA至约200-500bp的片段。
采用IlluminaHiSeq平台，得到40个碱基对单末端读数的一个泳道，导致20-30倍的平均覆盖度(在NCBI可得到所有的读数)。质量控制过滤后，采用BWA对准器将源于每个测序基因组的读数与酿酒酵母的参考序列进行比对(39)(sacCer2，2008年6月汇编，2011年4月1日从UCSC上下载：hgdownload.cse.ucsc.edu/goldenPath/sacCer2/chromosomes/)(39)。紧跟着是采用源于染色体组分析工具盒(GenomeAnalysisToolkit，GATK)的统一基因型(UnifiedGenotyper)识别相对于酿酒酵母参考序列的变体(40)。为了鉴别对菌株而言是独特的变体(包括SNP和插入缺失)，比较了“亲本”菌株和个体“衍生”的菌株。自定义代码组合、GATK的组合变体和选择变体的特征用于定位，然后依据质量以及仅在衍生菌株中出现的在开放读数框中检测到的SNP和插入缺失来分级。为了控制质量，在整合基因组学查看器(IGV)(41)中用目测法检查分级的SNP和插入缺失的读数对准。采用PyMol和PDB(3OLM)显现Rsp5p(G747E)中的SNP(图3F(16))。
实施例4.生物测定的一般方法
酵母菌菌株和培养
表达毒蛋白酵母菌菌株先前已经描述(6,9,33,34)(表1)。所有菌株具有单个或多个插入物用于半乳糖诱导型表达。此外，菌株要么缺失Δpdr1::KanMX和Δpdr3::KanMX，要么缺失Δpdr5::KanMX，以降低化合物的排出和所需化合物剂量。酵母菌培养于完全合成培养基(CSM)中，如果需要的话，适当删减(除去HIS或URA)以维持质粒。对于半乳糖诱导实验，过夜培养物生长于CSM/2％葡萄糖至饱和，按1:20稀释至CSM/2％棉子糖中，保持约2代。为了试验，在最佳OD600将培养物稀释至CSM/2％半乳糖中(见“生长测定”)。
表1:酵母菌菌株
通过用潮霉素R盒和5'和3'侧翼序列的PCR融合产物转化WT酵母菌，产生缺失菌株。在某些情况下，约300bp的5'PCR片段和约300bp的3'PCR片段用与潮霉素R(HygR)盒同源的寡聚物单独扩增，并在第二次PCR中使用，以在任一侧产生含有约300碱基对同源性的HygR片段。同源性的增加是必要的，因为常规的约40bp的同源性有时不足以准确地靶向理想位点的基因破坏。在某些情况下，PCR产物与卡那霉素R盒重组，所述卡那霉素R盒用于删除Δpdr1::KanMX和Δpdr3::KanMX，因此需要额外的同源性。然后这两个片段被用作脱除HygR质粒的引物。纯化PCR产物(Qiagen公司，MINELUTE)，通过琼脂糖凝胶电泳验证，并采用基于LiOAc转化法转化至符合要求的酵母菌中。将细胞于丰富培养基(YPD)中培养约4小时，然后铺板在YPD/潮霉素板上。采用缺失点上游的寡核苷酸和HygR基因中的反向寡核糖核酸，通过PCR确认了基因破坏。对于表达的α-syn酵母菌中的缺失，在相反交配型生成缺失，并配对、形成孢子和分割，以获得正确的基因型。确认了正确的标记和交配型。
通过空载体(例如，pAG413/416Gal-ccdb)或pAG413/416Gal-ORF的LiOAc转换，构建携带质粒的WT或α-syn的菌株。为选择质粒，在要么缺少组氨酸要么缺少尿嘧啶的合成缺陷型培养基(syntheticdrop-out)中铺板转换物。所有后续的培养使用适当的缺陷型培养基。
质粒
根据制造商说明使用BPClonase(Invitrogen)法将ORF从FlexGene库中(35)转移到pDONR221，从而完成半乳糖-诱导型过表达实验的质粒构建。通过BsrGI限制酶切消化法和，如果需要的话，DNA测序来验证入门克隆。验证后，根据制造商说明采用LRClonse(Invitrogen)将ORF转移到Gateway兼容的目的载体(pAG413Gal)上。通过BsrGI限制酶切消化法来验证克隆。生成的质粒列于表2中。
表2：用于过表达和Gateway克隆的酵母菌质粒。对于使用ABI2的剂量敏感性试验，表达质粒用于WT或α-syn酵母菌菌株。
酵母菌生长测定
如上所述建立用于所有剂量响应测定法的起始培养物。在384孔板上进行所有生长测定。采用多通道移液器以稀释各列，对CSMGal进行1.6倍的连续稀释，以便在96孔板中进行源板组装。对于含有化合物2倍终浓度的这些稀释系列，通过多通道移液器，将2×OD600培养物(在CSMGal中)分配，获得具有所需的OD600和药物浓度的最终药物/培养混合物。对于野生型酵母菌，最终起始OD600为0.01。对于α-syn，最终起始OD600为0.02。药物的浓度变化范围取决于培养基的功效、生长抑制和溶解度。然后使用TecanEvoFreedom液体处理机械将培养液从96孔板转移到384孔板中，每孔代表转移4次。最后的孔体积为35μL。然后在30℃下将板在加湿容器中培养24或40小时。然后在OD600下用TecanSaphire读板仪读板。
在α-syn实验中，将原始的OD600值转化成WT细胞的“相对生长”或“％最大挽救”。在WT细胞中，扣除孔背景，然后将未处理条件下的所有值均归一化至100％。在α-syn挽救实验中，扣除孔背景，并将特定实验的最大挽救归一化至100％。根据(OD600实验-OD600未处理的/(OD600最大-OD600未处理的)x100计算出所有实验数据点，以获得相对于观察到的最大挽救的挽救。对于缺失菌株，将数据归一化至未携带缺失的WTα-syn菌株。采用PrismGraphpadv.6.0进行非线性回归分析，绘制出剂量-响应曲线。在ABI开始抑制生长的情况下，只用达到最大值的点拟合曲线。之后，点点之间直接连接，并始终显示为虚线。
通过从对数期CSM/2％棉子糖培养物中用2％的半乳糖诱导α-syn过夜表达16小时来进行存活测定。诱导后，对总细胞数进行计数并将200个细胞铺板在YPD固体琼脂板上。2天后，用Acolyte自动菌落计数仪对存活的菌落进行计数。使用单因素方差分析和显著性的Tukey检验确定显著性。
α-突触核蛋白的分析
显微镜检查.在ABI指示浓度存在或不存在的情况下，用半乳糖诱导对数增长的棉子糖培养物5小时。离心分离细胞，弃去培养物，然后在1XPBS中用4％的多聚甲醛固定1小时。离心分离固定的培养物，在1XPBS中将相比团粒再次悬浮于0.4％的多聚甲醛，并于4℃下保存。用Nikon的EclipseTi显微镜放大100倍拍摄单一平面图像。
ROS.如之前所述，用ROS传感染料CM-H2DCFDA(Invitrogen)从表达未标记的α-syn的酵母菌中检测活性氧簇(ROS)的产生(9)。简而言之，在存在或不存在ABI1的情况下，α-syn(非GFP标记的)的对数期棉子糖培养物用半乳糖诱导6小时。此时，加入染料并保持另外30分钟。然后用EasyCyte流式细胞分析仪(GuavaTechnologies)分析细胞。
蛋白质印迹.在经指定浓度ABI1处理后的NoTox、InTox和HiTox菌株中进行α-syn-GFP蛋白分析。在DMSO或ABI1存在的情况下，用2％的半乳糖诱导对数期CSM/2％棉子糖培养物5小时。将培养物归一化成细胞密度，并为了SDS-PAGE制备细胞团粒。在载有SDS的染料中将细胞团粒煮沸15分钟，离心分离，并用4-12％的SDS-PAGE重新溶解。转移完成后，用1:2,000抗体(BDTransductionLaboratories，Cat.No.610786)和1:5,000IRDye800二级抗体(Li-CorOdyssey,RocklandImmunochemicals)对PVDF膜进行α-syn印迹。从相同的凝胶，经考马斯染色来检测总蛋白。印迹和考马斯染色凝胶均用Li-CorOdyssey成像系统来扫描和定量。数值表示为归一化成总蛋白的α-syn(图1E)。使用单因素方差分析，用显著性的Tukey检验确定显著性。
