CN105250209A - 一种深层发酵竹荪菌丝体的制备及其在化妆品中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种竹荪菌丝体的制备方法，该竹荪菌丝体是通过深层发酵的方法制备得到的。该竹荪菌丝体的制备方法生产周期短、生产工艺简便、培养材料易得、产品质量易于控制且成本低。用该方法制备得到的竹荪菌丝体具有美白及抗衰老功效。本发明也公开了竹荪菌丝体提取物在化妆品中的应用，以及含有竹荪菌丝体提取物的化妆品组合物。

Description

一种深层发酵竹荪菌丝体的制备及其在化妆品中的应用

技术领域

本发明涉及食用真菌领域，具体涉及一种深层发酵竹荪菌丝体的制备方法及其在化妆品中的应用。

背景技术

近年来随着消费者对自身健康和安全的日益关注，相对于工业合成的化妆品功效原料，来源于天然且功效卓著的原料更受青睐，特别是从天然植物中提取有效成分作为化妆品原料更易为消费者所接受。中国古代的日常美容用药，较之皮肤疾患治疗的处方更加倾向于整体肤质的改善所带来的美容功效，因而不仅较为安全，而且能够通过调节皮肤内外的阴阳气血平衡，恢复健康有序的自身良好状态而达成综合的美容护养功效。正如古代常见的美容护肤面脂、面膏等对功效的记载：“令面光悦”、“令光润”、“令人好颜色”、“令人面白净悦泽”等等，都间接体现了美白、保湿、滋润、抗衰老等作用。因此这也为我们拓展美容用药的思路提供了一定的指导。

竹荪又名竹笙、竹参、面纱菌、网纱菌、竹姑娘、僧竺蕈、竹菌等，是鬼笔科竹荪属中珍贵的食用菌。素有“菌菇之花”、“雪裙仙子”、“山珍之花”、“菌中皇后”的美誉。竹荪是优质的植物蛋白和营养源，菌体含有丰富的营养成分，据报道菌体约含蛋白20.2％，粗脂肪2.6％，碳水化合物38.1％，粗纤维9.4％，还含有21种氨基酸，8种为人体所必需，其中谷氨酸的含量高达1.76％，占氨基酸总量的17.0％以上，为蔬菜和水果所不及，且竹荪所含的氨基酸大多以菌体蛋白的形态存在，因此不易丧失。竹荪富含多种维生素，如B族维生素中的VB₁、VB₂、VB₆，以及维生素A、D、E、K等。其中VB₂(核黄素)含量较高。竹荪所含多糖以半乳糖、葡萄糖、甘露糖和木糖为主。竹荪还含有多种微量元素，其中重要的有锌、铁、铜、硒。

竹荪性温味甘，有活血、健脾益胃、助消化之功效，适用于咳嗽、高血压、高血脂等症的治疗和预防。在云南，苗族同胞将竹荪和糯米一起泡水喝，可以治疗虚弱症、损伤症和咳嗽，有直通补气之功效，竹荪还具有解腻助消化的作用。中医认为竹荪有大补之功，但其药用价值在历代本草著作中鲜有论述。常食竹荪能保护肝脏，减少腹壁脂肪的积存，有俗称“刮油”的作用。竹荪还有延长汤羹食品的存放时间、保持菜肴的鲜味而不霉馊的奇特功能。

竹荪是世界上名贵的大型食用菌之一，其不仅营养丰富，而且富含多糖及其他活性物质，具有抑菌、提高机体免疫力等多种生物功能，因此，其在医药、食品、保健品等领域具有较高的应用前景。研究表明，竹荪子实体提取物具有较好的美白和抗衰老效果，在细胞平台其美白效果可以与熊果苷相媲美，在人体功效测试中亦具有明显美白功效。但竹荪属珍稀食用菌，资源有限且价格昂贵。另一方面由于竹荪的产地、来源及培育方法不同，因此其产品质量不易控制，这些因素都限制了对其进一步开发和利用。

深层发酵培养技术是近年来发展较快的现代生物工程技术之一，该技术以真菌的无性繁殖为基础，通过培养获得菌丝体和发酵液，从中获取活性物质。具有生产周期短、生产工艺简便、培养材料易得、产品质量易于控制及成本低等优点，特别是对于不能人工栽培的食用菌来说，发酵法是大量获得其活性物质的重要途径。目前关于竹荪液体发酵的报道较少，且未有针对性获得美白及抗衰老活性产物的竹荪发酵工艺的报道，因此本发明首次提供一种竹荪液体发酵工艺方法，获得的菌丝体提取物和发酵液具有较好的美白及抗衰老效果。

