CN105218649A - 蛋白质VdAL在提高植物产量和促进植物生长中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了蛋白质VdAL在提高植物产量和促进植物生长中的应用。本发明所提供的应用中，蛋白质VdAL为下述A1)或A2)或A3)：A1)氨基酸序列为序列1的蛋白质；A2)在序列1的氨基酸序列中经过取代和/或缺失和/或添加一个或几个氨基酸残基得到的具有相同功能的由A1)衍生的蛋白质；A3)在A1)或A2)的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白质。实验证明，本发明的蛋白质VdAL及其生物制剂可以促进植物生长提高植物产量。
Description
技术领域
本发明涉及生物技术领域中蛋白质VdAL在提高植物产量和促进植物生长中的应用。
背景技术
目前我国大面积粮食及经济作物的持续高产主要依赖大量使用化肥、防治病虫害主要依赖大量喷施化学农药。中国农业科学院农业经济与发展研究所研究员胡定寰，在谈及农业污染问题时他指出，我们国家现在还是相当严重的，化肥和农药的过量使用，以及养殖业中大量使用的抗生素和重金属添加剂对农业生产都将造成严重的污染。
据辽宁省统计该省目前化肥年使用量在3万吨以上，单位面积化肥施用强度约340千克每公顷，国家生态区建设要求每公顷限值则为每公顷250千克，重氮肥轻磷肥钾肥现象普遍不规范施肥问题也较为突出，辽宁省农药年用量超过1.4万吨且呈逐年上升趋势。残留农药通过大气沉降和雨水冲刷的形式进入环境和农产品中极易造成环境污染事件。辽宁省环保厅农村处处长王军表示近年来随着农村环境污染问题日渐突出环境信访案件呈高发态势。据统计近两年辽宁省74个涉农县区环境信访案件每年平均4310件其中涉农案件近2795件占信访案件的65％左右。
过量施肥会造成农作物吸收营养元素时离子之间增强拮抗作用，若某种养分离子高浓度的存在能够抑制另一种或多种养分离子的活性，从而影响农作物对另一种营养离子的吸收。如在酸性土壤里氮肥的施入量过多，作物吸收钙离子就很困难。如果过量地施用钙肥会诱发农作物的锌、硼、铁、镁、锰等微量元素缺乏。钾肥用量过多也会影响农作物对钙离子、镁离子的吸收；而且过量施肥易引起农作物中毒，因施入大量肥料，增加了土壤溶液的浓度，使农作物根系吸收水分困难，造成地上部萎蔫，植株枯死。此外，过量施肥还影响农产品的品质，农作物生长中、后期，如果大量施入化肥，会使农产品器官含糖量降低，不耐贮藏，从而影响商品价值，降低农作物的经济效益。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是如何促进植物生长和如何提高植物产量。
为解决上述技术问题，本发明首先提供了蛋白质在提高植物产量和/或调控植物生长中的应用。
本发明所提供的蛋白质在提高植物产量和/或调控植物生长中的应用中，所述蛋白质的名称为VdAL，为如下A1)或A2)或A3)：
A1)氨基酸序列为序列1的蛋白质；
A2)在序列1的氨基酸序列中经过取代和/或缺失和/或添加一个或几个氨基酸残基得到的具有相同功能的由A1)衍生的蛋白质；
A3)在A1)或A2)的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白质。
其中，序列1由297个氨基酸组成。
为了使A1)中的蛋白质便于纯化，可在序列表中序列1或序列1的氨基酸所示的蛋白质的氨基末端或羧基末端连接上如表1所示的标签。
表1、标签的序列
| 标签 | 残基 | 序列 |
| Poly-Arg | 5-6(通常为5个) | RRRRR |
| Poly-His | 2-10(通常为6个) | HHHHHH |
| FLAG | 8 | DYKDDDDK |
| Strep-tag II | 8 | WSHPQFEK |
| c-myc | 10 | EQKLISEEDL |
上述A2)中的VdAL可人工合成，也可先合成其编码基因，再进行生物表达得到。上述A2)中的VdAL的编码基因可通过将序列表中序列2所示的DNA序列中缺失一个或几个氨基酸残基的密码子，和/或进行一个或几个碱基对的错义突变，和/或在其5′端和/或3′端连上表1所示的标签的编码序列得到。
上述VdAL在提高植物产量和/或调控植物生长中的应用中，所述调控植物生长可为促进植物生长。
为解决上述技术问题，本发明还提供了与VdAL相关的生物材料在提高植物产量和/或调控植物生长中的应用。
本发明所提供的与VdAL相关的生物材料在提高植物产量和/或调控植物生长中的应用；
所述生物材料，为下述B1)至B20)中的任一种：
B1)编码VdAL的核酸分子；
B2)含有B1)所述核酸分子的表达盒；
B3)含有B1)所述核酸分子的重组载体；
B4)含有B2)所述表达盒的重组载体；
B5)含有B1)所述核酸分子的重组微生物；
B6)含有B2)所述表达盒的重组微生物；
B7)含有B3)所述重组载体的重组微生物；
B8)含有B4)所述重组载体的重组微生物；
B9)含有B1)所述核酸分子的转基因植物细胞系；
B10)含有B2)所述表达盒的转基因植物细胞系；
B11)含有B3)所述重组载体的转基因植物细胞系；
B12)含有B4)所述重组载体的转基因植物细胞系；
B13)含有B1)所述核酸分子的转基因植物组织；
B14)含有B2)所述表达盒的转基因植物组织；
B15)含有B3)所述重组载体的转基因植物组织；
B16)含有B4)所述重组载体的转基因植物组织；
B17)含有B1)所述核酸分子的转基因植物器官；
B18)含有B2)所述表达盒的转基因植物器官；
B19)含有B3)所述重组载体的转基因植物器官；
B20)含有B4)所述重组载体的转基因植物器官。
上述与VdAL相关的生物材料在提高植物产量和/或调控植物生长中的应用中，B1)所述核酸分子可为如下b1)或b2)或b3)的基因：
b1)核苷酸序列是序列表中序列2的cDNA分子或DNA分子；
b2)与b1)限定的核苷酸序列具有75％或75％以上同一性，且编码VdAL的cDNA分子或基因组DNA分子；
b3)在严格条件下与b1)限定的核苷酸序列杂交，且编码VdAL的cDNA分子或基因组DNA分子。
其中，所述核酸分子可以是DNA，如cDNA、基因组DNA或重组DNA；所述核酸分子也可以是RNA，如mRNA或hnRNA等。
其中，序列2由894个核苷酸组成，编码序列1所示的蛋白质。
本领域普通技术人员可以很容易地采用已知的方法，例如定向进化和点突变的方法，对本发明的编码VdAL的核苷酸序列进行突变。那些经过人工修饰的，具有与本发明分离得到的VdAL的核苷酸序列75％或者更高同一性的核苷酸，只要编码VdAL且具有VdAL功能，均是衍生于本发明的核苷酸序列并且等同于本发明的序列。
这里使用的术语“同一性”指与天然核酸序列的序列相似性。“同一性”包括与本发明的编码VdAL所示的氨基酸序列组成的蛋白质的核苷酸序列具有75％或更高，或85％或更高，或90％或更高，或95％或更高同一性的核苷酸序列。同一性可以用肉眼或计算机软件进行评价。使用计算机软件，两个或多个序列之间的同一性可以用百分比(％)表示，其可以用来评价相关序列之间的同一性。
