CN105238827A

CN105238827A - 低聚龙胆糖酶法生产工艺

Info

Publication number: CN105238827A
Application number: CN201510773258.XA
Authority: CN
Inventors: 夏泽华; 吴敬; 陈晟; 江龙法
Original assignee: NANTONG KANGWEIERC BIOCHEMICAL Co Ltd
Current assignee: NANTONG KANGWEIERC BIOCHEMICAL Co Ltd
Priority date: 2015-11-13
Filing date: 2015-11-13
Publication date: 2016-01-13

Abstract

本发明涉及一种低聚龙胆糖酶法生产工艺。葡萄糖液的配制；过滤；转化工艺：糖液降温至55－65℃，搅拌加入β-葡萄糖苷酶，酶用量为30-60U/g葡萄糖，保温酶解36-48h，中间流加葡萄糖；酶解结束，升温至100℃，保温灭酶5-10min；浓缩、结晶，回收葡萄糖：酶解液60-65℃浓缩至葡萄糖浓度50-70%，0-5℃结晶，过滤；葡萄糖回用，滤液进入下一道工艺；脱色；色谱分离；浓缩、喷雾干燥。优点是以葡萄糖为原料，利用高活性重组β-葡萄糖苷酶转糖苷和缩合得到低聚龙胆糖浆，低聚龙胆糖浓度为40-60g/L；利用色谱技术进行分离纯化产品纯度为70-75%，回收率为40-45%；低聚龙胆糖的转化率及纯度均达到国际领先水平。

Description

低聚龙胆糖酶法生产工艺

技术领域

本发明涉及低聚糖生产领域，具体涉及一种低聚龙胆糖酶法生产工艺。

背景技术

低聚龙胆糖是一类由葡萄糖以β-1，6糖苷键连接形成的新型功能性低聚糖，有优良的双歧杆菌增殖效果，可有效促进肠内益生菌的增殖，不被人体酶解，低热量；适合肥胖症、高血脂、高血压、糖尿病等人群食用；保湿性、吸湿性高，有利于食品中水分的保持，可防止淀粉类食品的老化，延长货架期；pH和热稳定性高，适用于高温和特殊pH条件下保存的食品。在巧克力、冰淇凌、咖啡、调味品、烘烤食品和饮料中有广泛应用。

发明内容

为了解决上述问题，本发明提出了一种低聚龙胆糖酶法生产工艺，工艺完善，采用经过分子改造的高产率和热稳定性β-葡萄糖苷酶对葡萄糖进行转化生产低聚龙胆糖；利用底物流加策略解决高浓度底物对酶反应的抑制，强化低聚龙胆糖的产率；结合结晶技术和色谱分离技术对低聚龙胆糖的分离纯化进行研究，以获得高纯度的低聚龙胆糖产品。

为了达到上述发明目的，本发明提出了以下技术方案：

低聚龙胆糖酶法生产工艺，其特征在于以下步骤，

1）葡萄糖液的配制：在化糖罐中加入软水，升温至60-80℃，加入葡萄糖至50-70%w/v,搅拌，溶解后用10%盐酸调节PH4.5；过滤，打入酶解罐；

2）转化工艺：糖液降温至55－65℃，搅拌加入β-葡萄糖苷酶，酶用量为30-60U/g葡萄糖，保温酶解36-48h，中间流加葡萄糖；酶解结束，升温至100℃，保温灭酶5-10min；

3）浓缩、结晶，回收葡萄糖：酶解液60-65℃浓缩至葡萄糖浓度50-70%，0-5℃结晶，过滤；葡萄糖回用，滤液进入下一道工艺；

4）脱色：滤液升温至65-75℃，加入1-5%活性炭，脱色30-60min；过滤；

5）色谱分离：滤液过阳离子树脂，分离温度50-60℃，以去离子水洗脱；

6）浓缩、喷雾干燥：洗脱液30-40℃浓缩至低聚龙胆糖浓度30-35%，喷雾干燥，得到粉末型低聚龙胆糖。

所述的β-葡萄糖苷酶是高活性重组β-葡萄糖苷酶，酶活2500U/mL。

所述的葡萄糖符合GB/T20880-2007要求。

本发明的优点是工艺完善，以葡萄糖为原料，利用高活性重组β-葡萄糖苷酶转糖苷和缩合得到低聚龙胆糖浆，低聚龙胆糖浓度为40-60g/L；利用色谱技术进行分离纯化产品纯度为70-75%，回收率为40-45%；低聚龙胆糖的转化率及纯度均达到国际领先水平。

附图说明

图1是本发明的工艺流程图。

具体实施方式

一、主要原辅材料：

1、重组β-葡萄糖苷酶：酶活2500U/mL。

2、葡萄糖：符合GB/T20880-2007要求。

二、工艺要点：

１、葡萄糖液的配制：

在化糖罐中加入软水，升温至60-80℃，加入葡萄糖至50-70%（w/v）,搅拌，溶解后用10%盐酸调节PH4.5。过滤，打入酶解罐。

２、转化工艺：

　　糖液降温至55－65℃，搅拌加入β-葡萄糖苷酶，酶用量为30-60U/g葡萄糖，保温酶解36-48h，中间流加葡萄糖；酶解结束，升温至100℃，保温灭酶5-10min。

3、浓缩、结晶，回收葡萄糖：

酶解液60-65℃浓缩至葡萄糖浓度50-70%，0-5℃结晶，过滤。葡萄糖回用，滤液进入下一道工艺。

4、脱色：

滤液升温至65-75℃，加入1-5%活性炭，脱色30-60min；过滤。

5、色谱分离：

滤液过阳离子树脂，分离温度50-60℃，以去离子水洗脱。

6、浓缩、喷雾干燥：

洗脱液30-40℃浓缩至低聚龙胆糖浓度30-35%，喷雾干燥，得到粉末型低聚龙胆糖。

Claims

1.低聚龙胆糖酶法生产工艺，其特征在于以下步骤，

1）葡萄糖液的配制：

在化糖罐中加入软水，升温至60-80℃，加入葡萄糖至50-70%w/v,搅拌，溶解后用10%盐酸调节PH4.5；过滤，打入酶解罐；

2）转化工艺：

糖液降温至55－65℃，搅拌加入β-葡萄糖苷酶，酶用量为30-60U/g葡萄糖，保温酶解36-48h，中间流加葡萄糖；酶解结束，升温至100℃，保温灭酶5-10min；

3）浓缩、结晶，回收葡萄糖：

酶解液60-65℃浓缩至葡萄糖浓度50-70%，0-5℃结晶，过滤；葡萄糖回用，滤液进入下一道工艺；

4）脱色：

滤液升温至65-75℃，加入1-5%活性炭，脱色30-60min；过滤；

5）色谱分离：

滤液过阳离子树脂，分离温度50-60℃，以去离子水洗脱；

6）浓缩、喷雾干燥：

2.根据权利要求1所述的低聚龙胆糖酶法生产工艺，其特征是所述的β-葡萄糖苷酶是高活性重组β-葡萄糖苷酶，酶活2500U/mL。

3.根据权利要求1所述的低聚龙胆糖酶法生产工艺，其特征是所述的葡萄糖符合GB/T20880-2007要求。