本发明开发了针对竹荪菌株的深层发酵方法，首次提出经过我们的发酵工艺得到的竹荪菌丝体提取物具有美肤功效，适用于具有美白及抗衰老功效的化妆品中。

发明内容

经本发明人研究发现，竹荪菌丝体提取物具有卓越的美白肌肤功效。它可以通过抑制酪氨酸酶活性的方式，减少B16黑素细胞中黑素的生成以达到亮白肌肤的效果。并且该提取物具有提高角质细胞活力的功效，进而具有抗衰老的功效。

因此，本发明的一个目的是提供一种竹荪菌丝体提取物的制备方法，该方法包括深层发酵竹荪菌丝体的制备以及竹荪菌丝体提取物的制备。

深层发酵竹荪菌丝体的制备包括：取竹荪母菌种菌丝块接种于斜面培养基上，避光培养待菌丝长满斜面，取出保存待用。将已活化的斜面菌种接种于装有液体种子培养液的三角瓶中，摇床培养10天，制得一级种子液，然后将一级种子液按一定接种量接到液体种子培养基中，在相同的培养条件下制备二级种子液。以此类推，得到三级种子液。以二级或三级种为种子液，以相同接种量，接种于装有发酵培养液的三角瓶中，摇床培养7天，摇瓶得到菌丝体。

竹荪菌丝体提取物的制备包括：取竹荪菌丝体与蒸馏水按照一定的料液比混合，采用超声法及高温水提法经过离心，去除沉淀，得到的上清液即为竹荪菌丝体提取物。

因此，在本发明的一个方面，提供了一种深层发酵竹荪菌丝体的制备方法，所述方法包括以下步骤：

a.提供竹荪菌株，所述竹荪菌株以ACCC4912来自中国微生物菌种保藏管理委员会农业微生物中心上海食用菌分中心，

b.斜面培养，

c.液体种子培养，

d.发酵液培养，得到竹荪菌丝体。

在一个具体的实施方式中，所述斜面培养采用马铃薯葡萄糖琼脂培养基。在一个具体的实施方式中，所述液体种子培养采用马铃薯葡萄糖培养基。在一个具体的实施方式中，所述发酵液培养采用的培养基包含玉米粉，葡萄糖，七水硫酸镁，磷酸二氢钾，维生素B1。

在本发明的另一方面，提供了一种竹荪菌丝体，该竹荪菌丝体是通过本发明的深层发酵方法制备得到的。

在本发明的另一方面，提供了一种竹荪菌丝体提取物的制备方法，所述方法包括以下步骤：

a.提供本发明深层发酵方法制备得到的竹荪菌丝体，

b.超声提取，

c.温度60～90℃水提4～6小时，

d.离心后，取上清液，得到竹荪菌丝体提取物。

在本发明的另一方面，提供了本发明方法制备得到的竹荪菌丝体提取物在具有美白和/或抗衰老功效的化妆品中的应用。

在本发明的另一方面，提供了一种化妆品组合物，所述组合物包含竹荪菌丝体提取物和化妆品领域可接受的辅料。在一个实施方式中，所述化妆品领域可接受的辅料选自：溶剂、增溶剂、防腐剂、抗氧剂、pH调节剂、促渗剂、脂质体、保湿剂、增稠剂、螯合剂、肤感调节剂、表面活性剂、乳化剂、推进/抛射剂、香精、色素，以及其他功效添加剂。在一个具体的实施方式中，所述化妆品组合物可以为霜剂、乳剂、溶液剂、膜剂、气雾或喷雾形式，更具体地，所述组合物可以为洗面奶、沐浴露、柔肤水、护肤啫喱、护肤乳液、护肤霜、精华液、眼霜、面膜、气雾或喷雾形式。这些形式可通过本领域技术人员熟知的方法制备。

附图说明

图1显示了竹荪菌丝体对黑素形成的影响。

图2显示了竹荪菌丝体对酪氨酸酶的影响。

图3显示了DOPA染色结果。

图4显示了竹荪菌丝体对角质细胞活力的影响。

具体实施方式

本发明的发明人在经过了广泛而深入的研究之后发现：竹荪菌丝体提取物具有抑制酪氨酸酶活性的作用，并且增强角质细胞活力的作用。因此，本发明涉及竹荪菌丝体的美白及抗衰老功效，竹荪菌丝体提取物可作为功效添加剂加入到化妆品组合物中。