上述与VdAL相关的生物材料在提高植物产量和/或调控植物生长中的应用中，所述严格条件是在2×SSC，0.1％SDS的溶液中，在68℃下杂交并洗膜2次，每次5min，又于0.5×SSC，0.1％SDS的溶液中，在68℃下杂交并洗膜2次，每次15min；或，0.1×SSPE(或0.1×SSC)、0.1％SDS的溶液中，65℃条件下杂交并洗膜。
上述75％或75％以上同一性，可为80％、85％、90％或95％以上的同一性。
上述与VdAL相关的生物材料在提高植物产量和/或调控植物生长中的应用中，B2)所述的含有编码VdAL的核酸分子的表达盒(VdAL基因表达盒)，是指能够在宿主细胞中表达VdAL的DNA，该DNA不但可包括启动VdAL基因转录的启动子，还可包括终止VdAL基因转录的终止子。进一步，所述表达盒还可包括增强子序列。可用于本发明的启动子包括但不限于：组成型启动子，组织、器官和发育特异的启动子，和诱导型启动子。启动子的例子包括但不限于：花椰菜花叶病毒的组成型启动子35S：来自西红柿的创伤诱导型启动子，亮氨酸氨基肽酶("LAP",Chao等人(1999)PlantPhysiol120：979-992)；来自烟草的化学诱导型启动子，发病机理相关1(PR1)(由水杨酸和BTH(苯并噻二唑-7-硫代羟酸S-甲酯)诱导)；西红柿蛋白酶抑制剂II启动子(PIN2)或LAP启动子(均可用茉莉酮酸甲酯诱导)；热休克启动子(美国专利5，187，267)；四环素诱导型启动子(美国专利5，057,422)；种子特异性启动子，如谷子种子特异性启动子pF128(CN101063139B(中国专利200710099169.7))，种子贮存蛋白质特异的启动子(例如，菜豆球蛋白、napin,oleosin和大豆betaconglycin的启动子(Beachy等人(1985)EMBOJ.4：3047-3053))。它们可单独使用或与其它的植物启动子结合使用。此处引用的所有参考文献均全文引用。合适的转录终止子包括但不限于：农杆菌胭脂碱合成酶终止子(NOS终止子)、花椰菜花叶病毒CaMV35S终止子、tml终止子、豌豆rbcSE9终止子和胭脂氨酸和章鱼氨酸合酶终止子(参见，例如：Odell等人(I985)Nature313:810；Rosenberg等人(1987)Gene,56:125；Guerineau等人(1991)Mol.Gen.Genet,262:141；Proudfoot(1991)Cell,64:671；Sanfacon等人GenesDev.,5:141；Mogen等人(1990)PlantCell,2:1261；Munroe等人(1990)Gene,91:151；Ballad等人(1989)NucleicAcidsRes.17:7891；Joshi等人(1987)NucleicAcidRes.,15:9627)。
可用现有的表达载体构建含有所述VdAL基因表达盒的重组载体。所述植物表达载体包括双元农杆菌载体和可用于植物微弹轰击的载体等。如pAHC25、pBin438、pCAMBIA1302、pCAMBIA2301、pCAMBIA1301、pCAMBIA1300、pBI121、pCAMBIA1391-Xa或pCAMBIA1391-Xb(CAMBIA公司)等。所述植物表达载体还可包含外源基因的3′端非翻译区域，即包含聚腺苷酸信号和任何其它参与mRNA加工或基因表达的DNA片段。所述聚腺苷酸信号可引导聚腺苷酸加入到mRNA前体的3′端，如农杆菌冠瘿瘤诱导(Ti)质粒基因(如胭脂碱合成酶基因Nos)、植物基因(如大豆贮存蛋白基因)3′端转录的非翻译区均具有类似功能。使用本发明的基因构建植物表达载体时，还可使用增强子，包括翻译增强子或转录增强子，这些增强子区域可以是ATG起始密码子或邻接区域起始密码子等，但必需与编码序列的阅读框相同，以保证整个序列的正确翻译。所述翻译控制信号和起始密码子的来源是广泛的，可以是天然的，也可以是合成的。翻译起始区域可以来自转录起始区域或结构基因。为了便于对转基因植物细胞或植物进行鉴定及筛选，可对所用植物表达载体进行加工，如加入可在植物中表达的编码可产生颜色变化的酶或发光化合物的基因(GUS基因、萤光素酶基因等)、抗生素的标记基因(如赋予对卡那霉素和相关抗生素抗性的nptII基因，赋予对除草剂膦丝菌素抗性的bar基因，赋予对抗生素潮霉素抗性的hph基因，和赋予对氨甲喋呤抗性的dhfr基因，赋予对草甘磷抗性的EPSPS基因)或是抗化学试剂标记基因等(如抗除莠剂基因)、提供代谢甘露糖能力的甘露糖-6-磷酸异构酶基因。从转基因植物的安全性考虑，可不加任何选择性标记基因，直接以逆境筛选转化植株。
上述与VdAL相关的生物材料在提高植物产量和/或调控植物生长中的应用中，所述载体可为质粒、黏粒、噬菌体或病毒载体。所述质粒可为载体pET42a(+)。
上述与VdAL相关的生物材料在提高植物产量和/或调控植物生长中的应用中，所述微生物可为酵母、细菌、藻或真菌，如大肠杆菌。所述大肠杆菌可为大肠杆菌JM109。
上述与VdAL相关的生物材料在提高植物产量和/或调控植物生长中的应用中，所述转基因植物细胞系、转基因植物组织和转基因植物器官均不包括繁殖材料。
在本发明的一个实施方式中，VdAL的编码基因通过含有VdAL的编码基因的表达盒的重组载体导入大肠杆菌JM109中得到重组微生物。所述重组载体为将载体pET42a(+)的NdeI和KpnI识别位点间的序列替换为序列表中序列2的第1-894位核苷酸所示的DNA分子(即VdAL基因)，得到的重组载体。所述重组载体表达序列1所示的VdAL。所述重组微生物表达序列1所示的VdAL。
上述与VdAL相关的生物材料在提高植物产量和/或调控植物生长中的应用中，所述调控植物生长可为促进植物生长。
为解决上述技术问题，本发明还提供了一种提高植物产量和/或促进植物生长的方法。
本发明所提供的提高植物产量和/或促进植物生长的方法，包括对目的植物施用VdAL、所述生物材料或生物制剂，提高所述目的植物产量和/或促进所述目的植物生长；所述生物制剂的活性成分为VdAL或所述生物材料。
上述方法中，所述生物制剂可按照方法1)制备，所述方法1)为：培养所述重组微生物，使VdAL的编码基因表达，得到所述生物制剂。
上述方法中，所述方法1)具体可为如下11)和12)：
11)培养所述重组微生物，使所述编码基因表达，得到表达所述蛋白质的重组微生物培养物；
12)破碎所述微生物培养物中的菌体，得到所述生物制剂。
上述方法中，所述方法1)还可包括对所述生物制剂进行干燥。
上述方法中，所述编码基因可为B1)所述核酸分子。
在本发明的一个实施方式中，所述重组微生物为将含有VdAL的编码基因的表达盒的重组载体导入大肠杆菌JM109中得到的重组微生物。所述重组载体为将载体pET42a(+)的NdeI和KpnI识别位点间的序列替换为序列2的第1-894位核苷酸所示的DNA分子(即VdAL基因)，得到的重组载体。所述重组载体表达序列1所示的VdAL。所述重组微生物表达序列1所示的VdAL。