使用如上所述的培养条件进行CPY蛋白印迹分析。在1：5000下使用抗-Cpy抗体(Invitrogen公司，A6428)。采用IRDye800二级抗体(Li-CorOdyssey,RocklandImmunochemicals)对后-ER：ER比率进行定量，并使用Li-CorOdyssey成像系统进行扫描。使用单因素方差分析和显著性的Tukey检验确定显著性。
α-syn毒性的线虫模型
如上所述进行了线虫α-syn模型的药物治疗(6)。简而言之，通过用2％的次氯酸钠和0.5M的NaOH处理妊娠成虫以分离胚胎，从而得到年龄同步化的蠕虫(36)。将不同浓度的ABI1或0.2％的DMSO加入悬浮于M9缓冲液(22mM的KH2PO4、22mM的Na2HPO4、85mM的NaCl和1mM的MgSO4)(时间0)的胚胎中，并于25℃下培养24小时可获得同步化的L1种群。蠕虫用蒸馏水洗涤三次，再用M9缓冲液冲洗一次。将同步化L1蠕虫铺板于已接种100uL大肠杆菌(OP50)的常规线虫生长培养基(NGM)板上。然后每隔一日将蠕虫转移到新板上，以确保食物充足和消除后代污染。然后在孵化7天后对蠕虫进行分析。分析依据先前所述的标准进行(37)。在每种情况下，对约30-40只动物进行评分以得到WT动物的百分比。实验以一式三份的方式进行并计算平均值。采用单因素方差分析和Tukey检验确定显著性。
α-syn毒性的原代神经元培养物
实验目的是在如先前所述的原代中脑培养物中监测多巴胺能细胞的活力(7-9)。简单地说，从E17大鼠胚胎中脑中获得的细胞以每平方毫米2.18×103个细胞的密度铺板于48孔板上。铺板后4天，用胞嘧啶阿拉伯呋喃糖苷(20μM)处理细胞，以抑制神经胶质细胞的生长。三天后(7天在体外)，以15的感染复数(MOI)，在存在或不存在ABI1(0.1μM)的情况下，用编码A53Tα-syn的腺病毒转导细胞，用InvitrogenViraPower腺病毒表达系统产生(38)。72小时的转导期后，将培养基替换为含有或没有ABI1的新鲜培养基，另外培养24小时。针对微管相关蛋白2(MAP2)(一般的神经元标记)、酪氨酸羟化酶(TH)(多巴胺能神经元的标记)(7-9)将细胞染色。对处理条件不知情的研究人员通过带有20倍物镜的NikonTE2000-U倒置荧光显微镜对每个处理条件下至少有十个随机选取的观察视野(包含约800-1600MAP2+神经元)中的MAP2-和TH-免疫反应性神经元进行计数。相关多巴胺能细胞存活率计算为MAP2-阳性的神经元(也是TH阳性的)的百分数，并通过对照细胞的确定值(设为100％)进行归一化。每个实验使用从独立怀孕大鼠中分离出来的胚胎培养物重复4次。对于神经突分析，如上所述将原代中脑培养物铺于盖玻片上，然后如上处理及进行染色。使用NIS-Elements软件(Nikon)对每个样品中30-35个神经元的约80个突起进行神经突长度测量。采用GraphPadPrism程序，6.0版(www.graphpad.com/prism/Prism.htm)进行统计学分析。
网络分析：
ABI网络.ABI网络(图3E)基于String9.0(string-db.org)的相互作用和String未报道的人工文献管理系统中的基因、功能或物理相互作用产生。
构建ABI：α-syn网络.如论文中所广泛描述的那样建立了核心ABI网络并描绘于图3中。α-syn网络由110个已知在缺乏应激源时调节α-syn毒性的基因组成。其中，这些中的77个基因建立于已报道的过表达筛选中(8，21)。增加了来自于其它10个出版物的33个附加修饰物(表3)。通过整理Biogrid(thebiogrid.org)编入目录的所有基因的与物理的相互作用以及在Cytoscape软件中可视化而产生相互作用网络。自身相互作用被排除在外。仅描述显示与核心ABI网络至少有一个连接的节点。
表3：除了那些在已报道过表达筛选中描述的基因，α-syn毒性的基因修饰物的α-syn相互作用网络基因(8，21)。将只显示影响自身α-syn毒性的基因用于网络分析(图4C)。
实施例5.ABI保护神经元以对抗α-syn毒性
于在多巴胺能(DA)神经元中表达α-syn和GFP的线虫中进行ABI试验(9)。该模型允许活体动物的PD-相关神经元及其年龄依赖性变性直接可视化。尽管线虫(该类线虫有较厚的角质层)用药浓度差异妨碍了细胞中的功效的直接比较，但线虫模型已被证实对哺乳动物系统ND有效基因和化学修饰物的特性具有高度的预测性(13)。在这些动物中，ABI为α-syn毒性的多巴胺神经元提供了局部但高度显著的挽救，支持了保守的作用机理的观点(图2A和2B)。
还在哺乳动物来源的神经元中对ABI进行测试。从胚胎大鼠中脑建立原代腹侧中脑培养物，其富含在人类中特别易受α-syn毒性的DA神经元。用表达家族性α-syn突变(A53T)的腺病毒的转导降低表达酪氨酸羟化酶(TH，DA神经元的标记(9))总神经元的百分比。ABI在很大程度上恢复了这些神经元的存活(图2C、2D和5)。ABI也明显降低了由A53Tα-syn所致的神经元收缩过程(图2C、2E和5)。编码细菌lacZ的腺病毒对DA神经元的损失和神经突的长度都没有影响(数据未显示)。
还在人类皮质神经元(也受PD和相关痴呆的影响)中对ABI进行测试，所述人类皮质神经元从携带α-syn突变的患者中诱导的多能干细胞(iPSCs)产生。ABI既改善了ER-高尔基蛋白质运输的缺陷，又减少了这些神经元的亚硝化应激。
实施例6.ABI2的化学基因筛选揭示了以E3连接酶Rsp5p为中心的网络。
ABI改善从酵母菌到人类神经元的不同类型细胞中α-syn毒性的能力证实，其作用机理在进化上的高度保守。利用酵母菌三种不同全基因组基因的遗传途径来研究所强调的作用机理(5)。通常情况下，改变化合物靶标的水平或与其靶标通路密切相关的蛋白质水平，可能会改变需要产生化合物表型的剂量。发现ABI在高于其挽救α-syn毒性的EC50大约四倍的浓度下抑制生长(图3A)。在该浓度下，化合物还抑制野生型细胞的生长(图3A)。由于对恢复生长的筛查促进了化学基因筛选，故研究了高浓度时的生长抑制是否与低浓度时的α-syn挽救相关。
制备了50个ABI的衍生物(ABI1作为母体化合物)。研究了那些改变它们对抗α-syn活性的衍生物是否以相称的方式改变它们减缓野生型(WT)细胞生长的能力。的确，是这种情况(图3B)。例如，在咪唑连接的苯基的邻位(ABI2)或间位(ABI3)添加单个甲基，使得对抗α-syn的功效和抑制生长的能力移动到更低(ABI2)或更高(ABI3)的浓度(图3B和图6)。重要的是，即使在最高的生长-抑制剂量，细胞也保持了100％存活率(图3C)。
野生型细胞的生长抑制促进了三个独立化学基因的选择以便探索ABI在全基因组方式下的作用机理。在每一种情况下，为了在ABI2的完全抑制浓度下恢复生长而寻找基因的改变。首先，使用覆盖90％的酵母菌基因组的单拷贝质粒的半乳糖-诱导库，筛选足够数量的转化体以达到基因组40倍的覆盖度(图3D，绿色或顶部面板)。第二，在单倍体菌株中筛选随机转座子插入库，其允许恢复改变基因表达的敲除插入和调控插入(14)。为获得5倍的基因组覆盖度，使用了足够数量的整合体(图3D，蓝色或中间面板)。最后，恢复在缺乏诱变情况下而自发产生的基因组突变(图3D，红色或底部面板)。