文献中均未涉及竹荪菌丝体具有美白及抗衰老的作用，也未提及将其作为功能添加剂加入化妆品中。也就是说，本发明首次提出经过我们的发酵工艺得到的竹荪菌丝体具有美肤作用，可以作为功能添加剂加入化妆品中，用于实现美白及抗衰老功效。

本发明具体描述了一种深层发酵竹荪菌丝体的制备方法，所述方法包括：

提供竹荪菌株(DictyophoraduplicataACCC4912)，来自于中国微生物菌种保藏管理委员会农业微生物中心上海食用菌分中心；

使用的培养基为：

①斜面培养基(PDA斜面)：马铃薯葡萄糖琼脂(美国BD公司生产，商品名：马铃薯葡萄糖琼脂)粉末35-45g溶于1L去离子水中灭菌后即得。

②种子培养基(g/L)：马铃薯葡萄糖(美国BD公司生产，商品名：马铃薯葡萄糖肉汤)粉末35-45g溶于1L水中灭菌后即得(PDA摇瓶)。

③发酵培养基(g/L)：玉米粉25-35g，葡萄糖15-25g，七水硫酸镁0.5-1.5g，磷酸二氢钾1.0-3.0g，维生素B1(5-15)×10^-3g，自然pH。

菌丝体培养方法如下：

①斜面培养：

取母菌种菌丝块接种于PDA培养基上，25-30℃避光培养(LRH-250生化培养箱：上海一恒科技有限公司)待菌丝长满斜面，取出保存待用(说明：菌丝体的培养温度对于湿度没有严格的控制，只要普通的生化培养箱即可，正常的培养温度为26℃)。

②液体种子培养：

将已活化的斜面菌种接种于装有50-150ml液体种子培养液的250ml三角瓶中，摇床(DKY-Ⅱ回转式恒温调速摇床柜：上海杜科自动化设备有限公司)培养(80-120r/min，25-30℃)10-14天，制得一级种子液，然后将一级种子液按接种量8-12％接到液体种子培养基中，在相同的培养条件下制备二级种子液。

③发酵液培养：

以二级或三级种为种子液，接种量8-12％，接种于装有150-250ml发酵培养液的500ml三角瓶中，摇床培养(80-120r/min，25-30℃)5-14天。

竹荪菌丝体提取物的制备：

取竹荪菌丝体与蒸馏水按照一定的料液比混合，采用超声法及高温水提法经过离心，去除沉淀，得到的上清液即为竹荪菌丝体提取物。在竹荪菌丝体提取物的制备过程中，竹荪菌丝体与蒸馏水的料液比为1:10至1:100。在一个具体的实施方式中，竹荪菌丝体与蒸馏水的料液比为1:10至1:50。例如，在一个较优选的实施方式中，竹荪菌丝体与蒸馏水的料液比为1:30。在一个实施方式中，高温水提法包括在60～90℃水浴锅中浸提约4～6小时。

在一个实施方式中，竹荪菌丝体提取物的使用浓度可以是0.1-50mg/ml。例如，竹荪菌丝体提取物的使用浓度可以是0.1-20mg/ml，例如0.1-10mg/ml，例如0.1-5mg/ml，例如0.1-3mg/ml，例如0.1-1mg/ml。在一个实施方式中，竹荪菌丝体提取物的使用浓度为0.5mg/ml。

可以将竹荪菌丝体提取物按照0.001-100重量％的比例添加到化妆品组合物中。例如，化妆品组合物中竹荪菌丝体提取物的用量可以是0.01-50重量％，例如0.01-30重量％，例如0.01-20重量％，例如0.01-10重量％，例如0.01-5重量％，例如0.01-3重量％，例如0.01-1重量％。在其他实施方式中，化妆品组合物中竹荪菌丝体提取物的用量可以是0.5-20重量％，例如，0.5-10重量％，0.5-5重量％，0.5-3重量％，0.5-2重量％，0.5-1重量％。

下面结合具体的实施例进一步阐述本发明。但是，应该明白，这些实施例仅用于说明本发明而不构成对本发明范围的限制。下列实施例中未注明具体条件的试验方法，通常按照常规条件，或按照制造厂商所建议的条件。除非另有说明，所有的百分比和份数按重量计。