上述方法中，所述对目的植物施用VdAL、所述生物材料或生物制剂具体可为对所述目的植物叶片施用VdAL、所述生物材料或所述生物制剂，如对目的植物喷施VdAL、所述生物材料或所述生物制剂，也可用VdAL、所述生物材料或所述生物制剂处理所述目的植物的种子，如用VdAL、所述生物材料或所述生物制剂的液体制剂对所述目的植物的种子进行浸种。VdAL、所述生物材料或所述生物制剂的液体制剂可为直接用清水溶解或悬浮VdAL、所述生物材料或所述生物制剂得到的液体。对目的植物施用VdAL、所述生物材料或生物制剂的量可以根据所述目的植物的种类和/或生长时期确定。
为解决上述技术问题，本发明还提供了所述生物制剂在提高植物产量和/或调控植物生长中的应用。
为解决上述技术问题，本发明还提供了所述生物制剂。在本发明中，所述生物制剂的名称为维达利安。
本发明中，所述植物为双子叶植物或单子叶植物。所述双子叶植物可为锦葵科植物、葫芦科植物、茄科植物、十字花科植物、蔷薇科植物或豆科植物。所述锦葵科植物可为棉花。所述葫芦科植物可为西瓜、黄瓜或甜瓜。所述茄科植物可为番茄、圣女果或茄科。所述十字花科植物可为青梗菜。所述蔷薇科植物可为草莓。所述豆科植物可为大豆。
本发明中，所述产量可为经济产量，即栽培目的所需要的产品收获量。如禾谷类的种子，棉花的籽棉或皮棉，青梗菜的植株，西瓜、番茄、黄瓜、圣女果、草莓、甜瓜、甜椒的果实。所述产量可以重量来体现。
在生产中，所述促进植物的生长最终可表现为作物产量的增加。如棉花、西瓜、小麦、番茄、青梗菜、黄瓜、圣女果、草莓、甜瓜、甜椒或大豆产量的增加。
本发明中，所述促进植物的生长可为促进所述植物的营养生长和/或生殖生长，如促进所述植物果实的生长。所述营养生长具体可体现在促进种子发芽、促进植株生长、促进果实生长、提高座果数目和/或延缓植株衰老。在本发明的实施例中，所述促进植物的营养生长具体体现在以下几个方面：提高棉花发芽率、单株成铃数、亩总铃数和单铃重；提高西瓜单株结果数；提高小麦发芽率，促进小麦植株生长；提高番茄单株结果数；促进青梗菜植株生长；提高黄瓜座果数目，促进黄瓜果实膨大，促进黄瓜植株生长，延缓黄瓜植株衰老；提高圣女果座果数目；促进草莓植株生长；促进甜瓜植株生长；促进甜椒植株生长；促进大豆的出苗和植株的生长。所述促进植物的生殖生长具体体现为提高棉花、西瓜、番茄、黄瓜和圣女果的座果数目。
本发明中，VdAL或所述生物制剂对不同植物的作用可因VdAL或所述生物制剂浓度的不同而出现不同的结果。在施用VdAL或所述生物制剂时，VdAL或所述生物制剂的浓度可以根据作物或其品种以及施用VdAL或所述生物制剂的目的(如促进种子发芽或提高生物产量等)调节VdAL或所述生物制剂的浓度。
在本发明的实施例中，所述生物制剂稀释7500倍得到的液体可以促进棉花的发芽；所述生物制剂稀释3000-5000倍得到的液体可以提高棉花的霜前花产量和总产量以及每亩植株数、单株成铃数、亩总铃数、衣分和亩产量。所述生物制剂稀释2000倍得到的液体可以促进西瓜结果，提高西瓜产量。所述生物制剂稀释5000-10000倍得到的液体可以促进小麦种子的发芽；所述生物制剂稀释5000-20000倍得到的液体可以提高小麦产量。所述生物制剂稀释1000倍得到的液体可以促进番茄结果，提高番茄产量。所述生物制剂稀释2000-4000倍得到的液体可以提高青梗菜的产量。所述生物制剂稀释300-2000倍得到的液体可以提高黄瓜的座果率、促进黄瓜的膨大，提高黄瓜产量，促进黄瓜植株的顶端生长，延缓黄瓜植株的衰老。所述生物制剂稀释2000倍得到的液体可以提高圣女果的座果率。所述生物制剂稀释2000倍得到的液体可以促进草莓、甜瓜植株的生长。所述生物制剂稀释1000倍得到的液体可以促进甜椒植株的生长。所述生物制剂稀释3000-5000倍得到的液体可以促进大豆的出苗与生长。
实验证明，本发明中以VdAL为活性成分的维达利安生物制剂(VdAL)可以促进多种植物种子发芽、植株生长、果实生长、提高座果数目，并可延缓植株衰老：
1、稀释7500倍的VdAL处理棉花种子后棉花的平均发芽率为清水处理棉花种子后棉花的平均发芽率的1.08倍。用稀释3000倍的VdAL处理鲁30号，霜前花产量提高19.48％，总产量提高17.04％；用稀释5000倍的VdAL进行处理时，鲁30号霜前花产量提高21.25％，总产量提高20.00％，616霜前花产量提高19.06％，总产量提高19.69％，鲁25号霜前花产量提高16.37％，总产量提高17.60％。用稀释3000倍的VdAL处理时，单株成铃数、亩总铃数、衣分和亩产量增加率分别为4.5％、1.98％、0.24％和1.76％；用稀释5000倍的VdAL处理时，单株成铃数、亩总铃数、单铃重、衣分和亩产量增加率分别为3.41％、4.41％、1.9％、0.49％和5.22％。
2、稀释2000倍的VdLA处理西瓜后单株结果数提高18.2％，产量提高33.4％。
3、稀释1000倍的VdLA、稀释2000倍的VdAL、稀释5000倍的VdLA、稀释10000倍的VdAL处理小麦种子后，发芽速率约分别加快了2倍、9倍、12倍和11倍。稀释5000倍的VdAL、稀释10000倍的VdAL处理的小麦种子的发芽率分别提高了2.48％和4.40％。稀释5000倍的VdAL和稀释10000倍的VdAL浸种后，小麦单株鲜重分别提高了15.32％和27.03％。稀释5000倍的VdAL、稀释10000倍的VdAL、稀释20000倍的VdAL处理小麦后，产量分别提高了1.94％、8.13％、5.23％。稀释5000倍的VdAL处理小麦后，有效穗数增加了1.5％，穗粒数增加了0.5％；稀释10000倍的VdAL，有效穗数增加了7％，穗粒数增加了3.5％；稀释20000倍的VdAL，有效穗数增加了2.3％，穗粒数增加了3.7％。
4、稀释1000倍的VdAL和稀释3000倍的VdAL处理番茄后，番茄的单株结果数分别提高了4.8％和21.3％。
5、稀释2000倍的VdAL、稀释2500倍的VdAL、稀释3000倍的VdAL和稀释4000倍的VdAL处理青梗菜后，50株青梗菜鲜重分别提高了54.8％、71.0％、100.6％和103.7％。
6、VdAL还可以提高黄瓜的座果率、促进黄瓜的膨大，提高黄瓜产量，促进黄瓜植株的生长，延缓黄瓜植株的衰老；VdAL还可以提高圣女果的座果率；促进草莓、甜瓜、甜椒植株的生长；促进大豆的出苗与生长，稀释5000倍的VdAL浸种后，大豆单株鲜重提高了16.91％，大豆地上部分单株鲜重提高了28.30％。
实验证明，本发明的蛋白质VdAL及其生物制剂可以促进植物生长提高植物产量。
附图说明
图1为维达利安外观及维达利安中VdAL的western-blot检测结果。其中，A为维达利安外观；B为维达利安中VdAL的western-blot检测结果，风机表示在样品干燥过程中进入出风口部位的较细粉末，主塔表示在样品干燥过程中的正常粉末。