分离携带抑制基因(suppressor)的菌落，并且确定抑制基因的特性。对于过表达筛选，分离质粒并测序。对于Tn7筛选，连接介导的小载体PCR(14)被用来确定插入位点。以及，对于自发抗ABI2的突变体，多路全基因组测序和SNP-calling算法被用来确定可靠的突变。最后，可以确认，这些改变通过在野生型细胞中自身对它们进行重构赋予对ABI的抵抗。
值得注意的是，所有三个筛选仅恢复少数基因，并且每一个都指向同一作用机理：ABI促进由E3连接酶Rsp5/NEDD4控制的泛素介导过程(图3E和图7)。Rsp5p是哺乳动物Nedd4E3连接酶家族的单酵母菌成员，并具有与内吞作用及内体运输相关的许多保守的细胞功能(15)。该保守包括HECT泛素连接酶结构域，与RING泛素连接酶相反，该结构域形成与泛素直接连接的硫酯键。该保护还延伸至参与底物和接头蛋白(包括功能性保守的α-抑制蛋白)的不同的蛋白质-蛋白质相互作用的多重WW域。基因改变用颜色进行编码(图3E)，以对应于从中衍生出它们的筛选(图3D)。在RSP5和BUL1中的突变应直接降低Rsp5p的活性，而在DOA4、SLA1和VRP1的突变以及过表达UBP7和UBP11的质粒应间接降低Rsp5p的活性。在BAP2/3、MMP1和LEU2中的挽救命中应改善Rsp5的过度激活的后果。如果，和所建议的所有这些改变一样，ABI在高浓度时生长抑制是由于Rsp5p的过度激活引起，那么Rsp5p的过表达自身应当减少WT细胞的生长。事实上，也确实如此(图8)。
赋予对ABI抗性的RSP5、BUL1和DOA4中的三个自发性单氨基酸取代分别位于关键功能位点附近。所述rsp5G747E突变靠近连接酶的活性位点，即位于HECT结构域的N-和C-端半段结构(lobe)之间的点(图3F，(16))。bul1Q146P突变残基位置与Rsp5pWW结构域结合的PPxY基序相隔十个残基，可能影响与Rsp5p的结合(图3G)。最后，doa4C579F突变与来自于Doa4p蛋白酶结构域的活性位点半胱氨酸相隔8个氨基酸，可能影响其活性(图3H)。
研究亮氨酸通透酶BAP2和ABI2之间的关系，发现ABI2通过Rsp5p依赖性方式降低Bap2p的水平(图9)(17)。这种Bap2p的降低使细胞对低亮氨酸水平敏感，如同缺失Δbap2时一样(图9)。相反地，通过ABI2减轻生长抑制的rsp5G747E位点突变，使Bap2p稳定并允许细胞在低亮氨酸中生长(图9)。
最后，基因变异体中恢复的酶的性质，即从蛋白质底物(Ubp7p、Ubp11p和Doa4p)中除去泛素，结合既定的基因和物理相互作用，支持ABI通过激活Rsp5p而影响生长这一假设。例如，过表达Ubp7p挽救ABI2生长抑制，而Ubp7p与Rsp5p相互作用，拮抗运往液泡(酵母菌的溶酶体等价物)物质的泛素化(18)。对于DOA4，它的缺失限制了泛素的有效性，并使Rsp5p底物稳定(19，20)。缺失Δdoa4的这种影响直接拮抗Rsp5p过表达引起的缓慢生长表型(图8)。
Rsp5p在ABI2网络中的核心作用由其剂量与ABI生长抑制的关系得到证实。抵抗ABI2的5个基因中，当用于编码它们的基因单拷贝从二倍体细胞中缺失时，只有RSP5及其衔接蛋白BUL1变得更加抵抗ABI2(图3I)。与此相反，增加它们的水平可增强通过ABI2的生长抑制(图3J)。这种对剂量灵敏度的双向作用是化学基因筛选中药物靶标的标志(5)。
实施例7.ABI2靶向Rsp5p活性挽救α-Syn毒性
以WT细胞的生长抑制代表ABI活性，研究了这种ABI2基因网络如何影响ABI2挽救α-syn的能力。过表达的UBP7和UBP11拮抗α-syn的挽救，表明底物的脱泛素化在改善α-syn毒性中很重要(图4A和图10)。同样地，rsp5G747E和Δsla1突变拮抗α-syn的挽救(图4B和图10)。把ABI2对生长抑制的影响与其改善α-syn毒性的活性分开，Δbul1的影响是微乎其微的。
为了提供更多的全局观点，对酵母菌中α-syn基因修饰物的充分记录的列表((8，21)和表3)和在该生物体内得到的物理-和基因-相互作用的广泛贮库进行集成。值得注意的是，近30％先前确定的α-syn基因修饰-在高尔基体/囊泡转运、核内体转运、脂质代谢、蛋白质分解代谢和微管蛋白组装中的起作用–与ABI网络内的基因直接相关(图4C)。三个节点Rsp5p、Ubp7p和Ubp11p在两个网络模块之间共享。(值得注意的是，UBP7是α-syn和TDP-43模型之间共同的单一基因修饰，可能解释了为什么ABI作为TDP-43的适度修饰物首先被恢复(pers.comm.A.Gitler)。对于每一个共享节点，ABI对生长和α-syn毒性的影响是相反方向的：Rsp5p过表达抑制α-syn毒性(22)(图S7)，并且增强ABI2的生长抑制(图3J)；Ubp7p/Ubp11p增强α-syn毒性(21)，并抑制ABI2的生长表型(图3E和图11)。因此，ABI2作用于直接拮抗α-syn毒性的生物效应的分子结合点。
两个网络共享的三个蛋白质节点中，只有Rsp5p对ABI2呈现双向剂量敏感性(图3J)。为了严格研究Rsp5p和α-syn毒性之间的关系，对在rsp5G747E中只有单个氨基酸取代不同的同基因细胞进行了检测。值得注意的是，这种在WT细胞中赋予对ABI抵抗的取代，增强了缺乏ABI2时α-syn的毒性(图4D)。
为了证实ABI对抗α-syn毒性的挽救活性依赖于Rsp5p，检测了ABI恢复代表性物质(CPY)ER-高尔基运输和减少α-syn灶形成的能力。ABI2挽救WT细胞中的这些表型(图1C，(10))。此外，在携带rsp5G747E突变的细胞中两种挽救活性受损(图4E和4F)。因此，809个氨基酸组成的Rsp5p蛋白质的单个氨基酸取代既在WT细胞中赋予ABI抵抗又增强了在表达的α-syn细胞中的毒性。这确认了Rsp5p在α-syn毒性复杂网络中的关键作用，并进一步确认，该节点可为在无偏的表型筛选中鉴定的小分子的靶点。
无论ABI是否直接或间接作用于Rsp5p，其净效应是激活此泛素连接酶(图4G)。Rsp5p可以泛素化α-syn(22)，但实验没有检测到α-syn水平的变化(图1E)。在体外，ABI也不能增强重组Rsp5p或Nedd4的泛素化(pers.comm.：B.Schulman和A.Goldberg)。更确切地说，ABI直接拮抗α-syn诱导的病理，并且它影响不表达α-syn细胞中完全相同的生物通路。在活细胞中，Rsp5p在生物学复杂网络内运行，这对于体外基于简化的靶标(reductionisttarget-based)的分析造成了一个极大的挑战。Rsp5p支持不同的衔接蛋白以泛素化不同的底物。这些活性通过Ca++依赖性脂质结合(23，24)以及Rsp5p本身及其伴侣蛋白的不同的翻译后修饰来调节。此外，Rsp5p不仅在内吞作用与核内体运输中，还在逆行的高尔基体-ER运输(25)和ERAD(26)中起作用。鉴于这种复杂性，调节Rsp5p活性的化合物似乎更可能与将蛋白质置于正常细胞环境中的表型途径一起出现。更重要的是，该靶标空间与人类突触核蛋白病高度相关，因为囊泡运输通过改变α-syn和其它疾病相关基因包括VPS35、LRRK2和PARK16/RAB7L1而受到扰动(8，27-30)。这些通路和ABI网络(图4C)之间的接口表明，ABI对抗α-syn的功效源于其影响多重Rsp5p活性的能力。
实施例8.化合物ABI2挽救缺陷–来源于人类帕金森病(PD)患者神经元中的运输及亚硝化应激
ABI2，在先前无偏的酵母菌筛选中鉴定的小分子，在酵母菌突触核蛋白病模型中改善了蛋白质通过ER的运输，并降低了亚硝化应激(图12A)。