实施例1：竹荪菌丝体及竹荪菌丝体提取物的制备

菌株：竹荪DictyophoraduplicataACCC4912，来自中国微生物菌种保藏管理委员会农业微生物中心上海食用菌分中心。

培养基：

--斜面培养基(PDA斜面)：以商品名马铃薯葡萄糖琼脂购自美国BD公司，具体制备过程包括将马铃薯葡萄糖琼脂粉末39g溶于1L去离子水中，灭菌后即得。

--种子培养基：以商品名马铃薯葡萄糖肉汤购自美国BD公司，具体制备过程包括将马铃薯葡萄糖粉末40g溶于1L水中，灭菌后即得(PDA摇瓶)。

--发酵培养基：具体制备过程包括将玉米粉30g，葡萄糖20g，七水硫酸镁1.0g，磷酸二氢钾2.0g，维生素B10.01g溶于1L去离子水中。

菌丝体的培养：

--斜面培养

取竹荪菌株的菌丝块接种于斜面培养基上，26℃避光培养((LRH-250生化培养箱：上海一恒科技有限公司)，待菌丝长满斜面，取出保存待用。

--液体种子培养

将已活化的斜面菌种接种于装有80ml液体种子培养液的250ml三角瓶中，摇床培养(120r/min，26℃)10天((DKY-Ⅱ回转式恒温调速摇床柜：上海杜科自动化设备有限公司)，制得一级种子液，然后将一级种子液按接种量8％接到液体种子培养基中，在相同的培养条件下制备二级种子液。以类似的方法制备三级种子液。

--发酵液培养：

取二级或三级种子液，接种量8％，接种于装有200ml发酵培养液的500ml三角瓶中，摇床培养(120r/min，26℃)7天。

培养7天后，最终得到竹荪菌丝体7.61g。

竹荪菌丝体提取物的制备：

将竹荪菌丝体与蒸馏水以1:30(重量比)的料液比混合，逐步采用超声提取、高温水提的方法进行制备。具体是采用KQ-600B型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)，超声时间30分钟，温度40～60℃，对竹荪菌丝体进行超声提取。然后，将超声后的混合物在60～90℃水浴锅中浸提约4～6小时，取出离心(离心机：BeckmanCoulterAllegra^TM25RCentrifuge,离心转速：10000rpm)，弃沉淀，取出上清液即为竹荪菌丝体提取物。该上清液冻干成粉末后重新溶解在蒸馏水中，制得的该提取物的生药浓度为0.05g/ml。

实施例2：面霜的制备

实施例3：乳液的制备

实施例4：啫喱的制备

实施例5：化妆水的制备

实施例6：精华液的制备

实施例7：面膜的制备

实施例8：眼霜的制备

实施例9：气雾(清洁泡)的制备

实施例10：喷雾的制备

实施例11：沐浴露的制备

实施例12：洗面奶的制备

以上2-12实施例中所述的竹荪菌丝体组合物均经过①稳定性测试，将料体分别在-20℃、4℃、室温、48℃、循环(连续变换四个温度条件)放置12周，各料体的颜色和形态都保持稳定；②皮肤安全性测试，证实对皮肤无刺激，不会引发红斑、脱屑、刺痛及灼热等不良反应，可安心使用；③使用感觉测试，请20位中国女性志愿者在面部连续使用实施例9所述的精华液8周评估结果表明，使用含竹荪菌丝体提取物的精华液后，明显发现肌肤变得白皙、通透度提升，感觉肌肤水嫩饱满度提高，显得更为年轻。

以下实施例13-14中所使用的竹荪菌丝体提取物样品溶液为实施例1制备得到的竹荪菌丝体提取物；以下试验例中涉及的“mg/ml”浓度单位，为生药浓度。

实施例13：竹荪菌丝体提取物美白功效评估

一、实验原理

为了验证竹荪菌丝体提取物的美白功效，我们利用角质细胞与黑素细胞共培养体系对其美白功效进行评估。在该培养体系中，角质细胞和黑色素细胞模拟正常皮肤中两种细胞的比例共同培养。如果待测物能够减少黑色素总量的生成，可认为其具有皮肤美白的功效。该共培养体系的优势在于，它不仅可以通过测定黑色素生成的量直接判定待测物质的美白功效，而且还可以初步研究待测物质的美白机理。该评估方法由三个独立的实验组成。首先是黑色素生成总量检测，将黑色素颗粒溶解于高温碱性溶液，利用其在405nm处有较大光吸收，来间接反映黑色素颗粒生成量。其次是细胞酪氨酸酶实验，相比较体外生化酪氨酸酶活性抑制实验该测试方法更能反映出真实结果。最后一个实验是DOPA染色，通过DOPA染色可以观察到共培养体系中的黑色素细胞的形态、数量，通过衡量黑色素细胞染色深度也可以反映出待测物质的美白功效。