图2为维达利安可以促进西瓜的营养生长。其中，CK表示未处理的西瓜，VdAL表示维达利安处理的西瓜。
图3为维达利安可以促进黄瓜座果与膨大。其中，CK表示未处理的黄瓜，300表示稀释300倍的VdAL处理的黄瓜，600表示稀释600倍的VdAL处理的黄瓜，900表示稀释900倍的VdAL处理的黄瓜。
图4为不同处理的黄瓜的长势。其中，CK表示未处理的黄瓜，300表示稀释300倍的VdAL处理的黄瓜。
图5为不同处理的黄瓜的衰老情况。其中，CK表示未处理的黄瓜，2000×表示稀释2000倍的VdAL处理的黄瓜。
图6为不同处理的圣女果的座果情况。其中，CK表示未处理的圣女果，2000×表示稀释2000倍的VdAL处理的圣女果。
图7为不同处理的草莓。其中，CK表示未处理的草莓，2000×表示稀释2000倍的VdAL处理的草莓。
图8为不同处理的甜瓜。其中，CK表示未处理的甜瓜，2000×表示稀释2000倍的VdAL处理的甜瓜。
图9为不同处理的甜椒。其中，CK表示未处理的甜椒，1000×表示稀释1000倍的VdAL处理的甜椒。
图10为不同处理的大豆种子的发芽情况。其中，CK表示未处理的大豆种子，1000表示稀释1000倍的VdAL处理的大豆种子，3000表示稀释3000倍的VdAL处理的大豆种子，5000表示稀释5000倍的VdAL处理的大豆种子，10000表示稀释10000倍的VdAL处理的大豆种子，20000表示稀释20000倍的VdAL处理的大豆种子。
图11为不同处理的大豆幼苗生长状况。其中，CK表示未处理的大豆幼苗，5000×表示稀释5000倍的VdAL处理的大豆幼苗。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明进行进一步的详细描述，给出的实施例仅为了阐明本发明，而不是为了限制本发明的范围。
下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。
下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
下述实施例中的大肠杆菌JM109为北京索莱宝科技有限公司产品，产品目录号为C1300。
下述实施例中的载体pET42a(+)为北京碧橙蓝生物科技有限公司产品，产品目录号为S18-16。
下述实施例中的新陆早58号为新疆锦棉种业科技股份有限公司产品，鲁30号、616、鲁25号和鲁研棉24号为山东农兴种业有限责任公司产品。
下述实施例中的西瓜品种金丽都为寿光积善商贸有限公司产品。
下述实施例中的中麦816为北京龙盛源科技发展有限公司产品。
下述实施例中的番茄品种富克斯为寿光市金鹏种业有限公司产品。
下述实施例中的华丽青梗菜F1为上海虹桥天龙种业有限公司产品。
下述实施例中的黄瓜品种津杂1号为山东农兴种业有限公司产品。
下述实施例中的圣女果品种京丹2号为北京北农绿亨科技发展有限公司产品。
下述实施例中的草莓品种丰香为北京北农绿亨科技发展有限公司产品。
下述实施例中的超级翠宝香甜瓜品种为济南睿袤农业科技开发有限公司产品。
下述实施例中的甜椒品种睿优816为济南睿袤农业科技开发有限公司产品。
下述实施例中的大豆品种中华大豆王为济南睿袤农业科技开发有限公司产品。
实施例1、维达利安的制备
维达利安由中国农业大学研制，由山东惠民湖浩生物科技有限公司开发生产。
1、重组载体及重组菌的构建
人工合成序列表中序列2的第1-894位核苷酸所示的DNA分子，即VdAL基因。将载体pET42a(+)的NdeI和KpnI识别位点间的序列替换为序列表中序列2的第1-894位核苷酸所示的DNA分子(即VdAL基因)，保持pET42a(+)的其他序列不变，得到重组载体，将得到的重组载体命名为pET42a-VdAL。重组载体pET42a-VdAL表达序列表中序列1所示的蛋白质VdAL。
其中，序列2由894个核苷酸组成，编码序列1所示的氨基酸序列。
将pET42a-VdAL导入根癌农杆菌大肠杆菌JM109中，得到重组菌，将得到的重组菌命名为JM109-pET42a-VdAL，JM109-pET42a-VdAL表达序列1所示的蛋白质。
2、维达利安的制备
将JM109-pET42a-VdAL在37℃条件下进行发酵至OD值为0.6得到预发酵液，向预发酵液中加入IPTG，使IPTG的浓度为1mM，得到诱导液，将诱导液在25℃条件下发酵6小时得到发酵液。将发酵液进行离心，弃上清液，将得到的菌体沉淀破碎，然后在150℃进行喷雾干燥得到干粉制剂(图1中A)，将其命名为维达利安。
利用western-blot的方法对维达利安中的VdAL进行检测，一抗为VdAL抗体(VdAL抗体为序列2所示的蛋白质为免疫原制备得到的多克隆抗体)，结果表明，维达利安中含有VdAL(图1中B)，维达利安中VdAL的含量为7.28mg/g。
用清水将维达利安溶解，分别得到维达利安浓度分别为10g/3kg、10g/6kg、10g/9kg、1g/kg、1g/2kg、1g/2.5kg、1g/3kg、1g/4kg、1g/5kg、1g/7.5kg、1g/10kg和1g/20kg的液体，将这些液体分别命名为稀释300倍的VdAL、稀释600倍的VdAL、稀释900倍的VdAL、稀释1000倍的VdAL、稀释2000倍的VdAL、稀释2500倍的VdAL、稀释3000倍的VdAL、稀释4000倍的VdAL、稀释5000倍的VdAL、稀释7500倍的VdAL、稀释10000倍的VdAL和稀释20000倍的VdAL。
实施例2、维达利安可以促进棉花的生长
1、维达利安可以促进棉花种子的发芽
分别用实施例1的稀释5000倍的VdAL、稀释7500倍的VdAL和稀释10000倍的VdAL和清水浸泡新陆早58号种子24小时，在大花盆中进行发芽试验，温度为25℃，在播种第8天，统计棉花种子发芽率。每种处理100粒种子，实验重复三次。
结果显示，稀释5000倍的VdAL、稀释7500倍的VdAL和稀释10000倍的VdAL和清水处理棉花种子后棉花的平均发芽率分别为74.00％、75.50％、71.00％和70.23％，稀释5000倍的VdAL、稀释7500倍的VdAL和稀释10000倍的VdAL处理棉花种子后棉花的平均发芽率分别为清水处理棉花种子后棉花的平均发芽率的1.05倍、1.08倍、1.01倍，表明，维达利安可以提高棉花种子的发芽率，维达利安提高棉花种子发芽率的能力随维达利安浓度的变化而变化。
2、维达利安可以提高棉花的产量
实验一：
田间试验设计如下：实验采用随机区组设计，设置3个重复区，每个重复区随机设置九个处理区，分别为鲁30号VdAL处理1区、鲁30号VdAL处理2区、鲁30号对照处理区、616VdAL处理1区、616VdAL处理2区、616对照处理区、鲁25号VdAL处理1区、鲁25号VdAL处理2区、和鲁25号对照处理区，每个处理区的面积均为0.2亩。