在8-12周的神经元分化期间，用20μM的ABI2处理细胞7-10天。通过探测用或不用EndoH处理的nicastrin和GCase来评估从ER的运输。结果，如图12B所示，表明ABI2在aSynA53TiPS神经元中改善通过ER的向前蛋白质运输。
A53T或突变校正的神经前体在突触蛋白启动子作用下用编码RFP的慢病毒进行转导。一旦分化，用RFP标记神经元。在为期8-12周的分化中，采用5μMABI2处理神经元7-10天，用FL2负载并用NO传感器FL2实时成像(一个代表性实验，其显示每个条件下从18-54个神经元中的定量，得到与另一个独立实验相同的结果)。结果，如图12C所示，表明ABI2降低了αSynA53TiPS神经元中亚硝化应激。
实施例9.ABI2的化学基因筛选揭示了以E3连接酶Rsp5为中心的网络
酵母菌筛选可揭示小分子通过识别恢复所述小分子的基因改变来抑制生长的靶标空间(A.M.Smith,R.Ammar,C.Nislow,G.Giaever,AsurveyofyeastgenomicassaysfordrugandtargetdiscoveryPharmacolTher127,156(2010年8月))。在比挽救α-syn毒性浓度更高的浓度下，本申请所述的化合物(例如，化合物ABI2)抑制野生型细胞的生长。对挽救α-syn无活性的化合物不能逆转α-syn灶的形成或挽救ER-高尔基体运输。有效挽救α-syn的化合物，也更有效地抑制WT细胞的生长(图13A)。虽然ABI抑制生长，细胞仍保持全部的存活率(图13B)。
使用化合物ABI2测定允许在高浓度生长的基因改变。采用了三种途径：(1)覆盖酵母菌基因组(约5800个基因)中大多数基因的过表达菌株库，(2)约300,000个转座子-插入库(A.Kumar,Multipurposetransposoninsertionlibrariesforlarge-scaleanalysisofgenefunctioninyeastMethodsMolBiol416,117(2008))，和(3)产生于约2百万个细胞的自发性基因组点突变。少数命中被恢复，并形成功能相关基因的高度连接网络(图13C)。这些是促进核内体转运的E3泛素连接酶(RSP5)、内吞蛋白(SLA1、VRP1)、分拣多泡体的去泛化酶(DOA4)、Rsp5适体(BUL1)，可去泛素化Rsp5底物的两种蛋白质(UBP7、UBP11)、已知和潜在的Rsp5底物(BAP2、BAP3、MMP1)，以及引导液泡中Rsp5底物降解的VPS23(图13C)。对抗α-syn的无效衍生物未表现出对ABI网络基因的剂量敏感性，从而支持了野生型细胞中α-syn挽救与生长抑制之间的相关作用机理。
筛选命中的网络拓扑结构及其对ABI2改变的剂量-敏感性的性质，意味着ABI2作用于Rsp5以促进泛素介导的核内体转运。除了RSP5(这点至关重要)，本发明描述的网络中的每个其它基因都可以缺失。但是，没有缺失(包括双缺失UBP7和UBP11)能赋予更多的针对ABI2的部分抵抗。因此，尽管这些其他蛋白质参与了ABI2的活性，它们自身不能成为其靶标。事实上，改变RSP5基因剂量的作用表明它是中心节点：升高RSP5的剂量，对ABI2的敏感性上升，降低RSP5的剂量，对ABI2的敏感性下降(图13D)。而且，在其它的同基因细胞中，由约1000个氨基酸组成的蛋白质(rsp5G747E)的单个氨基酸取代赋予对ABI2的抵抗(图13D)。Rsp5是HECT结构域Nedd4E3连接酶的高度保守的哺乳动物家族的单一酵母菌成员。这些蛋白质催化泛素的K63连接至不同的膜蛋白，从而调节核内体运输，而不是蛋白酶体降解(D.Rotin,S.Kumar,PhysiologicalfunctionsoftheHECTfamilyofubiquitinligasesNatRevMolCellBiol10,398(2009年6月)；E.Lauwers,Z.Erpapazoglou,R.Haguenauer-Tsapis,B.Andre,TheubiquitincodeofyeastpermeasetraffickingTrendsCellBiol20,196(2010年4月))。HECT结构域的泛素连接酶包含结合不同衔接蛋白及底物的多重蛋白质-蛋白质结构域。钙、脂质结合以及自抑制作用构象调控底物的特异性和从质膜或高尔基体至液泡/溶酶体的核内体运输。在体外未重现Rsp5调控的这些复杂模式的大多数方面。
因此，为了进一步研究ABI2的活性，监测WT细胞中ABI2对依赖于Rsp5运输的三种蛋白的影响：Mup1(A.Menant,R.Barbey,D.Thomas,Substrate-mediatedremodelingofmethioninetransportbymultipleubiquitin-dependentmechanismsinyeastcellsEMBOJ25,4436(2006年10月4日))，Sna3(C.MacDonald,D.K.Stringer,R.C.Piper,Sna3isanRsp5adaptorproteinthatreliesonubiquitinationforitsMVBsortingTraffic13,586(2012年4月))和Bap2(F.Omura,Y.Kodama,T.Ashikari,Thebasalturnoverofyeastbranched-chainaminoacidpermeaseBap2prequiresitsC-terminaltailFEMSMicrobiolLett194,207(2001年1月15日))。ABI2：(1)促进了依赖于Rsp5的内吞作用和蛋氨酸通透酶Mup1的液泡输送(图13E)；(2)促进了衔接蛋白Sna3依赖于Rsp5的高尔基体至液泡的运输(图13F)；(3)促进了亮氨酸通透酶Bap2的依赖于Rsp5的降解。这影响了依赖于亮氨酸的生长，说明其在过表达筛选中得到了恢复。
实施例10.ABI2直接拮抗α-syn诱导的核内体缺陷
测试α-syn对Mup1-GFP和Sna3-GFP运输的影响。的确，α-syn的表达既阻碍了蛋氨酸诱导的Mup1-GFP从质膜到液泡的运输(图14A)，又阻碍了Sna3-GFP从高尔基体到液泡的构成性转运(图14B)。而且，在α-syn存在下，ABI2恢复了两种底物的运输(图14A和图14B)。
除了特定的底物，大量核内体从质膜至液泡的运输受α-syn的扰动(图4C)(T.F.Outeiro,S.Lindquist,Yeastcellsprovideinsightintoalpha-synucleinbiologyandpathobiologyScience302,1772(2003年12月5日)；A.D.Gitler等,TheParkinson'sdiseaseproteinalpha-synucleindisruptscellularRabhomeostasisProcNatlAcadSciUSA105,145(2008年1月8日)；J.H.Soper,V.Kehm,C.G.Burd,V.A.Bankaitis,V.M.Lee,Aggregationofalpha-synucleininS.cerevisiaeisassociatedwithdefectsinendosomaltraffickingandphospholipidbiosynthesisJMolNeurosci43,391(2011年3月))；Sancenon等,Suppressionofalpha-synucleintoxicityandvesicletraffickingdefectsbyphosphorylationatS129inyeastdependsongeneticcontextHumMolGenet21,2432(2012年6月1日))。当采用FM4-64对核内体通路进行脉冲标记时，延长α-syn的表达时间后，染料与α-syn包含物强烈共定位，并且未能到达液泡(图14C)。ABI2完全恢复内吞作用的同时，降低了α-syn包含物(图14C，底部面板)。因此，ABI2促进Rsp5依赖性过程的能力直接恢复由α-syn引起的不同细胞病理，包括ER-高尔基体以及核内体运输(图14D)。