另一方面，为了验证竹荪菌丝体提取物的抗衰老功效，我们利用角质细胞对其抗衰老功效进行评估。皮肤衰老的一个显著特征是其表皮层逐渐变薄，这主要是由于角质细胞活力降低、增殖速度下降所导致，如果待测物能够增强角质细胞活力，可初步判定其具有抗衰老的功效。

二、实验方法

(一)美白功效检测

1、细胞培养及药物处理

将制备好的角质细胞(Hacat细胞)及黑素细胞(B16细胞)以22:1的比例接种于6孔细胞板内(设置空白孔，空白孔中仅加入相应浓度的Hacat细胞)。24小时后，阴性对照组每孔加入2ml新鲜的培养液，样品组每孔加入2ml相应浓度的竹荪菌丝体提取物样品溶液(培养液配制)，0.2mg/ml的曲酸作为阳性对照，每组设3个复孔，置CO₂培养箱(37℃，5％CO₂)中孵育。48小时后进行第二次加样，每孔加入2ml溶液，方法同上。再次孵育48小时后进行第三次加样，每孔加入2ml溶液，方法同上。第三次加样24小时后，消化收集各组细胞，离心，弃去上清液。

2、黑色素含量检测

收集到的细胞中加入200μl的黑色素提取液(1mol/LNaOH+10％DMSO)，吹打均匀，95℃水浴1小时。待冷却，适度离心下管壁液滴，吹打均匀，吸取各离心管中的150μl溶液，移入96孔板中，酶标仪检测各孔Abs405值。

计算对黑色素生成的抑制率：

式中：T-样品孔Abs；C-阴性对照孔Abs；C₀-空白孔Abs。

3、细胞酪氨酸酶活性检测

收集到的细胞中加入400μl1％Triton溶液，充分震荡后，4℃反应1小时。4000rpm离心5分钟。在1.5mleppendorf管中各加入100μl3mg/ml多巴溶液，吸出每个离心管中200μl上清液，37℃孵育2小时。吸取各离心管中的150μl溶液，移入96孔板中，酶标仪检测各孔Abs405值。

计算对黑色素生成的抑制率：

式中：T-样品孔Abs；C-阴性对照孔Abs；C₀-空白孔Abs。

4、DOPA染色

吸去细胞培养液，用PBS洗两遍。加入10％甲醛，室温固定15分钟。PBS洗净后，加入1mg/ml的多巴溶液，37℃孵育1小时，观察细胞内酪氨酸酶与多巴的反应。染色结束后，吸去多巴溶液，加入PBS，在显微镜下观察黑素细胞的多巴染色结果，拍照。

5、结果判定

根据405nm处测得的吸光值来判定样品是否具有美白效果。

在黑素检测实验中，样品组OD值小于阴性对照组，且相对于阴性对照组有显著性差异则表明样品有抑制黑素生成的效果。

在细胞酪氨酸酶活性检测实验中，样品组OD值小于阴性对照组，且相对于阴性对照组有显著性差异则表明样品有抑制酪氨酸酶的效果。

在DOPA染色实验中，在没有观测到黑色素细胞数量减少，形态发生明显变化的同时，如果样品组黑色素细胞染色结果比对照组浅，说明样品具有较高的安全性，样品的美白功效并不是通过杀死黑色素细胞或抑制黑色素细胞生长来达成的。

(二)抗衰老功效检测

1、细胞培养及药物处理

将制备好的角质细胞(Hacat细胞)接种于96孔细胞板内。24小时后，阴性对照组每孔加入150μl新鲜的培养液，样品组每孔加入150μl相应浓度的竹荪菌丝体提取物样品溶液，HB-EGF作为阳性对照，每组设6个复孔，置CO₂培养箱(37℃，5％CO₂)中孵育。48小时后进行第二次加样，方法同上。一共加样72小时后，进行细胞活力检测。