在鲁30号VdAL处理1区的鲁30号的苗期和花铃前期分别按照下述方式进行处理：采用顶喷(机械喷施)的方式对棉花叶片喷施实施例1的稀释3000倍的VdAL，每亩喷施45-50kg，得到稀释3000倍的VdAL处理的鲁30号。苗期和花铃前期各喷施1次；喷施时间在早晨或傍晚，最好避开正午高温时段；喷施时严禁与药物及肥料混合；喷施后若2小时内下雨需要补喷施一次。
按照鲁30号VdAL处理1区的处理方法，将稀释3000倍的VdAL替换为稀释5000倍的VdAL对鲁30号VdAL处理2区进行处理，其他步骤均不变，得到稀释5000倍的VdAL处理的鲁30号。
按照鲁30号VdAL处理1区的处理方法，将稀释3000倍的VdAL替换为清水对鲁30号对照处理区进行处理，其他步骤均不变，得到未处理的鲁30号。
按照鲁30号VdAL处理1区的处理方法，分别对616VdAL处理1区和鲁25号VdAL处理1区进行处理，其他步骤均不变，分别得到稀释3000倍的VdAL处理的616、鲁25号。
按照鲁30号VdAL处理1区的处理方法，将稀释3000倍的VdAL替换为稀释5000倍的VdAL，分别对616VdAL处理2区和鲁25号VdAL处理2区进行处理，其他步骤均不变，分别得到稀释5000倍的VdAL处理的616、鲁25号。
按照鲁30号VdAL处理1区的处理方法，将稀释3000倍的VdAL替换为清水，分别对616对照处理区和鲁25号对照处理区进行处理，其他步骤均不变，分别得到未处理的616、鲁25号。
分别统计稀释3000倍的VdAL处理的鲁30号、稀释5000倍的VdAL处理的鲁30号、未处理的鲁30号、稀释3000倍的VdAL处理的616、稀释5000倍的VdAL处理的616、未处理的616、稀释3000倍的VdAL处理的鲁25号、稀释5000倍的VdAL处理的鲁25号和未处理的鲁25号的霜前花产量以、霜后花产量以及总产量，结果如表1所示。
表1、不同处理的棉花的平均产量
注：处理1表示稀释3000倍的VdAL进行的处理，处理2表示稀释5000倍的VdAL进行的处理，CK表示未处理(即用清水进行的处理)。
结果显示，适当浓度的维达利安可以提高棉花的产量：用稀释3000倍的VdAL处理鲁30号，霜前花产量提高19.48％，总产量提高17.04％；用稀释5000倍的VdAL进行处理时，鲁30号霜前花产量提高21.25％，总产量提高20.00％，616霜前花产量提高19.06％，总产量提高19.69％，鲁25号霜前花产量提高16.37％，总产量提高17.60％。
实验二：
田间试验设计如下：实验采用随机区组设计，设置3个重复区，每个重复区随机设置四个处理区，分别为VdAL处理1区、VdAL处理2区、VdAL处理3区和对照处理区，每个处理区的面积均为10亩。
在VdAL处理1区的鲁研棉24号的苗期和花铃前期分别按照下述方式进行处理：采用顶喷(机械喷施)的方式对棉花叶片喷施实施例1的稀释3000倍的VdAL，每亩喷施45-50kg，机车作业速度控制在时速6公里左右，得到稀释3000倍的VdAL处理的鲁研棉24号。苗期和花铃前期各喷施1次；喷施时间在早晨或傍晚，最好避开正午高温时段；喷施时严禁与药物及肥料混合；喷施后若2小时内下雨需要补喷施一次。
按照VdAL处理1区的处理方法，将稀释3000倍的VdAL替换为稀释5000倍的VdAL对VdAL处理2区进行处理，其他步骤均不变，得到稀释5000倍的VdAL处理的鲁研棉24号。
按照VdAL处理1区的处理方法，将稀释3000倍的VdAL替换为稀释10000倍的VdAL对VdAL处理3区进行处理，其他步骤均不变，得到稀释10000倍的VdAL处理的鲁研棉24号。
按照VdAL处理1区的处理方法，将稀释3000倍的VdAL替换为清水对对照处理区进行处理，其他步骤均不变，得到未处理的鲁研棉24号。
统计各处理的鲁研棉24号的每亩植株数、单株成铃数、亩总铃数、单铃重、衣分和亩产量，各项目的平均值以及与对照相比的增量如表2和表3所示。
表2、各处理的鲁研棉24号各项目的平均值和增量
注：处理1表示稀释3000倍的VdAL进行的处理，处理2表示稀释5000倍的VdAL进行的处理，处理3表示稀释10000倍的VdAL进行的处理，CK表示未处理(即用清水进行的处理)。
表3、各处理的鲁研棉24号各项目的平均值和增量
注：处理1表示稀释3000倍的VdAL进行的处理，处理2表示稀释5000倍的VdAL进行的处理，处理3表示稀释10000倍的VdAL进行的处理，CK表示未处理(即用清水进行的处理)。
结果显示，适当浓度的维达利安可以提高棉花的每亩植株数、单株成铃数、亩总铃数、单铃重、衣分和亩产量：用稀释3000倍的VdAL处理时，单株成铃数、亩总铃数、衣分和亩产量均有增加，增加率分别为4.5％、1.98％、0.24％和1.76％；用稀释5000倍的VdAL处理时，每亩植株数、单株成铃数、亩总铃数、单铃重、衣分和亩产量均有增加，增加率分别为1.4％、3.41％、4.41％、1.9％、0.49％和5.22％；用稀释10000倍的VdAL处理时，各项目的增加量没有用稀释3000倍的VdAL处理和稀释5000倍的VdAL处理时各项目的增加量高。表明，施用适当浓度的维达利安可以提高棉花的品质和产量。
实施例3、维达利安可以提高西瓜的品质和产量
田间试验设计如下：实验采用随机区组设计，设置3个重复区，每个重复区随机设置2个处理区，分别为VdLA处理区和对照处理区，每个处理区的面积均为0.2亩。
在VdLA处理区的西瓜品种金丽都按照下述方式进行处理：采用顶喷(机械喷施)的方式对西瓜叶片喷施实施例1的稀释2000倍的VdLA，每亩喷施30kg，得到稀释2000倍的VdAL处理的西瓜。喷施从西瓜的幼苗期，并于第一次喷施15天后再喷施1次，共喷2次；喷施时间在早晨或傍晚，最好避开正午高温时段；喷施时最好不与药物及肥料混合；喷施后若2小时内下雨需要补喷施一次。
按照VdAL处理区的处理方法，将稀释2000倍的VdAL替换为清水对对照处理区进行处理，其他步骤均不变，得到未处理的西瓜。
结果发现，维达利安对西瓜的营养生长和座果具有促进作用(图2)。统计不同处理区的西瓜产量，结果发现，稀释2000倍的VdAL处理西瓜后单株结果数为1.43±0.5个，产量为5200.2±500kg/亩，而未处理的西瓜的单株结果数为1.21±0.5个，产量为3898.2±500kg/亩。与未处理的西瓜相比，维达利安处理的西瓜的单株结果数提高了18.2％，产量提高了33.4％。
在西瓜成熟期分别测定不同处理西瓜的含水量、干物率、Vc含量、可溶性糖含量、可滴定酸含量、可溶性固形物含量、瓜皮厚度、蛋白质含量、粗纤维含量(表4)以及微量元素Ca、Cu、Fe、K、Mg、Mn、Na、P和Zn的含量(表5)。其中，含水量与干物率(西瓜中干物质占西瓜鲜重的百分比)均将西瓜干燥后进行测定，Vc含量按照2,6-二氯靛酚滴定法进行测定，可溶性糖含量按照蒽酮比色法进行测定，可滴定酸含量按照比色法进行测定，可溶性固形物含量、蛋白质含量按照分光光度计量方法进行测定，粗纤维含量按照温德法检测粗纤维方法进行测定，微量元素Ca、Cu、Fe、K、Mg、Mn、Na、P和Zn的含量均利用微量元素分析仪进行测定。