Rsp5/NEDD4可以泛素化α-syn，以及NEDD4定位于PD患者脑组织样本中的Lewy体(G.K.Tofaris等,UbiquitinligaseNedd4promotesalpha-synucleindegradationbytheendosomal-lysosomalpathwayProcNatlAcadSciUSA108,17004(2011年10月11日))。然而，在体内，ABI2没有改变α-syn水平。并且，当在体外测试时，ABI2没有通过Rsp5影响α-syn和Sna3的泛素化。但是，正如所指出的那样，在体外还没有重现大多数Rsp5体内活性的复杂性。因此，ABI2体现无偏的体内表型筛选的能力，以便发现通过基于简单的体外靶标途径无法发现的化学探针。同样，ABI2化学基因识别了根深蒂固的生物学节点，即尚未被先前的过表达或缺失筛选识别的Rsp5。值得注意的是，尽管它们在蛋白质内稳态和几种人类疾病中起关键作用，迄今为止生物探针几乎未曾接触到E3泛素连接酶，更谈不上治疗。
通过α-syn扰动和本发明所述的化合物促进的囊泡运输过程对所有的真核细胞是重要的，但是对严重依赖于高效突触小泡动力学和调节神经递质释放的神经元尤为重要。事实上，功能失调的核内体运输正在成为人类神经元中α-syn病理的贡献因素。改变的细胞生物学、死后病理学和人类基因风险因素都涉及改变的囊泡运输(A.A.Cooper等,Alpha-synucleinblocksER-GolgitrafficandRab1rescuesneuronlossinParkinson'smodelsScience313,324(2006年6月21日)；T.F.Outeiro,S.Lindquist,Yeastcellsprovideinsightintoalpha-synucleinbiologyandpathobiologyScience302,1772(2003年12月5日)；A.D.Gitler等,TheParkinson’sdiseaseproteinalpha-synucleindisruptscellularRabhomeostasisProcNatlAcadSciUSA105,145(2008年1月8日)；J.H.Soper,V.Kehm,C.G.Burd,V.A.Bankaitis,V.M.Lee,Aggregationofalpha-synucleininS.cerevisiaeisassociatedwithdefectsinendosomaltraffickingandphospholipidbiosynthesisJMolNeurosci43,391(2011年3月)；V.Sancenon等,Suppressionofalpha-synucleintoxicityandvesicletraffickingdefectsbyphosphorylationatS129inyeastdependsongeneticcontextHumMolGenet21,2432(2012年6月1日)；G.Esposito,F.AnaClara,P.Verstreken,SynapticvesicletraffickingandParkinson'sdiseaseDevNeurobiol72,134(2012年1月)；D.A.Macleod等,RAB7L1InteractswithLRRK2toModifyIntraneuronalProteinSortingandParkinson'sDiseaseRiskNeuron77,425(2013年2月6日)；C.Vilarino-Guell等,VPS35mutationsinParkinsondiseaseAmJHumGenet89,162(2011年6月15日)；A.Zimprich等,AmutationinVPS35,encodingasubunitoftheretromercomplex,causeslate-onsetParkinsondiseaseAmJHumGenet89,168(2011年6月15日)；P.Zabrocki等,Phosphorylation,lipidraftinteractionandtrafficofalpha-synucleininayeastmodelforParkinsonBiochimBiophysActa1783,1767(2008年10月))。本申请所描述的化合物促进核内体通过Rsp5/Nedd4运输，从而使囊泡运输稳态“复位”的能力，本身挽救了其它几个看似不相干的α-syn表型。识别这种形成网络以影响蛋白质折叠病理多个方面的根深蒂固的通路可能有利于开发疾病改善疗法。
文献
1.D.C.Swinney,J.Anthony,NatRevDrugDiscov10,507(Jul,2011).
2.J.Kotz,Science-BusinessExchange15,(2012).
3.D.F.Tardiff,S.Lindquist,DrugDiscoveryToday:Technologies,(2012).
4.V.Khurana,S.Lindquist,NatRevNeurosci11,436(Jun,2010).
5.A.M.Smith,R.Ammar,C.Nislow,G.Giaever,PharmacolTher127,156(Aug,2010).
6.D.F.Tardiff,M.L.Tucci,K.A.Caldwell,G.A.Caldwell,S.Lindquist,JBiolChem287,4107(Feb3,2012).
7.A.D.Gitler等,ProcNatlAcadSciUSA105,145(Jan8,2008).
8.A.A.Cooper等,Science313,324(Jul21,2006).
9.L.J.Su等,DisModelMech3,194(Mar-Apr,2010).
10.M.L.Duennwald,S.Lindquist,GenesDev22,3308(Dec1,2008).
11.T.F.Outeiro,S.Lindquist,Science302,1772(Dec5,2003).
12.A.B.Singleton等,Science302,841(Oct31,2003).
13.P.M.Dexter,K.A.Caldwell,G.A.Caldwell,Neurotherapeutics9,393(Apr,2012).
14.A.Kumar,MethodsMolBiol416,117(2008).
15.D.Rotin,S.Kumar,NatRevMolCellBiol10,398(Jun,2009).
16.H.C.Kim,A.M.Steffen,M.L.Oldham,J.Chen,J.M.Huibregtse,EMBORep12,334(Apr,2011).
