CN105199015B - 一种从大菱鲆鱼皮中提取类肝素的方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种从大菱鲆鱼皮中提取类肝素的方法。该法共包括清洗鱼皮、碱处理、盐处理、离心、沉淀、离心、干燥7个步骤，避免了额外加入蛋白酶等杂质，缩短了生产周期，产品抗凝血活性强；同时采用酒精进行沉淀，能耗低，产品收率高，工艺简单，可控性强，产品质量稳定。

Description

一种从大菱鲆鱼皮中提取类肝素的方法

技术领域

本发明涉及一种类肝素的提取方法，具体涉及一种从大菱鲆鱼皮中提取类肝素的方法。

背景技术

类肝素即类似肝素的物质，是在化学结物上与肝素有一定程度的类似，具有抗凝血活性的酸性黏多糖类物质。具有抗血栓形成、消炎、止痛、改善患处血液循环、吸收渗出物、治愈水肿及浮肿、促进组织修复等作用。临床适用于血管栓塞、静脉曲张、浅表静脉炎、淋巴腺炎、乳腺炎与软化瘢痕。

目前已有很多利用猪肠、动物软骨等来提取类肝素的文献报道，但还没有利用大菱鲆鱼皮来提取类肝素的研究报道。现有的类肝素的提取采用的方法主要是酶解法，步骤包括：预处理、粉碎、酶解、过滤、树脂处理、洗脱、沉淀、干燥。这种方法的缺点是：生产周期长、能耗高，产品活性损失大。

发明内容

本发明为了克服上述类肝素提取过程中生产周期长、能耗高，产品活性损失大的不足，提供了一种从大菱鲆鱼皮中提取类肝素的方法，本方法缩短了生产周期，降低了能耗，保证了产品的活性。

本发明采用以下技术方案：

一种从大菱鲆鱼皮中提取类肝素的方法，其特征在于，它包括以下步骤：

1）清洗鱼皮：用清水冲洗鱼皮，去除碎肉、鱼刺等杂质，沥干后称重；

2）碱处理：用鱼皮重量1-5倍的pH在9-11的NaOH溶液浸泡鱼皮，浸泡过程中维持溶液的pH在9-11；

3）盐处理：去除浸泡后的鱼皮，保留浸泡液，向浸泡液中加入氯化钠使得加入的氯化钠的浓度为1.5%-5%，然后用0.1M 盐酸调pH为8.0-10.0，40-60℃条件下保温2-5小时，然后升温至80℃，保温10分钟；

4）离心：将步骤3）处理后所得液体用离心机离心，收集上清液；

5）沉淀：向步骤4）离心后所得的上清液中加入95%的酒精，使酒精的浓度为40%-60%。静置过夜；

6）离心：去除经步骤5）处理后的上层费酒精，下层沉淀进行离心；

7）干燥：室温下真空干燥即得产品。

步骤2）中鱼皮浸泡时间为1-3小时。

步骤4）中离心转速为3500r/min，时间为10min。

步骤5）中离心转速为3500r/min，时间为10min。

步骤7）中真空干燥时间为3-6小时。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：采用盐处理，避免额外加入蛋白酶等杂质，产品抗凝血活性强；采用酒精进行沉淀，能耗低，产品收率高。无酶解、脱脂处理等过程，工艺简单，可控制性强，产品质量稳定。

具体实施方式

下面结合具体说实施例对本发明做进一步的详细说明。

实施例1

新鲜的大菱鲆鱼皮用水冲洗，去除碎肉、鱼刺等杂质，沥干水，称取200g鱼皮，加入200g pH为9的 NaOH溶液浸泡鱼皮10小时，浸泡过程中维持溶液的pH为9；去除浸泡后的鱼皮，保留浸泡液，向浸泡液中加入氯化钠，使得加入的氯化钠浓度为2%，用0.1M 盐酸调pH为9.0，40℃保温5小时，后升温至80℃，保温10分钟；离心，3500r/min，10分钟，收集上清液，加入95%的酒精，使得酒精浓度为60%，静置过夜，去上层废酒精，下层沉淀进行离心，3500r/min，10分钟，室温，真空干燥3小时，得2.8克类肝素。

实施例2

新鲜的大菱鲆鱼皮用水冲洗，去除碎肉、鱼刺等杂质，沥干水，称取200g鱼皮，加入600g pH为10的NaOH溶液浸泡鱼皮5小时，浸泡过程中维持溶液的pH10；去除浸泡后鱼皮，保留浸泡液，向浸泡液中加入氯化钠，使得加入的氯化钠浓度为1.5%，用0.1M 盐酸调pH为10.0，60℃保温2小时，后升温至80℃，保温10分钟；离心，3500r/min，10分钟，收集上清液，加入95%的酒精，使得酒精浓度为45%，静置过夜，去上层废酒精，下层沉淀进行离心，3500r/min，10分钟，室温，真空干燥5小时，得2.4克类肝素。

实施例3

新鲜的大菱鲆鱼皮用水冲洗，去除碎肉、鱼刺等杂质，沥干水，称取200g鱼皮，加入1000g pH为11的NaOH溶液浸泡鱼皮3小时，浸泡过程中维持溶液的pH11；去除浸泡后的鱼皮，保留浸泡液，向浸泡液中加入氯化钠，使得加入的氯化钠浓度为5%，用0.1M 盐酸调pH为8.0，50℃保温3小时，后升温至80℃，保温10分钟；离心，3500r/min，10分钟，收集上清液，加入95%的酒精，使得酒精浓度为40%，静置过夜，去上层废酒精，下层沉淀进行离心，3500r/min，10分钟，室温，真空干燥6小时，得2.6克类肝素。

Claims (1)

1.一种从大菱鲆鱼皮中提取类肝素的方法，其特征在于，它包括以下步骤：

1）清洗鱼皮：用清水冲洗鱼皮，去除碎肉、鱼刺杂质，沥干后称重；

2）碱处理：用鱼皮重量1-5倍的pH在9-11的NaOH溶液浸泡鱼皮，鱼皮浸泡时间为1-3小时，浸泡过程中维持溶液的pH在9-11；

3）盐处理：去除浸泡后的鱼皮，保留浸泡液，向浸泡液中加入氯化钠使得加入的氯化钠的浓度为1.5%-5%，然后用0.1M 盐酸调pH为8.0-10.0，40-60℃条件下保温2-5小时，然后升温至80℃，保温10分钟；

4）离心：将步骤3）处理后所得液体用离心机离心，收集上清液；离心转速为3500r/min，时间为10min；

5）沉淀：向步骤4）离心后所得的上清液中加入95%的酒精，使酒精的浓度为40%-60%，静置过夜；离心转速为3500r/min，时间为10min；

6）离心：去除经步骤5）处理后的上层费酒精，下层沉淀进行离心；

7）干燥：室温下真空干燥3-6小时即得产品。