表4、不同处理西瓜各指标的平均含量
| 指标 | 未处理 | VdLA处理 |
| 含水量(％) | 90.22 | 91.43 |
| 干物率(％) | 9.78 | 8.57 |
| Vc(mg/100g) | 12.1 | 18.2 |
| 可溶性糖(％) | 6.83 | 7.44 |
| 可滴定酸(％) | 0.09 | 0.09 |
| 可溶性固形物(％) | 9.1 | 9.1 |
| 瓜皮厚(cm) | 0.97 | 1.23 |
| 蛋白质(％DW) | 5.54 | 6.33 |
| 蛋白质(％FW) | 0.54 | 0.54 |
| 粗纤维(％DW) | 2.06 | 2.02 |
| 粗纤维(％FW) | 0.2 | 0.17 |
表5、不同处理西瓜各微量元素的平均含量
注：3、5、7、9、11、13、15、17和19行中各微量元素的含量均指每升新鲜西瓜中各微量元素的质量，2、4、6、8、10、12、14、16和18行中各微量元素的含量均指新鲜西瓜中各微量元素的含量。
结果显示，维达利安处理后，西瓜的含水量略有增加，增加了1.34％；Vc含量显著提高，提高了50.41％；可溶性糖含量提高了8.88％，干物质中蛋白质含量提高了14.2％，新鲜西瓜中蛋白质含量提高了0.62％，可滴定酸和可溶性固形物的含量均没有变化，而干物率下降12.4％，粗纤维的含量有少量下降。表明，维达利安处理后，西瓜中的主要营养成分含量增加；而酸度没有明显增加，干物率和粗纤维的含量均有下降，提高西瓜的适口性。维达利安处理后，每升新鲜西瓜的Ca、Cu、Fe、K、Mg、Mn、Na、P和Zn的质量均有增加，增加量分别为12.75％、16.54％、19.21％、16.46％、1.05％、20.45％、2.13％、10.02％、19.73％；新鲜西瓜中Cu、Fe、K、Mn和Zn的质量含量均有增加，增加量分别为2.09％、19.09％、1.88％、5.72％和5.07％。表明，维达利安可以显著提高西瓜中对人体有益微量元素Cu、Fe、K、Mn和Zn的含量。以上实验证明，维达利安可以提高西瓜的品质。
实施例4、维达利安可以促进小麦的生长、提高小麦的产量
1、维达利安可以促进小麦的发芽与营养生长
实验一：
将中麦816种子分别在实施例1的稀释1000倍的VdAL、稀释2000倍的VdAL、稀释5000倍的VdAL、稀释10000倍的VdAL和清水中浸种12小时，然后在发芽盒(发芽盒中铺有两层用无菌水浸湿的无菌滤纸)中于25℃下催芽96小时，统计小麦种子发芽率(小麦种子发芽标准为：种子芽长为或超过种子长度的一半，并且根长为或超过种子长度)。每种处理100粒种子，实验重复三次。
结果显示，对照与稀释1000倍的VdAL、稀释2000倍的VdAL、稀释5000倍的VdAL、稀释10000倍的VdAL和清水处理的小麦种子的发芽率分别为95.31±1％、83.26±1％、92.51±1％、97.67±1％和99.50±1％，稀释1000倍的VdAL、稀释2000倍的VdAL、稀释5000倍的VdAL、稀释10000倍的VdAL处理小麦种子后，发芽率分别提高了-12.64％、-0.00％、2.48％和4.40％。表明，适宜浓度的维达利安可以促进小麦种子的发芽。
实验二：
将中麦816种子分别在实施例1的稀释5000倍的VdAL、稀释10000倍的VdAL和清水中浸种24小时，然后播种于土壤中，将播种当天记为播种第1天，在播种第3天将小麦幼苗从土壤中取出，称量小麦幼苗鲜重。
结果显示，用稀释5000倍的VdAL、稀释10000倍的VdAL和清水处理的小麦的单株鲜重分别为0.128±0.022g、0.141±0.022g和0.111±0.022g，稀释5000倍的VdAL和稀释10000倍的VdAL浸种后，小麦单株鲜重分别提高了15.32％和27.03％，稀释10000倍的VdAL浸种后的单株鲜重显著高于清水浸种后的小麦单株鲜重。表明，维达利安可以促进小麦的营养生长。
2、维达利安可以提高小麦的产量
田间试验设计如下：实验采用随机区组设计，设置3个重复区，每个重复区随机设置五个处理区，分别为VdAL处理1区、VdAL处理2区、VdAL处理3区、VdAL处理4区和对照处理区，每个处理区的面积均为0.5亩。
在VdAL处理1区的中麦816的扬花期按照下述方式进行对小麦处理1次：采用顶喷(人工喷施)的方式对小麦叶片喷施实施例1的稀释2500倍的VdAL，每亩喷施45-50kg，得到稀释2500倍的VdAL处理的小麦。喷施时间在早晨或傍晚，最好避开正午高温时段；喷施时严禁与药物及肥料混合；喷施后若2小时内下雨需要补喷施一次。
按照VdAL处理1区的处理方法，将稀释2500倍的VdAL替换为稀释5000倍的VdAL对VdAL处理2区进行处理，其他步骤均不变，得到稀释5000倍的VdAL处理的小麦。
按照VdAL处理1区的处理方法，将稀释2500倍的VdAL替换为稀释10000倍的VdAL对VdAL处理3区进行处理，其他步骤均不变，得到稀释10000倍的VdAL处理的小麦。
按照VdAL处理1区的处理方法，将稀释2500倍的VdAL替换为稀释20000倍的VdAL对VdAL处理4区进行处理，其他步骤均不变，得到稀释20000倍的VdAL处理的小麦。
按照VdAL处理1区的处理方法，将稀释2500倍的VdAL替换为清水对对照处理区进行处理，其他步骤均不变，得到未处理的小麦。
统计各处理的小麦产量，结果显示，稀释2500倍的VdAL处理小麦后小麦的产量没有提高，产量为8679kg/ha，稀释5000倍的VdAL、稀释10000倍的VdAL、稀释20000倍的VdAL和清水处理的小麦的平均产量分别为8942kg/ha、9485kg/ha、
9231kg/ha和8772kg/ha，稀释5000倍的VdAL、稀释10000倍的VdAL、稀释20000倍的VdAL处理小麦后，产量分别提高了1.94％、8.13％、5.23％。
统计不同处理的小麦的千粒重、有效穗数、穗粒数和穗长，结果如表6所示。结果显示，稀释5000倍的VdAL处理小麦后，有效穗数增加了1.5％，穗粒数增加了0.5％；稀释10000倍的VdAL，有效穗数增加了7％，穗粒数增加了3.5％；稀释20000倍的VdAL，有效穗数增加了2.3％，穗粒数增加了3.7％。
表6、不同处理的小麦的千粒重、有效穗数、穗粒数和穗长的平均值
注：处理1表示稀释20000倍的VdAL进行的处理，处理2表示稀释10000倍的VdAL进行的处理，处理3表示稀释5000倍的VdAL进行的处理，处理4表示稀释2500倍的VdAL进行的处理，CK表示未处理(即用清水进行的处理)。
实施例5、维达利安可以增加番茄单株结果数
田间试验设计如下：实验采用随机区组设计，设置3个重复区，每个重复区随机设置三个处理区，分别为VdAL处理1区、VdAL处理2区和对照处理区，每个处理区的面积均为0.1亩。