17.F.Omura,Y.Kodama,T.Ashikari,FEMSMicrobiolLett194,207(Jan15,2001).
18.J.Ren,Y.Kee,J.M.Huibregtse,R.C.Piper,MolBiolCell18,324(Jan,2007).
19.S.Swaminathan,A.Y.Amerik,M.Hochstrasser,MolBiolCell10,2583(Aug,1999).
20.S.Dupre,R.Haguenauer-Tsapis,MolCellBiol21,4482(Jul,2001).
21.E.Yeger-Lotem等,NatGenet41,316(Mar,2009).
22.G.K.Tofaris等,ProcNatlAcadSciUSA108,17004(Oct11,2011).
23.P.J.Plant,H.Yeger,O.Staub,P.Howard,D.Rotin,JBiolChem272,32329(Dec19,1997).
24.R.Dunn,D.A.Klos,A.S.Adler,L.Hicke,JCellBiol165,135(Apr,2004).
25.K.Jarmoszewicz,K.Lukasiak,H.Riezman,J.Kaminska,PLoSOne7,e39582(2012).
26.C.M.Haynes,S.Caldwell,A.A.Cooper,JCellBiol158,91(Jul8,2002).
27.G.Esposito,F.AnaClara,P.Verstreken,DevNeurobiol72,134(Jan,2012).
28.D.A.Macleod等,Neuron77,425(Feb6,2013).
29.C.Vilarino-Guell等,AmJHumGenet89,162(Jul15,2011).
30.A.Zimprich等,AmJHumGenet89,168(Jul15,2011).
31.A.L.Barabasi,N.Gulbahce,J.Loscalzo,NatRevGenet12,56(Jan,2011).
32.C.Hein,J.Y.Springael,C.Volland,R.Haguenauer-Tsapis,B.Andre,MolMicrobiol18,77(Oct,1995).
33.S.Treusch等,Science334,1241(Dec2,2011).
34.S.Ju等,PLoSBiol9,e1001052(Apr,2011).
35.Y.Hu等,GenomeRes17,536(Apr,2007).
36.J.A.Lewis,J.T.Fleming,MethodsCellBiol48,3(1995).
37.S.Cao,C.C.Gelwix,K.A.Caldwell,G.A.Caldwell,JNeurosci25,3801(Apr13,2005).
38.F.Liu等,FreeRadicBiolMed45,242(Aug1,2008).
39.H.Li,R.Durbin,Bioinformatics25,1754(Jul15,2009).
40.M.A.DePristo等,NatGenet43,491(May,2011).
41.H.Thorvaldsdottir,J.T.Robinson,J.P.Mesirov,BriefBioinform,(Apr19,2012).
42.M.L.Duennwald,S.Jagadish,F.Giorgini,P.J.Muchowski,S.Lindquist,ProcNatlAcadSciUSA103,11051(Jul18,2006).
43.D.M.Gelperin等,GenesDev19,2816(Dec1,2005).
44.B.Sampaio-Marques等,Autophagy8,1494(Oct,2012).
45.Y.J.Lee,S.Wang,S.R.Slone,T.A.Yacoubian,S.N.Witt,PLoSOne6,e15946(2011).
46.V.Sancenon等,HumMolGenet21,2432(Jun1,2012).
47.Y.Y.Sere,M.Regnacq,J.Colas,T.Berges,FreeRadicBiolMed49,1755(Dec1,2010).
48.M.Kim等,BiochemBiophysResCommun365,628(Jan25,2008).
49.N.Sharma等,JMolNeurosci28,161(2006).
50.T.R.Flower,L.S.Chesnokova,C.A.Froelich,C.Dixon,S.N.Witt,JMolBiol351,1081(Sep2,2005).
51.J.H.Soper,V.Kehm,C.G.Burd,V.A.Bankaitis,V.M.Lee,JMolNeurosci43,391(Mar,2011).
等同物和范围
在权利要求中，冠词诸如“一个(a,an)”和“那个(the)”可表示一个或多个，除非另有指示与此相反或从上下文中明显地看出。若一个、多于一个或所有的组的成员存在于给定的产品或方法或在给定的产品或方法中采用或以其他方式与给定的产品或方法相关，则在一组的一个或多个成员间包括“或”的权利要求或说明书被视为满足条件，除非另有指示与此相反或从上下文中明显地看出。本发明包括这样的实施方案，其中恰好组中的一个成员存在于给定的产品或方法或在给定的产品或方法中采用或以其他方式与给定的产品或方法相关。本发明包括这样的实施方案，其中多于一个或所有的组的成员存在于给定的产品或方法或在给定的产品或方法中采用或以其他方式与给定的产品或方法相关。
另外，本发明涵盖所有变型、组合和排列，其中来自一个或多个所列权利要求的一个或多个限制、要素、条款和描述性术语被引入到其他权利要求中。例如，从属于其他权利要求的任何权利要求可被修饰，从而包括从属于同一个基础权利要求的任何其他权利要求中存在的一个或多个限制。当多种要素如所列的那样存在时，如在马库什组的形式中，也披露了要素的各亚组，并且可以从组中除去任何一个或多个要素。一般地，应该理解，当本发明或本发明的方面被提及包括具体的要素和/或特征时，本发明的具体实施方案或本发明的方面由所述要素和/或特征组成或基本上由所述要素和/或特征组成。出于简要的目的，本申请在这些语句中(inhaecverba)并未具体列出那些实施方案。还应该注意，术语“包含”和“含有”意在表示开放性的，并允许包括额外的要素和步骤。当给出范围时，包括了端点。另外，除非另有指示或由上下文和本领域技术人员的理解明显地看出，表达为范围的值可假定本发明不同实施方案的所述范围中的任何具体值或亚值，直到所述范围的下限的单位的十分之一，除非上下文清楚地给出不同指示。
本申请参考了各种发行的专利、公开的专利申请、期刊文章和其他出版物，将所有这些引入本申请作为参考。若任何引入的参考文献和本说明书有冲突，则以本说明书为准。此外，落入现有技术范围的本发明的任何具体实施方案可以明确地从任何一个或多个权利要求中排除。因为所述实施方案被认为是本领域技术人员已知的，它们可以被排除，即使所述排除没有在本申请中明确列出。本发明的任何具体实施方案可从任何权利要求中以任何理由排除，不管是否与现有技术的存在有关。
仅使用常规实验，本领域技术人员会认识到或者能够确定对本申请所述的具体实施方案的许多等价形式。本申请所述的本发明实施方案的范围不意在限制为上述说明书，而是如随附的权利要求所列出的那样。本领域技术人员会理解，可实现本说明书的各种变化和修饰，而不背离如以下权利要求所定义的本发明的主旨或范围。