2、细胞活力检测

采用XTT法检测细胞线粒体活力，首先用60℃预热的培养液将XTT配制成1.0mg/ml溶液，然后用PBS将PMS配制成5mmol/l溶液，临用时，将PMS与1mg/ml的XTT按1:200比例混合，用细胞培养液将1mg/mlXTT/PMS溶液稀释至0.2mg/ml，最后移除96孔板中培养液，加入0.2mg/mlXTT/PMS溶液，37℃孵育2小时，在酶标仪上450nm处测定吸光度。

3、结果判定

根据450nm处测得的吸光值来判定样品是否具有抗衰老效果。

在角质细胞活力检测实验中，样品组OD值大于阴性对照组，且相对于阴性对照组有显著性差异，因此表明样品具有增强细胞活力的作用，从而说明样品具有抗衰老的功效。

三、实验结果

1、竹荪菌丝体提取物抑制黑色素细胞生成黑色素

实验浓度(mg/ml)	0.5
		抑制率(％)	91.1％

如图1所示，0.5mg/ml浓度下竹荪菌丝体提取物可以抑制黑色素的产生。

实验结果显示，竹荪菌丝体提取物可以抑制黑色素的产生(与对照相比，其结果具有显著差异，*P<0.05)，因此具有美白的功效。

2、竹荪菌丝体提取物抑制黑色素细胞酪氨酸酶

实验浓度(mg/ml)	0.5
		抑制率(％)	9.6％

如图2所示，0.5mg/ml浓度下竹荪菌丝体提取物可以抑制细胞酪氨酸酶。

实验结果显示，竹荪菌丝体提取物可以抑制细胞酪氨酸酶(与对照相比，其结果具有显著差异，*P<0.05)，这说明竹荪菌丝体提取物的美白功效源自其对细胞酪氨酸酶的抑制作用。

3、DOPA染色结果

如图3所示，DOPA染色后黑色素细胞呈黄褐色。经过竹荪菌丝体提取物处理后，黑色素细胞克隆没有减少，显微镜下也没有观测到形态的改变，但是黑色素克隆的颜色明显变淡。这个结果揭示竹荪菌丝体提取物是一个比较安全的美白剂，它并不是通过影响黑色素细胞生长来达到美白效果。

4、竹荪菌丝体提取物增强角质细胞活力

如图　4所示，0.5mg/ml浓度下竹荪菌丝体提取物可以显著增强角质细胞活力。

实验结果显示，竹荪菌丝体提取物可以促进角质细胞活力(与对照相比，其结果具有显著性差异，*P<0.05)，说明竹荪菌丝体提取物具有抗衰老的功效。

Claims (10)

1.一种深层发酵竹荪菌丝体的制备方法，所述方法包括以下步骤：

a.提供竹荪菌株，所述竹荪菌株以ACCC4912来自中国微生物菌种保藏管理委员会农业微生物中心上海食用菌分中心，

b.斜面培养，

c.液体种子培养，

d.发酵液培养，得到竹荪菌丝体。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述斜面培养采用马铃薯葡萄糖琼脂培养基。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述液体种子培养采用马铃薯葡萄糖培养基。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述发酵液培养采用的培养基包含玉米粉，葡萄糖，七水硫酸镁，磷酸二氢钾，维生素B1。

5.如权利要求1所述方法制备得到的竹荪菌丝体。

6.一种竹荪菌丝体提取物的制备方法，所述方法包括以下步骤：

a.提供如权利要求5所述的竹荪菌丝体，

b.超声提取，

c.温度60～90℃水提4～6小时，

d.离心后，取上清液，得到竹荪菌丝体提取物。

7.如权利要求6所述的竹荪菌丝体提取物在具有美白和/或抗衰老功效的化妆品中的应用。

8.一种化妆品组合物，其特征在于，所述组合物包含如权利要求6所述的竹荪菌丝体提取物和化妆品领域可接受的辅料。

9.如权利要求8所述的组合物，其特征在于，所述辅料选自：溶剂、增溶剂、防腐剂、抗氧剂、pH调节剂、促渗剂、脂质体、保湿剂、增稠剂、螯合剂、肤感调节剂、表面活性剂、乳化剂、推进/抛射剂、香精、色素，以及其他功效添加剂。

10.如权利要求8所述的组合物，其特征在于，所述化妆品组合物是选自以下的形式：霜剂、乳剂、溶液剂、膜剂、气雾或喷雾剂。