在VdAL处理1区的番茄品种富克斯的开花初期和第一次处理后第15天分别按照下述方式喷施VdAL：采用顶喷(人工喷施)的方式对番茄叶片喷施实施例1的稀释1000倍的VdAL，每亩喷施45-50kg得到稀释1000倍的VdAL处理的番茄，将第1次喷施当天记为喷施后第0天。喷施时间在早晨或傍晚，最好避开正午高温时段；喷施时严禁与药物及肥料混合；喷施后若2小时内下雨需要补喷施一次。
按照VdAL处理1区的处理方法，将稀释1000倍的VdAL替换为稀释3000倍的VdAL对VdAL处理2区进行处理，其他步骤均不变，得到稀释3000倍的VdAL处理的番茄。
按照VdAL处理1区的处理方法，将稀释1000倍的VdAL替换为清水对对照处理区进行处理，其他步骤均不变，得到未处理的番茄。
在喷施后第20天统计番茄的单株结果数，结果显示，稀释1000倍的VdAL、稀释3000倍的VdAL和清水处理番茄后番茄的平均单株结果数分别为34.9个/株、40.4个/株和33.3个/株，稀释1000倍的VdAL和稀释3000倍的VdAL处理番茄后，番茄的单株结果数分别提高了4.8％和21.3％。表明，维达利安可以促进番茄结果。
实施例6、维达利安可以促进青梗菜的生长
田间试验设计如下：实验采用随机区组设计，设置3个重复区，每个重复区随机设置五个处理区，分别为VdAL处理1区、VdAL处理2区、VdAL处理3区、VdAL处理4区和对照处理区，每个处理区的面积均为0.2亩。
在VdAL处理1区的华丽杂交青梗菜的两叶一心期按照下述方式VdAL喷施1次：采用顶喷(人工喷施)的方式对番茄叶片喷施实施例1的稀释2000倍的VdAL，每亩喷施45-50kg得到稀释2000倍的VdAL处理的青梗菜，将维达利安喷施当天记为处理第0天。喷施时间在早晨或傍晚，最好避开正午高温时段；喷施时严禁与药物及肥料混合；喷施后若2小时内下雨需要补喷施一次。
按照VdAL处理1区的处理方法，将稀释2000倍的VdAL替换为稀释2500倍的VdAL对VdAL处理2区进行处理，其他步骤均不变，得到稀释2500倍的VdAL处理的青梗菜。
按照VdAL处理1区的处理方法，将稀释2000倍的VdAL替换为稀释3000倍的VdAL对VdAL处理3区进行处理，其他步骤均不变，得到稀释3000倍的VdAL处理的青梗菜。
按照VdAL处理1区的处理方法，将稀释2000倍的VdAL替换为稀释4000倍的VdAL对VdAL处理4区进行处理，其他步骤均不变，得到稀释4000倍的VdAL处理的青梗菜。
按照VdAL处理1区的处理方法，将稀释2000倍的VdAL替换为清水对对照处理区进行处理，其他步骤均不变，得到未处理的青梗菜。
在处理第20天，分别统计不同处理的50株青梗菜的鲜重，结果显示，稀释2000倍的VdAL、稀释2500倍的VdAL、稀释3000倍的VdAL、稀释4000倍的VdAL和清水处理后平均50株青梗菜鲜重分别为2.960kg、3.270kg、3.835kg、3.895kg和1.912kg，稀释2000倍的VdAL、稀释2500倍的VdAL、稀释3000倍的VdAL和稀释4000倍的VdAL处理青梗菜后，50株青梗菜鲜重分别提高了54.8％、71.0％、100.6％和103.7％。表明，维达利安可以促进青梗菜的生长。
实施例7、维达利安在其他作物中的作用
1、维达利安可以促进黄瓜生长、提高产量、延缓衰老
田间试验设计如下：实验采用随机区组设计，设置3个重复区，每个重复区随机设置五个处理区，分别为VdAL处理1区、VdAL处理2区、VdAL处理3区、VdAL处理4区和对照处理区，每个处理区的面积均为0.1亩。
在VdAL处理1区的黄瓜品种津杂1号的开花初期和第一次处理后第15天分别按照下述方式喷施VdAL：采用顶喷(人工喷施)的方式对黄瓜叶片喷施实施例1的稀释300倍的VdAL，每亩喷施45-50kg，得到稀释300倍的VdAL处理的黄瓜，将第1次喷施维达利安喷施当天记为喷施第0天。喷施时间在早晨或傍晚，最好避开正午高温时段；喷施时严禁与药物及肥料混合；喷施后若2小时内下雨需要补喷施一次。
按照VdAL处理1区的处理方法，将稀释300倍的VdAL替换为稀释600倍的VdAL对VdAL处理2区进行处理，其他步骤均不变，得到稀释600倍的VdAL处理的黄瓜。
按照VdAL处理1区的处理方法，将稀释300倍的VdAL替换为稀释900倍的VdAL对VdAL处理3区进行处理，其他步骤均不变，得到稀释900倍的VdAL处理的黄瓜。
按照VdAL处理1区的处理方法，将稀释300倍的VdAL替换为稀释2000倍的VdAL对VdAL处理4区进行处理，其他步骤均不变，得到稀释2000倍的VdAL处理的黄瓜。
按照VdAL处理1区的处理方法，将稀释300倍的VdAL替换为清水对对照处理区进行处理，其他步骤均不变，得到未处理的黄瓜。
在喷施第20天，统计黄瓜的结果情况，结果发现，维达利安可以提高黄瓜的座果率、促进黄瓜的膨大，提高黄瓜产量(图3)，表明，维达利安可以促进黄瓜的营养生长和生殖生长。在喷施第20天，观察黄瓜的长势，结果发现，维达利安处理的黄瓜的长势好于未处理的黄瓜的长势(图4)，表明，维达利安可以促进黄瓜的营养生长。在喷施第45天，观察黄瓜的衰老情况，结果发现，未处理的黄瓜的衰老情况比维达利安处理的黄瓜的衰老情况严重(图5)，表明，维达利安可以延缓黄瓜的衰老。
2、维达利安可以提高圣女果的座果率、提高产量
田间试验设计如下：实验采用随机区组设计，设置3个重复区，每个重复区随机设置两个处理区，分别为VdAL处理区和对照处理区，每个处理区的面积均为1亩。
在VdAL处理区的圣女果品种京丹2号的开花期按照下述方式VdAL喷施1次：采用顶喷(人工喷施)的方式对圣女果叶片喷施实施例1的稀释2000倍的VdAL，每亩喷施45-50kg，得到稀释2000倍的VdAL处理的圣女果，将维达利安喷施当天记为处理第0天。喷施时间在早晨或傍晚，最好避开正午高温时段；喷施时严禁与药物及肥料混合；喷施后若2小时内下雨需要补喷施一次。
按照VdAL处理区的处理方法，将稀释2000倍的VdAL替换为清水对对照处理区进行处理，其他步骤均不变，得到未处理的圣女果。
在处理第7-10天，观察圣女果的结果情况，结果发现，维达利安可以提高圣女果的座果率，提高圣女果产量(图6)，表明，维达利安可以促进圣女果的生长。
3、维达利安可以促进草莓的生长
田间试验设计如下：实验采用随机区组设计，设置3个重复区，每个重复区随机设置两个处理区，分别为VdAL处理区和对照处理区，每个处理区的面积均为1亩。
在VdAL处理区的草莓品种为丰香的开花期期按照下述方式VdAL喷施1次：采用顶喷(人工喷施)的方式对草莓叶片喷施实施例1的稀释2000倍的VdAL，每亩喷施45-50kg，得到稀释2000倍的VdAL处理的草莓，将维达利安喷施当天记为处理第0天。喷施时间在早晨或傍晚，最好避开正午高温时段；喷施时严禁与药物及肥料混合；喷施后若2小时内下雨需要补喷施一次。
按照VdAL处理区的处理方法，将稀释2000倍的VdAL替换为清水对对照处理区进行处理，其他步骤均不变，得到未处理的草莓。