Claims (20)

1.在有需要的受试者中治疗或预防与蛋白质聚集相关的疾病的方法，所述方法包括：
给药于所述受试者治疗或预防有效量的权利要求18-20中任一项的化合物或其可药用盐或权利要求13-16中任一项的药物组合物。
2.根据权利要求1的方法，其中所述受试者是人。
3.根据权利要求1的方法，其中所述疾病是淀粉样变性。
4.根据权利要求1的方法，其中所述疾病是帕金森病。
5.根据权利要求1的方法，其中所述疾病是阿尔茨海默氏病。
6.根据权利要求1的方法，其中所述疾病是朊病毒病。
7.在有需要的受试者中治疗或预防神经变性疾病的方法，所述方法包括：
给药于所述受试者治疗或预防有效量的权利要求18-20中任一项的化合物或其可药用盐或权利要求13-16中任一项的药物组合物。
8.在有需要的受试者中治疗或预防与TarDNA结合蛋白43kDa(TDP-43)相关的疾病的方法，所述方法包括：
给药于所述受试者治疗或预防有效量的权利要求18-20中任一项的化合物或其可药用盐或权利要求13-16中任一项的药物组合物。
9.根据权利要求8的方法，其中所述疾病是肌萎缩侧索硬化(ALS)。
10.根据权利要求8的方法，其中所述疾病是额颞叶痴呆。
11.在有需要的受试者中减少或预防蛋白质聚集的方法，所述方法包括：
给药于所述受试者治疗或预防有效量的权利要求18-20中任一项的化合物或其可药用盐或权利要求13-16中任一项的药物组合物。
12.调节在有需要的受试者中的E3泛素连接酶的方法，所述方法包括：
给药于所述受试者治疗有效量的权利要求18-20中任一项的化合物或其可药用盐或权利要求13-16中任一项的药物组合物。
13.药物组合物，其包括权利要求18-20中任一项的化合物或其可药用盐，以及任选地可药用赋形剂。
14.根据权利要求13的药物组合物，其中所述药物组合物用于治疗或预防与蛋白质聚集相关的疾病。
15.根据权利要求14的药物组合物，其中所述药物组合物包括治疗或预防有效量的所述化合物。
16.根据权利要求13的药物组合物，其还包括与该化合物或其可药用盐组合的另外的药剂。
17.试剂盒，其包括：
权利要求18-20中任一项的化合物或其可药用盐或权利要求13-16中任一项的药物组合物；和
给药所述化合物、其可药用盐或药物组合物于受试者的说明书。
18.式(I)化合物：
及其可药用盐、溶剂合物、水合物、多晶型物、共结晶物、互变异构体、立体异构体、同位素标记的衍生物和前药；
其中：
环A为取代的或未取代的芳基或取代的或未取代的杂芳基；
环B为取代的或未取代的芳基或取代的或未取代的杂芳基；
X为–C(＝O)–、–C(＝S)–、–C(＝NRG)–、–S(＝O)–或–S(＝O)2–；
每种情况下RA独立地为氢、卤素、取代的或未取代的酰基、取代的或未取代的烷基、取代的或未取代的烯基、取代的或未取代的炔基、取代的或未取代的碳环基、取代的或未取代的杂环基、取代的或未取代的芳基、取代的或未取代的杂芳基、–ORA1、–N(RA1)2、–SRA1、–CN、–SCN、–C(＝NRA1)RA1、–C(＝NRA1)ORA1、–C(＝NRA1)N(RA1)2、–C(＝O)RA1、–C(＝O)ORA1、–C(＝O)N(RA1)2、–NO2、–NRA1C(＝O)RA1、–NRA1C(＝O)ORA1、–NRA1C(＝O)N(RA1)2、–OC(＝O)RA1、–OC(＝O)ORA1、–OC(＝O)N(RA1)2，或当与氮原子相连时RA为氮保护基，或者两个RA基团相连形成取代的或未取代的碳环、取代的或未取代的杂环、取代的或未取代的芳基环或取代的或未取代的杂芳基环；
每种情况下RA1独立地为氢、取代的或未取代的酰基、取代的或未取代的烷基、取代的或未取代的烯基、取代的或未取代的炔基、取代的或未取代的碳环基、取代的或未取代的杂环基、取代的或未取代的芳基、取代的或未取代的杂芳基，当与氮原子相连时RA1为氮保护基，当与氧原子相连时RA1为氧保护基，或当与硫原子相连时RA1为硫保护基，或者两个RA1基团相连形成取代的或未取代的杂环；
RB为氢、卤素或取代的或未取代的C1-6烷基；
RC为氢、卤素或取代的或未取代的C1-6烷基；
每种情况下RD独立地为氢、卤素、取代的或未取代的酰基、取代的或未取代的烷基、取代的或未取代的烯基、取代的或未取代的炔基、取代的或未取代的碳环基、取代的或未取代的杂环基、取代的或未取代的芳基、取代的或未取代的杂芳基、–ORD1、–N(RD1)2、–SRD1、–CN、–SCN、–C(＝NRD1)RD1、–C(＝NRD1)ORD1、–C(＝NRD1)N(RD1)2、–C(＝O)RD1、–C(＝O)ORD1、–C(＝O)N(RD1)2、–NO2、–NRD1C(＝O)RD1、–NRD1C(＝O)ORD1、–NRD1C(＝O)N(RD1)2、–OC(＝O)RD1、–OC(＝O)ORD1、–OC(＝O)N(RD1)2，或当与氮原子相连时RD为氮保护基，或者两个RD基团相连形成取代的或未取代的碳环、取代的或未取代的杂环、取代的或未取代的芳基环，或取代的或未取代的杂芳基环；
每种情况下RD1独立地为氢、取代的或未取代的酰基、取代的或未取代的烷基、取代的或未取代的烯基、取代的或未取代的炔基、取代的或未取代的碳环基、取代的或未取代的杂环基、取代的或未取代的芳基、取代的或未取代的杂芳基，当与氮原子相连时RD1为氮保护基，当与氧原子相连时RD1为氧保护基，或当与硫原子相连时RD1为硫保护基，或者两个RD1基团相连形成取代的或未取代的杂环；
RE为氢、取代的或未取代的C1-6烷基或氮保护基；
每种情况下RF独立地为氢、卤素、取代的或未取代的酰基、取代的或未取代的烷基、取代的或未取代的烯基、取代的或未取代的炔基、取代的或未取代的碳环基、取代的或未取代的杂环基、取代的或未取代的芳基、取代的或未取代的杂芳基、–ORF1、–N(RF1)2、–SRF1、–CN、–SCN、–C(＝NRF1)RF1、–C(＝NRF1)ORF1、–C(＝NRF1)N(RF1)2、–C(＝O)RF1、–C(＝O)ORF1、–C(＝O)N(RF1)2、–NO2、–NRF1C(＝O)RF1、–NRF1C(＝O)ORF1、–NRF1C(＝O)N(RF1)2、–OC(＝O)RF1、–OC(＝O)ORF1、–OC(＝O)N(RF1)2，或当与氮原子相连时RF为氮保护基，或者两个RF基团相连形成取代的或未取代的碳环、取代的或未取代的杂环、取代的或未取代的芳基环或取代的或未取代的杂芳基环；
每种情况下RF1独立地为氢、取代的或未取代的酰基、取代的或未取代的烷基、取代的或未取代的烯基、取代的或未取代的炔基、取代的或未取代的碳环基、取代的或未取代的杂环基、取代的或未取代的芳基、取代的或未取代的杂芳基，当与氮原子相连时RF1为氮保护基，当与氧原子相连时RF1为氧保护基，或当与硫原子相连时RF1为硫保护基，或者两个RF1基团相连形成取代的或未取代的杂环；
RG为氢、取代的或未取代的C1-6烷基或氮保护基；
k为0、1、2、3、4或5；
p为0、1、2、3、4或5；和
m为0、1、2或3。
19.根据权利要求18的化合物，其中所述化合物为下式化合物：
或其可药用盐。
20.根据权利要求18的化合物，其中所述化合物为下式化合物：
或其可药用盐。
CN201480027084.6A 2013-03-15 2014-03-17 苯并咪唑衍生物及其用途 Pending CN105338812A (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201361794870P 2013-03-15 2013-03-15
US61/794,870 2013-03-15
PCT/US2014/030733 WO2014145887A1 (en) 2013-03-15 2014-03-17 Benzimidazole derivatives and uses thereof