在处理第7-10天，观察草莓的生长情况，结果发现，维达利安可以促进草莓的营养生长(图7)。
4、维达利安可以促进甜瓜的生长
田间试验设计如下：实验采用随机区组设计，设置3个重复区，每个重复区随机设置两个处理区，分别为VdAL处理区和对照处理区，每个处理区的面积均为1亩。
在VdAL处理区的超级翠宝香甜瓜品种的苗期按照下述方式VdAL喷施1次：采用顶喷(人工喷施)的方式对甜瓜叶片喷施实施例1的稀释2000倍的VdAL，每亩喷施45-50kg，得到稀释2000倍的VdAL处理的甜瓜，将维达利安喷施当天记为处理第0天。喷施时间在早晨或傍晚，最好避开正午高温时段；喷施时严禁与药物及肥料混合；喷施后若2小时内下雨需要补喷施一次。
按照VdAL处理区的处理方法，将稀释2000倍的VdAL替换为清水对对照处理区进行处理，其他步骤均不变，得到未处理的甜瓜。
在处理第30天，观察甜瓜的生长情况，结果发现，维达利安可以促进甜瓜的营养生长(图8)。
5、维达利安可以促进甜椒的生长
田间试验设计如下：实验采用随机区组设计，设置3个重复区，每个重复区随机设置两个处理区，分别为VdAL处理区和对照处理区，每个处理区的面积均为1亩。
在VdAL处理区的甜椒品种睿优816的开花期按照下述方式VdAL喷施1次：采用顶喷(人工喷施)的方式对甜椒叶片喷施实施例1的稀释1000倍的VdAL，每亩喷施45-50kg，得到稀释1000倍的VdAL处理的甜椒，将维达利安喷施当天记为处理第0天。喷施时间在早晨或傍晚，最好避开正午高温时段；喷施时严禁与药物及肥料混合；喷施后若2小时内下雨需要补喷施一次。
按照VdAL处理区的处理方法，将稀释1000倍的VdAL替换为清水对对照处理区进行处理，其他步骤均不变，得到未处理的甜椒。
在处理第7-10天，观察甜椒的生长情况，结果发现，喷施维达利安后，甜椒长势茁壮、叶片深绿(图9)，表明维达利安可以促进甜椒的营养生长。
6、维达利安可以促进大豆的出苗与生长
将大豆品种中华大豆王种子分别在实施例1的稀释1000倍的VdAL、稀释3000倍的VdAL、稀释5000倍的VdAL、稀释10000倍的VdAL、稀释20000倍的VdAL和清水中浸种24小时，然后在托盘(托盘中铺有两层用无菌水浸湿的无菌滤纸)中于25℃下催芽72小时，统计大豆种子发芽率。每种处理100粒种子，实验重复三次。
结果显示(图10)，稀释3000倍的VdAL和稀释5000倍的VdAL大豆种子后，发芽率均有提高。表明，维达利安可以促进大豆种子的发芽。
实验二：
将大豆品种中华大豆王种子分别在实施例1的稀释5000倍的VdAL和清水中浸种24小时，然后播种于土壤中，将播种当天记为播种第1天，在播种第20天将大豆幼苗从土壤中取出，称量大豆幼苗鲜重(图11)。
结果显示，用稀释5000倍的VdAL和清水处理的大豆的单株鲜重分别为1.59±0.3g和1.36±0.3g，稀释5000倍的VdAL浸种后，大豆单株鲜重提高了16.91％；用稀释5000倍的VdAL和清水处理的大豆的地上部分单株鲜重分别为1.36±0.3g和1.06±0.3g，稀释5000倍的VdAL浸种后，大豆地上部分单株鲜重提高了28.30％，显著高于清水处理的大豆的地上部分单株鲜重。表明，维达利安可以促进大豆的营养生长。
Claims (10)
1.蛋白质在提高植物产量和/或调控植物生长中的应用；所述蛋白质为如下A1)或A2)或A3)：
A1)氨基酸序列为序列1的蛋白质；
A2)在序列1的氨基酸序列中经过取代和/或缺失和/或添加一个或几个氨基酸残基得到的具有相同功能的由A1)衍生的蛋白质；
A3)在A1)或A2)的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白质。
2.与权利要求1所述蛋白质相关的生物材料在提高植物产量和/或调控植物生长中的应用；
所述生物材料，为下述B1)至B20)中的任一种：
B1)编码权利要求1所述蛋白质的核酸分子；
B2)含有B1)所述核酸分子的表达盒；
B3)含有B1)所述核酸分子的重组载体；
B4)含有B2)所述表达盒的重组载体；
B5)含有B1)所述核酸分子的重组微生物；
B6)含有B2)所述表达盒的重组微生物；
B7)含有B3)所述重组载体的重组微生物；
B8)含有B4)所述重组载体的重组微生物；
B9)含有B1)所述核酸分子的转基因植物细胞系；
B10)含有B2)所述表达盒的转基因植物细胞系；
B11)含有B3)所述重组载体的转基因植物细胞系；
B12)含有B4)所述重组载体的转基因植物细胞系；
B13)含有B1)所述核酸分子的转基因植物组织；
B14)含有B2)所述表达盒的转基因植物组织；
B15)含有B3)所述重组载体的转基因植物组织；
B16)含有B4)所述重组载体的转基因植物组织；
B17)含有B1)所述核酸分子的转基因植物器官；
B18)含有B2)所述表达盒的转基因植物器官；
B19)含有B3)所述重组载体的转基因植物器官；
B20)含有B4)所述重组载体的转基因植物器官。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：B1)所述核酸分子为如下b1)或b2)或b3)的基因：
b1)核苷酸序列是序列表中序列2的cDNA分子或DNA分子；
b2)与b1)限定的核苷酸序列具有75％或75％以上同一性，且编码权利要求1所述蛋白质的cDNA分子或基因组DNA分子；
b3)在严格条件下与b1)限定的核苷酸序列杂交，且编码权利要求1所述蛋白质的cDNA分子或基因组DNA分子。
4.根据权利要求1-3任一所述的应用，其特征在于：所述调控植物生长为促进植物生长。
5.一种提高植物产量和/或促进植物生长的方法，包括对目的植物施用权利要求1中所述蛋白质、权利要求2或3中所述生物材料或生物制剂，提高所述目的植物产量和/或促进所述目的植物生长；所述生物制剂的活性成分为权利要求1中所述蛋白质或权利要求2或3中所述生物材料。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：所述生物制剂按照方法1)制备，所述方法1)为：培养权利要求2或3中B5)-B8)中任一所述重组微生物，使所述蛋白质的编码基因表达，得到所述生物制剂。
7.根据权利要求5或6所述的方法，其特征在于：所述方法1)为如下11)和12)：
11)培养权利要求2或3中B5)-B8)中任一所述重组微生物，使所述编码基因表达，得到表达所述蛋白质的重组微生物培养物；
12)破碎所述微生物培养物中的菌体，得到所述生物制剂。
8.权利要求5-7中任一所述生物制剂在提高植物产量和/或调控植物生长中的应用。
9.根据权利要求1-4中任一所述应用、权利要求5-7中任一所述方法或权利要求8所述应用，其特征在于：所述植物为双子叶植物或单子叶植物；所述生长为营养生长和/或生殖生长。
10.权利要求5-7任一所述方法中所述生物制剂。
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