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN105338812A true CN105338812A (zh) 2016-02-17

Family

ID=51538125

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201480027084.6A Pending CN105338812A (zh) 2013-03-15 2014-03-17 苯并咪唑衍生物及其用途

Country Status (8)

Country Link
US (1) US9790188B2 (zh)
EP (1) EP2967046A4 (zh)
JP (1) JP2016520532A (zh)
CN (1) CN105338812A (zh)
CA (1) CA2906194A1 (zh)
HK (1) HK1220325A1 (zh)
IL (1) IL241374A0 (zh)
WO (1) WO2014145887A1 (zh)

Families Citing this family (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA2909964A1 (en) * 2013-05-02 2014-11-06 E3X Bio Method for identifying modulators of ubiquitin ligases
EP3454856A4 (en) 2016-05-10 2019-12-25 C4 Therapeutics, Inc. HETEROCYCLIC DEGRONIMERS FOR TARGET PROTEIN REDUCTION
EP3455218A4 (en) 2016-05-10 2019-12-18 C4 Therapeutics, Inc. C3 CARBON-BASED GLUTARIMIDE DEGRONIMERS FOR TARGET PROTEIN REDUCTION
WO2017197036A1 (en) 2016-05-10 2017-11-16 C4 Therapeutics, Inc. Spirocyclic degronimers for target protein degradation
WO2018237026A1 (en) 2017-06-20 2018-12-27 C4 Therapeutics, Inc. N / O-LINKED DEGRONS AND DEGRONIMERS FOR DEGRADATION OF PROTEINS
WO2019043208A1 (en) 2017-09-04 2019-03-07 F. Hoffmann-La Roche Ag DIHYDROQUINOLINONES
CN111315735B (zh) 2017-09-04 2024-03-08 C4医药公司 二氢苯并咪唑酮
EP3679026A1 (en) 2017-09-04 2020-07-15 C4 Therapeutics, Inc. Glutarimide
WO2019099868A2 (en) 2017-11-16 2019-05-23 C4 Therapeutics, Inc. Degraders and degrons for targeted protein degradation
WO2019191112A1 (en) 2018-03-26 2019-10-03 C4 Therapeutics, Inc. Cereblon binders for the degradation of ikaros
EP3781156A4 (en) 2018-04-16 2022-05-18 C4 Therapeutics, Inc. SPIROCYCLIC COMPOUNDS

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1298707A (zh) * 1999-12-08 2001-06-13 翟永功 新矿物药材蒙脱石
CN1671696A (zh) * 2002-05-23 2005-09-21 西托匹亚有限公司 激酶抑制剂
CN1838950A (zh) * 2003-06-23 2006-09-27 神经化学（国际）有限公司 治疗蛋白质聚集疾病的方法
CN101193867A (zh) * 2004-12-01 2008-06-04 Osi医药有限公司 N取代的苯并咪唑基c-Kit抑制剂和苯并咪唑组合库
WO2011005052A2 (en) * 2009-07-10 2011-01-13 Green Gross Corporation Novel arylpiperazine-containing imidazole 4-carboxamide derivatives and pharmaceutical composition comprising same
CN102573837A (zh) * 2009-07-30 2012-07-11 艾斯特司治疗有限公司 用PPARγ的苯并咪唑衍生物激动剂来治疗神经性疼痛的方法

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6358949B1 (en) * 1999-04-02 2002-03-19 Neurogen Corporation Aryl and hetroaryl fused aminoalkyl-imidazole derivatives: selective modulators of bradykinin B2 receptors
ATE359274T1 (de) * 2000-11-21 2007-05-15 Vertex Pharma Imidazol- und benzimidazol- caspase inhibitoren und deren verwendung
US7485658B2 (en) * 2003-08-21 2009-02-03 Osi Pharmaceuticals, Inc. N-substituted pyrazolyl-amidyl-benzimidazolyl c-Kit inhibitors
UA82395C2 (en) 2003-08-21 2008-04-10 Оси Фармасьютикалз, Инк. N-substituted benzimidazolyl c-kit inhibitors
FR2889190A1 (fr) * 2005-08-01 2007-02-02 Merck Sante Soc Par Actions Si Nouveaux derives d'imidazoles carboxamides comme inhibiteurs de fructose -1,6-biphosphatase et compositions pharmaceutiques les contenant
JP2009001495A (ja) 2005-10-13 2009-01-08 Taisho Pharmaceutical Co Ltd ２−アリール−ベンゾイミダゾール−５−カルボキサミド誘導体
ES2553610T3 (es) 2010-12-14 2015-12-10 Electrophoretics Limited Inhibidores de la caseína cinasa 1 delta (CK1delta)
US20140249196A1 (en) * 2011-11-22 2014-09-04 Theodore Mark Kamenecka N-benzylbenzimidazole modulators of pparg

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1298707A (zh) * 1999-12-08 2001-06-13 翟永功 新矿物药材蒙脱石
CN1671696A (zh) * 2002-05-23 2005-09-21 西托匹亚有限公司 激酶抑制剂
CN1838950A (zh) * 2003-06-23 2006-09-27 神经化学（国际）有限公司 治疗蛋白质聚集疾病的方法
CN101193867A (zh) * 2004-12-01 2008-06-04 Osi医药有限公司 N取代的苯并咪唑基c-Kit抑制剂和苯并咪唑组合库
WO2011005052A2 (en) * 2009-07-10 2011-01-13 Green Gross Corporation Novel arylpiperazine-containing imidazole 4-carboxamide derivatives and pharmaceutical composition comprising same
CN102573837A (zh) * 2009-07-30 2012-07-11 艾斯特司治疗有限公司 用PPARγ的苯并咪唑衍生物激动剂来治疗神经性疼痛的方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
CHEMICAL ABSTRACTS SERVICE: "《STN Registry数据库》", 16 September 2002 *
JANG HYUN CHOI等: "Antidiabetic actions of a non-agonist PPARc ligand blocking Cdk5-mediated phosphorylation", 《NATURE》 *

Also Published As

Publication number Publication date
EP2967046A4 (en) 2016-12-21
WO2014145887A1 (en) 2014-09-18
HK1220325A1 (zh) 2017-05-05
CA2906194A1 (en) 2014-09-18
WO2014145887A8 (en) 2014-11-13
US20160031824A1 (en) 2016-02-04
IL241374A0 (en) 2015-11-30
JP2016520532A (ja) 2016-07-14
US9790188B2 (en) 2017-10-17
EP2967046A1 (en) 2016-01-20

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN105338812A (zh) 苯并咪唑衍生物及其用途
CN105744932B (zh) 用于治疗神经障碍的包含托拉塞米和巴氯芬的组合物
KR101257550B1 (ko) 세포내 칼슘을 조절하는 화합물
EP2892518B1 (en) Compositions for treating parkinson&#39;s disease
ES2758554T3 (es) Aminoácidos gama para tratamiento de trastornos oculares
CN102548986A (zh) 氨基吡咯烷酮衍生物及其用途
EA011074B1 (ru) Гидразидсодержащие соединения - ингибиторы cftr и их применение
BRPI0917719A2 (pt) compostos que modulam cálcio intracelular
EP2774914A1 (en) N-benzylaniline derivative and uses thereof
US20120046246A1 (en) Methods for treating osteoclast-related disease, compounds and compositions thereof
CN108025191A (zh) 治疗癌症的方法
JP7296472B2 (ja) プリドピジンを使用したミトコンドリア関連疾患および障害（それらの症状を含む）の治療
ES2615052T3 (es) Compuesto de benzotiazolona
ES2381180T3 (es) Utilización de derivados de indol como activadores de nurr-1, para el tratamiento de la enfermedad de parkinson
GB2548839A (en) New uses and methods
CN106660992A (zh) 二甲基吡啶胺衍生物及其医药用途
TW470645B (en) Compound for inhibiting or preventing HIV infection, its preparation and pharmaceutical composition comprising same
WO2020165802A1 (en) Compositions and methods relating to use of agonists of alpha5-containing gabaa receptors
CN105566314B (zh) 一种盐酸替扎尼定化合物
ES2637802T3 (es) Formulación que comprende un compuesto de benzotiazolona
US20130172346A1 (en) Use of kynurenic acid amide derivatives for the treatment of huntington&#39;s disease
TW202200537A (zh) 新穎之氫醌衍生物
KR101605522B1 (ko) 2-(3-히드록시-4-(4-(3-메톡시페녹시)-1ｈ-피라졸-3-일)페녹시)아세토-하이드라자이드 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 프리온 질환 예방 및 치료용 약학적 조성물
WO2015090226A1 (zh) N，n&#39;取代哌啶胺类化合物、其制备方法及用途
ES2642003T3 (es) Sales de un compuesto de benzotiazolona como agonistas del adreno-receptor beta-2

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication

Application publication date: 20160217

WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication